Nghiên cứu thành phần hóa học cặn chiết etylaxetat của cây nàng nàng (callicarpa candicans) (2017)

TRƢỜNG SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA HÓA HỌC - NGUYỄN THỊ NINH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CẶN CHIẾT ETYLAXETAT CỦA CÂY NÀNG NÀNG (CALLICARPA CANDICANS) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Hóa Hữu Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS Phạm Thị Hồng Minh HÀ NỘI, 2017 LỜI CẢM ƠN Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới Ban lãnh đạo Viện Hóa học Hợp chất thiên nhiên - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam tạo điều kiện cho em thực hồn thành khóa luận Viện Để hồn thành tốt khóa luận này, em xin chân thành cảm ơn TS Phạm Thị Hồng Minh - cán hướng dẫn tập thể cán Phòng Hóa sinh hữu tạo điều kiện, giúp đỡ giúp em suốt thời gian thực hồn thành khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy khoa Hóa học trường Đại học Sư phạm Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi, động viên em suốt trình học tập Khoa Trong q trình thực khóa luận, em khơng tránh khỏi thiếu sót em kính mong nhận đóng góp bảo quý thầy cô Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội , ngày tháng năm 2017 Xác nhận cuả GVHD Sinh viên thực TS Phạm Thị Hồng Minh Nguyễn Thị Ninh LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan đề tài: “Nghiên cứu thành phần hóa học cặn chiết etylaxetat Nàng nàng (Callicarpa candicans) công trình nghiên cứu riêng em hướng dẫn khoa học TS Phạm Thị Hồng Minh Các nội dung nghiên cứu, kết đề tài trung thực chưa công bố hình thức trước Những số liệu bảng biểu phục vụ cho việc phân tích, nhận xét, đánh giá tác giả thu thập từ nguồn khác có ghi rõ phần tài liệu tham khảo Nếu phát có gian lận tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm nội dung khóa luận Hà Nội, tháng năm 2017 Sinh viên Nguyễn Thị Ninh MỤC LỤC MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN 1.1 Khái quát thực vật chi Callicarpa 1.2 Đặc điểm thực vật học phân bố Cây Nàng nàng 1.2.1 Đặc điểm sinh thái 1.2.2 Đặc điểm phân bố 1.2.3 Những ứng dụng Nàng nàng(C candicans) y học cổ truyền Việt Nam 1.3 Nghiên cứu hóa học thực vật chi Callicarpa 1.3.1 Các hợp chất diterpenenoid 1.3.2 Các hợp chất flavonoid 1.3.3 Các hợp chất phenylpropanoid phenylethanoid 11 1.3.4 Các hợp chất phytosterol 12 1.3.5 Các hợp chất triterpenoid 13 Chương THỰC NGHIỆM 15 2.1 Đối tượng phương pháp nghiên cứu 15 2.1.1 Thu mẫu, xác định tên khoa học 15 2.1.2 Phương pháp phân tích, phân lập hợp chất từ dịch chiết 15 2.1.3 Phương pháp khảo sát cấu trúc chất 15 2.2 Dụng cụ hóa chất thiết bị nghiên cứu 16 2.2.1 Dụng cụ, hoá chất 16 2.2.2 Thiết bị nghiên cứu 16 2.3 Phương pháp xử lý mẫu 16 2.4 Phân lập tinh chế chất từ cặn dịch chiết etyl axetat thân, Nàng nàng 17 2.4.1 Hợp chất CE1(β-sitoterol-3-O-β-D-glucopyranoside (1) 18 2.4.2 Hợp chất (2) ursolic acid (CE2) 18 Các dịch chiết lại tiếp tục nghiên cứu 20 Chương THẢO LUẬN KẾT QUẢ 21 3.1 Hợp chất β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside (1) 21 3.2 Hợp chất ursolic acid (2) 22 3.3 2-hydroxy-ursolic acid hay 2, 3-dihydroxy- urs-12-en-28-oic (3) 23 KẾT LUẬN 25 TÀI LIỆU THAM KHẢO 26 PHỤ LỤC 29 DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1 Các hợp chất diterpenenoid Bảng 1.2 Các hợp chất phenylpropanoid phenylethanoid Bảng 1.3 Các hợp chất phenylpropanoid phenylethanoid 11 Bảng 1.4 Các hợp chất phytosterol 12 Bảng 1.5 Các hợp chất triterpenoid 13 Bảng 2.1 Bảng 2.1 Khối lượng cặn chiết thu từ thân, Nàng nàng 17 DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 1.1 Các hợp chất diterpenenoid (1 - 35) Hình 1.2 Cấu trúc hóa học hợp chất flavonoid (36 -58) Hình 1.3 Cấu trúc hóa học hợp chất (59 -75) 11 Hình 1.4 Cấu trúc hóa học hợp chất triterpenoid (81 -92) 13 Hình 2.1 Cây Nàng nàng 15 Sơ đồ 2.1 Ngâm chiết mẫu thân, Nàng nàng (C candicans) 17 MỞ ĐẦU Việt Nam có thảm thực vật phong phú đa dạng với nhiều dược liệu quí Các hợp chất từ nguồn gốc thiên nhiên thể hoạt tính sinh học phong phú, nguồn nguyên liệu lý tưởng để tạo nhiều loại thuốc chống lại bệnh hiểm nghèo, chất bảo quản thực phẩm, chế phẩm phục vụ nơng nghiệp có hoạt tính cao mà không ảnh hưởng đến môi sinh Việc sử dụng loại thảo dược theo cổ truyền hay từ hợp chất nguồn gốc tự nhiên có xu hướng ngày tăng chiếm vị trí quan trọng y học, sinh học, công nghiệp nông nghiệp thực phẩm Vì vậy, thuốc sử dụng thảo dược đối tượng để nhà khoa học nghiên cứu cách đầy đủ chất hoạt chất có cỏ thiên nhiên, từ định hướng cho việc nghiên cứu, chiết xuất tìm loại hoạt chất có hoạt tính cao việc chữa trị nhiều loại bệnh có ý nghĩa khoa học thực tiễn cao Gần nhiều thuốc cổ truyền hay nhân dân sử dụng, số có Nàng Nàng (Calicarpa candicans) biết đến để hỗ trợ điều trị bệnh dùng làm thuốc bổ cho phụ nữ sinh, giúp mạnh gân cốt, thuốc chữa bệnh gan, đau bụng, chữa mụn nhọt, lở loét Ngồi ra, dùng làm thuốc điều hòa kinh nguyệt, đau bụng, cầm máu vết thương Ở Việt Nam, thơng tin nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học Nàng nàng chưa đề cập đến Vì vậy, đề tài khóa luận theo định hướng: “Nghiên cứu thành phần hóa học cặn chiết etyl axetat Nàng Nàng (Callicarpa candicans)” góp phần tìm hiểu thành phần hóa học có Nàng nàng đưa hướng sử dụng hiệu dược liệu Mục tiêu đề tài: Chiết tách, phân lập xác định cấu trúc 2-3 hợp chất phân lập từ C candicans Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 Khái quát thực vật chi Callicarpa Các thực vật chi Callicarpa (Chi Tu hú hay chi Tử châu) thuộc họ Cỏ roi ngựa (Verbenaceae) có khoảng 40 lồi, hay gặp phổ biến vùng nhiệt đới cận nhiệt đới, chủ yếu nước thuộc châu Á hay Đơng Nam châu Á, số lồi gặp vùng xích đạo châu Mỹ Australia