Tiểu luận cộng nghệ sinh học Đề tài: VI SINH vật THỦY PHÂN CHITIN và KHẢ NĂNG ỨNG DỤNG của CHÚNG TRONG bảo vệ môi TRƯỜNG

A.LÝ DO CHỌN ĐỀ TÀITrong những năm gần đây, nghành công nghệ sinh học đang có bước phát triển rất mạnh mẽ. Phát triển và ứng dụng công nghệ sinh học là một xu thế tất yếu trong điều kiện các sản xuất truyền thống đang gây ô nhiễm môi trường nghiêm trọng. Các chế phẩm sản xuất bằng con đường sinh học không chỉ thân thiện với môi trường sống, mang lại giá trị kinh tế cao mà còn ứng dụng rất hiệu quả trong lĩnh vực đời sống. và enzyme là một phần khong thể thiếu được của nghành công nghệ sinh học. Hiện nay có rất nhiều loại enzyme được nghiên cứu và ứng dụng của chúng ngày càng được mở rộng. Một trong số đó có enzyme chitinase với dẫn xuất quan trọng là chitosan đang được ứng dụng vào vô số các lĩnh vực khác nhau. 1Việt Nam có nguồn lợi thủy sản rất dồi dào, nghành công nghệ nuôi trồng và chế biến ngày càng phát triển mạnh. Nuôi tôm là một trong những nghề đã đem lại hiệu quả kinh tế cao vì tôm là mặt hàng hải sản có giá trị không những cho nguồn đạm động vật cao mà còn là loại thực phẩm được nhiều người ưu thích và ngày càng có giá trị trên thị trường thế giới. Tuy nhiên dịch bệnh là nỗi ám ảnh và gây thiệt hại lớn về kinh tế cho nghề nuôi tôm nói riêng và nghành thủy sản nói chung. Nguyên nhân gây bệnh là do lượng thức ăn hữu cơ dư thừa trong nước sẽ làm ô nhiễm, gây độc cho tôm, đồng thời vỏ tôm sau khi sau khi lột xác bị lắng động xuống đáy ao tạo điều kiện phát triển cho các sinh vật có hại cho sự phát triển của tôm. Trên thị trường đã xuất hiện nhiều chế phẩm vi sinh được nhập về nhưng quá đắt cho người nông dân sử dụng và không kiểm soát được các vi sinh vật có trong chế phẩm có ảnh hưởng gì đến sức khỏe con người và môi trường không. Trong khi đó việc sử dụng các chế phẩm sinh học có nguồn gốc tự nhiên lại cho hiệu quả hơn trong việc phòng và trị bệnh nhờ quá trình cạnh tranh sinh học. Khi ta thêm các vi sinh vật có lợi như các vi sinh vật có hoạt tính sinh học cao vào môi trường, chúng sẽ phân giải nhanh các chất hữu cơ, lấn át và ức chế mầm bệnh phát triển, vì thế sẽ ngăn ngừa được các mầm bệnh xảy ra. 1.Mặt khác một trong những dạng phế liệu chiếm phần lớn từ nghành thủy sản là nguồn chitin từ vỏ ngoài giáp xác như tôm, cua. Tận dụng nguồn phế liệu này không những giải quyết triệt để vấn đề ô nhiễm môi trường mà còn tạo ra các chế phẩm mới có giá trị vì vậy nên tôi chọn đề tài: “Vi sinh vật thủy phân chitin và khả năng ứng dụng của chúng trong bảo vệ môi trường’’ từ bài báo tiếng Anh “Chitinolytic Microorganisms and Their Possible Application in Environmental Protection” đăng trên tạp chí Current Microbiololy năm 2014, tập 68. B.NỘI DUNG BÀI BÁOTóm tắtBài báo này cung cấp một đánh giá về các kết quả nghiên cứu mới nhất về ứng dụng của vi khuẩn chitinases để kiểm soát sinh học. Vi sinh vật sản xuất ra các enzim này có thể ức chế sự phát triển của nhiều bệnh nấm gây ra mối đe dọa nghiêm trọng tới sản xuất mùa vụ toàn cầu. Gần đây, những nỗ lực đang được thực hiện để khám phá các vi sinh vật sản xuất enzyme thủy phân chitin. Tiềm năng tồn tại mà các loại thuốc diệt nấm sinh học tự nhiên sẽ thay thế thuốc diệt nấm hóa học hoặc sẽ được sử dụng để bổ sung thuốc diệt nấm hiện đang được sử dụng, điều này sẽ làm giảm tác động tiêu cực của các chất hóa học trong môi trường và hỗ trợ phát triển bền vững của nông nghiệp và lâm nghiệp.Giới thiệuBệnh thực vật là một vấn đề chính đối với việc canh tác cây trồng và gây thất thoát 10% tổng sản lượng mùa vụ toàn cầu 98. Nấm mốc, một trong những tác nhân gây bệnh thực vật nặng nhất, thường bị phá hủy bằng thuốc trừ nấm hóa học. Chúng được sử dụng phổ biến rộng rãi, điều này đã tăng gấp ba lần trong 40 năm qua, đã tăng tốc gây ô nhiễm và hủy hoại môi trường. Hơn thế nữa, thuốc diệt nấm hóa học có thể gây tử vong cho các côn trùng có lợi và các quần thể vi sinh vật ở đất và có thể đi vào chuổi thức ăn 9. Ngoài hiệu quả cao và dễ sử dụng, thuốc trừ nấm hóa học có nhiều bất lợi. Kiểm soát sinh học, sử dụng vi sinh vật để kiểm soát các bệnh thực vật, mang đến những thay đổi, đây là chiến lược thanh thiện với môi trường để kiểm soát các tác nhân gây bệnh thực vật. Gần đây, kiểm soát sinh học sử dụng các vi sinh vật sản xuất enzim phân hủy nấm, đặc biệt là chitinases (CHIs), được biết đến để thủy phân chitin, một thành phần chính của thành tế bào nấm, CHIs hoặc các vi sinh vật thủy phân chi tin hiện đang được nghiên cứu như một sự thay thế hấp dẫn đối với các hóa chất tổng hợp vì sự an toàn của chúng và tác động môi trường thấp hơn. Chiến lược kiểm soát sinh học đã trở thành một cách tiếp cận quan trọng để tạo thuận lợi cho nông nghiệp bền vững 40, 54, 80, 92.Sự xuất hiện của Chitin trong tự nhiênChitin, a β (1,4) liên kết polymer của NacetylDglucosamine, là một trong những polysacchrides phổ biến nhất trong tự nhiên. Chitin xuất hiện ở dạng kết hợp với polyme, chẳng hạn như protein. Trong tự nhiên, nó được tìm thấy trong hai dạng tinh thể. Dạng α có chitin song song vi sợi với liên kết hydro liên phân tử mạnh và là chitin phong phú nhất trong tự nhiên, được tìm thấy trong tôm và cua. βchitin có chuỗi chitin song song và xuất hiện trong mai mực 125. Chitin được phân bố rộng rãi trong tự nhiên, đặc biệt là cấu trúc polysacchride trong thành tế bào, bộ khung ngoài của động vật chân đốt, vỏ bên ngoài của động vật giáp xác và giun tròn. Khoảng 75% tổng trọng lượng của động vật có vỏ, như tôm, cua và nhuyễn thể, được coi là chất thải. Chitin chiếm 20–58% trọng lượng khô của chất thải này 116. Chitin có một loạt các ứng dụng trong sinh hóa, thực phẩm và các ngành công nghiệp hóa chất và có khả năng kháng khuẩn, kháng cholesterol và hoạt tính chống ung thư 32, 77. Chitin và các vật liệu liên quan của nó cũng được sử dụng trong xử lý nước thải 26, vận chuyển thuốc, và chữa lành vết thương và là nguồn chất xơ 19, 74. Chất thải từ việc chế biến động vật giáp xác biển là một nguồn thương mại chitin đáng kể. Số lượng đáng kể được sản xuất ở châu Á, chủ yếu là Thái Lan, là nước xuất khẩu chính tôm và Ấn Độ. Sử dụng chất thải chitin rất hiếm, nhưng nếu được tiến hành đúng cách, sẽ giải quyết được vấn đề về môi trường xử lý chất thải và cho phép nền kinh tế lớn giá trị của chitin được sử dụng 117. Điều đáng chú ý là việc sản xuất chitin trong sinh quyển biển là rất lớn. Lượng chitin hàng năm ước tính được sản xuất bởi động vật phù du biển là hơn vài tỷ tấn 8, và tổng sản lượng chitin hàng năm ước tính là 1010 tới 1011 tấn 31, 42. Phần lớn sản lượng chitin này ở dạng vỏ gắn với động vật phù du biển và động vật giáp xác ở biển như tôm, cua và tôm hùm. Khi lột xác, bộ khung ngoài lột vỏ có thể chứa nhiều hơn năm lần chitin so với cơ thể của động vật. Động vật chân đốt hoạt động có ý nghĩa lớn nhất bởi vì chúng tạo ra lượng chitin rất lớn. Tương tự, lớp bề mặt của các cơ quan của côn trùng trên cạn và loài nhện có chứa một lượng đáng kể chitin 119. Đáng ngạc nhiên là hàm lượng chitin trong trầm tích biển khá thấp. Điều này là do quá trình chuyển đổi sinh học được thực hiện bởi vi khuẩn thủy phân chitin ở biển 37, chuyển đổi polysaccharide thành các hợp chất hữu cơ sau đó được các vi sinh vật khác sử dụng như một nguồn cacbon và nitơ.Vi sinh vật thủy phân chitinThường được tìm thấy trong sinh quyển, vi sinh vật thủy phân chitin có khả năng phân hủy chitin dưới cả hai điều kiện hiếu khí và yếm khí. Chúng được tìm thấy trong nhiều môi trường khác nhau. Trái ngược với kỳ vọng rằng chúng có rất nhiều