Khảo sát khả năng diệt khuẩn của sản phẩm GPC8TM đối với vi khuẩn vibrio parahaemolyticus gây bệnh trên tôm thẻ chân trắng

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG DIỆT KHUẨN CỦA SẢN PHẨM GPC8TM ĐỐI VỚI VI KHUẨN VIBRIO PARAHAEMOLYTICUS GÂY BỆNH TRÊN TÔM THẺ CHÂN TRẮNG Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : Th.s Võ Minh Sơn Sinh viên thực MSSV: 1151110041 : Nguyễn Thụy Thanh Trúc Lớp: 11DSH01 TP Hồ Chí Minh, 2015 LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu kết Đồ án trung thực Mọi thơng tin trích dẫn Đồ án đƣợc ghi rõ nguồn gốc Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm lời cam đoan Tp Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2015 Sinh viên thực Nguyễn Thụy Thanh Trúc LỜI CẢM ƠN Để hồn thành Khóa luận tốt nghiệp, ngồi cố gắng thân, tơi nhận đƣợc giúp đỡ nhiều Thầy Cô giáo, Anh Chị trƣớc, bạn bè gia đình suốt thời gian thực đề tài Nhân xin đƣợc gửi lời cảm ơn chân thành đến: Ban giám hiệu Trƣờng Đại học Công Nghệ Thành Phố Hồ Chí Minh, tồn thể q thầy Khoa Cơng Nghệ Sinh Học tận tình giảng dạy truyền đạt nhiều kiến thức bổ ích suốt khóa học để tơi hồn thành tốt đề tài Thầy Phạm Minh Nhựt giáo viên giới thiệu vào làm Luận văn Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản II Ban Giám Đốc, cô chú, anh chị cán Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản II tạo điều kiện giúp đỡ tơi q trình thực đề tài Đặc biệt, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Thạc Sĩ Võ Minh Sơn, ngƣời tận tình hƣớng dẫn, dạy bảo giúp đỡ suốt trình thực đề tài Đồng thời xin gửi lời cám ơn đến bạn Trần Thái Hoàng Quân bạn giúp đỡ, động viên thực đề tài suốt trình học tập trƣờng Cuối tơi xin cảm ơn gia đình ngƣời thân ủng hộ động viên tôi, tạo điều kiện tốt cho mặt tinh thần vật chất để hồn thành tốt Khóa luận Trong thời gian thực đề tài tốt nghiệp, cố gắng nhiều, nhiên thời gian có hạn kiến thức hạn chế nên khơng thể tránh đƣợc sai sót Rất mong nhận đƣợc ý kiến đóng Thầy Cơ để Khóa luận hồn thiện Xin chân thành c ảm ơn! TP Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2015 Sinh viên Nguyễn Thụy Thanh Trúc Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC MỤC LỤC .i DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH ẢNH .vi MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tình hình ảnh hƣởng dịch bệnh EMS giới Việt Nam .4 1.2 Vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus 1.2.1 Phân loại 1.2.2 Đặc điểm hình thái 1.2.3 Đặc điểm sinh hóa 1.2.4 Các yếu tố ảnh hƣởng đến phát triển V parahaemolyticus 1.2.5 Vi khuẩn V parahaemolyticus gây bệnh EMS 1.3 Một số chất diệt khuẩn sử dụng nuôi trồng thủy sản (Nguồn: Fishviet.net) 14 1.3.1 Vôi (CaCO3, CaO) 14 1.3.2 Chlorine 14 1.3.3 Formaldehyde (Formalin, Formol) .15 1.3.4 Benzalkonium Chloride (BKC) 15 1.3.5 Iodine (Povidone – Iodine, Polyvinyl Pyrrolidone Iodide) .15 1.3.6 Thuốc tím (Kali Permanganate – KMnO4) .15 i