Trong số đó, nhiều lồi hay sử dụng theo kinh nghiệm dân gian, điều cho thấy chi Callicarpa nguồn tự nhiên có hoạt tính sinh học Y học cổ truyền nhiều nước sử dụng nhiều thực vật chi Callicarpa từ phận khác tạo chế phẩm chất độc cá, xua đuổi côn trùng, dùng y học Những nghiên cứu hóa học dược học thực vật từ chi Callicarpa cho thấy chi có hoạt tính sinh học phong phú Theo tác giả Võ Văn Chi, chi Callicarpa có 14 lồi [2], tác giả Phạm Hoàng Hộ thống kê chi Callicarpa Việt Nam có 26 lồi [3], theo nhà thực vật học Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật thống kê 21 lồi [1] Có nhiều lồi thuộc chi Callicarpa sử dụng y học dân gian nhiều dân tộc, nước Châu Á, Đơng Nam Á Australia, Mỹ Khoảng 20 lồi thực vật chi Callicarpa công bố tác dụng sử dụng y học dân gian Trong đó, số loài biết đến hay sử dụng y học cổ truyền Trung Quốc Nam Á Theo y học cổ truyền sử dụng việc điều trị bệnh viêm gan, bệnh thấp khớp, sốt, nhức đầu, khó tiêu, bệnh khác Một số lồi Callicarpa công bố sử dụng chống lại ung thư (ví dụ, rễ Callicarpa americana gốc để điều trị bệnh ung thư da vỏ Callicarpa rubella để điều trị khối u ruột già) Các dịch chiết thu từ 14 loài chi Callicarpa đánh giá tác dụng sinh học gồm khả kháng khuẩn, kháng nấm, chống côn trùng sinh trưởng, gây độc tế bào, hoạt động phytotoxic Ngoài acid amin, benzenoids, carbohydrates đơn giản, lipid, nhiều diterpenes, flavonoids, phenylpropanoids, phytosterol, sesquiterpene, triterpenes phát phân lập từ chi Callicarpa Các loại dầu thiết yếu từ lồi Callicarpa americana gần cơng bố có tác dụng chống khó tiêu, số chất phân lập từ loài C americana C japonica xác nhận có tác dụng chống muỗi đốt, lần việc sử dụng loài y học dân gian Gần đây, kết điều tra tác dụng sinh học loài C americana cho biết số hợp chất phân lập từ dịch chiết có hoạt tính chủ yếu diterpene với kiểu cấu trúc khung clerodane Ở Ấn Độ C arborea Roxb sử dụng để điều trị bệnh da [5] Lá C candicans (Burm f ) Hochr Philippines sử dụng làm chất gây mê cho cá [6, 7] Trong y học dân gian Đài Loan loài C formosana Rolfe sử dụng để điều trị bệnh thấp khớp rối loạn đường tiêu hóa (nhiễm trùng miệng, rối loạn dày không xác định đường ruột) [8] Vỏ C lanata L người dân Đông Ấn Độ sử dụng trầu [9] Loài C macrophylla Vahl sử dụng rộng rãi hệ thống y học cổ truyền Ấn Độ Trung Quốc Tại Ấn Độ hạt loài C macrophylla sử dụng để điều trị bệnh nhiễm trùng miệng đường ruột [10], dùng để điều trị bệnh thấp khớp, khối u, rối loạn tiêu hóa, tiêu chảy, lỵ, tiểu đường lọc máu [11], nước ép trái sử dụng để điều trị sốt, loại dầu thơm từ rễ sử dụng để điều trị "rối loạn dày"[11] 22.Yuan-Wei Liu, Yuan-Bin Cheng, Chia-Ching Liaw, Chung-Hsiung Chen, Jih-Hwa Guh, Tsong-Long Hwang, Ji-Shu Tsai, Won-Bo Wang, and Ya-Ching Shen Bioactive Diterpenes from Callicarpa longissima J Nat Prod., 75 (4), 689–693, (2012) 23 Goad, L J., and Akihisa, T., -Analysis of sterols, Chapman & Hall, (1997), 324-333 24 Shashi B Mahato and Asish P Kundu -13C-NMR spectra of pentacyclic triterpenoids - A compilation and some salient features Phytochemistry, 37 (5) (1994) 1517-1575 25 David Lontsi, Beibam-Lucas Sondegam, Marie-Therese Martin, and Berna Bodo.