Định lượng đồng thời paracetamol, ibuprofen, cafein trong thuốc Cadiltamol F, Bidiipalvic bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao và quang phổ hấp thụ phân tử (Luận văn thạc sĩ)

Định lượng đồng thời paracetamol, ibuprofen, cafein trong thuốc Cadiltamol F, Bidiipalvic bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao và quang phổ hấp thụ phân tử (Luận văn thạc sĩ)Định lượng đồng thời paracetamol, ibuprofen, cafein trong thuốc Cadiltamol F, Bidiipalvic bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao và quang phổ hấp thụ phân tử (Luận văn thạc sĩ)Định lượng đồng thời paracetamol, ibuprofen, cafein trong thuốc Cadiltamol F, Bidiipalvic bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao và quang phổ hấp thụ phân tử (Luận văn thạc sĩ)Định lượng đồng thời paracetamol, ibuprofen, cafein trong thuốc Cadiltamol F, Bidiipalvic bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao và quang phổ hấp thụ phân tử (Luận văn thạc sĩ)Định lượng đồng thời paracetamol, ibuprofen, cafein trong thuốc Cadiltamol F, Bidiipalvic bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao và quang phổ hấp thụ phân tử (Luận văn thạc sĩ)Định lượng đồng thời paracetamol, ibuprofen, cafein trong thuốc Cadiltamol F, Bidiipalvic bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao và quang phổ hấp thụ phân tử (Luận văn thạc sĩ)Định lượng đồng thời paracetamol, ibuprofen, cafein trong thuốc Cadiltamol F, Bidiipalvic bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao và quang phổ hấp thụ phân tử (Luận văn thạc sĩ)Định lượng đồng thời paracetamol, ibuprofen, cafein trong thuốc Cadiltamol F, Bidiipalvic bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao và quang phổ hấp thụ phân tử (Luận văn thạc sĩ)

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN THỊ MAI DUNG ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜI PARACETAMOL, IBUPROFEN, CAFEIN TRONG THUỐC CADILTAMOL F, BIDI-IPALVIC BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÍ LỎNG HIỆU NĂNG CAO VÀ QUANG PHỔ HẤP THỤ PHÂN TỬ LUẬN VĂN THẠC SĨ HỐ HỌC Ngành: Hóa phân tích Mã số: 44 01 18 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Mai Xuân Trường Thái Nguyên, năm 2018 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng, số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa sử dụng bất một công trình Tôi xin cam đoan rằng, giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc T Thái Nguyên, tháng năm 2018 Tác giả luận văn Nguyễn Thị Mai Dung Xác nhận Xác nhận Trưởng khoa chuyên môn giáo viên hướng dẫn PGS.TS Nguyễn Thị Hiền Lan PGS.TS Mai Xuân Trường i LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập thực luận văn, tác giả nhận nhiều quan tâm, động viên giúp đỡ thầy giáo, cô giáo, bạn bè gia đình Tác giả bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: Khoa Hóa học, Phòng Đào tạo - Trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên, thầy cô giáo tham gia giảng dạy cung cấp kiến thức giúp suốt trình học tập nghiên cứu Đặc biệt tác giả xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo PGS.TS Mai Xuân Trường người tận tình hướng dẫn bảo giúp đỡ suốt trình nghiên cứu, thực hồn thành luận văn Cuối tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến gia đình, bạn bè người bên tôi, động viên khuyến khích tơi q trình thực đề tài nghiên cứu mình Với thời gian nghiên cứu có hạn, khối lượng công việc lớn, khả nghiên cứu còn hạn chế, chắn luận văn tránh khỏi thiếu sót Tác giả rất mong nhận ý kiến đóng góp từ thầy giáo, cô giáo bạn đọc Xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, tháng 04 năm 2018 Tác giả Nguyễn Thị Mai Dung ii MỤC LỤC Trang Trang bìa phụ Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục từ viết tắt iv Danh mục bảng biểu v Danh mục hình vi MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu ba chất paracetamol, ibuprofen, cafein 1.1.1 Paracetamol 1.1.2 Ibuprofen 1.1.3 Cafein 1.1.4 Các loại dược phẩm chứa paracetamol, ibuprofen cafein 1.2 Giới thiệu phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 1.2.1 Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 1.2.2 Các định luật sở hấp thụ ánh sáng[10,14,17] 1.2.3 Những nguyên nhân làm cho hấp thụ ánh sáng dung dịch không tuân theo định luật Bughe-Lămbe-Bia[10,14] 10 1.2.4 Phương pháp lọc Kalman 11 1.3 Tổng quan phương pháp xác định đồng thời thành phần theo phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 18 1.4 Giới thiệu phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 22 1.4.1 Nguyên tắc phương pháp HPLC 22 1.4.2 Các đại lượng đặc trưng trình sắc ký 24 1.4.3 Hệ thống máy HPLC 26 iii 1.5 Tổng quan phương pháp xác định đồng thời ba thành phần theo phương pháp HPLC 28 1.6 Các đại lượng đặc trưng để xử lý kết phân tích 34 1.6.1 Đánh giá độ tin cậy quy trình phân tích 34 1.6.2 Các phương pháp để xử lý kết phân tích 36 Chương THỰC NGHIỆM 38 2.1 Phương pháp nghiên cứu 38 2.1.1 Phương pháp nghiên cứu lý thuyết 38 2.1.2 Phương pháp thực nghiệm 38 2.2 Thiết bị, dụng cụ hóa chất 38 2.2.1 Thiết bị 38 2.2.2 Dụng cụ 39 2.2.3 Hóa chất 39 2.3 Chuẩn bị dung môi để hòa tan mẫu 40 2.3.1.Phương pháp HPLC 40 2.3.2 Phương pháp UV-Vis 40 2.4 Cách tiến hành 40 2.4.1 Xác định đồng thời ba chất theo phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 40 2.4.2 Xác định đồng thời ba chất theo phương pháp HPLC 45 2.4.3 Đánh giá phương pháp định lượng 46 2.4.4 Xác định PRC, IBU CFI thuốc Bidi-ipalvic thuốc CaditamolF 48 2.4.5 Khảo sát độ phép xác định PRC, IBU CFI theo phương pháp thêm chuẩn 49 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 51 3.1 Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 51 3.1.1 Khảo sát phổ hấp thụ phân tử PRC, IBU CFI 51 iv 3.1.2 Khảo sát khoảng tuyến tính tuân theo định luật Bughe – Lambe – Bia PRC, IBU CFI Xác định số LOD LOQ 52 3.1.3 Khảo sát đánh giá độ tin cậy phương pháp nghiên cứu mẫu tự pha 58 3.1.4 Xác định hàm lượng PRC, IBU CFI thuốc BIDI-IPALVIC CADITAMOL-F 63 3.1.5 Khảo sát độ phép xác định PRC, IBU CFI theo phương pháp thêm chuẩn 65 3.2 Phương pháp HPLC 69 3.2.1 Xây dựng điều kiện tối ưu để xác định đồng thời paracetamol, ibuprofen cafein 69 3.2.2 Đánh giá phương pháp định lượng 72 3.2.3 Xác định PRC, IBU CFI thuốc Bidi-ipalvic thuốc CaditamolF 76 3.2.4 Khảo sát độ phép xác định PRC, IBU CFI theo phương pháp thêm chuẩn 78 KẾT LUẬN 81 TÀI LIỆU THAM KHẢO 83 v DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Tiếng việt Tiếng Anh Viết tắt Axetonitril Acetonitrile ACN Cafein Caffeine