KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA LÁ KHOAI MÌ VÀ POTASSIUM NITRATE LÊN SẢN SINH KHÍ METHANE TRONG MÔI TRƯỜNG LÊN MEN IN VITRO

BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NI – THÚ Y **************** KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA LÁ KHOAI MÌ VÀ POTASSIUM NITRATE LÊN SẢN SINH KHÍ METHANE TRONG MƠI TRƯỜNG LÊN MEN IN VITRO Sinh viên thực : CHÂU THỊ THU NGÀ Lớp : DH08TA Ngành : Chăn ni Niên khóa : 2008 – 2012 Tháng 08/2012 BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NUÔI – THÚ Y **************** CHÂU THỊ THU NGÀ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA LÁ KHOAI MÌ VÀ POTASSIUM NITRATE LÊN SẢN SINH KHÍ METHANE TRONG MƠI TRƯỜNG LÊN MEN IN VITRO Khóa luận đệ trình để đáp ứng yêu cầu cấp Kỹ sư chăn nuôi chuyên ngành sản xuất thức ăn Giáo viên hướng dẫn ThS LÊ THỤY BÌNH PHƯƠNG PGS.TS DƯƠNG NGUYÊN KHANG i Tháng 08/2012 XÁC NHẬN CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN Họ tên sinh viên thực tập: CHÂU THỊ THU NGÀ Tên luận văn: “KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA LÁ KHOAI MÌ VÀ POTASSIUM NITRATE LÊN SẢN SINH KHÍ METHANE TRONG MƠI TRƯỜNG LÊN MEN IN VITRO” Đã hoàn thành luận văn theo yêu cầu giáo viên hướng dẫn ý kiến nhận xét, đóng góp hội đồng chấm thi tốt nghiệp khoa ngày …………… Giáo viên hướng dẫn ThS Lê Thụy Bình Phương ii LỜI CẢM ƠN Chân thành cảm ơn Ban giám hiệu trường Đại Học Nông Lâm Tp Hồ Chí Minh, ban chủ nhiệm khoa Chăn Nuôi – Thú Y, môn Sinh lý – Sinh hóa, mơn Dinh Dưỡng, mơn Di truyền giống Tồn thể q thầy, trường Đại Học Nơng Lâm tận tình dạy bảo em suốt trình học tập trường Tỏ lòng biết ơn đến Lời xin cảm ơn cha mẹ, anh chị em gia đình, người tận tụy lo lắng hy sinh để có ngày hơm Gửi lời cảm ơn sâu sắc đến ThS Lê Thụy Bình Phương PGS.TS Dương Nguyên Khang người hết lòng giúp đỡ hướng dẫn em suốt q trình hồn thành khóa luận tốt nghiệp Em chân thành cảm ơn Cô Hồ Thị Nga, Cô Nguyễn Thị Phương Dung, cô Nguyễn Ngọc Thanh Xuân, Thầy Nguyễn Phúc Lộc, Thầy Đặng Kiên Cường nhiệt tình tạo điều kiện thuận lợi cho em trình thực tập phòng thí nghiệm Gửi lời cảm ơn đến Ban giám đốc anh chị em lò mổ Út Hảo, huyện Dĩ An, tỉnh Bình Dương tạo điều kiện giúp tơi hồn thành luận văn tốt nghiệp Các anh chị thực tập bệnh xá thú y giúp đỡ em q trình phân tích xử lí mẫu Anh Duy, anh Tú, chị Nhung, bạn Giàu, tập thể lớp DH08TA động viên, chia sẻ giúp đỡ suốt thời gian học tập thực đề tài tốt nghiệp Chân thành cảm ơn ! Châu Thị Thu Ngà iii TÓM TẮT LUẬN VĂN Thí nghiệm: “Khảo sát ảnh hưởng khoai mì potassium nitrate lên sản sinh khí methane mơi trường lên men in vitro” thực từ ngày 01/03/2012 đến ngày 15/05/2012 phòng thí nghiệm mơn Sinh lý – Sinh hóa mơn Di truyền giống, khoa Chăn Nuôi Thú Y, trường Đại Học Nông Lâm Tp HCM Mục tiêu nghiên cứu: Nhằm khảo sát khả sinh methane hai nguồn nitơ môi trường lên men in vitro Phương pháp khảo sát: Hỗn hợp thực liệu (đã tính theo tỷ lệ) cho vào bình ủ 1500 ml ủ điều kiện yếm khí 39oC để so sánh khả sinh khí methane khoảng thời gian 6h, 24h tỷ lệ tiêu hóa sau kết thúc trình ủ 24h Kết thu được:  Thí nghiệm 1: Nồng độ HCN khoai mì giảm 53,3 % qua trình phơi nắng Tỷ lệ nitơ hòa tan mì phơi nắng (27,0 %) thấp so với tươi (32,2 %)  Thí nghiệm 2: Tổng thể