ĐIỀU CHẾ HẠT NANO KETOPROFEN EUDRAGIT RS

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐIỀU CHẾ HẠT NANO KETOPROFEN - EUDRAGIT RS Ngành học : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Sinh viên thực : TRẦN TẤN KHẢI Niên khóa : 2007 - 2011 Tháng 07/2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐIỀU CHẾ HẠT NANO KETOPROFEN - EUDRAGIT RS Hướng dẫn khoa học Sinh viên thực ThS NGUYỄN TUẤN ANH TRẦN TẤN KHẢI Tháng 07/2011 LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn đến Ban giám hiệu trường Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh, ban chủ nhiệm Bộ môn Công nghệ Sinh học, tất q thầy tận tình dạy, truyền đạt kiến thức quý báu cho suốt thời gian học trường Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến ThS Nguyễn Tuấn Anh cơng tác Phòng thí nghiệm Cơng nghệ Nano – Đại học Quốc Gia Tp Hồ Chí Minh, tạo điều kiện thuận lợi, tận tình bảo, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quý báu cho suốt thời gian thực hoàn thành luận văn tốt nghiệp Xin cám ơn Dược sĩ Lê Ngọc Thành Nhân, ThS Đào Thị Phương Tuyền động viên, giúp đỡ tơi hồn thành tốt luận văn Tôi xin chân thành cám ơn đến ban giám đốc tất anh, chị Phòng thí nghiệm Cơng nghệ Nano – Đại học Quốc Gia Tp Hồ Chí Minh tạo điều kiện cho thực tập tốt nghiệp đóng góp nhiều kinh nghiệm quý báu để tơi hồn thành tốt luận văn Con xin bày tỏ lòng kính u biết ơn sâu sắc cha, mẹ; cám ơn cha, mẹ tin tưởng, yêu thương, tạo điều kiện tốt để học tập tốt Cuối cùng, xin cám ơn bạn lớp DH07SH, người bạn thân ủng hộ, động viên lúc khó khăn Tp Hồ Chí Minh, tháng 07 năm 2011 Sinh viên thực Trần Tấn Khải i TÓM TẮT Ketoprofen dược chất thuộc nhóm chất chống viêm khơng steroid có tác dụng giảm đau, thường dùng để điều trị bệnh thấp khớp viêm khớp Tuy nhiên nhược điểm Ketoprofen thời gian bán thải ngắn, sinh khả dụng thấp nhiều tác dụng phụ, điều gây trở ngại lớn cho bệnh nhân, đặc biệt bệnh nhân phải sử dụng thuốc lâu ngày Để khắc phục nhược điểm trên, phương pháp tiếp cận điều chế hạt nano chứa Ketoprofen polyme thực Với đặc tính phóng thích kéo dài hạt nano polyme, kết thực nghiệm phương pháp tiếp cận hứa hẹn cải thiện tính sinh khả dụng sản phẩm Hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS điều chế phương pháp nhũ hóa bay dung mơi Mục đích nghiên cứu để khảo sát ảnh hưởng nồng độ Eudragit RS dung mơi lên kích thước hạt, đánh giá số tính chất hóa lý học quan trọng hạt Cuối đánh giá khả phóng thích dược chất mơi trường pH 1,2 pH 7,4 Kích thước hạt nano phụ thuộc vào nồng độ Eudragit RS/dung môi Hạt nano điều chế thành cơng có hình dạng tròn đồng với kích thước cỡ 100 nm Qua khảo sát phổ hồng ngoại (FTIR) có tương tác Ketoprofen polyme Eudragit RS Kết định lượng phổ UV – Vis cho thấy hàm lượng Ketoprofen 9,64% Trong môi trường acid (pH 1,2) hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS phóng thích dược chất 14,95% sau giờ, môi trường đệm (pH 7,4) hạt