A. PHƯƠNG PHÁP KHỐI PHỔI. TỔNG QUAN VỀ KHỐI PHỔ: Khối phổ (mass spectrometry – MS): là một kỹ thuật quang phổ do nhà vật lí học người Anh Joseph John Thomson phát minh ra vào năm 1897. Chính nhờ kĩ thuật này đã giúp Thomson phát hiện ra các đồng vị của nguyên tố và chứng minh sự tồn tại hai đồng vị của khí Neon. Với phát minh này đã giúp Thomson giành được giải thưởng Nobel năm 1906.1. Khối phổ là gì?Là một kỹ thuật phân tích hóa học giúp xác định hàm lượng và loại chất hóa học có trong một mẫu bằng cách đo tỷ lệ khối lượng trên điện tích và số lượng của các ion pha khí từ phân tử hoặc nguyên tử của mẫu. Dùng thiết bị chuyên dụng là khối phổ kế. Kĩ thuật này có nhiều ứng dụng, thường được kết hợp với một số sinh học phân tử khác như:•Khối phổ kết hợp với sắc ký khí.•Khối phổ kết hợp với sắc ký lỏng.•Khối phổ kết hợp điện di2. Nguyên lý của phương pháp khối phổ:Là kỹ thuật phân tích đo phổ về khối lượng của các phân tử tích điện khi chúng di chuyển trong điện trường. Các ion được tạo thành trong buồng ion hóa, được gia tốc và tách riêng nhờ bộ phận phân tích khối phổ trước khi đến detector. Tất cả các quá trình này diễn ra trong hệ thiết bị chân không.Tín hiệu tương ứng với các ion sẽ được thể hiện bằng một số vạch (pic) có cường độ khác nhau tập hợp lại thành một khối phổ đồ hoặc phổ khối. Dữ liệu phổ khối được tự động ghi lại và sử dụng để nhận dạng mẫu bằng các công cụ tin sinh học. Đồng thời, có thể xác định cấu trúc cũng như là định lượng các chất trong mẫu mà ta phân tích http:www.biomedia.vnreviewphuongphapkhoiphoms.html3. Sự hình thành khối phổ (sự ion hóa): Để có thể nghiên cứu các chất bằng pp khối phổ thì các phân tử chất nghiên cứu ở dạng khí hoặc hơi phải được ion hóa bằng phương pháp thích hợp. Phương pháp ion hoá bằng va chạm điện tử (dùng phổ biến nhất)•Trong buồng ion hoá, các điện tử phát ra từ cathode (làm bằng vonfram hoặc reni) bay về anode với vận tốc lớn. •Các phân tử chất nghiên cứu ở trạng thái hơi sẽ va chạm với điện tử trong buồng ion hoá, có thể nhận năng lượng điện tử và bị ion hoá. Phương pháp ion hóa bằng trường điện từ (dùng khá phổ biến)4. Máy khối phổ: là một thiết bị dùng cho phương pháp khối phổ, cho ra phổ khối lượng của một mẫu, để tìm ra thành phần của nó. Có thể ion hóa mẫu và tách các ion của nó với các khối lượng khác nhau và lưu lại thông tin dựa vào việc đo đạc cường độ dòng ion. Tùy theo loại điện tích của ion đem nghiên cứu mà người ta phân biệt máy khối phổ ion dương hoặc ion âm. Một khối phổ kế thông thường gồm 3 phần:•phần nguồn ion•phần phân tích khối lượng•phần đo đạc.
Trang 1TIỂU LUẬN MÔN CÁC KĨ THUẬT CƠ BẢN TRONG NGHIÊN CỨU SINH HỌC THỰC
NGHIỆM
Đ tài : ề
S D NG PH Ử Ụ ƯƠ NG PHÁP KH I PH VÀ Ố Ổ
D U PHÓNG X TRONG NGHIÊN C U Ấ Ạ Ứ
SINH H C TH C NGHI M Ọ Ự Ệ
Giảng viên hướng dẫn : PGS.TS Lê Thị Phương Hoa
TS Đào Văn Tấn Học viên : Nguyễn Thị Ngọc Liên
Mã học viên : K27 0257
Trang 2CÁC KĨ THUẬT CƠ BẢN TRONG NGHIÊN CỨU NGUYỄN THỊ NGỌC LIÊN
SINH HỌC THỰC NGHIỆM K27-0257
M C L C: Ụ Ụ
A PHƯƠNG PHÁP KH I PH 3Ố Ổ
I T NG QUAN V KH I PH 3Ổ Ề Ố Ổ
1 Kh i ph là gì 3ố ổ
2 Nguyên lý c a phủ ương pháp kh i ph 3ố ổ
3 S hình thành kh i ph (s ion hóa) 4ự ố ổ ự
4 Máy kh i ph 4ố ổ
II NG D NG 6Ứ Ụ
1 ng d ng c a máy kh i ph trong phân tích protein 7Ứ ụ ủ ố ổ
2 S k t h p các phự ế ợ ương pháp sinh h c phân t khác 9ọ ử 2.1 Kh i ph k t h p v i s c kí khí(Gas Chromatography Mass ố ổ ế ợ ớ ắ
Spectometry) 9
2.2 S c lí l ng k t h p kh i ph (LS/MS/MS) 11ắ ỏ ế ợ ố ổ 2.3 Đi n di k t h p kh i ph 11ệ ế ợ ố ổ III U NHƯ ƯỢC ĐI M C A PHỂ Ủ ƯƠNG PHÁP KH I PH 12Ố Ổ
1 u đi m 12Ư ể
2 Nhược đi m 12ể
B PHƯƠNG PHÁP ĐÁNH D U PHÓNG X 12Ấ Ạ
I T NG QUAN V ĐÁNH D U PHÓNG X 12Ổ Ề Ấ Ạ
1 Khái ni m 12ệ
2 Nguyên lý 13
3 Yêu c u c a các đ ng v phóng x 13ầ ủ ồ ị ạ
II NG D NG 14Ứ Ụ
1 Trong nghiên c u sinh h c và công nông nghi p 14ứ ọ ệ
2 Trong y h c 17ọ
3 Trong kh o c 18ả ổ
TÀI LI U THAM KH O 18Ệ Ả
Trang 3A PH ƯƠ NG PHÁP KH I PH Ố Ổ
I T NG QUAN V KH I PH : Ổ Ề Ố Ổ
- Kh i ph (mass spectrometry – MS): là m t kỹ thu t quang ph do nhà v t lí h c ố ổ ộ ậ ổ ậ ọ
người Anh Joseph John Thomson phát minh ra vào năm 1897
- Chính nh kĩ thu t này đã giúp Thomson phát hi n ra các đ ng v c a nguyên t ờ ậ ệ ồ ị ủ ố
và ch ng minh s t n t i hai đ ng v c a khí Neon ứ ự ồ ạ ồ ị ủ
- V i phát minh này đã giúp Thomson giành đớ ược gi i thả ưởng Nobel năm 1906
1 Kh i ph là gì? ố ổ
Là m t kỹ thu t phân tích hóa h c giúp xác đ nh hàm lộ ậ ọ ị ượng và lo i ch t hóa ạ ấ
h c có trong m t m u b ng cách đo t l kh i lọ ộ ẫ ằ ỷ ệ ố ượng trên đi n tích và s lệ ố ượng c a ủ các ion pha khí t phân t ho c nguyên t c a m u ừ ử ặ ử ủ ẫ
- Dùng thi t b chuyên d ng là kh i ph k ế ị ụ ố ổ ế
- Kĩ thu t này có nhi u ng d ng, ậ ề ứ ụ thường được k t h p v i m t s sinh h c phân ế ợ ớ ộ ố ọ
t khác nhử ư:
• Kh i ph k t h p v i s c ký khí ố ổ ế ợ ớ ắ
