KHẢO SÁT SƠ BỘ THÀNH PHẦN HÓA THỰC VẬT, XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN VÀ KHẢ NĂNG KHÁNG OXY HÓA CỦA CAO CHIẾT TỪ MỘT SỐ BỘ PHẬN CÂY SA KÊ (Artocapus altilis)

  BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT SƠ BỘ THÀNH PHẦN HÓA THỰC VẬT, XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN VÀ KHẢ NĂNG KHÁNG OXY HÓA CỦA CAO CHIẾT TỪ MỘT SỐ BỘ PHẬN CÂY SA KÊ (Artocapus altilis) Ngành học : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Sinh viên thực : VÕ VĂN TRUNG Niên khóa : 2009 – 2013 Tháng 6/2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT SƠ BỘ THÀNH PHẦN HÓA THỰC VẬT VÀ XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN, KHẢ NĂNG KHÁNG OXY HÓA CỦA CAO CHIẾT TỪ MỘT SỐ BỘ PHẬN CÂY SA KÊ (Artocapus altilis) Hướng dẫn khoa học Sinh thực PGS.TS PHAN PHƯỚC HIỀN VÕ VĂN TRUNG KS TRƯƠNG THỊ BÍCH LIỄU Tháng 6/2012 LỜI CẢM ƠN Xin gửi lời cám ơn đến Trường ĐH Nông Lâm TP HCM tạo điều kiện cho thực đề tài Em xin chân thành cám ơn: PGS.TS Phan Phước Hiền KS Trương Thị Bích Liễu tận tình hướng dẫn, giúp đỡ, dành thời gian công sức để truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quy giá, chỉnh sửa tạo điều kiện cho em hồn thành khóa luận tốt nghiệp Em xin cám ơn TS Trần Thị Lệ Minh, phó trưởng BM Cơng nghệ Sinh học thầy cô truyên đạt kiến thức, kinh nghiệm suốt thời gian học trường Em xin cám ơn GVCN Tô Thị Nhã Trầm tận tình dạy, khuyên bảo trình học tập thực khóa luận Cám ơn bạn lớp DH09SH chia niền vui, khó khăn q trình học tập làm khóa luận Con xin gửi lòng biết ơn sâu sắc đến ba mẹ người thân gia đình dày công khổ cực nuôi dưỡng giáo dục trưởng thành VÕ VĂN TRUNG           i   TĨM TẮT Q trình cơng nghiệp hóa – đại hóa ngày đẩy mạnh, dân số ngày tăng mối lo lương thực bệnh tật trở nên nghiêm trọng tình trạng kháng thuốc kháng sinh Kết thống kê Viện Dược liệu năm 2006 cho biết Việt Nam có khoảng 3.948 lồi thực vật nấm có giá trị làm thuốc, có khoảng 185 thuốc có giá trị dược lí cao Cây sa kê trồng nhiều vùng nhiệt đới vừa cung cấp lương thực thứ yếu vừa làm thực phẩm chức làm trà, chế biến ăn từ có giá trị việc điều trị ung thu vú, xơ gan, kháng khuẩn, chống lão hóa Sa kê nghiên cứu nhiều Ấn Độ, Thái Lan, Đài Loan… Còn Việt Nam chưa có nghiên cứu cơng bố thức giá trị sa kê Do đề tài: “khảo sát sơ thành phần hóa thực vật xác định khả kháng khuẩn, khả chống oxy hóa cao chiết từ số phận sa kê (Artocapus altilis).” tiến hành nhằm tìm nguồn lương thực dược liệu tiến tới nghiên cứu đối tượng Mẫu vỏ cây, tươi, sa kê khô thu nhận Thủ Đức xử lí chiết với hệ dung mơi có độ phân cực khác nhau, đêm quay đuổi dung mơi thu cao Tiến hành thử hoạt tính kháng khuẩn Staphylococcus aureus ATCC 43300, Samonella spp., E coli ATCC 2592 thử nghiệm hoạt tính đánh bắt gốc tự DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) Kết xác định khối lượng nguyên liệu cao vỏ 11,11 