trong môi trường có lượng chitin cao (như vỏ tôm), chỉ một số nhỏ đã được xác định trong chất thải của tôm: vi khuẩn thủy phân chitin chỉ chiếm 4% tổng số vi khuẩn dị dưỡng. Nấm thủy phân chitin chiếm 2560% tổng số nấm mốc, nhưng số lượng của chúng thấp hơn số lượng vi khuẩn 106. Trong khi nghiên cứu mối tương quan giữa chất thải tôm và số lượng vi khuẩn trong đường tiêu hóa của cừu, Cobos et al. 13 xác định chỉ một tỷ lệ nhỏ vi khuẩn thủy phân chitin trong môi trường này. Họ đã xác định không có vi khuẩn thủy phân chitin sau 30 ngày cho cừu ăn một chế độ ăn không chứa hoặc 15% chất thải từ tôm. Chỉ sau 72 ngày cho ăn cừu trên một chế độ ăn uống có chứa 25% bột chất thải từ tôm đã ghi nhận 0,1% vi khuẩn thủy phân chitin trong hệ thống tiêu hóa của cừu.Chất nền Chitin không phải lúc nào cũng kích thích sự tăng trưởng của vi sinh vật thủy phân chitin. Các kết quả thu được từ Zdanowski và Vosjan 123 chỉ ra rằng vi sinh vật thủy phân chitin chỉ là một tỷ lệ nhỏ trong tổng số vi sinh vật trên vỏ nhuyễn thể. Trong hồ và đất trong các lưu vực thoát nước của hồ được xác định có số lượng cao hơn một cách đáng kể. Đất và vùng rễ được sinh trưởng rất nhiều nhờ vi sinh vật thủy phân chitin, và xạ khuẩn là phổ biến nhất. Swiontek Brzezinska et al. 108 cho rằng 4569% của xạ khuẩn và 3240% nấm mốc có thể phân hủy chitin trong đất trong bồn thoát nước của hồ Chełmzynskie. Bởi vì vi sinh vật phân hủy vi khuẩn phân lập từ đất thường hoạt động tích cực hơn vi khuẩn thủy phân chitin phân lập từ nước và trầm tích đáy, chúng có thể thích hợp hơn cho sử dụng trong nông nghiệp. Paul và Clark báo cáo rằng 90% tất cả các chủng xạ khuẩn phân lập từ đất thuộc chi Streptomyces.

ĐẠI HỌC HUẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH HỌC - TIỂU LUẬN ĐỀ TÀI: VI SINH VẬT THỦY PHÂN CHITIN VÀ KHẢ NĂNG ỨNG DỤNG CỦA CHÚNG TRONG BẢO VỆ MÔI TRƯỜNG Giảng viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: TS Nguyễn Xuân Huy Nguyễn Thị Linh Lớp: Sinh 4B MSV: 15S3011043 A LÝ DO CHỌN ĐỀ TÀI Trong năm gần đây, nghành công nghệ sinh học có bước phát triển mạnh mẽ Phát triển ứng dụng công nghệ sinh học xu tất yếu điều kiện sản xuất truyền thống gây ô nhiễm môi trường nghiêm trọng Các chế phẩm sản xuất đường sinh học không thân thiện với môi trường sống, mang lại giá trị kinh tế cao mà ứng dụng hiệu lĩnh vực đời sống enzyme phần khong thể thiếu nghành cơng nghệ sinh học Hiện có nhiều loại enzyme nghiên cứu ứng dụng chúng ngày mở rộng Một số có enzyme chitinase với dẫn xuất quan trọng chitosan ứng dụng vào vô số lĩnh vực khác [1] Việt Nam có nguồn lợi thủy sản dồi dào, nghành công nghệ nuôi trồng chế biến ngày phát triển mạnh Nuôi tôm nghề đem lại hiệu kinh tế cao tơm mặt hàng hải sản có giá trị khơng cho nguồn đạm động vật cao mà loại thực phẩm nhiều người ưu thích ngày có giá trị thị trường giới Tuy nhiên dịch bệnh nỗi ám ảnh gây thiệt hại lớn kinh tế cho nghề ni tơm nói riêng nghành thủy sản nói chung Nguyên nhân gây bệnh lượng thức ăn hữu dư thừa nước làm ô nhiễm, gây độc cho tôm, đồng thời vỏ tôm sau sau lột xác bị lắng động xuống đáy ao tạo điều kiện phát triển cho sinh vật có hại cho phát triển tôm Trên thị trường xuất nhiều chế phẩm vi sinh nhập đắt cho người nơng dân sử dụng khơng kiểm sốt vi sinh vật có chế phẩm có ảnh hưởng đến sức khỏe người mơi trường khơng Trong việc sử dụng chế phẩm sinh học có nguồn gốc tự nhiên lại cho hiệu việc phòng trị bệnh nhờ trình cạnh tranh sinh học Khi ta thêm vi sinh vật có lợi vi sinh vật có hoạt tính sinh học cao vào mơi trường, chúng phân giải nhanh chất hữu cơ, lấn át ức chế mầm bệnh phát triển, ngăn ngừa mầm bệnh xảy [1] Mặt khác dạng phế liệu chiếm phần lớn từ nghành thủy sản nguồn chitin từ vỏ giáp xác tôm, cua Tận dụng nguồn phế liệu giải triệt để vấn đề ô nhiễm mơi trường mà tạo chế phẩm có giá trị nên tơi chọn đề tài: “Vi sinh vật thủy phân chitin khả ứng dụng chúng bảo vệ môi trường’’ từ báo tiếng Anh “Chitinolytic Microorganisms and Their Possible Application in Environmental Protection” đăng tạp chí Current Microbiololy năm 2014, tập 68 B NỘI DUNG BÀI BÁO Tóm tắt Bài báo cung cấp đánh giá kết nghiên cứu ứng dụng vi khuẩn chitinases để kiểm soát sinh học Vi sinh vật sản xuất enzim ức chế phát triển nhiều bệnh nấm gây mối đe dọa nghiêm trọng tới sản xuất mùa vụ toàn cầu Gần đây, nỗ lực thực để khám phá vi sinh vật sản xuất enzyme thủy phân chitin Tiềm tồn mà loại thuốc diệt nấm sinh học tự nhiên thay thuốc diệt nấm hóa học sử dụng để bổ sung thuốc diệt nấm sử dụng, điều làm giảm tác động tiêu cực chất hóa học mơi trường hỗ trợ phát triển bền vững nông nghiệp lâm nghiệp Giới thiệu Bệnh thực vật vấn đề việc canh tác trồng gây thất 10% tổng sản lượng mùa vụ tồn cầu [98] Nấm mốc, tác nhân gây bệnh thực vật nặng nhất, thường bị phá hủy thuốc trừ nấm hóa học Chúng sử dụng phổ biến rộng rãi, điều tăng gấp ba lần 40 năm qua, tăng tốc gây ô nhiễm hủy hoại môi trường Hơn nữa, thuốc diệt nấm hóa học gây tử vong cho trùng có lợi quần thể vi sinh vật đất vào chuổi thức ăn [9] Ngoài hiệu cao dễ sử dụng, thuốc trừ nấm hóa học có nhiều bất lợi Kiểm soát sinh học, sử dụng vi sinh vật để kiểm soát bệnh thực vật, mang đến thay đổi, chiến lược thiện với môi trường để kiểm soát tác nhân gây bệnh thực vật Gần đây, kiểm soát sinh học sử dụng vi sinh vật sản xuất enzim phân hủy nấm, đặc biệt chitinases (CHIs), biết đến để thủy phân chitin, thành phần thành tế bào nấm, CHIs vi sinh vật thủy phân chi tin nghiên cứu thay hấp dẫn hóa chất tổng hợp an tồn chúng tác động mơi trường thấp Chiến lược kiểm soát sinh học trở thành cách tiếp cận quan trọng để tạo thuận lợi cho nông nghiệp bền vững [40, 54, 80, 92] Sự xuất Chitin tự nhiên Chitin, a β- (1,4) liên kết polymer N-acetyl-D-glucosamine, polysacchrides phổ biến tự nhiên Chitin xuất dạng kết hợp với polyme, chẳng hạn protein Trong tự nhiên, tìm thấy hai dạng tinh thể Dạng α có chitin song song vi sợi với liên kết hydro liên phân tử mạnh chitin phong phú tự nhiên, tìm thấy tơm cua β-chitin có chuỗi chitin song song xuất mai mực [125] Chitin phân bố rộng rãi tự nhiên, đặc biệt cấu trúc polysacchride thành tế bào, khung động vật chân đốt, vỏ bên động vật giáp xác giun tròn Khoảng 75% tổng trọng lượng động vật có vỏ, tơm, cua nhuyễn thể, coi chất thải Chitin chiếm 20–58% trọng lượng khơ chất thải [116] Chitin có loạt ứng dụng sinh hóa, thực phẩm ngành cơng nghiệp hóa chất có khả kháng khuẩn, kháng cholesterol hoạt tính chống ung thư [32, 77] Chitin vật liệu liên quan sử dụng xử lý nước thải [26], vận chuyển thuốc, chữa lành vết thương nguồn chất xơ [19, 74] Chất thải từ việc chế biến động vật giáp xác biển nguồn thương mại chitin đáng kể Số lượng đáng kể sản xuất châu Á, chủ yếu Thái Lan, nước xuất tơm Ấn Độ Sử dụng chất thải chitin hiếm, tiến hành cách, giải vấn đề môi trường xử lý chất thải cho phép kinh tế lớn giá trị chitin sử dụng [117] Điều đáng ý việc sản xuất chitin sinh biển lớn Lượng chitin hàng năm ước tính sản xuất động vật phù du biển vài tỷ [8], tổng sản lượng chitin hàng năm ước tính 10 10 tới 1011 [31, 42] Phần lớn sản lượng chitin dạng vỏ gắn với động vật phù du biển động vật giáp xác biển tôm, cua tơm hùm Khi lột xác, khung ngồi lột vỏ chứa nhiều năm lần chitin so với thể động vật Động vật chân đốt hoạt động có ý nghĩa lớn chúng tạo lượng chitin lớn Tương tự, lớp bề mặt quan côn trùng cạn lồi nhện có chứa lượng đáng kể chitin [119] Đáng ngạc nhiên hàm lượng chitin trầm tích biển thấp Điều q trình chuyển đổi sinh học thực vi khuẩn thủy phân chitin biển [37], chuyển đổi