phóng thích dược chất 62,47% sau ii SUMMARY Thesis title: “Prepared nanoparticles Ketoprofen – Eudragit RS” Ketoprofen is analgestic drug classified into non-steroidal anti-inflammatory group It is commonly used to treat rheumatism and arthritis However, the conventional capsule of Ketoprofen has several disadvantages, as the short half-life, low bioavailability and the side effects Consequently, it causes many problems for patients who have to use this drug for long time To overcome these disadvantages, a new approach for preparation of nanoparticles containing Ketoprofen and polymer is proposed With sustained-release properties of the polymeric nanoparticles, the experimental results demonstrate that the proposed approach is promising method to improve bioavailability of product Nanoparticles containing Ketoprofen and Eudragit RS were prepared by emulsion solvent evaporation method The purpose of this research was to investigation effect of the Eudragit RS concentration in organic solvent to the size Next, we pointed out several important chemical and physical properties of nanoparticles Finally, an evaluation of the ability to release drug at the condition of pH 1.2 and pH 7.4 The size of the nanoparticles depended on Eudragit RS concentration in the organic solvent Nanoparticles were prepared successfully with spherical in shape, quite homologous and its size about 100 nm Investigation of fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) indicated that there were the interations between the drug and polyme Eud RS Result of quantitative analysis by ultraviolet – vissible (UV – Vis) showed that the concentration of Ketoprofen was 9.64% In acidic conditions (pH 1.2) nanoparticles Ketoprofen – Eudragit RS released 14.95% after hours, in buffer conditions pH 7.4 they released 62.47% after hours Keywords: nanoparticles, nano Ketoprofen, emulsion solvent evaporation method iii MỤC LỤC LỜI CÁM ƠN i TÓM TẮT ii SUMMARY iii MỤC LỤC iv DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH SÁCH CÁC BẢNG viii DANH SÁCH CÁC HÌNH ix Chương MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài 1.3 Yêu cầu đề tài Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 2.1 Hạt nano – polyme dùng dược phẩm 2.1.1 Cấu trúc hạt nano polyme 2.1.2 Tính chất bề mặt 2.1.3 Những phương pháp xác định kích thước, hình thái .4 2.1.4 Phương pháp đánh giá tương tác dược chất – polyme 2.2 Hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS .7 2.2.1 Dược chất Ketoprofen 2.2.1.1 Dược lý chế tác dụng 2.2.1.2 Dược động học 2.2.2 Polyme Eudragit RS 2.3 Một số phương pháp điều chế hạt nano – polyme 11 2.3.1 Phương pháp chế tạo từ monome 11 2.3.1.1 Phương pháp nhũ hóa bay dung mơi 11 2.3.1.2 Phương pháp khuếch tán nhũ tương 11 2.3.1.3 Phương pháp muối hóa .12 2.3.1.4 Phương pháp ngưng tụ nano .12 2.3.2 Phương pháp chế tạo hạt nano polyme dạng bột khô .13 iv 2.3.3 Hiệu suất tạo hạt