KHẢO SÁT TÍNH GÂY BỆNH CỦA NẤM Phytophthora spp. TRÊN MỘT SỐ DÒNG VÔ TÍNH CAO SU TRONG VƯỜN ƯƠM

đối với một số dòng vô tính cao su trong vườn ươm” được tiến hành tại nhà lưới trường Cao Đẳng Công nghiệp cao su, TX Đồng Xoài, Tỉnh Bình Phước, thời gian từ tháng 02/2009 đến tháng 06

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP

KHẢO SÁT TÍNH GÂY BỆNH CỦA NẤM Phytophthora spp

TRÊN MỘT SỐ DÒNG VÔ TÍNH CAO SU

TRONG VƯỜN ƯƠM

Sinh Viên: LÊ THANH BÔN Ngành: NÔNG HỌC

Niên Khoá: 2004 – 2009

Tháng 09/20009

KHẢO SÁT TÍNH GÂY BỆNH CỦA NẤM Phytophthora spp TRÊN MỘT

SỐ DÒNG VÔ TÍNH CAO SU TRONG VƯỜN ƯƠM

Tác giả

LÊ THANH BÔN

Khoá luận được đệ trình để đáp ứng yêu cầu

cấp bằng kỹ sư ngành Nông học

Giáo viên hướng dẫn:

TS LÊ ĐÌNH ĐÔN

KS BÙI ĐÌNH NINH

Tp Hồ Chí Minh, tháng 09/2009

CẢM TẠ

Trân trọng ghi ơn cha mẹ, anh chị em cùng toàn thể người thân đã thương yêu, giúp đỡ động viên tôi trong suốt quá trình tham gia khoá học

Chân thành cảm ơn:

Ban giám hiệu trường Đại học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh

Ban chủ nhiệm khoa Nông học

Bộ môn Bảo Vệ Thực Vật

Tất cả quý Thầy Cô trường Đại Học Nông Lâm đã tận tình giảng dạy tôi trong suốt thời gian học tập

Xin chân thành cảm ơn sâu sắc đến thầy TS Lê Đình Đôn, KS Bùi Đình Ninh

đã trực tiếp hướng dẫn và giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện đề tài

Ban giám hiệu, khoa Nông Học trường Cao Đẳng Công nghiệp cao su Bình Phước

Ban lãnh đạo, cùng toàn thể anh chị em trong cơ quan đã tận tình giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt thời gian học tập và hoàn thành khoá luận tốt nghiệp này

Tp Hồ Chí Minh, tháng 09/2009

Sinh viên

Lê Thanh Bôn

TÓM TẮT

Đề tài nghiên cứu “Khảo sát tính gây bệnh của nấm Phytophthora spp đối với

một số dòng vô tính cao su trong vườn ươm” được tiến hành tại nhà lưới trường Cao Đẳng Công nghiệp cao su, TX Đồng Xoài, Tỉnh Bình Phước, thời gian từ tháng 02/2009 đến tháng 06/2009 gồm các nội dung thí nghiệm sau:

Xác định ngưỡng nồng độ gây bệnh của nấm Phytophthora spp trên dòng vô

tính PB255

Khảo sát tính gây bệnh của nấm Phytophthora spp trên một số dòng vô tính

cao su RRIM600, RRIV4, PB235, PB255 và PB260

Khảo sát tính gây bệnh của nấm Phytophthora spp giữa cây ghép mắt và cây

Qua khảo sát phản ứng của một số DVT nhận thấy, khi chủng 6 mẫu nấm

Phytophthora, các DVT cao su đều bị nhiễm bệnh RRIM600 là DVT có tỷ lệ bệnh

nặng nhất ở tất cả các bộ phận của cây, cả 6 mẫu nấm đều tấn công gây hại Có tỷ lệ nhiễm bệnh nhẹ nhất là DVT RRIV4 còn lại ở mức nhiễm bệnh trung bình là DVT PB255, PB235 và PB260

Trong 6 mẫu nấm Phytophthora, mẫu nấm RBP05- TB có khả năng tấn công

gây hại mạnh nhất, trên tất cả các bộ phận của cây Gây hại yếu nhất ở lá là mẫu nấm RBP05- DT02 và ở thân là mẫu nấm RBG05- BL Cả 6 mẫu nấm đều gây hại trên cuống