tích khí sinh nghiệm thức có bổ sung urea (1829 ml) cao nghiệm thức bổ sung nitrate (1557 ml) Lá khoai mì tươi làm giảm 27,7 % khí methane so với nghiệm thức có khoai mì phơi nắng Kết cho thấy có tương tác cộng gộp khoai mì tươi potassium nitrate phần lên q trình giảm sản sinh khí methane iv MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN iii  MỤC LỤC v  DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT viii  DANH SÁCH CÁC BẢNG ix  DANH SÁCH CÁC HÌNH x  DANH SÁCH CÁC BIỂU ĐỒ xi  Chương MỞ ĐẦU 1  1.1 Đặt vấn đề .1  1.2 Mục đích 2  1.3 Yêu cầu 2  Chương TỔNG QUAN 3  2.1 Đặc điểm sinh lý cỏ 3  2.2 Sự nhai lại tiêu hóa học .4  2.3 Con đường trao đổi chất cỏ .4  2.4 Quá trình lên men cỏ .5  2.4.1 Tiêu hóa carbohydrate 6  2.4.2 Tiêu hóa hợp chất Nitrogen 7  2.4.3 Chuyển hóa lipid 8  2.5 Hệ vi sinh vật cỏ .8  2.5.1 Bacteria 9  2.5.2 Protozoa 9  2.5.3 Nấm 9  2.6 Nhu cầu nguồn NPN thú nhai lại 10  2.7 Tận dụng nguồn thức ăn giảm phát sinh khí methane 13  v 2.7.1 Rỉ mật đường 13  2.7.2 Sử dụng khoai mì phần nguồn by-pass protein cho thú nhai lại .14  2.7.2.1 Vai trò by-pass prorein hệ thống thức ăn loài nhai lại 14  2.7.2.2 Cây khoai mì 15  Chương NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18  3.1 Thời gian địa điểm thực đề tài 18  3.1.1 Thời gian 18  3.1.2 Địa điểm 18  3.2 Nội dung thí nghiệm 18  3.3 Bố trí thí nghiệm 18  3.3.1 Phân tích hàm lượng HCN Nitơ hòa tan khoai mì 18  3.3.2 Đánh giá ảnh hưởng cách chế biến khoai mì lên sản sinh khí methane mơi trường lên men in vitro sử dụng chất rỉ mật đường có bổ sung potassium nitrate urea 19  3.4 Chuẩn bị mẫu phương pháp thí nghiệm 20  3.4.1 Chuẩn bị mẫu 20  3.4.2 Cách tiến hành 20  3.4.3 Thí nghiệm 2: Thí nghiệm in vitro 20  3.4.4 Xử lí số liệu 23  Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 24  4.1 Thành phần dinh dưỡng khoai mì .24  4.2 Hàm lượng HCN Nitơ hòa tan khoai mì 24  4.3 Ảnh hưởng cách chế biến khoai mì lên sản sinh khí methane môi trường lên men in vitro sử dụng chất rỉ mật đường có bổ sung potassium nitrate urea 27  4.3.1 Tổng thể tích khí sinh 29  4.3.2 Sản xuất khí methane trình lên men in vitro dịch cỏ 30  vi 4.3.3 Ảnh hưởng nguồn NPN lên khả tiêu hóa vật chất khơ cuối giai đoạn ủ 24h 32  4.4 Đánh giá hàm lượng NH3 có dung dịch in vitro sau ủ 24h 32  Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 34  5.1 Kết luận .34  5.2 Đề nghị 34  TÀI LIỆU THAM KHẢO 35  PHỤ LỤC 41  vii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT ATP Adenosine tri-phosphate AOAC Association of Official Analytical Chemists CH4 Methane CP Crude protein CS Giống mì cao sản CS-T Giống mì cao sản – tươi CS-PN Giống mì cao sản - phơi nắng DM Dry matter HCN Hydrogen cyanide KM94 Giống mì KM94 KM94-T Giống mì KM94 – tươi KM94-PN Giống mì KM94 – phơi nắng LCFAs Long Chain Fatty Acid NH3 Ammonia NPN Non-Protein Nitrogen pH Power of/potential Hydrogen VFAs Volatile fatty acids viii DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 3.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm phân tích hàm lượng HCN Nitơ hòa tan 19 Bảng 3.2 Sơ đồ bố trí thí nghiệm in vitro (% DM bản) 19 Bảng 3.3 Thành phần thực liệu thí nghiệm (g tươi) 21 Bảng 3.4 Thành phần dung dịch đệm (Tilly Terry, 1963) 21 Bảng 4.1 Thành phần vật chất khô (%), protein (% VCK) mì 24 Bảng 4.2 Hàm lượng HCN mì 24 Bảng 4.3 Tỷ lệ nitơ hòa tan khoai mì 25 Bảng 4.4 Tổng thể tích chất khí, tỷ lệ khí methane sinh ra, thể tích khí methane/gram chất lên men tỷ lệ lên men chất nghiệm thức 28 Bảng 4.5 Nồng độ NH3 dung dịch in vitro sau 24h ủ 32 ix TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt Dư Thanh Hằng, 2008 Tạp chí khoa học Đại học Huế, số 46 Lê Đức Ngoan, 2002 Giáo trình dinh dưỡng gia súc Nhà xuất Nông Nghiệp Hồ Thanh Tú, 2011, Ảnh hưởng việc bổ sung muối nitrate, muối sulphate urea lên sản sinh khí methane trình lên men in vitro sử dụng chất rỉ mật đường bột khoai mì Luận văn tốt nghiệp, trường đại học Nông Lâm TP.HCM, Việt Nam Tài liệu Tiếng Anh Blakley, R L and I E Coop, 1949 The metabolism and toxicity of cyanides and cyanogenetic glucosides in sheep.II.Detoxication of hydrocyanic acid New Zealand J Sci Thechnol.31A(3):1-16 Carulla JE, Kreuzer M, Machmüller A and Hess H D, 2005 Supplementation of Acacia mearnsii tannins decreases methanogenesis and urinary nitrogen in forage-fed sheep Australian Journal of Agricultural Research 56, 961-970 Chhay Ty, Preston T R and Borin K, 2007 Effect of variety and wilting on HCN content of cassava leaves and on intake, digestibility and N retention by growing pigs Livestock Research for Rural Development Volume 19, Article #135 Retrieved January 35 27, 2012 Cleasby T G, 1963 Feeding values of molasses Proceeding of The South African Sugar Technologist’s Association Cuong, V C, Tuyen, D.V., G.J.McCrabb, M.W.A Verstegen 2010 Performance of Laisind cattle in Vietnam as affected by a sugar cane molasses diet J Sci Dev 2010, (Eng.Iss.1): 76 - 84 Gijzen H J, Bernal E and Ferrer H, 2000 Cyanide toxicity and cyanide degradation in anaerobic wastewater treatment Water Research Volume 34, No 9, pp 2447-2454 Guo WS, Schaefer DM, Guo XX, Ren LP, Meng QX (2009) Use of nitratenitrogen as a sole dietary nitrogen source to inhibit ruminal methanogenesis and to improve microbial nitrogen synthesis in vitro Asian-Australian Journal of Animal Science 22, 542-549 Khang D N, 1999 Effects of cassava leaf meal on rumen environment and as a replacement for cotton seed meal in napier grass for dairy cows MSc thesis in the programme "Tropical Livestock Systems" SLU, Dept of Animal nutrition and management, Uppsala, Sweden Khieu Borin, Lindberg J E and Ogle R B, 2005 Effect of variety and preservation method of cassava leaves on diet digestibility by indigenous and improved pigs Animal Science 80 (3), 319-324 36 10 Le Thi Ngoc Huyen, Do H Q, Preston T R and Leng R A, 2010, Nitrate as fermentable nitrogen supplement to reduce rumen methane production Livestock Research for Rural Development Volume 22, Article #146 Retrieved October 15, 2010 11 Le Thuy Binh Phuong, 2012 Effect of sulphate and nitrate salts on methane production in in vitro incubations and on growth performance and methane emissions in cattle fed molasses and cassava foliage MSc Thesis, Can Tho University, Viet Nam 12 Lewis D, 1951 The metabolism of nitrate and nitrite by the sheep Reduction of nitrate in the rumen of the sheep Biochemistry Journal 48: 175-179 13 Moore, C.P, 1976 The utilization of cassava forage in ruminant feeding International Seminar on Tropical Livestock Products, 8-12 March, Acapulco, Mexico 21p 14 Netpana N, Wanapat M, Poungchompu O and Toburan W, 2001, Effect of condensed tannins in cassava hay on fecal parasitic egg counts in swamp buffaloes and cattle In: Proceedings International Workshop on Current Research and Development on Use of Cassava as Animal Feed T R Preston, B Ogle and M Wanapat (Ed) 15 Nolan J V, 1998 Stoichiometry of rumen fermentation and gas production Meeting the Kyoto target.Implications for the Australian Livestock Industries Workshop proceedings Canberra, 4–5 November 1998 37 16 Preston, T.R., A Elias, W.B Willis and T.M Sutherland, 1967 Intensive beef production from molasses and urea Nature 216: 721-722 17 Promkot C., Wanapat M , Wachirapakorn C and Navanukraw C, 2011 Influence of Sulfur on Fresh Cassava Foliage and Cassava Hay Incubated in Rumen Fluid of Beef Cattle Asian-Aust J Anim Sci Vol 20, No : 1424 – 1432 18 Roffler R.E., Schwab C.G., Satter L.D, 1975 Relationship Between Ruminal Ammonia and Nonprotein Nitrogen Utilization by Ruminants III Influence of Intraruminal Urea Infusion on Ruminal Ammonia Concentration Journal of Dairy Science Volume 59, Issue 1, January 1976, Pages 80-84 19 Rush, I.G., and Totusek, R, 1976 Supplemental value of feed grade buiret and urea-molasses for cows an dry winter grass J Animal Sci 42: 497-505 20 Sangkhom Inthapanya, Preston T R and Duong Nguyen Khang T R, 2011 Mitigating methane production from ruminants; Effect of nitrogen solubility in cassava leaves as source of protein in an in vitro incubation using cassava root as source of carbohydrate Workshop on Reducing Greenhouse Gas Emissions from Livestock and Soils (Editors: Reg Preston and Sisomphone Southavong) National Institute of Animal Science, Hanoi, 14-15 November 2011 21 Satter, L D., and W J Esdale, 1968 In vitro lactate metabolism by ruminul ingests Appl Microbiol., 16: 680 38 22 Sophea and Preston T R, 2010, Effect of different levels of supplementary potassium nitrate replacing urea on growth rates and methane production in goats fed rice straw, mimosa foliage and water spinach International Conference on Livestock, Climate Change and Resource Depletion, (Editor: Reg Preston), Champasack University, Pakse, LAO PDR, 9-11 November 2010 23 Suttle, 2010, Mineral nutrition of livestock, 4th edition 24 Tilley J M A and Terry R A, 1963 A two stage technique for the in vitro digestion of forage crops Journal of the British Grassland Society 18 : 104 25 Tham H T, Man N V and Preston T R, 2008 Performance of young cattle fed rice straw sprayed with mixture of urea and molasses supplemented with different levels of cassava leaf meal Livestock Research for Rural Development Volume 20, supplement. 26 Thauer, R K., K Jungermann and K Decker, 1977 Energy conservation in chemotrophic anaerobic bacteria Bacteriol Rev 41:100-180 39 27 Van D T T, Thanh M N T and Binh D V, 2001 Cassava as small ruminant feed in the hilly and mountainous area of Bavi district In: Preston T R, Ogle B and Wanapat M (Eds.), International workshop on Current research and development on use of cassava as animal feed July 23-24, 2001 SIDA SARAC project Khon Kaen University, Thailand Pp 23- 24. 