polysaccharide thành hợp chất hữu sau vi sinh vật khác sử dụng nguồn cacbon nitơ Vi sinh vật thủy phân chitin Thường tìm thấy sinh quyển, vi sinh vật thủy phân chitin có khả phân hủy chitin hai điều kiện hiếu khí yếm khí Chúng tìm thấy nhiều môi trường khác Trái ngược với kỳ vọng chúng có nhiều mơi trường có lượng chitin cao (như vỏ tôm), số nhỏ xác định chất thải tôm: vi khuẩn thủy phân chitin chiếm 4% tổng số vi khuẩn dị dưỡng Nấm thủy phân chitin chiếm 25-60% tổng số nấm mốc, số lượng chúng thấp số lượng vi khuẩn [106] Trong nghiên cứu mối tương quan chất thải tôm số lượng vi khuẩn đường tiêu hóa cừu, Cobos et al [13] xác định tỷ lệ nhỏ vi khuẩn thủy phân chitin môi trường Họ xác định khơng có vi khuẩn thủy phân chitin sau 30 ngày cho cừu ăn chế độ ăn không chứa 15% chất thải từ tôm Chỉ sau 72 ngày cho ăn cừu chế độ ăn uống có chứa 25% bột chất thải từ tôm ghi nhận 0,1% vi khuẩn thủy phân chitin hệ thống tiêu hóa cừu Chất Chitin khơng phải lúc kích thích tăng trưởng vi sinh vật thủy phân chitin Các kết thu từ Zdanowski Vosjan [123] vi sinh vật thủy phân chitin tỷ lệ nhỏ tổng số vi sinh vật vỏ nhuyễn thể Trong hồ đất lưu vực thoát nước hồ xác định có số lượng cao cách đáng kể Đất vùng rễ sinh trưởng nhiều nhờ vi sinh vật thủy phân chitin, xạ khuẩn phổ biến Swiontek Brzezinska et al [108] cho 45-69% xạ khuẩn 32-40% nấm mốc phân hủy chitin đất bồn nước hồ Chełmzynskie Bởi vi sinh vật phân hủy vi khuẩn phân lập từ đất thường hoạt động tích cực vi khuẩn thủy phân chitin phân lập từ nước trầm tích đáy, chúng thích hợp cho sử dụng nông nghiệp Paul Clark báo cáo 90% tất chủng xạ khuẩn phân lập từ đất thuộc chi Streptomyces Hầu như, tất xạ khuẩn tế bào mầm có khả phân hủy lignin, chitin, pectin creatine Vi khuẩn đất phân hủy chitin bao gồm Flavobacterium, Bacillus, Cytophaga, Pseudomonas Các loại nấm phân hủy Chitin bao gồm, ví dụ Aspergillus, Mucor Mortierella [90] Trong môi trường thủy sinh, chitin bị phân hủy chủ yếu vi khuẩn dị dưỡng Chúng bao gồm vi khuẩn hiếu khí chi Aeromonas, Enterobacter, Chromobacterium, Arthrobacter, Flavobacterium, Serratia, Bacillus, Erwinia, Vibrio [20, 102] Theo Swiontek Brzezinska et al [107], 15% vi khuẩn phân hủy chitin hồ Chełmzynskie giàu dinh dưỡng Tuy nhiên, trầm tích đáy hồ này, số lượng vi sinh vật thủy phân chitin xác định thấp nhiều Mudryk [71], nước mặt hồ Gardno, phát 10,6% vi khuẩn phân hủy chitin, so với 5% đáy trầm tích Vi sinh vật thủy phân chitin sống nhiều loại môi trường Kopecny et al [56] tìm thấy vi khuẩn thủy phân chitin phân động vật ăn cỏ hoang dã (ví dụ, bò rừng bizon - Bibos bonasus, llama - Llama vicugna paca, nai sừng - Elaphurus davidianus) động vật ăn cỏ nước (ví dụ, cừu bò) Chúng tìm thấy dịch cỏ bò, chúng khơng thể sản sinh enzyme để tiêu hóa chitin cung cấp mơi trường sống cho vi khuẩn thủy phân chitin để đổi lấy trợ giúp tiêu hóa hợp chất cứng Phần lớn vi khuẩn xác định thuộc chi Clostridium, chủng vi khuẩn thường gặp nhất, Clostridium sp ChK5, phân hủy chitin keo tạo acetate, muối axit butyric lactate Có thơng tin tham gia vi sinh vật yếm khí phân hủy chitin, vi khuẩn phân hủy chitin thuộc chi Clostridium mô tả môi trường biển [8, 110] Gram âm, vi khuẩn kỵ khí có mặt trầm tích [79] Các kết thu từ Reguera Leschine [84] cho thấy việc sử dụng chitin nguồn nitơ phân bố rộng rãi vi sinh vật phân hủy cellulose kỵ khí hiếu khí Cellulomonas (ATCC 21 399) có khả phân hủy nhanh chóng cellulose chitin điều kiện kị khí hiếu khí Sturz Robinson [99] quan sát thấy phân hủy chitin xảy chủ yếu trầm tích bề mặt, nơi vi khuẩn hiếu khí chiếm ưu đóng vai trò định phân hủy chitin Enzyme thủy phân chitin CHIs glycoside hydrolases xúc tác thủy phân chitin Chúng sản xuất vi sinh vật, nấm, côn trùng, thực vật động vật tìm thấy huyết người [30] Chúng thủy phân liên kết β-1,4-glycosidic N-acetyl-D-glucosamine cấu tạo nên chuỗi chitin [41] Q trình thủy phân enzim hồn tồn chitin thành Nacetylglucosamine tự thực hệ thống thủy phân chitin bao gồm nhóm enzyme đa dạng xúc tác cho trình thủy phân chuỗi polyme hóa chitin [25, 30, 77, 91] Danh pháp enzym thủy phân chitin khơng rõ ràng Do vị trí liên kết thủy phân, CHI (EC 3.2.1.14) chia thành hai loại Endochitinases cắt chuỗi chitin vị trí ngẫu nhiên, tạo oligomers trọng lượng phân tử thấp, chẳng hạn chitototetriose, chitotriose diacetylochitobiose Exochitinases giải phóng chitobiose từ đầu tận chuỗi chitin Trong khứ, có hai lớp khác cho enzyme này: chitobiases chịu trách nhiệm cho phân giải chitobiose, β-N-acetylglucosaminidases, tạo đơn phân β-N-acetyl-D-glucosamine [14, 88] Hiện nay, theo danh pháp thành lập Ủy ban Danh mục Liên minh Hóa sinh Sinh học Phân tử Quốc tế, chitobiase β-Nacetylglucosaminidases bao gồm tập hợp chung β-N-acetylhexosaminidases (EC.3.2.1.52) [14, 88] Khi phân loại theo giống trình tự amino acid, CHIs chia thành ba họ: 18, 19 20 Họ 18 bao gồm CHIs bắt nguồn chủ yếu từ nấm từ vi khuẩn, virus, động vật, côn trùng thực vật Họ 19 bao gồm CHIs bắt nguồn từ thực vật (loại I, II IV) số có nguồn gốc từ vi khuẩn, ví dụ: Streptomyces griseus Họ 20 bao gồm N-acetylgluco-saminidase từ Vibrio harveyi Nacetylhexosaminidase từ Dictyostelium discoideum người [16, 21,41, 77] Nhiều vi khuẩn, bao gồm loài Marcescens Serratia, Aeromonas sp., Pseudomonas aeruginosa K-187, S.griseus HUT 6037, tổng hợp nhiều CHIs khác [45, 101, 112, 116] Hơn nữa, nấm mốc Trichoderma harzianum tạo hai N-acetyl-glucosaminidases, bốn endochitinases, chitobiosidase [38] Các CHIs từ vi khuẩn có phân tử khối từ 20 đến 120 kDa, với hầu hết 20–60 kDa [49, 51] Độ pH nhiệt độ tối ưu CHIs 5–8 40 0C Tùy thuộc vào nguồn gốc CHI, hoạt động bị ức chế ổn định có mặt ion kim loại khác (Bảng 1) Một chất ức chế mạnh mẽ CHIs allosamidin, lần báo cáo chất ức chế cạnh tranh cụ thể CHI trùng Allosamidin có cấu trúc tương tự chất trung gian, oxazoline vòng hình thành oxy cacbonyl nhóm N-acetyl C-1 N-acetylglucosamine trình thủy phân [55] CHIs enzyme cảm ứng (thích ứng), tức chúng biểu hiện số điều kiện định cảm ứng yếu tố định điều khiển hệ thống chất ức chế /cảm ứng Trong chitin chất cảm ứng, glucose nguồn cacbon dễ dàng đồng hóa khác chất ức chế [86] Theo Frandberg Schnurer [27], việc trì sản xuất CHIs cảm ứng chitin chitooligosaccharide môi trường; nhiên, khơng có CHIs sản xuất ngoại bào tìm thấy trường hợp khơng có hợp chất Mặc dù số actinomycetes sản xuất CHIs cách cấu thành, chất chitin thích hợp làm tăng sản lượng [77] Công việc sản xuất CHIs thông qua chất chitin khác tính đặc biệt sản xuất enzime Nhiều nghiên cứu sử dụng chitin keo để sản xuất CHIs [44, 63] Tuy nhiên, số vi sinh vật sản xuất CHIs hoạt động diện vỏ tôm [10, 117] Các kết nghiên cứu phòng thí nghiệm nhằm đánh giá hoạt tính enzime Trichoderma môi trường chứa chitin tinh khiết sợi nấm nguồn cacbon cung cấp điều kiện tăng trưởng tối ưu cho việc sản xuất CHIs ngoại bào Các nghiên cứu sử dụng chất carbon khác xác nhận mối quan hệ nguồn carbon chuyển hóa tổng hợp enzym thủy phân chitin Hoạt tính thủy phân chitin quan sát thấy vi khuẩn nuôi cấy mơi trường có chứa chitin keo glycol, Nacetylglucosamine, chitooligosaccarides, thành tế bào số loại nấm định Khơng có hoạt tính hoạt tính thấp vi khuẩn ni cấy mơi trường có chứa glucose laminarin làm nguồn cacbon [69, 88, 124] Các nghiên cứu phân tử phát diện hệ thống truyền tín hiệu hai thành phần điều hòa tổng hợp CHIs Pseudoalteromonas piscicida O-7, Streptomyces thermoviolaceus OPC-520 vi khuẩn khác Các hệ thống bao gồm hai protein: protein histidine kinase protein điều hòa đáp ứng Để đáp