Phản ứng giữa cây mắt ghép và cây gốc ghép (được gieo từ hạt) PB235 sau khi

chủng 6 mẫu nấm Phytophthora thấy rằng, cây mọc từ hạt có tỷ lệ nhiễm bệnh thấp

hơn hẳn so với cây mắt ghép

MỤC LỤC

Trang

Trang tựa i

Lời cảm tạ ii

Tóm tắt iii

Mục lục v

Danh sách các chữ viết tắt viii

Danh sách các bảng ix

Danh sách các hình xi

Chương 1 MỞ ĐẦU 1

1.1 Đặt vấn đề: 1

1.2 Mục tiêu 2

1.3 Yêu cầu 2

Chương 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4

2.1 Giới thiệu tổng quát về cây cao su 4

2.1.1 Dòng vô tính RRIV4 7

2.1.2 Dòng vô tính PB235 7

2.1.3 Dòng vô tính PB255 7

2.1.4 Dòng vô tính PB260 8

2.1.5 Dòng vô tính RRIM600 8

2.2 Điều kiện sinh thái miền Đông Nam Bộ 8

2.2.1 Khí hậu 8

2.2.2 Về đất đai 9

2.3 Giới thiệu chung về nấm Phytophthora 9

2.3.1 Đặc điểm sinh vật học 10

2.3.2 Chu kỳ sống 10

2.3.3 Những nghiên cứu trong nước và ngoài nước về bệnh Phytophthora trên cây cao su 13

Chương 3 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16

3.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu 16

3.2 Nội dung nghiên cứu 16

3.3 Phương pháp nghiên cứu 16

3.3.1 Vật liệu chủng 16

3.3.2 Phương pháp chuẩn bị dịch bào tử 17

3.3.3 Phương pháp khảo sát phản ứng của nấm Phytophthora spp đối với một số dòng vô tính cao su 18

3.3.3.1 Xác định nồng độ gây hại trên các dòng vô tính 18

3.3.3.2 Khảo sát phản ứng của một số dòng vô tính cao su đối với nấm Phytophthora spp 19

3.3.3.3 Khảo sát tính gây bệnh của nấm Phytophthora spp giữa cây mắt ghép và cây gốc ghép cao su PB235 22

3.4 Phương pháp sử lý số liệu 22

Chương 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 23

4.1 Xác định nồng độ gây hại của nấm Phytophthora spp ở ngưỡng nồng độ 103, 105, 107 động bào tử/mltrên DVT PB255 23

4.2 Khảo sát phản ứng của một số dòng vô tính cao su đối với nấm Phytophthora spp. .25

4.2.1 Tỷ lệ bệnh của một số DVT cao su khi chủng các mẫu nấm Phytophthora 27

4.2.1.1 Tỷ lệ bệnh trên lá của một số DVT cao su sau 4 ngày chủng các mẫu nấm Phytophthora 27

4.2.1.2 Tỷ lệ bệnh trên cuống của một số DVT cao su saun 4 ngày chủng các mẫu nấm Phytophthora 28

4.2.1.3 Tỷ lệ bệnh trên thân của một số DVT cao su sau 4 ngày chủng các mẫu nấm Phytophthora 30

4.2.2 Tốc độ phát triển vết bệnh của một số DVT cao su khi chủng các mẫu nấm Phytophthora 31

4.2.2.1 Tốc độ phát triển của vết bệnh trên lá của một số DVT cao su 31

4.2.2.2 Tốc độ phát triển của vết bệnh trên cuống lá của một số DVT cao su 32

4.2.2.3 Tốc độ phát triển của vết bệnh trên thân của một số DVT cao su 33

4.2.3 Tỷ lệ cuống lá rụng của một số DVT cao su khi chủng các loài nấm Phytophthora 35

4.3 Khảo sát tính gây bệnh của nấm Phytophthora spp giữa cây mắt ghép và cây gốc

ghép (mọc từ hạt) cao su PB235 36

Chương 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 39

5.1 Kết luận 39

5.2 Đề nghị 39

TÀI LIỆU THAM KHẢO 40

PHỤ LỤC 42

DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT

TLB: Tỷ lệ bệnh

NSC: Ngày sau chủng

DVT: Dòng vô tính

PGA: Potato Glucose Agar (môi trường khoai tây)

CRA: Carrot Agar (môi trường cà rốt)

RRIV: Rubber Research Instiute Of Viet Nam (Viện nghiên cứu cao su Việt Nam)

Tgxhtc: Thời gian xuất hiện triệu chứng bệnh

DANH SÁCH CÁC BẢNG

Bảng 2.1 Định hướng phát triển ngành cao su trong giai đoạn 2010 – 2015 4 Bảng 2.2: Diện tích, sản lượng và năng suất cao su trong nước giai đoạn 1996 – 20056 Bảng 2.3: Mười giống cao su có diện tích lớn nhất cả nước năm 2004 .6 Bảng 3.1 Điều kiện thời tiết, khí hậu trong thời gian bố trí thí nghiệm 16

Bảng 3.2 Danh sách các loài nấm Phytophthora spp 17

Bảng 4.1 Thời gian xuất hiện triệu chứng khi chủng 6 mẫu nấm ở 3 nồng độ trên DVT

PB255 23

Bảng 4.2 Tỷ lệ bệnh DVT PB255 khi chủng 6 mẫu nấm ở nồng độ 105 và 107 24

Bảng 4.3 Tỷ lệ bệnh của một số DVT cao su khi chủng các mẫu nấm Phytophthora 26

Bảng 4.4 Tỷ lệ bệnh trên lá của một số DVT cao su sau 4 ngày chủng các mẫu nấm

Bảng 4.8 KTVB (mm) sau 4 ngày chủng và tốc độ phát triển KTVB (mm/ngày) trên

cuống của một số DVT cao su 33

Bảng 4.9 KTVB (mm) sau 6 ngày chủng và tốc độ phát triển KTVB (mm/ngày) trên

thân của một số DVT cao su 33

Bảng 4.10 Tỷ lệ (%) rụng cuống lá của một số DVT cao su sau 4 ngày chủng các mẫu

nấm Phytophthora 35

.Bảng 4.11 Tỷ lệ bệnh giữa cây mắt ghép và cây gốc ghép (mọc từ hạt) cao su PB235

sau 4 ngày chủng 6 mẫu nấm 36

Hình 4.9 Triệu chứng bệnh do nấm Phytophthora gây hại trên lá, cuống và trên thân

của cây gốc ghép (được gieo từ hạt) cao su PB235 37

Hình 4.10 Triệu chứng bệnh do nấm Phytophthora gây hại trên lá, cuống và trên thân

của cây mắt ghép cao su PB235 38

và Campuchia Điều này càng khẳng định cây cao su không những mang lại lợi ích về kinh tế mà nó còn ổn định về mặt chính trị

Cây cao su Hevea brasiliensis thuộc họ thầu dầu (Euphorbiaceace) có nguồn

gốc tại vùng châu thổ sông Amazon (Nam Mỹ), được du nhập vào Châu Á năm 1876 Qua quá trình chọn lọc, cây cao su đã thích nghi dần với điều kiện sinh thái khác nhau

ở nhiều nước trên thế giới

Ở Việt Nam, cây cao su du nhập từ năm 1897 và từ đầu thế kỷ 20 đến nay diện tích trồng cao su luôn được mở rộng ở vùng Đông Nam Bộ, các tỉnh Tây Nguyên, Miền Trung và Phía Bắc Cao su là cây công nghiệp dài ngày có giá trị trong nhiều lĩnh vực kinh tế, xã hội, an ninh quốc phòng và bảo vệ môi trường Sản phẩm chính của cây cao su là mủ cao su, đây là nguyên liệu cần thiết cho một số ngành công nghiệp trong nước và xuất khẩu Ngoài ra cây cao su còn cung cấp gỗ, chất đốt, và hạt cao su có thể ép dầu làm xà phòng, thức ăn gia súc (Nguyễn Thị Huệ, 1997)

Diện tích trồng cao su ngày càng phát triển mạnh Năm 2005, tổng diện tích cao

su của Việt Nam là 480.000 ha và sản lượng khai thác cao su khoảng 469.000 tấn, đến nay sản lượng là 644,2 nghìn tấn Cao su thiên nhiên của Việt Nam sản xuất hàng năm tăng khoảng 15% trong đó bao gồm trồng mới, trồng tái canh trên diện tích thanh lý

những vườn cây già cỗi, không hiệu quả nhằm thay thế bằng những giống mới có năng suất và tốc độ tăng trưởng nhanh hơn (Tập đoàn Công nghiệp Cao su Việt Nam, 2006)

Diện tích cao su trồng tập trung, trong điều kiện nóng ẩm mưa nhiều, đã tạo điều kiện thuận lợi cho một số bệnh hại phát triển và lây lan nhanh chóng Một trong

những bệnh hại lá, cuống lá, thân và trái trên cây cao su đó là bệnh Phytopthora spp

bệnh gây hại nặng cho vườn ươm, vườn nhân, vườn kiến thiết cơ bản và vườn khai

thác Các nghiên cứu cho thấy khi cây cao su bị nhiễm bệnh do Phytophthora spp như

loét sọc mặt cạo hay rụng lá mùa mưa có ảnh hưởng rất lớn đến sự sinh trưởng của cây, làm hư hỏng lớp vỏ kinh tế dẫn đến làm giảm chu kỳ khai thác và khi cây bị nhiễm bệnh thường làm giảm sản lượng khai thác mủ từ 25 – 40% (Viện nghiên cứu cao su Việt Nam, 1994)