Đồ án tốt nghiệp 1.4 Sản phẩm diệt khuẩn GPC8 T M 16 1.4.1 Thành phần 16 1.4.2 Ứng dụng .22 1.5 Tôm thẻ chân trắng .22 1.5.1 Phân loại (Nguồn: Boone, 1931) 22 1.5.2 Đặc điểm 23 1.5.3 Các bệnh thƣờng gặp tôm thẻ chân trắng (Nguồn: UV Vietnam)… 23 CHƢƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 Địa điểm thời gian nghiên cứu .30 2.2 Vật liệu nghiên cứu 30 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 33 2.3.1 Khảo sát khả diệt khuẩn sản phẩm GPC8 điều kiện in vitro… 33 2.3.2 Khảo sát khả diệt khuẩn sản phẩm GPC8 điều kiện in vivo… 35 2.3.3 Phƣơng pháp xử lý số liệu 40 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 41 3.1 Kết 41 3.1.1 Kết khảo sát khả diệt khuẩn sản phẩm GPC8 điều kiện in vitro 41 3.1.2 Kết khảo sát khả diệt khuẩn sản phẩm GPC8 điều kiện in vivo .44 3.2 Thảo luận .52 ii Đồ án tốt nghiệp CHƢƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 53 4.1 Kết luận 53 4.2 Kiến nghị 53 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO .54 iii Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT AHPNS: Acute hepatopancreatic nerosis syndrome EMS: Early mortality syndrome ĐBSCL: Đồng sông Cửu Long IMNV: Infectious myonecrosis virus IHHNV: Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus GAV: Gill-associated virus NT: Nghiệm thức NTĐC: Nghiệm thức đối chứng TCBS: Thiosunphate Citrate Bile Salt Sucrose agar TSA: Tryptic Soya Agar TSB: Tryptic Soya Broth TSV: Taura syndrome virus V parahaemolyticus: Vibrio parahaemolyticus Viện NCNTTS II: Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản II WSSV: White spot syndrome virus YHV: Yellow head virus iv Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Khoảng tối ƣu khoảng chịu đựng V parahaemolyticus Bảng 1.2 Thành phần hóa học sản phẩm diệt khuẩn GPC8 T M 16 Bảng 1.3 Các sản phẩm thƣơng mại có thành phần Glutaraldehyde đƣợc phép lƣu hành thị trƣờng nuôi trồng thủy sản (theo Quyết định số 15/2006/QĐ-BTS ngày 8/9/2006 Bộ trƣởng Bộ Thủy sản) 19 Bảng 2.1 Bố trí thí nghiệm ni chung 34 Bảng 2.2 Bố trí thí nghiệm LC50 36 Bảng 2.3 Bố trí thí nghiệm LD50 38 Bảng 2.4 Bố trí thí nghiệm diệt khuẩn điều kiện in vivo 39 Bảng 3.1 Đƣờng kính vòng diệt khuẩn 42 Bảng 3.2 Tỷ lệ tơm chết (%) tích lũy theo thời gian thí nghiệm LC50 .45 Bảng 3.3 Tỷ lệ tơm chết (%) tích lũy theo thời gian thí nghiệm LD50 .48 v Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 So sánh sản lƣợng tôm nƣớc năm 2013 so với 2012 Hình 1.2 Hình thái vi khuẩn V parahaemolyticus Hình 1.3 Nhuộm Gram vi khuẩn V parahaemolyticus Hình 1.4 Khuẩn lạc V parahaemolyticus môi trƣờng chọn lọc TCBS .8 Hình 1.5 Cơ chế gây bệnh EMS 10 Hình 1.6 Tôm chết bệnh EMS 11 Hình 1.7 Gan tơm sƣng to, có màu bất thƣờng 12 Hình 1.8 Gan tụy tơm bị bệnh EMS, đƣờng ruột đứt khúc đục 12 Hình 1.9 Tơm bị nhiễm bệnh EMS tơm bình thƣờng 13 Hình 1.10 Một số tơm sau vƣợt qua bệnh EMS (gọi tơm tre – đốt thể nhƣ đốt tre) tôm sau chết 13 