Nghiên cứu chiết xuất các hợp chất hoạt tính sinh học từ rễ cây mật nhân và ứng dụng trong thực phẩm

Nghiên cứu chiết xuất các hợp chất hoạt tính sinh học từ rễ cây mật nhân và ứng dụng trong thực phẩm. Bài báo nghiên cứu các thông số kỹ thuật của quá trình chiết, tiến hành tối ưu hóa các thông số, đồng thời, nghiên cứu một số hoạt tính sinh học từ dịch chiết rễ cây mật nhân. Sau đó nghiên cứu giảm đắng bằng cách bổ sung vào sản phẩm cafe vừa tạo ra được sản phẩm thực phẩm mới vừa là thực phẩm chức năng tốt dành cho nam giới.

Tạp chí Khoa học Cơng nghệ …, …, 2015, … NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC, HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA DỊCH CHIẾT RỄ CÂY MẬT NHÂN (EURYCOMA LONGIFOLIA JACK) Ở THỪA THIÊN-HUẾ BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHƯNG NINH VÀ ỨNG DỤNG SẢN XUẤT CÀ PHÊ MẬT NHÂN Trương Thị Minh Hạnh1,*, Trần Ý Đoan Trang2 1* Trường Đại học Bách khoa, Đại học Đà Nẵng, 54 Nguyễn Lương Bằng, Thành phố Đà Nẵng *Email: 1*tminhhanh2001@yahoo.com, tydtrang@gmail.com Đến Tòa soạn: 15/09/2015, Chấp nhận đăng: 06/11/2015 TÓM TẮT Bài báo trình bày kết khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết rễ mật nhân (Eurycoma Longifolia Jack) Thừa Thiên- Huế phương pháp chưng ninh Kết cho thấy điều kiện tốt trình chiết nhiệt độ 1000C, tỉ lệ rắn lỏng 1/50 (g/ml) thời gian chưng ninh 60 phút Bằng phương pháp sắc kỷ lỏng ghép khối phổ LC-MS tìm thấy số thành phần hóa học dịch chiết có khả chống khối u, chống ung thư, chống sốt rét có hoạt tính tăng cường sinh lý nam giới Nghiên cứu dịch chiết nước từ rễ mật nhân khơng có hoạt tính kháng oxi hố, khơng có khả kháng E Coli St aureous, đảm bảo tính an tồn thực phẩm, nên sử dụng trực tiếp bổ sung vào thực phẩm Với mục đích đa dạng hóa sản phẩm, vừa có lợi cho sức khỏe, sinh lý người trưởng thành, vừa chấp nhận vị đắng mật nhân, sản phẩm ứng dụng chọn cà phê mật nhân Tiến hành đánh giá cảm quan hai phép thử: phép thử so hàng mức độ ưu tiên phép thử thị hiếu chấp nhận với đối tượng sinh viên trường Đại học Bách khoa người thường xuyên uống cà phê Kết cho thấy việc bổ sung dịch chiết mật nhân với tỉ lệ 50/50 vào sản phẩm cà phê đánh giá u thích tương đương với sản phẩm cà phê khơng bổ sung mật nhân Từ khóa: rễ mật nhân, chưng ninh, kháng oxi hoá, kháng khuẩn, cà phê mật nhân MỞ ĐẦU Mật nhân (Eurycoma longifolia) loại thảo dược biết đến nhiều Đông y với tên thông dụng bá bệnh Hầu hết phận mật nhân có tác dụng trị bệnh Các chiết xuất từ mật nhân y học cổ truyền sử dụng để điều trị bệnh sốt rét, làm thuốc tăng trưởng hoocmon sinh dục làm thuốc hạ nhiệt Rễ mật nhân cho thành phần có giá trị nhất, sử dụng để điều trị nhiều bệnh đau nhức, sốt dai dẳng, sốt rét, suy dương, kiết lỵ, sưng tuyến dùng làm thuốc tăng cường sức khỏe [1] Chiết xuất từ rễ mật nhân dùng để khôi phục lại lượng thể sinh khí, tăng cường lưu thơng máu đồng thời có vai trò tốt phụ nữ sau sinh Ngồi chiết xuất có Trương Thị Minh Hạnh, Trần Ý Đoan Trang chứa hợp chất có hoạt tính chống khối u, chống ký sinh trùng, có khả gây độc tế bào dòng tế bào gây ung thư người ung thư vú, ung thư phổi, ung thư đại tràng chống loét [1] Một hoạt tính bật loại hoạt tính tăng nội tiết tố testosterone nam giới; có nhiều nghiên cứu báo cáo hoạt tính sinh học chuột thể người [1] Vì vậy, việc chiết xuất hợp chất có hoạt tính sinh học quan trọng từ rễ mật nhân để bổ sung vào thực phẩm, tạo sản phẩm vừa đảm bảo giá trị dinh dưỡng vừa có tác dụng ngăn ngừa bệnh tật mang lại sức khỏe cho người cần thiết Trong khuôn khổ báo chúng tơi trình bày kết tìm kiếm điều kiện chiết xuất tốt phương pháp chưng ninh; đánh giá thành phần hố học có dịch chiết phương pháp LC-MS; khảo sát hoạt tính kháng oxi hố hoạt tính kháng khuẩn dịch chiết nước; đồng thời thử nghiệm ứng dụng sản xuất loại sản phẩm nước uống cà phê - mật nhân NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên vật liệu - Rễ mật nhân đặt mua sở bán thuốc uy tín, thu nhận vào khoảng cuối tháng huyện Phú Vang, tỉnh Thừa Thiên Huế, độ tuổi mật nhân lấy rễ từ 5-7 năm tuổi Khi đưa phòng thí nghiệm rửa sơ bộ, thái mỏng, rửa sạch, phơi khô tự nhiên xay nhỏ thành bột; đóng gói bảo quản điều kiện thường phòng thí nghiệm để đưa vào nghiên cứu Rễ thái lát nếm có vị đắng gắt, bột phơi khơ có mùi thơm đặc trưng - Cà phê bột Trung Nguyên a) Nguyên liệu trước xay thành bột b) Bột rễ mật nhân c) Cà phê Trung nguyên Hình Nguyên liệu nghiên cứu 2.2 Phương pháp nghiên cứu - Phương pháp chiết xuất chưng ninh: cho bột rễ mật nhân nước với tỷ lệ thích hợp vào bình cầu, lắp ống sinh hàn tiến hành chưng ninh điều kiện khác nhau, sau lọc bỏ phần bã vải lọc giấy lọc, tiến hành cô bớt nước, cuối đem sấy khối lượng cắn thu không đổi Hiệu suất chiết (H, %) tỷ lệ phần trăm khối lượng cắn thu sau sấy khô (m2, g) với khối lượng mẫu đem thí nghiệm (m1, g): - Xác định hoạt tính kháng oxi hoá phương pháp DPPH [2] - Thử hoạt tính kháng khuẩn: phương pháp đục lỗ hai chủng E Coli Staphylococous aureous [3] - Xác định tổng số vi sinh vật hiếu khí, tổng số nấm men, nấm mốc phương pháp đếm khuẩn lạc [4] Nghiên cứu thành phần hố học, hoạt tính sinh học dịch chiết rễ mật nhân … - Xác định hàm lượng kim loại nặng: phương pháp TCVN 6494:1999, TCVN 6626:2000, TCVN 7877:2008 - Phương pháp cảm quan: Sử dụng phép thử so hàng mức độ ưu tiên phép thử thị hiếu chấp nhận [5] Đầu tiên, dùng phép thử so hàng mức độ ưu tiên để khảo sát mức độ ưu tiên người tiêu dùng ba mẫu cà phê có tỷ lệ dịch cà phê/dịch chiết mật nhân khác nhau, để tìm tỷ lệ thích hợp người sử dụng chấp nhận vị đắng Sau đó, dùng phép thử thị hiếu chấp nhận để đánh giá xác nhận lại chất lượng mẫu cà phê mật nhân pha chế với tỉ lệ chọn - Phương pháp định danh thành phần hoá học dịch chiết: Chuẩn bị dịch chiết điều kiện chiết tốt tìm, phân tích thành phần hoá học dịch chiết sắc ký lỏng khối phổ LC-MS: thiết bị LC/MS Agilent 6120, cột C18, pha động axit focmic 0,1% metanol; chạy chế độ gradient với chế độ negative (chế độ âm) chế độ positive (chế độ dương) - Xử lí số liệu: Giá trị trung bình độ lệch chuẩn tính tốn sở lần thí nghiệm lặp lại xử lý phần mềm minitab phiên 16.0.2 Đối với phương pháp đánh giá cảm quan, số người tham gia thử 50 người, không lặp, sử dụng phần mềm minitab để so sánh điểm thị hiếu trung bình mẫu cà phê: mẫu nước uống cà phê - mật nhân với tỉ lệ chọn mẫu nước cà phê không bổ sung mật nhân Với giả thiết H0 điểm thị hiếu trung bình hai mẫu khơng khác nhau, giả thiết Ha điểm thị hiếu trung bình hai mẫu khác Từ giá trị P sau xử lý số liệu, P < α (mức ý nghĩa lựa chọn để kiểm định) bác bỏ giả thiết H0 chấp nhận giả thiết Ha; ngược lại P > α chấp nhận giả thiết H0 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố đến hiệu suất chiết từ rễ mật nhân dung môi nước Theo tác giả Rajeev Bhat cộng sự, thành phần rễ mật nhân thành phần chủ yếu quassinoid alkaloid [1], đó, alkaloid hợp chất có tính chất phân cực mạnh, quassinoid dẫn xuất triterpen, hợp chất phân cực vừa Do đó, thành phần hòa tan tốt dung mơi phân cực nước Mặt khác, nước dung môi rẻ tiền, dễ kiếm, an toàn bổ sung vào thực phẩm, lại khơng gây mùi vị khó chịu thực phẩm nên chọn nước làm dung môi nghiên cứu 12.0 11.0 10.0 9.0 8.0 Tỷ lệ lỏng//rắn, (ml/g) a) 30 60 90 120 180 240 Thời gian b) chiết, (phút) Hiệu suất chiết, % 13 12 11 10 12.0 11.5 11.0 10.5 10.0 9.5 9.0 13.0 Hiệu suất chiết, % Hiệu suất chiết, % Kết khảo sát đơn biến yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết tỉ lệ lỏng/rắn, thời gian chưng ninh nhiệt độ chưng ninh thể đồ thị Hình a, b, c 60 70 80 90 c) Hình Ảnh hưởng tỉ lệ lỏng/rắn (a), thời gian (b) nhiệt độ chưng ninh (c) đến hiệu suất chiết 100 Nhiệt độ chiết, (0C) Trương Thị Minh Hạnh, Trần Ý Đoan Trang Hình a) thể ảnh hưởng tỷ lệ lỏng/rắn đến hiệu suất chiết với mẫu thực điều kiện thời gian chưng ninh 180 phút, nhiệt độ 800C Kết cho thấy hiệu suất chiết cao (đạt 12,39%), ứng với tỷ lệ lỏng/rắn 50/1 (ml/g) Hình b) thể ảnh hưởng thời gian chưng ninh đến hiệu suất chiết tiến hành mẫu thí nghiệm có tỉ lệ lỏng/rắn 20/1 (ml/g), nhiệt độ chưng ninh 800C Kết cho thấy với thời gian chưng ninh 60 phút, hiệu suất chiết cao (11,72%) Còn Hình 2c), nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu suất chiết, với mẫu thí nghiệm có tỉ lệ lỏng/rắn 20/1 (ml/g), thời gian chiết 180 phút Kết chưng ninh 1000C cho hiệu suất chiết cao (12,20%) Tổng hợp ảnh hưởng yếu tố trên, chọn điều kiện chiết tốt cho rễ mật nhân phương pháp chưng ninh tỷ lệ lỏng/rắn 50/1 (ml/g) với thời gian chiết 60 phút nhiệt độ 1000C Ở điều kiện này, thực nghiệm cho phép thu hiệu suất chiết 13,03% 3.2 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn kháng oxi hố dịch chiết nước từ rễ mật nhân Kết thử hoạt tính kháng oxy hố phương pháp DPPH thể Bảng 1, kết kiểm nghiệm