XÂY DỰNG QUY TRÌNH THỦY PHÂN PHẾ LIỆU CÁ BẰNG ENZYME PROTEASE

XÂY DỰNG QUY TRÌNH THỦY PHÂN PHẾ LIỆU CÁ BẰNG ENZYME PROTEASE

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HỒ CHÍ MINH ************ NGUYỄN THỊ ĐAN THÙY XÂY DỰNG QUY TRÌNH THỦY PHÂN PHẾ LIỆU CÁ BẰNG ENZYME PROTEASE LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 11/2010 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP.HỒ CHÍ MINH ********* NGUYỄN THỊ ĐAN THÙY XÂY DỰNG QUY TRÌNH THỦY PHÂN PHẾ LIỆU CÁ BẰNG ENZYME PROTEASE Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số : 06.42.80 LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC Hướng dẫn khoa học: TS LÊ ĐÌNH ĐƠN Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 11/2010 XÂY DỰNG QUY TRÌNH THỦY PHÂN PHẾ LIỆU CÁ BẰNG ENZYME PROTEASE NGUYỄN THỊ ĐAN THÙY Hội đồng chấm luận văn Chủ tịch: TS HOÀNG QUỐC KHÁNH Viện sinh học nhiệt đới Thư ký: TS TRẦN LỆ MINH Trường Đại học Nông Lâm TP.HCM Phản biện 1: PGS.TS NGUYỄN TIẾN THẮNG Viện sinh học nhiệt đới Phản biện 2: TS PHAN THẾ ĐỒNG Trường Đại học Nơng Lâm TP.HCM Ủy viên: TS LÊ ĐÌNH ĐƠN Trường Đại học Nơng Lâm TP.HCM ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP.HỒ CHÍ MINH HIỆU TRƯỞNG LÝ LỊCH CÁ NHÂN Tôi tên Nguyễn Thị Đan Thùy, sinh ngày 20 tháng 05 năm 1983, huyện Châu Thành, tỉnh Đồng Nai Con Ông Nguyễn Thành Trung Bà Nguyễn Thị Cài Tốt nghiệp Tú tài trường Trung học phổ thơng Lê Q Đơn, Tp.Hồ Chí Minh, năm 2001 Tốt nghiệp Đại học ngành Cơng nghệ sinh học, hệ Chính quy Đại học Mở - Bán cơng Tp.Hồ Chí Minh Sau đó, tháng 09 năm 2006 theo học Cao học ngành Công nghệ sinh học Đại học Nông Lâm, Thủ Đức, thành phố Hồ Chí Minh Tình trạng gia đình: Độc thân Địa liên lạc: Hộ 608, Số 20 Hoàng Minh Giám, phường 9, quận Phú Nhuận, thành phố Hồ Chí Minh Điện thoại: 0908105231 Email: danthuy_205@yahoo.com LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan công trình nghiên cứu tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác LỜI CẢM TẠ Tôi xin chân thành cảm ơn: Ban Giám Hiệu trường Đại học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh, tất Q Thầy/Cơ tham gia giảng dạy truyền đạt kiến thức cho tơi TS Lê Đình Đơn thạc sĩ Trương Phước Thiên Hồng tận tình hướng dẫn tơi thực đề tài PGS.TS Quyền Đình Thi thầy cô thuộc Viện Công nghệ sinh học Hà Nội cung cấp enzyme cho thực đề tài PGS.TS Trịnh Công Thành, môn Di truyền giống Khoa chăn ni- thú y nhiệt tình hướng dẫn tơi sử dụng phần mềm Minitab 15 Quý Thầy/Cô thuộc Viện Nghiên Cứu Công Nghệ Sinh Học Môi Trường thuộc trường đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh tạo điều kiện cho thực tốt đề tài Các bạn học viên lớp Công Nghệ Sinh Học K2006 học tập, chia sẻ, động viên giúp đỡ tơi suốt q trình thực đề tài Học viên thực đề tài Nguyễn Thị Đan Thùy TĨM TẮT Đề tài “Xây dựng quy trình thủy phân phế liệu cá enzyme protease” thực Viện Nghiên Cứu Công Nghệ Sinh Học Môi Trường thuộc trường đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh từ tháng năm 2009 đến tháng năm 2010 Nội dung nghiên cứu đề tài bao gồm xác định điều kiện tối ưu cho quy trình thủy phân phế liệu cá enzyme protease bước đầu nghiên cứu chất bảo quản dịch cá sau thủy phân Đề tài tiến hành nghiên cứu yếu tố (bao gồm năm yếu tố: nồng độ chất, nồng độ enzyme, nhiệt độ thủy phân, độ pH dung dịch thủy phân thời gian thủy phân) ảnh hưởng đến trình thủy phân phế liệu cá enzyme protease để xác định điều kiện thủy phân sở Sau đó, xác lập điều kiện tối ưu cho quy trình thủy phân thơng qua tiến hành quy hoạch thực nghiệm theo yếu tố 25 với trung tâm thí nghiệm điều kiện sở xác định Đề tài tiến hành nghiên cứu tác dụng bảo quản dung dịch sau thủy phân ba chất bảo quản khác bao gồm: sorbitol, methyl paraben hydrogen peroxide thông qua đánh giá hàm lượng nitơ acid amin dung dịch sau thủy phân thời gian bảo quản khác Kết thực nghiệm cho thấy với nồng độ chất: 25 % (w/w), nồng độ enzyme: 50,5 – 55 UI, nhiệt độ thủy phân: 54 – 55 oC, độ pH dung dịch thủy phân: 6,5 thời gian thủy phân: 16 - 16,5 hiệu suất thủy phân đạt cao (48,19 %) Kết khảo sát chất bảo quản dung dịch cá sau thủy phân khẳng định sử dụng nồng độ sorbitol % thích hợp bảo quản tốt dung dịch thủy phân 28 ngày, sử dụng methyl paraben nồng độ 1,1 ‰ bảo quản dung dịch sau thủy phân tốt thời gian bảo quản tốt ngày, sử dụng peroxide hydro với nồng độ nồng độ 2,5 ‰ bảo quản dung dịch sau thủy phân thích hợp thời gian bảo quản tốt ngày SUMMARY The thesis “Using protease for the hydrolysis of fish waste” was carried out at Research Institute for Biotechnology and Enviromental Technology, University of Agriculture and Forestry, Ho Chi Minh City from May 2009 to March 2010 The studies were: (1) the optimization of hydrolysis conditions, (2) the hydrolysated liquid preservation This thesis studied the effect of each factor (substance concentration, protease concentration, temperature, pH and hydrolysis time) on enzymatic hydrolysis in order to define the central values Then, the full factorial design composed of 25 factorial runs was used to optimize enzymatic hydrolysis This thesis also analysed the concentration of amine nitrogen in hydrolysated liquid at the different preservative times to evaluate the preservative effect of three preservative substances (sorbitol, methyl paraben, hydrogen peroxide) on hydrolysated liquid The optimal values for hydrolysis process were recorded as: substance concentration: 25 %(w/w), protease concentration: 50.5 - 55 UI, temperature: 54 55oC, pH: 6.5, hydrolysis time: 16 – 16.5 hours The studies also showed that sorbitol 8.0 % (w/v) could preserve the hydrolysated liquid in 28 days, methyl paraben 1.1 ‰ (w/v) could preserve the hydrolysated liquid in days, hydrogen peroxide 2.5 ‰ (w/v) could preserve the hydrolysated liquid in days MỤC LỤC CHƯƠNG TRANG Trang tựa Trang chuẩn Y i Lý lịch cá nhấn ii Lời cam đoan iii Lời cảm tạ iv Tóm tắt v Summary vi Mục lục vii Danh sách chữ viết tắt viii Danh sách hình ix Danh sách bảng x ĐẶT VẤN ĐỀ TỒNG QUAN 2.1 Khái quát tình hình sử dụng phế liệu cá Việt Nam 2.2 Thành phần protein cá 2.2.1 Thành phần protein thịt cá 2.2.2 Thành phần protein máu cá 2.2.3 Thành phần protein gan cá 2.2.4 Thành phần protein hệ tiêu hóa cá 2.3 Enzyme protease 2.3.1 Giới thiệu enzyme protease 2.3.2 Cấu tạo trung tâm hoạt động enzyme protease 2.3.3 Phân loại enzyme protease 2.3.4 Nguồn thu nhận enzyme protease 2.3.4.1 Nguồn vi sinh vật 2.3.4.2 Nguồn động vật 10 2.3.4.2 Nguồn thực vật 10 2.3.5 Một số lĩnh vực ứng protease 10 2.3.5.1 Trong công nghệ sản xuất thực phẩm 10 2.3.5.2 Trong công nghiệp 11 2.3.5.3 Trong nông nghiệp 12 2.3.5.4 Trong y học 12 2.3.6 Giới thiệu số quy trình thủy phân cá sử dụng enzyme protease 13 2.3.6.1 Quy trình sử dụng thủy phân tạo dịch đạm cá 13 2.3.6.2 Quy trình thủy phân phế liệu cá mòi 14 2.4 Một số yếu tố ảnh hưởng đến trình thủy phân chất protease 15 2.4.1 Ảnh hưởng nhiệt độ 15 2.4.2 Ảnh hưởng độ pH 15 2.4.3 Ảnh hưởng nồng độ enzyme 16 2.4.4 Ảnh hưởng nồng độ chất- phương trình Michaelis-Menten 17 2.4.5 Ảnh hưởng thời gian 18 2.5 Cơ sở phương pháp bảo quản 19 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 Vật liệu, hóa chất trang thiết bị dùng nghiên cứu 24 3.1.1 Vật liệu 24 3.1.2 Hóa chất 24 3.1.2.1 Hóa chất dùng xác định hoạt tính enzyme protease 25 3.1.2.3 Hóa chất dùng xác định nitơ formol 25 3.1.2.4 Hóa chất dùng xác định nitơ ammoniac 25 3.1.2.2 Hóa chất dùng xác định nitơ tổng số 25 3.1.3 Thiết bị 25 3.2 Các phương pháp hóa sinh 25 3.2.1 Sử dụng phương pháp Anson để xác định họat độ enzyme protease 25 3.2.2 Sử dụng phương pháp Kjeldahl để xác định nitơ tổng số 25 3.2.3 Sử dụng phương pháp Sorensen để xác định nitơ formol 25 3.2.4 Sử dụng phương pháp chưng cất nước xác định hàm lượng 25 10 Bảng VII.4: Bảng ANOVA cho số liệu bảng VII.3 ANOVA Sum of Squares ngay7 Between Groups (Combined) Sig .114 26.917 000 085 085 20.094 001 372 124 29.191 000 Within Groups 042 10 004 Total 500 14 1.952 488 64.093 000 110 110 14.503 003 1.841 614 80.623 000 076 10 008 2.028 14 1.331 333 51.713 000 461 461 71.702 000 869 290 45.051 000 064 10 006 1.395 14 1.571 393 75.516 000 758 758 145.852 000 812 271 52.071 000 052 10 005 1.623 14 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total ngay28 F Deviation ngay21 Mean Square 457 Linear Term Contrast ngay14 df Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total 83 ANOVA Sum of Squares nongdo2 Between Groups (Combined) 052 006 12.771 4.175 11 1.392 192.173 000 Linear Term Contrast Deviation 2.778 1.397 2.778 699 383.586 96.467 000 000 Within Groups Total 058 4.233 11 007 6.597 2.199 432.564 000 5.816 5.816 1144.073 000 781 390 041 005 6.637 11 2.552 2.068 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total nongdo8 Sig 12.042 676 Total Between Groups (Combined) Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total nongdo10 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total 84 4.240 F Within Groups nongdo6 Mean Square 12.719 Linear Term Contrast Deviation nongdo4 df 652.234 000 12.042 1852.652 338 52.025 000 000 76.809 000 851 245.957 000 2.068 598.070 000 483 242 69.900 000 028 003 2.579 11 5.566 4.965 1.855 4.965 261.944 700.959 000 000 601 301 42.436 000 057 007 5.623 11 VIII Hàm lượng loại nitơ theo thời gian bảo quản methyl paraben VIII.1 Hàm lượng nitơ formol theo thời gian bảo methyl paraben Bảng VIII.1: Bảng số liệu Ngày 14 21 Nồng độ methyl paraben (‰) Lần Lần Lần Trung bình Lần Lần Lần 0.3 3,09 3,2 3,15 3,15 3,9 3,89 0.5 3,6 3,59 3,57 3,59 4,16 0.7 2,66 2,85 2,76 2,77 0.9 2,4 2,43 2,41 1.1 3,67 3,55 3,55 28 Trung bình Lần Lần Lần Trung bình Lần Lần Lần Trung bình 3,94 3,91 2,77 2,73 2,75 2,75 1,47 1,3 1,38 1,38 4,24 4,29 4,23 3,29 3,24 3,39 3,31 2,57 2,54 2,59 2,57 3,8 3,92 3,84 3,85 3,66 3,84 3,75 3,75 3,32 3,34 3,33 3,33 3,41 4,18 4,21 4,1 4,16 4,15 4,14 4,1 4,13 4,45 4,35 4,36 4,39 3,59 4,31 4,19 4,36 4,29 4,5 4,5 4,51 4,50 4,9 4,9 4,7 4,83 85 Bảng VIII.2: Bảng ANOVA cho số liệu bảng VIII.1 ANOVA Sum of Squares ngay7 Between Groups (Combined) Sig .801 231.166 000 025 025 7.112 024 3.181 1.060 305.851 000 035 10 003 3.240 14 456 114 29.093 000 141 141 36.085 000 315 105 26.762 000 Within Groups 039 10 004 Total 495 14 5.668 1.417 470.219 000 5.625 5.625 1866.594 000 043 014 4.761 026 030 10 003 5.698 14 23.233 5.808 1193.462 000 22.812 22.812 4687.299 000 421 140 28.850 000 049 10 005 23.281 14 Within Groups Total Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total ngay28 F Deviation ngay21 Mean Square 3.206 Linear Term Contrast ngay14 df Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total 86 ANOVA Sum of Squares nongdo0.3 Between Groups (Combined) df Mean Square F Sig 10.085 3.362 1183.002 000 6.240 6.240 2196.026 000 3.845 1.922 676.490 000 023 003 10.108 11 2.955 985 532.365 000 2.013 2.013 1088.109 000 942 471 254.493 000 015 002 2.969 11 2.234 745 142.085 000 Linear Term Contrast 392 392 74.793 000 Deviation Within Groups 1.842 042 921 005 175.731 000 2.276 11 7.515 2.505 1391.716 000 5.198 5.198 2887.737 000 2.317 1.159 643.706 000 014 002 7.530 11 2.490 830 128.686 000 Linear Term Contrast 2.336 2.336 362.237 000 Deviation Within Groups 154 052 077 006 11.910 004 2.542 11 Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total nongdo0.5 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total nongdo0.7 Between Groups (Combined) Total nongdo0.9 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total nongdo1.1 Between Groups (Combined) Total 87 VIII.2 Hàm lượng nitơ ammoniac theo thời gian bảo methyl paraben Bảng VIII.3: Bảng số liệu Ngày Nồng độ methyl paraben (‰) 14 Lần Lần Lần Trung bình Lần Lần 0.3 2,27 2,19 2,35 2,27 3,03 3,1 0.5 1,57 1,65 1,7 1,64 2,7 0.7 2,2 2,24 2,2 2,21 0.9 1,4 1,28 1,29 1.1 1,17 1,34 1,26 21 Lần 28 Trung bình Lần Lần Lần Trung bình Lần Lần Lần Trung bình 2,96 3,03 3,4 3,35 3,38 3,38 3,34 3,3 3,35 3,33 2,85 2,75 2,77 3,97 4,03 4,00 3,78 3,79 3,92 3,83 3,55 3,77 3,65 3,66 3,62 3,6 3,47 3,56 3,61 3,8 3,69 3,70 1,32 3,13 2,97 3,16 3,09 2,79 2,75 2,7 2,75 2,94 2,94 2,96 2,95 1,26 2,66 2,4 2,5 2,52 3,17 3,39 3,2 3,25 3,25 3,44 3,31 3,33 88 Bảng VIII.4: Bảng ANOVA cho số liệu bảng VIII.3 ANOVA Sum of Squares ngay7 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total ngay14 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total ngay21 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total ngay28 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total 89 Df Mean Square F Sig 2.766 692 151.009 000 1.647 1.647 359.686 000 1.119 373 81.451 000 046 10 005 2.812 14 2.171 543 53.744 000 147 147 14.554 003 2.024 675 66.807 000 101 10 010 2.272 14 2.505 626 128.133 000 675 675 138.131 000 1.830 610 124.800 000 049 10 005 2.553 14 1.458 364 71.540 000 231 231 45.268 000 1.227 409 80.297 000 051 1.508 10 14 005 ANOVA Sum of Squares nongdo0.3 Between Groups (Combined) Df Mean Square F Sig 2.354 785 248.412 000 1.866 1.866 590.693 000 488 244 77.271 000 025 003 2.379 11 10.737 3.579 835.551 000 9.134 9.134 2132.405 000 1.603 802 187.123 000 034 004 10.771 11 4.609 1.536 216.379 000 2.860 2.860 402.840 000 1.749 874 123.148 000 057 007 4.666 11 5.959 1.986 466.476 000 3.078 3.078 722.850 000 2.881 1.441 338.288 000 034 004 5.993 11 8.326 2.775 230.788 000 Linear Term Contrast Deviation 7.273 1.052 7.273 526 604.840 43.763 000 000 Within Groups Total 096 8.422 11 012 Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total nongdo0.5 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total nongdo0.7 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total nongdo0.9 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total nongdo1.1 Between Groups (Combined) 90 IX Hàm lượng loại nitơ theo thời gian bảo quản hydrogen peroxide IX.1 Hàm lượng nitơ formol theo thời gian bảo peroxide hydro Bảng IX.1: Bảng số liệu Ngày Nồng độ hydrogen peroxide (‰) 14 Lần Lần 3,8 3,84 3,9 3,85 1.00 3,79 3,7 3,66 1.50 2,79 2,89 2.00 2,65 2.50 2,84 0.50 Lần Trung bình Lần 21 Lần Lần 4,3 4,37 4,38 3,72 3,64 3,55 2,84 2,84 2,68 2,6 2,69 2,65 2,97 2,9 2,9 Trung bình 28 Lần Lần Lần 4,35 3,82 3,68 3,75 3,57 3,59 1,84 1,92 2,75 2,71 2,71 1,87 3,75 3,79 3,8 3,78 3,15 3,24 3,06 3,15 91 Trung bình Lần Lần Lần Trung bình 3,75 3,59 3,61 3,55 3,58 1,87 1,88 1,68 1,63 1,79 1,7 1,83 1,94 1,88 2,07 2,08 2,07 2,07 2,07 1,99 2,13 2,06 1,68 1,6 1,62 1,63 1,44 1,43 1,46 1,44 1,41 1,4 1,32 1,38 Bảng IX.2: Bảng ANOVA cho số liệu bảng IX.1 ANOVA Sum of Squares ngay7 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total ngay14 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total ngay21 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total ngay28 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total 92 df Mean Square F Sig 3.625 906 288.037 000 2.623 2.623 833.442 000 1.003 334 106.236 000 031 10 003 3.657 14 4.645 1.161 409.891 000 1.461 1.461 515.581 000 3.185 1.062 374.660 000 028 10 003 4.674 14 9.602 2.400 810.971 000 5.879 5.879 1986.018 000 3.723 1.241 419.288 000 030 10 003 9.631 14 9.295 2.324 981.894 000 6.021 6.021 2544.135 000 3.274 1.091 000 024 9.319 10 14 002 461.147 ANOVA Sum of Squares nongdo0.5 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total nongdo1.0 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total nongdo1.5 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total nongdo2.0 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total nongdo2.5 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total 93 df Mean Square F Sig .981 327 127.363 000 290 290 112.915 000 691 345 134.586 000 021 003 1.001 11 10.488 3.496 932.284 000 9.033 9.033 2408.704 000 1.456 728 194.075 000 030 004 10.518 11 2.000 667 388.375 000 1.473 527 1.473 264 857.864 153.631 000 000 014 002 2.014 11 7.794 2.598 1105.488 000 3.394 3.394 1444.205 000 4.400 2.200 936.130 000 019 002 7.812 11 7.939 2.646 705.668 000 5.928 2.010 5.928 1.005 1580.887 268.059 000 000 030 004 7.969 11 IX.2 Hàm lượng nitơ ammoniac theo thời gian bảo peroxide hydro Bảng IX.3: Bảng số liệu Ngày 14 21 28 Nồng độ hydrogen peroxide (‰) Lần Lần Lần Trung bình Lần Lần Lần Trung bình Lần Lần Lần Trung bình Lần Lần Lần Trung bình 0.50 2,26 2,18 2,2 2,21 1,84 1,85 1,82 1,84 3,09 3,14 3,16 3,13 3,34 3,42 3,4 3,39 1.00 1,98 2,06 2,01 2,02 3,05 3,1 3,03 3,11 2,9 2,7 2,9 2,89 2,83 1.50 0,83 0,8 0,83 0,82 3,54 3,59 3,64 3,59 3,01 3,04 2,94 3,17 3,12 3,14 3,14 2.00 0,15 0,08 0,17 0,13 3,22 3,24 