Hình 1.11 Chất diệt khuẩn GPC8 T M 16 Hình 1.12 Tôm thẻ chân trắng 23 Hình 1.13 Tơm bị bệnh hoại tử IMNV 24 Hình 1.14 Tơm bị bệnh Taura 25 Hình 1.15 Tơm bị bệnh đốm trắng 26 Hình 1.16 Tơm bị bệnh đầu vàng YHV 27 Hình 1.17 Tôm thẻ chân trắng bệnh IHHNV với dấu hiệu nhƣ chủy cong quẹo, phần dị hình, biến dạng .28 Hình 2.1 Quy trình nghiên cứu 33 Hình 2.2 Thí nghiệm ni chung .35 Hình 2.3 Hệ thống thí nghiệm LC50 .37 vi Đồ án tốt nghiệp Hình 2.4 Hệ thống thí nghiệm LD50 38 Hình 2.5 Hệ thống bể kính thí nghiệm 40 Hình 3.1 Kết thí nghiệm giếng khuếch tán .41 Hình 3.2 Kết kiểm tra mật độ vi khuẩn mơi trƣờng TCBS 42 Hình 3.3 Ảnh hƣởng nồng độ chất diệt khuẩn GPC8 đến mật độ Vibrio parahaemolyticus .43 Hình 3.4 Đồ thị tỷ lệ tôm chết (%) theo thời gian thí nghiệm .44 Hình 3.5 So sánh tôm khỏe mạnh (A) tôm nhiễm bệnh (B) 46 Hình 3.6 Kiểm tra Vibrio parahaemolyticus tôm bệnh môi trƣờng Compact Dry PI-VP 47 Hình 3.7 Tỷ lệ tơm chết (%) theo ngày thí nghiệm LD5 .47 Hình 3.8 Mật độ vi khuẩn thí nghiệm diệt khuẩn điều kiện in vivo .49 Hình 3.9 Tỷ lệ tơm sống (%) thí nghiệm diệt khuẩn điều kiện in vivo .51 vii Đồ án tốt nghiệp CHƢƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận - Kết thí nghiệm giếng khuếch tán cho thấy sản phẩm chất diệt khuẩn GPC8 T M có khả diệt khuẩn nồng độ 10000 ppm với đƣờng kính vòng diệt khuẩn 16.66 mm - Kết thí nghiệm ni chung cho thấy sản phẩm chất diệt khuẩn GPC8 T M diệt tốt vi khuẩn nồng độ 5; 10; 20 ppm - Nồng độ chất diệt khuẩn GPC8 T M gây chết 50% tôm (LC50) đƣợc xác định 22,0 ppm - Mật độ vi khuẩn V parahaemolyticus gây chết 50% tôm (LD50) đƣợc xác định 1x10 cfu/ml - Trong điều kiện in vivo chất diệt khuẩn GPC8 T M có khả diệt khuẩn tốt khoảng thời gian nồng độ 10 20 ppm Sau chất diệt khuẩn bị suy giảm khả diệt khuẩn khiến vi khuẩn phát triển trở lại - Nồng độ thích hợp GPC8 áp dụng vào thực tế (dựa theo khả diệt khuẩn tỷ lệ sống tơm) khuyến cáo cho nhà sản xuất 10 ppm tiếp tục bổ sung chất diệt khuẩn lần thứ hai cách lần thứ 4.2 Kiến nghị - Tiếp tục thử nghiệm diệt khuẩn ngồi ao ni giai đoạn cải tạo ao ni thƣơng phẩm nhằm kiểm soát dịch bệnh 53 Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Đặng Thị Hoàng Oanh Nguyễn Thanh Phƣơng (2012) Các bệnh nguy hiểm tôm nuôi Đồng Sơng Cửu Long Tạp chí khoa học 22c: 106 - 118 Lê Hồng Phƣớc, Lê Hữu Tài Nguyễn Văn Hảo (2012) Diễn biến hội chứng hoại tử gan tụy ao nuôi tôm thâm canh huyện Trần Đề, Sóc Trăng Lê Hữu Tài, Nguyễn Văn Hảo Lê Hồng Phƣớc, 2012 Một số kết chẩn đốn mơ bệnh học phân tích siêu cấu trúc hội chứng hoại tử gan tụy tôm nuôi Đồng sông Cửu Long Nguyễn Văn Duy, Nguyễn Thị Cẩm Ly, 2012 Phân lập xác định gen độc tố Vibrio Parahaemolyticus hải sản tươi sống Nha Trang Tạp chí khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Nguyễn Trọng Nghĩa, Âu Thị Kim Ngọc, Nguyễn Thị Minh Trang, Đặng Thị Hoàng Oanh, Trƣơng Quốc Phú Phạm Anh Tuấn (2014) Phân lập xác định khả