ứng với tín hiệu từ mơi trường (sự diện chitin dẫn xuất nó), kinase vi khuẩn trải qua q trình tự phosphoryl hóa amino acid histidine, sau xúc tác chuyển nhóm phosphate sang amino acid asparagine trình tự protien điều hòa đáp ứng Protein điều hòa đáp ứng phosphoryl hóa kết hợp với trình tự promoter hoạt hóa phiên mã gen mã hóa CHI [87, 88, 111] Bảng Các tính chất sinh hóa số vi sinh vật CHIs Vi sinh vật Loại enzime Nhiệt độ (0C) 40 pH Chất ức chế Chất kích hoạt Exochitinase Khối lương phân tử (kDa) 57 Serratia sp KCK 5-10 - Pseudomonas sp TKU015 - 68, 30 50 5-7 Pb2+, Fe2+, Zn2+, Hg2+, Mg2+ Mn2+, Fe2+, Cu2+, EDTA Bacillus sp 13.26 - 60 60 7-8 Bacillus licheniformis Bacillus thuringiensis spp colmeri 15A3 Bacillus subtilis NPU 001 Bacillus brevis Stenotrophomonas maltophilia Sanguibacter antarcticus KOPRI 21702T Streptomyces sp DA11 - 36 50-70 5-6 Mn2+, Co2+, Ca2+ - - 31 20-60 4-8 Endochitinase 85 50 Endochitinase Endochitinase, exochitinase Endochitinase 52 55 60 40-50 5-7 34 30-40 7.6 - Cu2+, Ca2+, Ba2+ - 55 50 Mn2+, Cu2+, Mg2+ [37] - 40 50 Co2+ [49] GH-18 66 60 6-8 Ca2+, Ba2+, Mg2+ [47] - 40 30-40 6-8 Fe2+, Ba2+, EDTA, EGTA, SDS, urea Hg2+, Cd2+, Ni2+ 2+ Cu , Co2+, Mn2+ - - [73] - 47 30-60 6.5-7 Hg2+, Cd2+, Ni2+ Mg2+ [109] - 56 40 Fe2+, Hg2+ Mg2+, Mo2+ [59] Streptomyces halstedii AJ-7 Streptomyces roseolus DH Streptomyces venezuelae P10 Streptomyces aureofaciens CMUAc130 Penicillium sp LYG 0704 Tài liệu tham khảo [53] Zn2+, SDS, Tween 40, Triton X-100 Mg22+, Ni22+ [122] Ca2+ [52] Ag+, Zn2+ Mg2+, Na+, Fe3+, Ca2+, Cu2+ [61] Hg2+ - [10] Ca2+, Mg2+ [62] [46,100 ] [76] Ag+ Hg , Cu2+ 2+ [118] Massilia timonae Trichoderma saturnisporum Trichoderma atroviride PTCC5220 Aspergillus fumigatus CS-01 Thermomyces lanuginosus SY2 Both Hg2+ Both Hg2+ Mn2+ Both Mn2+, Zn2+ [93] 40 - - [39] 45 55 - - [121] 48 55 4.5 Fe , Ag+, Hg2+, Cu2+, EDTA Ca2+, Ba2+, Na2+, k+ [34] Endochitinase Both Chitobiosidase 64 24 55 60 60 - 42 - 2+ [1] Phân hủy chất thải tôm, nguồn chitin Sự phân hủy chitin, phần quan trọng chu kỳ carbon nitơ toàn cầu [43], chủ yếu dựa vào trình vi sinh Chitin sử dụng quần thể vi sinh vật nguồn hai yếu tố [67] Được coi chất thải thông thường, chất thải từ tơm (nguồn chitin) chế biến làm thức ăn chăn nuôi sử dụng nơng nghiệp phân bón nitơ tự nhiên giá rẻ Tuy nhiên, khơng phải khơng phổ biến cho chất thải tôm để từ lưu vực nước đến vùng nước tĩnh, nơi bị phân hủy vi sinh vật khác Swiontek Brzezinska et al [106] xác định tỷ lệ phân hủy cách đánh giá lượng oxy tiêu thụ vi sinh vật có mặt chất thải tôm Trong nghiên cứu này, họ sử dụng phân đoạn thận có chứa lượng đáng kể chất béo protein vỏ không chứa chất béo protein Kết nghiên cứu họ cho thấy tỷ lệ phân hủy cao, với lượng tiêu thụ oxy tương đối cao, điển hình loại mơi trường Do hàm lượng chitin thành phần chúng, trình oxy hóa vỏ tơm chậm so sánh với q trình oxy hóa phận khác Trong trầm tích nước đáy hồ có tính chất phú dưỡng cao, chất thải tôm chuyển hóa hiệu vi sinh vật mặt đáy Tiêu thụ oxy diện chất thải tơm cao phía trầm tích nước, khác biệt so sánh với tích lũy cao vi sinh vật trầm tích [107] Ngồi ra, Streptomyces rimosus phân lập từ đất có hiệu chuyển hóa khơng chất thải tơm mà chitosan, dẫn xuất chitin Sau nuôi cấy 14 ngày, tỷ lệ phân hủy chitosan 42,5%, tỷ lệ phân hủy vỏ tôm 38,2% Xem xét chất liệu khó phân hủy, kết coi đạt yêu cầu [105] Khi Hoang cộng [43] nghiên cứu phân hủy vỏ tôm Streptomyces sp TH-11, họ nhận thấy giảm đáng kể trọng lượng vỏ sớm ngày 7, 12 16 Tương tự cân phân tử khác, chitin khơng dễ dàng chuyển hóa, chí vi sinh vật chitino-lytic, q trình oxy hóa đòi hỏi thời gian Theo Mudryk [72] Grover Chrzanowski [33], cellulose, tương tự cấu trúc chitin, không sử dụng rộng rãi làm chất hô hấp, số vi sinh vật phân hủy polyme Chất thải vỏ tôm kiểm tra chủ yếu để sản xuất monosaccharides hoạt tính sinh học oligosaccharides [18] N-acetylglucosamine, sử dụng để sản xuất mỹ phẩm chất bổ sung dinh dưỡng [12] Vỏ tôm chất để sản xuất CHIs Actinomycetes số loài vi khuẩn sử dụng vỏ tôm hiệu chitin keo cho luận án CHIs Ngoài ra, Rattanakit et al [83] trì chất thải vỏ tơm chất tốt cho nuôi cấy Aspergillus sp S1–13, trồng phương tiện truyền thông chứa chất thải từ tôm, tổng hợp lượng enzyme thủy phân chitin giống cao so với nấm trồng mơi trường có bổ sung chất chitin dạng keo Wang et al [115], Chang et al [10], Wang Chang [116], người điều tra hoạt tính thủy phân chitin vi khuẩn chi Bacillus Pseudomonas sử dụng thành công chất thải vỏ tôm cua để sản xuất CHIs Các vi sinh vật CHIs kiểm sốt sinh học Nấm thực vai trò quan trọng trình vận hành hệ sinh thái Khi sinh vật hoại sinh chúng phân hủy chất hữu cơ, dẫn đến hình thành chất mùn Tuy nhiên, nhiều loại nấm ký sinh trùng mầm bệnh Những loại nấm công trồng đặc biệt nguy hiểm Các mầm bệnh thực vật nghiêm trọng bao gồm: Fusarium, Penicillium, Alternaria, Botrytis, Ramularia, Monilinia, Cladosporium Aspergillus Những lồi nấm cơng nhiều trồng làm vườn, bao gồm rau, trái hoa trang trí Để bảo vệ trồng, người ta áp dụng loại hóa chất bảo vệ thực vật khác (thuốc diệt nấm) sản xuất hóa học tổng hợp Ngồi có nhiều tác nhân sinh học chống lại mầm bệnh nấm, chứa nhiều hoạt chất sinh học khác có nguồn gốc vi sinh vật, ví dụ, CHIs Khả vi sinh vật để sản xuất kháng nấm CHIs biết đến rộng rãi (Bảng 2) Các enzim tạo lồi nấm Trichoderma có tầm quan trọng công nghệ sinh học Cơ chế hoạt động chúng mô tả [5] Áp dụng chế phẩm có chứa nấm mốc kiểm sốt sinh học nấm phát triển kết việc sản xuất enzym CHIs glucanases [2, 38, 58] Exo-α-1,3-glucanase liên kết với thành tế bào loại nấm gây bệnh khác Aspergillus niger, Botrytis cinerea, Colletotrichum acutatum, Fusarium oxysporum, Penicillum aurantiogriseum, Rhizoctonia solani [2] CHI có hiệu ức chế tăng trưởng R solani, Marchophominia phaseolina, Fusarium sp [4, 70, 75] Hơn nữa, CHIs nguồn gốc vi khuẩn tìm thấy để hiển thị tính chất diệt nấm Ví dụ, CHIs Bacillus thuringiensis spp colmeri ức chế tăng trưởng nhiều tác nhân gây bệnh, bao gồm R solani, B cinerea, Penicillium chrysogenum Physalospora piricola [61] Prasanna et al [81] nói CHI từ Brevibacillus laterosporus ức chế hiệu phát triển Fusarium equiseti Các loại enzyme cho thấy mối quan hệ thích hợp với trùng Một số nấm men, ví dụ, Pichia anomala Pichia mem-branefaciens, sỡ hữu tính chất diệt nấm β-1.3-glucanase ức chế phát triển B cinerea [48, 65] Sự phát triển nấm mốc bị ức chế hiệu CHI sản xuất nấm men sau đây: Candida saitoana, C guilliermondii, C oleophila [23, 89] Actinomycetes hiển thị tính chất diệt nấm mạnh Nó liên quan đến việc sản xuất nhiều loại hợp chất diệt nấm khác nhau, bao gồm kháng sinh enzyme thủy phân ngoại bào CHIs b1,3-glucan-ases [80] Streptomyces halstedii, S griseus S.cavourensis SY224 sản xuất chất CHIs kháng nấm có hoạt tính cao, hàm ý khả sử dụng chúng làm tác nhân bảo vệ sinh học cho trồng [29, 49, 60] Streptomyces halstedii, S griseus S.cavourensis SY224 sản sinh chi nấm chống nấm có hoạt tính cao, hàm ý khả sử dụng chúng làm tác nhân bảo vệ sinh học cho trồng [29, 49, 60] Với việc sử dụng kỹ thuật kỹ thuật di truyền, sử dụng q trình kiểm sốt sinh học phytopathogens enzyme tái tổ hợp thu cách đưa gen thích hợp mã hóa CHIs kháng nấm vào nhiều loại sinh vật khác rong nghiên cứu thực Bezirganoglu et al [6] protein kháng nấm (AFP) gen hợp CHI đưa vào dưa hấu phương Đông để kiểm soát bệnh nấm R solani F oxysporum gây Kết họ chứng minh gen tổng hợp AFP-CHI có hiệu việc bảo vệ dưa chuyển gen chống lại bệnh nấm R solani F oxysporum gây Matroodi