CFI Độ lệch chuẩn Standard Deviation S hay SD Giới hạn định lượng Limit Of Quantity LOQ Ibuprofen Ibuprofen IBU Mã giải phẫu – điều trị - hóa Anatomical therapeutic học chemical code Paraxetamol Paracetamol Phương pháp sắc ký lỏng hiệu High Performance Liquid cao Chromatography Sai số tương đối Relative Error iv ATC PRC HPLC RE DANH MỤC BẢNG BIỂU Trang Bảng 2.1 Danh mục chất chuẩn viện kiểm nghiệm thuốc 39 Bảng 2.2 Danh mục dung môi tinh khiết dùng cho HPLC 39 Bảng 3.1 Độ hấp thụ quang PRC giá trị nồng độ 53 Bảng 3.2 Kết xác định LOD LOQ PRC 54 Bảng 3.3 Độ hấp thụ quang CFI giá trị nồng độ 55 Bảng 3.4 Kết tính LOD LOQ CFI 56 Bảng 3.5 Độ hấp thụ quang IBU giá trị nồng độ 57 Bảng 3.6 Kết tính LOD LOQ IBU 58 Bảng 3.7 Pha chế dung dịch hỗn hợp PRC CFI 58 Bảng 3.8 Kết tính nồng đợ, sai số PRC, CFI 59 Bảng 3.9 Pha chế dung dịch hỗn hợp PRC IBU 60 Bảng 3.10 Kết tính nồng độ, sai số PRC IBU hỗn hợp 61 Bảng 3.11 Pha chế dung dịch hỗn hợp CFI IBU 61 Bảng 3.12 Kết tính nồng đợ, sai số CFI IBU hỗn hợp 62 Bảng 3.13 Pha dung dịch chuẩn PRC, IBU, CFI hỗn hợp 62 Bảng 3.14 Kết tính nồng độ, sai số PRC, IBU CFI 63 Bảng 3.15 Kết tính nồng độ, sai số PRC,CFI,IBU mẫu thuốc BIDI_IPALVIC 63 Bảng 3.16 Kết tính nồng đợ, sai số PRC,CFI,IBU mẫu thuốc CADITAMOL – F 64 Bảng 3.17 Thành phần dung dịch chuẩn PRC, IBU CFI thêm vào dung dịch mẫu thuốc Bidi-ipalvic 65 Bảng 3.18 Kết xác định độ thu hồi PRC, IBU CFI mẫu thuốc Bidi-ipalvic 66 Bảng 3.19 Thành phần dung dịch chuẩn PRC, IBU CFI thêm vào dung dịch mẫu thuốc Caditamol-F 67 Bảng 3.20 Kết xác định độ thu hồi PRC, IBU CFI mẫu thuốc Caditamol-F 68 v Bảng 3.21 Giá trị đại lượng đặc trưng 72 Bảng 3.22 Kết khảo sát thời gian lưu 72 Bảng 3.23 Kết khảo sát diện tích pic 72 Bảng 3.24 Mối tương quan nồng độ diện tích pic PRC, IBU CFI 73 Bảng 3.25 Kết khảo sát độ lặp lại 75 Bảng 3.26 Kết phân tích thuốc Bidi-ipalvic 76 Bảng 3.27 Kết phân tích thuốc Caditamol F 77 Bảng 3.28 Kết khảo sát độ 78 Bảng 3.29 Kết khảo sát độ 80 vi DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo paracetamol Hình 1.2 Cơng thức cấu tạo ibupfofen Hình 1.5: Mơ hình hoạt đợng bợ lọc Kalman 12 Hình 3.1 Phổ hấp thụ dung dịch chuẩn PRC(8µg/ml), IBU(10µg/ml) CFI(8µg/ml) dung dịch HCl 0,1 M 51 Hình 3.2 Phổ hấp thụ quang PRC nồng độ 0,2 40g/mL 52 Hình 3.3 Đường hồi quy tuyến tính biểu diễn phụ tḥc đợ hấp thụ quang A vào nồng độ PRC 53 Hình 3.4 Phổ hấp thụ quang CFI nồng độ 0,2 40,0g/mL 54 Hình 3.5 Đường hồi quy tuyến tính biểu diễn phụ thuộc độ hấp thụ quang A vào nồng độ CFI 55 Hình 3.6 Phổ hấp thụ quang IBU nồng độ 1,0  40,0g/mL 56 Hình 3.7 Đường hồi quy tuyến tính biểu diễn phụ thuộc độ hấp thụ quang A vào nồng độ IBU 57 Hình 3.8 Sắc ký đồ PRC 300 µg/mL bước sóng λ = 224 nm 70 Hình 3.9 Sắc ký đồ CFI 200 µg/mL bước sóng λ = 224 nm 70 Hình 3.10 Sắc ký đồ IBU 100 µg/mL bước sóng λ = 224 nm 70 Hình 3.11 Sắc ký đồ PRC 300 g/mL (1), CFI 200 g/mL (2) IBU 100 g/mL (3) 71 Hình 3.12 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc tuyến tính nồng đợ diện tích pic PRC 74 Hình 3.13 Đồ thị biểu diễn phụ tḥc tuyến tính nồng đợ diện tích pic IBU 74 Hình 3.14 Đồ thị biểu diễn phụ tḥc tuyến tính nồng đợ diện tích pic CFI 74 vi Kết sắc ký đồ hình 3.11 cho thấy pic tách hoàn toàn, pic gọn cân đối, thời gian lưu chất hợp lý với thời gian lưu PRC 4,41 phút; CFI 5,12 phút IBU 6,58 phút 3.2.2 Đánh giá phương pháp định lượng 3.2.2.1 Kiểm tra tính thích hợp hệ thống Bảng 3.21 Giá trị đại lượng đặc trưng Hoá chất Paracetamol Số đĩa lý thuyết ( N ) 1280 Cafein 1024 Ibuprofen 2132 Độ phân giải ( RS ) 1,56 3,31 Bảng 3.22 Kết khảo sát thời gian lưu PRC Lần bơm 4,415 4,415 CFI Thời Thời Thời gian Số liệu thống Số liệu thống Số liệu thống gian lưu gian lưu kê kê kê lưu (phút) (phút) (phút) IBU 6,583 = 4,415 S = 0,0010 4,416 %RSD=0,023 4,414 X 5,122 = 6,584 5,123 S = 0,0007 5,120 %RSD=0,011 5,122 X 6,584 6,584 6,584 = 5,122 S = 0,0016 %RSD=0,031 X Bảng 3.23 Kết khảo sát diện tích pic Lần bơm Paracetamol 75941875 75941881 75941869 75941877 X = 759418976; S = 6,595; %RSD = 8,3.10-5 34401076 Ibuprofen X 58234839 Cafein X 34401067 34401079 34401082 = 34401076; S = 7,937; %RSD = 2,3.10-5 58234851 58234842 58234845 = 58234844; S = 6,285; %RSD = 1,1.10-5 72 Kết bảng 3.21, 3.22 3.23 cho thấy: thông số hệ thống số đĩa lý thuyết độ phân giải nằm giới hạn cho phép Sai số tương đối diện tích pic thời gian lưu tìm thấy phù hợp Vì hệ thống sắc ký đảm bảo tính thích hợp với chất phân tích 3.2.2.2 Khảo sát độ tuyến tính phương pháp Kết khảo sát đợ tuyến tính chất trình bày bảng 3.24 Bảng 3.24 Mối tương quan nồng độ diện tích pic PRC, IBU CFI PRC IBU CFI Nồng độ Diện tích pic Nồng đợ Diện tích pic Nồng đợ Diện tích pic (µg/mL) (mAuxphút) (µg/mL) (mAuxphút) (µg/mL) (mAuxphút) 100,00 38847619 100,00 34401067 20,00 6570458 200,00 56952774 200,00 55797883 40,00 11593983 300,00 75941875 300,00 83367272 60,00 17543344 400,00 94787339 400,00 110547532 80,00 24219521 500,00 112654863 500,00 136345484 100,00 30403275 600,00 131766398 600,00 158797886 200,00 58234868 y = 184299x+2x10^7 y=290271x + 7x10^6 y=290271x + 671655 R2=0,9998 R2=0,9987 R2=0,9984 Từ kết bảng 3.24 Biểu diễn phụ tḥc diện tích pic PRC, IBU, CFI theo nồng độ Kết thể hình 3.12; 3.13 3.14 73 mAuxph 140000000 120000000 100000000 80000000 60000000 40000000 20000000 µg/mL 0 100 200 300 400 500 600 700 Hình 3.12 Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tính nồng độ diện tích pic PRC 180000000 y = 254516x + 7E+06 R² = 0.9987 160000000 140000000 120000000 100000000 80000000 60000000 40000000 20000000 0 100 200 300 400 500 600 700 Hình 3.13 Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tính nồng độ diện tích pic IBU 70000000 y = 289779x + 612638 R² = 0.9991 60000000 50000000 40000000 30000000 20000000 10000000 0 50 100 150 200 250 Hình 3.14 Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tính nồng độ diện tích pic CFI 74 3.2.2.3 Khảo sát độ lặp lại phương pháp sắc ký Bảng 3.25 Kết khảo sát độ lặp lại PRC Mẫu IBU CFI Diện tích Hàm Diện tích Hàm Diện tích Hàm pic lượng pic lượng pic lượng (mAuxphút) (µg/mL) (mAuxphút) (µg/mL) (mAuxphút) (µg/mL) 75941698 297,60 34401067 100,01 11593861 198,74 75941873 300,01 34401003 99,92 11593983 200,01 75941720 298,55 34401102 100,16 11593915 199,28 75941916 300,68 34401089 100,05 11593991 200,13 Số X liệu thống kê = 299,21 X = 100,04 X = 199,54 S = 7,71 S = 0,112 S = 0,88 %RSD = 0,57 %RSD = 0,112 %RSD = 0,441 Nhận xét: Từ kết bảng 3.25 cho thấy độ lệch chuẩn tương đối %RSD chất phân tích nhỏ 2% (PRC: 0,57%; IBU:0,112%; CFI: 0,441%) sai số tương đối nhỏ Như vậy, phương pháp sắc ký định lượng đồng thời chất có độ lặp lại cao 75 3.2.3 Xác định PRC, IBU CFI thuốc Bidi-ipalvic thuốc CaditamolF 3.2.3.1 Xác định PRC, IBU CFI thuốc Bidi-ipalvic Bảng 3.26 Kết phân tích thuốc Bidi-ipalvic PRC Lượng STT cân Diện tích (mg) pic IBU Hàm lượng CFI Diện tích pic Hàm lượng (µg/mL) Diện tích pic Hàm lượng (µg/mL) (µg/mL) 593,9 75941773 299,95 59768785 199,97 6570458 19,97 589,6 75941710 297,77 59768514 198,52 6570019 19,85 594,3 75941926 300,15 59769001 200,10 6570841 20,01 594,4 75941983 300,20 59769132 200,13 6571094 20,01 X Số liệu thống kê = 299,52 X = 199,68 X = 19,96 S = 1,43 S = 0,91 S = 0,08 %RSD = 0,47 %RSD = 0,46 %RSD = 0,41 299,52mg/viên 199,68mg/viên 19,96mg/viên Hàm lượng chất thuốc Nhận xét: Từ kết bảng 3.26 cho thấy độ lệch chuẩn tương đối % RSD chất phân tích nhỏ 2% (PRC: 0,47%; IBU: 46%; CFI: 0,41%) Điều đó chứng tỏ thuốc Bidi-ipalvic công ty cổ phần dược phẩm thiết bị y tế Bình Định đáp ứng yêu cầu chất lượng theo tiêu chuẩn dược phẩm Việt Nam 76 3.2.3.2 Xác định PRC, IBU CFI thuốc Caditamol F Bảng 3.27 Kết phân tích thuốc Caditamol F PRC IBU Lượng STT cân (mg) Hàm Diện tích pic lượng Diện tích pic (µg/mL) CFI Hàm lượng (µg/mL) Diện tích pic Hàm lượng (µg/mL) 855,9 112654863 499,94 59768885 199,98 6570448 19,98 855,7 112654430 499,82 59768624 199,93 6570319 19,99 856,1 112655016 500,06 59769181 200,02 6570672 20,00 856,4 112655287 500,23 59769310 200,10 6571009 20,01 X Số liệu thống kê = 500 X = 200 X = 19,96 S = 0,21 S = 0,10 S = 0,05 %RSD = 0,04 %RSD = 0,05 %RSD = 0,26 500mg/viên 200mg/viên 19,96mg/viên Hàm lượng chất thuốc Nhận xét: Từ kết bảng 3.27 cho thấy độ lệch chuẩn tương đối % RSD chất phân tích nhỏ 2% (PRC: 0,04%; IBU: 0,05%; CFI: 0,26%) Điều đó chứng tỏ thuốc Caditamol F công ty TNHH US PHARMA USA sản xuất đáp ứng yêu cầu chất lượng theo tiêu chuẩn dược phẩm Việt Nam 77 3.2.4 Khảo sát độ phép xác định PRC, IBU CFI theo phương pháp thêm chuẩn 3.2.4.1 Khảo sát độ phép xác định PRC, IBU CFI thuốc Bidi-ipalvic Độ phương pháp xác định phương pháp thêm chuẩn Cân xác mợt lượng viên thuốc Bidi-ipalvic sau đó thêm mợt lượng xác bợt chất chuẩn PRC, IBU CFI hòa tan dung dịch pha động tương tự 3.2.3.1 Đem dung dịch sắc ký điều kiện với dung dịch chuẩn, lặp lại thực nghiệm với lần cân khác Dựa vào hàm lượng chất biết mẫu, lượng chất chuẩn thêm vào diện tích pic dung dịch mẫu dung dịch chuẩn tính lượng chất chuẩn tìm thấy so với lượng thêm vào Kết khảo sát thể bảng 3.28 Bảng 3.28 Kết khảo sát độ Chất chuẩn PRC IBU CFI Mẫu CK (µg/mL) C (µg/mL) CT (µg/mL) 299,51 100,00 398,91 299,64 100,00 398,74 299,78 100,00 400,48 299,30 100,00 399,6 Số liệu thống kê: X = 100,13%; S = 0,51; %RSD = 0,51% 199,23 100,00 298,74 199,47 100,00 298,80 199,16 100,00 298,76 199,85 100,00 299,27 Số liệu thống kê: X = 99,45%; S = 0,16; %RSD = 0,16% 19,79 1,00 20,772 19,80 1,00 20,788 19,79 1,00 20,789 19,80 1,00 20,795 Số liệu thống kê: X = 99,20%; S = 0,46; %RSD = 0,46% 78 Rev(%) 100,4 99,1 100,7 100,3 99,5 99,3 99,6 99,4 98,3 99,2 99,6 99,7 Trong đó: CK : hàm lượng chất chuẩn xác định trước thêm chuẩn C : hàm lượng chất chuẩn thêm vào mẫu CT : hàm lượng chất xác định sau thêm chuẩn