phóng thích dược chất .14 2.4 Quá trình đơng khơ tạo bột khơ chứa hạt nano 15 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 3.1 Thời gian địa điểm thực .17 3.2 Vật liệu 17 3.2.1 Nguyên liệu – hóa chất 17 3.2.2 Thiết bị .17 3.3 Phương pháp nghiên cứu 18 3.3.1 Điều chế hạt nano Ketoprofen - Eudragit RS 18 3.3.1.1.Thử nghiệm điều chế hạt nano Ketoprofen - Eudragit RS…… …… 18 3.3.1.2 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ Eudragit RS/acetone (kl/tt) 19 3.3.1.3 Đông khô hỗn dịch nano 21 3.3.2 Các phương pháp xác định tính chất hóa lý 22 3.3.2.1 Đánh giá kích thước hạt trung bình DLS .22 3.3.2.2 Xác định hình học bề mặt hạt nano SEM 22 3.3.2.3 Xác định kích thước hạt TEM 23 3.3.2.4 Đánh giá tương tác Ketoprofen – Eudragit RS phổ FTIR .23 3.3.3 Đánh giá định tính, định lượng hàm lượng Keto phổ UV - Vis 24 3.3.4 Đánh giá độ phóng thích dược chất từ hạt Ketoprofen - Eudragit RS 25 3.3.5 Xử lý số liệu 27 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 4.1 Kết điều chế hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS 28 4.1.1 Kết thử nghiệm điều chế hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS .28 4.1.2 Kết khảo sát ảnh hưởng nồng độ Eudragit RS/acetone (kl/tt) 29 4.1.3 Kết q trình đơng khô với tỉ lệ tá dược bảo vệ khác 31 4.2 Kết xác định tính chất hóa lý hạt nano Ketoprofen - Eudragit RS 34 4.2.1 Kết đánh giá kích thước hạt trung bình DLS .34 4.2.2 Kết đánh giá hình học bề mặt hạt nano SEM 34 4.2.3 Kết xác định kích thước hạt TEM 36 4.2.4 Kết đánh giá tương tác Ketoprofen – Eudragit RS FTIR 36 4.3 Kết định tính, định lượng hàm lượng Keto phổ UV – Vis .38 4.4 Kết đánh giá độ phóng thích dược chất 39 v 4.5 Mơ hình hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS 41 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 43 5.1 Kết luận 43 5.2 Đề nghị 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO .44 PHỤ LỤC vi DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT CRD : Completety radomized design DLS : Dynamic light scatering DNA : Deoxyribonucleic acid DSC : Differential thermal calorimeetry DTA : Differential thermal analysis ESEM : Environmental scanning electron microscopy Eud : Eudragit FTIR : Fourier transform infrared HPLC : High performance liquid chromatography Keto : Ketoprofen kl : Khối lượng Mw : Molecular Weight nm : Nano mét NMR : Nuclear magnetic resonance NSAID : Non - steroidal anti – inflammatory drugs PE : Polyelectrolyte PEG : Poly(ethylene glycol) pK a : Acid dissociation constant PLA : Poly(d, 1-lactic acid) PSS : Poly(styrene sulfonate) PTN : Phòng thí nghiệm PTDC : Phóng thích dược chất SFL : Spay freezing into liquid SEM : Scanning electron microscope TEM : Transmission electron microscope Tg : Glass transition temperature USP-NF25 : United States Pharmacoeia – National formulary 25 UV – Vis : Ultraviolet – Vissible XRD : X – Ray difraction vii DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 