28 Van Zijderveld S.M., Dijkstra J, Gerrits W.J.J, Newbold J.R, Perdok H.B, 2010 Dietary nitrate persistently reduces enteric methane production in lactating dairy cows In Greenhouse gases and animal agriculture conference, October 3-8, 2010 Banff, Canada ( Quoted by Hulshof et al 2010) 29 Wanapat M, 1995 The use of local feed resources for livestock production in Thailand Proceedings of the International Conference on Increasing Animal Production with Local Resources (Editor: Guo Tingshuang) China Forestry Publishing House, Ministry of Agriculture, China 30 Wheeler J L, Hedges D A and Till A R, 1975 A possible effect of cyanogenic glucoside in sorghum on animal requirements for sulphur Journal of Agricultural Science 84:377379 40 PHỤ LỤC General Linear Model: HCN mg/kg DM versus Lá khoai mì, tiến trình xử lí Factor Type Lá khoai mì fixed Levels Values KM94, cao sản q trình xử lí fixed phơi nắng, tươi Analysis of Variance for HCN mg/kg DM, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Lá khoai mì 1448 1448 1448 0.49 0.522 Quá 384502 384502 384502 130.62 0.000 Lá khoai mì*q trình xử lí trình xử lí 14071 14071 14071 4.78 0.094 Error 11775 11775 2944 Total 411796 S = 54.2552 R-Sq = 97.14% R-Sq(adj) = 95.00% Least Squares Means HCN mg/kg DM-Lá khoai mì Mean SE Mean KM94 613.893 27.1276 cao sản 586.983 27.1276 phơi nắng 381.206 27.1276 tươi 819.670 27.1276 q trình xử lí Lá khoai mì*q trình xử lí KM94 phơi nắng 352.721 38.3642 KM94 tươi 875.065 38.3642 Cao sản phơi nắng 409.690 38.3642 Cao sản tươi 764.275 38.3642 General Linear Model: %N solubility versus Lá khoai mì, Tiến trình xử lí Factor Lá khoai mì q trình xử lí Type fixed fixed Levels Values KM94, cao sản phơi nắng, tươi 41 Analysis of Variance for %N solubility, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Lá khoai mì 4.600 4.600 4.600 3.25 0.146 q trình xử lí 54.492 54.492 54.492 38.52 0.003 3.19 0.149 Lá khoai mì*q trình xử lí 4.511 4.511 4.511 Error 5.659 5.659 1.415 Total 69.262 S = 1.18942 R-Sq = 91.83% R-Sq(adj) = 85.70% Least Squares Means for %N solubility Lá khoai mì Mean SE Mean KM94 28.84 0.5947 Cao sản 30.36 0.5947 phơi nắng 26.99 0.5947 tươi 32.21 0.5947 q trình xử lí Lá khoai mì*q trình xử lí KM94 phơi nắng 25.48 0.8410 KM94 tươi 32.20 0.8410 Cao sản phơi nắng 28.50 0.8410 Cao sản tươi 2.21 0.8410 General Linear Model: NH3,mg/l versus Lá khoai mì, Tiến trình xử lí, Factor Type Lá khoai mì fixed Levels Values KM94, cao sản Q trình xử lí fixed Phơi nắng, Tươi Nguồn NPN fixed KNO3, Urea Analysis of Variance for NH3,mg/l, using Adjusted SS for Tests Source Lá khoai mì DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 1142 1142 1142 0.39 0.539 q trình xử lí 195 195 195 0.07 0.799 Nguồn NPN 1681 1681 1681 0.57 0.457 Lá khoai mì*q trình xử lí 474 474 474 0.16 0.692 0.02 0.894 q trình xử lí*Nguồn NPN Error 54 54 54 26 76740 76740 2952 42 Total 31 S = 54.3281 R-Sq = 4.42% 80286 R-Sq(adj) = 0.00% Least Squares Means for NH3,mg/l Lá khoai mì Mean SE Mean KM94 168.9 13.58 Cao sản 156.9 13.58 Phơi nắng 160.4 13.58 Tươi 165.4 13.58 KNO3 155.7 13.58 Urea 170.2 13.58 q trình xử lí Nguồn NPN Lá khoai mì*q trình xử lí KM94 Phơi nắng 162.6 19.21 KM94 Tươi 175.2 19.21 Cao sản Phơi nắng 158.3 19.21 Cao sản Tươi 155.6 