• Kh i ph k t h p v i s c ký l ng ố ổ ế ợ ớ ắ ỏ
• Kh i ph k t h p đi n di ố ổ ế ợ ệ
2 Nguyên lý c a ph ủ ươ ng pháp kh i ph : ố ổ
- Là kỹ thu t phân tích đo ph v kh i lậ ổ ề ố ượng c a các phân t tích đi n khi ủ ử ệ chúng di chuy n trong đi n trể ệ ường
- Các ion đượ ạc t o thành trong bu ng ion hóa, đồ ược gia t c và tách riêng nh ố ờ
b ph n phân tích kh i ph trộ ậ ố ổ ước khi đ n detector ế
- T t c các quá trình này di n ra trong h thi t b chân không.ấ ả ễ ệ ế ị
- Tín hi u tệ ương ng v i các ion sẽ đứ ớ ược th hi n b ng m t s v ch (pic) có ể ệ ằ ộ ố ạ
cường đ khác nhau t p h p l i thành m t kh i ph đ ho c ph kh i ộ ậ ợ ạ ộ ố ổ ồ ặ ổ ố
- D li u ph kh i đữ ệ ổ ố ượ ự ộc t đ ng ghi l i và s d ng đ nh n d ng m u b ng ạ ử ụ ể ậ ạ ẫ ằ các công c tin sinh h c Đ ng th i, có th xác đ nh c u trúc cũng nh là đ nh
Trang 4CÁC KĨ THUẬT CƠ BẢN TRONG NGHIÊN CỨU NGUYỄN THỊ NGỌC LIÊN
SINH HỌC THỰC NGHIỆM K27-0257
http://www.biomedia.vn/review/phuong-phap-khoi-pho-ms.html
3 S hình thành kh i ph (s ion hóa): ự ố ổ ự
- Đ có th nghiên c u các ch t b ng pp kh i ph thì các phân t ch t nghiên c u ể ể ứ ấ ằ ố ổ ử ấ ứ ở
d ng khí ho c h i ph i đạ ặ ơ ả ược ion hóa b ng phằ ương pháp thích h p.ợ
* Ph ươ ng pháp ion hoá b ng va ch m đi n t (dùng ph bi n nh t) ằ ạ ệ ử ổ ế ấ
• Trong bu ng ion hoá, các đi n t phát ra t cathode (làm b ng vonfram ho c ồ ệ ử ừ ằ ặ reni) bay v anode v i v n t c l n ề ớ ậ ố ớ
• Các phân t ch t nghiên c u tr ng thái h i sẽ va ch m v i đi n t trong ử ấ ứ ở ạ ơ ạ ớ ệ ử
bu ng ion hoá, có th nh n năng lồ ể ậ ượng đi n t và b ion hoá.ệ ử ị
* Ph ươ ng pháp ion hóa b ng tr ằ ườ ng đi n t (dùng khá ph bi n) ệ ừ ổ ế
4 Máy kh i ph : ố ổ
- là m t thi t b dùng cho phộ ế ị ương pháp kh i ph , cho ra ố ổ ph kh i lổ ố ượ c a m t ng ủ ộ
m uẫ , đ ể tìm ra thành ph nầ c a nó ủ
- Có th ể ion hóa m u ẫ và tách các ion c a nó v i các kh i lủ ớ ố ượng khác nhau và l u l i ư ạ thông tin d a vào vi c ự ệ đo đ c cạ ường đ dòng ion.ộ
- Tùy theo lo i đi n tích c a ion đem nghiên c u mà ngạ ệ ủ ứ ười ta phân bi t máy kh i ệ ố
ph ion dổ ương ho c ion âm.ặ
* M t kh i ph k thông th ộ ố ổ ế ườ ng g m 3 ph n: ồ ầ
• ph n ngu n ionầ ồ
Trang 5• ph n phân tích kh i lầ ố ượng
• ph n đo đ c.ầ ạ
http://www.biomedia.vn/review/phuong-phap-khoi-pho-ms.html
* C u t o: ấ ạ
• B t kỳ máy kh i ph nào cũng có b n kh i ch c năng sau đây: ấ ố ổ ố ố ứ
+ H th ng n p m u: ệ ố ạ ẫ Đ a m u vào máy, n u m u d ng l ng ho c r n c n ph i ư ẫ ế ẫ ở ạ ỏ ặ ắ ầ ả chuy n sang d ng h i b ng các bi n pháp thích h p.ể ạ ơ ằ ệ ợ
+ Bu ng ion hoá: ồ Ion hóa các phân t , nguyên t c a m u tr ng thái khí ho c h iử ử ủ ẫ ở ạ ặ ơ + B phân tíchộ : Tách các ion theo t s kh i lỉ ố ố ượng và đi n tích c a ion (m/z) Các ionệ ủ
được gia t c và tách riêng nh tác d ng c a t trố ờ ụ ủ ừ ường , đi n trệ ường đ đi đ n ể ế detector
+ B ghi tín hi u:ộ ệ chuy n các ion đã đ n thành tín hi u đi n đo b ng h đi n t ể ế ệ ệ ằ ệ ệ ử
c a máy kh i phủ ố ổ
- Tín hi u đi n t detector đệ ệ ừ ược khu ch đ i trế ạ ước khi chuy n thành tín hi u s ể ệ ố
ph c v x lí d li u theo nh ng yêu c u khác nhau: ghi ph kh i, so sánh v i d ụ ụ ử ữ ệ ữ ầ ổ ố ớ ữ
li u ph trong th vi n ph hay đ nh lệ ổ ư ệ ổ ị ượng m uẫ
Trang 6CÁC KĨ THUẬT CƠ BẢN TRONG NGHIÊN CỨU NGUYỄN THỊ NGỌC LIÊN
SINH HỌC THỰC NGHIỆM K27-0257
h
ttp://omnisci.com.vn/bvct/may-sac-ky-long-may-sac-ky-khoi-pho-thiet-bi-thinghiem-noi-that-thi-nghiem/11/ly-thuyet-khoi-pho.html
* Nguyên lý ho t đ ng c a máy kh i ph : ạ ộ ủ ố ổ
- M u ch t c n phân tích sẽ đẫ ấ ầ ược chuy n thành tr ng thái h i, sau đó m i b t đ u ể ạ ơ ớ ắ ầ quá trình đo kh i ph ố ổ
- Đ đo để ược đ c tính c a các phân t c th , máy kh i ph sẽ chuy n chúng thànhặ ủ ử ụ ể ố ổ ể các ion, ki m soát chuy n đ ng c a chúng b i các đi n t trể ể ộ ủ ở ệ ừ ường bên ngoài
- Quá trình được th c hi n trong môi trự ệ ường chân không
- Trong khi áp su t khí quy n vào kho ng 760 mmHg, áp su t môi trấ ể ả ấ ường x lý ion ử
thường t 10ừ -5 đ n 10ế -8 mmHg (th p h n m t ph n t c a áp su t khí quy n) ấ ơ ộ ầ ỉ ủ ấ ể
- Ion sau khi đượ ạc t o thành sẽ được phân tách b ng cách gia t c và t p trung ằ ố ậ chúng thành m t dòng tia mà sau đó sẽ b u n cong b i m t t trộ ị ố ở ộ ừ ường ngoài
- Các ion sau đó sẽ được thu nh n b ng đ u dò đi n t và thông tin t o ra sẽ đậ ằ ầ ệ ử ạ ược phân tích và l u tr trong m t máy vi tính ư ữ ộ
II NG D NG: Ứ Ụ
- Phương pháp kh i ph có th dùng đ nghiên c u t t c các nguyên t hay h p ố ổ ể ể ứ ấ ả ố ợ