gây hoại tử gan tụy vi khuẩn Vibrio Parahaemolyticus Đồ án tốt nghiệp Thủy sản, Đại học Cần Thơ Tài liệu tiếng Anh Daniel NA, MacKinnon L, Bishop R, Altekruse S, Ray B, Hammond Rm, Thompson S, Bean NH, Griffin PM, Slutsker L (2000) Vibrio Parahaemolyticus infections in the United States, 1973 - 1998 J infect Dis, 181(5):1661 – Flegel, T.W (2012) Historic emergence, impact and current status of shrimp pathogens in Asia Journal of Invertebrate Pathology 110:166 – 173 54 Đồ án tốt nghiệp Lightner, D.V., (1996) Viral disease In A Handbook of Pathology and Diagnostic Procedures for Diseasea of Penaeid Shrimp ed McVey, A pp - 72 Baton Rouge, LA: World Aquaculture Society Lightner, D.V., Redman, R M., Pantoja, C R., Nobel, B L., Loc, T (2012) Early mortality syndrome affects shrimp in Asia Global aquaculture advocate January/Febuary 2014:40 Mooney A (2012) An emerging shrimp disease in Vietnam, microsporidiosis or liver disease? Available at: http://aquatichealth.net/issues/38607 (accessed 24 Feb 2012) Reed M, Muench H (1938) A simple method for estimating fifty percent endpoints Am J Hyg 27:493 – 497 Tài liệu web Australian Govement Hygiene Protocols for the Prevention and Control of Diseases,http://www.environment.gov.au/system/files/pages/8c8789d3-aa604063-bfb5-4fdabfe186eb/files/disinfectants.pdf Aquanetviet Bệnh phổ biến tôm nuôi: nguyên nhân, chẩn đốn phòng trị bệnh, http://aquanetviet.org/post/2144907 Bách khoa - Hóa chất ứng dụng, Một số hóa chất sử dụng nuôi trồng Thủy sản, http://news.bachkhoa.net.vn/ Bộ Nông nghiệp Phát triển Nơng thơn Tình hình sản xuất thương mại tơm giới, 9/2013, http://www.mard.gov.vn/pages/news_detail.aspx?NewsId=31596 Hình So sánh sản lƣợng tôm nƣớc năm 2013 so với 2012, http://thuysanvietnam.com.vn/hau-dich-benh-ems-tom-thai-lan-no-luc-phuchoi-article-8844.tsvn 55 Đồ án tốt nghiệp Petcity Thuốc sát trùng GPC8, http://www.petcity.vn/thuoc-sat-trung- gpc8/p753.html Thuốc Thú y - Thủy sản Vemedim Hội chứng chết sớm tôm, http://www.vemedim.com.vn/benhvadieutri.php?id=6&b=92 Thuốc Thú y - thuốc Thủy sản Mekovet Bệnh chết sớm tôm (EMS/AHNBS), http://mekovet.com.vn/vi/dieu-tri-benh.nd11/benh-chet-som-tren-tomemsahpns.i259.html Thạc sĩ Huỳnh Trƣờng Giang, Khoa Thủy sản - Đại học Cần Thơ Glutaraldehyde chất sát trùng phổ rộng, http://uvvietnam.com.vn/NewsDetail.aspx?newsId=1096 Trung tâm nghiên cứu Khoa học Nông vận Cách sử dụng thuốc sát trùng chăn nuôi, http://khoahocchonhanong.com.vn/CSDLKHCN/modules.php?name=News &op=viewst&sid=1167 Tôm thẻ chân trắng, http://tepbac.com/species/full/42/Tom-the-chan-trang.htm 56 Đồ án tốt nghiệp PHỤ LỤC PHỤ LỤC A: THÀNH PHẦN MÔI TRƢỜNG DINH DƢỠNG SỬ DỤNG TRONG CÁC THÍ NGHIỆM A1 Thành phần môi trƣờng Tryptone Soya Agar Tryptone Soya Agar (g/l) Tryptone 15,0 Papaic digest of soybean meal 5,0 Sodium chloride 15,0 agar 15,0 pH (at 25 oC) = 7,3 ± 0,2 A2 Thành phần môi trƣờng Tryptone Soya Broth Tryptone Soya Agar (g/l) Tryptone 15,0 Papaic digest of soybean meal 5,0 Sodium chloride 15,0 pH (at 25 oC) = 7,3 ± 0,2 Đồ án tốt nghiệp A3 Thành phần môi trƣờng Thiosunphate Citrate Bile Salt Sucrose agar Thiosunphate Citrate Bile Salt Sucrose agar (g/l) Yeast extract 5,0 Proteose Peptone 10,0 Sodium thiosulfate 10,0 Sodium citrate 10,0 Ox gall 5,0 Sodium cholate 3,0 Sucrose 20,0 Sodium chloride 10,0 Ferric citrate 1,0 Bromothymol blue 0,04 Thymol blue 0,04 Agar 15,0 pH (at 25 oC) = 8.8 ± 0,2 Đồ án tốt nghiệp PHỤ LỤC B: KẾT QUẢ KHẢO SÁT KHẢ NĂNG DIỆT VI KHUẨN VIBRIO PARAHAEMOLYTICUS CỦA SẢN PHẨM GPC8 TM B.1 Kết đƣờng kính vòng diệt khuẩn thí nghiệm giếng khuếch tán Nồng độ GPC8 Đƣờng kính vòng diệt khuẩn (mm) (ppm) 10000 Trung bình Vòng Vòng Vòng 18 14 18 16,66 ± 2,31 B2 Kết kiểm tra mật độ vi khuẩn V parahaemolyticus mơi trƣờng TCBS thí nghiệm ni chung Nồng độ chất diệt khuẩn Mật độ tế bào (cfu/ml) Log (mật độ tế bào) Bình Bình Bình Bình Bình Bình 6,32.108 1,28.108 1,24.108 8,80 8,11 8,09 0.25 2,60.107 1,42.108 7,20.107 7,41 8,15 7,86 0.5 2,20.107 3,20.107 3,60.107 7,34 7,51 7,56 1,10.107 1,84.107 4,20.106 7,04 7,26 6,62 2,00.103 0,00 3,30 0,00 10 0 0,00 0,00 0,00 20 0 0,00 0,00 0,00 GPC8 (ppm) Đồ án tốt nghiệp B.4 Số tơm chết thí nghiệm LD50 Mật độ vi khuẩn (cfu/ml) Ngày thí nghiệm Tổng tôm chết Tỷ lệ tôm chết (%) 5.10 25 0 30 100 1.10 7 21 70 6.10 6 14 46.67 2.10 2 11 36.67 B.5 Kết mật độ vi khuẩn thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo vào lúc Nồng độ chất diệt khuẩn Mật độ tế bào (cfu/ml) Log (mật độ tế bào) Bình Bình Bình Bình Bình Bình 8,0.102 2,6.104 8,0.102 2,90 4,41 2,90 0.5 8,0.102 3,22.104 1,0.103 2,90 4.51 3,00 1,76.104 4,8.103 2,2.103 4,25 3,68 3,34 3,80.103 1,00.104 5,6.103 3,58 4,00 3,75 10 1,04.105 5,4.103 2,76.104 5,02 3,73 4,44 20 1,8.103 4,0.103 1,5.104 3,26 3,60 4,18 GPC8 (ppm) Đồ án tốt nghiệp B.6 Kết mật độ vi khuẩn thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo vào lúc Nồng độ chất diệt khuẩn Mật độ tế bào (cfu/ml) Log (mật độ tế bào) Bình Bình Bình Bình Bình Bình 3,4.103 1,98.104 5,0.103 3,53 4,30 3,70 0.5 8, 8.103 5,22.104 1,4.103 3,94 4.72 3,15 1,72.104 3,58.104 3,0.103 4,24 4,55 3,48 1,8.103 1,16.104 6,6.103 3,26 4,06 3,82 10 6,0.101 2,0.101 1,78 1,30 20 0 0 0 GPC8 (ppm) B.7 Kết mật độ vi khuẩn thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo vào lúc 24 Nồng độ chất diệt khuẩn Mật độ tế bào (cfu/ml) Log (mật độ tế bào) Bình Bình Bình Bình Bình Bình 5,8.103 6,0.103 4,4.103 3,76 3,78 3,64 0.5 2,72.105 2,8.103 4,2.104 5,43 3.45 4,62 1,66.105 4,12.105 2,2.104 5,22 5,61 4,34 2,02.105 1,12.105 1,0.106 5,31 5,05 6,00 10 5,4.105 8,0.103 4,0.103 5,73 3,90 3,60 20 8,0.103 4,0.103 3,90 3,60 GPC8 (ppm) Đồ án tốt nghiệp B.8 Kết số lƣợng tơm sống thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo thời điểm Nồng độ chất diệt khuẩn Số tơm sống Bình Bình Bình 15 15 15 0.5 15 15 15 15 15 15 15 