19.21 q trình xử lí*Nguồn NPN Phơi nắng KNO3 154.5 19.21 Phơi nắng Urea 166.4 19.21 Tươi KNO3 156.8 19.21 Tươi Urea 173.9 19.21 General Linear Model: V khí 6h, ml, %CH4, 6h, versus Lá khoai mì, Tiến trìn Factor Type Lá khoai mì fixed Levels Values KM94, cao sản Tiến trình xử lí fixed phơi nắng, tươi Nguồn NPN fixed KNO3, Urea Analysis of Variance for V khí 6h, ml, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Lá khoai mì 7813 7812 7812 1.20 0.284 q trình xử lí 5000 5000 5000 0.77 0.389 Nguồn NPN 74112 74112 74112 11.35 0.002 Lá khoai mì*q trình xử lí 800 800 800 0.12 0.729 0.62 0.438 q trình xử lí*Nguồn NPN Error 4050 4050 4050 26 169713 169713 6527 43 Total S = 80.7924 31 R-Sq = 35.10% 261488 R-Sq(adj) = 22.62% Analysis of Variance for %CH4, 6h, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Lá khoai mì 36.12 36.12 36.12 2.61 0.118 trình xử lí 2.00 2.00 2.00 0.14 0.707 Nguồn NPN 200.00 200.00 200.00 14.47 0.001 Lá khoai mì*quá trình xử lí 10.13 10.13 10.13 0.73 0.400 0.04 0.851 0.50 0.50 0.50 Error q trình xử lí*Nguồn NPN 26 359.25 359.25 13.82 Total 31 608.00 S = 3.71716 R-Sq = 40.91% R-Sq(adj) = 29.55% Analysis of Variance for V CH4 6h,ml, using Adjusted SS for Tests Source Lá khoai mì DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 2801 2801 2801 1.53 0.228 trình xử lí 470 470 470 0.26 0.617 Nguồn NPN 34270 34270 34270 18.67 0.000 Lá khoai mì*quá trình xử lí 1248 1248 1248 0.68 0.417 0.07 0.788 136 136 136 Error q trình xử lí*Nguồn NPN 26 47731 47731 1836 Total 31 86655 S = 42.8463 R-Sq = 44.92% R-Sq(adj) = 34.33% Analysis of Variance for V khí 24h, ml, using Adjusted SS for Tests Source Lá khoai mì DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 4278 4278 4278 0.13 0.717 trình xử lí 39903 39903 39903 1.25 0.274 Nguồn NPN 246753 246753 246753 7.74 0.010 Lá khoai mì*quá trình xử lí 153 153 153 0.00 0.945 q trình xử lí*Nguồn NPN 45753 45753 45753 1.43 0.242 Error 26 829231 829231 31894 Total 31 1166072 S = 178.588 R-Sq = 28.89% R-Sq(adj) = 15.21% 44 Analysis of Variance for %CH4, 24h, using Adjusted SS for Tests Source Lá khoai mì DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 24.50 24.50 24.50 0.93 0.344 trình xử lí 0.50 0.50 0.50 0.02 0.892 Nguồn NPN 420.50 420.50 420.50 15.96 0.000 Lá khoai mì*quá trình xử lí 1.13 1.13 1.13 0.04 0.838 q trình xử lí*Nguồn NPN 36.13 36.13 36.13 1.37 0.252 Error 26 685.12 685.12 26.35 Total 31 1167.88 S = 5.13332 R-Sq = 41.34% R-Sq(adj) = 30.05% Analysis of Variance for V CH4 24h,ml, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Lá khoai mì 1953 1953 1953 0.50 0.486 q trình xử lí 2531 2531 2531 0.65 0.428 Nguồn NPN 78388 78388 78388 20.08 0.000 Lá khoai mì*q trình xử lí 31 31 31 0.01 0.929 q trình xử lí*Nguồn NPN 9460 9460 9460 2.42 0.132 Error 26 101474 101474 3903 Total 31 193838 S = 62.4729 R-Sq = 47.65% R-Sq(adj) = 37.58% Analysis of Variance for V khí tổng, ml, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Lá khoai mì 528 528 528 0.02 0.902 q trình xử lí 73153 73153 73153 2.14 0.155 Nguồn NPN 591328 591328 591328 17.32 0.000 Lá khoai mì*q trình xử lí 1653 1653 1653 0.05 0.828 q trình xử lí*Nguồn NPN 77028 77028 77028 2.26 0.145 887756 34144 Error 26 887756 Total 31 1631447 S = 184.782 R-Sq = 