et al [66] xây dựng CHI coneric cách thêm tên miền liên kết chitin từ S marcescens vào nấm CHI, Trichoderma atroviride Chit42, để nghiên cứu vai trò miền gắn kết chitin hoạt động enzyme Chit42 Việc đánh giá hoạt tính kháng nấm cơng trình kiến trúc chim địa xây dựng thực để nghiên cứu ảnh hưởng ChBD hoạt tính kháng nấm CHIs Nghiên cứu họ chứng minh hợp ChBD cải thiện lực với tinh thể chitin dạng keo hoạt động enzyme CH tinh trùng so sánh với Chit42 Chimeric CHI cho thấy hoạt tính kháng nấm cao phytopathogenic nấm Hiệu tác nhân enzym việc chống nấm phytopathogens phụ thuộc vào nhiều yếu tố Roberts Selitrennikoff [85] khám phá CHIs có nguồn gốc vi khuẩn cho thấy hoạt tính diệt nấm thấp đáng kể so với nguồn gốc thực vật Các tác giả kết hợp tượng với thực tế phần lớn chi vi khuẩn exochitin-ases có hoạt động thấp hai bậc so với endochitinases Đồng thời hoạt tính diệt nấm liên quan đến tương tác loại enzym khác Nghiên cứu Someya et al [95] chứng minh hoạt động phối hợp en dochitinase chitobiase tạo chuỗi tinh thể Serratia ức chế phát triển B cinerea đến mức độ lớn so với hai enzyme riêng biệt Chang et al [11] nói Bacillus cereus QQ308 sản xuất enzym thủy phân chống nấm, bao gồm CHI, chitosanase protease, nuôi mơi trường có chứa tơm vỏ vỏ cua sản xuất từ chất thải biển Sự tăng trưởng nấm gây bệnh thực vật F oxysporum, F solani, Pythium tối ưu bị ảnh hưởng đáng kể việc nuôi trồng QQ308 Một số chi nấm mốc sản xuất mạnh endochitinases - T harzianum Fusarium chlamydosporum có ý nghĩa đặc biệt việc bảo vệ thực vật Ngồi chitnases, chúng tạo enzym thủy phân khác, ví dụ, protease, tương tác với enzyme phân hủy chitin [82] Joo [49], thử nghiệm hoạt tính diệt nấm CHIs tinh khiết không tinh khiết sản xuất S halstedii, chứng minh việc chuẩn bị enzym ức chế phát triển số chi nấm thực vật nấm, đến mức độ lớn thấp Các CHIs ức chế phát triển Alternaria alternata, Colletotrichum gloeosporioides, Fusarium ox-ysporium, sợi nấm lycopersici Stemphylum, chất không tinh khiết gây ức chế tăng trưởng Phytophtora capsci Swiontek Brzezinska et al [103, 104] phát thử nghiệm mức độ ức chế phát triển phytopathogenetic phụ thuộc vào mức độ tinh khiết việc chuẩn bị enzym Các CHIs khơng bị lọc hóa mạnh mẽ đối kháng so với CHIs tinh khiết Nó kết nối với có loại thuốc kháng sinh không tinh khiết làm tăng hoạt tính diệt nấm tác nhân Sự tương tác hợp lực b1,3-glucanase kháng thể peptide-peptide (peptabols) tiết lộ trình ký sinh T harzianum Peptabols trichorzianines A B có khả ức chế tổng hợp bglucan (các enzyme chịu trách nhiệm tổng hợp b-glucan thành tế bào) phân lập từ plasmalemma B cinerea Tác dụng peptabols tăng cường cách bổ sung b-1,3-glucanase sản xuất T harzianum, làm tăng hiệu diệt nấm chúng [64, 120] Bảng 2: Hoạt tính kháng nấm số chi vi khuẩn Nguồn Chống đối kháng Tài liệu tham khảo Trichoderma harzianum Fusarium oxysporum f sp melonis, Sclerotium [114] Rifai TM rolfsii Trichoderma harzianum Macrophomina phaseolina, Fusarium sp R [4, 70, solani, Aspergillus 75] niger (NCIM 563), Aspergillus, Rhizopus, Mucor sp Trichoderma atroviride Rhizoctonia solani [39] PTCC5220 Trichothecium roseum Alternaria alternata, Fusarium moniliforme, [22] Magnaporthe grisea Basidiobolus ranarum Rhizoctonia solani, F solani [68] Bacillus sp BG-11 Rhizopus arrhizus, Sclerotium rolfsii, R solani, [7] Phytophthora infestans, F oxysporum, Phanerochaete [11] chrysosporium Bacillus cereus YQQ 308 Fusarium oxysporum, F solani, P ultimum [28] Bacillus pumilus SG2 Fusarium graminearum, R solani, Magnaporthe grisea, Sclerotinia sclerotiorum, Trichoderma reesei, B cinerea, [36] Bipolaris sp [61] Bacillus cereus IO8 Botrytis cinerea Bacillus thuringiensis subsp Rhizoctonia solani, B cinerea, P chrysogenum, colmeri 15A3 P piricola, Penicillium glaucum, Sclerotinia [81] fuckelian Brevibacillus laterosporus Fusarium equiseti [35] Aeromonas hydrophila SBK1 Aeromonas hydrophila SBK1 [17] Enterobacter sp NRG4 Fusarium moniliforme, Aspergillus niger, Mucor [113] Alcaligenes xylosoxydans rouxi, Rhizopus nigricans Stenotrohomonas maltophila Fusarium sp Rhizoctonia bataticola [46,100 Rhizobium sp Fusarium solani, F oxysporum, R solani, A ] alternate [97] Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Curvularia lunata, F Serratia marcescens strain B2 oxysporum, Fusarium udum Vibrio pacini Botrytis cinerea [95] Mucor racemosus, Trichoderma viride, Streptomyces halstedii AJ-7 Zygorhynchus heterognmus, Candida albicans [3] Streptomyces hygroscopicus Alternaria alternata, B cinerea, S lycopersici, Streptomyces tendae TK- F oxysporum VL_333 Colletotrichum gloeosporioides, Sclerotium [49] Streptomyces sp DA11 rolfsii Streptomyces roseolus DH Aspergillus niger, F oxysporum [80] Streptomyces sporovirgulis Streptomyces rimosus Aspergillus niger, Candida albicans Aspergillus spp., Rhizopus Penicillium spp., Mucor spp Alternaria alternate Alternaria alternata, F solani [51] chinensis, [37] [47] [104] [105] Các vấn đề liên quan đến việc sử dụng vi sinh vật chất chuyển hóa chúng bảo vệ thực vật chống lại bệnh nấm Các loại thuốc sinh học cung cấp chiến lược thay thế, thân thiện với mơi trường để kiểm sốt tác nhân gây bệnh thực vật Tuy nhiên, số thách thức, ứng dụng họ hạn chế Mặc dù có lợi, việc sử dụng vi sinh vật chất chuyển hóa chúng có số nhược điểm Đầu tiên, so với sản phẩm hóa học, thuốc diệt nấm sinh học cần nhiều thời gian để làm việc Hơn nữa, tính chọn lọc cao, chi phí liên quan đến việc sử dụng chúng tương đối cao [126] Các điều kiện mơi trường, ngăn chặn phát triển vi sinh vật, phải xem xét Tuy nhiên, có nhiều cách mà loại biofungicide khác kết hợp thực phương pháp nơng nghiệp, vật lý hóa học để tạo hiệu ứng hiệp đồng [57, 96] Dahiya et al [16] tin enzyme thủy phân chitin sử dụng làm chất bổ sung cho thuốc diệt nấm hóa học để tăng hiệu chúng chống lại nấm mốc gây bệnh giảm nồng độ cần thiết hóa chất độc hại Trong nơng nghiệp, miễn cưỡng sử dụng thuốc diệt nấm dựa CHIs có liên quan lo sợ tác động chúng giảm môi trường tự nhiên Tuy nhiên nghiên cứu kết hợp hai vi khuẩn thủy phân chitin Paenibacillus sp 300 Streptomyces sp 385 có hiệu so với F oxysporum gây héo dưa chuột so với chủng cá nhân kết hợp khác [94] Theo El-Tarabily et al [24] kết hợp chủng S marcescens, Streptomyces viridodiasticus Micromonospora carbonacea ức chế phát triển Sclerotinia nhỏ gây thối rau Kishore cộng [54] mô tả tác dụng hiệp đồng vi khuẩn Bacillus circulans GRS 243 S marcescens GPS 5, kết hợp ức chế phát triển nấm mốc Phaeoisariopsis personata sử dụng tiên đề Bảo vệ rừng dựa vào biofungicides chứa loài Trichoderma (chủ yếu T viride T harzianum), bào tử có hiệu ức chế phát triển nấm gây bệnh trộn lẫn với mùn cưa áp dụng cho đất [50] Nông nghiệp dựa vào biofungicides chứa nhiều vi sinh vật khác (ví dụ: Bacillus subtilis GB03, Pseudomonas aureofaciens Tx-1 Streptomyces griseoviridis K61), bán tên thương mại khác [15] Phần lớn chất biofungicides dựa vào xâm nhập rhizosphere với vi sinh vật Bằng cách sản xuất enzyme diệt nấm chất chuyển hóa khác, vi sinh vật ức chế phát triển tác nhân gây bệnh bảo vệ rễ Kết luận Vi sinh vật thủy phân chitin có tiềm cho ứng dụng sinh học sản xuất nhiều loại môi trường tự nhiên Ứng dụng khơng giới hạn việc phân hủy chất thải có chứa chitin Nhiều nghiên cứu chứng minh khả sử dụng chúng trình sản xuất enzim thủy phân chitin có hoạt tính diệt nấm chống lại số loại nấm gây bệnh nấm Trong kiểm soát sinh học nấm gây bệnh thực vật, ứng dụng tác nhân có chứa chất chuyển hóa khác vi sinh vật, bao gồm CHIs, dường hiệu