Hiện nay, ở Việt Nam đã có nhiều dòng vô tính cao su được lai tạo và do cây cao su là cây công nghiệp dài ngày, thời gian kinh doanh kéo dài trong 20 năm, nên việc chọn giống đóng một vai trò rất quan trọng Trong những thập niên vừa qua, ngành cao su Việt Nam đã không ngừng nâng cao sản lượng cao su qua những nghiên cứu khoa học trong công tác cải tiến giống, kỹ thuật nông nghiệp Những thiệt hại do bệnh gây ra vẫn gia tăng đáng kể, hầu như chưa có biện pháp phòng trừ hiệu quả, vì bệnh diễn ra trên diện rộng, tốc độ phát triển rất nhanh Do đó biện pháp được áp dụng hiện nay là bón phân định kỳ để tăng sức đề kháng cho cây nhằm hạn chế sự ảnh hưởng của bệnh hoặc kết hợp với việc dùng thuốc hoá học bôi phòng trị bệnh định kỳ trong mùa mưa Nhưng thực tế cho đến nay các kết quả nghiên cứu về những tác động

do Phytophthora spp gây ra trên cây cao su vẫn còn rất nhiều hạn chế

Từ trên những cơ sở đó chúng tôi thực hiện đề tài “Khảo sát tính gây bệnh

của nấm Phytophthora spp đối với một số dòng vô tính cao su trong vườn ươm”

1.2 Mục tiêu

Xác định tính gây bệnh của nấm Phytophthora spp đối với một số dòng vô tính

cao su RRIM600, RRIV4, PB235, PB255, PB260

1.3 Yêu cầu

Xác định nồng độ gây bệnh của nấm Phytophthora spp trên dòng vô tính

PB255

Khảo sát tính gây bệnh của nấm Phytophthora spp trên một số dòng vô tính

cao su RRIM600, RRIV4, PB235, PB255, PB260

Khảo sát tính gây bệnh của nấm Phytophthora spp giữa cây mắt ghép và cây

gốc ghép (mọc từ hạt) cao su PB235

1.4 Đối tượng khảo sát

Nấm Phytophthora spp và một số dòng vô tính cao su RRIM600, RRIV4,

PB235, PB255, PB260, cây gốc ghép PB235 (được gieo từ hạt)

Chương 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1 Giới thiệu tổng quát về cây cao su

Cây cao su Hevea brasiliensis có nguồn gốc từ vùng nhiệt đới lưu vực rừng

Amazone (Nam Mỹ), trong điều kiện tự nhiên cây có thể cao 35- 40m và có chu kỳ

sống trên 100 năm Nhưng trong các đồn điền cao su thì chiều cao của cây thường chỉ

khoảng 20- 25m tuỳ theo từng dòng vô tính Nguyên nhân chủ yếu là do ảnh hưởng

trực tiếp của việc khai thác mủ cao su và hiện nay đối với vườn cây của các Công ty

cao su trực thuộc Tập đoàn Công nghiệp cao su Việt Nam thì chu kỳ khai thác của cây

cao su đã giảm từ 25 năm xuống còn 20 năm Tiến hành thanh lý, trồng lại khi hết chu

kỳ khai thác cũng như việc khai thác mủ không còn đem lại hiệu quả kinh tế cho

doanh nghiệp

Bảng 2.1 Định hướng phát triển ngành cao su trong giai đoạn 2010 – 2015

(Tập đoàn Công nghiệp cao su Việt Nam, 2006)

Lá cao su thuộc loại lá kép chân vịt, có 3 lá chét Khi lá mới bắt đầu nhú, lá non

uốn cong gần như song song với cuống lá, lá non có màu đỏ sậm Khi các lá này lớn

thì có màu xanh lục và lá vươn ra gần như 1800 so với cuống lá Lá trưởng thành có

màu xanh lục sáng đậm ở mặt trên phiến lá, mặt dưới của phiến lá có màu lợt hơn

Cuống lá chỉ dài khoảng 15 – 25cm mang hai túi mật nhỏ ở chổ phân chia 3 lá chét và

mật chỉ có lúc lá mới ra trong thời kỳ thay lá qua đông Lá chét có cuống lá ngắn hình

Định hướng phát triển 2005 (tấn) 2010 (tấn) Tới năm 2015 (tấn)

I Tổng công ty 246.000 293.700 344.000

Tây nguyên và duyên hải niềm trung 60.000 90.000 92.000

Nước ngoài (Lào) 1.700 41.000 60.000

II Thành phần khác 234.000 284.000 372.000

Toàn ngành 480.000 577.700 716.000

trứng hoặc hình bầu dục Cây cao su thay lá sinh lý vào giai đoạn cuối đông sau thời gian rụng lá khoảng 15 – 20 ngày thì ra lá mới và sau 30 ngày thì lá ổn định hoàn toàn

Rễ cao su có 2 loại: Rễ cọc và rễ bàng Hệ thống rễ chiếm khoảng 15% trọng lượng của toàn bộ cây Khi trồng bằng bầu thì hệ thống rễ phát triển kém hơn đối với việc trồng bằng hạt và bằng stump Hệ thống rễ bàng phát triển tuỳ theo từng mùa, phát triển mạnh vào giai đoạn cây rụng hết lá và đã bắt đầu ra lá non, phát triển yếu vào thời điểm cuối mùa khô thời điểm cây chuẩn bị rụng lá sinh lý hàng năm Hiện tượng rụng lá qua đông chịu ảnh hưởng tuỳ theo dòng vô tính, tuổi cây và điều kiện môi trường mà lá có thể rụng một phần hay toàn phần (Geor., 1967)

Hoa cao su là hoa đơn tính đồng chu, hoa mọc cùng lúc với sự ra lá mới Hoa mọc thành chùm, hoa cái to hơn nằm ở phần cuối của chùm hoa, hoa đực với số lượng nhiều hơn hoa cái mọc ở phần trên của chùm hoa Hoa màu vàng hơi ngã lục, cuống hoa ngắn dạng hoa hình chuông với 5 lá đài nhưng không có cánh hoa Hoa đực dài khoảng 5mm mang một cột nhị chứa 10 nhị đực chia làm hai vòng trên cột nhị Hoa cái dài khoảng 8mm màu vàng lục có 3 noãn cùng 3 vòi nhụy màu trắng hơi dính Hoa sống trong 2 tuần, khi nở hoa đực nở trước trong vòng một ngày thì rụng, còn hoa cái

nở trong 3- 5 ngày Thường hoa cái và hoa đực không nở cùng lúc nên thường xảy ra hiện tượng thụ phấn chéo giữa các cây khác nhau (Nguyễn Thị Huệ, 1997)

Mủ cao su là sản phẩm chính trong quá trình khai thác mủ Mủ nước là một dung dịch thể keo, màu trắng đục và có tỷ trọng khoảng từ 0.974 – 0.991 Mủ tươi là

hệ phân tán bao gồm các phần tử mang điện tích âm phân tán trong dung dịch serum

Có 3 thành phần chủ yếu trong mủ cao su đó là Cao Su chiếm 30% - 45%, các hạt Lutoid chiếm 10% - 20% và còn lại là các hạt Frey – Wyssling 1% - 3%

Bảng 2.2: Diện tích, sản lượng và năng suất cao su trong nước giai đoạn 1996 – 2005

Năm Chỉ Số Đơn Vị 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005

Diện Tích 1000 ha 254 348 382 395 412 416 429 441 454 480

Sản Lượng 1000 tấn 143 187 194 249 291 313 297 364 400 469

Năng xuất 100kg/ha/năm 5.61 5.37 5.07 6.3 7.06 13 12.2 13.6 13.1 14.1

(Tập đoàn công nghiệp cao su Việt Nam, 2006)