Rev(%) : độ thu hồi Nhận xét: Từ kết bảng 3.28 cho thấy, đợ thu hồi PRC 99,1÷100,7%, IBU 99,3÷99,6% CFI 98,3÷99,7% Đợ lệch chuẩn tương đối chất nhỏ 2% Do đó phương pháp sắc ký đạt yêu cầu độ 3.2.4.2 Khảo sát độ phép xác định PRC, IBU CFI thuốc Caditamol F Độ phương pháp xác định phương pháp thêm chuẩn Cân xác mợt lượng viên thuốc Caditamol F sau đó thêm mợt lượng xác bợt chất chuẩn PRC, IBU CFI hòa tan dung dịch pha động tương tự 3.2.3.2 Đem dung dịch sắc ký điều kiện với dung dịch chuẩn, lặp lại thực nghiệm với lần cân khác Dựa vào hàm lượng chất biết mẫu, lượng chất chuẩn thêm vào diện tích pic dung dịch mẫu dung dịch chuẩn tính lượng chất chuẩn tìm thấy so với lượng thêm vào Kết khảo sát thể bảng 3.29 79 Bảng 3.29 Kết khảo sát độ Chất chuẩn Mẫu CK (µg/mL) C (µg/mL) CT (µg/mL) Rev(% ) 501,03 100,00 601,94 100,9 499,22 100,00 598,50 99,3 499,46 100,00 599,10 99,6 499,96 100,00 599,28 99,3 PRC Số liệu thống kê: X = 99,78%; S = 0,76; %RSD = 0,76% 199,79 100,00 299,58 99,8 199,35 100,00 298,76 99,4 199,66 100,00 299,29 99,6 199,58 100,00 299,41 99,8 IBU Số liệu thống kê: CFI X = 99,65%; S = 0,19; %RSD = 0,19% 19,79 1,00 20,78 99,1 19,79 1,00 20,78 98,9 19,80 1,00 20,79 99,3 19,80 1,00 20,78 99,0 Số liệu thống kê: X = 99,080%; S = 0,170; %RSD = 0,170% Trong đó: CK : hàm lượng chất chuẩn xác định trước thêm chuẩn C : hàm lượng chất chuẩn thêm vào mẫu CT : hàm lượng chất xác định sau thêm chuẩn Rev(%) : độ thu hồi Nhận xét: Từ kết bảng 3.29 cho thấy, độ thu hồi PRC 99,3÷100,9%, IBU 99,4÷99,8% CFI 98,9÷99,3% Đợ lệch chuẩn tương đối chất nhỏ 2% Do đó phương pháp sắc ký đạt yêu cầu độ 80 KẾT LUẬN Sau một thời gian thực luận văn Chúng thu một số kết sau: Phương pháp UV-Vis Đã lựa chọn điều kiện tối ưu cho phép đo quang dung dịch hỗn hợp PRC, IBU CFI là: Khoảng bước sóng thích hợp để quét phổ từ 200÷300nm, PRC λmax = 243nm, IBU λmax = 220nm CFI λmax = 272nm môi trường axit HCl 0,1M Khoảng thời gian tối ưu để tiến hành thí nghiệm đo quang 30 phút sau pha có thể tiến hành thí nghiệm nhiệt đợ phòng Khảo sát, xác định khoảng tuyến tính đợ hấp thụ quang PRC 0,2 đến 30,0μg/mL, CFI từ 0,2 đến 40,0μg/mL IBU từ đến 40,0μg/mL Đã xác định đồng thời PRC, IBU CFI hỗn hợp cấu tử cho thấy xác định PRC, IBU hỗn hợp tương đối xác, xác định hà m lượng CFI sử dụng phương pháp thêm chuẩn mã u thuốc Trong thuốc Bidi-ipalvic với độ thu hồi PRC từ 98,3% đến 99,4%, IBU từ 98,8% đến 99,6% CFI từ 97,5% đến 99,4% Trong thuốc Caditamol F với độ thu hồi củaPRC từ 95,0% đến 99,4%, IBU từ 96,7% đến 99,2% CFI từ 98,3% đến 99,4% Phương pháp HPLC Đã lựa chọn điều kiện tối ưu cho phương pháp xác định đồng thời PRC, CFI IBU là: Pha động: hỗn hợp dung dịch KH2PO4 0,015M (pH=3) : axetonitril tương ứng với tỷ lệ thể tích 13:87 Detector UV-Vis: λ = 224nm Cột: sử dụng cột C18 (250mm x 4,6 mm; 0,45µm) 81 Tốc đợ dòng: 0,6mL/phút Thể tích bơm mẫu: 20µL Nhiệt đợ phân tích: 30oC Thời gian lưu chất hợp lý với thời gian lưu PRC 4,41 phút; CFI 5,12 phút IBU 6,58 phút Từ kết bảng 3.23 cho thấy, độ thu hồi chất thuốc Bidiipalvic PRC 99,1÷100,7%, IBU 99,3÷99,6% CFI 98,3÷99,7% Đợ thu hồi thuốc Caditamol F PRC 99,3÷100,9%, IBU 99,4÷99,8% CFI 98,9÷99,3% Kết xác định PRC, IBU, CFI thuốc Bidi-ipalvic Caditamol F theo phương pháp HPLC phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử sử dụng chương trình lọc Kalman [6] gần 82 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Bộ Y tế (2010), Dược điển Việt Nam IV, NXB Y học Trần Quốc Chính (2015), Định lượng đồng thời paracetamol codein photphat thuốc Actadol Codein phương pháp sắc ký lỏnghiệu cao (HPLC) phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UV-Vis), Luận văn thạc sĩ khoa học vật chất, Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên Bộ Y tế (2012), Dược thư Việt Nam, NXB Y học Bùi Đức Ngọc (2015), Định lượng đồng thời paracetamol cafein thuốc Panadol Extra Hapacol Extra phương pháp sắc ký lỏnghiệu cao (HPLC) phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UV-Vis), Luận văn thạc sĩ khoa học vật chất, Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên Trần Tứ Hiếu, Đặng Ứng Vận, Mai Xuân Trường (2006), “Xác định đồng thời cấu tử có phổ hấp thụ xen phủ theo phương pháp lọc Kalman”, Tạp chí Phân tích Hố, Lý Sinh học Tập 11(3) Tr 15 - 19 Mai Xuân Trường (2008), Nghiên cứu phương pháp hấp thụ quang phân tử xác định đồng thời chất có phổ hấp thụ xen phủ dựa thuật toán lọc Kalman, Luận án Tiến sĩ hóa học, Đại học KHTN – Đại học Quốc Gia Hà Nội Thái Duy Thìn cộng (2005), Nghiên cứu ứng dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) đo quang phổ UV-Vis để định tính định lượng hoạt chất số thuốc có từ đến thành phần, Viện kiểm nghiệm thuốc Bộ Y tế, Trường Đại học Dược Hà Nội Vũ Duy Long (2014), Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat phenylephin hydroclorit thuốc TIFFY phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UV-Vis), Luận văn thạc sĩ khoa học vật chất, Đại học Sư phạm – Đại học Thái Nguyên 83 Trần Thúc Bình (2002), Nghiên cứu phương pháp xác định đồng thời chất có phổ hấp thụ xen phủ sử dụng vi tính, Luận án tiến sĩ hóa học, Đại học Quốc gia Hà Nội 10 Trần Tứ Hiếu (2003), Phân tích trắc quang phổ hấp thụ UV-Vis, NXB Đại học Quốc Gia Hà Nội 11 Trần Tứ Hiếu, Đặng Ứng Vận, Mai Xuân Trường (2004), “Sử dụng sai số tương đối để lập trình xác định đồng thời cấu tử có phổ hấp thụ xen phủ nhau”, Tạp chí Phân tích Hố, Lý Sinh học, Tập 9(4) Tr 31 - 34 12 Đặng Trần Phương Hồng, Trịnh Văn Quỳ (1997), Định lượng đồng thời sulfadoxin pyrimethamin viên nén fasnida phương pháp HPLC phương pháp quang phổ đạo hàm, Thông báo kiểm nghiệm, Viện kiểm nghiệm - Bộ Y tế 13 Phạm Luận (1997), Sổ tay pha chế hóa chất, Trường ĐHKHTN - Đại học Quốc Gia Hà Nội 14 Phạm Luận (2006), Phép đo phổ hấp thụ phân tử UV-Vis, NXB Đại học Quốc Gia Hà Nợi 15 Hồ Viết Q (2006), Phân tích lý hóa, NXB Giáo dục 16 Mai Xuân Trường, Dương Thị Tú Anh (2006), “Định lượng đồng thời vitamin B1, B2 B6 viên nén Narobex theo phương pháp lọc Kalman”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đại học Thái Nguyên, tập 2(38) Tr 66 - 69 17.Viện kiểm nghiệm dược phẩm (1973), Những phương pháp định lượng, NXB Y học Tiếng Anh 18 Angshuman Biswas et al (2010), “Simultaneous estimation of Paracetamol, Chlorzoxazone and Diclofenac Potassium in pharmaceutical formulation by a RP - HPLC method”, International Journal of Pharma and Bio Sciences, 1(2), pp – 84 19 Akwasi Acheampong et al (2015), “Development and Validation of a RP-HPLC Method with PDA