ch t có th bi n thành d ng khí hay h i.ấ ể ế ạ ơ
+ Đ i v i h p ch t vô c : PP kh i ph dùng đ nghiên c u thành ph n đ ng v ố ớ ợ ấ ơ ố ổ ể ứ ầ ồ ị
ho c đ xác đ nh v t các ch t nghiên c u.ặ ể ị ế ấ ứ
Trang 7+ Đ i v i h p ch t h u c : PP kh i ph thố ớ ợ ấ ữ ơ ố ổ ường dùng trong quá trình đ ng nh t ồ ấ
ch t ho c phân tích c u trúc.ấ ặ ấ
* Các ng d ng c th c a pp kh i ph : ứ ụ ụ ể ủ ố ổ
- Xác đ nh các lo i vitamin, hoocmon kích thích sinh trị ạ ưởng
- Phân tích d lư ượng c a các lo i thu c kháng sinh, thu c tr sâuủ ạ ố ố ừ
- Xác đ nh đị ược các h p ch t ch a bi t d a vào kh i lợ ấ ư ế ự ố ượng và thành ph n c a ầ ủ các nguyên t trong h p ch t đó.ố ợ ấ
- Xác đ nh c u trúc c a các đ ng v trong h p ch t.ị ấ ủ ồ ị ợ ấ
1 ng d ng c a máy kh i ph trong phân tích protein: Ứ ụ ủ ố ổ
- Protein được tinh ch r i c t b ng enzyme pepsin Enzyme pepsin c t ế ồ ắ ằ ắ
polypeptide t i nh ng đi m nh t đ nh trên chu i => Ta có th d đoán đạ ữ ể ấ ị ỗ ể ự ược các m nh (fragments) polypeptide sau khi b c t.ả ị ắ
- Đ a m u đã x lý pepsin vào đĩa và cho máy ch y Laser ion hoá các ư ẫ ử ạ
fragments làm cho chúng tích đi n dệ ương và b t ra bay vào ng ng này có ậ ố Ố chi u dài nh t đ nh, 4 phía g n 2 lo i đi n c c (+) và (-).ề ấ ị ắ ạ ệ ự
- Có 2 lo i h th ng hay đạ ệ ố ượ ử ục s d ng chính trong proteomics là MALDI-TOF
và ESI-MS/MS Chúng b sung cho nhau đ nh n d ng protein.ổ ể ậ ạ
http: //www.biomedia.vn/review/phuong-phap-khoi-pho-ms.html
Trang 8CÁC KĨ THUẬT CƠ BẢN TRONG NGHIÊN CỨU NGUYỄN THỊ NGỌC LIÊN
SINH HỌC THỰC NGHIỆM K27-0257
http: //www.biomedia.vn/review/phuong-phap-khoi-pho-ms.html
- ng có th xoay tròn, do đó các c c đi n đ i chi u liên t c làm cho các m nh Ố ể ự ệ ổ ề ụ ả polypeptide không bám được vào thành mà bay theo chi u xo n c.ề ắ ố
- V n t c bay c a 1fragment ph thu c 2 y u tậ ố ủ ụ ộ ế ố
+ đi n tích (z) ệ + kh i lố ượng (m)
- Máy kh i ph đo đố ổ ược th i gian, bi t trờ ế ước quãng đường => tính được v n t c => ậ ố xác đ nh đị ược ch s m/z c a fragment.ỉ ố ủ
- Các tín hi u đệ ược phát hi n b i detector và khu ch đ i, cu i cùng bi u di n trên ệ ở ế ạ ố ể ễ
đ th d ng các đ nh (peak) M i đ nh tồ ị ở ạ ỉ ỗ ỉ ương ng 1 fragment.ứ
- V i máy MS/MS (tandem MS) thì đây m i là l n MS th nh t, cho phép hi n th ớ ớ ầ ứ ấ ể ị các fragment c a m t polypeptide b c t b ng pepsin L n MS th 2 cho phép ủ ộ ị ắ ằ ầ ứ
kh ng đ nh ch c ch n 1 fragment nh t đ nh nh h th ng l c ẳ ị ắ ắ ấ ị ờ ệ ố ọ
Trang 9re : Schematic of a MALDI-TOF Mass Spectrometer
* Phân tích k t qu : ế ả
• Vì protein bao g m 20 amino acid có kh i lồ ố ượng khác nhau do đó kh i lố ượng
c a m t trình t đ nh cũng nói lên đủ ộ ự ủ ỏ ược trình t c a nó ự ủ
VD: Gi s + Valin có kh i l ả ử ố ượ ng là 3
+ Methionin có kh i l ố ượ ng là 5
N u m t fragment có kh i lế ộ ố ượng là 8, thì c u trúc c a fragment có th có 2 ấ ủ ể
trường h p ho c : valin-methionin ho c methionin-valin.ợ ặ ặ
2 S k t h p các ph ự ế ợ ươ ng pháp sinh h c phân t khác: ọ ử
2.1 Kh i ph k t h p v i s c kí khí(Gas Chromatography Mass Spectometry) ố ổ ế ợ ớ ắ
- Phương pháp S c ký khí k t h p v i Kh i ph (vi t t t là GC-MS ho c GCMS) là ắ ế ợ ớ ố ổ ế ắ ặ
m t phộ ương pháp m nh mẽ v i đ nh y cao đạ ớ ộ ạ ượ ử ục s d ng trong các nghiên c u vứ ề thành ph n các ch t trong không khí ầ ấ
- B n ch t GC-MS là s k t h p c a S c ký khí (Gas Chromatography) và Kh i ph ả ấ ự ế ợ ủ ắ ố ổ (Mass Spectometry) Ngưỡng phát hi n c a phệ ủ ương pháp này là 1 picogram
* C u t o c a GC-MS: ấ ạ ủ
+ S c ký khí (GC): ắ phân tách h n h p hóa ch t thành m t m ch theo t ng ỗ ợ ấ ộ ạ ừ
ch t tinh khi tấ ế
+ Kh i ph (MS): ố ổ ) xác đ nh đ nh tính và đ nh lị ị ị ượng
Trang 10CÁC KĨ THUẬT CƠ BẢN TRONG NGHIÊN CỨU NGUYỄN THỊ NGỌC LIÊN
SINH HỌC THỰC NGHIỆM K27-0257
Ngu n http://www.biomedia.vn/review/lua-chon-thiet-bi-gcms-may-sac-ky-khi- ồ
ghep-noi-khoi-pho.html#
* Công d ng: ụ
+ Phân tách: GC-MS có th phân tách các h n h p hóa ch t ph c t p trong ể ỗ ợ ấ ứ ạ không khí hay trong nước
+ Đ nh lị ượng: GC-MS có th đ nh lể ị ượng m t ch t b ng cách so sánh v i m u ộ ấ ằ ớ ẫ chu n ( m u chu n là ch t bi t trẩ ẫ ẩ ấ ế ước và đã được đ nh lị ượng chu n b ng ẩ ằ GC-MS)
+ Nh n d ng:ậ ạ N u trong m u có m t ch t l xu t hi n, kh i ph có th ế ẫ ộ ấ ạ ấ ệ ố ổ ể
nh n d ng c u trúc hóa h c đ c nh t c a nó C u trúc c a ch t này sau đó ậ ạ ấ ọ ộ ấ ủ ấ ủ ấ
được so sánh v i m t th vi n c u trúc c a các ch t đã bi t ớ ộ ư ệ ấ ủ ấ ế
* Máy s c kí khí k t h p v i kh i ph nhi u l n(GC/MSn) ắ ế ợ ớ ố ổ ề ầ
Trang 112.2 S c lí l ng k t h p kh i ph (LS/MS/MS) ắ ỏ ế ợ ố ổ
- Phương pháp s c ký l ng ghép kh i ph là phắ ỏ ố ổ ương pháp được hi u là m u để ẫ ược phân tách và tinh s ch qua s c ký, sau đó m u đạ ắ ẫ ược đ a qua máy kh i ph đ ti p ư ố ổ ể ế
t c xác đ nh kh i lụ ị ố ượng nguyên t c a nó.ử ủ
- K t thúc quá trình ta thu đế ượ ược l ng m u nh t đ nh và c u trúc c a nó ẫ ấ ị ấ ủ
http://case.vn/vi-VN/87/88/129/details.case
2.3 Đi n di k t h p kh i ph ệ ế ợ ố ổ
- Thường được dùng đ xác đ nh protein Phể ị ương pháp này cho phép ta quan sát và
Trang 12CÁC KĨ THUẬT CƠ BẢN TRONG NGHIÊN CỨU NGUYỄN THỊ NGỌC LIÊN
SINH HỌC THỰC NGHIỆM K27-0257
III U NH Ư ƯỢ C ĐI M C A PH Ể Ủ ƯƠ NG PHÁP KH I PH : Ố Ổ
1 u đi m: Ư ể
• Gi i h n phát hi n nh ớ ạ ệ ỏ
• Đ nh y caoộ ạ
• Đ đ c hi u cao do tính phân m nh riêng bi t c a các ion.ộ ặ ệ ả ệ ủ
• Th i gian phân tích nhanh.ờ
• Đ phân gi i cao.ộ ả
• Có th đ nh lể ị ượng đ ng th i các ch t có th i gian l u gi ng nhau.ồ ờ ấ ờ ư ố
2 Nh ượ c đi m: ể
• Giá thành cao
• Ch áp d ng cho nh ng ch t b n nhi t và bay h i.ỉ ụ ữ ấ ề ệ ơ
B PH ƯƠ NG PHÁP ĐÁNH D U PHÓNG X : Ấ Ạ
I T NG QUAN V ĐÁNH D U PHÓNG X : Ổ Ề Ấ Ạ
1 Khái ni m: ệ
- Là phương pháp kh o sát các quá trình b ng cách đ a ả ằ ư các h p ch t thích h p phátợ ấ ơ phóng x ạ vào cùng v i v t li u trong h th ng đ ớ ậ ệ ệ ố ể kh o sát quá trình v n đ ng, ả ậ ộ chuy n hóaể c a h th ng thông qua h máy đo phóng x mà không c n d ng ho t ủ ệ ố ệ ạ ầ ừ ạ
đ ng c a h th ng.ộ ủ ệ ố
2 Nguyên lý:
Nguồn:
http://ungthubachmai.vn/y- hoc-hat-nhan/ghi-hinh-gen-va- phan-tu-kha-nang-dong-gop- lon-cua-y-hoc-hat-nhan-cho-y-hoc-phan-tu.html
Trang 13- T t c cácấ ả v t ch tậ ấ thông thường đượ ấ ạc c u t o b i s liên k t c a cácở ự ế ủ nguyên t ố hóa h c, m i nguyên t có m tọ ỗ ố ộ s nguyên t đ c tr ng cho số ử ặ ư ố proton trong h t ạ nhân nguyên t Thêm vào đó, các nguyên t có th t n t i m t vài d ngử ố ể ồ ạ ở ộ ạ đ ng v , ồ ị
m i đ ng v khác nhau v s lỗ ồ ị ề ố ượ ngneutron trong h t nhân Ngoài các đ ng v ạ ồ ị
thường các nguyên t còn có cácố đ ng v phóng x ồ ị ạ
- Đ ng v là hi n tồ ị ệ ượng các nguyên t có cùng s proton nh ng khác nhau v s ử ố ư ề ố
n tron, do đó s kh i A c a chúng khác nhau.ơ ố ố ủ
- Các đ ng v phóng xồ ị ạ là đ ng v không n đ nh Theo th i gian nguyên t c a ồ ị ổ ị ờ ử ủ các đ ng v phóng x này sẽ bi n đ i thành m tồ ị ạ ế ổ ộ đ ng vồ ị khác S bi n đ i này có ự ế ổ
th di n ra v i nhi u các khác nhau nhể ễ ớ ề ư phân rã phóng xạ, ho c là phát ra các h t ặ ạ (thường là các đi n t (phân rã bêta),ệ ử positron ho cặ h t alpha) ho c b ng sạ ặ ằ ự phân
h ch t nhiênạ ự , và h p thu đi n tấ ệ ử
• Các đ ng v c a nguyên t Hidroồ ị ủ ố :
- S kh i: A = Z + N.ố ố
- S kh i A và s proton (s đ n v đi n tích h t nhân) Z là 2 đ i lố ố ố ố ơ ị ệ ạ ạ ượng đ c tr ng ặ ư cho nguyên t ử
- Đ ng v phóng x c a m t nguyên t có cùng tính ch t hóa h c gi ng đ ng v b n.ồ ị ạ ủ ộ ố ấ ọ ố ồ ị ề
- Do đó n u tr n m t lế ộ ộ ượng nh đ ng v phóng x v i đ ng v b n c a m t nguyên ỏ ồ ị ạ ớ ồ ị ề ủ ộ
t r i theo dõi s thay đ i ho t đ ng c a đ ng v phóng x trong quá trình v t lý, ố ồ ự ổ ạ ộ ủ ồ ị ạ ậ hóa h c…mà nguyên t đó tham gia, ngọ ố ười ta có th bi t để ế ược m t s tính ch t c aộ ố ấ ủ quá trình đó
Trang 14CÁC KĨ THUẬT CƠ BẢN TRONG NGHIÊN CỨU NGUYỄN THỊ NGỌC LIÊN
SINH HỌC THỰC NGHIỆM K27-0257
- Cường đ đ l n cho s pha loãng và tách dòng mà v n còn đ cho s phát hi n ộ ủ ớ ự ẫ ủ ự ệ
b c x khi đo dòng xu ng.ứ ạ ố
- Ch t mang đ ng v phóng x đánh d u ph i xâm nh p và đ ng nh t v i môi ấ ồ ị ạ ấ ả ậ ồ ấ ớ
trường nghiên c u, ph i t n t i b n v ng v i môi trứ ả ồ ạ ề ữ ớ ường nghiên c u trong su t ứ ố quá trình th c nghi m.ự ệ
- Ch t mang đ ng v phóng x ph i gi ng v i môi trấ ồ ị ạ ả ố ớ ường đánh d u đ không làm ấ ể nhi u lo n môi trễ ạ ường đánh d u.ấ
II NG D NG: Ứ Ụ
1 Trong nghiên c u sinh h c và công nông nghi p: ứ ọ ệ
- Trong nghiên c u di truy n h c, gi i mã gen, tìm hi u s v n chuy n các aa trong ứ ề ọ ả ể ự ậ ể
c th sinh v t ơ ể ậ
- T o gi ng ra các đ t bi n gen.ạ ố ộ ế
- Theo dõi s di chuy n c a nự ể ủ ước m t, nặ ước ng m, ki m tra t c đ th m qua đê, ầ ể ố ộ ấ
đ p, thăm dò d u khí, nghiên c u c ch các ph n ng ph c t p và đo đ c các h ngậ ầ ứ ơ ế ả ứ ứ ạ ạ ằ
s hoá lí…ố
1.1 Đánh d u đ ng v phóng x N ấ ồ ị ạ 15 trong phát hi n c u t o DNA theo nguyên ệ ấ ạ
t c bán b o t n: ắ ả ồ
https://www.slideshare.net/nhido3192/bi-ging-sinh-hc-phn-t-ts-v-minh-tr