2.1 Nhiệt thuỷ tinh hoá hạt nano chế tạo từ Ketoprofen Bảng 2.2 Đặc tính hóa lý Ketoprofen .8 Bảng 2.3 Các loại polyme phương pháp chế tạo hạt nano .10 Bảng 3.1 Nguyên liệu dùng nghiên cứu chế tạo hạt nano Keto – Eud RS 17 Bảng 3.2 Các thiết bị dùng để chế tạo, phân tích kiểm nghiệm hạt nano 18 Bảng 3.3 Thí nghiệm ảnh hưởng nồng độ Eud RS thiết bị siêu âm 20 Bảng 3.4 Thí nghiệm ảnh hưởng nồng độ Eud RS thiết bị khuấy từ 21 Bảng 3.5 Các tỷ lệ tá dược dùng để khảo sát mẫu đông khô 22 Bảng 4.1 Kết ảnh hưởng nồng độ Eud RS lên kích thước hạt siêu âm 29 Bảng 4.2 Kết ảnh hưởng nồng độ Eud RS lên kích thước hạt khuấy từ 30 Bảng 4.3 Kết q trình đơng khơ với tỉ lệ tá dược khác 31 Bảng 4.4 Thông số chế tạo mẫu S – 34 Bảng 4.5 Kết định lượng hàm lượng Ketoprofen mẫu thử S – 39 Bảng 4.6 Dược chất phóng thích mơi trường pH 1,2 39 Bảng 4.7 Dược chất phóng thích môi trường pH 7,4 40 viii Các kết ảnh SEM cho thấy - Ngun liệu Ketoprofen có dạng tinh thể hình chủ nhật, đa giác, có kính thước cỡ vài micro mét, không - Bột Eud RS hạt tinh thể với kích thước lớn nguyên liệu Ketoprofen nhiều - Hạt nano Ketoprofen – Eud RS có dạng hình cầu, kích thước trung bình cỡ 100 nm, phân bố đồng đều, xung quanh tá dược bảo vệ kết dính với Sự kết dính hạt nano Keto - Eud RS mẫu chụp SEM giải thích việc sử dụng hợp chất đường làm tá dược bảo vệ có tính hút ẩm mạnh kết dính lại với 4.2.3 Kết xác định kích thước hạt kính hiển vi điện tử truyền qua (TEM) Hình 4.10 Ảnh TEM bột nano S – Ảnh TEM cho thấy hat nano Ketoprofen – Eudragit RS sau trình đơng khơ, hạt dạng hình cầu, đồng đều, kích thước trung bình 100,74 nm 4.2.4 Kết đánh giá tương tác Ketoprofen – Eudragit RS phổ hấp thu hồng ngoại (FTIR) Phổ FTIR bột Ketoprofen nguyên liệu, Eudragit RS, bột khô nano S – thể hình 4.11 36 Hình 4.11 Phổ FTIR Ketoprofen, Eud RS bột nano S – Xét vùng nhóm chức phổ hồng ngoại (từ 400 cm-1 đến 2.200 cm-1) - Dược chất Ketoprofen có dao động đặc trưng là: dao động C=O nhóm chức cacboxyl có peak 1.701,15 cm-1, dao động C=O nhóm chức ceton có peak 1.657,76 cm-1 - Polyme Eudragit RS có peak đặc trưng 1.734,91 cm-1 dao động C=O nhóm chức este - Trong phổ IR mẫu bột nano Ketoprofen – Eudragit RS (S – 2), quan sát peak đặc trưng: peak dược chất Ketoprofen (là dao động C=O nhóm chức ceton), polyme Eud RS (dao động C=O nhóm chức este) Tuy nhiên, khơng phát thấy dao động C=O nhóm chức cacboxyl Ketoprofen Điều theo Hannele Eerikäinen (2004) nhóm cacboxyl phân tử Ketoprofen tương tác với polyme dẫn đến tương tác nhóm cacboxyl Ketoprofen tinh thể Kết là, nhóm dao động C=O nhóm chức cacboxyl dịch chuyển bước sóng dài, từ bị che lấp dao động mạnh nhóm este Eud RS 37 4.3 Kết đánh giá định tính, định lượng hàm lượng Ketoprofen hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS phổ UV – Vis Kết quét phổ mẫu Ketoprofen chuẩn mẫu S – trình bày hình 4.12 hình 4.13 Hình 4.12 Phổ UV – Vis Ketoprofen chuẩn