Tại Việt Nam, cao su sinh trưởng tốt trong giới hạn vĩ độ địa lý từ 150 vĩ Bắc

đến 50 vĩ Nam, trên các loại đất feralit vàng đỏ hay vàng nhạt, đất bazan nâu đỏ, hoặc

đất nâu vàng trên phù sa cổ Khu vực sinh thái phù hợp để trồng cây cao su phải có các

điều kiện: Độ cao dưới 700m không bị ngập úng, không có lớp kết non hoặc tầng sỏi,

đá trong phạm vi độ sâu 80cm cách mặt đất Độ dốc dưới 30%, nhiệt độ bình quân

năm từ 25 – 280C, với lượng mưa trung bình năm trên 1500mm, giờ nắng trung bình

năm hơn 1600giờ (Nguyễn Thị Huệ, 1997)

Bên cạnh những thuận lợi về điều kiện tự nhiên còn được sự quan tâm của

Chính Phủ nên diện tích gieo trồng cao su trong cả nước theo thời gian ngày càng gia

tăng, theo đó sản lượng và năng suất cũng được cải tiến rõ rệt (Bảng 2.2)

Bảng 2.3: Mười giống cao su có diện tích lớn nhất cả nước năm 2004

2.1.1 Dòng vô tính RRIV4

Dòng vô tính RRIV4 còn có tên khác LH 82/182 và BK15, lai tạo năm 1982 tại viện nghiên cứu cao su Việt Nam, được xếp vào Bảng II trong cơ cấu giống ở giai đoạn 1999 – 2001, được công nhận cho sản xuất trên diện tích rộng từ năm 1997 Dòng vô tính RRIV4 được viện nghiên cứu cao su Việt Nam tuyển sớm 1983, đưa vào

sơ tuyển từ năm 1987 Hiện nay, dòng vô tính RRIV4 được trồng nhiều ở Đông Nam

Bộ, tại các công ty thuộc Tập đoàn Công nghiệp cao su Việt Nam Sinh trưởng tốt trong giai đoạn kiến thiết cơ bản, phát triển nhanh ở các năm đầu, có độ đồng đều cao trong thời gian kiến thiết cơ bản.Tăng trưởng dưới trung bình đến kém trong khi cạo, năng suất rất cao dẫn đầu trong các giống hiện đang khuyến cáo tại Việt Nam Dòng

vô tính RRIV4 có khả năng kháng gió rất kém

2.1.2 Dòng vô tính PB235

Dòng vô tính PB235 có xuất xứ từ trạm Prang Besar, Công ty Golden Hope, Malaysia chọn lọc trên vườn cây lai năm 1955 Ở Việt Nam đã trồng và chiếm tỷ lệ cao nhất trên diện tích cao su của Tổng công ty cao su Việt Nam trồng từ năm 1976 –

2000 (34,7%) Cao nhất ở khu vực Đông Nam Bộ, Tây Nguyên (29,7%) và Miền Trung (16,6%) Giai đoạn kiến thiết cơ bản thì sinh trưởng và phát triển mạnh ở những vùng có điều kiện thuận lợi, rút ngắn thời gian KTCB so với giống RRIM600 Dòng

vô tính PB235 có triển vọng và nổi bật hơn hẳn so với các DVT khác trong điều kiện thuận lợi như nhau, nhưng lại giảm sút rõ rệt trong điều kiện bất lợi Hiện nay diện tích trồng mới, tái canh DVT PB235 chỉ ở mức hạn chế do dễ bị khô miệng cạo và nhất là kháng gió kém Có những bất cập trong sơ chế là mủ kem có màu vàng, độ nhớt Mooney không thích hợp cho mủ CV (50 - 60)

2.1.3 Dòng vô tính PB255

Có xuất xứ từ trạm Prang Besar, công ty Golden Hope, Malaysia Ở Việt Nam PB255 được xếp vào Bảng I trong cơ cấu giống ở giai đoạn 1999 - 2001, có trên các vườn khảo nghiệm và sản xuất thử ở nhiều vùng năm 1992 Hiện nay, dòng vô tính PB255 đươc trồng ở Đông Nam Bộ tại các Công Ty cao su thuộc Tập đoàn Công nghiệp cao su Việt Nam Sinh trưởng từ trung bình đến khá trong giai đoạn kiến thiết

cơ bản và tăng trưởng khá trong khi cạo, sinh trưởng biến thiên rõ, đặc biệt sinh trưởng rất tốt ở những nơi đầy đủ nước và chăm sóc tốt, phát triển chậm nơi đất nghèo dinh

dưỡng hoặc thiếu chăm sóc Dòng này cho năng suất cao ở những vùng thuận lợi, có tiềm năng năng suất nhờ đáp ứng rõ với thuốc kích thích Có triển vọng cho nhiều vùng trồng cao su ở Việt Nam, đặc biệt những vùng có gió mạnh

2.1.4 Dòng vô tính PB260

Có xuất xứ từ trạm Prang Besar, công ty Golden Hope, Malaysia Ở Việt Nam được xếp vào Bảng II trong cơ cấu giống từ năm 1994, đã đưa vào sơ tuyển năm 1986, chung tuyển 1989, sản xuất thử 1991 Hiện nay, dòng vô tính PB260 được trồng rất nhiều ở Đông Nam Bộ, tại các công ty cao su thuộc Tập đoàn Công nghệp cao su Việt Nam Sinh trưởng từ trung bình đến khá trong giai đoạn kiến thiết cơ bản ở Đông Nam Bộ và Tây Nguyên, tăng trưởng khá trong khi cạo Năng suất cao, là giống có triển vọng cho nhiều vùng trồng cao su ở Việt Nam Dòng vô tính PB260 sinh trưởng

và sản lượng ổn định trong điều kiện môi trường khác nhau

2.2 Điều kiện sinh thái miền Đông Nam Bộ

và trên đất Lào, Campuchia Mỗi năm có hai mùa rõ rệt (mùa mua và mùa khô) Nhiệt

độ bình quân trong năm từ 26 – 280C Lượng mưa bình quân từ 1800 – 2000mm / năm Mùa mưa bắt đầu từ tháng 4 và kéo dàì đến tháng 11, mùa khô từ tháng 12 – 03 năm sau Đây cũng là nơi ít chịu ảnh hưởng của mưa bão nhưng khi mưa thì thường

tập trung nhiều ngày, bên cạnh đó còn bị ảnh hưởng bởi sương mù tạo nên nhữg tiểu vùng khí hậu ẩm ướt trong vườn cây cao su, tạo điều kiện cho nấm bệnh phát triển và tấn công gây hại trên cây cao su (Nguyễn Thị Hụê, 1997)