hơn, chúng cho thấy hoạt tính diệt nấm mạnh enzim thủy phân chitin tinh Việc sử dụng tác nhân cấu thành tập hợp vi sinh vật thủy phân chitin dường mang lại kết tốt việc chống lại nấm gây bệnh thực vật C KẾT LUẬN Giáp xác nguồn nguyên liệu thủy sản dồi chiếm 1/3 tổng sản lượng nguyên liệu thủy sản Việt Nam Nguồn phế liệu nguyên liệu quan trọng cho công nghiệp sản xuất: chitin, chitosan, glucosamin sản phẩm có giá trị khác Chitin có loạt ứng dụng sinh hóa, thực phẩm ngành cơng nghiệp hóa chất có khả kháng khuẩn, kháng cholesterol hoạt tính chống ung thư Chitin vật liệu liên quan sử dụng xử lý nước thải, vận chuyển thuốc, chữa lành vết thương nguồn chất xơ Chitin có nhiều ứng dụng đời sống nghành công nghiệp nước ta tồn gới nên cần có nhiều cơng trình nghiên cứu lớn nhiều để khai thác nhiều giá trị chitin cho sống người Tài liệu tham khảo Nguyễn Thu Nhường, Đồ án tốt nghiệp Đại học, nghiên cứu thu nhận enzyme chitinase vi khuẩn phân lập từ đất thuộc tỉnh khánh hòa Tài liệu tham khảo Adrangi S, Faramarzi MA, Shahverdi AR, Sepehrizadeh Z (2010) Purification and characterization of two extracellular endoch-itinases from Massilia timonae Carbohydr Res 345:402–407 Ait-Lahsen H, Soler A, Rey M, de la Cruz J, Monte E, Llobell A (2001) An antifungal exo-a 1,3 glucanase (AGN13.1) from the biocontrol fungus Trichoderma harzianum Appl Environ Microbiol 67:5833–5839 Bao-qin H, Chang-ying YU, Wan-shun LIU, Ji-xun DAI (2004) Purification and inhibition fungal growth of chitinases from Vibrio pacini Wuhan Univ J Nat Sci 9(6):973–978 Bell DK, Wells HD, Markham CR (1982) In vitro antagonism of Trichoderma species against six fungal plant pathogens Phytopathol 72:379–382 Benitez T, Rincon AM, Limon MC, Codon AC (2004) Bio-control mechanisms of Trichoderma strains Int Microbiol 7(4):249–260 Bezirganoglu I, Hwang SY, Fang TJ, Shaw JF (2013) Trans-genic lines of melon (Cucumis melo L var makuwa cv ‘Silver Light’) expressing antifungal protein and chitinase genes exhibit enhanced resistance to fungal pathogens Plant Cell Tissue Organ Cult 112:227–237 Bhushan B (1998) Isolation, purification, characterization and scaleup production of a thermostable chitinase from an alkalo-philic microorganism Ph.D Thesis, Department of Microbiol-ogy, Chandigarh Punjab University, Boyer JN (1994) Aerobic and anaerobic degradation and mineral-ization of 14C: chitin by water column and sediment inocula of the York River estuary, Virginia Appl Environ Microbiol 60:174–179 Budi SW, van Tuinen D, Arnould C, Dumas-Gaudut E, Gian-inazzi-Pearson V, Gianinazzi S (2000) Hydrolytic enzyme activity of Paenibacillus sp strain B2 and effect of antagonistic bacterium on cell wall integrity of two soil-borne pathogenic fungi Appl Soil Ecol 15:191–199 10 Chang WT, Chen M, Wang SL (2010) An antifungal chitinase produced by Bacillus subtilis using chitin waste as a carbon source World J Microbiol Biotechnol 26:945–950 11 Chang WT, Chen YC, Jao CL (2007) Antifungal activity and enhancement of plant growth by Bacillus cereus grown on shellfish chitin wastes Biores Technol 98:1224–1230 12 Chen JK, Shen CR, Liu CL (2010) NAcetylglucosamine: pro-duction and applications Mar Drugs 8:2493–2516 13 Cobos MA, Garcia LE, Gonza ́ lez SS, Barcena JR, Herna ́ndez DS, Pe ́rez-Sato M (2002) The effect of shrimp shell waste on ruminal bacteria and performance of lambs Animal Feed Sci Technol 95:179–187 14 Cohen-Kupiec R, Chet I (1998) The molecular biology of chitin digestion Curr Opin Biotechnol 9:270–277 15 Copping LG (2004) The Manual of biocontrol agents British Crop Protection Council 16 Dahiya N, Tewari R, Hoondal GS (2006) Biotechnological aspects of thủy phân chitin enzymes: a review Appl Microbiol Biotech 25:1–10 17 Dahiya N, Tewari R, Tiwari RP, Hoondal GS (2005) Production of an antifungal chitinase from Enterobacter sp NRG4 and its application in protoplast production World J Microbiol Bio-technol 21(8–9):1611–1616 18 Das SN, Neeraja Ch, Sarma PVSRN, Madhu Prakash J, Purusho-tham P, Kaur M, Dutta S, Podile AR (2012) Microbial chitinases for chitin waste management Microorg Environ Manag, 135–150 19 Dixon B (1995) Using fungal dressings to heal wounds Bio-technology 13:120– 121 20 Donderski W, Trzebiatowska M (2000) Influence of physical and chemical factors on the activity of chitinases produced by planktonic bacteria isolated from Jeziorak Lake Pol J Environ Stud 9(2):77–82 cinerea by Candida saitoana in apple fruit Phytopathology 88:282–291 24 El-Tarabily KA, Soliman MH, Nassar AH, Al-Hassani HA, Sivasithamparam K, McKenna F, Hardy GESTJ (2000) Biological control of Sclerotinia minor using a chitinolytic bacte-rium and actinomycetes Plant Pathol 49:573–583 25 Felse PA, Panda T (2000) Production of microbial chitinases: arevisit Bioprocess Eng 23:127–134 26 Flach J, Pilet PE, Jolles P (1992) What’s new in chitinase research? Experimentia 48:701–706 27 Fra ̈ ndberg E, Schnu ̈ rer J (1994) Thủy phân chitin properties of Bacillus pabuli K1 J Appl Bacteriol 76:361–367 28 Ghasemi S, Ahmadian G, Jelodar NB, Rahimian H, Ghandili S, Dehestani A, Shariati P (2010) Antifungal chitinases from Bacillus pumilus SG2: preliminary report World J Microbiol Biotechnol 26:1437–1443 21 Duo-Chuan L (2006) Review of fungal chitinases Mycopatho-logia 163:345–360 29 Gherbawy Y, Elhariry H, Altalhi A, ElDeeb B, Khiralla G (2012) Molecular screening of Streptomyces isolates for antifungal activity and family 19 chitinase enzymes J Microbiol 50(3):459–468 22 Duo-Chuan L, Hang Sh-H, Liu K-Q, Lu J (2004) Purification and partial characterization of a chitinase from the mycoparasitic fungus Trichothecium roseum J Gen Appl Microbiol 50:35–39 30 Gohel V, Singh A, Vimal M, Ashwini P, Chhatpar HS (2006) Bioprospecting and antifungal potential of thủy phân chitin micro-organisms Afr J Biotechnol 5(2):54 72 23 El Ghaouth A, Wilson CL, Wisniewski M (1998) Ultrastructural and cytochemical aspects of the biological control of Botrytis 31 Gooday GW (1990) The ecology of chitin degradation Adv Microbial Ecol 11:387–430 32 Gooday GW (1999) Aggressive and defensive roles of chitin-ases EXS 87:157– 169 33 Grover JP, Chrzanowski TH (2000) Seasonal patterns of sub-strate utilization by bacterioplankton: case studies in four Temperate lakes of different latitudes Aquatic Microbial Ecol 23:41–54 34 Guo RF, Shi BSh, Li DCh, Ma W, Wei Q (2008) Purification and characterization of a novel thermostable chitinase from Thermomyces lanuginosus SY2 and cloning of its encoding gene Agric Sci China 7(12):1458–1465 35 Halder SK, Maity Ch, Jana A, Das A, Paul T, Mohapatra PKD, Pati BR, Mondal KCh (2013) Proficient biodegradation of shrimp shell waste by Aeromonas hydrophila SBK1 for the concomitant production of antifungal chitinase and antioxidant chitosaccharides Int Biodet Biodeg 79:88–97 36 Hammami I, Siala R, Jridi M, Ktari N, Nasri M, Mohamedali T (2013) Partial purification and characterization of chiIO8, a novel antifungal chitinase produced by Bacillus cereus IO8 J Appl Microbiol 115:358–366 37 Han Y, Yang B, Zhang F, Miao X, Li Z (2009) Characterization of antifungal chitinase from marine Streptomyces sp DA11 associated with South China Sea Sponge Craniella Australiensis Mar Biotechnol 11:132–140 38 Haran S, Schickler H, Oppenheim A, Chet I (1995) New com-ponents of the thủy phân chitin system of Trichoderma harzianum Nucleic Acid Res 99:447–450 39 Harighi MJ, Motallebi M, Zamani MR (2006) Purification of chitinase 42 from Trichoderma atroviride