VI SINH MT NHÓM 6

Chào mừng thầy bạn đến với thuyết trình nhóm THÀNH VIÊN Nguyễn Ngọc Như Ý Bùi Thị Phương Thảo Dương Công Thành Nguyễn Trung Bảo Phan Huỳnh Phúc Nguyễn Võ Triệu Mẫn Phân biệt và giải thích phương pháp định tính và định lượng vi sinh vật NỘI DUNG CHÍNH I Khái quát chung: II Phân tích phương pháp: A Phương pháp định tính B Phương pháp định lượng III Nhận xét IV Kết luận I Khái quát chung:  Phương pháp định tính phương pháp xác định có vi sinh vật mẫu hay không  Phương pháp định lượng phương pháp xác định số lượng vi sinh vật mẫu II Phân tích: A PHÂN TÍCH PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH -Mẫu -BGBL -EMB -Nghiệm pháp IMViC phù hợp Vi khuẩn E.coli  Các bước tiến hành: Chuẩn bị mẫu  Tăng sinh Phân lập  Khẳng định -Tăng sinh: +Môi trường sử dụng: canh BGBL +Ủ nhiệt độ 44oC 24h +Chọn ống sinh  cấy phân lập -Phân lập: + Môi trường sử dụng: EMB agar +Cấy chuyển từ BGBL  EMB, ủ nhiệt độ 37oC 24h +Chọn khuẩn lạc đặc trưng cấy chuyển sang môi trường TSA -Thử nghiệm IMViC -Kết luận: Có vi khuẩn E.coli hay không B PHÂN TÍCH PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG 1.Phương pháp đếm trực tiếp  Là phương pháp định lượng dựa quan sát đếm trực tiếp số lượng tế bào vi sinh vật kính hiển vi buồng đếm  Đối tượng: mật độ vsv đơn bào có kích thước lớn nấm men, men, tảo… xác định trực tiếp buồng đếm kính hiển vi Có phương pháp đếm trực tiếp:    Đếm trực tiếp kính hiển vi hùynh quang Đếm trực tiếp buồng đếm breed Đếm trực tiếp buồng đếm hồng cầu  Ưu điểm: cho phép xác định nhanh chóng số lượng vi sinh vật có mẫu  Nhược điểm: • Không phân biệt tế bào sống chết mẫu • Không phân biệt tế bào vi sinh vật vật thể • Hạn chế huyền phù có mật độ thấp lượng dung dịch đem đếm nhỏ • Độ xác không cao, dễ nhầm lẫn • Không thích hợp mẫu có mật độ vi sinh thấp 2.Phương pháp đếm KHUẨN LẠC  Cho phép xác định số lượng tế bào vi sinh vật sống diện mẫu  Tế bào sống tế bào có khả phân chia tạo thành khuẩn lạc môi trường chọn lọc  Do phương pháp có tên gọi phương pháp đếm khuẩn lạc Cách tiến hành 3.Phương pháp đếm KHUẨN LẠC màng lọc  Phương pháp kết hợp phương pháp lọc vô trùng phương pháp đếm khuẩn lạc đĩa petri Màng lọc có kích thước lỗ 0,45pm 0,2pm chế tạo từ nguyên liệu sợi thủy tinh siêu mánh, sợi polypropylene, thường cung cấp trạng thái vô trùng  Ưu điểm: xác định mật độ vsv cụ thể thể tích mẫu lớn: 10ml; 100ml;…  Nhược điểm: không thích hợp cho việc phân tích mẫu thực phẩm rắn Cách tiến hành Phương pháp đo độ đục Ngoài phương pháp nêu trên, mật độ vi sinh vật đươc xác định cách gián tiếp thông qua đo độ đục pha lỏng có chứa nhiều phần tử không tan hình thành hệ huyền phù có độ đục phần tử diện môi trường lỏng cản ánh sáng, làm phân tán chùm ánh sáng tới… ƯU NHƯỢC ĐIỂM: - Ưu điểm: Phương pháp cho kết nhanh thường ứng dụng theo dõi nghiên cứu đặc trung tăng trưởng chủng vi sinh vật phòng thí nghiệm sản xuất - Nhược điểm: không thích hợp cho ứng dụng kiểm nghiệm vi sinh vật 5.Phương pháp MPN  Phương pháp dựa nguyên tắc xác suất thống kê phân bố vsv độ pha loãng khác mẫu Hay nói phương pháp đánh giá số lượng vi sinh vật có xác xuất lớn diện đơn vị thể tích  Phương pháp dùng để định lượng nhóm vi sinh vật nuôi cấy môi trường lỏng chọn lọc cho kết biểu kiến thích hợp  Quy trình thực hiện phương pháp này sau: -Cho vào ống nghiệm có chứa môi trường thích hợp cho tăng trưởng đối tượng vi sinh vật cần định lượng thể tích xác định dung dịch mẫu nhiều nồng độ pha loãng liên tiếp -Ủ nhiệt độ thời gian thích hợp -Dựa vào kết biểu kiến chứng minh tăng trưởng vi sinh vật cần kiểm định ống nghiệm (ghi nhận số lượng số lượng độ pha loãng) -Sử dụng số liệu dựa vào bảng Mac Crady, suy mật độ vi sinh vật trình bày dạng số MPN/100ml hay số MPN/1g mẫu III Nhận xét:  Phương pháp định tính phương pháp quan trọng, lĩnh vực y học như: xét nghiệm, điều chế kháng sinh  Phương pháp định lượng phổ biến thí nghiệm, kiểm nghiệm chất lượng thực phẩm môi trường… IV Kết luận  Ta áp dụng phương pháp định tính định lượng để ứng dụng triệt để vào nghiên cứu, giúp dễ dàng nhận biết nguyên nhân gây bệnh, biến đổi môi trường, tích tụ độc tố thực phẩm, phát triển thêm loại vắc xin phòng bệnh…  Cả phương pháp định lượng định tính thiết thực quan trọng đời sống người Cảm ơn thầy bạn ý lắng nghe!! ... vi sinh vật mẫu hay không  Phương pháp định lượng phương pháp xác định số lượng vi sinh vật mẫu II Phân tích: A PHÂN TÍCH PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH -Mẫu -BGBL -EMB -Nghiệm pháp IMViC phù hợp Vi. .. loãng khác mẫu Hay nói phương pháp đánh giá số lượng vi sinh vật có xác xuất lớn diện đơn vị thể tích  Phương pháp dùng để định lượng nhóm vi sinh vật nuôi cấy môi trường lỏng chọn lọc cho kết... điểm: cho phép xác định nhanh chóng số lượng vi sinh vật có mẫu  Nhược điểm: • Không phân biệt tế bào sống chết mẫu • Không phân biệt tế bào vi sinh vật vật thể • Hạn chế huyền phù có mật độ