Detection for the Simultaneous Estimation of Acetylsalicylic Acid, Paracetamol and Caffeine in Fixed Dose Combination Tablets”, International Journal of Chemical and Biomolecular Science, 1(4), pp 211 – 217 20 Bollikolla Hari Babu et al (2015), “A validated high performance liquid chromatography method for the simultaneous analysis of Guaifenesin, Ambroxol and Loratidine in bulk and liquid dosage form”, Journal of Applied Pharmaceutical Scien, 5(12), pp 61- 66 21 Boyka G Tsvetkova et al (2013), “HPLC Assay and Stability Studies of Tablets Containing Paracetamol and Caffeine”, International Journal of Pharmaceutical Sciences Review and Research, 18(1), pp 138 – 142 22 Daravath et al (2014), “Development and validation of RP – HPLC method for simultaneous estimation of Chlorpheniramine Maleate and Diethylcarbamazine Citrate in pharmaceutical dosage forms”, Asian J Pharm Clin Res, 7(3), pp 98 – 102 23 Deodhar MN et al (2009),“Reverse phase HPLC method for determination of Aceclofenac and Paracetamol in tablet dosage form”, Asian Journal of Research in Chemistry, 2(1), pp 37 - 40 24 Dhaneshwar SR et al (2011), “Simultaneous quantitation and validation of Paracetamol, Phenylpropanolamine Hydrochloride and Cetirizine Hydrochloride by RP-HPLC in bulk drug and formulation”, International Journal of Pharmaceutical Sciences and Drug Research, 3(4), pp 303-308 25 Kumudhavalli M V et al (2010), “Dertermination of Psuedoephedrine Hydrochloride, Cetirizine Dihydrochloride and Paracetamol uncoated tablet by RP – HPLC method”, Journal of Global Pharma Technology, 2(4), pp 97 – 101 85 26 Maslarska V et al (2013), ”Simultaneous determination and validation of Paracetamol and Codeine phosphate in pharmaceutical prepparation by RPHPLC”, Int J Pharm Sci, 5(2), pp 417 - 419 27 Rajaven P et al(2013), “Method development and validation for the simultaneous estimation of Ibuprofen and Codeine phosphate in tablet dosage form by RP-HPLC”, Asians Journal of pharmaceutical Analysis and Medicinal chemistry, 1(1), pp - 17 28.Tsvetkova et al (2012), “Simultaneous high performance liquid chromatographydetermination of Paracetamol and Ascorbic acid intablet dosage forms”, African Journal of Pharmacy and Pharmacology, 6(17), pp 1332 – 1336 29 Tuani Y.T et al (2014), “simultaneous quantification of Paracetamol and Ibuprofen in fixed dose combination using RP – HPLC with UV detection”, International Journal of pharmaceutical chemistry, 3(1), pp – 15 30.Wadher et al (2006), “Reverse phase HPLC method for determination of Aceclofenac and Paracetamol in tablet dosage form”, Indian J Pharm Sci, 268 (3), pp 387 – 389 86 ... Định lượng đồng thời acetaminophen, codeine phosphate thuốc Actadol codeine phương pháp sắc kí lỏng hiệu cao phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử + Sử dụng phương pháp quang phổ hấp thụ phân. .. nhiều phương pháp áp dụng giới Việt Nam để xác định hàm lượng thuốc Trong đó có hai phương pháp hay sử dụng đó là: Phương pháp sắc kí lỏng hiệu cao (HPLC) phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử. .. cứu "Định lượng đồng thời paracetamol cafein thuốc Panadol Extra Hapacol Extra phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UV-Vis)" + Sử dụng phương pháp quang