Phân lập và tuyển chọn những chủng nấm men có khả năng lên men rượu cao từ bánh men thu thập tại Yên Phong Bắc Ninh (Khóa luận tốt nghiệp)

Phân lập và tuyển chọn những chủng nấm men có khả năng lên men rượu cao từ bánh men thu thập tại Yên Phong Bắc Ninh (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và tuyển chọn những chủng nấm men có khả năng lên men rượu cao từ bánh men thu thập tại Yên Phong Bắc Ninh (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và tuyển chọn những chủng nấm men có khả năng lên men rượu cao từ bánh men thu thập tại Yên Phong Bắc Ninh (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và tuyển chọn những chủng nấm men có khả năng lên men rượu cao từ bánh men thu thập tại Yên Phong Bắc Ninh (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và tuyển chọn những chủng nấm men có khả năng lên men rượu cao từ bánh men thu thập tại Yên Phong Bắc Ninh (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và tuyển chọn những chủng nấm men có khả năng lên men rượu cao từ bánh men thu thập tại Yên Phong Bắc Ninh (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và tuyển chọn những chủng nấm men có khả năng lên men rượu cao từ bánh men thu thập tại Yên Phong Bắc Ninh (Khóa luận tốt nghiệp)

- : Chính quy Chuyên ngành : Khoa :CNSH & CNTP : 2011 - 2015 Thái Nguyên, 2016 MEN THU - : Chính quy Chuyên ngành : : 43 - CNSH Khoa : CNSH & CNTP : 2011 - 2015 Thái Nguyên, 2016 i Lâm Thái Nguyên Nông Lâm Thái Nguyên Xin c ii Trang B ng 3.1 Thành ph n c B ng 3.2 Thành ph n c B ng 4.1 K t qu B ng Hansen 30 ng Malt Cao N m Men - Peptone 30 OD c a 50 ch ng n m men phân l m hình thái khu n l c c a 50 ch ng n m men 37 B ng 4.3 K t qu th kh ng 40 B ng 4.4 K t qu th kh B ng 4.5 K t qu c 35 ch chi t malt t d ch tinh b t l 41 ch chi t malt 43 iii Trang Hình 2.1 C u t o t bào n m men [11] 17 Hình 3.1 Hình nh s khu n l c 32 Hình 3.2 nh k t qu c a vi c quan sát qua kính hi n vi ch ng 43.1 33 Hình 4.1 K t qu th kh ng glucose c a m t s ch ng 40 Hình 4.2 Hình nh k t qu th kh ch chi t malt 41 Hình 4.3 Hình nh m t s ch ng th ho t tính catalase 42 th kháo sát s ng c a n ng t i s phát tri n c a ch ng n m men 34.1 44 th kh o sát ng c a n n s phát tri n c a ch ng n m men 34.1 44 th kh o sát ng c ns ng phát tri n c a ch ng n m men 34.1 45 iv Trang U PH N M 1.1 tv 1.2 M c tiêu yêu c tài 1.2.1 M c tiêu c tài 1.2.2 yêu c u c tài tài c c ti n PH N T NG QUAN TÀI LI U cv u 2.1.1 Phân lo u 2.1.2 Quy trình s n xu u [9] 12 2.2 N m Men 16 2.2.1 Hình thái c u t o n m men [2] 16 ng n m men [2] 18 2.2.3 Sinh s n c a n m men [2] 22 ng c a n m men [2] 23 m sinh lý, sinh hóa c a n m men[2] 24 29 i ng Ph m Vi Nghiên C u 29 ng 29 3.1.2 Ph m vi nghiên c u 29 3.2 Th m 29 3.3 Thi t b , d ng c , hóa ch t 29 v 3.3.1 Thi t b 29 3.3.2 D ng c 29 3.3.3 Hóa ch t 29 3.4 N i dung nghiên c u 30 3.5 Các u 30 n pha loãng m u [7] 30 p [3] 31 y truy n gi gi ng [3] 31 m hình thái 31 ch chi t malt [1] 33 ms bào bu nh sinh kh i n m men b nh kh m h ng c u [7] 33 33 34 nh n u [8] 34 PH N K T QU TH O LU N 35 4.1 K t qu phân l p 35 4.2 Tuy n ch n m t s ch ng n m men cá kh u m nh 39 4.2.1 