2.2.2 Về đất đai

Miền Đông Nam Bộ có hai nhóm đất chính: Đất đỏ bazan và đất xám phù sa cổ

Đất đỏ bazan: Có cao trình từ 100 – 250m so với mực nước biển, địa hình đồi

dốc và có độ dốc tương đối cao Đất có thành phần cơ giới từ nặng đến trung bình, có kết cấu viên rất đều nên có độ tơi xốp khá từ 59 – 61%, khả năng giữ ẩm tốt, tốc độ thấm nước trung bình Đất đỏ bazan thường có độ pH = 4,0 – 4,5, tầng đất mặt giàu chất hữu cơ, hàm lượng mùn trung bình khoảng 2,8% Hiện tượng kết von (laterit hoá) đôi khi xuất hiện dày đặc gần lớp đất mặt, tuy nhiên có một số nơi tầng đất canh tác cạn (Nguyễn Thị Huệ, 1997)

Đất xám phù sa cổ: Thường có dịa hình tương đối bằng phẳng, cao trình thấp

từ 30 – 50m so với mực nước biển Thành phần cơ giới nhẹ, tầng canh tác mỏng thường bị giới hạn bởi hiện tượng kết von đá ong (laterit hoá) rời rạc hoặc dày đặc (> 70%) nằm cách mặt đất khoảng 50 – 80cm, có nhiều nơi nằm lộ hẳn lên khỏi mặt đất Đất nghèo dinh dưỡng, kém tơi xốp, độ pH =4,0 – 4,3, hàm lượng mùn trung bình thấp (1,56%) và giảm mạnh theo chiều sâu

2.3 Giới thiệu chung về nấm Phytophthora

Phytophthora được đặt tên bởi Bary (1887) Đây là một loại rất phổ biến thuộc

giới Chromista và lớp Oomycetes Với một số điểm đặc trưng tập hợp các bộ phận từ nấm thật bao gồm:

- Động bào tử có 2 lông roi

- Vách tế bào bao gồm Cellulose và polysacarit nhiều hơn chitin

- Thể lưỡng bội

- Với khoảng 67 loài đã được mô tả (Erwin, D.C and Ribero, O.K 1996)

Các loài Phytophthora tấn công gây hại trên rất nhiều loại cây trồng và là những tác

nhân gây ra một số dịch bệnh cho cây trồng trên thế giới Vấn đề bệnh gây hại do

Phytophthora đã được nghiên cứu khá nhiều ở Châu Âu, tuy nhiên đây lại là loại bệnh

hại phổ biến ở vùng nhiệt đới và gây ra nhiều bệnh nguy hiểm, làm mất mùa cũng như ảnh hưởng nghiêm trọng đến sự sinh trưởng và phát triển của các loại cây ăn quả ở

vùng này như bệnh thối rễ, thối lỡ cổ rễ, loét thân, lụi tàn lá và thối trái Nấm

Phytophthora palmivora là một trong những tác nhân gây ra rất nhiều bệnh trên nhiều

loại cây trồng khác nhau chẳng hạn như: Loét sọc mặt cạo, rụng lá mùa mưa trên cây cao su; thối vỏ trái cây ca cao; thối rễ, thân trên cây đu đủ; thối rễ, loét thân sầu riêng; thối rễ và tàn rụi trên cây cam,quýt

Phytophthora là một nhóm lớn có mặt hầu như khắp nơi trên thế giới và có

khoảng hơn 1.000 cây ký chủ, một vài loài của Phytophthora đã trở thành dịch hại

(Gregory, 1983)

2.3.1 Đặc điểm sinh vật học

Lớp Oomycetes có những đặc trưng về hình thái và chu kỳ sống giống nấm thật Tuy nhiên, chúng có những phân biệt khá rõ ràng Basiomycetes và Ascomycetes dựa trên những đặc điểm về di truyền học và cơ chế sinh sản của chúng (Erwin và Ribeiro, 1996) Việc xếp chúng vào ngành (giới) Chromista và lớp Oomycetes (Cavalier và Smith, 1996) Được chứng minh bằng các đặc trưng và các biến đổi trong con đường tiến hóa (Elliott, 1983; Hendrix, 1973; Wang và Garcia, 1973) Sự hiện diện của β-glucans nhiều hơn chitin trong vách tế bào (Bartnicki, Garcia và Wang, 1983) Hình thành động bào tử có lông roi không đều (Desjardins và ctv, 1969) và chiếm ưu thế trong giai đoạn lưỡng bội trong chu kỳ sinh trưởng phát triển của nấm (Erwin và Ribeiro, 1996) Ngoài ra, Oomycetes là dạng nấm phát triển đơn bào, sinh sản vô tính bằng động bào tử và sinh sản hữu tính bằng bào tử trứng (Oospore) (Vũ Triệu Mân và Lê Lương Tề, 1998)

tử Khi chiếu sáng ở phạm vi gần có bước sóng 320 – 475 nm kích thích sự hình thành túi bào tử và chúng không hình thành trong điều kiện môi trường có pH cao (> 7) Sự

hiện diện của ion Cu2+ cũng hạn chế hình thành túi bào tử (André Drenth và Barbara Sendall, 2001)

Động bào tử: Được hình thành dưới điều kiện như ở hình thành túi bào tử, chúng đòi hỏi có nhiều nước tự do và nhiệt độ thấp hơn khoảng từ 15 – 180C Chúng là bào tử vách mỏng, vô tính, có dạng hình bầu dục và có khả năng bơi bằng hai lông roi Khi bơi thì chúng bơi theo đường xoắn ốc và độ lớn của đường bơi khoảng từ 26 – 70

mm trong môi trường nếu không bị tắc nghẽn (yêu cầu khoảng trống của hạt đất có đường kính khoảng từ 50 – 140 mm) động bào tử có thể bơi với tốc độ 563 mm/giờ Những va chạm với bề mặt xung quanh làm cho chúng trở nên mất phương hướng cũng như làm giảm phạm vi hoạt động của chúng Sự di chuyển cũng như quá trình nảy mầm của động bào tử có khả năng dị hóa các acid amino serine, glutamate và asparagine và bị hấp thụ bởi acid amino của dịch tiết ra từ rễ cây Động bào tử trở nên

ít di động khi nhiệt độ môi trường tăng, pH thấp, tiếp xúc với bề mặt và nồng độ bào

tử thấp động bào tử được sinh ra trong túi bào tử và thoát ra qua một lỗ nhỏ ở đầu túi khi túi trưởng thành Có nhiều động bào tử được hình thành trong mỗi túi bào tử, điều

này cho phép nấm Phytophthorra sản xuất một khối lượng lớn nguồn lây nhiễm hơn là

một túi bào tử đơn độc cũng như làm tăng khả năng lây nhiễm đến những ký chủ mới Động bào tử bơi trong khoảng vài phút đến một giờ và bơi hầu như không có phương hướng, nhưng lại bị hấp dẫn trực tiếp bởi dịch tiết ra từ rễ cây Chỗ vết thương hay những phần mọng nước của rễ và chồi ngọn là những vùng thích hợp nhất cho sự lây nhiễn của nấm Khi động bào tử tiếp xúc với một bề mặt thích hợp thì chúng sẽ biến đổi thành dạng tròn, hai lông roi biến mất, nhanh chóng tiết ra tế bào vách và bắt đầu hình thành một ống mầm để xâm nhiễm vào cây, bắt đầu sinh trưởng sợi nấm Khi tiến hành xâm nhiễm thì động bào tử xuyên thẳng vào cây ký chủ qua rễ hoặc qua khí khổng, chúng hình thành giác múc (bộ phận để xuyên qua các tế bào của cây)