15 15 10 15 15 15 20 15 15 15 GPC8 (ppm) B.9 Kết số lƣợng tơm sống thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo thời điểm Nồng độ chất diệt khuẩn Số tơm sống Bình Bình Bình 15 15 15 0.5 15 15 15 15 15 15 15 15 15 10 15 15 15 20 15 14 15 GPC8 (ppm) Đồ án tốt nghiệp B.10 Kết số lƣợng tơm sống thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo thời điểm 24 Nồng độ chất diệt khuẩn Số tơm sống Bình Bình Bình 14 14 14 0.5 14 14 14 14 14 13 14 14 14 10 14 15 15 20 15 14 15 GPC8 (ppm) Đồ án tốt nghiệp PHỤ LỤC C: KẾT QUẢ XỬ LÝ SỐ LIỆU THỐNG KÊ C.1 Kết kiểm tra mật độ vi khuẩn V parahaemolyticus môi trƣờng TCBS thí nghiệm ni chung ANOVA Table for log by Nongdo Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value 80.01 0.0000 Between groups 277.866 46.311 Within groups 8.103 14 0.578786 Total (Corr.) 285.969 20 Multiple Range Tests for log by Nongdo Method: 95.0 percent LSD Nongdo Count Mean Homogeneous Groups 20 0.0 X 10 0.0 X 1.1 X 6.97333 X 0.5 7.47 XX 0.25 7.80667 XX 8.33333 X Đồ án tốt nghiệp C2 Kết mật độ vi khuẩn thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo vào lúc ANOVA Table for H0 by Nong Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1.86709 0.373419 0.91 0,5065 Within groups 4.92727 12 0.410606 Total (Corr.) 6.79436 17 Multiple Range Tests for H0 by Nong Do Method: 95.0 percent LSD Nong Do Count Mean Homogeneous Groups 3.40333 X 0.5 3.47 X 20 3.68 X 3.75667 X 3.77667 X 10 4.39667 X 10 Đồ án tốt nghiệp C3 Kết mật độ vi khuẩn thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo vào lúc ANOVA Table for H6 by Nong Do Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 46.7957 9.35914 24.77 0,0000 Within groups 4.53367 12 0.377806 Total (Corr.) 51.3294 17 Multiple Range Tests for H6 by Nong Do Method: 95.0 percent LSD Nong Do Count Mean Homogeneous Groups 20 X 10 1.02667 X 3.71333 X 3.71667 X 0.5 3.93667 X 4.09 X 11 Đồ án tốt nghiệp C4 Kết mật độ vi khuẩn thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo vào lúc 24 ANOVA Table for H24 by Nong Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 17.5519 3.51038 2.71 0,0728 Within groups 15.5372 12 1.29477 Total (Corr.) 33.0891 17 Multiple Range Tests for H24 by Nong Method: 95.0 percent LSD Nong Do Count Mean Homogeneous Groups 20 2.5 X 3.47333 XX 10 4.41 XX 0.5 4.5 XX 5.05667 X 5.45333 X 12 ... thích hợp để diệt vi khuẩn V parqhaemolyticus gây bệnh tôm thẻ Nội dung nghiên cứu  Khảo sát khả diệt vi khuẩn V parahaemolyticus gây bệnh tôm thẻ chân trắng sản phẩm GPC8 điều kiện in vitro Đồ... thực đề tài Khảo sát khả diệt khuẩn sản phẩm GPC8 TM vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus gây bệnh tơm thẻ chân trắng Mục đích nghiên cứu Thí nghiệm nhằm mục đích tìm nồng độ sản phẩm GPC8 T M... nghiên cứu 33 2.3.1 Khảo sát khả diệt khuẩn sản phẩm GPC8 điều kiện in vitro… 33 2.3.2 Khảo sát khả diệt khuẩn sản phẩm GPC8 điều kiện in vivo… 35 2.3.3