Th kh ng 39 4.2.2 Th kh ch chi t Malt 41 4.2.3 Th ho t tính Catalase 42 nh n c n n ch n 42 4.3 T u ki ng phát tri n c a ch ng Sacchoromyces cerevisiae 34.1 43 4.3.1 Kh d ng ngu ng glucose) 43 4.3.2 Kh d ng ngu 44 4.3.4 ng c a PH 44 vi 45 PH N K T LU NGH 46 5.1 K t lu n 46 ngh 46 TÀI LI U THAM KH O 47 1.1 tv Xa h sinh - 1.2.2 Y trình lên men T bánh men 33 Hình 3.2 nh k t qu c a vi c quan sát qua kính hi n vi ch ng 43.1 ch chi t malt [1] Nghi n malt y 100(g) Malt hòa tr c c t 450 lên 700 khu cc u Th b n khơng th y xu t hi n màu xanh d ng l c, trùng vòng 30 phút, b o qu n t l ms m h ng c u [7] c c t vô trùng bu ng t mép c a lamen sát v i mép c a gi ng sau m t góc 450, h t t xu ng cho gi b ép b i bu t m h ng c u phi i kính hi n vi 110 C dùng d n bào bu u t bào n m men gi m h ng c ng nhi t ng ms ng 34 - Nguyên lý: T bào n m men phát tri n s c d ch nuôi c y làm cho d ch nuôi c y chuy n sang d ng huy nuôi c y s t l thu n v i m D a vào kh c c a d ch t bào n m men d ch nuôi c y p ph ánh sang c a n m men Kh c song 550 p ph ánh sang cao m men cao, giá tr 620 nm t bào n m c l n Ti n hành: B t máy so màu chuy Hút vào curvet 1- ml m c song 620 nm i ch i máy hi n th k t qu ghi l i giá tr c nh kh - c ng n m men s sinh khí CO2 mà khí CO2 s y ng nghi m Ch ng có kh ng durhan n i lên nh s t o khí y ng Durhan lên th i gian ng n nh t - Ti n hành: cho 20ml d ch g nh th kh Thanh trùng ng nghi m có ch a s n ng durhan 1210 ngu i c y n m men vào quan sát tính th i gian lên men c a ch y ng Durhan lên cao 5cm nh n u [8] Ti n hành: l y 100ml d 200 kho ng nh m c 100ml, rót d ch lên men vào r lên kho ng 300ml Ti c giá tr Tính n u thơ l i Dùng c n k c ph n n i lên c a c n k c n theo công th c N1 = ó N1: n nh m c t kho ng 100ml d ng l ti % lo i c n tính tr c 35 N2 : N c c V1: th tích d t V2 th c t V1 PH N K T QU TH O LU N 4.1 K t qu phân l p T m u bánh men thu th p t i huy n Yên Phong T nh B c Ninh c 50 ch ng n m men V i giá tr ng phát tri n n STT c th hi n s ng Hansen l ng 0h 6h 12h 18h 24h 30h 36h 21.1 0.438 1.116 1.258 1.450 1.497 1.519 1.538 21.2 0.436 1.392 1.452 1.546 1.518 1.583 1.645 21.3 0.510 1.407 1.447 1.553 1.569 1.622 1.652 22.1 0.527 1.380 1.373 1.456 1.473 1.448 1.444 22.2 0.555 1.305 1.285 1.49 1.523 1.596 1.607 22.3 0.583 1.349 1.485 1.485 1.506 1.540 1.563 25.3 0.572 1.263 1.561 1.600 1.649 1.730 1.680 24.2 0.575 1.535 1.528 1.595 1.669 1.704 1.670 24.1 0.536 1.545 1.539 1.612 1.699 1.775 1.792 10 25.1 0.553 1.656 1.625 1.687 1.740 1.756 1.754 11 23.3 0.560 1.608 1.643 1.665 1.670 1.729 1.738 12 23.1 0.566 1.580 1.624 1.681 1.716 1.726 1.736 13 25.2 0.555 1.300 1.552 1.604 1.654 1.785 1.658 14 26.1 0.512 1.285 1.609 1.678 1.728 1.769 1.751 15 23.2 0.570 1.586 1.653 1.655 1.657 1.767 1.720 16 26.2 0.773 1.237 1.547 1.669 1.666 1.670 1.670 17 26.3 0.693 1.345 1.549 1.738 1.761 1.770 1.773 36 18 26.4 0.760 1.391 1.592 1.743 1.752 1.778 1.783 19 29.1 0.833 1.344 1.575 1.676 1.694 1.689 1.687 20 29.2 0.571 1.205 1.406 1.625 1.655 1.634 1.612 21 29.3 0.542 1.293 1.476 1.672 1.676 1.677 1.677 22 29.4 0.323 1.353 1.558 1.611 1.599 1.570 1.552 23 27.1 0.642 1.411 1.617 1.710 