g, cao tươi 17,82 g cao vàng 17,23 g từ 100 g bột nguyên liệu Hiệu suất chiết xuất vỏ 11,11%, tươi 17,81%, khô 17,23% Khảo sát sơ hóa thực vật cho thấy sa kê có diện chất tinh dầu, carotenoid, flavonoid, polyphenol, acide hữu cơ, hợp chất khử, triterpenoid, alkaloid, anthraquinon, anthocyanoid Hoạt tính sinh học cao chiết từ ethyl acetate sa kê tươi có khảng kháng khuẩn cao vi khuẩn E coli S aureus Khả đánh bắt gốc tự DPPH mẫu có hoạt tính Trong đó, cao chiết từ sa kê tươi chiết dung môi ethyl acetae có hoạt tính sinh học cao (IC50 = 56,17), cao chiết từ vỏ vàng có hoạt tính sinh học thấp ii    SUMMARY The thesis: “Survey the chemical composition, antibacterial activity and antioxidant activity of extracts crude of plant parts Artocapus altilis” Artocapus altilis is one of the multipurpose crops provide food, medicine, textiles, building materials and food for livestock In Viet Nam, there is no reported for study on this plant Thus, this study was conducted to find asource of food and medicine toward new research on this subject The sample bark, fresh leaves, yellow leaves were collected in Thu Duc district in December, 2012 Power of those samples was extraction with solvent systems of different polarity Then, crude extracts was conducted testing high antibacterial activity on Staphylococcus aureus ATCC 43300, Salmonella spp and E coli ATCC 2592 Finally, crude extracts were tested for antioxidant activity by DPPH free radical assay Results we have identified in 11.11 g of bark extract, 17.82 g of fresh leaves extract, 17.23 g of yellow leaves extract to powder 100 g original material The performance of sample were 11.11 % of bark extract, 17.81 % of fresh leaves and the 17.23 % of yellow leaves Survey the chemical composition shows that the extract, involved: oils, carotenoids, flavonoids, polyphenols, organicacids, reductant, triterpenoid, alkaloid, anthraquinone and anthocyanoid A altilis extract crude obtained antibacterial activity on bacterial The biological activity of ethyl acetate extracts of fresh leaves inhibited bacterial growth in the bacterium E coli ATCC 2592 and S aureus ATCC 43300 The ability to capture free radicals DPPH samples is activated In particular, extracts of fresh leaves A altilis by solvent extraction with ethyl acetae higher biological activity (IC50 = 56.17), extracts of bark and leaves have lower biological activity Keys words: Artocapus altilis, extraction, chemical componemts, bacterial activity, antioxidant activity, MIC, DPPH iii    MỤC LỤC Trang Lời cảm ơn i Tóm tắt ii Summary iii Mục lục iv Danh sách chữ viết tắt vi Danh sách bảng vii Danh sách hình viii Chương MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Yêu cầu đề tài 1.3 Nội dung thực Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu sa kê 2.1.1 Phân loại khoa học sa kê 2.1.2 Đặc điểm sinh thái sa kê 2.1.3 Điều kiện