Báo cáo TN vi sinh môi trường

BÀI 1: XÁC ĐỊNH COLIFORMS TỔNG SỐ (PP MPN) Giai đoạn 1 Chuẩn bị pipet → sấy khử trùng, để nguội Chuẩn bị nước cất, môi trường LB → hấp khử trùng, làm nguội Pha loãng mẫu theo dãy nồng độ thập phân và cấy vào môi trường LB. Ủ 370C – 24h Giai đoạn 2 Đọc kết quả LB (+) Chuẩn bị môi trường BGBL → hấp khử trùng, làm nguội Cấy chuyền từ mt LB (+) qua môi trường BGBL. Ủ 370C Giai đoạn cuối Đọc ống (+) ở mt BGBL và tính kết quả.

BÁO CÁO THÍ NGHIỆM VI SINH MÔI TRƯỜNG

GVHD: Th.S LÊ THỊ HỒNG TUYẾT LỚP 05KT MT3 – NHÓM 16

***

BÀI 1: XÁC ĐỊNH COLIFORMS TỔNG SỐ (PP MPN)

Giai đoạn 1

- Chuẩn bị pipet → sấy khử trùng, để nguội

- Chuẩn bị nước cất, môi trường LB → hấp khử trùng, làm nguội

- Pha loãng mẫu theo dãy nồng độ thập phân và cấy vào môi trường LB Ủ 370C – 24h

Giai đoạn 2

- Đọc kết quả LB (+)

- Chuẩn bị môi trường BGBL → hấp khử trùng, làm nguội

- Cấy chuyền từ mt LB (+) qua môi trường BGBL Ủ 370C

Giai đoạn cuối

Đọc ống (+) ở mt BGBL và tính kết quả

Tiến hành

Bước 1: Lấy mẫu và pha loãng mẫu theo dãy nồng độ thập phân 10-1, 10-2 và 10-3

Bước 2: Mỗi độ pha loãng hút 3 lần, mỗi lần 1 ml cấy vào 3 ống nghiệm môi trường LB

Hút 3 nồng độ liên tiếp, mỗi nồng độ 3 ống nghiệm Bước 3: Ủ 370C - 24h Bước 4: Ống dương tính là có bọt khí trong ống durham Ghi kết quả Bước 5: Tra bảng Mac Crady – loạt 3 ống nghiệm ở 3 nồng độ liên tiếp MT LB ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ĐẠT KHÔNG MT BGBL ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ĐẠT KHÔNG Kết quả & nhận xét

BÀI 2: XÁC ĐỊNH COLIFORM PHÂN (PP MPN)

Giai đoạn 1; Giống Coliform

Giai đoạn 2

- Chuẩn bị môi trường EC → hấp khử trùng, làm nguội

- Cấy chuyền từ môi trường LB (+) sang môi trường EC Ủ 44,50C – 24h

Giai đoạn cuối

- Đọc ống (+) ở mt EC và tính kết quả

Tiến hành

Bước 1: Lấy mẫu và pha loãng mẫu theo dãy nồng độ thập phân 10-1, 10-2 và 10-3

Bước 2: Mỗi độ pha loãng hút 3 lần, mỗi lần 1 ml cấy vào 3 ống nghiệm môi trường LB

Hút 3 nồng độ liên tiếp, mỗi nồng độ 3 ống nghiệm Bước 3: Ủ 370C - 24h Bước 4: Ống dương tính là có bọt khí trong ống durham Bước 5: Cấy vào ống canh EC Broth Ủ ở 44,5oC – 24h MT EC ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ĐẠT KHÔNG Kết quả & nhận xét

BÀI 3: XÁC ĐỊNH E.COLI (PP MPN)

Giai đoạn 1; Giống Coliform

Giai đoạn 2; Giai đoạn 2 giống Coliform phân

Giai đoạn 3

- Chuẩn bị môi trường trypton → hấp khử trùng, làm nguội

- Đọc kết quả EC (+) và cấy chuyền qua mt Trypton Ủ 44,50C – 24h

Giai đoạn cuối

- Thực hiện nhỏ 3 giọt thuốc thử Kovac’s vào môi trường Trypton (thử nghiệm Indol) Ghi nhận ống xuất hiện màu đỏ trên bề mặ Tính kết quả

ĐẠT

KHÔNG

ĐẠT

KHÔNG

Kết quả & nhận xét

BÀI 4: XÁC ĐỊNH COLIFORMS TỔNG SỐ (PHƯƠNG PHÁP MÀNG LỌC)

Giai đoạn 1

- Chuẩn bị môi trường m ENDO Agar LES → đun sôi rót vào đĩa petri để đông lại

- Thao tác lọc mẫu → Úp ngược đĩa ủ 370C – 24h

- Đếm số lượng khuẩn lạc có màu đỏ đậm đến ánh kim Tính kết quả

Kết quả & nhận xét

BÀI 5: XÁC ĐỊNH TỔNG VI KHUẨN HIẾU KHÍ (PP ĐỔ ĐĨA) Thực hiện - Chuẩn bị nước cất, môi trường PCA → hấp khử trùng, làm nguội đến 450C - Chuẩn bị pipet → sấy khử trùng, để nguội Tiến hành thao tác đổ đĩa → Để đông → Úp ngược đĩa ủ 370C – 24h - Đếm tất cả các khuẩn lạc mọc trong đĩa Kết quả & nhận xét