Bào tử noãn: Là dạng bào tử hữu tính, được hình thành từ sự kết hợp của các túi giao tử được gọi là túi noãn và túi đực Trong đó sterol là thành phần thiết yếu cho sự hình thành bào tử noãn Bào tử noãn bị ức chế bởi điều kiện ánh sáng Nhiệt độ cần thiết cho sự hình thành bào tử noãn thấp hơn so với sự phát triển của túi noãn

Hình 2.1 Chu kỳ phát triển của Phytophthorra (Drenth, 1994)

Tỷ lệ C/N 94:1 thúc đẩy sự hình thành các bào tử noãn, (Ca cũng có ý nghĩa tương tự) Bên cạnh đó bào tử noãn đựơc xem như là một cấu trúc nghỉ và khi trong điều kiện không thích hợp cho sự phát triển thì chúng sẽ đi vào giai đoạn ngủ nghỉ Khi điều kiện thích hợp trở lại cho sự sinh trưởng thì chúng sẽ hình thành sợi nấm sau

đó hình thành túi bào tử và động bào tử (André Drenth và Barbara Sendall, 2001) Bào tử vách dày: Đây là một dạng cấu trúc nghỉ vô tính Chúng là những tế bào sinh dưỡng được hình thành bên trong sợi nấm hay tại các đầu chóp của sợi nấm Chúng phát triển vách dày và có thể tồn tại trong điều kiện khắc nghiệt Điều kiện tối thích cho sự hình thành bào tử vách dày là nhiệt độ trong khoảng 150C có sự hiện diện của sterol trong môi trường nuôi cấy và một tỷ lệ C/N (30:1) Sự nảy mầm có thể xảy

ra khi nồng độ dinh dưỡng cao, nhất là glucose và asparagine Tất cả các dạng bào tử đều yêu cầu có nước tự do cho sự nảy mầm Bào tử thường tồn tại trong tàn dư thực vật hay trong đất Mầm bệnh lan rộng được là dựa vào khả năng có thể khuyếch tán nhờ gió, nước mưa, côn trùng và nhất là con người Chúng sống tự do như một loài hoại sinh trong một thời gian nhất định trước khi tìm được ký chủ thích hợp (André Drenth và Barbara Sendall, 2001)

2.3.3 Những nghiên cứu trong nước và ngoài nước về bệnh Phytophthora trên cây cao su

- Những nghiên cứu ngoài nước

Ở khu vực Đông Nam Á cây cao su được trồng với diện tích khá lớn bao gồm các quốc gia như Malaysia, Indonesia, Thái Lan và Việt Nam Đặc biệt là những vùng phía nam của Thái Lan với lượng mưa trung bình hàng năm từ 2000 – 3000mm và nhiệt độ trung bình khoảng 26 – 280C Nguyên nhân của một số loài bệnh do các loài

Phytophthora khác nhau gây ra đã làm cho các sản phẩm cao su ở Thái Lan bị hạn chế

Những loại bệnh quan trọng do Phytophthora trên cây cao su như bệnh rụng lá mùa

mưa và bệnh loét sọc mặt cạo (André Drenth and Barbara Sendall, 2001)

Năm 1996, rụng lá mùa mưa bộc phát và được RRIM (Rubber Research Instiute

of Malaysia) điều tra hàng năm cho thấy bệnh phân bố và gây hại nặng ở vùng Bắc Pelis và Kedah, đảo Langkawi và Tây Bắc Perak của Malaysia và được RRIM bổ sung vào bản đồ bệnh (Wastie, R.L, 1973)

- Những nghiên cứu trong nước

Tại Việt Nam, theo ghi nhận ban đầu của RRIV (Rubber Research Institute of

Viet nam, Viện nghiên cứu cao su Việt Nam, 1996) có 2 loài Phytophthora gây hại trên cây cao su trong đó Phytophthora pamivora hiện diện nhiều trên mặt cạo và

Phytophthora botryosa hiện diện nhiều trên lá và trái cao su

Bệnh rụng lá mùa mưa trên cây cao su do nấm Phytophthora botryosa làm giảm

sản lượng từ 40 – 45% và tỷ lệ đậu trái từ 75 – 80% (Đặng Vũ Thị Thanh và Hà Minh Trung, 1999)

Theo Võ Thị Thu Oanh, 1999, bệnh do nấm Phytophthora botryosa gây ra

Bệnh xảy ra chủ yếu trong mùa mưa, những vùng có nhiệt độ thấp và ẩm độ cao, bệnh thường xuất hiện trên những vết thương mới, gây rụng lá già, cuống lá và làm thối trái, xãy ra trong mùa mưa, mức độ gây hại khác nhau tùy thuộc vào điều kiện khí hậu và từng DVT cao su Điển hình của bệnh là trên cuống lá bị rụng có một hoặc nhiều cục

mủ trắng (hình 2.1).Trái cao su nhiễm bệnh thì bị thối, không bị rụng Nấm cũng gây chết tược ghép mới trồng và chết cây con ở vườn nhân, vườn ươm (Tổng công ty cao

su Việt Nam, 2004)

Trong điều kiện thời tiết khí hậu khu vực Miền Đông Nam Bộ, bệnh rụng lá mùa mưa thường xuất hiện tập trung trên những vườn cây khai thác nằm ở vùng dưới thung lũng, trên những diện tích có lượng mưa tập trung, vườn cây không thông thoáng Tại Tây Nguyên những kết quả điều tra năm 1996 cho thấy bệnh xuất hiện vào đầu mùa mưa, bắt đầu vào tháng 7 và cao điểm là những tháng có lượng mưa cũng như

số giờ mưa trong ngày cao (tháng 9 - 10) Trên cùng một địa điểm thì DVT RRIM600

bị nhiễm bệnh rụng lá nặng hơn so với DVT GT1 (Phan Thành Dũng, 2000)

Bệnh do nấm Phytophthorra spp gây hại trên tất cả các giai đoạn sinh trưởng

của cây từ giai đoạn cây con ở vườn ươm, vườn nhân, vườn cây kiến thiết cơ bản và vườn cây kinh doanh Từ các vết bệnh trên thân, cành, cuống lá, nhựa tự chảy ra thành giọt (xì mủ) (Phan Thành Dũng, 2000)

Theo Nguyễn Hải Đường và cộng sự (1990) trên vùng đất xám và đất đỏ ở khu

vực Miền Đông nam Bộ cho thấy Phytophthorra spp gây hại cho cây cao su trên vùng

đất đỏ (Phú Riềng, Bình Long, Đồng Nai) nặng hơn so với vùng đất xám (Dầu Tiếng) tình hình nhiễm bệnh trên DVT RRIM600 thường xuất hiện sớm hơn so với DVT GT1 trên cùng một địa điểm (Phan Thành Dũng, 2000)

Bệnh rụng lá mùa mưa do nấm Phytophthorra spp có:

Tác hại: Bệnh xảy ra trong mùa mưa, mức độ gây hại khác nhau tùy thuộc vào điều kiện khí hậu và từng DVT Bệnh gây rụng lá già và làm thối trái

Triệu chứng: Điển hình của bệnh là trên cuống lá bị rụng có một hoặc nhiều cục

mủ trắng (hình 2.1) Trái cao su nhiễm bệnh thì bị thối, không rụng Nấm cũng gây chết tược ghép mới trồng và chết cây con ở vườn nhân, vườn ươm Bệnh cũng lây xuống mặt cạo, do đó khi vườn cây bị rụng 50 % tán lá thì phải giảm nhịp độ cạo hoặc cho nghỉ cạo trong mùa rụng lá nặng Các DVT nhiễm bệnh nặng: RRIM600, PB261, PB235, VM515, GT1 (Tổng công ty cao su Việt Nam)

Cục mủ hình thành trên cuống lá, thân cây và vết bệnh trên lá

Hình 2.2 Triệu chứng bệnh do Phytophthora gây ra trên DVT RRIM600 (hình được

chụp trong điều kiện nhà lưới)

2.3.4 Biện pháp phòng trừ

Bệnh rụng lá mùa mưa do Phytophthora gây ra trên cây cao su thường xảy ra

chủ yếu trong mùa mưa, tốc độ bệnh xảy ra nhanh, trên diện rộng, mức độ gây hại cũng tùy thuộc vào đặc tính của từng DVT và điều kiện thời tiết Bệnh hiện nay chưa

có biện pháp trị hiệu quả và cũng chưa được quan tâm đúng mức mà chủ yếu áp dụng các biện pháp phòng bệnh là chủ yếu Trường hợp vườn cây cao su non bị bệnh thì sử dụng Ridomil 68WG nồng độ 0,3% để trị Nếu chồi non nhiễm bệnh phải cắt bỏ phần

bị thối, thu gom cành bệnh mang đi xử lý, kết hợp với việc vệ sinh làm cỏ tạo điều kiện thông thoáng trong vườn cao su, phun thuốc có chứa đồng trước mùa bệnh phát sinh Khử trùng dụng cụ ghép và vết ghép bằng thuốc chuyên dụng

Chương 3 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu

Thời gian: 02/2009 – 06/ 2009

Địa điểm nghiên cứu: Phòng bệnh cây và nhà lưới – Khoa Nông Học - Trường

Cao đẳng Công nghiệp Cao su – Bình Phước

Bảng 3.1 Điều kiện thời tiết, khí hậu trong thời gian bố trí thí nghiệm

(Nguồn: Trạm khí tượng thủy văn tỉnh Bình Phước, 2009)

3.2 Nội dung nghiên cứu

- Xác định ngưỡng nồng độ gây bệnh của nấm Phytophthora spp trên dòng vô

tính PB255

- Khảo sát tính gây bệnh của nấm Phytophthora spp trên một số dòng vô tính

cao su RRIM600, RRIV4, PB235, PB255, PB260

- Khảo sát tính gây bệnh của nấm Phytophthora spp giữa cây mắt ghép và cây

gốc ghép cao su PB235

3.3 Phương pháp nghiên cứu

3.3.1 Vật liệu chủng

Bầu cây con giống PB235 dùng làm gốc ghép được trồng ở vườn ươm, khi

đường kính gốc khoảng 8 – 10mm, tiến hành ghép 5 dòng vô tính RRIM600, PB235,

PB255, PB260 và RRIV4 Khi mắt ghép được 20 ngày thì mở băng, sau khi mở băng

được 15 ngày thì cắt ngọn gốc ghép và nhấc bầu ra khỏi rãnh đem về nhà lưới Khi

chồi ghép lên, chọn những cây phát triển tương đối đồng đều để làm thí nghiệm Thí

nghiệm được chủng 6 loài nấm của Bộ môn bệnh cây trường Đại học Nông Lâm Tp

Hồ Chí Minh (Lê Văn Thành, 2006)

Bảng 3.2 Danh sách các loài nấm Phytophthora spp

1 RBP05- DT02 Đất, PB235 Công ty cao su Dầu Tiếng

2 RBP05- DT03 Đất, PB235 Công ty cao su Dầu Tiếng

3 RBR05- DT Đất, RRIM600 Công ty cao su Dầu Tiếng

4 RBR05- TB Lá, cuống lá, RRIM600 Công ty cao su Tân Biên

5 RBP05- TB Lá, cuống lá, PB235 Công ty cao su Tân Biên

6 RBG05- BL Lá, cuống lá GT1 Công ty cao su Bình Long

3.3.2 Phương pháp chuẩn bị dịch bào tử

Môi trường thông thường dùng cho quá trình nhận biết Phytophthorra : V-8

juice, cà rốt agar, lima bean agar

- Cách chuẩn bị môi trường PGA: Khoai tây : 200g

Gluco : 20g

Agar : 15g

Nước cất : 1000ml

Môi trường được khử trùng ở 1210C, 1 atm, trong thời gian 20 phút

- Chuẩn bị môi trường CRA : Cà rốt : 600g

CaCO3 : 15g

Agar : 15g

Nước cất : 1000ml

Môi trường được hấp tiệt trùng ở 1210C, 1atm, trong thời gian 20 phút

- Cách chuẩn bị môi trường khoáng (MSS)

Khuấy từ 30 phút cho tan, hấp tiệt trùng ở 1210C, 1atm, trong thời gian 20 phút

- Nhân sinh khối nấm và tạo dịch động bào tử: Cấy từng khoảnh nấm có đường kính 4 – 5mm cùng độ tuổi (3 NSC) vào trung tâm đĩa peptri, thêm vào 10 – 15ml CR 20% Ủ tối trong 3 ngày ở nhiệt độ phòng (26 – 280C) đến khi tản nấm có đường kính 2 – 3cm Sau đó rửa tản nấm bằng nước cất tiệt trùng 2 – 3 lần Tiếp đó cho vào 10 – 15ml dung dịch khoáng và phơi sáng 12 – 24 giờ để cho tản nấm hình thành bào tử Thay khoáng bằng nước cất tiệt trùng, làm lạnh 30 phút để bào tử phóng

động bào tử (hình 3.1)

- Cách chuẩn bị nồng độ động bào tử: Cố định động bào tử bằng Vortex sau

đó đếm động bào tử trên buồng đếm hồng cầu

3.3.3 Phương pháp khảo sát phản ứng của nấm Phytophthora spp đối với một số

dòng vô tính cao su

Các dòng vô tính cao su

Các mẫu nấm Phytophthora

Ký hiệu RBP05- DT02 P2 Dòng vô tính PB255

3.3.3.1 Xác định nồng độ gây hại trên các dòng vô tính

Xác định nồng độ gây hại của nấm Phytophthora spp ở nồng độ 103, 105, 107 động bào tử/ml trên DVT PB255

Bầu cây con sử dụng PB 235 làm gốc ghép được trồng ngoài vườn ươm, khi đường kính gốc ghép đạt từ 10 – 12 cm thì tiến hành ghép DVT PB255 Khi chồi ghép lên 1 – 2 tầng lá ổn định, tiến hành chọn những cây tương đối đồng đều cả về chiều cao và đường kính để trồng làm thí nghiệm