Hình 4.13 Phổ UV – Vis mẫu S – Qua phổ UV – Vis mẫu S – ta thấy có đỉnh hấp thu số sóng 257 nm ứng với vùng phổ dược chất Ketoprofen (USP30-NF25, 2007) 38 Bảng 4.5 Kết định lượng hàm lượng Ketoprofen mẫu thử S – Lần Cường độ hấp thụ Cường độ hấp Hàm lượng mẫu chuẩn A c thụ mẫu thử A t Ketoprofen (%) 0,671 0,647 9,66 0,673 0,648 9,63 0,674 0,649 9,63 Hàm lượng Ketoprofen trung bình (%) 9,64 Kết tính tốn hàm lượng Ketoprofen (tính ngun trạng) trình bày bảng 4.5 cho thấy bột nano Ketoprofen – Eud RS có hàm lượng dược chất Ketoprofen trung bình khoảng 9,64% 4.4 Kết đánh giá độ phóng thích dược chất Tiến hành đánh giá độ phóng thích dược chất (PTDC) hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS hai môi trường thử nghiệm HCl 0,1 M (pH 1,2) đệm phosphat (pH 7,4) Kết thử nghiệm độ PTDC hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS môi trường pH 1,2 trình bày bảng 4.6 hình 4.14 Bảng 4.6 Dược chất phóng thích mơi trường pH 1,2 Thời gian (phút) 30 60 90 120 Dược chất phóng thích (%) Mẫu Mẫu thử 7,86 10,33 13,68 14,95 Mẫu đối chứng 27,02 38,81 42,81 51,02 Phụ lục 2.1 Đồ thị biểu diễn độ phóng thích (hình 4.14) cho thấy môi trường dày, hạt nano Ketoprofen - Eudragit RS có độ phóng thích dược chất thấp có kiểm sốt 15% so với 50% mẫu đối chứng Điều có ý nghĩa việc chống tác dụng viêm dày dùng dược chất Ketoprofen 39 60 Mẫu đối chứng Phần trăm phóng thích (%) 50 Mẫu thử 51,02 40 42,81 38,81 30 27,02 20 13,68 10 7,86 14,95 10,33 0 30 60 90 120 150 Thời gian (phút) Hình 4.14 Đồ thị biểu diễn dược chất phóng thích môi trường pH 1,2 Kết thử nghiệm độ PTDC hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS môi trường pH = 7,4 trình bày bảng 4.7 hình 4.15 Bảng 4.7 Dược chất phóng thích môi trường pH 7,4 Thời gian (phút) 30 60 90 120 150 180 210 240 Dược chất phóng thích (%) Mẫu Mẫu thử 35,82 39,78 45,63 48,38 52,70 55,36 59,46 62,47 Mẫu đối chứng 89,90 88,20 88,90 89,05 90,00 89,06 91,08 90,40 Phụ lục 2.2 100 Dược chất phóng thích (%) 80 60 40 Mẫu đối chứng 20 Mẫu thử 0 30 60 90 120 150 180 210 240 270 Thời gian (phút) Hình 4.15 Đồ thị biểu diễn dược chất phóng thích mơi trường pH 7,4 40 Thử nghiệm khả phóng thích pH 7,4 240 phút, mẫu đối chứng phóng thích Ketoprofen diễn gần hoàn toàn 30 phút đầu (tỷ lệ 89,9%), mẫu thử 35,82% Sau đó, phóng thích dược chất mẫu thử diễn chậm lại, từ từ, có kiểm sốt tuyến tính theo thời gian Chứng tỏ hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS kiểm sốt tốt phóng thích Ketoprofen tránh tượng dược chất bị thải thể trước thể hấp thu Tuy nhiên, theo Dược Điển Mỹ (USP30-NF25, 2007), chuyên luận viên tan ruột, độ PTDC thuốc phải ≤ 10% dày (môi trường pH 1,2) phải ≥ 85% sau 45 phút môi trường ruột (mơi trường pH 7,4) kết chưa mong muốn Điều giải thích chất polyme Eud RS có độ hòa tan khơng phụ thuộc vào pH mơi trường Do đó, tính tan bột nano Ketoprofen – Eud RS tuyến tính có kiểm sốt theo thời gian Tóm lại, với hạt