hoạt tính kháng khuẩn dịch chiết nước thu hai chủng vi sinh vật E Coli Staphylococous aureous mơi trường LB trình bày Bảng Trong đó, mẫu chiết nước rễ mật nhân tiến hành chưng ninh 1000C 60 phút với tỷ lệ lỏng/rắn 50/1 (ml/g) Bảng Kết thử hoạt tính kháng oxy hố DPPH STT Ký hiệu mẫu Nồng độ chất thử trung hòa 50% gốc tự DPPH EC50 (µg/ml) Mẫu chiết nước rễ mật nhân >128 Resveratrol ( mẫu tham khảo) 8,3 Bảng cho thấy resveratrol chất kháng oxi hóa mạnh tìm thấy vỏ nho đỏ, hoạt tính kháng oxi hóa resveratrol mạnh gấp lần so với vitamin E gấp 10 lần so với vitamin C Như kết bảng trên, resveratrol có khả khử 50% gốc tự DPPH nồng độ 8,3 µg/ml, dịch chiết nước rễ mật nhân thể hoạt tính kháng oxi hóa nồng độ >128(µg/ml), cho thấy khả kháng oxi hóa yếu Điều hợp lý so sánh với kết cơng bố ngồi nước, chiết xuất thô từ rễ mật nhân dung môi khác cồn hỗn hợp dung môi metanol: clorofom có hoạt tính kháng oxi hố yếu [2, 6] Bảng Kết khảo sát hoạt tính kháng khuẩn Vi khuẩn E coli St aureous Dịch chiết mật nhân 0 Đối chứng (nước cất) 0 Kết phân tích Bảng cho thấy, dịch chiết nước từ rễ mật nhân khơng có khả kháng khuẩn E Coli Staphylococous aureous Kết phù hợp với báo cáo trước tác giả Farouk (2007) Tzar M (2010) khẳng định chiết xuất từ rễ mật nhân Nghiên cứu thành phần hố học, hoạt tính sinh học dịch chiết rễ mật nhân … khả kháng khuẩn [3] Ở nghiên cứu này, nồng độ dịch chiết loãng, tiến hành thí nghiệm hai chủng E Coli Staphylococous aureous; chưa thể kết luận khả kháng khuẩn dịch chiết chủng vi khuẩn khác 3.3 Khảo sát thành phần hoá học dịch chiết nước từ rễ mật nhân Kết phân tích LC-MS thể Hình 3a Hình 3b Hình 3a Kết chạy LC-MS chế độ âm Hình 3b Kết chạy LC-MS chế độ dương Trương Thị Minh Hạnh, Trần Ý Đoan Trang Từ kết phân tích phổ LC-MS, số cấu tử có dịch chiết nước từ rễ mật nhân trình bày Bảng Bảng Thành phần hố học có dịch chiết nước mật nhân Công thức STT Thời gian lưu, (phút) Chế độ chạy Tên hợp chất 2,059 Âm Chaparrinone (α-methyl) C20H26O7 7,784 Âm Eurycomanone C20H24O9 12,687 Âm Eurycomalide C19H24O6 5,250 Dương 3-ethoxy-benzaldehyde C9H10O2 7,770 Dương 9-methoxycanthin-6-one C15H10N2O2 12,400 Dương Canthin-6-one-3N-oxide 11hydroxycanthin-6-one C14H8N2O2 13,002 Dương Eurycomanol C20H26O9 15,961 Dương 15β-O-acetyl-14-hydroxyklaineanone 6α-acetoxy-15β-hydroxyklaineanone C22H30O9 16,289 Dương 13β,18-dihydroeurycomanol 5α,14β,15β-trihydroklaineanone C20H28O9 phân tử Bảng cho thấy, chiết xuất từ nước rễ mật nhân có chứa hai thành phần eurycomanone eurycomanol, quassinoid có thành phần rễ mật nhân [1, 7] Các hợp chất có khả làm tăng nội tiết tố testosterone lượng tinh dịch chuột đực, có tác dụng chống lại estrogen chuột trưởng thành [8] Eurycomanone, 6α-acetoxy-15β-hydroxyklaineanone với hai alkaloid 9-methoxycanthin-6-one canthin-6-one-3N-oxide báo cáo có tác dụng gây độc mạnh dòng tế bào ung thư phổi, dòng tế bào KB, ung thư vú, ung thư đại tràng [1,9] Theo