sinh thái phân bố sa kê 2.2 Một số nghiên cứu tác dụng sa kê 2.3 Tổng quan hợp chất thiên nhiên 2.4 Kĩ thuật tách chiết hợp chất hữu 2.4.1 Kĩ thuật chiết lỏng – lỏng 2.4.2 Kĩ thuật chiết ngấm kiệt 2.4.3 Kĩ thuật chiết ngâm dầm 2.4.4 Kĩ thuật chiết soxhlet 2.5 Tổng quan vi sinh vật gây bệnh đường ruột 2.5.1 E Coli 2.5.2 Salmonella spp 10 2.5.3 Staphylococcus aureus .10 2.6 Phương pháp xác định hoạt tính kháng oxy hóa 11 2.6.1 Khái niệm khả chống oxy hóa .11 2.6.2 Xác định khả kháng oxy hoá thử nghiệm DPPH 11   iv    Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 3.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu .13 3.2 Vật liệu 13 3.2.1 Mẫu thí nghiện 13 3.2.2 Chủng vi khuẩn 13 3.2.3 Hóa chất 13 3.2.4 Thiết bị dụng cụ 14 3.3 Phương pháp nghiên cứu .14 3.3.1 Xác định ẩm độ nguyên liệu 14 3.3.2 Tính hiệu suất thu hồi cao chiết .15 3.3.3 Khảo sát tính kháng khuẩn cao chiết sa kê 19 3.3.5 Thử nghiệm hoạt tính chống oxy hóa phương pháp DPPH 23 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 4.1 Kết ẩm độ nguyên liệu hiệu suất thu hồi cao 25 4.1.1 Ẩm độ nguyên liệu 25 4.1.2 Hiệu suất thu hồi cao sa kê 25 4.2 Khảo sát sơ thành phần hóa thực vật cao chiết 27 4.3 Khảo sát khả kháng khuẩn cao sa kê 32 4.3.1 Thử nghiệm khảng kháng khuẩn phương pháp gắn đĩa giấy 32 4.3.2 Xác định nồng độ ức chế tối thiểu vi khuẩn (MIC) 35 4.4 Kết thử nghiệm chống oxy hóa 37 4.4.1 Kết đo OD dung dịch chuẩn vitamin C 37 4.4.2 Kết đo OD dung dịch chuẩn Trolox .38 4.4.3 Kết đo OD cao petroleum ether chiết từ vỏ sa kê 39 4.4.4 Kết đo OD cao petroleum ether chiết từ sa kê tươi 39 4.4.5 Kết đo OD cao petroleum ether chiết từ sa kê vàng 39 4.4.6 Kết đo OD cao ethyl acetate chiết từ vỏ sa kê .40 4.4.7 Kết đo OD cao ethyl acetate chiết từ sa kê tươi 40 4.4.8 Kết đo OD cao ethyl acetate chiết từ sa kê vàng 40 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 43 5.1 Kết luận .43 5.2 Đề nghị 43 Tài liệu tham khảo 44 Phụ lục v    DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT DMSO: Dimethylsulfuoxid DPPH: 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl Ea: Ethyl acetate Et: Ethanol H: H2O (nước) IC50: Inhibitory Concention 50 MeOH: Methanol MIC: Minimum Inhibitory Concentration OD: Optical Density P: Petroleum ether TSA: Trypticase Soy Agar TSB: Trypticase Soy both 1H, 2H, 3H: cao chiết từ dung môi nước vỏ cây, tươi vàng 1Et, 2Et, 3Et: cao chiết từ dung môi ethanol vỏ cây, tươi vàng 1Ea, 2Ea, 3Ea: cao chiết từ dung môi ethyl acetate vỏ cây, tươi vàng 1P, 2P, 3P: cao chiết từ dung môi petroleum ether vỏ cây, tươi vàng vi    DANH SÁCH CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1 Thành phần dinh dưỡng hạt sa kê Bảng 3.1 Sơ đồ phương pháp pha loãng mẫu đánh giá kết 22 Bảng 3.2 Dãy nồng độ mẫu thử đánh bắt gốc tự DPPH 23 Bảng 3.3 Pha mẫu thử nghiệm DPPH 24 Bảng 4.1 Ẩm độ nguyên liệu phận sa kê 25 Bảng 4.2 Khối lượng cao chiết hệ dung môi khác sa kê 26 Bảng 4.3 Hiệu suất chiết xuất cao thô sa kê phận khác 27 Bảng 4.4 Định tính thành phần hóa thực vật vỏ sa kê 28 Bảng 4.5 Định tính thành phần hóa thực vật sa kê tươi 29 Bảng 4.6 Định tính thành phần hóa thực vật sa kê vàng 30 Bảng 4.7 Kết thử nghiệm khả kháng khuẩn môi trường TSA 33 Bảng 4.8 Giá trị MIC cao thử nghiệm môi trường TSB 35 Bảng 4.9 Giá trị IC50 mẫu, Vitamin C Trolox 41 vii    DANH SÁCH CÁC HÌNH Trang Hình 3.1 Mẫu sa kê dùng thí nghiệm 13 Hình 3.2 Sơ đồ chiết cao tổng sử dụng nghên cứu 15 Hình 3.3 Sơ đồ khảo sát thành phần hóa học cao tổng 19 Hình 4.1 Dịch chiết sa kê 27 Hình 4.2 Định tính hợp chất hóa học 31 Hình 4.3 Thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn cao chiết sa kê 34 Hình 4.4 Kết thử nghiệm MIC 36 Hình 4.5 Thử nghiệm đánh bắt gốc tự DPPH vitamin C 37 Hình 4.6 Đồ thị khả ức chế DPPH vitamin C 38 Hình 4.7 Đồ thị khả ức chế DPPH Trolox 38 Hình 4.8 Đồ thị khả ức chế DPPH cao petroleum ether vỏ sa kê 39 Hình 4.9 Đồ thị khả ức chế DPPH cao petroleum ether sa kê tươi 39 Hình 4.10 Đồ thị khả ức chế DPPH cao petroleum ether sa kê vàng 39 Hình 4.11 Đồ thị khả ức chế DPPH cao ethyl acetate vỏ sa kê 40 Hình 4.12 Đồ thị khả ức chế DPPH cao ethyl acetate sa kê tươi 40 Hình 4.13 Đồ thị khả ức chế DPPH cao ethyl acetate sa kê vàng 40 Hình 4.14 Biểu đồ gí trị IC50 mẫu cao đối chứng 41 viii    4.3.2 Xác định nồng độ ức chế tối thiểu vi khuẩn (MIC) Sau xác định tính kháng khuẩn cao thử nghiệm Để xác định tính kháng khuẩn xác hơn, tiếp tục thử nghiệm kháng khuẩn phương pháp pha loãng tới hạn xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) dựa độ đục môi trường giảm dần cho thấy có tính kháng khuẩn, kết thể bảng 4.8 Bảng 4.8 Giá trị MIC cao thử nghiệm môi trường TSB Cao chiết Giá trị MIC (µg/ml) E coli ATCC 2592 Salmonella spp S aureus ATCC 43300 1P >300 >300 >300 2P >300 >300 >300 3P >300 >300 >300 1Ea 150 150 150 2Ea 150 >300 75 3Ea 150 >300 150 1Et 150 >150 >300 2Et 150 >300 150 3Et 150 150 150 1H >300 >300 >300 2H >300 >300 >300 3H >300 >300 >300 Giá trị MIC S aureus cao 1Ea, 2Ea, 3Ea, 2Et 3Et, E coli cao 1Ea, 2Ea, 3Ea, 1Et, 2Et 3Et , Salmonella cao 1Ea, 1Et 3Et ức chế vi khuẩn nồng độ 150 (µg/ml) Giá trị MIC S aureus cao 2Ea ức chế nồng độ 75 (µg/ml) Ở giá trị MIC thấp tính ức chế cao Kết thử nghiệm tính kháng khuẩn cao chiết từ vỏ cây, tươi, vàng sa kê cho thấy tính kháng khuẩn tập trung tươi vàng với dung môi chiết ethyl acetate cồn Điều cho thấy dung môi ethyl acetate cồn chiết tách hợp chất có hoạt tính sinh học mạnh dung mơi cịn lại Tuy nhiên, y học thực phẩm hạn chế sử dụng dung mơi có tác động dung môi đến hệ hô hấp ức chế thần kinh với liều cao gây độc tế bào thể sống 35   (-) (+) a (+) (-) b (+) (-) c Hình 4.4 Kết thử nghiệm MIC a cao 1Ea Salmonella spp, b cao 2Ea S aureus ATCC 43300, c cao 3Et E coli ATCC 2592 36   4.4 Kết thử nghiệm