Thuyết mình nhiệm vụ KH và Cn thuộc dự án KH và CN vắc xin 4 bênh ở gia cầm

CÔNG TY CP THUỐC THÚ Y TRUNG ƯƠNG THUYẾT MINH NHIỆM VỤ KH&CN THUỘC DỰ ÁN KH&CN VẮC XIN BỆNH Ở GIA CẦM Tên nhiệm vụ: Nghiên cứu sản xuất vắc-xin tứ giá quy mơ phịng thí nghiệm phòng bệnh gia cầm chủng vi rút Newcastle, vi rút Infectious bronchitis, vi rút Infectious bursal disease vi khuẩn Haemophilus paragallinarum Hà Nội, 2017 CƠ SỞ THỰC HIỆN NHIỆM VỤ Đơn vị: Công Ty Cổ Phần Thuốc Thú Y Trung Ương (FIVEVET.,JSC) Địa chỉ: CCN Hà Bình Phương – Thương Tín – Hà Nội  Chuyên nghiên cứu, sản xuất, kinh doanh loại thuốc, Vắc xin Sinh phẩm thú y  Đội ngũ chuyên gia, nghiên cứu viên, nhiều kinh nghiệm nghiên cứu, sản xuất vắc xin sinh phẩm thú y Cơ sở vật chất:  Nhà máy sản xuất/phòng kiểm nghiệm/hệ thống kho cho sản xuất vắc xin sinh phẩm đạt tiêu chuẩn GMPWHO/GLP-WHO/GSP-WHO  Hệ thống trang thiết bị đại, tiên tiến Tiềm lực tài chính:  Thị phần Cơng ty chiếm 7,8% so với công ty sản xuất thuốc thú y nước  Doanh thu liên tục tăng trưởng 10-15%/năm - đứng TOP 10 doanh nghiệp sản xuất thuốc thú y Việt Nam Năng lực quản lý Dự án:  Cơng ty hồn thành xuất sắc dự án :“Nghiên cứu điều chế thuốc đặc hiệu điều trị bệnh tiêu chảy vi khuẩn heo”- dự án cấp Quốc gia, theo nghị định 119/1999/NĐ-CP  Năm 2015: Công ty phối hợp với Viện chăn nuôi nghiên cứu đề tài: “Sản xuất thử chế phẩm thảo dược IAS-1, IAS-2, IAS-3 dùng để thay phần kháng sinh phòng trị bệnh tiêu chảy cho lợn gà  Năm 2017, Công ty Bộ KH&CN giao thực dự án: “Nghiên cứu sản xuất thử nghiệm thuốc điều trị hữu hiệu bệnh loại vi khuẩn Actinobacillus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida, Streptococcus suis gây đường hô hấp lợn” Hợp tác: Hợp tác chặt chẽ với đơn vị nghiên cứu đầu ngành lĩnh vực thú y Viện thú y Quốc gia, Trung tâm chẩn đoán thú y trung ương, Viện Công nghệ sinh học… phối hợp với nhiều chi cục tỉnh, thành phố ĐẶT VẤN ĐỀ Biểu đồ thể số lượng gà nước năm gần 246,758 55,711 259,295 59,767 Năm 2014 Gà đẻ trứng Năm 2015 Tổng số gà 276,189 63,338 Năm 2016 ĐẶT VẤN ĐỀ Tình hình số dich bệnh gia cầm năm 2016 TT Dịch bệnh Số tỉnh, thành phố có bệnh Số ốm (con) Số chết, xử lý (con) Cúm gia cầm 9.956 9.956 Bệnh Newcastle 17 63.673 17.656 Bệnh Gumboro 10 59.740 11.729 Tụ huyết trùng 18 99.039 19.921 Bệnh CRD 42.040 1.611 Vắc xin đơn giá đa giá Vắc xin đơn giá Vắc xin đa giá  Tạo miễn dịch nhanh  Miễn dịch chậm  Hiệu giá bảo hộ cao  Hiệu giá bảo hộ thấp  Thời gian miễn dịch lâu  Thời gian miễn dịch ngắn  Tốn nhiều công lao động, gây stress cho vật nuôi, tổng chi phí cho vắc xin cao hơn, … dẫn đến giảm hiệu kinh tế chăn nuôi  Tiêm mũi/1 loại vắc xin phịng nhiều bệnh cho vật ni  Giảm chi phí cho cơng lao động để tiêm phòng  Hạn chế tác động đến vật nuôi Một số loại vắc xin vô hoạt, đa giá dùng cho gà STT Tên vắc xin ITA ND+IBD (Laprovet – Pháp) Bursine NK ( Zoetis) Virsin 437L (Biovac Ltd) TALOVAC 201 IB/ND (Immunovet) IC+NDV ( Phibro-Israel) Nobilis IB multi ND EDS ( Inetrvet-Hà Lan) Gallimune 405 ( Rhone ma – Malaysia) Cevac Corymune 7K Cevac ®ND - IB - IBD - EDS K Thành phần ND: Chủng Lasota; IBD: chủng GP ND: chủng Kimber; IBD: chủng Luckert ND: chủng VH; IC: serotype A, B, C ND: chủng Terumo; IB: Chủng Mass 41 ND: chủng