cơng trình nghiên cứu trước đó, eurycomanone, eurycomanol, 13β,18-dihydroeurycomanol 15β-O-acetyl-14hydroxyklaineanone quassinoid có hoạt tính chống ký sinh trùng sốt rét [1,7,9] Hai thành phần chaparrinone (α-methyl) 15β-O-acetyl-14-hydroxyklaineanone báo cáo thành phần có hoạt tính chống khối u [1] Kết phân tích phổ LC-MS cho thấy dịch chiết khơng có thành phần có khả kháng oxi hoá kháng khuẩn Điều giúp giải thích kết nghiên cứu mục 3.2 dịch chiết thu khơng có hoạt tính kháng khuẩn tính kháng oxi hố khơng cao Mặc dù vậy, chiết xuất nước rễ mật nhân có chứa nhiều thành phần hoạt tính sinh học q có tiềm lĩnh vực y dược thực phẩm 3.4 Khảo sát tính an tồn thực phẩm dịch chiết từ rễ mật nhân Nghiên cứu bao gồm khảo sát hàm lượng kim loại nặng, tổng số nấm men - nấm mốc tổng số vi sinh vật hiếu khí dịch chiết thu Kết trình bày Bảng Nghiên cứu thành phần hố học, hoạt tính sinh học dịch chiết rễ mật nhân … Bảng Kết xác định hàm lượng kim loại nặng tổng số vi sinh vật STT Chỉ tiêu Đơn vị tính Kết Pb mg/kg 0,164 As mg/kg 0,0095 Cd mg/kg 0,105 Hg mg/kg 0,075 Tổng số vi sinh vật hiếu khí Số khuẩn lạc/1 ml dịch chiết Tổng số nấm men – nấm mốc Số khuẩn lạc/1 ml dịch chiết Kết Bảng cho thấy, có tồn số kim loại nặng As, Pb, Hg hàm lượng nhỏ so với ngưỡng tối đa cho phép theo qui chuẩn kĩ thuật quốc gia giới hạn ô nhiễm thực phẩm [theo TT-BYT số năm 2011] Đồng thời kết vi sinh cho thấy dịch chiết nước từ rễ mật nhân khơng có chứa vi sinh vật hiếu khí nấm men, nấm mốc Vì vậy, dịch chiết đánh giá an toàn tiêu hàm lượng kim loại nặng, tổng số vi sinh vật hiếu khí tiêu tổng số nấm men – nấm mốc 3.5 Thăm dò ứng dụng sản phẩm thực phẩm Các kết nghiên cứu cho thấy dịch chiết rễ mật nhân nước có thành phần hóa học hoạt tính sinh học tốt Điều lý giải Mật nhân biết đến với nhiều công dụng chữa bệnh thuốc dân gian, loại thảo dược biết đến vị đắng gắt đến khó sử dụng Do đó, để giảm tính đắng vốn có thuốc này, tiến hành sản xuất loại nước uống cà phê – mật nhân, với hy vọng vị đắng cà phê giảm vị đắng mật nhân bổ sung đến mức chấp nhận 3.5.1 Khảo sát tỷ lệ bổ sung dịch chiết mật nhân vào sản phẩm nước uống cà phê- mật nhân Để chọn tỉ lệ dịch cà phê/ dịch chiết mật nhân phù hợp cho sản phẩm nước uống cà phê mật nhân, chuẩn bị mẫu cà phê-mật nhân với tỉ lệ 50:50; 75:25; 25:75 (dịch cà phê: dịch chiết mật nhân) Đầu tiên, dùng phép thử so hàng mức độ ưu tiên, để tìm tỷ lệ thích hợp người sử dụng chấp nhận yêu thích Ở phép thử này, yêu cầu người thử xếp ba mẫu cà phê khác theo mức độ yêu thích vị đắng giảm dần (không xếp đồng hạng) Số lượng người thử 50 người tham gia; sinh viên ngành công nghệ thực phẩm trường Đại học Bách Khoa Đà Nẵng học môn đánh giá cảm quan Kết đánh giá cảm quan 34 phiếu hợp lệ trình bày Bảng Bảng Kết đánh giá cảm quan phép thử so hàng mức độ ưu tiên STT Mẫu café (tỷ lệ dịch cà phê: dịch chiết mật nhân) Tổng hạng Nhóm ý nghĩa Mẫu (50:50) 61 a Mẫu (75:25) 74 a Mẫu (25:75) 69 a Giá trị bảng tra Basker 19,3 Trương Thị Minh Hạnh, Trần Ý Đoan Trang Từ kết cảm quan, thấy mẫu cà phê với tỷ lệ bổ sung dịch chiết mật nhân khơng khác có ý nghĩa; mẫu có tổng hạng thấp nên ưu tiên mẫu mẫu [5] Với tỉ lệ chọn phạm vi nghiên cứu này, với kết phép thử so hàng mức độ ưu tiên trên, chọn tỷ lệ bổ sung 50/50 (dịch cà phê/dịch chiết mật nhân) 3.5.2 Đánh giá chất lượng cà phê có bổ sung dịch chiết mật nhân Sau lựa chọn tỷ lệ dịch cà phê/dịch chiết mật nhân 50/50 cho vị đắng thích hợp với người sử dụng, tiến hành đánh giá chất lượng mẫu cà phê lựa chọn thông qua phép thử thị hiếu chấp nhận người tiêu dùng Qua phép thử này, muốn khẳng định lại chất lượng nước uống cà phê- mật nhân có người tiêu dùng chấp nhận hay khơng, có đánh giá ngang với cà phê không bổ sung mật nhân hay không? Trong phần này, tiến hành song song đánh giá thị hiếu mẫu thử: mẫu cà phê bổ sung dịch chiết mật nhân (với tỷ lệ dịch cà phê/dịch chiết mật nhân 50/50) mẫu cà phê không bổ sung dịch chiết mật nhân làm mẫu đối chứng Người tiêu dùng phép thử gồm 50 người thử người thường xuyên sử dụng cà phê, lần/tuần, kết thu Bảng Bảng Kết tổng hợp phép thử thị hiếu chấp nhận Mẫu cà phê Tổng điểm Điểm thị hiếu trung bình Mẫu (cà phê bổ sung dịch chiết mật nhân) Mẫu – ĐC (cà phê không bổ sung dịch chiết mật nhân) 327 356 6,76 ± 1,33 7,12 ± 1,35 So sánh trung bình, P 0,183 Từ Bảng nhận thấy hai mẫu cà phê dù có bổ sung hay khơng bổ sung dịch chiết mật nhân điểm trung bình thị hiếu tương đương Đối với mẫu cà phê có bổ sung dịch chiết mật nhân, điểm thị hiếu trung bình người thử đánh giá nằm khoảng từ điểm đến điểm tương ứng với mức độ thích đến tương đối thích Như thấy mẫu cà phê bổ sung dịch chiết mật nhân người sử dụng chấp nhận Đồng thời sử dụng phần mềm minitab để so sánh điểm thị hiếu trung bình mẫu cà phê nêu mức ý nghĩa α = 1% phép kiểm định t-student cho hai mẫu, thu giá trị P = 0,183 > 0,01 Như vậy, mức ý nghĩa α = 1%, điểm thị hiếu trung bình cà phê có bổ sung dịch chiết mật nhân khơng khác điểm thị hiếu trung bình cà phê khơng có bổ sung Do đó, mẫu cà phê có bổ sung dịch chiết mật nhân theo đánh giá ngang mẫu cà phê không bổ sung dịch chiết Từ khảo sát thăm dò trên, nhận thấy việc bổ sung dịch chiết mật nhân vào sản phẩm cà phê có ý nghĩa việc làm giảm vị đắng dịch chiết nguyên chất cách đáng kể Điều góp phần cho việc nghiên cứu tạo sản phẩm cà phê thị trường KẾT LUẬN Nghiên cứu thành phần hoá học, hoạt tính sinh học dịch chiết rễ mật nhân … Kết nghiên cứu cho thấy trình chiết xuất dung môi nước rễ mật nhân phương pháp chưng ninh đạt hiệu suất thu nhận cao chiết 13,03% (% khối lượng cao chiết khô so với khối lượng nguyên liệu đem chiết) điều kiện nhiệt độ 1000C; tỷ lệ rắn/lỏng 1/50 (g/ml) thời gian chiết 60 phút Với dịch chiết thu trên, kết nghiên cứu khơng thể hoạt tính kháng oxi hố hoạt tính kháng khuẩn hai chủng E.coli Staphylococcus aureus Bằng phương pháp LC-MS định danh số cấu tử có dịch chiết nước rễ mật nhân với nhiều hoạt tính sinh học hoạt tính chống khối u, chống ung thư, chống sốt rét tăng cường sinh lý nam giới Dịch chiết nước từ rề mật nhân đảm bảo an toàn thực phẩm với tiêu hàm lượng kim loại nặng, tiêu tổng số vi sinh vật hiếu khí tổng số nấm men – nấm mốc, đảm bảo an tồn bổ sung vào thực phẩm Để giảm vị đắng dịch chiết nước mật nhân, việc bổ sung vào sản phẩm cà phê với tỷ lệ 50/50 (dịch cà phê/ dịch chiết mật nhân) đánh giá yêu thích có vị đắng chấp nhận Để chiết tách cấu tử có hoạt tính sinh học với hiệu suất cao hơn, tiếp tục nghiên cứu chiết xuất dung môi khác với điều kiện có áp suất phương pháp chiết chân không chiết siêu âm Đồng thời, tiến hành định danh thành phần hoá học dịch chiết mật nhân thu phương pháp LC-MS-MS để thu kết xác TÀI LIỆU THAM KHẢO Rajeev Bhat, Karim A.A - Tongkat Ali (Eurycoma longifolia Jack): a review on its ethnobotany and pharmacological importance, Fitoterapia -, 81 (2010) 669 – 679 Varghese C.P., Ambrose C., Jin S.C., Lim Y.J and Keisaban T - Antioxidant and antiinflammatory activity of Eurycoma longifolia Jack, a traditional medicinal plant in Malaysia, International Journal of Pharmaceutical Sciences and Natotechnology -, 5(4) (2013) 1875 – 1878 Abd ElAziem Farouk, Asma Benafri TS - Antibacterial activity of Eurycoma longifolia Jack, a Malaysia medicinal plant, Journal Saudi Med -, 28(9) (2007) 1422 – 1424 PGS TS Lê Thanh Mai, PGS TS Nguyễn Thị Hiền, PGS TS Phạm Thu Thuỷ, TS Nguyễn Thanh Hằng, ThS Lê Thị Lan Chi - Các phương pháp phân tích ngành cơng nghệ lên men, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, (2004), tr 316 -318 Nguyễn Hoàng Dũng, Trương Cao Suyền, Nguyễn Thị Minh Tú, Phan Thuỵ Xuân Uyên (biên dịch) - Đánh giá cảm quan thực phẩm – Nguyên lý thực hành, NXB Đại học Quốc gia, Hồ Chí Minh, (2007), tr 296 Purwwantiningsih, Abas hi hussin, Kit Lam Chan - Free radical scavenging activity of the standardized ethanolic extract of Eurycoma longifolia (TAF-273), International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences -, 3(4) (2011) 343 – 347 Low BS, Choi SB, Abdul Wahab H., Das PK, Chan KL - Eurycomanone, the major quassinoid in Eurycoma longifolia root extract increases spermatogenesis by inhibiting the activity of phosphodiesterase and aromatase in steroidogenesis, Journal Ethopharmacol -, 149(1) (2013) 201 – 207 Teh CH, Muruqaiyah V., Chan KL - Developing a validated liquid chromatography-mass spectrometric method for the simultaneous analysis of five bioactive quassinoid markers for the standardization of manufactured batches of Eurycoma longifolia Jack extract as antimalarial medicaments -, Journal Chromatoqr A, 1218(14) (2011) 1861 – 1877 Trương Thị Minh Hạnh, Trần Ý Đoan Trang Ching-Hao Li, Jiunn-Wang Liao, Po-Lin Liao, Wei-Kuang Huang, Ling-Shan Tse, ChengHui Lin, Jaw-Jou Kang, Yu-Wen Cheng - Research article: evaluation of acute 13-week subchronic toxicity and genotoxicity of the powdered root of Tongkat Ali (Eurycoma longifolia Jack)”, Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine -, 2013 (2013) - 11 ABSTRACT RESEARCH ON CHEMICAL COMPONENT AND BIOACTIVITIES OF EXTRACT OF EURYCOMA LONGIFOLIA JACK ROOT AT THUA THIEN HUE PROVINCE USING LEACHING METHOD AND APPLICATION IN PRODUCING EURYCOMA LONGIFOLIA COFFEE Truong Thi Minh Hanh1,*, Tran Y Doan Trang2 1* University of Science and Technology – The University of Danang, 54 – Nguyen Luong Bang, Dannang *Email: 1*tminhhanh2001@yahoo.com, 2tydtrang@gmail.com This article presents investigaion results of parameters that affect extraction process of Eurycoma Longifolia Jack root at Thua Thien Hue Province by applying leaching extract method Results show that the best condition of extraction can be achieved when temperature is at 1000C, ratio of solid – liquid is 1/50 (g/ml) and extraction time is 60 minutes When using liquid chromatography – mass spectrometers method (LC-MS), several phytochemicals of this extract are found to cytotoxic effects with KB cell lines, breast and colon cancer have antitumor, and anti-plasmodial effects and contain aphrodisiac and testosterone that can enhance reproductivity of male In addition, this research shows that the water root extract from Eurycoma Longifolia not have antioxidant activity and not show antibacterial property with E Coli and St aureous, but still ensure food safety Thus, the extract can be used directly or added to food With the aim to diversify food products and provide not only physiological and reproductive health benefits for adults but also acceptable bitter taste of the Eurycoma Longifolia water extract, Eurycoma Longifolia extract coffee is selected as an application product Sensory evaluation is conducted through two experiments: preference ranking and acceptability test, in which students of the Da Nang University of Science and Technology are participants Experiment results show that when adding the water extract to coffee products with ratio 50/50, the obtained Eurycoma Longifolia extract coffee is evaluated as favorable as normal coffee Keywords: Eurycoma Longifolia root, leaching extract, antioxidant, antibacterial, Eurycoma Longifolia extract coffee 10 ... 11hydroxycanthin-6-one C14H8N2O2 13,002 Dương Eurycomanol C20H26O9 15,961 Dương 15β-O-acetyl-14-hydroxyklaineanone 6α-acetoxy-15β-hydroxyklaineanone C22H30O9 16,289 Dương 13β,18-dihydroeurycomanol... KB, ung thư vú, ung thư đại tràng [1,9] Theo cơng trình nghiên cứu trước đó, eurycomanone, eurycomanol, 13β,18-dihydroeurycomanol 15β-O-acetyl-14hydroxyklaineanone quassinoid có hoạt tính chống... độ ch y Tên hợp chất 2,059 Âm Chaparrinone (α-methyl) C20H26O7 7,784 Âm Eurycomanone C20H24O9 12,687 Âm Eurycomalide C19H24O6 5,250 Dương 3-ethoxy-benzaldehyde C9H10O2 7,770 Dương 9-methoxycanthin-6-one