chống oxy hóa %: ức chế DPPH = (Ao – A)/Ao x 100 Ao: độ hấp thu DPPH A: độ hấp thu dung dịch phản ứng IC50: nồng độ ức chế 50% gốc DPPH Khả ức chế gốc tự đánh giá phương pháp gốc tự bền Chất chống oxy hóa làm giảm màu DPPH từ tím sang vàng Hoạt tính kháng gốc tự chất thử nghiệm tỉ lệ thuận với độ màu DPPH 4.4.1 Kết đo OD dung dịch chuẩn Vitamin C Vitamin C hợp chất phần thực vật, giữ vai trị quan trọng sinh học có khả chống oxy hóa cao có khả kết hợp với nhiều dạng gốc tự bị loại thải ngồi thể Vì vitamin C sử dụng làm đối chứng phản ứng chống oxy hóa thử nghiệm Đc  DPPH  Hình 4.5 Thử nghiệm đánh bắt gốc tự DPPH vitamin C 37   Hình 4.6 Đồ thị khả ức chế DPPH Vitamin C 4.4.2 Kết đo OD dung dịch chuẩn Trolox Trolox hợp chất 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic, dẫn xuất tan nước vitamin E, chất chống oxy hóa vitamin E, sử dụng ứng dụng sinh học sinh hóa để giảm bớt căng thẳng oxy hóa, hư hỏng sử dụng làm đối chứng thử nghiệm Hình 4.7 Đồ thị khả ức chế DPPH Trolox Vitamin C Trolox sử dụng làm chất chuẩn để so sánh với mẫu thử nghiệm cao chiết 38   4.4.3 Kết đo OD cao petroleum ether chiết từ vỏ sa kê Hình 4.8 Đồ thị khả ức chế DPPH cao petroleum ether vỏ sa kê 4.4.4 Kết đo OD cao petroleum ether chiết từ sa kê tươi Hình 4.9 Đồ thị khả ức chế DPPH cao petroleum ether sa kê tươi 4.4.5 Kết đo OD cao petroleum etherchiết từ sa kê vàng Hình 4.10 Đồ thị khả ức chế DPPH cao petroleum ether sa kê vàng 39   4.4.6 Kết đo OD cao ethyl acetate chiết từ vỏ sa kê Hình 4.11 Đồ thị khả ức chế DPPH cao ethyl acetate vỏ sa kê 4.4.7 Kết đo OD cao ethyl acetate chiết từ sa kê tươi Hình 4.12 Đồ thị khả ức chế DPPH cao ethyl acetate sa kê tươi 4.4.8 Kết đo OD cao ethyl acetate chiết từ sa kê vàng Hình 4.13 Đồ thị khả ức chế DPPH cao ethyl acetate sa kê vàng 40   Cơ chế phản ứng gốc tự DPPH chất chống oxy hóa: - DPPH + AH - DPPH-H + A Bảng 4.9 Giá trị IC50 mẫu, Vitamin C Trolox Mẫu Giá trị IC50 (µg/ml) Trolox 53,86 Vitamin C 44,91 1P 1042,24 2P 849,75 3P 1103,16 1Ea 91,95 2Ea 56,17 3Ea 90,43 Giá trị IC50 tính dựa vào phương trình đường chuẩn y = ax + b Hình 4.14 Biểu đồ giá trị IC50 mẫu cao đối chứng Từ kết đo cho thấy phận vỏ, tươi, vàng có số hợp chất chống oxy hóa tác dụng với DPPH làm giá trị hấp thụ OD Kết thí nghiệm phù hợp với báo cáo Jatap Bapat (2010) chất chiết từ rễ phận khác sa kê có tác dụng chống oxy hóa Trong dân gian thường hay thu nhặt vàng dùng để nấu nước uống hạ nhiệt, huyết áp thay trà xanh, khổ qua, hoa lài, sen… 41   Các cao dùng thử nghiệm có hoạt tính sinh học khác Cao chiết với dung mơi petroleum ether có haotj tính sinh học thấp hón so với cao chiết dung môi ethyl aceta Do số tạp chất như: acide hữu cơ, anthraquinon, chất khử, polyphenol thường chất phân cực tập trung nhiều vỏ, rễ, thân gỗ…Chính tạp chất ảnh hưởng đễn tiếp xúc chất thử nghiệm với DPPH làm giảm hoạt tính đánh bắt gốc tự DPPH Dung mơi petroleum ether có độ phân cực dẫn đến việc chiết khơng kiệt chất có hoạt tính sinh học, dung mơi ethyl acetate có độ phân cực cao nên chiết tốt chất có hoạt tính sinh học Trong dung mơi chiết cao chiết từ sa kê tươi có hoạt tính sinh học cao tươi chiết với dung môi ethyl acetae có hoạt tính sinh học cao so với dung môi petroleum ether 42   Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Qua trình tách chiết với nhiều dung môi khác phận khác thu cao vỏ 11,11 g, cao tươi 17,82 g cao vàng 17,23 g Sa kê thu hái xử lí mẫu, tiến hành đo độ ẩm mẫu phù hợp với tiêu chuẩn Dược Diển Việt Nam IV tính hiệu suất thu hồi cao vỏ 11,11%, tươi 17,81%, vàng 17,23% Khảo sát sơ thành phần hóa thực vật cho thấy diện số hợp chất quan thành phần sa kê như: polyphenol, alkaloid, chất khử, anthraquinon, catotenoid flavonoid Thử nghiệm khả kháng khuẩn mẫu cao, kết xác định cao chiết từ sa kê tươi với dung mơi ethyl acetate có hoạt tính kháng khuẩn mạnh Hoạt tính đánh bắt gốc tự DPPH mẫu cao vỏ cây, tươi khơ xác định mẫu dùng thí nghiệm có khảng chống oxy hóa hoạt tính cao sa kê tươi Sa kê có tiềm ứng dụng thực phẩm y học Việc sử dụng sa kê phần nguồn dược liệu thiên nhiên góp phần cải thiện sức khỏe cộng đồng 5.2 Đề nghị Tiếp tục tách xác định hợp chất thứ cấp từ phận khác sa kê: búp non, quả, rễ, lõi gỗ Thử nghiệm thu nhận mẫu nhiều địa phương khác tiến đến so sánh hoạt tính sinh học sa kê Thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn chống oxy hóa với cao chiết xuất từ dung môi khác, phương pháp thử khác nồng độ thử nghiệm khác 43   TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Nguyễn Hữu Châu 2007 Kiểm tra tính nhạy cảm kháng sinh vi khuẩn Escherichia coli, Salmonella spp Staphylococcus aureus phương pháp MIC Luận văn tốt ngiệp bác sĩ thú y, Trường ĐH Cần Thơ Nguyễn Khắc Quỳnh Cứ 2000 Bài giảng chiết xuất dược liệu Bộ môn dược liệu Trường ĐH Y Dược TP.HCM Huỳnh Kim Diệu 2008 Sử dụng Xuân Hoa (Pseuderanthemun palatiferum) để phòng trị tiêu chảy heo theo mẹ sau cai sữa Luận án tiến sĩ Nông nghiệp Trường ĐH Nông Lâm TP.HCM Nguyễn Ngọc Hải, Nguyễn Thị Kim Loan 2009 Thực hành nghiên cứu vi sinh vật NXB Nông Nghiệp Trần Thị Việt Hoa, Trần Thị Phương Thảo Vũ Thị Thanh Tâm 2007 Thành phần hóa học tính chống oxy hóa nghệ đen Curcuma zedoaria Berg trồng Việt Nam Tạp chí phát triển Khoa học Cơng nghệ Trần Minh Huệ 2009 Cây Sa Kê – loại đa tác dụng cần quan tâm Viện KHKT Nông Lâm Tây Nguyên Thông tin Khoa học Công nghệ Trần Hùng 2006 Giáo trình thực tập dược liệu Bôn môn dược liệu Trường ĐH Y Dược TP.HCM Nguyễn Thị Thu Hương 2010 Nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa theo hướng bảo vệ gan nấm Linh chi đỏ Ganoderma lucidum Tạp chí Y học TP.HCM Trịnh Thị Phi Ly 2010 Nghiên cứu thành phần hóa học, tính chất hóa lí hoạt tính tinh dầu Màng Tang (Ltsea cubeba (Lour.) Pers) Luận văn Thạc sĩ Khoa học nông