3,22 3,22 2,8 2,77 2,85 2,81 3,28 3,3 3,2 3,26 2.50 0,13 0,1 0,15 0,13 3,21 3,13 3,32 3,22 2,6 2,73 2,75 2,69 3,45 3,49 3,41 3,45 94 Bảng IX.4: Bảng ANOVA cho số liệu bảng IX.3 ANOVA Sum of Squares ngay7 Between Groups (Combined) Linear Term Sig 3.025 2314.740 000 Contrast 11.005 11.005 8422.166 000 Deviation 1.093 364 013 10 001 12.111 14 5.408 Contrast 2.599 Deviation 278.931 000 1.352 467.250 000 2.599 898.259 000 2.809 936 323.580 000 029 10 003 5.437 14 363 091 19.524 000 343 343 73.918 000 Deviation Within Groups 019 046 10 006 005 1.393 301 Total 409 14 (Combined) 720 180 46.247 000 Contrast 093 093 23.878 001 Deviation 627 209 53.704 000 Within Groups 039 10 004 Total 759 14 (Combined) Linear Term Within Groups Total ngay28 Between Groups F Total ngay21 Between Groups Mean Square 12.098 Within Groups ngay14 Between Groups df (Combined) Linear Term Linear Term Contrast 95 ANOVA Sum of Squares nongdo0.5 Between Groups (Combined) 000 Contrast 3.475 3.475 2780.181 000 Deviation 1.400 700 010 001 Total 4.885 11 (Combined) 2.088 Contrast 859 Deviation Linear Term 559.896 000 696 99.884 000 859 123.331 000 1.228 614 88.160 000 056 007 2.143 11 13.786 4.595 3029.954 000 Contrast 6.099 6.099 4021.504 000 Deviation 7.687 3.844 2534.179 000 012 Total 13.798 11 (Combined) 20.156 6.719 3952.131 000 Contrast 12.042 12.042 7083.671 000 Deviation 8.114 4.057 2386.361 000 014 Total 20.169 11 (Combined) 21.078 7.026 1564.222 000 Contrast 13.376 13.376 2978.066 000 Deviation 7.701 3.851 036 004 Linear Term (Combined) Linear Term Within Groups Linear Term Within Groups nongdo2.5 Between Groups Sig 1.625 1299.991 Total nongdo2.0 Between Groups F Within Groups nongdo1.5 Between Groups Mean Square 4.875 Within Groups nongdo1.0 Between Groups df Linear Term Within Groups 96 002 002 857.300 000 ANOVA Sum of Squares nongdo0.5 Between Groups (Combined) 000 3.475 1.400 3.475 2780.181 700 559.896 000 000 010 Total 4.885 11 (Combined) 2.088 696 99.884 000 Contrast 859 859 123.331 000 Deviation 1.228 614 88.160 000 056 007 2.143 11 13.786 4.595 3029.954 000 Contrast 6.099 6.099 4021.504 000 Deviation 7.687 3.844 2534.179 000 012 Total 13.798 11 (Combined) 20.156 6.719 3952.131 000 Contrast 12.042 12.042 7083.671 000 Deviation 8.114 4.057 2386.361 000 014 Total 20.169 11 (Combined) 21.078 7.026 1564.222 000 13.376 7.701 13.376 2978.066 3.851 857.300 000 000 036 21.114 11 Linear Term Contrast Deviation Linear Term (Combined) Linear Term Within Groups Linear Term Within Groups nongdo2.5 Between Groups Sig 1.625 1299.991 Total nongdo2.0 Between Groups F Within Groups nongdo1.5 Between Groups Mean Square 4.875 Within Groups nongdo1.0 Between Groups df Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total 97 001 002 002 004 ... tắt v Summary vi Mục lục vii Danh sách chữ viết tắt viii Danh sách hình ix Danh sách bảng x ĐẶT VẤN ĐỀ TỒNG QUAN ... phần triglyceride acid béo, DHA (docosahexaenoic acid) xem có giá trị cải thi n sức khỏe cho người cần thi t cho hoàn thi n hệ thần kinh, giảm cholesterol triglyceride máu hạn chế bệnh tim mạch... Hoàng Minh Giám, phường 9, quận Phú Nhuận, thành phố Hồ Chí Minh Điện thoại: 0908105231 Email: danthuy_205@yahoo.com LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các số liệu, kết nêu luận