-Musangicic acid, a triterpenoid constituent of Musanga cecropioides Phytochemistry, 32 (12) (1992) 4285-4288 26 B U Jaki, S G Franzblau, L R Chadwick, D C Lankin, F Zhang, Y Wang, and G F Pauli, Puriy - Activity Relationships of Natural Products: The Case of Anti-TB Active Ursolic Acid J.Nat.Prod, 71 (2008) 17421748 27.William P., Douglas Kinghorn, Biologically Active Natural Products of the Genus Callicarpa, Curr Bioact Compd., 2008, 4(1), 15-32 28 Takashi Yamagishi, De-Cheng Zhang, Jer-Jang et al The cytotoxic principles of Hyptis capitata and the structures of the new triterpenes hyptatic acid-A and –B* Phytochemistry, 1988, 27 (10), p 3213-3216 28 PHỤ LỤC Trang Các phổ β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside (CE1) 30 Phổ 1H-NMR CE1 30 Phổ 13C-NMR CE1 31 Phổ DEPT CE1 32 Các phổ ursolic acid (CE2) 33 Phổ 1H-NMR CE2 33 Phổ 13C-NMR CE2 34 Phổ DEPT CE2 35 Phổ HSQC CE2 36 Phổ HMBC CE2 37 Các phổ 2,3β-dihydroxy-urs-12en-28-oic acid (CE3) 38 Phổ 1H-NMR CE3 38 Phổ 13C-NMR CE3 39 Phổ DEPT CE3 40 Phổ HSQC CE3 41 Phổ HMBC CE3 42 29 PHỤ LỤC Các phổ β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside (CE1) Phổ 1H-NMR β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside (CE1) 30 Phổ 13C-NMR β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside (CE1) 31 Phổ DEPT β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside (CE1) 32 Các phổ 1H-NMR ursolic acid (CE2) Phổ 1H-NMR ursolic acid (CE2) 33 Phổ 13C-NMR ursolic acid (CE2) 34 Phổ DEPT ursolic acid (CE2) 35 Phổ HSQC ursolic acid (CE2) 36 Phổ HMBC ursolic acid (CE2) 37 Các phổ 2,3β-dihydroxy-urs-12en-28-oic acid (CE3) Phổ 1H-NMR 2,3β-dihydroxy-urs-12en-28-oic acid (CE3) 38 Phổ 13C-NMR 2,3β-dihydroxy-urs-12en-28-oic acid (CE3) 39 Phổ DEPT 2,3β-dihydroxy-urs-12en-28-oic acid (CE3) 40 Phổ HSQC 2,3β-dihydroxy-urs-12en-28-oic acid (CE3) 41 Phổ HMBC 2,3β-dihydroxy-urs-12en-28-oic acid (CE3) 42 ... thơng tin nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học Nàng nàng chưa đề cập đến Vì vậy, đề tài khóa luận theo định hướng: Nghiên cứu thành phần hóa học cặn chiết etyl axetat Nàng Nàng (Callicarpa. .. đề tài: Nghiên cứu thành phần hóa học cặn chiết etylaxetat Nàng nàng (Callicarpa candicans) công trình nghiên cứu riêng em hướng dẫn khoa học TS Phạm Thị Hồng Minh Các nội dung nghiên cứu, kết... Hạt sắc uống làm sáng mắt 1.3 Nghiên cứu hóa học thực vật chi Callicarpa Hiện nay, 20 loài thực vật thuộc chi Callicarpa nghiên cứu hóa thực vật, với thành phần hóa học phong phú đa dạng, bao gồm: