Báo Cáo Kết Quả Khảo Nghiệm Đánh Giá Rủi Ro Đối Với Môi Trường Và Đa Dạng Sinh Học Của Ngô Kháng Thuốc Trừ Cỏ ROUNDUP

MỤC LỤC MỤC LỤC HÌNH v MỤC LỤC BẢNG vi TÓM TẮT BÁO CÁO KHẢO NGHIỆM ĐÁNH GIÁ RỦI RO ĐỐI VỚI MÔI TRƯỜNG VÀ ĐA DẠNG SINH HỌC CỦA SỰ KIỆN NK603 – NGÔ KHÁNG THUỐC TRỪ CỎ ROUNDUP GỐC GLYPHOSATE BÁO CÁO KẾT QUẢ KHẢO NGHIỆM SỰ KIỆN NK603 – NGÔ CHỐNG CHỊU THUỐC TRỪ CỎ ROUNDUP GỐC GLYPHOSATE TẠI VIỆT NAM PHẦN I THÔNG TIN CHUNG Tổ chức đăng ký khảo nghiệm: Giống trồng chuyển gen đăng ký khảo nghiệm: Đơn vị khảo nghiệm: Giấy phép khảo nghiệm: PHẦN II TỔNG QUAN VỀ GIỐNG CÂY TRỒNG CHUYỂN GEN 10 Sinh vật cho gen (mô tả đặc điểm sinh vật cho nguồn gốc gen chuyển) 10 Quá trình chuyển nạp gen (phương pháp, cấu trúc vector, cấu trúc gen) 11 2.1 Phương pháp chuyển gen 11 2.2 Cấu trúc vector sử dụng chuyển gen 12 2.3 Cấu trúc gen đưa vào 15 Sinh vật nhận gen 18 Giống trồng chuyển gen 19 4.1 Tính trạng đặc điểm nhận dạng NK603 19 4.2 Sự biểu tính trạng gen đưa vào 19 4.3 Thông tin khác biệt kiện NK603 so với sinh vật nhận 20 4.4 Phương pháp, công nghệ phát kiện NK603 20 4.5 Thông tin lịch sử cấp phép sử dụng kiện NK603 giới 21 Mô tả nguy cơ, khả xảy nguy để xác định rủi ro xảy phóng thích kiện NK603 21 Phần III XÁC ĐỊNH VẤN ĐỀ KHẢO NGHIỆM TẠI VIỆT NAM 23 Kết đánh giá rủi ro môi trường kiện NK603 giới 23 1.1 Đánh giá tác động kiện NK603 lồi sinh vật khơng chủ đích 23 ii 1.2 Đánh giá nguy trở thành cỏ dai, dịch hại, lan tràn xâm lấn kiện NK603 gây ảnh hưởng tới môi trường đa dạng sinh học thơng qua đặc tính kiểu hình nơng học điều kiện đồng ruộng 26 1.3 Đánh giá nguy trôi gen từ kiện MON 89034 sang sinh vật khác hậu xảy 27 1.4 Đánh giá nguy khác gây ảnh hưởng tới môi trường hệ sinh thái Việt Nam 30 1.5 Đánh giá điều kiện môi trường làm tăng cường hạn chế điểm bất lợi kiện NK603 31 Xác định yêu cầu khảo nghiệm Việt Nam: 32 PHẦN IV MỤC TIÊU, NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP KHẢO NGHIỆM SỰ KIỆN NK603 33 Khảo nghiệm hạn chế 33 1.1 Mục tiêu khảo nghiệm 33 1.2 Nội dung khảo nghiệm 33 1.3 Vật liệu sử dụng khảo nghiệm 34 1.4 Thời gian diện tích khảo nghiệm 34 1.5 Địa điểm khảo nghiệm 34 1.6 Phương pháp khảo nghiệm 37 Khảo nghiệm diện rộng vùng sinh thái khác 42 2.1 Mục tiêu khảo nghiệm 42 2.2 Nội dung khảo nghiệm 42 2.3 Vật liệu sử dụng khảo nghiệm 43 Vật liệu hạt giống chuyển gen sử dụng khảo nghiệm diện rộng vùng sinh thái bao gồm: 43 2.4 Thời gian diện tích khảo nghiệm 43 2.5 Địa điểm khảo nghiệm 44 PHẦN V KẾT QUẢ KHẢO NGHIỆM SỰ KIỆN CHUYỂN GEN NK603 TẠI VIỆT NAM 50 Khảo nghiệm hạn chế đánh giá rủi ro môi trường 50 1.1 Đánh giá đa dạng quần thể côn trùng không chủ đích ruộng khảo nghiệm ngơ biến đổi gen so với đối chứng không chuyển gen qua điều tra thực địa 50 1.2 Đánh giá đa dạng thành phần loài sinh vật đất (Collembola) 56 iii 1.3 Đánh giá nguy trở thành cỏ dại, dịch hại xâm lấn gây ảnh hưởng tới môi trường đa dạng sinh học NK603 khảo nghiệm hạn chế Việt Nam 59 1.4 Tóm tắt kết khảo nghiệm hạn chế đánh giá rủi ro môi trường đa dạng sinh học NK603 Việt Nam 66 Khảo nghiệm diện rộng đánh giá rủi ro môi trường 67 2.1 Đánh giá ảnh hưởng NK603 tới loài sinh vật khơng chủ đích thuộc nhóm sâu hại, nhóm bắt mồi ăn thịt, nhóm ký sinh 67 2.2 Đánh giá nguy trở thành cỏ dại, dịch hai, lan tràn hay xâm lấn ảnh hưởng đến môi trường ngô chuyển gen NK603 77 2.3 Đánh giá hiệu kiểm sốt cỏ dại ngơ biến đổi gen NK603 so với đối chứng không chuyển gen 82 2.4 Đánh giá hiệu kinh tế kiện NK603 85 PHẦN VI KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 91 Kết luận 91 Đề nghị 92 TÀI LIỆU THAM KHẢO 93 MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG QUÁ TRÌNH KHẢO NGHIỆM 101 iv MỤC LỤC HÌNH Hình Bản đồ Plasmid vector PV-ZMGT32 13 Hình Bản đồ vector PV-ZMGT32L sử dụng chuyển gen tạo kiện NK603 13 Hình Trình tự axit amin protein CP4 EPSPS 16 Hình Quy trình tạo kiện NK603 17 Hình Diễn biến khí hậu khảo nghiệm hạn chế Văn Giang – Hưng Yên 36 Hình Diễn biến khí hậu khảo nghiệm hạn chế Bà Rịa Vũng Tàu 36 Hình Sơ đồ bố tri khảo nghiệm hạn chế 37 Hình Sơ đồ thu thập số liệu khảo nghiệm hạn chế Việt Nam 41 Hình Sơ đồ bố tri khảo nghiệm hạn chế 47 Hình 10 Sơ đồ thu thập số liệu