VH; IC: serotype A, C (A-221; C2-Modesto) ND: chủng Clone 30; IB: chủng M41và chủng D274; EDS:chủng BC 14 ND: Ulster 2C ; IB: Mas41; IC:serotype A, C ND: chủng Lasota; IB: Massachussetts; EDS: B8/78; IC: serotype A, B, C; Salmonella:  chủng Enteritidis ND: chủng Lasota; IB: chủng Massachusetts; IBD: GP classical; EDS: chủng B8/78 DỰ ÁN SẢN XUẤT VẮC XIN TỨ GIÁ Quyết định số 3469/QĐ-BKHCN ngày 07/12/2017 Bộ trưởng KHCN việc điều chỉnh Danh mục dự án khoa học công nghệ nhiệm vụ thuộc dự án KH&CN thuộc sản phẩm quốc gia "Sản xuất vắc-xin phòng bệnh cho vật nuôi Việt Nam" Dự án KH&CN: Vắc-xin tứ giá phòng loại bệnh gia cầm: bệnh Newcastle vi rút Newcastle (ND), bệnh viêm phế quản truyền nhiễm vi rút Infectious bronchitis (IB), bệnh Gumboro tác nhân vi rút Infectious bursal disease (IBD), bệnh sổ mũi truyền nhiễm vi khuẩn Haemophilus paragallinarum Đề tài: Nghiên cứu sản xuất vắc-xin tứ giá quy mơ phịng thí nghiệm phịng bệnh gia cầm chủng vi rút Newscastle, vi rút Infectious bronchitis, vi rút Infectious bursal disease vi khuẩn Haemophilus paragallinarum ĐẶC ĐIỂM CƠ BẢN CỦA VI RÚT ND, IB, IBD VÀ VI KHUẨN IC Tên bệnh Newcastle Viêm phế quản truyền nhiễm Đối tượng gà Tỷ lệ nhiễm (%) Tỷ lệ chết (%) Mọi lứa tuổi 60-80% 80-100% Gà < tuần tuổi; Gà đẻ trứng 50-100% 0-25% 100% 20-50% 20-50% 5-20% Gumboro 3-6 tuần tuổi Viêm mũi truyền nhiễm (Phù đầu gà) Mọi lứa tuổi, tăng nặng theo tuổi gà NỘI DUNG (tiếp) 2.4 Miễn dịch chéo Vi rút vô hoạt  Gây miễn dịch cho gà  Thu Huyết làm phản ứng HI/Trung hòa với chủng vi rút khác  Công cường độc sử dụng chủng thực địa đối chứng Công cường độc Huyết Phản ứng huyết học 26 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU TÍNH ỔN ĐỊNH CỦA CHỦNG VI RÚT/VI KHUẨN LỰA CHỌN 3.1 Nghiên cứu tính ổn định ni cấy độc lực Tiếp đời 10 lần liên tiếp mơi trường thích hợp Xác định số EID50, TCID50, LD50, PFU, IVPI, ICPI 3.2 Nghiên cứu tính ổn định miễn dịch qua đời cấy chuyển/nuôi cấy Tiêm miễm dịch cho gà thí nghiệm Đánh giá hiệu giá kháng thể phản ứng huyết học 3.3 Nghiên cứu tính ổn định di truyền Giải trình tự gene định kháng nguyên chủng vi rút/vi khuẩn qua lần tiếp đời So sánh phân tích biến đổi amino acid liên quan đến điểm định tính kháng nguyên (Mỗi chủng chọn P0, P5, P10) 27 NỘI DUNG BẢO QUẢN GIỐNG VÀ THẨM ĐỊNH GIỐNG 4.1 Chọn điều kiện bảo quản phù hợp Lựa chọn Chất bổ trợ phù hợp để bảo quản Bảo quản giống điều kiện khác nhau: dạng đông khô, dạng tươi 4.2 Xây dựng quy trình điều kiện bảo quản loại vi rút/vi khuẩn 4.3 Thẩm định giống 28 ĐỀ XUẤT NỘI DUNG  Khi xâm nhiễm vào thể, Vi rút ILT kích thích hệ thống miễn dịch sinh miễn dịch dịch thể (kháng thể trung hịa) đồng thời kích thích hệ thống miễn dịch trung gian tế bào  Đã có nghiên cứu ra: Miễn dịch dịch thể khơng hồn tồn kiểm soát xâm nhiễm vi rút vào thể Vắc xin vơ hoạt chứa vi rút ILT gặp khó khăn việc kích thích miễn dịch trung gian tế bào? Có tỷ lệ rủi ro định vi rút ILT trình nghiên cứu chế tạo vắc xin giá phòng Chế tạo protein tái tổ hợp glycoprotein B, D song song với tạo chủng kháng nguyên vô hoạt 29 Kháng nguyên bề mặt virus ILT Virus ILT có 10 gen mã hóa glycoprotein bề mặt - Gen UL27 US6 mã hóa cho glycoprotein B, D tương ứng, bảo tồn cao - gB có vai trị xâm nhiễm giúp virus