PTCC5220 Iran J Biol 19:203–214 40 Hartl L, Zach S, Seidl-Seiboth V (2012) Fungal chitinases: diversity, mechanistic properties and biotechnological potential Appl Microbiol Biotechnol 93:533–543 41 Henrissat B (1999) Classification of chitinases modules EXS 87(1):137–156 42 Herwig RP, Pellerin NB, Irgens RL, Maki JS, Staley JT (1988) chitin bacteria and chitin mineralization in the marine waters and sediments along the Antarctic Peninsula FEMS Microbiol Ecol 53:101– 112 43 Hoang KC, Lai TH, Lin CS, Chen YT, Liau CY (2011) The thủy phân chitin activities of Streptomyces sp TH-11 Int J Mol Sci 12:56–65 44 Hosny MS, El-Shayeb NA, Abood A, Abdel-Fattah AM (2010) A potent activity of marine Actinomycete sp And enzymatic production of chitooligosaccharides Aust J Basic Appl Sci 4(4):615–623 45 Itoh Y, Kawase T, Nikajdou N, Fukada H, Mitsutomi M, Wa-tanabe T, Itoh Y (2002) Functional analysis of the chitin binding domain of a family 19 chitinase from Streptomyces griseus HUT6037: substrate-binding affinity and cis-dominant increase of antifungal function Biosci Biotechnol Biochem 66:1084–1092 46 Jankiewicz U, Swiontek Brzezinska M, Saks E (2012) Identifi-cation and characterization of a chitinase of Stenotrophomonas maltophilia, a bacterium that is antagonistic towards fungal phytopathogens 113(1):30–35 J Biosci Bioeng (Arachis hypogaea) with chitin bacteria Phytopathology 95:1157–1165 47 Jiang X, Chen D, Hong Sh, Wang W, Chen Sh, Zou Sh (2012) Identification, characterization and functional analysis of a GH-18 chitinase from Streptomyces roseolus Carbohydr Polym 87:2409–2415 55 Koga D, Isogai A, Sakuda S, Matsumoto S, Suzuki A, Kimura S, Ide A (1987) Specific inhibition of Bombyx mori chitinase by allosamidin Agric Bio Chem 51:471–476 48 Jijakli MH, Lepoivre P (1998) Characterization of an exo-b-1,3- glucanase produced by Pichia anomala strain K, antagonist of Botrytis cinerea on apples Phytopathology 88:335–343 56 Kopecˇny ́ J, Hodrova ́ B, Stewart CS (1996) The isolation and characterization of rumen chitin bacterium Lett Appl Microbiol 23:195–198 49 Joo GJ (2005) Purification and characterization of an extracel-lular chitinase from the antifungal biocontrol agent Streptomy-ces halstedii Biotechnol Lett 27:1483–1486 50 Kapus ́cin ́ski R (2002) Biopreparations in environmental pro-tection and use of forest Environ Eng 7:55–58 (in polish) 51 Kavitha A, Vijayalakshmi M (2011) Partial purification and antifungal profile of chitinase produced by Streptomyces tendae TK-VL_333 Ann Microbiol 61:597–603 52 Khiyami M, Masmali I (2008) Characteristics of thermostable chitinase enzymes of Bacillus licheniformis isolated from Red Palm Weavil Gut Aus J Basic Appl Sci 2(4):943–948 53 Kim HS, Timmis KN, Golyshin PN (2007) Characterization of a thủy phân chitin enzyme from Serratia sp KCK isolated from kimchi juice Appl Microbiol Biotechnol 6:1275–1283 54 Kishore GK, Pande S, Podile AR (2005) Biological control of late leaf spot of peanut 57 Kordowska-Wiater M (2011) Yeast as a biological plant pro-tection agents Adv Microbiol 50(2):107–119 (in polish) 58 Kubicek CP, Mach RL, Peterbauer CK, Lorito M (2001) Trichoderma chitinases: from genes to biocontrol J Plant Pathol 83:11–23 59 Lee YG, Chung KC, Wi SG, Lee JC, Bae HJ (2009) Purification and properties of a chitinase from Penicillium sp LYG 0704 Protein Expr Purif 65:244–250 60 Lee SY, Tindwa H, Lee YS, Naing KW, Hong SH, Nam Y, Kim KY (2012) Biocontrol of anthracnose in pepper using chitinase, beta-1,3 glucanase, and 2furancarboxaldehyde produced by Streptomyces cavourensis SY224 J Microbiol Biotechnol 2(10): 1359–1366 61 Liu D, Cai J, Xie Ch-Ch, Liu Ch, Chen Y-H (2010) Purification and partial characterization of a 36-kDa chitinase from Bacillus thuringiensis spp colmeri, and its biocontrol potential Enzyme Microb Technol 46:252–256 62 Li S, Zhao ZA, Li M, Gu ZR, Bai C, Huang WD (2002) Puri-fication and characterization of a novel chitinase from Bacillus brevis Acta Biochemica et Biophysica Sinica 34(6):690–696 genes involved in chitin degradation of Pseudoalteromonas piscicida strain O-7 Arch Microbiol 188:619–628 63 Mane UV, Deshmukh AM (2009) Chitin degrading potential of three aquatic actinomycetes and its optimization Afr J Bio-technol 8(23):6617–6620 70 Monteiro VN, Silva RN, Steindorff AS, Costa FT, Noronha EF, Ricart SAO, Sousa MV, Vainstein MH, Ulhoa CJ (2010) New insights in Trichoderma harzianum antagonism of fungal plant pathogens by secreted protein analysis Curr Microbiol 61:298–305 64 Markovich NA, Kononova GL (2003) Lytic enzymes of Trich-oderma and their role in plant defense from fungal diseases: a review Appl Biochem Microbiol 39:389– 400 65 Masih EI, Paul B (2002) Secretion of beta-1,3-glucanase by the yeast Pichia membranefaciens and its possible role in the bio-control of Botrytis cinerea causing mold disease of the grape-vine Curr Microbiol 44:391–395 66 Matroodi S, Motallebi M, Zamani M, Moradyar M (2013) Designing a new chitinase with more chitin binding and antifungal activity World J Microbiol Biotechnol 29:1517–1523 67 McCreath KJ, Gooday GW (1992) A rapid and sensitive microassay for determination of thủy phân chitin activity J Micro-biol Meth 14:229–237 68 Mishra P, Kshirsagar PR, Nilegaonkar SS, Singh SK (2012) Statistical optimization of medium components for production of extracellular chitinase by Basidiobolus ranarum: a novel biocontrol agent against plant pathogenic fungi J Basic Microbiol 52:539–548 69 Miyamoto K, Okunishi M, Nukui E, Tsuchiya T, Kobayashi T, Imada C, Tsujibo H (2007) The regulator CdsS/CdsR twocomponent system modulates expression of 71 Mudryk Z (1991) The role of heterotrophic bacteria in the decomposition processes of some macromolecular compounds in the estuarine Gardno lake Pol Arch Hydrobiol 38:153–162 72 Mudryk Z (1997) Studies on metabolic activity of planktonic bacteria isolated from coastal lake Łebsko Pol J Environ Stud 6:23–28 73 Mukherjee G, Sen SK (2006) Purification, characterization, and antifungal activity of chitinase from Streptomyces venezuelae P10 Curr Microbiol 53:265–269 74 Muzzarelli RA, Mattioli-Balmonte M, Pugnaloni A, Biagini G (1999) Biochemistry, histology and clinical uses of chitins and chitosans in wound healing EXS 87:251–264 75 Nampoothiri KM, Baiju TV, Sandhya C, Sabu A, Szakacs G, Pandey A (2004) Process optimization for antifungal chitinase production by Trichoderma harzianum Process Biochem 39:1583– 1590 76 Park HJ, Kim D, Kim IH, Lee CE, Kim IC, Kim JY, Kim SJ, Lee HK, Yim JH (2009) Characteristics of cold-adaptive en- dochitinase from Antarctic bacterium Sanguibacter antarcticus KOPRI 21702 Enzyme Microb Technol 45:391–396 77 Patil RS, Ghormade V, Deshpande MV (2000) Thủy phân chitin enzymes: an exploration Enzyme Microb Tech 26:473– 483 78 Paul EA, Clark FE (2000) Soil Microbiology and Biochemistry, University of Maria Curie-Sklodowska University in Lublin (in polish) 79 Pel R, Gottschal JC (1986) Mesophilic chitin: degrading anaerobes isolated from an estuarine environment FEMS Microbiol Ecol 38:39–49 80 Prapagdee B, Kuekulvong C, Mongkolsuk S (2008) Antifungal potential of extracellular metabolites produced by Streptomyces hygroscopicus against phytopathogenic fungi Int J Biol Sci 4:330–337 81 Prasanna L, Eijsink VGH, Meadow R, Ga ̊ seidnes S (2013) A novel strain of Brevibacillus laterosporus produces chitinases that contribute to its biocontrol potential Appl Microbiol Bio-technol 97:1601–1611 