45.58% R-Sq(adj) = 35.12% Analysis of Variance for V CH4, ml, using Adjusted SS for Tests Source Lá khoai mì DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 9433 9433 9433 1.22 0.279 45 q trình xử lí 5182 5182 5182 0.67 0.420 Nguồn NPN 216318 216318 216318 28.00 0.000 Lá khoai mì*q trình xử lí 1673 1673 1673 0.22 0.646 q trình xử lí*Nguồn NPN 11866 11866 11866 1.54 0.226 Error 26 200849 200849 7725 Total 31 445320 S = 87.8919 R-Sq = 54.90% R-Sq(adj) = 46.22% Analysis of Variance for % CH4, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Lá khoai mì 39.64 39.64 39.64 2.37 0.135 q trình xử lí 4.94 4.94 4.94 0.30 0.591 Nguồn NPN 354.87 354.87 354.87 21.26 0.000 Lá khoai mì*q trình xử lí 7.72 7.72 7.72 0.46 0.503 1.03 0.319 17.21 17.21 17.21 Error q trình xử lí*Nguồn NPN 26 434.07 434.07 16.69 Total 31 858.44 S = 4.08594 R-Sq = 49.44% R-Sq(adj) = 39.71% Analysis of Variance for V khí điều chỉnh, ml, using Adjusted SS for Tests Source Lá khoai mì DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 528 528 528 0.02 0.902 q trình xử lí 73153 73153 73153 2.14 0.155 Nguồn NPN 209628 209628 209628 6.14 0.020 Lá khoai mì*q trình xử lí 1653 1653 1653 0.05 0.828 2.26 0.145 77028 77028 77028 Error Q trình xử lí*Nguồn NPN 26 887756 887756 34144 Total 31 1249747 S = 184.782 R-Sq = 28.97% R-Sq(adj) = 15.30% Analysis of Variance for %DM lên men, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 15.4 15.4 15.4 0.14 0.713 q trình xử lí 383.5 383.5 383.5 3.44 0.075 Nguồn NPN 38.2 38.2 38.2 0.34 0.564 Lá khoai mì Lá khoai mì*q trình xử lí 0.4 0.4 0.4 0.00 0.955 Q trình xử lí*Nguồn NPN 2.4 2.4 2.4 0.02 0.883 46 Error 26 2903.0 Total 31 3342.9 S = 10.5666 R-Sq = 13.16% 2903.0 111.7 R-Sq(adj) = 0.00% Analysis of Variance for V CH4,ml/g, using Adjusted SS for Tests Source Lá khoai mì DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 102.9 102.9 102.9 0.22 0.644 q trình xử lí 1102.2 1102.2 1102.2 2.34 0.138 Nguồn NPN 2595.0 2595.0 2595.0 5.50 0.027 Lá khoai mì*q trình xử lí 144.8 144.8 144.8 0.31 0.584 q trình xử lí*Nguồn NPN 229.3 229.3 229.3 0.49 0.492 Error 26 12261.7 12261.7 471.6 Total 31 16436.0 S = 21.7164 R-Sq = 25.40% R-Sq(adj) = 11.05% Least Squares Means - V khí 6h, ml -%CH4, 6h - V CH4 6h,ml Lá khoai mì Mean SE Mean Mean SE Mean Mean SE Mean KM94 1047.50 20.1981 13.44 0.9293 141.77 10.7116 Cao sản 1016.25 20.1981 15.56 0.9293 160.49 10.7116 q trình xử lí phơi nắng 1044.38 20.1981 14.75 0.9293 154.96 10.7116 tươi 1019.38 20.1981 14.25 0.9293 147.30 10.7116 KNO3 983.75 20.1981 12.00 0.9293 118.41 10.7116 Urea 1080.00 20.1981 17.00 0.9293 183.86 10.7116 Nguồn NPN Lá khoai mì*quá trình xử lí KM94 phơi nắng 1055.00 28.5644 14.25 1.3142 151.85 15.1484 KM94 tươi 1040.00 28.5644 12.63 1.3142 131.70 15.1484 Cao sản phơi nắng 1033.75 28.5644 15.25 1.3142 158.07 15.1484 Cao sản tươi 998.75 28.5644 15.88 1.3142 162.90 15.1484 trình xử lí*Nguồn NPN phơi nắng KNO3 1007.50 28.5644 12.38 1.3142 124.30 15.1484 phơi nắng Urea 1081.25 28.5644 17.13 1.3142 185.62 15.1484 tươi KNO3 960.00 28.5644 11.63 1.3142 112.51 15.1484 tươi Urea 1078.75 28.5644 16.88 1.3142 182.09 15.1484 - 47 - -V khí 24h, mlLá khoai mì -%CH4, 24h V CH4 24h,ml- Mean SE Mean Mean SE Mean Mean SE Mean KM94 649.38 44.6469 