liên kết với màng dung hợp màng -gD thụ thể giúp virus Herpesviridae, VirolZone 2017 bám vào tế bào nhạy cảm - gB gF kích thích sinh kháng thể trung hịa đáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào - gB, gD kháng nguyên tiềm cho phát triển vắc xin tái tổ hợp Virus Lasota (LS) biểu gB, gD ILT Gây miễn dịch với chủng tái tổ hợp làm giảm triệu chứng bệnh thử thách với ILT độc (tương tự với vắc xin CEO, TCO) Zhao et al., 2014 Danh sách 21 kháng nguyên biểu nấm men P pastoris cho phát triển vắc xin người (Wang et al., 2016, Bill RM 2014) STT Nhân tố gây bệnh Kháng nguyên biểu Kết Proposed as an alternative to previous Alzheimer's Recombinant 4 × Aβ15, four tandem repeats human clinical trials of vaccination that were disease of amyloid β(1–15) interlinked by spacers halted due to brain inflammation Trans-sialidase containing the catalytic Chagas' disease The recombinant subunit vaccine was domain without the immunodominant SAPA (Trypanosoma cruzi) protective in mice (Shed Acute Phase Antigen) repeats Dengue virus type envelope domain III Demonstration of synthesis of Dengue virus (sEDIII-2) recombinant antigen EBNA1, the viral protein expressed in all Epstein-Barr virus-associated malignancies; Recombinant E1ΔGA was demonstrated Epstein-Barr virus truncated EBNA1 (E1ΔGA, codons 390–641) to be immunogenic in mice was expressed as a secretory protein with an N-terminal polyhistidine tag Hand, foot and mouth disease VP1, one of the major immunogenic capsid Recombinant VP1 protein was (human enterovirus proteins of human enterovirus 71 immunogenic in mice 71) Helicobacter Protection against infection was Alkyl hydroperoxide reductase (AhpC) pylori infection demonstrated in mice Production and purification of VLPs that Hepatitis B virus Hepatitis B surface antigen (HBsAg) have potential as a superior vaccine to Engerix-B® E1E2 protein, which consists of E1 residues Hepatitis C virus E1E2 protein was immunogenic in rabbits 187–346 and E2 residues 381–699 Human hookworm N. americanus glutathione S-transferase Scale-up of production was demonstrated (Necator (Na-GST-1) for initial phase clinical testing Nhân tố gây bệnh Human 10 immunodeficiency virus type Human 11 papillomavirus Human schistosomiasis 12 (Schistosoma mansoni) STT 13 Influenza virus A (avian origin) Influenza virus A 14 (pandemic swine origin) Japanese 15 encephalitis virus 16 Leptospirosis (Leptospira spp) Kháng nguyên biểu Kết Gag protein Gag protein was immunogenic in mice Major capsid protein, L1, for human papillomavirus type 16 kDa recombinant protein corresponding to the extracellular domain of a unique S.  mansonitetraspanin Recombinant protein was produced Development of 20L scale production was demonstrated The recombinant antigen induced an immunoprotective response in mice Recombinant production of H1N1 haemagglutinin (HA) protein endotoxin-free H1N1 HA was demonstrated Immunogenicity and protective Viral envelope protein (E) efficacy were demonstrated in mice Recombinant proteins produced Leptospiral immunoglobulin-like (Lig) in E. coli have demonstrated variable protein LigANI and the results LigANI and LipL32 from P.  immunodominant lipoprotein LipL32 pastoris retained the