1.735 1.153 1.740 24 27.2 0.942 1.406 1.630 1.672 1.701 1.710 1.709 25 30.1 0.557 1.172 1.331 1.641 1.558 1.639 1.556 26 30.2 0.583 1.287 1.408 1.654 1.668 1.647 1.643 27 30.3 0.600 1.142 1.227 1.636 1.680 1.712 1.742 28 30.4 0.545 1.310 1.417 1.654 1.676 1.658 1.657 29 28.1 0.610 1.343 1.613 1.637 1.722 1.707 1.706 30 28.2 0.432 1.165 1.317 1.619 1.656 1.647 1.658 31 28.3 0.593 1.240 1.386 1.649 1.684 1.676 1.730 32 28.4 0.612 1.291 1.429 1.672 1.702 1.671 1.684 33 27.3 0.602 1.278 1.376 1.648 1.659 1.664 1.624 34 27.4 0.423 1.060 1.472 1.701 1.800 1.731 1.729 35 32.1 0.647 1.305 1.456 1.600 1.698 1.690 1.700 36 32.2 0.587 1.280 1.342 1.410 1.529 1.523 1.644 37 32.3 0.430 1.223 1.435 1.514 1.599 1.555 1.634 38 32.4 0.487 1.255 1.341 1.499 1.657 1.521 1.667 39 34.1 0.673 1.454 1.511 1.500 1.481 1.487 1.477 40 3.3 0.556 1.272 1.481 1.622 1.849 1.869 1.890 41 4.2 0.440 1.320 1.225 1,411 1.566 1.562 1.590 42 4.4 0.457 1.158 1.366 1.442 1.550 1.645 1.688 43 3.7 0.400 0.595 1.00 1.215 1.340 1.358 1.328 44 5.8 0.512 1.440 1.458 1.500 1.605 1.634 1.641 45 5.3 0.531 1.240 1.420 1.527 1.651 1.683 1.689 46 5.2 0.610 1.320 1.420 1.602 1.716 1.765 1.808 47 11.3 0.543 1.517 1.613 1.674 1.682 1.700 1.733 37 48 3.5 0.478 1.418 1.425 1.456 1.472 1.472 1.437 49 4.3 0.357 1.032 1.525 1.587 1.611 1.301 1.305 50 12.3 0.482 1.380 1.614 1.649 1.693 1.718 1.737 STT 21.1 21.2 21.3 22.1 22.2 22.3 25.3 24.2 24.1 10 25.1 11 23.3 12 23.1 13 25.2 14 26.1 15 23.2 16 26.2 17 26.3 18 26.4 19 29.1 20 29.2 21 29.3 22 29.4 ơng có tâm Tròn, l g ngà, khơng có tâm 38 23 27.1 24 27.2 25 30.1 26 30.2 27 30.3 28 30.4 29 28.1 30 28.2 31 28.3 32 28.4 33 27.3 34 27.4 35 32.1 36 32.2 37 32.3 38 32.4 39 34.1 40 3.3 41 4.2 42 4.4 43 3.7 44 5.8 45 5.3 46 5.2 47 11.3 48 3.5 49 4.3 50 12.3 g có tâm 39 Tu có 2 cao 5cm 40 Glucose Lactose Saccarose 22.1 26.2 28.2 32.3 32.4 34.1 28.2, 34.1 ba 41 khác Durhan Durhan 22.1 12 22.1 21 22.1 25 28.2 12 28.2 15 28.2 15 34.1 34.1 12 34.1 13 42 Qua b ng 4.4 th y t l pha lỗng 9:1 ch ng 34.1 có kh lên men d ch chi t malt m nh nh t, th i gian làm n i ng Durhan t l pha lỗng ln ng n nh t 4.2.3 Th ho t tính Catalase :d c tính c a n m men lồi sinh v y k khí tùy ti n Do v y ti n hành vi c th ho ng có ph i thu c vi sinh v t k khí tùy ti n hay khơng Ti n hành: l y m t chút sinh kh i c a t ng ch ng lên kính, r i nh tr c ti p vài gi t H2O2 vào Quan sát th y có hi ng s i b t khí K t lu n ch ng thu c lo i vi sinh v t k khí tùy ti n Hình 4.3 Hình nh m t s ch ng th ho t tính catalase nh n Th c hi n vi có kh d ch tinh b c n n ch n nh n c n nh m n ch n ch ng u ethylic m nh nh t B ng vi ch chi t malt t 43 B ng 4.5 K t qu t d ch tinh b ch chi t malt Lo i d t D ch tinh b D ch malt Ch ng u(%) Ch ng u(%) 22.1 10,5 22.1 1.75 28.2 10,15 28.2 34.1 11,55 34.1 Qua b ng 4.5 ch ng 34.1 có kh uv nh, sau ng 22.1 ch ng 28.2 V y d a vào k t qu t th nghi có kh c ch ng 34.1 u m nh nh t c s d ng vào thí nghi m u ki n ni c y ti p theo 4.3 T u ki ng phát tri n c a ch ng Sacchoromyces cerevisiae 34.1 4.3.1 Kh d ng ngu K t qu nghiên c u phát tri n ch a ch ng n ng glucose) ng c a n ng t i s c th hi n