nghiệp Trường ĐH Nông Lâm TP.HCM 10 Nguyễn Kim Phi Phụng 2007 Phương pháp cô lập hợp chất hữu NXB ĐH Quốc Gia TP.HCM Tài liệu tiếng Anh 11 Ashok D Patil, Alan J Freyer, Lew Killmer, Priscilla Offen, Paul B Taylor, Bartholomew J Votta, and Randall K Johnson 2002 A New Dimeric Dihydrochalcone and a New Prenylated Flavone from the Bud Covers of Artocarpus altilis: Potent Inhibitors of Cathepsin K Journal of Natural, 65: 624-627 12 Concepción Sánchez-Moreno, José A Larrauri and Fulgencio Saura-Calixto 1998 44   A Procedure to Measure the Antiradical Efficiency of Polyphenols Sci Food Agric, 76: 270-276 13 D Ragone 1997 Breadfruit Artocarpus altilis (Parkinson) Fosberg Promoting The conservation and use of underutilized and neglected crops Institute of Plant Genetics and Crop Plant Research, Gatersleben International Plant Genetic Resources Institute, Roma, Italia, 10: – 77 14 Enos Tangke Arung, Britanto Dani Wicaksono, Yohana Ayupriyanti Handoko, Irawan Wijaya Kusuma, Dina Yuliaand Ferry Sandra 2009 Anti-Cancer Properties of Diethylether Extract of Wood from Sukun (Artocarpus altilis) in Human Breast Cancer (T47D) Cells Tropical Journal of Pharmaceutical Research, 8: 317 - 324 15 Irina I Koleva,Teris A van Beek, Jozef P H Linssen, Aede de Groot and Lyuba N Evstatieva 2002 Screening of plant extracts for antioxidant activity: a comparative study on three testing methods Phytochem Anal, 13: - 17 16 Kriengsak Thaipong, Unaroj Boonprakob, Kevin Crosby, Luis Cisneros-Zevallos, David Hawkins Byrne 2006 Comparison of ABTS, DPPH, FRAP, and ORAC assays for estimating antioxidant activity from guava fruit extracts Journal of Food Composition and Analysis, 19: 669 - 675 17 Lalahalli M, Siddesha, Nataraju Angaswamy and Bannikuppe S Vishwanath 2011 Phytochemical screening and evaluation of in vitro angiotensin- converting enzume inhibitory activity of Artocarpus altilis leaf Natural product research, 25: 1931 - 1940 18 L Pogačnik, N Poklar Ulrih 2011 Determination of antioxidants in Medicinal herbs Bulletin of the Transilvania University of Braşov Series Medical Sciences, 4: 92 – 102 19 Surat Boonphong, Apiwat Baramee, Prasat Kittakoop, and Pakawan Puangsombat 2007 Antitubercular and Antiplasmodial Prenylated Flavones from the Roots of Artocarpus altilis Chiang Mai J Sci, 34: 339 - 344 20 Taslim Ersam, Sjamsul A Achmad, Emilio L Ghisalberti, Euis H Hakim, and Rusjdi Tamin 2000 Some Phenolic Compounds from Artocarpus altilis Fosb International Seminar on the Role of Chemistry in Industry and Enviroment, Andalas University, Padang, 8: 30 - 31 Tài liệu Internet 45   21 Nguyễn Thị Huyền Trang, Lê Thu Thủy, Nguyễn Văn Lâm, Nguyễn Hương Thủy Nghiên cứu biến đổi hàm lượng vitamin C, polyphenol hoạt tính kháng oxi hố ổi q trình chín 2012 http://www.hua.edu.vn:85/tc_khktnn/Upload%5C19112012-14.pdf 12/8/2012 22 Lương y Nguyễn Công Đức Cây