antigenic characteristics of the native proteins Recombinant neuraminidase (rNA) antigen KẾT QUẢ DỰ KIẾN 34 Sản phẩm KH&CN yêu cầu chất lượng cần đạt Dạng I: Mẫu (model, maket); Sản phẩm (là hàng hố, tiêu thụ thị trường); Vật liệu; Thiết bị, máy móc; Dây chuyền công nghệ; Giống trồng; Giống vật nuôi loại khác; Mức chất lượng TT Tên sản phẩm giống vi khuẩn/ vi rút để dùng chế tạo vắc xin khiết, có tính kháng ngun cao, ổn định, có tính miễn dịch tốt, bảo quản điều kiện tối ưu Đơn vị đo Cần đạt Giống vi - Thuần khiết sinh vật - An toàn: 100% - Đại diện cho chủng lưu hành thực địa - Tính kháng nguyên cao ổn định: ND: hiệu giá HA > 9Log2 IB: EID50 > 105 /ml ILT: EID50 > 105 /ml H.P> 108 vi khuẩn/ml Mẫu tương tự Dự kiến Trong Thế số lượng nước giới Chưa Tương - 100 có đương ống/giốn g - Bảo quản điều kiện thích hợp Dạng II: Tài liệu dự báo (phương pháp, quy trình, mơ hình) TT Tên sản phẩm Yêu cầu khoa học cần đạt Quy trình tạo giống vi rút ND, vi rút IB, - Áp dụng để tạo giống vi rút vi rút ILT vi khuẩn IC - Được hội đồng cấp sở nghiệm thu Quy trình bảo quản giống vi rút ND, vi - Áp dụng để bảo quản giống vi rút rút IB, vi rút ILT vi khuẩn IC - Được hội đồng cấp sở nghiệm thu Quy trình nhân giống vi rút ND, vi rút IB, vi rút ILT vi khuẩn IC - Áp dụng để nhân giống vi rút - Được hội đồng cấp sở nghiệm thu Quy trình sử dụng giống vi rút ND, vi rút IB, vi rút ILT vi khuẩn IC - Áp dụng để sử dụng giống vi rút để sản xuất vắc xin Việt Nam - Được hội đồng cấp sở nghiệm thu Quy trình kiểm nghiệm giống vi rút ND, vi rút IB, vi rút ILT vi khuẩn IC - Áp dụng để kiểm nghiệm giống vi rút - Được hội đồng cấp sở nghiệm thu Dạng III: Bài báo; Sách chuyên khảo; sản phẩm khác  Đăng tải 01 báo khoa học tạp chí chuyên ngành  Đào tạo 01 thạc sỹ chuyên ngành Thú y/Vi sinh vật/Công nghệ sinh học Tiến độ thực Dự kiến 18 tháng Các nội dung, công việc chủ yếu   Kết phải đạt NỘI DUNG THU THẬP, SÀNG LỌC  Bộ mẫu CHỦNG VI RÚT/VI KHUẨN DÙNG chủng phân lập ĐỂ SẢN XUẤT VẮC XIN NỘI DUNG GIÁM ĐỊNH CHỦNG, GIỐNG VI RÚT, VI KHUẨN ĐỂ LỰA CHỌN GIỐNG ĐẠI DIỆN DÙNG LÀM GIỐNG SẢN XUẤT VẮC NỘI DUNG NGHIÊN CỨU TÍNH ỔN ĐỊNH CỦA CHỦNG VI RÚT/VI KHUẨN LỰA CHỌN NỘI DUNG BẢO QUẢN GIỐNG VÀ THẨM ĐỊNH GIỐNG Lựa chọn 3-5 chủng đại diện cho loại kháng nguyên Lựa chọn loại chủng Thời gian Cá nhân, (bắt đầu, tổ chức kết thúc) thực hiện* 10/2017Cán Công ty 10/2018 TW5, Viện thú y, TTCĐ thú y Trung Ương 03/2018Cán Công ty 12/2018 TW5, Viện thú y, Viện Công nghệ sinh học 04/2018Cán Công ty 03/2019 TW5, Viện thú y, TTCĐ thú y Trung Ương 04/2018Cán Công ty 03/2019 TW5 Xin chân thành cảm ơn quý vị lắng nghe! 39 KINH PHÍ THỰC HIỆN ... B8/78 DỰ ÁN SẢN XUẤT VẮC XIN TỨ GIÁ Quyết định số 346 9/QĐ-BKHCN ngày 07/12/2017 Bộ trưởng KHCN việc điều chỉnh Danh mục dự án khoa học công nghệ nhiệm vụ thuộc dự án KH& CN thuộc sản phẩm quốc gia. .. thuộc dự án KH& CN thuộc sản phẩm quốc gia "Sản xuất vắc- xin phòng bệnh cho vật nuôi Việt Nam" Dự án KH& CN: Vắc- xin tứ giá phòng loại bệnh gia cầm: bệnh Newcastle vi rút Newcastle (ND), bệnh viêm... (tương tự với vắc xin CEO, TCO) Zhao et al., 20 14 Danh sách 21 kh? ?ng nguyên biểu nấm men P pastoris cho phát triển vắc xin người (Wang et al., 2016, Bill RM 20 14) STT Nhân tố gây bệnh Kh? ?ng nguyên