NGHIÊN CỨU MÔI TRƯỜNG TÁI SINH CHỒI, NHÂN NHANH VÀ TẠO RỄ GIỐNG LAN Dendrobium Liberty

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC      KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU MÔI TRƯỜNG TÁI SINH CHỒI, NHÂN NHANH VÀ TẠO RỄ GIỐNG LAN Dendrobium Liberty Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Niên khóa: 2006 - 2010 MSSV: 06126068 Sinh viên thực hiện: LÊ HOÀI LÂM Tháng 7/2011 i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC     KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU MÔI TRƯỜNG TÁI SINH CHỒI, NHÂN NHANH VÀ TẠO RỄ GIỐNG LAN Dendrobium Liberty Hướng dẫn khoa học: Sinh viên thực hiện: TS PHẠM XUÂN TÙNG LÊ HOÀI LÂM KS HỒ CAO LỘNG NGỌC Tháng 07/2011 ii LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn:  Ban Giám Hiệu trường Đại học Nơng Lâm Thành phố Hồ Chí Minh, Ban chủ nhiệm Bộ môn Công Nghệ Sinh Học, tất quý thầy cô truyền đạt kiến thức cho suốt thời gian học trường  Đặc biệt xin chân thành biết ơn thầy Phạm Xuân Tùng, Giám đốc Trung tâm Nghiên cứu Khoai Tây, Rau Hoa Đà Lạt KS Hồ Cao Lộng Ngọc giúp đỡ tạo điều kiện suốt thời gian thực đề tài tốt nghiệp Trung tâm  Xin cảm ơn tất anh chị, cô làm việc Trung tâm, đặc biệt anh chị bạn Bộ môn Cơng Nghệ Sinh Học tận tình hướng dẫn động viên tơi gặp khó khăn  Cảm ơn ba mẹ, anh chị, tất bạn bè hỗ trợ, giúp đỡ động viên suốt năm qua Thành phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2011 Lê Hồi Lâm iii TĨM TẮT Hiện nay, nhu cầu thị trường hoa kiểng nước, đặc biệt lan tăng nhanh Trong đó, mức độ phát triển lĩnh vực trồng lan hạn chế chưa có đầu tư nghiên cứu chiều sâu chọn tạo giống kĩ thuật ni trồng, nên hiểu rõ đành giá tiềm triển vọng nguồn lợi Để góp phần làm phong phú thêm nguồn giống lan Dendrobium spp., đề tài “Nghiên cứu môi trường tái sinh chồi, nhân nhanh tạo rễ giống lan Hoàng Thảo Dendrobium Liberty” thực để xác định số cơng thức mơi trường ni cấy thích hợp, góp phần xây dựng quy trình nhân giống lan Dendrobium spp đạt hiệu cao Thí nghiệm thưc giống lan Dendrobium Liberty trồng Trung tâm nghiên cứu Khoai Tây, Rau Hoa Đà Lạt Đề tài thực gồm thí nghiệm nhằm mục đích khảo sát ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng đến tái sinh chồi, nhân nhanh tạo rễ giống lan Dendrobium Liberty Ngoài ra, đề tài khảo sát tỉ lệ sống ngồi vườn ươm trồng số loại giá thể Nồng độ BA NAA bổ sung vào môi trường ni cấy thích hợp đến tái sinh chồi lan Dendrobium Liberty in vitro môi trường MS bổ sung 0,6 mg/l BA kết hợp 0,1 mg/l NAA Hệ số nhân chồi cao bổ sung 0,3 mg/l TDZ vào mơi trường ni cấy Bên cạnh đó, bổ sung 0,4 mg/l IBA vào mơi trường ni cấy thích hợp cho tạo rễ Khi trồng giá thể xơ dừa bổ sung 30 % phân trùn, tỉ lệ sống cao so với giá thể xơ dừa không bổ sung phân trùn iv SUMMARY Thesis title: “EFFECT OF SOME FACTORS ON SHOOT REGENERATION, MULTIPLICATION AND ROOTING OF IN VITRO Dendrobium Liberty” Currently, the needs of the domestic flower, especially the orchid is growing fast In fact, the level of development of the sector is limited due to growing orchids, but investors not have in-depth