31.69 1.2833 211.71 15.6182 Cao sản 672.50 44.6469 33.44 1.2833 227.33 15.6182 phơi nắng 696.25 44.6469 32.69 1.2833 228.41 15.6182 tươi 625.63 44.6469 32.44 1.2833 210.62 15.6182 KNO3 573.13 44.6469 28.94 1.2833 170.02 15.6182 Urea 748.75 44.6469 36.19 1.2833 269.01 15.6182 Quá trình xử lí Nguồn NPN Lá khoai mì*q trình xử lí KM94 phơi nắng 682.50 63.1402 32.00 1.8149 221.59 22.0875 KM94 tươi 616.25 63.1402 31.38 1.8149 201.82 22.0875 Cao sản phơi nắng 710.00 63.1402 33.38 1.8149 235.24 22.0875 Cao sản tươi 635.00 63.1402 33.50 1.8149 219.42 22.0875 trình xử lí*Nguồn NPN phơi nắng KNO3 646.25 63.1402 30.13 1.8149 196.11 22.0875 phơi nắng Urea 746.25 63.1402 35.25 1.8149 260.71 22.0875 tươi KNO3 500.00 63.1402 27.75 1.8149 143.94 22.0875 tươi Urea 751.25 63.1402 37.13 1.8149 277.31 22.0875 - -V khí tổng, ml- -V CH4, ml - -% CH4 Lá khoai mì Mean SE Mean Mean SE Mean Mean SE Mean KM94 1696.88 46.1956 353.48 21.9730 20.33 1.0215 Cao sản 1688.75 46.1956 387.82 21.9730 22.56 1.0215 phơi nắng 1740.63 46.1956 383.37 21.9730 21.84 1.0215 tươi 1645.00 46.1956 357.93 21.9730 21.05 1.0215 KNO3 1556.88 46.1956 288.43 21.9730 18.11 1.0215 Urea 1828.75 46.1956 452.87 21.9730 24.78 1.0215 q trình xử lí Nguồn NPN Lá khoai mì*q trình xử lí KM94 phơi nắng 1737.50 65.3304 373.44 31.0745 21.22 1.4446 KM94 tươi 1656.25 65.3304 333.53 31.0745 19.45 1.4446 Cao sản phơi nắng 1743.75 65.3304 393.31 31.0745 22.46 1.4446 Cao sản tươi 1633.75 65.3304 382.32 31.0745 22.66 1.4446 1653.75 65.3304 320.41 31.0745 19.24 1.4446 q trình xử lí*Nguồn NPN phơi nắng KNO3 phơi nắng Urea 1827.50 65.3304 446.34 31.0745 24.43 1.4446 tươi KNO3 1460.00 65.3304 256.45 31.0745 16.99 1.4446 tươi Urea 1830.00 65.3304 459.40 31.0745 25.12 1.4446 48 -V khí điều - chỉnh, ml - %DM lên men- V CH4,ml/g Lá khoai mì Mean SE Mean Mean SE Mean Mean SE Mean KM94 1641.88 46.1956 62.12 2.6416 51.91 5.4291 Cao sản 1633.75 46.1956 63.50 2.6416 55.50 5.4291 q trình xử lí phơi nắng 1685.63 46.1956 59.35 2.6416 59.57 5.4291 tươi 1590.00 46.1956 66.27 2.6416 47.84 5.4291 KNO3 1556.88 46.1956 61.72 2.6416 44.70 5.4291 Urea 1718.75 46.1956 63.90 2.6416 62.71 5.4291 Nguồn NPN Lá khoai mì*quá trình xử lí KM94 phơi nắng 1682.50 65.3304 58.55 3.7358 59.91 7.6779 KM94 tươi 1601.25 65.3304 65.69 3.7358 43.91 7.6779 Cao sản phơi nắng 1688.75 65.3304 60.15 3.7358 59.24 7.6779 Cao sản tươi 1578.75 65.3304 66.86 3.7358 51.76 7.6779 Quá trình xử lí*Nguồn NPN phơi nắng KNO3 1653.75 65.3304 58.53 3.7358 53.25 7.6779 phơi nắng Urea 1717.50 65.3304 60.17 3.7358 65.90 7.6779 tươi KNO3 1460.00 65.3304 64.90 3.7358 36.15 7.6779 tươi Urea 1720.00 65.3304 67.64 3.7358 59.52 7.6779 49 ... nghiệp Em chân thành cảm ơn Cô Hồ Thị Nga, Cô Nguyễn Thị Phương Dung, cô Nguyễn Ngọc Thanh Xuân, Thầy Nguyễn Phúc Lộc, Thầy Đặng Kiên Cường nhiệt tình tạo điều kiện thu n lợi cho em trình thực tập... 7,4 nhào trộn thu n lợi cho vi sinh vật Nước bọt chứa muối carbonate phosphate phân tiết nuốt xuống cỏ tương đối liên tục có tác dụng trung hòa sản phẩm acid sinh cỏ để trì pH mức thu n lợi cho... khối vi sinh vật khí thể (methane carbonic) Ngồi chức lên men cỏ có vai trò hấp thu Phần lớn acid béo bay hấp thu qua vách cỏ trở thành nguồn lượng cho gia súc nhai lại Các khí thể thải qua phản