khảo nghiệm diện rộng Việt nam 49 Hình 11 Đa dạng thành phần lồi trùng khơng chủ đích khảo nghiệm hạn chế ngô chuyển gen NK603 Việt Nam 55 Hình 12 Đa dạng thành phần lồi Collembola khảo nghiệm hạn chế ngô chuyển gen MON 89034 Việt Nam 58 Hình 13 So sánh số tiêu nơng sinh học khảo nghiệm hạn chế ngô chuyển gen MON 89034 Việt Nam 63 Hình 14 Đa dạng thành phần lồi trùng khơng chủ đích khảo nghiệm diện rộng ngơ chuyển gen NK603 Việt Nam 69 Hình 15 Đa dạng thành phần lồi trùng khơng chủ đích (theo nhóm chức năng) khảo nghiệm diện rộng ngô chuyển gen NK603 Việt Nam 74 Hình 16 Các tiêu kiểu hình nơng học giống ngô khảo nghiệm 80 Hình 17 Năng suất thu hoạch ngơ chuyển gen NK603 điều kiện áp lực sâu tự nhiên khảo nghiệm diện rộng Việt Nam 85 v MỤC LỤC BẢNG Bảng Tổng hợp nguyên tố di truyền plasmid vector PV-ZMGT32 14 Bảng Hiện trạng phê chuẩn sử dụng làm thực phẩm, thức ăn chăn nuôi trồng trọt kiện NK603 22 Bảng Đặc tính kiểu hình nơng học kiện NK603 so với đối chứng (số liệu thu thập Hoa Kỳ năm 1999) 27 Bảng Diễn biến thời tiết Văn Giang-Hưng Yên khảo nghiệm hạn chế 36 Bảng Diễn biến thời tiết Bà Rịa vũng Tàu khảo nghiệm hạn chế 36 Bảng Diễn biến thời tiết trình khảo nghiệm diện rộng vùng sinh thái Việt Nam 46 Bảng Cơng thức thí nghiệm đánh giá rủi ro ngô NK603 46 Bảng Sự đa dạng quần thể côn trùng khảo nghiệm hạn chế ngô chuyển gen NK603 Việt Nam 52 Bảng Một số số đánh giá đa dạng lồi trùng khảo nghiệm hạn chế Việt Nam 54 Bảng 10 Đa dạng thành phần loài số đa dạng Collembola khảo nghiệm hạn chế kiện NK603 57 Bảng 11 Đặc tính nơng sinh học ngô NK603 khảo nghiệm hạn chế Việt Nam 61 Bảng 12 Một số tiêu nông sinh học ngô NK603 khảo nghiệm hạn chế Việt Nam (tiếp) 62 Bảng 13 Tính mẫn cảm ngô NK603 khảo nghiệm hạn chế Việt Nam 65 Bảng 14 Sự đa dạng quần thể côn trùng khảo nghiệm diện rộng kiện NK603 Việt Nam 68 Bảng 15 Đa dạng thành phần số loài sâu hại khảo nghiệm diện rộng ngô chuyển gen NK603 Việt Nam 72 Bảng 16 Đa dạng thành phần số loài bắt mồi ăn thịt ký sinh khảo nghiệm diện rộng ngô chuyển gen NK603 Việt Nam 73 Bảng 17 Cấp hại trung bình rệp muội giống ngô khảo nghiệm diện rộng Việt Nam năm 2011 76 vi Bảng 18 Đặc điểm kiểu hình nơng sinh học NK603 khảo nghiệm diện rộng Việt Nam 79 Bảng 19 Tính mẫn cảm với số bệnh hại NK603 khảo nghiệm diện rộng Việt Nam 81 Bảng 20 Kết đánh giá hiệu kiểm soát cỏ dại kiện NK603 kháng thuốc trừ cỏ Roundup gốc glyphosate 84 Bảng 21 Năng suất thu hoạch kiện MON 89034 khảo nghiệm diện rộng Việt Nam 85 vii TÓM TẮT BÁO CÁO KHẢO NGHIỆM ĐÁNH GIÁ RỦI RO ĐỐI VỚI MÔI TRƯỜNG VÀ ĐA DẠNG SINH HỌC CỦA SỰ KIỆN NK603 – NGÔ KHÁNG THUỐC TRỪ CỎ ROUNDUP GỐC GLYPHOSATE TT I Nội dung đánh giá Thông tin chung Kết đánh giá Ghi Tên, địa liên lạc tổ chức đăng ký, người đứng đầu người đầu mối liên lạc Tổ chức đăng ký: Công ty TNHH DEKALB Việt Nam Người đứng đầu đầu mối liên lạc: Nguyễn Hồng Chính Giám đốc Regulatory Affairs, VN Điện thoại: 0988 026 955 chinh.hong.nguyen@monsanto.com Trang Tên trồng chuyển gen Tên trồng chuyển gen: Cây ngô (Zea mays L.) Tên kiện chuyển gen: Sự kiện NK603, Ngô kháng thuốc trừ cỏ Roundup Trang Mục tiêu khảo nghiệm đánh giá rủi ro Thu thập số liệu vùng sinh thái khác Việt Nam để khẳng định lần tính an tồn ngơ biến đổi gen NK603 môi trường đa dạng sinh học Việt Nam ; Đánh giá hiệu sinh học giống ngô biến đổi gen NK603 vùng sinh thái Việt Nam Thông tin sinh vật nhận gen Trang 33,42 Tên nhận gen Trang 18 Thông tin ảnh hưởng bất lợi đến sức khỏe người vật nuôi II trồng Tên trồng nhận gen: Cây ngô (Zea mays L.) Tên giống nhận gen: Giống ngô lai C919 thương hiệu Dekalb Cho đến nay, chưa có tài liệu công bố ảnh hưởng ngô sức khỏe người vật nuôi: Ngô thực phẩm gây ngộ độc, chất gây dị ứng sản sinh chất mang độc tính yếu tố chống dinh dưỡng (anti-nutritions) Trang 18 TT Nội dung đánh giá Mô tả đặc điểm sinh học mối quan hệ sinh vật nhận môi trường tự nhiên Kết đánh giá Ngơ sống năm, có nguồn gốc từ Mexico Trung Mỹ Cây ngô thuộc họ hồ thảo, hồ thảo, lớp mầm Ngơ loại trồng thụ phấn nhờ gió, có hoa đơn tính gốc với hoa đực hoa riêng rẽ Ngơ tự thụ phấn giao phấn chéo với tần suất phụ thuộc vào khoảng cách yếu tố vật lý khác ảnh hưởng đến khả phát tán hạt phấn Ngô hàng năm với chu kỳ trồng ngắn Cây ngô yêu cầu ánh sáng mạnh, trồng điều kiện chiếu sáng mạnh ngô cho suất cao, chất lượng hạt tốt Nhiệt độ lý tưởng để ngô sinh trưởng phát triển 25-300C Cây ngô trồng nhiều loại đất khác nhau, nhiên ngơ thích hợp đất có thành phần giới nhẹ, độ màu mỡ cao, dễ thoát nước, tầng canh tác dày, độ pH: 6-7 Ngơ trồng nhiều vụ năm, tùy theo khí hậu vùng mà thời vụ gieo trồng ngơ có khác song chủ yếu vụ chính: đông xuân, hè thu thu đông Thông tin lịch Giống ngô lai C919, thương hiệu Dekalb Bộ Nông sử sử dụng sinh nghiệp Phát triên nơng thơn cơng nhận giống thức vật nhận năm 1999 trồng rộng rãi nhiều vùng sinh thái Việt Nam Giống ngô lai C919 giống ngắn ngày (thời gian sinh trưởng trung bình từ 90 - 95 ngày), trồng vụ/năm, thích nghi rộng, phù hợp với nhiều loại đất khác nhau, suất cao ổn định từ 10-12 tấn/ha, chi phí thấp, lợi nhuận cao, chống chịu hạn cục nhiều bệnh rỉ sắt, cháy , chịu trồng dày, mật độ lên tới 83.000 cây/ha Ghi Trang 19 Trang 19 III Thông tin trình chuyển gen Phương pháp Sự kiện NK603 tạo phương pháp bắn đạn gia tốc, sử dụng plasmid PV-ZMGT32L với gen chuyển chuyển gen vào cp4 epsps Phương pháp chuyển gen bắn đạn gia tốc sử dụng rộng rãi Trang 11 Vector sử dụng Plasmid vector PV-ZMGT32 sử dụng chuyển gen chuyển gen tạo kiện NK603 plasmid ngun gốc có kích thước 9.3 kb, thiết kế cơng ty Monsanto có chứa cấu trúc biểu gen liền kề nhau, cấu trúc có chứa gen Trang 12 TT Nội dung đánh giá Kết đánh giá cp4 epsps Vector mang gen chọn lọc nptII (kháng kanamycine) gốc tái (ori) Sử dụng enzyme cắt giới hạn MluI cắt giới hạn plasmid vector PV-ZMGT32, thu nhận vector PV-ZMGT32L có kích thước khoảng 6.7 kb Vector sử dụng phương pháp bắn đạn gia tốc để tạo kiện NK603 Sự kiện NK603 chứa cấu trúc biểu gen cp4 epsps không mang gen chọn lọc nptII gốc tái ori Sự kiện NK603 mang 02 gen cp4 epsps Gen cp4epsps phân lập từ chủng vi khuẩn Agrobacterium CP4 mã hóa 02 protein CP4 EPSPS CP4 EPSPS L214P mã hóa cho enzyme 5enolpyruvlyshikimate-3-phosphate synthase (CP4 EPSPS) có trọng lượng 47.6 kDa gồm 455 axit amin Protein CP4 EPSPS protein thuộc nhóm protein EPSPS có tự nhiên có hoạt tính chống chịu cao với glyphosate Protein CP4 EPSPS L214P có cấu trúc chức tương tự CP4 EPSPS khác axit amin vị trí thứ 214 (leucine CP4 EPSPS bị thay proline CP4 EPSPS L214P) 1) ELISA để phát protein CP4 EPSPS; 2) PCR để xác định có mặt gen cp4 epsps 3) Chẩn đốn nhanh có mặt protein CP4 EPSPS que thử Kích thước, trình tự, chức gen đưa vào Phương pháp xác định, phát gen đưa vào IV Thông tin sinh vật chuyển gen Tính trạng đặc điểm nhận dạng sinh vật chuyển gen Có thể nhận kiện NK603 mắt thường nhờ vào biểu tính kháng thuốc trừ cỏ đồng ruộng phun Roundup: cỏ chết kiện NK603 sinh trưởng bình thường phương pháp sinh học phân tử sau: 1) ELISA, 2) PCR 3) lai Southern 4) Chẩn đoán nhanh que thử Ghi Trang 15 Trang 20 Trang 19 Đề nghị Trên sở kết luận từ kết đánh giá rủi ro môi trường đa dạng sinh học giới kết khảo nghiệm đánh giá rủi ro môi trường đa dạng sinh học hai năm 2010 - 2011 Việt Nam kiện NK603 khẳng định tính an tồn dòng ngơ NK603 môi trường đa dạng sinh học, không khác biệt so với ngô truyền thống Công ty TNHH Dekalb Việt Nam kính đề nghị Bộ Nơng nghiệp Phát triển nông thôn nghiệm thu kết đánh giá rủi ro môi trường đa dạng sinh học kiện NK603, bao gồm tổ hợp lai MON 89034xNK603 Việt Nam Đối với kiện NK603 chống chịu thuốc trừ cỏ Roundup gốc glyphosate, vấn đề quan ngại việc sử dụng thuốc trừ cỏ glyphosate thời gian dài tiềm ẩn nguy hình thành tính kháng số lồi cỏ dại Tuy nhiên, theo phân tích khả hình thành cỏ dại thấp Hơn nữa, việc quản lý rủi ro kiện NK603 kháng thuốc trừ cỏ Roundup hạn chế cách luân canh trồng hệ thống cánh tác Vì vậy, triển khai rộng ngồi sản xuất, cơng ty có cam kết việc song song với việc cung cấp giống, cung cấp quy trình kỹ thuật yêu cầu tối thiểu canh tác quản lý hình thành tính kháng điều kiện đồng ruộng Việt Nam Thành phố Hồ Chí Minh, tháng Tổ chức chủ trì khảo nghiệm Viện Di truyền Nông nghiệp năm 2012 Tổ chức đăng ký khảo nghiệm Công ty TNHH Dekalb Việt Nam 92 TÀI LIỆU THAM KHẢO A Hồ sơ đánh giá rủi ro nước ngô NK603 Australia New Zealand Food Authority, 2002 Final risk assessment report: glyphosatetolerant corn line NK603 Canadian Food Inspection Agency, Plant Biosafety Office, 2002 Decision Document DD2002-35 Determination of the Safety of Monsanto Canada Inc.’s Roundup ReadyTM Corn (Zea mays L.) Line 603 Comissão Técnica Nacional de Biosseguranỗa - CTNBio (Brazil) 2004 Risk Assessment of Herbicide Tolerant Maize (NK603) European Commission, 2005 COMMISSION DECISION of March 2005 authorising the placing on the market of foods and food ingredients derived from genetically modified maize line NK 603 as novel foods or novel food ingredients under Regulation (EC) No 258/97 of the European Parliament and of the Council European Food Safety Authority, 2003 Opinion of the Scientific Panel on Genetically Modified Organisms on a request from the Commission related to the safety of foods and food ingredients derived from herbicide-tolerant genetically modified maize NK603, for which a request for placing on the market was submitted under Article of the Novel Food Regulation (EC) No 258/97 by Monsanto (QUESTION NO EFSAQ-2003-002) Opinion adopted on 25 November 2003 Health Canada, Office of Food Biotechnology, 2001 Novel food decision summary for glyphosate-tolerant maize line NK603 Japanese Biosafety Clearing House, Ministry of Environment, 2001 Outline of the biological diversity risk assessment report: Type use approval for NK603 Philippines Department of Agriculture, Bureau of Plant Industry, 2005 Determination of the Safety of Monsanto’s Corn NK 603 (Glyphosate-Tolerant Corn) for Direct Use as Food, Feed and for Processing and for Propagation U.S.Department of Agriculture, Animal and Plant Health Inspection Service, 2000 Monsanto Co Request for Extension of Determination of Nonregulated Status to the Additional Regulated Article: Roundup Ready Corn Line NK603 US Food and Drug Administration, 2000 Letter to Monsanto regarding NK603 US Food and Drug Administration, 2000 Memorandum to file concerning glyphosatetolerant maize link NK603 93 B Tài liệu tham khảo Arẳjo AS, Monteiro RT, Abarkeli RB, 2003 Effect of glyphosate on the microbial activity of two Brazilian soils Chemosphere 2003 Aug;52(5):799-804 Bitzer, Royce J., Buckelew, Lamar D and Pedigo, Larry P., 2002 Effects of Transgenic Herbicide-Resistant Soybean Varieties and Systems on Surface-Active Springtails (Entognatha: Collembola) Environmental Entomology 31(3):449-461 2002 Barry, G., G Kishore, S Padgette, M Taylor, K Kolaoz, M Weldon, D Re, D Elchholtz, K Fincher and L Hallas 1992 Inhibitors of amino acid biosynthesis: Strategies for imparting glyphosate tolerance to crop plants Pages 139 Beck, E., G Ludwig, E.A Auerswald, B Reiss and H Schaller 1982 Nucleotide sequence and exact localization of the neomycin phosphotransferase gene from transposon Tn5 Gene 19:327-336 Benbrook, C 1991 Racing against the clock Pesticide-resistant biotypes gain ground Agrichemical Age Pp 30-33 Bonnette, K.L 2002 An acute oral toxicity study in mice with the E coli-produced ppCP4 EPSPS protein Monsanto Technical Report MSL-18266 St Louis, Missouri Boongird, S., T Seawannasri, T Ananachaiyong, and S Rattithumkul 2003 Effect of Roundup Ready corn NK603 on foraging behavior and colony development of Apis mellifera L under greenhouse conditions Pp 26-27 Proceeding of the Sixth National Plant Protection Conference, November 24-27, 2003 Buckelew, L.D, Pedigo L.P, Mero H.M, Owen M.D.k and Tylkam G.L, 2000 Weed management systems used in evaluating effects on canopy insects J Econ Entomol 93(5): 1437-1443 Codex Alimentarius 2003 Guideline for the conduct of food safety assessment of foods derived from recombinant-DNA plants CAC/GL 45-2003 Codex Alimentarius Commission, Joint FAO/WHO Food Standards Programme, Rome, Italy ftp://ftp.fao.org/codex/Publications/Booklets/Biotech/Biotech_2003e.pdf Della-Cioppa, G., S.C Bauer, B.K Klein, D.M Shah, R.T Fraley, and G.M Kishore 1986 Translocation of the Precursor of 5-Enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate Synthase into Chloroplasts of Higher Plants in vitro Proc Natl Acad Sci USA 83: 6873-6877 Duke, S O and Hoagland, R E.: 1981, Weed Sci 29, 297 Dunfield, K.E., and J.J Germida 2003 Seasonal changes in the rhizosphere microbial communities associated with field-grown genetically modified canola (Brassica napus) Appl Environ Microbiol 69:7310-7318 Dunfield, K.E., and J.J Germida 2004 Impact of Genetically Modified Crops on Soiland Plant-Associated Microbial Communities J Environ Qual 33:806–815 94 FAO/WHO 1991 Strategies for assessing the safety of foods produced by biotechnology, report of Joint FAO/WHO consultation World Health Organization, Geneva, Switzerland FAO/WHO 2001 Evaluation of allergenicity of genetically modified foods Report of a joint FAO/WHO expert consultation on allergenicity of foods derived from biotechnology Food and Agriculture Organization of the United Nations (FAO), Rome, Italy FARRP 2010 Allergen database University of Nebraska Food Allergy Research and Resource Program, Lincoln, Nebraska http://www.allergenonline.org/databasebrowse.shtml Fraley, R.T., S.G Rogers, R.B Horsch, P.R Sanders, J.S Flick, S.P Adams, M.L Bittner, L.A Brand, C.L Fink, J.S Fry, G.R Galluppi, S.B Goldberg, N.L Hoffman and S.C Woo 1983 Expression of bacterial genes in plant cells Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 80:4803-4807 Franz, J.E., M.K Mao, and J.A Sikorski 1997 Glyphosate: A unique global herbicide American Chemical Society (ACS), Washington, DC ACS Monograph No 189 Fuchs, R.L and J.D Astwood 1996 Allergenicity assessment of foods derived from genetically modified plants Food Technology 50: 83-88 Galinat, W.C 1988 The Origin of Corn In Corn and Corn Improvement, Third Edition Number 18 in the series Agronomy G.F Sprague and J.W Dudley (eds.) American Society of Agronomy, Inc., Crop Science Society of America, Inc., and Soil Science Society of America, Inc., Madison, Wisconsin Pp1-31 Giesy, J.P., S Dobson and K.R Solomon 2000 Ecotoxicological risk assessment for Roundup® herbicide Reviews of Environmental Contamination and Toxicology 167: 35-120 Goldstein, S.M 2003 Life history observations of three generations of Folsomia candida (Willem) (Colembola: Isotomidae) fed yeast and Roundup Ready soybeans and corn P 83 Masters thesis Michigan State University Gordon-Kamm, W.J., T.M Spencer, M.L Mangano, T.R Adams, R.J Daines, J.V O’Brien, W.G Start, W.R Adams, S.A Chambers, N.G Willetts, C.J Mackey, R.W Krueger, A.P Kausch and P.G Lemaux 1990 Transformation of maize cells and regeneration of fertile transgenic plants Plant Cell 2: 603-618 Grey, T.C., Robinson, D., Jones, J.M., Stock, S.W., and Thomas, N.L 1983 Effect of age and sex on the composition of muscle and skin from a commercial broiler strain Brit Poult Sci 24: 219-231 Harlow, E., and D Lane 1988 Immunoassay’s Antibodies: A Laboratory Manual.Chapter 14: 553-612 95 Harrison, L.A., M.R Bailey, M.W Naylor, J.E Ream, B.G Hammond, D.L Nida, B.L Burnette, T.E Nickson, T.A Mitsky, M.L Taylor, R.L Fuchs and S.R Padgette 1996 The expressed protein in glyphosate-tolerant soybean, 5enolypyruvylshikimate-3-phosphate synthase from Agrobacterium sp strain CP4, is rapidly digested in vitro and is not toxic to acutely gavaged mice Journal of Nutrition 126:728-740 Harrison, L.A., M.R Bailey, R.M Leimgruber, C.E Smith, D.L Nida, M.L Taylor, M Gustafson, B Heeren and S.R Padgette 1993 Characterization of microbiallyexpressed protein : CP4 EPSPS Monsanto Technical Report MSL-12901 St Louis, Missouri Harvey, L H., T.J Martin, and D Seifers 2003 Effect of Roundup Ready wheat on greenbug, Russian wheat aphid, and wheat curl mite J of Agr and Urb Ento Haslam, E 1993 Introduction, commentary and overview Pages 1-50 in Shikimic Acid: Metabolism and Metabolites John Wiley and Sons, Inc., Chichester, England Hillyard, J.R., M.Y Deng and R.P Lirette 2000 Molecular analysis to determine the genetic stability of Roundup Ready® corn event NK603 across additional generations Monsanto Technical Report MSL 17062 St Louis, Missouri Hunt, A 1994 Messenger RNA 3’ end formation in plants Ann Rev Plant Physiol Plant Mol Biol 45: 47-60 Jackson, Ryan E and Pitre, Henry N., 2004 Influence of Roundup Ready Soybean Production Systems and Glyphosate