nano Ketoprofen – polyme Eudragit RS, có khả kiểm sốt độ phóng thích thuốc tốt, chống tác dụng phụ đào thải dược chất keto thể, có tiềm dạng điều chế kiểm soát hấp thu 4.5 Mơ hình hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS Từ kết DLS, ảnh TEM SEM, phổ hồng ngoại IR UV - Vis, đưa mơ hình hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS sau Hình 4.16 Mơ hình hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS - Ban đầu, tinh thể Ketoprofen bột Eudragit RS hòa tan acetone tạo thành phân tử dược chất Keto Eud RS 41 - Thông qua phổ hồng ngoại IR, kết phân tử Ketoprofen Eud RS tương tác với thơng qua nhóm chức cacboxyl Keto với nhóm este Eud RS Sự tương tác làm tăng hòa tan Ketoprofen chất Eud RS mà không xảy tượng tái kết tinh - Hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS hình thành, phân tử Ketoprofen phân tán bên cấu trúc matrix polyme Eud RS 42 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận -Xây dựng quy trình điều chế hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS phương pháp nhũ hóa bay dung môi - Điều chế thành công hạt nano Ketoprofen – Eudragit RS có hình dạng tròn đồng với kích thước cỡ 100 nm - Phổ hồng ngoại (FTIR) cho thấy có tương tác nhóm cacboxylic acid Ketoprofen nhóm este Eud RS - Bẳng phổ UV – Vis cho kết định lượng hàm lượng Ketoprofen mẫu bột nano 9,64% - Kết khảo sát độ phóng thích cho thấy bột nano Ketoprofen – Eudragit RS có khả kiểm sốt tốt phóng thích hai mơi trường trường pH 1,2 pH 7,4 5.2 Đề nghị - Hạt nano Ketoprofen tổng hợp cần thiết có thử nghiệm khả phóng thích dược chất Ketoprofen chuột thỏ có sử dụng chất mang Eudragit RS - Cần có nghiên cứu để tăng hàm lượng dược chất (> 10%), hạn chế khả phóng thích dược chất mơi trường pH 1,2 xuống 10% 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Bộ Y Tế 2002 Dược thư quốc gia, tr 613 – 615 Nguyễn Thị Lai ctv 2006 Nghiên cứu bào chế viên nén Ketoprofen tác dụng kéo dài, mã số đề tài KC 10 - 03.2, đề tài cấp nhà nước Lê Hữu Nguyên 2009 Bước đầu nghiên cứu chế tạo hạt nano Ketoprofen – polyme với Eudragit E 100 Luận văn dược sỹ, Đại học Y Dược Tp HCM Tài liệu tiếng anh B K Kim, S J Hwang, J B Park and H J Park 2002 Preparation and characterization of drug-loaded polymethacrylate microspheres by an emulsion Solvent evaporation method j microencapsulation, vol 19, no 6: 811 - 822 Carlos Astete 2005 Synthesis of poly(D,L-lactide-co-glycolide) nanoparticles with entrapped magnetite A thesis Master of Science in Biological and Agricultural Engineering, Louisiana State University Deore B.V., Mahajan H.S., and Deore U.V 2009 Development and characterization of sustained release microspheres by quasi emultion solvent diffusion method International journal of cemtech ressearch, vol.1, no.3: 634 – 642 Dubernet, C 1995 Thermoanalysis of microspheres Thermochim Acta 248: 259 -269 Hannele Eerikäinen, Leena Peltonen, Janne Raula, Jouni Hirvonen, and Esko I Kauppinen 2004 Nanoparticles containing Ketoprofen and acrylic polymes prepared by an aerosol flow reactor method AAPS PharmSciTech 2004, Article 68 Hannele Eerikäinen 2005 Preparation of nanoparticles consisting of methacrylic polymes and drugs by an aerosol flow reactor method PhD Thesis Faculty of Science, University of Helsinki 10 Hsu F Y., Chueh S C and Wang Y.J 1999 Biomaterials, 20 1931 11 Jarcho M., Bolen C H., Thomas M B., Bobich J, Kay J F and Doremus J., 1976, J Mater Sci., 11 2027 12 KrEudter, J 1983 Physicochemical characterization of polyacrylic nanoparticles International Journall of pharmac Eudtics, vol 14: 43 – 58 13 Moein Moghimi S., Christy Hunter A., and Clifford Murray J 2005 Nanomedicine: current status and future prospects The FASEB Journal, vol 19: 310 - 330 14 Nan Y Zhong L W 2005 Handbook of microscopy for nanotechnology Kluwer Academic Publishers 15 Samuli Hirsjärvi 2008 Preparation and Characterization of Poly(Lactic Acid) Nanoparticles for PharmacEudtical Use PhD Thesis Faculty of Science University of Helsinki 16 Suryanrayanan, R 1995 X-Ray Powqder Diffractometry, in Physical Characterization of PharmacEudtical Solids, vol 70, H.G Brittain, editor Marcel Dekker, inc.: New York: 187 - 221 17 USP30-NF25 2007 Ketoprofen: 2439 44 18 Wassim Abdelwahed, Ghania Degobert, Serge Stainmesse, and Hatem Fessi 2006 Freeze drying of nanoparticles: Formulation, process and storage considerations ELSEVIER Advanced Drug Delivery Reviews 58, 1688–1713 Tài liệu internet 19 http//www.pharma-polymes.com 45 PHỤ LỤC Phụ lục Kết thí nghiệm Phụ lục 1.1 Kích thước hạt trung bình (nm) thí nghiệm Mẫu Lần Lần Lần Trung bình Sai số chuẩn RS5 104 113 114 110,33 3,18 RS10 257 273,6 266,8 265,8 4,82 RS15 326,6 348,4 326,4 333,8 7,3 RS20 509,6 515,4 528,9 517,97 5,72 Phụ lục 1.2 Kích thước hạt trung bình (nm) thí nghiệm Mẫu Lần Lần Lần Trung bình Sai số chuẩn K5 107,6 103,4 98,8 103,27 2,54 K10 262,6 289,6 275,9 276,03 7,79 K15 550,4 582,7 597,9 577 14,01 K20 898,3 977,5 1009,2 961,67 32,98 Phụ lục Kết khảo sát độ PTDC môi trường pH 1,2 pH 7,4 Phụ lục 2.1 PTDC mơi trường pH 1,2 Mẫu thử V hòa m tan (ml) Chuẩ 0,0507 n g 30 phút 60 phút 90 phút 120 phút m viên nang Pha loãng Viên Viên Viên 100 50 lần 900 lần 0,056 0,052 0,061 900 lần 0,078 0,067 0,073 900 lần 0,103 0,087 0,097 900 lần 0,11 Atb % hòa tan (mg) tan 0,674 = 100 mg m Keto 0,098 0,103 0,056 ± 0,003 0,073 ± 0,003 0,096 ± 0,005 0,104 ± 0,003 0,758 7,86 0,996 10,33 1,319 13,68 1,441 14,95 Mẫu đối chứng m Chuẩ 0,050 n 7g 30 phút 60 m viên phút nang 90 = 25 phút mg 120 phút V hòa tan Pha Viên Viên Viên (ml) loãng 100 50 lần 900 lần 0,501 0,510 0,487 900 lần 0,718 0,703 0,712 900 lần 0,820 0,780 0,804 900 lần 1,027 0,854 0,879 m Keto Atb % hòa tan (mg) tan 0,674 0,499 ± 0,007 0,711 ± 0,004 0,777 ± 0,035 0,920 ± 0,054 6,756 27,02 9,702 38,81 10,703 42,81 12,756 51,02 Phụ lục 2.2 PTDC môi trường pH 