qua hình sau ng 44 th kháo sát s ng c a n ng t i s phát tri n c a ch ng n m men 34.1 * K t lu n: Qua bi ta k t lu n n ng t i thích cho ch ng 34.1 3% 4.3.2 Kh d ng ngu K t qu nghiên c u hi ng c c th th sau th kh o sát ng c a n ns phát tri n c a ch ng n m men 34.1 * K t lu th kh o sát ta k t lu n n peptone t i thích cho ch ng 43.1 10 g/l 4.3.4 ng c a PH K t qu nghiên c u tri n c a ch ng c n s sinh tr c th hi n qua hình sau ng phát 45 th kh o sát ng c n s sinh ng phát tri n c a ch ng n m men 34.1 * K t Lu n: D i PH t i thích cho ch ng n m men 34.1 PH =6 nh d c ch khu n l nghi m v m hính thái m sinh hóa hình thái t bào Thơng qua thí kh ch ng 34.1 có kh nh n u t t nh 43.1 thu c gi ng Sacchoromyces cerevisiae c n ch c nh danh ch ng 46 PH N K T LU NGH 5.1 K t lu n Q trình th c hi tài men có kh u cao t bánh men thu th p t i Yên c k t qu : Phong B Phân l p n ch l p n ch n ch ng n m c ch ng t 50 ch ng n m men phân c t m u bánh men thu c B c thu th p t i Yên Phong B c Ninh T ch ng c n ch nhi u thí nghi m, tơi ch u cao V ti n hành n ch n qua c ch ng 34.1 ch ng n m men có kh c t 11,55%, qua thí nghi ch ng thu c ch ng Sacchoromyces cerevisiae th nh t tên ch ng Saccharomyces cerevisiae 34.1 Qua trình kh o khát tìm u ki n t i thích cho ch ng tơi th y n cho ch ng n y 3% N ng t i thích peptone t i thích 10 g/l, PH = d i PH thích h p nh t ngh u ki n phòng thí nghi m h n ch b nên vi truy n th ngh u v ch ng Sacchoromyces cerevisiae 34.1 có th ng d ng vào quy mơ s n xu u công nghi p 47 TÀI LI U THAM KH O TÀI LI U IN N PGS.TS Nguy n, Ph y- giáo trình vi sinh v t h c, NXB giáo d c, 2007 c Ph m- giáo trình n m men cơng nghi p, NXB khoa h c k thu t, 2006 Nguy n Duy Th ng - phân l p n ch n ch ng n m men có ho t l c cao t bánh men thu c b c m t s t nh phía B c, Thái Nguyên, 2010 a Lê Th Vu Lan, Ph m Minh Nh t - th c t i H c K Thu t Công Ngh TPHCM,2008 n m men ngh sinh h c Nguy p chí ho ng c l c cao s n su i c a công ng khoa h c 12-1990 nl c Giang n & hi ng n m men có ho t u men t nh Cao B ng nt t nghi p,2011 Tr c, c Th c ph m M ph m, NXB giáo d c, 2002 B môn sinh h t i H c t ng h p Maxcova, Th c t p visinh v t h c, Tài li u d i h c THCN, Hà N i, 1983 Lê Th Mai , Nguy n Th Hi n, Ph m Thu Th y, Nguy n Thanh H ng, Lê Th Lan Chi ngh lên men, NXB KHKT, Hà N i, 2005 Tr n Th Thanh Công ngh Vi sinh, NXB giáo d c, 2009 THÔNG TIN T M NG INTERNET 10 http://www.thegioiruou.vn/vn/tu-van-ruou/cac-dong-ruou-dac-trung-trenthe-gioi/ 11 http://icfood.vn/home/2014/01/02/chiet-xuat-nam-men-yeast-extractla-gi/s_cerevisiae/ ... a vào m i quan h v i nhi lo i: lo i lên men cao (28 nhi ta chia n m men làm 100C) lo i lên men th p (5 320C) Trong công nghi p s n xu nh ng ch ng n m men lên men nhi ng dùng nhi cao, ch ng có. .. ng t u ki n y m khí s lên men r t phát tri n c a t bào n m men h lên men n trì ho s ng c a Khi có khơng khí s lên men y hi ng cách oxy hóa sinh h ng kìm hãm s i ng m men s thu ng c n thi t cho... tr n 2% s b ng n l i g vi c khí n lên men ln b khu ng c a n c lên men 29 PH N NG, N U ng Ph m Vi Nghiên C u ng Bánh Men thu th p t Huy n Yên Phong T nh B c Ninh 3.1.2 Ph m vi nghiên c u Trong