Thí nghiệm gồm có 4 nghiệm thức:

Nghiệm thức 1 phun dung dịch nấm ở nồng độ 103 động bào tử/ml

Nghiệm thức 2 ở nồng độ 105 động bào tử/ml

Nghiệm thức 3 ở nồng độ 107 động bào tử/ml

Nghiệm thức 4 đối chứng phun nước cất

Mỗi nghiệm thức phun 6 mẫu nấm trên DVT PB255 (5 cây/DVT/mẫu nấm) Tổng thí nghiệm có 120 cây

Chỉ tiêu theo dõi:

-Thời gian xuất hiện bệnh được xác định từ thời điểm phun dung dịch nấm (8 giờ tối) đến khi có triệu chứng bệnh biểu hiện trên các bộ phận của cây

- Thời gian theo dõi: tiến hành theo dõi hàng ngày sau khi chủng

- Chỉ tiêu theo dõi: xác định tỷ lệ bệnh trên tất cả các bộ phận bị hại của cây ở các ngưỡng nồng độ dung dịch bào tử

3.3.3.2 Khảo sát phản ứng của một số dòng vô tính cao su đối với nấm

Phytophthora spp

Cây cao su sử dụng để khảo sát phản ứng của nấm Phytophthora là 5 DVT

RRIM600, PB235, PB255, PB260 và RRIV4 Bầu cây con sử dụng PB235 làm gốc ghép được trồng ngoài vườn ươm, khi đường kính gốc ghép đạt từ 10 – 12cm thì tiến hành ghép 5 DVT RRIM600, PB235, PB255, PB260 và RRIV4 Khi chồi ghép lên 1 –

2 tầng lá ổn định, tiến hành chọn những cây tương đối đồng đều cả về chiều cao và đường kính để trồng làm thí nghiệm Nồng độ dung dịch bào tử phun là 105 động bào tử/ml

Thí nghiệm trồng 5 dòng vô tính trên 5 hàng, 10 cây/hàng Tổng số cây thí nghiệm là 450 cây Thí nghiệm được bố trí theo sơ đồ, trong điều kiện nhà lưới, phía trên nhà lưới được phủ màng PE màu đen Trong nhà lưới luôn giữ ẩm độ > 85 % và nhiệt độ từ 25 – 280C

Chỉ tiêu theo dõi:

- Quan trắc, theo dõi và điều tra số lá, cuống lá, và thân bị bệnh hàng ngày trên từng DVT

- Xác định tỷ lệ lá bệnh, tỷ lệ cuống bệnh và tỷ lệ thân bệnh Được tính theo công thức:

Tỷ lệ (%) = m / n x 100

m: Số cây, thân, cuống và lá bị bệnh

n: Tổng số cây, thân, cuống và lá điều tra

- Xác định tốc độ phát triển vết bệnh trên lá, cuống và trên thân Dựa trên kết quả đo chiều dài và chiều ngang vết bệnh (nếu có)

Kích thước trung bình vết bệnh trên lá tính theo công thức: KTVB (mm) = (a + b) / 2 Trong đó: a là chiều dài vết bệnh, b là chiều ngang vết bệnh

Tốc độ phát triển vết bệnh trên lá, trên cuống (mm/ngày) được áp dụng theo cách tính: (A +B +C) / 3

Trong đó: A là KTVB 2 ngày sau chủng / 2

B là KTVB 3 ngày sau chủng - KTVB 2 ngày sau chủng

C là KTVB 4 ngày sau chủng - KTVB 3 ngày sau chủng

Tốc độ phát triển vết bệnh trên thân (mm/ngày) được áp dụng theo cách tính:

(A +B +C) / 3

Trong đó: A là KTVB 2 ngày sau chủng / 2

B là KTVB 4 ngày sau chủng /2 - A

C là KTVB 4 ngày sau chủng /2 - B

- Quan sát, mô tả triệu chứng biểu hiện, vị trí gây hại của các loài nấm

- Xác định tỷ lệ cuống lá rụng trên các DVT khi triệu chứng bệnh xuất hiện sau 2 – 3 –

4 ngày

3.3.3.3 Khảo sát tính gây bệnh của nấm Phytophthora spp giữa cây mắt ghép và

Mỗi thí nghiệm trồng 2 giống trên 2 hàng, 10 cây/hàng Tổng số cây thí nghiệm 180 cây

Chỉ tiêu theo dõi:

- Quan trắc hàng ngày mức độ nhiễm bệnh trên lá, cuống lá và trên thân của cây mắt ghép và cây gốc ghép (mọc từ hạt) Theo công thức tính:

Tỷ lệ (%) = m / n x 100

m: Số cây, thân, cuống và lá bị bệnh

n: Tổng số cây, thân, cuống và lá điều tra

3.4 Phương pháp xử lý số liệu

Tính toán các giá trị trung bình, tỷ lệ % bệnh bằng phần mềm Excel

Chương 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

4.1 Xác định nồng độ gây hại của nấm Phytophthora spp ở ngưỡng nồng độ 103 ,

10 5 , 10 7 động bào tử/ml trên DVT PB255

Sau khi chủng 6 mẫu nấm với 3 nồng độ trên DVT cao su PB255 Kết quả quan

sát cho thấy, cả 6 mẫu nấm đều có khả năng gây hại trên lá, cuống lá và thân Tại vị trí mắt ghép và gốc ghép không xuất hiện triệu chứng Triệu chứng chỉ xuất hiện ở 2 nồng

độ 105 và 107 động bào tử/ml còn ở nồng độ103 động bào tử/ml thì triệu chứng không xuất hiện Qua bảng 4.1 cho thấy, thời gian xuất hiện triệu chứng bệnh ở nồng độ 107động bào tử/ml xuất hiện sớm hơn ngưỡng nồng độ105

Bảng 4.1 Thời gian xuất hiện triệu chứng khi chủng 6 mẫu nấm ở 3 nồng độ trên DVT

Sau 2 ngày chủng thì triệu chứng bắt đầu xuất hiện, kết quả bảng 4.2 cho thấy,

tỷ lệ nhiễm bệnh gia tăng khi nồng độ bào tử chủng tăng Khi chủng ở nồng độ 103động bào tử/ml tất cả các bộ phận của cây cao su đều không bị bệnh nhưng ở nồng độ chủng 105 động bào tử/ml đến 107 động bào tử/ml thì các bộ phận (lá, cuống, thân) của cây bắt đầu nhiễm bệnh Tỷ lệ nhiễm bệnh ở nồng độ 105 động bào tử/ml thấp hơn so với nồng độ 107 động bào tử/ml Như vậy, ở nồng độ 105 động bào tử/ml thì cây cao su

bắt đầu bị nhiễm bệnh, đây là cơ sở để sử dụng nồng độ 105 động bào tử/ml cho các bố trí thí nghiệm sau

Bộ phận nhiễm bệnh

Tổng số Cây Chủng

Tỷ lệ (%) bệnh

Thời gian xuất hiện bệnh (giờ)

Tổng số Cây Chủng

Tỷ lệ (%) bệnh

Thời gian xuất hiện bệnh (giờ)