7,4 Mẫu thử V hòa m tan (ml) Chuẩn 0,0507 210 phút 240 phút 900 lần 0,277 0,284 0,281 900 lần 0,311 0,315 m viên nang 900 lần 0,299 0,355 0,551 900 lần 0,34 900 lần 0,349 0,383 0,398 900 lần 0,38 900 lần 0,409 0,414 0,433 phút phút 0,253 0,263 90 180 loãng lần phút phút Viên 900 60 150 Viên 50 lần phút phút Viên 100 (g) 30 120 pha m Keto tan % hòa (mg) tan 3,453 35,82 3,843 39,87 4,399 45,63 4,664 48,38 5,08 52,70 5,337 55,36 5,732 59,46 6,022 62,47 0,674 0,25 0,33 = 100 mg Atb 0,36 0,387 0,403 0,424 0,255 ± 0,004 0,281 ± 0,002 0,319 ± 0,006 0,335 ± 0,018 0,362 ± 0,014 0,377 ± 0,014 0,402 ± 0,013 0,419 ± 0,007 Mẫu đối chứng m Chuẩn 0,0507 g 30 phút 60 phút 90 phút 120 phút 150 phút 180 phút 210 phút 240 phút m viên nang V hòa tan pha (ml) lỗng 100 50 lần 900 lần 900 lần 900 lần 900 lần 900 lần 900 lần 900 lần 900 lần = 25 mg Viê n1 Viên Viên m Keto Atb % hòa tan (mg) tan 0,674 0,32 0,338 0,331 0,28 0,352 0,335 0,27 0,28 0,28 0,27 0,28 0,27 0,354 0,331 0,326 0,343 0,344 0,324 0,337 0,316 0,338 0,319 0,342 0,313 0,332 ± 0,003 0,322 ± 0,022 0,321 ± 0,022 0,318 ± 0,017 0,318 ± 0,017 0,311 ± 0,017 0,315 ± 0,015 0,309 ± 0,02 22,476 89,90 22,049 88,20 22,224 88,90 22,262 89,05 22,501 90,00 22,266 89,06 22,771 91,08 22,601 90,40 PHỤ LỤC Kết xử lý thống kê phần mềm MSTATC Thí nghiệm 1: khảo sát ảnh hưởng nồng độ Eud RS/acetone lên kích thước trung bình hạt thiết bị siêu âm Bảng Anova ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob -Between 256801.193 85600.398 956.651 0.0000 Within 715.834 89.479 -Total 11 257517.026 Coefficient of Variation = 3.08% Bảng trắc nghiệm phân hạng Duncan's Multiple Range Test LSD value = 25.92 s_ = 5.461 at alpha = 0.010 x Mean = 110.3 D Mean Mean = 265.8 C Mean Mean = 333.8 B Mean Mean = 518.0 A Mean = = = = 518.0 A 333.8 B 265.8 C 110.3 D Thí nghiệm 2: khảo sát ảnh hưởng nồng độ Eud RS/acetone lên kích thước trung bình hạt thiết bị khuấy từ Bảng Anova ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 1274823.456 424941.152 419.406 0.0000 Within 8105.583 1013.198 Total 11 1282929.039 Coefficient of Variation = 6.64% Bảng trắc nghiệm phân hạng Duncan's Multiple Range Test LSD value = 87.21 s_ = 18.38 at alpha = 0.010 x Mean = 103.3 D Mean Mean = 276.0 C Mean Mean = 577.0 B Mean Mean = 961.7 A Mean = = = = 961.7 A 577.0 B 276.0 C 103.3 D ... tử (g/mol) 254.28 Công thức phân tử C H O Độ tan nước (mg/l) 118 (ở 25 C) 16 14 o o 51 (ở 22 C) Độ tan pH 1,2 (mg/l) 130 Độ tan pH 5,0 (mg/l) 840 Độ tan pH 7,4 (mg/l) > 1.400 pKa 3,98 o 94 – 97... constant PLA : Poly(d, 1-lactic acid) PSS : Poly(styrene sulfonate) PTN : Phòng thí nghiệm PTDC : Phóng thích dược chất SFL : Spay freezing into liquid SEM : Scanning electron microscope TEM : Transmission... này, polyme hòa tan pha hữu hỗn hòa với nước acetone, tetrahydrofuran (THF), pha hữu bị nhũ hóa pha nước chấn động học mạnh Pha nước chứa chất nhũ hóa nồng độ cao muối khơng tan dung môi hữu