Đang tải... (xem toàn văn)
BÀI 1: XÁC ĐỊNH COLIFORMS TỔNG SỐ (PP MPN) Giai đoạn 1 Chuẩn bị pipet → sấy khử trùng, để nguội Chuẩn bị nước cất, môi trường LB → hấp khử trùng, làm nguội Pha loãng mẫu theo dãy nồng độ thập phân và cấy vào môi trường LB. Ủ 370C – 24h Giai đoạn 2 Đọc kết quả LB (+) Chuẩn bị môi trường BGBL → hấp khử trùng, làm nguội Cấy chuyền từ mt LB (+) qua môi trường BGBL. Ủ 370C Giai đoạn cuối Đọc ống (+) ở mt BGBL và tính kết quả.
BÁO CÁO THÍ NGHIỆM VI SINH MƠI TRƯỜNG GVHD: Th.S LÊ THỊ HỒNG TUYẾT LỚP 05KT MT3 – NHÓM 16 *** BÀI 1: XÁC ĐỊNH COLIFORMS TỔNG SỐ (PP MPN) Giai đoạn - Chuẩn bị pipet → sấy khử trùng, để nguội - Chuẩn bị nước cất, môi trường LB → hấp khử trùng, làm nguội - Pha loãng mẫu theo dãy nồng độ thập phân cấy vào môi trường LB Ủ 370C – 24h Giai đoạn - Đọc kết LB (+) - Chuẩn bị môi trường BGBL → hấp khử trùng, làm nguội - Cấy chuyền từ mt LB (+) qua môi trường BGBL Ủ 370C Giai đoạn cuối Đọc ống (+) mt BGBL tính kết Tiến hành Bước 1: Lấy mẫu pha loãng mẫu theo dãy nồng độ thập phân 10-1, 10-2 10-3 Bước 2: Mỗi độ pha loãng hút lần, lần ml cấy vào ống nghiệm môi trường LB Hút nồng độ liên tiếp, nồng độ ống nghiệm Bước 3: Ủ 370C - 24h Bước 4: Ống dương tính có bọt khí ống durham Ghi kết Bước 5: Tra bảng Mac Crady – loạt ống nghiệm nồng độ liên tiếp MT LB ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ĐẠT KHÔNG MT BGBL ĐẠT KHÔNG Kết & nhận xét BÀI 2: XÁC ĐỊNH COLIFORM PHÂN (PP MPN) Giai đoạn 1; Giống Coliform Giai đoạn - Chuẩn bị môi trường EC → hấp khử trùng, làm nguội - Cấy chuyền từ môi trường LB (+) sang môi trường EC Ủ 44,50C – 24h Giai đoạn cuối - Đọc ống (+) mt EC tính kết Tiến hành Bước 1: Lấy mẫu pha loãng mẫu theo dãy nồng độ thập phân 10-1, 10-2 10-3 Bước 2: Mỗi độ pha loãng hút lần, lần ml cấy vào ống nghiệm môi trường LB Hút nồng độ liên tiếp, nồng độ ống nghiệm Bước 3: Ủ 370C - 24h Bước 4: Ống dương tính có bọt khí ống durham Bước 5: Cấy vào ống canh EC Broth Ủ 44,5oC – 24h MT EC ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ĐẠT KHÔNG Kết & nhận xét BÀI 3: XÁC ĐỊNH E.COLI (PP MPN) Giai đoạn 1; Giống Coliform Giai đoạn 2; Giai đoạn giống Coliform phân Giai đoạn - Chuẩn bị môi trường trypton → hấp khử trùng, làm nguội - Đọc kết EC (+) cấy chuyền qua mt Trypton Ủ 44,50C – 24h Giai đoạn cuối - Thực nhỏ giọt thuốc thử Kovac’s vào môi trường Trypton (thử nghiệm Indol) Ghi nhận ống xuất màu đỏ bề mặ Tính kết MT Trypton ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ỐNG NGHIỆM ĐẠT KHÔNG TN Indol ĐẠT KHÔNG Kết & nhận xét BÀI 4: XÁC ĐỊNH COLIFORMS TỔNG SỐ (PHƯƠNG PHÁP MÀNG LỌC) Giai đoạn - Chuẩn bị môi trường m ENDO Agar LES → đun sơi rót vào đĩa petri để đông lại - Thao tác lọc mẫu → Úp ngược đĩa ủ 370C – 24h - Đếm số lượng khuẩn lạc có màu đỏ đậm đến ánh kim Tính kết Kết & nhận xét BÀI 5: XÁC ĐỊNH TỔNG VI KHUẨN HIẾU KHÍ (PP ĐỔ ĐĨA) Thực - Chuẩn bị nước cất, môi trường PCA → hấp khử trùng, làm nguội đến 450C - Chuẩn bị pipet → sấy khử trùng, để nguội Tiến hành thao tác đổ đĩa → Để đông → Úp ngược đĩa ủ 370C – 24h - Đếm tất khuẩn lạc mọc đĩa Kết & nhận xét ... MPN) Giai đoạn 1; Giống Coliform Giai đoạn - Chuẩn bị môi trường EC → hấp khử trùng, làm nguội - Cấy chuyền từ môi trường LB (+) sang môi trường EC Ủ 44,50C – 24h Giai đoạn cuối - Đọc ống (+)... đoạn - Chuẩn bị môi trường trypton → hấp khử trùng, làm nguội - Đọc kết EC (+) cấy chuyền qua mt Trypton Ủ 44,50C – 24h Giai đoạn cuối - Thực nhỏ giọt thuốc thử Kovac’s vào môi trường Trypton... BÀI 5: XÁC ĐỊNH TỔNG VI KHUẨN HIẾU KHÍ (PP ĐỔ ĐĨA) Thực - Chuẩn bị nước cất, môi trường PCA → hấp khử trùng, làm nguội đến 450C - Chuẩn bị pipet →