82 Punja ZK, Utkhede RS (2003) Using fungi and yeasts to manage vegetable crop diseases Trends Biotechnol 21:400–407 83 Rattanakit N, Yano Sh, Plikomol A, Wakayama M, Tachiki T 2007) Purification of Aspergillus sp S1-13 chitinases and their role in saccharification of chitin in mash of solid-state culture with shellfish waste J Biosci Bioeng 103(6):535–541 84 Reguera G, Leschine SB (2001) Chitin degradation by cellulo-lytic anaerobes and facultative aerobes from soil and sediments FEMS Microbiol Lett 204:367–374 85 Roberts WK, Selitrennikoff CP (1988) Plant and bacterial chitinases differ in antifungal activity J Gen Microbiol 134(169–1):76 86 Sahai AS, Manocha MS (1993) Chitinases of fungi and plants: their involvment in motphogenesis and host– parasite interaction FEMS Microbiol Rev 11:317–338 87 Saito A, Fujii T, Yoneyama T, Miyashita K (1998) glkA is involved in glucose repression of chitinase production in Streptomyces lividans J Bacter 180:2911–2914 88 Saks E, Jankiewicz U (2010) Thủy phân chitin activity of bacteria Adv Biochem 56(4):1–8 (in polish) 89 Saligkarias ID, Gravanis FT, Epton HAS (2002) Biological control of Botrytis cinerea on tomato plants by the use of epi-phytic yeasts Candida guilliermondii strains 101 and US and Candida oleophila strain I-182: II a study on mode of action Biol Control 25:151–161 90 Schlegel HG (2006) General microbiology Polish Scientific Publishers, Warsaw, Poland (in polish) 91 Shaikh SA, Deshpande MV (1993) Thủy phân chitin enzymes: their contribution to basic applied research World J Microbiol Bio-technol 9:468– 475 92 Sharma N, Sharma KP, Gaur RK, Gupta VK (2011) Role of chitinase in plant defense Asian J Biochem 6:29–37 93 Sharma V, Shanmugam V (2011) Purification and character-ization of an extracellular 24 kDa chitobiosidase from the my-coparasitic fungus Trichoderma saturnisporum J Basic Microbiol 51:1– 94 Singh PP, Shin YC, Park CS, Chung YR (1999) Biological control of fusarium wilt of cucumber by thủy phân chitin bacteria Phytopathology 89:92– 99 95 Someya N, Nakajima M, Hirayae K, Hibi T, Akutsu K (2001) Synergistic antifungal activity enzymes and prodigiosin produced by the biocontrol bacterium Serratia marcescens strain B2 against the gray mold pathogen, Botrytis cinerea J Gen Plant Pathol 67:312–317 96 Spadaro D, Gullino ML (2005) Improving the efficacy of bio-control agents against soilborne pathogens Crop Prot 24:601–613 97 Sridevi M, Mallaiah KV (2008) Factors effecting chitinase activity of Rhizobium sp from Sesbania sesban Biologia 63(3):307–312 98 Strange RN, Scott PR (2005) Plant disease: a threat to global food security Annu Rev Phytopathol 43:83–116 99 Sturz H, Robinson J (1985) Anaerobic decomposition of chitin in freshwater sediments In: Muzzarelli R, Jeuniaux C, Gooday GW (eds) Chitin in nature and biotechnology Plenum Press, New York, pp 531–538 100 Suma K, Podile AR (2013) Chitinase A from Stenotrophomonas maltophilia shows transglycosylation and antifungal activities Biores Technol 133:213–220 101 Suzuki K, Sugawara N, Suzuki M, Uchiyama T, Katouno F, Nikaidou N, Watanabe T (2002) Chitinases, A, B and C1 of Serratia marcescens 2170 produced by recombinant E coli: enzymatic properties and synergism on chitin degradation Biosci Biotechnol Biochem 66:1075–1083 102 Swiontek Brzezinska M, Donderski W (2006) Thủy phân chitin bacteria in two lakes of different trophic status Pol J Ecol 54(2):295–301 103 Swiontek Brzezinska M, Jankiewicz U (2012) Production of antifungal chitinase by Aspergillus niger LOCK 62 and its potential role in the biological control Curr Microbiol 65(6):666–672 104 Swiontek Brzezinska M, Jankiewicz U, Lisiecki K (2013) Optimization of cultural conditions for the production of anti-fungal chitinase by Streptomyces sporovirgulis Appl Biochem Microbiol 49(2):154–159 105 Swiontek Brzezinska M, Jankiewicz U, Walczak M (2013) Biodegradation of chitinous substances and chitinase production by the soil actinomycete Streptomyces rimosus Internat Biodet Biodeg 84:104–110 106 Swiontek Brzezinska M, LalkePorczyk E, Donderski W (2008) Occurrence and activity of microorganisms in shrimp waste Curr Microbiol 57:580–587 107 Swiontek Brzezinska M, LalkePorczyk E, Donderski W (2008) Utilization of shrimp waste as a respiration substrate by plank-tonic and benthic microorganisms Pol J Environ Stud 17(2):273–282 108 Swiontek Brzezinska M, Walczak M, Lalke-Porczyk E, Don-derski W (2010) Microbial degradation of shrimp waste in soil of the Chełmzyn ́skie Lake watershed Pol J Environm Stud 19(3):627–633 109 Taechowisan T, Peberdy JF, Lumyong S (2003) Chitinase production by endophytic Streptomyces aureofaciens CMUAc130 and its antagonism against phytopathogenic fungi Ann Micro-biol 53(4):447–461 110 Timmis K, Hobbs G, Berkeley RCW (1974) clos-tridia isolated from marine mud Can J Microbiol 20:1284– 1285 111 Tsujibo H, Hatano N, Okamoto T, Endo H, Miyamoto K, Ina-mori Y (1999) Synthesis of chitinase in Streptomyces thermo-violaceus is regulated by a two-component sensorregulator system FEMS Microbiol Lett 181:83–90 112 Ueda M, Fujiwara A, Kawaguchi T, Arai M (1995) Purification and some properties of six chitinases from Aeromonas sp No 10S–24 Biosci Biotechnol Biochem 59:2162–2164 113 Vaidya RJ, Shah IM, Vyas PR, Chhatpar HS (2001) Production of chitinase and its optimization from a novel isolate Alcaligenes xylosoxydans: potential antifungal biocontrol World J Micro-biol Biotechnol 1:62–69 114 Viterbo A, Haran S, Friesem D, Ramot O, Chet I (2001) Antifungal activity of a novel endochitinase gene (chit36) from Trichoderma harzianum Rifai TM FEMS Microbiol Lett 200:169–174 115 Wang SL, Chao CH, Liang TW, Chen CC (2009) Purification and characterization of protease and chitinase from Bacillus cereus TKU006 and conversion of marine wastes by these enzymes Mar Biotechnol 11:334– 344 116 Wang SL, Chang WT (1997) Purification and characterization of two bifunctional chitinases/lysozymes extracellularly produced by Pseudomonas aeruginosa K-187 in shrimp and crab shell powder medium Appl Environ Microbiol 63:380–386 117 Wang SL, Hsiao WJ, Chang WT (2002) Purification and char-acterization of an antimicrobial chitinase extracellularly pro-duced by Monascus purpureus CCRC31499 in a shrimp and crab shell powder medium J Agric Food Chem 50:2249–2255 118 Wang SL, Chen SJ, Wang CL (2008) Purification and charac-terization of chitinase and chitosanases from a new strain Pseudomonas sp TKU015 using shrimp shells as a substrate Carbohydr Res 343:1171–1179 119 Witas T (1995) Activity in the exploitation barrier chitin of shellfish Department of Maritime College Publishing, Szczecin (in polish) 120 Witkowska D, Stolas J, Kancelista A, Piezga M (2009) Lytic abilities of fungi of the genus Trichoderma biomass in the presence of phytopathogens Acta Pol Sci Biotechnol 8(2s):17–25 (in polish) ... Tận dụng nguồn phế liệu giải triệt để vấn đề nhiễm mơi trường mà tạo chế phẩm có giá trị nên chọn đề tài: Vi sinh vật thủy phân chitin khả ứng dụng chúng bảo vệ môi trường ’ từ báo tiếng Anh “Chitinolytic... nguồn cacbon nitơ Vi sinh vật thủy phân chitin Thường tìm thấy sinh quyển, vi sinh vật thủy phân chitin có khả phân hủy chitin hai điều kiện hiếu khí yếm khí Chúng tìm thấy nhiều mơi trường khác Trái... phát 10,6% vi khuẩn phân hủy chitin, so với 5% đáy trầm tích Vi sinh vật thủy phân chitin sống nhiều loại môi trường Kopecny et al [56] tìm thấy vi khuẩn thủy phân chitin phân động vật ăn cỏ hoang