Application on Pest and Beneficial Insects in Wide-row Soybean J Agric Urban Entomol 21(2): 61–70 Jamornman, S., S Sopa, S Kumsri, T Anantachaiyong, and S Rattithumkul 2003 Roundup Ready corn NK603 effect on Thai greenlacewing, Mallada basalis (Walker) under laboratory conditions Pp 29-30 Proc Sixth Nat Plant Protec Conf., November 24-27, 2003 Jasinki J.R., Eisley, J.B., Young, C.E., Kovach J., Willson H., 2003 Select Nontarget Arthropod Abundance in Transgenic and Nontransgenic Field Crops in Ohio Environ Entomol 32(2): 407-A30413 Jugenheimer, R.W 1976 Corns for special purposes and uses Pages 215-258 in Corn: Improvement, Seed Production, and Uses John Wiley and Sons, New York, New York Kay, R., A Chan, M Daly and J McPherson 1985 Duplication of CaMV 35S promoter sequences creates a strong enhancer for plant genes Science 236:1299-1302 Kishore, G.M and D.M Shah 1988 Amino acid biosynthesis inhibitors as herbicides Ann Rev Biochem 57: 627-663 96 Klee, H.J., Y.M Muskopf and C.S Gasser 1987 Cloning of an Arabidopsis thaliana gene encoding 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase: Sequence analysis and manipulation to obtain glyphosate-tolerant plants Molecular and General Genetics 210:437-442 Klein, T.M., E.D Wolf, R Wu, and J.C Sanford 1987 High velocity microprojectiles for delivering mucleic acids into living cells Nature 327: 70-73 Leach, J.N., George, C and Astwood, J.D (2002) The effect of corn grain matrix on the in vitro digestibility of CP4 EPSPS and CP4 EPSPS L214P proteins from the grain of Roundup Ready corn kiện NK603 in simulated gastric fluid Unpublished study number: 02-01-46-23; MSL-18000 Monsanto Company LeBaron, H.M 1991 Herbicide resistant weeds continue to spread Resistant Pest Management Newsletter 3: 36-37 Levin, J.G and D.B Sprinson 1964 The enzymatic formation and isolation of 3enolypyruvyl shikimate 5-Phosphate J Biol Chem 239: 1142-1150 Mangelsdorf, P.C 1974 Corn - Its Origin, Evolution, and Improvement Harvard University Press, Cambridge, Massachusetts Matsudaira, P 1987 Sequence from picomole quantities of proteins electroblotted onto polyvinylidene diflouride membranes J Biol Chem 262: 10035-10038 McElroy, D., W Zhang, J Cao and R Wu 1990 Isolation of an efficient actin promoter for use in rice transformation The Plant Cell 2:163 McPherson, R M., W C Johnson, B G Mullinix, Jr., W A Mills, III, and F S Peebles 2003 Influence of herbicide tolerant soybean production systems on insect pest populations and pest-induced crop injury J Econ Entomol 96: 690-698 Metcalfe, D.D., J.D Astwood, R Townsend, H.A Sampson, S.L Taylor, and R.L Fuchs 1996 Assessment of the allergenic potential of foods derived from genetically engineered crop plants Critical Reviews in Food Science and Nutrition 36(S): S165-S186 Michigan Farm News, 2002 MSU: Roundup Ready crops are a safe source Michigan Far Bureau 79 (11):7 Morjan WE, Pedigo LF (2002) Suitability of transgenic glyphosate-resistant soybeans to green cloverworm (Lepidoptera: Noctuidae) J Econ Entomol 95: 1275-1280 Odell, J.T., F Nagy and N.-H Chua 1985 Identification of DNA sequences required for activity of the cauliflower mosaic virus 35S promoter Nature 313:810-812 OECD 1999 Consensus document on general information concerning the genes and their enzymes that confer tolerance to glyphosate herbicide ENV/JM/MONO(99)9 Series on harmonization of regulatory oversight in biotechnology No.10 Organisation of European Co-operation and Development, Paris, France 97 OECD 2002 Consensus document on compositional considerations for new varieties of maize (Zea mays): Key food and feed nutrients, anti-nutrients and secondary plant metabolites ENV/JM/MONO (2002)25 Series on the Safety of Novel Foods and Feeds, No Organisation for Economic Co-operation and Development, Paris, France Padgette, S.R., D.B Re, G.F Barry, D.E Eichholtz, X Delannay, R.L Fuchs, G.M Kishore and R.T Fraley 1996 New weed control opportunities: Development of soybeans with a Roundup ReadyTM gene Pages 53-84 in Herbicide-Resistant Crops: Agricultural, Environmental, Economic, Regulatory, and Technical Aspects S.O Duke (ed.) CRC Press, Boca Raton, Florida Padgette, S.R., G.F Barry, D.B Re, D.A Eichholtz, M Weldon, K Kolacz and G.M Kishore 1993 Purification, cloning and characterization of a highly glyphosatetolerant 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase from Agrobacterium sp strain CP4 Monsanto Technical Report MSL0012738 St Louis, Missouri Philippot Laurent, Melanie Kuffner, D Cheneby, G Depret, G Laguerre F MartinLaurent Genetic structure and activity of the nitrate-reducers community in the rhizosphere of different cultivars of maize Plant Soil (2006) 287:177–186 Raven Peter H., 2010 Does the use of transgenic plants diminish or promote biodiversity? New Biotechnology 27, Number 5:528-533 Reicosky, D.C 1995 Impact of tillage on soil as a carbon sink In Farming for a Better Environment Soil and Water Conservation Society Ankeny, IA Ridley, W.P., R.S Sidhu, P.D Pyla, M.A Nemeth, M.L Breeze and J.D Astwood 2002 Comparison of the nutritional profile of glyphosate-tolerant corn event NK603 with that of conventional corn (Zea mays L.) Journal of Agricultural and Food Chemistry 50:7235-7243 Rochester, D.E., J.A Winer and D.M Shah 1986 The structure and expression of maize genes encoding the major heat shock protein, hsp70 The EMBO Journal 5:451-458 Schönbrunn, E., S Eschenburg, W.A Shuttleworth, J.V Schloss, N Amrhein, J.N.S Evans and W Kabsch 2001 Interaction of the herbicide glyphosate with its target enzyme 5-enolpyruvylshikimate 3-phosphate synthase in atomic detail Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 98:1376-1380 Schulz, A., A Kruper, and N Amrhein 1985 Differential sensitivity of bacterial 5enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate synthases to the herbicide glyphosate FEMS Microbiol Lett 28: 297-301 Siciliano, S.D., and J.J Germida 1999 Taxonomic diversity of bacteria associated with the roots of field-grown transgenic Brassica napus cv Quest, compared to the nontransgenic B napus cv Excel and B rapa cv Parkland FEMS Microbiol Ecol 29:263-272 98 Sidhu, R.S., B.G Hammond, R.L Fuchs, J.N Mutz, L.R Holden, B George, and T Olson 2000 Glyphosate-tolerant corn: The composition and feeding value of grain from glyphosate-tolerant corn is equivalent to that of conventional corn (Zea mays L.) J Agric Food Chem 48: 2305-2312 Sjoblad, R D., J.T McClintock and R Engler 1992 Toxicological considerations for protein components of biological pesticide products Regulatory Toxicol and Pharmacol 15: 3-9 Sleisenger, M.H and J.S Fordtran 1989 The stomach and duodenum: Anatomy, physiology, and disease Pages 685 Smith, E.R., G.M Pesti, R.I Bakalli, G.O Ware, and J.F.M Menten 1998 Further studies on the influence of genotype and dietary protein on the performance of broilers Poult Sci 77: 1678- 1687 Steinrtiken, H.C and N Amrhein (1980) The herbicide glyphosate is a potent inhibitor of 5-enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate synthase Biochem Biophys Res Comm 94: 1207-1212 Taylor, M.L., G.F Hartnell, M.A Nemeth, B George, and J.D Astwood 2001 Comparison of broiler performance when fed diets containing Roundup Ready corn NK603, parental line, or commercial corn Poult Sci 80 (Suppl 1): 319 Abstract 1321 Taylor, M.L., Hartnell, G.F., Riordan,S.G., Nemeth, M.A., Karunanandaa, K., George, B and Astwood, J.D (2003) Comparison of broiler performance when fed diets containing grain from Roundup Ready (NK603), YieldGard × Roundup Ready (MON810 × NK603), non-transgenic control, or commercial corn Poultry Science 82: 443–453 Taylor, S.L 1992 Chemistry and detection of food allergens Food Technology 46: 146152 Taylor, S.L., R.F Lemanske Jr., R.K Bush, and W.W Busse 1987 Food allergens: structure and immunologic properties Ann Allergy 59: 93-99 Thomas, W.E., Pline-Srnic, W.A., Thomas, J.F., Edmisten, K.L., Wells, R and Wilcut, J.W (2004) Glyphosate negatively affects pollen viability but not pollination and seed set in glyphosate-resistant corn Weed Science 52: 725–734 Tu, H and A Silvanovich 2010b Updated Bioinformatics Evaluation of Roundup ReadyÒ2 Corn NK603 Utilizing the AD_2010, TOX_2010, PRT_2010, EST_2010, NT_2010, and NR_2010 Databases Monsanto Technical Report RAR-10-139 St Louis, Missouri U.S EPA 1992 Pesticide Tolerance for Glyphosate Federal Register Vol 57 (49): 8739, March 12, 1992 U.S EPA 1993 ReRegistration Eligibility Decision (RED): Glyphosate Office of Prevention, Pesticides and Toxic Substances, U.S Environmental Protection Agency, Washington, D.C 99 Warburton, D.B and W.D Klimstra 1984 Wildlife use of no-till and conventionally tilled corn fields J Soil and Water Cons 39: 327-330 Watson, S.A 1982 Corn: Amazing Maize General Properties In CRC Handbook of Processing and Utilization in Agriculture, Volume II: Part Plant Products I.A Wolff (ed.) CRC Press, Inc., Boca Raton, Florida Pp 3-29 Watson, S.A 1987 Structure and composition In Corn: Chemistry and Technology S.A Watson and R.E Ramstad (eds.) American Association of Cereal Chemists, Inc., St Paul, Minnesota Pp 53-82 Watson, S.A 1988 Corn Marketing, processing, and utilization In Corn and Corn Improvement, Third Edition G.F Sprague and J.W Dudley (eds.) Number 18 in the series Agronomy American Society of Agronomy, Inc., Crop Science Society of America, Inc., and Soil Science Society of America, Inc., Madison, Wisconsin Pp 881-940 WHO 1994 Glyphosate World Health Organization (WHO), International Programme of Chemical Safety (IPCS), Geneva Environmental Health Criteria No 159 WHO 1995 Application of the principles of substantial equivalence to the safety evaluation of foods or food components from plants derived by modern biotechnology In Report of WHO Workshop WHO/FNU/FOS/95.1; World Health Organization, Food Safety Unit, Geneva, Switzerland Williams, G.M., Kroes, R & Munro, I.C (2000) Safety evaluation and risk assessment of the herbicide Roundup and its active ingredient, glyphosate, for humans Regulatory Toxicology and Pharmacology 31, 117-165 Yoshimura, 2004 Effects of consecutive cultivation of glyphosate-tolerant soybean on vegetation, composition of insects and soil microorganisms in Japan 8th Inter Symp Biosafety Gent Mod Org, 26-30 Sept Montpelier, France 100 MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG QUÁ TRÌNH KHẢO NGHIỆM Hình ảnh khóa tập huấn “Quản lý tuân thủ an toàn sinh học khảo nghiệm trồng biến đổi gen” tổ chức Viện Di truyền nông nghiệp, 4/2012 Khu vực khảo nghiệm có hàng rào bảo vệ để ngăn chặn thâm nhập các loài động vật người khơng phận Quy trình canh tác ngơ chuyển gen khơng có sai khác so với ngơ truyền thống Thực nghiêm ngặt biện pháp cách ly sinh sản: Ruộng khảo nghiệm m ngô chuyển chuy gen (ảnh trên) gieo trồng sau ru ruộng xung quanh điểm đ khảo nghiệm 30 ngày (ảnh dưới) Lãnh đạo Bộ Nông nghiệp PTNT, thành viên Hội đồng An tồn Sinh học kiểm tra ruộng khảo nghiệm ngơ chuyển gen công ty TNHH Dekalb Việt Nam Daklak (hình trên) Vĩnh Phúc (hình dưới) Hội nghị đầu bờ “Khảo nghiệm diện rộng giống ngô biến đổổi gen” Bộ Nông nghiệp PTNT phối hợp với Viện Di truyền Nông nghiệp tổ chức ngày 29 tháng năm 2011 Vĩnh Phúc Điều tra hiệu phòng òng trừ cỏ dại ngơ chuyển gen NK603 Vĩnh Phúc (a) NK603 - Ngô chuyển ển gen chống ch chịu thuốc trừ cỏ glyphosate; (b) C919 – Ngô lai không chuyển c gen (đối chứng) (c) Tổ hợpp lai MON 89034 x NK603 mang đặc tính kháng sâu chống ng chị chịu thuốc trừ cỏ Hình ảnh thu hoạch tiêu hủy hạt ngơ biến đổi gen MON89034 NK603 Vĩnh Phúc phương pháp tách hạt nghiền nhỏ địa điểm khảo nghiệm Hình ảnh thu tiêu hủy ngơ biến đổi gen MON89034 NK603 Đăklăk phương pháp tách hạt xử lý ruộng khảo nghiệm Hình ảnh tiêu hủy tồn thân ngơ biến đổi gen MON89034 NK603 Vĩnh Phúc phương pháp chặt nhỏ đốt cháy ruộng khảo nghiệm ... Arabidopsis (bảng 1) 12 MluI 149 EcoRV 169 EcoRI 579 NcoI 8387 SacI 1098 P-ract1 nptII NcoI 1604 ract1 intron CTP2 ori MluI 6855 PV-ZMGT32 9307 bp NOS 3' EcoRI 6837 EcoRV 6827 EcoRI 6561 SacI 6559 CP4... protein CP4 EPSPS CTP2 mơ tả hình Protein CP4 EPSPS protein thuộc nhóm protein EPSPS có tự nhiên (Schulz cộng sự, 1985) So sánh với phần lớn protein ESPSPs khác, protein CP4 EPSPS xác nhận protein... amin protein CP4 EPSPS Trình tự protein CTP2 trình tự gạch chân (từ axit amin – 76) Axit amin đánh dấu đậm, gạch chân axit amin Leucin (trong protein CP4 EPSPS) thay axit amin Proline (trong protein