Nghiên cứu tính kháng sinh của Enterobacter tại bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu tính kháng sinh của Enterobacter tại bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu tính kháng sinh của Enterobacter tại bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu tính kháng sinh của Enterobacter tại bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu tính kháng sinh của Enterobacter tại bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu tính kháng sinh của Enterobacter tại bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu tính kháng sinh của Enterobacter tại bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu tính kháng sinh của Enterobacter tại bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu tính kháng sinh của Enterobacter tại bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu tính kháng sinh của Enterobacter tại bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên. (Khóa luận tốt nghiệp)
ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - PHẠM THỊ YẾN Tên đề tài: NGHIÊN CỨU TÍNH KHÁNG KHÁNG SINH CỦA ENTEROBACTER TẠI BỆNH VIỆN ĐA KHOA TRUNG ƢƠNG THÁI NGUYÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chun ngành : Cơng nghệ sinh học Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2011-2015 Thái Nguyên – năm 2016 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - PHẠM THỊ YẾN Tên đề tài: NGHIÊN CỨU TÍNH KHÁNG KHÁNG SINH CỦA ENTEROBACTER TẠI BỆNH VIỆN ĐA KHOA TRUNG ƢƠNG THÁI NGUYÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : Công nghệ sinh học Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2011-2015 Giảng viên hƣớng dẫn Bộ môn 1.: TS Phạm Bằng Phƣơng PGS.TS.BS Lƣu Thị Kim Thanh : Công nghệ sinh học Thái Nguyên – năm 2016 i LỜI CẢM ƠN Lời tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS.BS Lưu Thị Kim Thanh – Trưởng khoa Vi sinh Bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên TS.Phạm Bằng Phương học-Công nghệ thực phẩm Giangr viên khoa Công nghệ sinh Đại học Nông Lâm Thái Nguyên người định hướng nghiên cứu, tận tình hướng dẫn giúp đỡ tạo điều kiện đầy đủ trang thiết bị hóa chất để tơi thực luận tốt nghiệp.` Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành đến thầy cô giáo khoa Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên dạy dỗ trang bị cho tơi kiến thức bổ ích suốt năm học qua Qua tơi xin bày tỏ lòng biết ơn tới cán bộ, kỹ thuật viên phòng xét nghiệm Vi sinh Bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Ngun giúp tơi hồn thành đề tài Xin cảm ơn gia đình, bạn bè tập thể lớp Cơng nghệ sinh học k43 ln động viên, khích lệ giúp đỡ suốt thời gian học tập nghiên cứu vừa qua Thái Nguyên, ngày tháng Sinh viên Phạm Thị Yến năm 2016 ii DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 3.1: Kết nhuộm soi bệnh phẩm (n=305) 35 Bảng 3.2: Kết nuôi cấy bệnh phẩm 36 Bảng 3.3: Kết phân lập bệnh phẩm (n=94) 37 Bảng 3.4: Kết phân lập cấp độ loài bệnh phẩm (n=23) 39 Bảng 3.5: Độ kháng kháng sinh loài Enterobacter Aerogenes 40 Bảng 3.6 Độ kháng kháng sinh loài Enterobacter Cloacae 41 Bảng 3.7: Độ kháng kháng sinh Enterobacter 43 Bảng 3.8: Tổng số chủng đa kháng kháng sinh Enterobacter 48 Bảng 3.9: Kết kiểu đa kháng kháng sinh Enterobacter 48 iii DANH MỤC HÌNH Trang Hình 2.1 Tính chất Enterobacter 32 Hình 2.2 Phản ứng VP dương tính 32 Hình 2.3 Hình thái khuẩn lạc Enterobacter 32 Hình 2.4 Lên men đương glucose 32 Hình 2.5 Chun hóa nitrat thành nitrit 33 Hình 2.6 Xác định men Coagulase 33 Hình 2.7 phản ứng catalase 33 Hình 2.8 Tính nhạy cảm kháng sinh 33 Hình 2.9 Khả di đông 34 Hình 2.10 Lên men đường Mannit 34 Hình 3.1: Kết nhuộm soi bệnh phẩm 35 Hình 3.2 Tỷ lệ ni cấy dương tính loại bệnh phẩm 36 Hình 3.3: Tỷ lệ Enterobacter vi khuẩn khác bệnh phẩm 38 Hình 3.4 Tỷ lệ nhạy cảm kháng kháng sinh Enterobacter 44 Hình 3.5: Tỷ lệ kiểu đa kháng sinh Enterobacter 49 iv DANH MỤC VIẾT TẮT NST Nhiễm sắc thể mRNA ARN thông tin ADN Deoxyribonucleic acid ARN Ribonucleic acid Ampicillin AM Chloramphenicol C Ceftazidine CAZ Ceftriaxone CRO Ciprofloxacine CIP Cefotaxime CTX Cefolecine CN Cephalothine CF Doxyciline DO Gentamycine GM Metroxondazle MZ Netilmycine NET Nofloxacine NOR Ofloxacine OFX Rifapycine RA Trimethoprim TM Spectiomycine SPC Piperacine PRL Resistance R Penicillin biding protein PBP v MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC BẢNG ii DANH MỤC HÌNH iii DANH MỤC VIẾT TẮT iv MỤC LỤC v MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu nghiên cứu 2.1 Xác định tỉ lệ nhiễm trùng Enterobacter số bệnh nhân đến khám điều trị Bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên 2.2 Xác định mức độ kháng kháng sinh Enterobacter với số kháng sinh Nội dung nghiên cứu 3.1 Phân lập Enterobacter từ số bệnh phẩm 3.2 Đánh giá mức độ kháng kháng sinh chủng Enterobacter phân lập CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Lược sử nghiên cứu Enterobacter 1.2 Sự phân bố Enterobacter 1.3 Hình thái, cấu tạo sinh sản 1.3.1 Hình thái, cấu tạo 1.3.2 Sự sinh sản Enterobacter 1.4 Cấu tạo chung vi khuẩn 1.4.1 Thành tế bào 1.4.2 Màng tế bào chất vi 1.4.3 Tế bào chất 1.4.4 Thể nhân 1.4.5 Bao nhầy 1.4.6.Tiên mao 1.4.7 Bào tử 1.5 Đặc điểm sinh học Enterobacter 1.5.1 Tính chất ni cấy 1.5.2 Một số tính chất hóa sinh 1.5.3 Sức đề kháng 1.5.4 Kháng nguyên 1.5.5 Đặc tính yếu tố độc lực 1.6 Hội chứng độc lực Enterobacter gây 1.7 Kháng sinh 1.7.1 Khái niệm 1.7.2 Phân loại kháng sinh 1.7.3 Cơ chế tác dụng kháng sinh lên tế bào vi sinh vật 11 1.8 Đề kháng kháng sinh 13 1.8.1 Khái niệm 13 1.8.2 Các kiểu đề kháng vi sinh vật 13 1.8.3 Cơ chế đề kháng kháng sinh 15 1.8.4 Nguồn gốc đề kháng kháng sinh 16 1.9 Cơ chế đề kháng kháng sinh Enterobacter 16 1.10 Biện pháp hạn đề kháng vi khuẩn 17 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Đối tượng nghiên cứu 19 2.2 Các thiết bi hóa chất 19 2.2.1 Thiết bị dụng cụ 19 vii 2.2.2 Hóa chất 19 2.3 Môi trường nuôi cấy, phân lập, xác định tính chất sinh hóa làm kháng sinh đồ 20 2.4 Các khoanh giấy kháng sinh 24 2.5 Phương pháp nghiên cứu 25 2.5.1 Kỹ thuật lấy bệnh phẩm 25 2.5.2 Kỹ thuật phân lập 26 2.5.3 Kỹ thuật kháng sinh đồ 30 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 35 3.1 Kết nhuộm soi, nuôi cấy phân lập 35 3.1.1 Kết nhuộm soi 35 3.1.2 Kết nuôi cấy 36 3.1.3 Kết phân lập Enterobacter 37 3.2 Kết xác định loài chi Enterobacter 39 3.3 Kết xác định mức độ đề kháng kháng sinh loài Enterobacter 40 3.4 Kết xác định mức độ đề kháng kháng sinh Enterobacter 43 3.5 Kết kiểu đa kháng chủng Enterobacter 47 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 50 KẾT LUẬN 50 KIẾN NGHỊ 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO 51 MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Từ thập niên 1940, kháng sinh làm nên cách mạng lớn việc làm giảm tỷ lệ tử vong bệnh nhiễm trùng Nhưng không may đề kháng vi khuẩn với thuốc kháng sinh trở thành vấn đề nghiêm trọng tồn cầu [9].Tình trạng kháng thuốc liệt kê vào nguy khủng khiếp đe dọa nhân loại nay, xếp ngang với thay đổi khí hậu phong trào khủng bố toàn cầu [18] Trong năm gần đây, tỷ lệ bệnh nhiễm trùng vi khuẩn đề kháng kháng sinh tăng lên rõ rệt môi trường bệnh viện cộng đồng [19].Nguyên nhân chủ yếu sử dụng kháng sinh không hợp lý tạo điều kiện cho vi khuẩn phơi nhiễm nhiều với kháng sinh dẫn đến nhiều hội để chúng phát triển lây lan tính kháng kháng sinh [19] Sự kết hợp kháng thuốc nhiễm sắc thể kháng thuốc plasmid làm cho Enterobacteriaceae vi khuẩn có khả biến đổi tất vi khuẩn mức độ mẫn cảm với thuốc kháng sinh Một vi khuẩn điển hình thuộc họ có khả đề kháng với nhiều loại kháng sinh Enterobacter [7], Enterobacter loại trực khuẩn Gram âm, phân bố chủ yếu đường tiêu hóa người động vật, chúng tồn dễ dàng mơi trường đất, nước,khơng khí…Trong giới hạn đề tài tốt nghiệp nghiên cứu Enterobacter người Enterobacter có khả sản xuất penicillinase phá hủy vòng βlactam, cấu trúc kháng sinh penicillin G, Ampicillin…làm cho kháng sinh tác dụng Hiện chưa có vaccine đặc hiệu để phòng nhiễm khuẩn Enterobacter, có kháng sinh có vai trò hữu hiệu bệnh nhiễm ... đề tài: NGHIÊN CỨU TÍNH KHÁNG KHÁNG SINH CỦA ENTEROBACTER TẠI BỆNH VIỆN ĐA KHOA TRUNG ƢƠNG THÁI NGUYÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chun ngành : Cơng nghệ sinh học Khoa :... Mục tiêu nghiên cứu 2.1 Xác định tỉ lệ nhiễm trùng Enterobacter số bệnh nhân đến khám điều trị Bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên 2.2 Xác định mức độ kháng kháng sinh Enterobacter. .. kháng kháng sinh loài Enterobacter Aerogenes 40 Bảng 3.6 Độ kháng kháng sinh loài Enterobacter Cloacae 41 Bảng 3.7: Độ kháng kháng sinh Enterobacter 43 Bảng 3.8: Tổng số chủng đa kháng