sa kê chữa bệnh ? http://vietbao.vn/Suc-khoe/Cay-sa-ke-chua-duoc-benh-gi/45261329/248/ 11/11 2007 23 http://vi.wikipedia.org/wiki/Xa_k%C3%AA 12/3/2013 24 http://en.wikipedia.org/wiki/Trolox 28/6/2013 46   PHỤ LỤC Thuốc thử dragendorff Dung dịch kali iodobismuthat Dung dịch 1: hòa tan 0,85 g bismuth nitrat base (TT) 400 ml nước cất 10 ml acide acetic (TT) Dung dịch 2: hòa tan 0,8 g kali iodoid (TT) ml nước cất Trộn lẫn dung dịch vơi theo thể tích Cứ 10 ml hỗn hợp thu thêm 100 ml nước 20 ml acide acetic (TT) Kết thử hoạt tính đánh bắt gốc tự DPPH mẫu đối chứng Bảng 2.1 Nồng độ kết đo OD Vitamin C Nồng độ (µg/ml) A (OD 517 nm) HTCO (%) 10 2,2834 18,45 20 1,7640 37,00 30 1,2989 53,61 40 0,7257 74,08 50 0,2418 91,36 DPPH 2,8000 Bảng 2.2 Nồng độ kết đo OD Trolox   Nồng độ (µg/ml) 20 A (OD 517 nm) 2,3765 HTCO (%) 15,13 30 1,7964 35,84 40 1,2019 57,08 50 0,7589 72,90 60 0,1618 94,22 DPPH 2,8000 Bảng 2.3 Nồng độ kết đo OD cao petroleum ether vỏ sa kê Nồng độ (µg/ml) A (OD 517 nm) HTCO (%) 720 1,8139 33,02 900 1,6361 39,58 960 1,613 40,44 1320 0,9176 66,20 1380 0,7977 70,54 1500 0,3751 86,15 DPPH 2,7080 Bảng 2.4 Nồng độ kết đo OD cao petroleum ether sa kê tươi Nồng độ (µg/ml) A (OD 517 nm) HTCO (%) 660 1,5180 43,94 900 1,3116 51,57 1200 1,0287 62,01 1290 0,8487 68,66 1440 0,4366 83,88 1500 0,3156 88,35 DPPH 2,7080 Bảng 2.5 Nồng độ kết đo OD cao petroleum ether sa kê vàng Nồng độ (µg/ml) A (OD 517 nm) HTCO (%) 600 720 900 960 1200 1380 1440 1500 DPPH 2,0701 1,6823 1,5877 1,5429 1,4153 1,0681 0,9464 0,7644 2,7080 23,56 37,88 41,37 43,02 47,74 60,56 65,05 71,77 Bảng 2.6 Nồng độ kết đo OD cao ethyl acetate vỏ sa kê   Nồng độ (µg/ml) A (OD 517 nm) HTCO (%) 30 10,5501 10,55 50 23,4637 23,46 60 35,3728 35,37 90 51,4841 51,48 100 55,9032 55,9 110 59,8416 59,84 120 65,4425 65,44 DPPH 2,8000 Bảng 2.7 Nồng độ kết đo OD cao ethyl acetate sa kê tươi Nồng độ (µg/ml) A (OD 517 nm) HTCO (%) 10 2,3377 16,51 20 1,9286 31,12 50 1,5544 44,49 70 0,9728 65,26 90 0,7128 74,54 100 0,3871 79,83 110 0,3485 86,18 DPPH 2,8000 Bảng 2.8 Nồng độ kết đo OD cao ethyl acetate sa kê vàng   Nồng độ (µg/ml) A (OD 517 nm) HTCO (%) 40 2,3004 17,84 50 2,0568 26,54 70 1,6732 40,24 80 1,5987 42,90 90 1,3878 50,44 100 1,1956 57,30 110 1,057 62,25 120 0,9373 66,53 DPPH 2,8000 ... ? ?Khảo sát sơ thành phần hóa thực vật xác định khả kháng khuẩn, khả chống oxy hóa cao chiết từ số phận sa kê (Artocapus altilis)? ?? nhằm đánh giá dược tính sa kê 1.2 Yêu cầu đề tài  Khảo sát số dược... giá trị sa kê Do đề tài: ? ?khảo sát sơ thành phần hóa thực vật xác định khả kháng khuẩn, khả chống oxy hóa cao chiết từ số phận sa kê (Artocapus altilis). ” tiến hành nhằm tìm nguồn lương thực dược... dung thực  Xác định ẩm độ nguyên liệu hiệu suất thu hồi cao sa kê  Chiết tách hợp chất hệ dung môi khác  Khảo sát sơ thành phần hóa thực vật cao chiết từ số phận sa kê  Thử tính kháng khuẩn cao