research on breeding and culture techniques of crops and therefore should understand and appreciate the potential and development expectations of resources To contribute to enrich the source of orchid Dendrobium spp., the thesis "Effect of some factors on shoot regeneration, multiplication and rooting of in vitro Dendrobium Liberty " was conducted to determine a number of appropriate culture medium, contributing to the building process of Dendrobium spp effectively The material is Dendrobium Liberty in vitro in Potato, Vesgetable and Flower Research Center, Da Lat The thesis made of four experiments aimed at surveying the effects of growth regulator on directly shoot regeneration, shoot multiplication and root formation of Dendrobium Liberty In addition, the thesis also examined survival ratio of plantlets on different substrates ex vitro BA and NAA concentrations added to culture medium suitable to regenerate shoots Dendrobium Liberty in vitro was MS medium supplemented 0,6 mg/l BA and 0,1 mg/l NAA Suitable culture medium for shoot multiplication was MS medium supplemented 0,3 mg/l TDZ Besides, supplemented 0,4 mg/l IBA in culture medium appropriate for rooting When grown on coconut fibre substrate supplemented 30% earth worm’s manure, the survival rate of planlets in nusery is higher than coconut fibre substrate unsupplemented earth worm’s manure v MỤC LỤC Lời cảm ơn i Tóm tắt ii Sumary iii Mục lục iv Danh sách chữ viết tắt vii Danh sách bảng viii Danh sách hình viii Chương MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Mục tiêu Yêu cầu Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu hoa Hoàng Thảo (Dendrobium spp.) 2.1.1 Phân loại học 2.1.2 Đặc điểm sinh học 2.1.3 Điều kiện sinh thái 2.2 Tình hình sản xuất hoa lan giới Việt Nam 2.2.1 Tình hình sản xuất hoa lan giới 2.2.2 Tình hình sản xuất hoa lan Việt Nam 2.3 Sơ lược giá thể trồng lan 2.3.1 Xơ dừa 2.3.2 Dớn 2.3.3 Than 2.4 Những nghiên cứu nuôi cấy mô lan Dendrobium spp 10 2.4.1 Trên giới 10 2.4.2 Ở Việt Nam 10 2.5 Môi trường điều kiện nuôi cấy mô tế bào thực vật 11 2.5.1 Sơ lược lịch sử nuôi cấy mô tế bào thực vật 11 2.5.2 Môi trường nuôi cấy 12 vi 2.6 Các chất điều hòa sinh trưởng thường dùng nuôi cấy mô 14 2.6.1 Auxin 14 2.6.2 Cytokinin 14 2.6.3 Gibberellin 15 2.7 Điều kiện nuôi cấy 15 7.1 Ánh sáng 15 7.2 Nhiệt độ 15 7.3 Môi trường in vitro 16 2.8 Các yếu tố khác 16 2.8.1 Nguồn carbon 16 2.8.2 Tác nhân tạo gel (gelling agent) 17 2.8.3 pH môi trường 17 2.8.4 Than hoạt tính (activated chorcoal) 17 2.8.5 Tính thẩm thấu mơi trường 18 2.8.6 Amino acid 18 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 3.1 Thời gian địa điểm thí nghiệm 19 3.2 Vật liệu thí nghiệm 19 3.2.1 Đối tượng thí nghiệm 19 3.2.2 Trang thiết bị dụng cụ 19 3.2.3 Điều kiện thí nghiệm 19 3.3 Nội dung thí nghiệm 20 3.3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng BA, NAA lên tái sinh chồi 20 3.3.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng TDZ tới hệ số nhân chồi 21 3.3.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng NAA IBA đến tạo rễ 22 3.3.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát tỉ lệ sống vườn ươm 23 3.4 Cách bố trí thí nghiệm 23 3.5 Xử lý số liệu 23 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 24 4.1 Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng nồng độ BA, NAA lên tái sinh chồi 24 4.2 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng nồng độ TDZ tới hệ số nhân chồi 28 4.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng nồng độ NAA IBA đến tạo rễ 31 vii 4.4 Thí nghiệm 4: Tỉ lệ sống ngồi vườn ươm 32 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 34 5.1 Kết luận 34 5.2 Đề nghị 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO 35 PHỤ LỤC viii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT 2,4-D : C8H6O3Cl2 (2,4-diclorophenoxyacetic acid) 2ip : C10H13N5 [N-(2-isopentyl) adenine] BA : C12H11 (Benzyl adenine) Ctv : Cộng tác viên CV : Hệ số biến động ĐC : Đối chứng IAA : C10H9NO2 (3-indolyl- acetic acid) IBA : C12H13NO2 (3-indolebutric acid) Kinetin : C10H9NO5 (6-Furfurylaminopurine) NAA : C12H10O2 (1-naphathalene acetic acid) NT : Nghiệm thức P : Xác suất sai lầm (mức độ tin cậy) ix DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 3.1 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ BA, NAA lên tái sinh chồi 19 Bảng 3.2 Khảo sát ảnh hưởng TDZ tới hệ số nhân chồi 20 Bảng 3.3 Khảo sát ảnh hưởng NAA IBA đến tạo rễ 21 Bảng 4.1 Ảnh hưởng nồng độ BA, NAA lên tái sinh chồi 24 Bảng 4.2 Ảnh hưởng TDZ tới hệ số nhân chồi 28 Bảng 4.3 Ảnh hưởng NAA IBA đến tạo rễ 30 DANH SÁCH CÁC HÌNH Hình 2.1 Hình ảnh số loài lan thuộc giống Dendrobium spp Hình 3.1 Dendrobium Liberty 19 Hình 4.1 Ảnh hưởng nồng độ BA, NAA lên tái sinh chồi 26 Hình 4.2 Ảnh hưởng TDZ tới hệ số nhân chồi 29 Hình 4.3 Ảnh hưởng NAA IBA đến tạo rễ 31 Hình 4.4 Tỉ lệ sống ngồi vườn ươm 33 x Các nghiệm thức có khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê so với nghiệm thức đối chứng Trong đó, nghiệm thức (bổ sung 0,3 mg/l TDZ vào mơi trường ni cấy) có số chồi cao 5,7 chồi có khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê so với nghiệm thức đối chứng nghiệm thức khác, nghiệm thức (bổ sung 0,4 mg/l TDZ vào môi trường ni cấy) có số chồi cao thứ hai 4,5 chồi Khi tăng nồng độ TDZ cao ức chế sinh trưởng phát triển chồi Như vậy, nồng độ TDZ thích hợp cho việc nhân nhanh chồi lan Dendrobium Liberty 0,3 mg/l Đối chứng 0,1 mg/l TDZ 0,2 mg/l TDZ 0,3 mg/l TDZ 0,4 mg/l TDZ 28 Hình 4.2 Ảnh hưởng TDZ tới hệ số nhân chồi lan Dendrobium Liberty in vitro 4.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng NAA IBA đến tạo rễ lan Dendrobium Liberty in vitro Ngoài quan tiếp nhận ánh sáng thực trình quang hợp, biến đổi lượng ánh sáng thành lượng hóa học tích lũy chất hữu thõa mãn nhu cầu dinh dưỡng cho sinh vật Rễ phận quan trọng thiếu cho phát triển tồn diện rễ hút nước, muối khoáng chất dinh dưỡng từ đất, giúp sinh trưởng, phát triển khỏe mạnh Trong ni cấy in vitro, để tạo hồn chỉnh trước mang ngồi vườn ươm ngồi yêu cầu đầy đủ thân lá, phải đạt yêu cầu có rễ phát triển đầy đủ, khỏe mạnh để thích nghi với điều kiện bên ngồi vườn ươm Khi chuyển từ điều kiện in vitro ngồi vườn ươm, có tác động mạnh mẽ đến như: ẩm độ, ánh sáng, nhiệt độ, môi trường hóa khơng thích hợp… nên dễ bị chết Để kích thích rễ in vitro người ta bổ sung vào mơi trường ni cấy chất kích thích sinh trưởng thuộc nhóm auxin (IAA, IBA, NAA) Đôi để tăng hiệu auxin, kết hợp lượng thích hợp với cytokinin cho hình thành rễ tốt Ngồi ra, bổ sung than hoạt tính giúp kích thích hình thành sinh trưởng rễ nhanh Ở thí nghiệm này, môi trường nuôi cấy bổ sung NAA (0,2; 0,4; 0,6; 0;8 mg/l) IBA (0,2; 0,4; 0,6; 0;8 mg/l) 1mg/l than hoạt tính để tìm nồng độ thích hợp đến tạo rễ cho lan Dendrobium Liberty Auxin có vai trò quan trọng với phân chia tế bào kích thích tạo rễ Do đó, với có mặt NAA IBA mơi trường nuôi cấy cho thấy số rễ/cây cao so với môi trường không bổ sung NAA IBA 29 Bảng 4.3 Ảnh hưởng NAA IBA đến tạo rễ lan Dendrobium Liberty in vitro Nghiệm thức Nồng độ Số rễ/mẫu (mg/l) Chiều dài rễ (mm) 1(ĐC) 9,8e 17,5c 0,2 NAA 9,2f 11,7g 0,4 NAA 13,2c 14,4f 0,6 NAA 10,2ef 12,6g 0,8 NAA 7,8g 10,5h 0,2 IBA 10,9d 15,0e 0,4 IBA 17,7a 25,2a 0,6 IBA 14,6b 18,9b 0,8 IBA 12,7c 16,7d 3,49 3,46 CV (%) Các ký tự khác theo sau giá trị trung bình cột biểu khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê mức P < 0,05 Ở nghiệm thức đối chứng, không sử dụng auxin (NAA, IBA), số rễ chiều dài rễ tương đối lớn (9,8 rễ/cây 17,5 mm) Tuy nhiên, đưa ngồi vườn ươm tỉ lệ chết tương đối cao rễ yếu nhỏ, khả hút chất dinh dưỡng từ đất Bên cạnh đó, ảnh hưởng NAA IBA bổ sung mơi trường in vitro kéo dài chuyển vườn ươm, cho khả sống tốt Đối với NAA, bổ sung 0,4 mg/l NAA vào môi trường nuôi cấy, số rễ chiều dài rễ lớn (13,2 rễ/cây 14,4 mm) Ở nồng độ NAA cao hơn, số rễ chiều dài rễ bắt đầu giảm dần Đối với IBA, bổ sung 0,4 mg/l IBA vào môi trường nuôi cấy, số rễ/ chiều dài rễ lớn (17,7 rễ/cây 25,2 mm) Bảng 4.3, sử dụng IBA kết số rễ chiều dài rễ cao so với sử dụng NAA nồng độ Bộ rễ to khỏe bổ sung IBA vào môi trường ni cấy Nhận xét: Mơi trường ni cấy thích hợp bổ sung 0,4 mg/l IBA cho số lượng rễ nhiều, chất lượng rễ tốt trước đem ngồi vườn ươm 30 Hình 4.3 Ảnh hưởng NAA IBA đến tạo rễ lan Dendrobium Liberty in vitro 31 4.4 Thí nghiệm 4: Tỉ lệ sống đem ngồi vườn ươm Theo Dương Cơng Kiên (2002), ngồi yếu tố nội sinh điều kiện bên ngồi vườn ươm ánh sáng, nhiệt độ, ẩm độ ảnh hưởng nhiều đến sinh trưởng phát triển củ Sự thay đổi điều kiện sống từ tình trạng dị dưỡng sang tự dưỡng làm dễ bị stess chết Do đó, phải hóa từ từ để thích nghi với điều kiện Ở thí nghiệm này, in vitro phòng thí nghiệm đưa ngồi vườn ươm trồng thử nghiệm giá thể gồm 70 % xơ dừa 30 % phân trùn Nghiệm thức đối chứng 100 % xơ dừa Sau 15 ngày đưa vườn ươm với chế độ chăm sóc tốt dần thích nghi với điều kiện bên Kết quả, sau 30 ngày đưa vườn ươm, tỉ lệ sống trồng nghiệm thức đối chứng 38/70 (54,29 %) Tỉ lệ sống trồng giá thể thử nghiệm (70 % xơ dừa + 30 % phân trùn) 60/70 (85,71 %) Như vậy, trồng giá thể thử nghiệm (70 % xơ dừa + 30 % phân trùn) cho tỉ lệ sống cao so với nghiệm thức đối chứng (100% xơ dừa) Mặt khác, trồng giá thể thí nghiệm có bổ sung 30 % phân trùn, có màu xanh non to so với trồng giá thể 100 % xơ dừa 32 Nghiệm thức đối chứng: 100 % xơ dừa Nghiệm thức thí nghiệm: 70 % xơ dừa + 30 % phân trùn Hình 4.4 Tỉ lệ sống vườn ươm sau 30 ngày 33 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Từ kết đạt được, chúng tơi có số kết luận sau:  Trong điều kiện thí nghiệm, mơi trường ni cấy MS bổ sung BA 0,6 mg/l kết hợp với NAA 0,1 mg/l ảnh hưởng thích hợp tới khả tái sinh chồi từ mẫu protocorm ban đầu so với nghiệm thức khác  Mơi trường ni cấy thích hợp để nhân chồi môi trường MS bổ sung 0,3 mg/l TDZ  Mơi trường thích hợp cho hình thành rễ môi trường MS bổ sung 0,4 mg/l IBA  Giá thể xơ dừa bổ sung 30 % phân trùn cho tỉ lệ sống vườn ươm 85,71 % (so với 54,29 % sử dụng giá thể 100 % xơ dừa) 5.2 Đề nghị  Nghiên cứu khả thay TDZ loại cytokinin có giá thành thấp (BA, BAP…) để gia tăng hiệu kinh tế sản xuất giống Dendrobium spp quy mô thị trường  Tiếp tục nghiên cứu thử nghiệm loại giá thể trồng in vitro vườn ươm đạt tỉ lệ sống cao  Nghiên cứu thử nghiệm ảnh hưởng nồng độ đường, than hoạt tính pH đến sinh trưởng phát triển in vitro 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Trần Văn Bảo 2002 Kỹ thuật trồng phong lan Nhà xuất trẻ Trần Thị Dung 2003 Bài giảng nuôi cấy mô tế bào thực vật Trường đại học Nông Lâm Tp HCM Phạm Thành Hổ 2006 Nhập môn Công Nghệ Sinh Học Nhà xuất Giáo Dục Dương Công Kiên 2002 Nuôi cấy mô thực vật Nhà xuất đại học Quốc Gia Tp HCM Nguyễn Đức Lượng Lê Thị Thủy Tiên 2002 Công nghệ tế bào Nhà xuất đại học Quốc Gia Tp HCM Vũ Văn Vụ, Nguyễn Mộng Hùng Lê Hồng Điệp 2006 Công Nghệ Sinh Học Tập 2- Công Nghệ Sinh Học Tế Bào Nhà xuất Giáo Dục Trần Quang Hoàng 2005 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng đến q trình ni cấy in vitro hai giống lan Dendrobium Cymbidium Luận văn tốt nghiệp Kỹ sư Công Nghệ Sinh Học, Đại học Nông Lâm Tp HCM Đặng Quốc Tượng 2008 Khảo sát ảnh hưởng số thành phần dinh dưỡng bổ sung môi trường nuôi cấy đến khả nhân chồi tạo rễ lan Dendrobium spp in vitro Luận văn tốt nghiệp Kỹ sư Công Nghệ Sinh Học, Đại học Nông Lâm Tp HCM Nguyễn Thị Hồng Nhật 2004 Nhân giống in vitro lan Dendrobium phương pháp nuôi vấy chồi đơn giả hành Luận văn tốt nghiệp Kỹ sư Nông Học, Đại học Nông Lâm Tp HCM Tài liệu nước 10 Ed Herman 2000 Micropropagation of Orchids from Stem and Leaf Tissues Agricell Report, Feburary, 2000 11 Nasiruddin, K M., Begum, R and Yesmin, S 2003 Protocorm like bodies and plantlet regeneration from Dendrobium formosum leaf callus Journal of Plant Science (13), 955-957 12 Dr Rhitu Rai 2007 Genetics and plant breeding, Introduction to Plant Biotechnology Scientist National Research Centre on Plant Biotechnology Lal Bhadur Shastri Building Pusa Campus New Delhi-110012 Tài liệu internet 13 http://www.hoalanvietnam.org/Article.asp?ID=262 14 http://www.new.dalatrose.com/View/161/4246/10 15 http://www.google.com.vn/#hl=vi&q=dendrobium+liberty&aq=f&aqi=&aql= &oq=&gs_rfai=&fp=9f67d4ceaed88e9a 35 PHỤ LỤC Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng nồng độ BA, NAA lên nhân chồi lan Dendrobium liberty in vitro Title: anh huong BA va NAA den tai sinh choi Function: ANOVA-2 Data case to 27 Two-way Analysis of Variance over variable (lan lap) with values from to and over variable (ngthuc) with values from to ĐƯỜNG KÍNH CỤM Variable 3: dkinh A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Source Freedom Squares Mean Square F-value Prob -lan lap 0.19 0.095 0.77 0.4795 ngthuc 46.39 5.798 47.08 0.0000 Error 16 1.97 0.123 Non-additivity 0.05 0.048 0.37 Residual 15 1.92 0.128 -Total 26 48.55 -Grand Mean= 12.541 Grand Sum= Coefficient of Variation= 338.600 2.80% Means for variable (dkinh) for each level of variable (ngthuc): Var Value Var Mean 10.133 12.067 12.933 Total Count= 27 15.200 12.600 11.267 12.933 13.200 12.533 RANGE Error Mean Square = 0.1230 Error Degrees of Freedom = 26 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 0.5886 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = = = 9.800 11.80 12.40 14.80 12.80 11.60 13.40 13.00 12.20 Ranked Order H FG DE A CD G B BC EF Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = = = 14.80 13.40 13.00 12.80 12.40 12.20 11.80 11.60 9.800 A B BC CD DE EF FG G H =========================================================================== === TRỌNG LƯỢNG CỤM Variable 4: trongluong A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Source Freedom Squares Mean Square F-value Prob -lan lap 5052.18 2526.091 1.96 0.1729 ngthuc 676030.44 84503.805 65.64 0.0000 Error 16 20599.31 1287.457 Non-additivity 695.71 695.714 0.52 Residual 15 19903.60 1326.907 -Total 26 701681.94 -Grand Mean= 668.985 Grand Sum= 18062.600 Coefficient of Variation= 5.36% Means for variable (trongluong) for each level of variable (ngthuc): Total Count= 27 Var Value Var Mean 379.800 569.000 692.333 996.533 687.800 622.867 763.400 732.267 576.867 RANGE Error Mean Square = 1287 Error Degrees of Freedom = 26 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 60.22 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = = = 356.8 547.8 657.4 1034 724.2 645.6 787.4 663.8 536.8 Ranked Order F E D A C D B D E Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = = = 1034 787.4 724.2 663.8 657.4 645.6 547.8 536.8 356.8 A B C D D D E E Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng TDZ tới hệ số nhân chồi lan Dendrobium Liberty in vitro Title: anh huong TDZ den nhan nhanh choi Function: ANOVA-2 Data case to 15 Two-way Analysis of Variance over variable (lan lap) with values from to and over variable (nghiem thuc) with values from to Variable 3: so choi A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Source Freedom Squares Mean Square F-value Prob -lan lap 0.06 0.032 1.71 0.2401 nghiem thuc 39.77 9.943 532.64 0.0000 Error 0.15 0.019 Non-additivity 0.02 0.018 0.93 Residual 0.13 0.019 -Total 14 39.98 -Grand Mean= 3.320 Grand Sum= Coefficient of Variation= 49.800 Total Count= 15 4.12% Means for variable (so choi) for each level of variable (nghiem thuc): Var Value Var Mean 1.133 2.333 2.867 5.733 4.533 RANGE Error Mean Square = 0.01900 Error Degrees of Freedom = 14 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 0.2414 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 1.200 2.200 2.800 5.800 4.600 Ranked Order E D C A B Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 5.800 4.600 2.800 2.200 1.200 A B C D E Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng NAA IBA đến tạo rễ lan Dendrobium liberty in vitro Title: anh huong NAA IBA den su tao re Function: ANOVA-2 Data case to 27 Two-way Analysis of Variance over variable (llap) with values from to and over variable (ngthuc) with values from to SỐ LƯỢNG RỄ Variable 3: so luong A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Source Freedom Squares Mean Square F-value Prob -llap 0.11 0.055 0.32 0.7287 ngthuc 226.25 28.281 166.54 0.0000 Error 16 2.72 0.170 Non-additivity 0.44 0.436 2.86 Residual 15 2.28 0.152 -Total 26 229.08 -Grand Mean= 11.807 Grand Sum= Coefficient of Variation= 318.800 Total Count= 27 3.49% Means for variable (so luong) for each level of variable (ngthuc): Var Value Var Mean 9.800 9.200 13.200 10.200 7.867 10.933 17.733 14.600 12.733 =========================================================================== === RANGE Error Mean Square = 0.1700 Error Degrees of Freedom = 26 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 0.6920 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = = = 10.00 9.200 13.20 9.800 7.800 11.00 17.40 14.40 13.40 Ranked Order E F C EF G D A B C Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = = = 17.40 14.40 13.40 13.20 11.00 10.00 9.800 9.200 7.800 A B C C D E EF F G CHIỀU DÀI RỄ Variable 4: chieu dai A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Source Freedom Squares Mean Square F-value Prob -llap 0.52 0.259 0.86 0.4412 ngthuc 480.28 60.035 199.50 0.0000 Error 16 4.81 0.301 Non-additivity 1.29 1.286 5.47 Residual 15 3.53 0.235 -Total 26 485.61 -Grand Mean= 15.874 Grand Sum= Coefficient of Variation= 428.600 3.46% Means for variable (chieu dai) for each level of variable (ngthuc): Var Value Var Mean 17.533 11.733 14.467 12.600 10.533 15.067 25.267 18.933 16.733 RANGE Error Mean Square = 0.3010 Total Count= 27 Error Degrees of Freedom = 26 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 0.9208 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = = = 17.80 12.20 14.40 12.40 10.20 15.60 25.60 19.20 16.80 Ranked Order C G F G H E A B D Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = = = 25.60 19.20 17.80 16.80 15.60 14.40 12.40 12.20 10.20 A B C D E F G G H ... ratio of plantlets on different substrates ex vitro BA and NAA concentrations added to culture medium suitable to regenerate shoots Dendrobium Liberty in vitro was MS medium supplemented 0,6 mg/l... supplemented 0,6 mg/l BA and 0,1 mg/l NAA Suitable culture medium for shoot multiplication was MS medium supplemented 0,3 mg/l TDZ Besides, supplemented 0,4 mg/l IBA in culture medium appropriate... grown on coconut fibre substrate supplemented 30% earth worm’s manure, the survival rate of planlets in nusery is higher than coconut fibre substrate unsupplemented earth worm’s manure v MỤC LỤC