ĐẠI CƯƠNG về sắc ký Trình chiếu

Sắc ký là quá trình tách dựa trên sự phân bố liên tục của các cấu tử chất phân tích trên 2 pha: Một pha thường đứng yên, có khả năng hấp thu chất phân tích gọi là pha tĩnh, một pha di chuyển qua pha tĩnh gọi là pha động. Do các cấu tử chất phân tích có ái lực khác nhau với pha tĩnh, chúng di chuyển với tốc độ khác nhau và tách ra khỏi nhau.

ĐẠI CƯƠNG VỀ SẮC KÝ Nội dung Các khái niệm Phân loại Thành phần, thông số đặc trưng, lực liên kết Pic sắc ký sắc đồ Đĩa lý thuyết phương trình vandemter Ứng dụng ĐẠI CƯƠNG VỀ SẮC KÝ I Khái niệm Sắc ký trình tách dựa phân bố liên tục cấu tử chất phân tích pha: Một pha thường đứng yên, có khả hấp thu chất phân tích gọi pha tĩnh, pha di chuyển qua pha tĩnh gọi pha động Do cấu tử chất phân tích có lực khác với pha tĩnh, chúng di chuyển với tốc độ khác tách khỏi Quá trình tách sắc ký cột chất A B THỨ TỰ RA KHỎI CỘT  Hợp chất có lực nhiều với pha động có xu hướng khỏi cột trước  Hợp chất có lực nhiều với pha tĩnh bị giữ lại lâu cột sau SẮC KÝ ĐỒ II PHÂN LOẠI II.1 Phân loại theo trạng thái pha động pha tĩnh Độ phân giải Đây đại lượng biểu thị rõ ba khả cột sắc ký: giải hấp, chọn lọc hiệu tách Phương trình Vandemter Phương trình mô tả ảnh hưởng tốc độ dòng pha động đến hiệu tách B H = A + + Cu u Trong đó: A hệ số khuyêch tán xoáy B hệ số khuyếch tán dọc theo cột C hệ số truyền khối Nếu H có đơn vị cm A cm, B cm2/s ; C s Hiệu cột cao H nhỏ tương ứng tốc độ tối ưu B u= C VI ỨNG DỤNG CỦA SẮC KÝ Định tính PHƯƠNG PHÁP ĐƯỜNG CHUẨN Nồng độ (ppb) 20 50 100 200 500 1000 1500 Diện tích (mAu) 1818155 4323952 8848970 17287122 38708909 75531554 95077738 PHƯƠNG PHÁP THÊM CHUẨN Tên hoạt chất 400000 350000 S (mAu.s) 300000 200000 Y=A+B*X Thong so Gia tri Sai so A 201954,33333 2310,60358 B 94320 1789,78583 - -2,0 -1,5 -1,0 200921 298341 389561 478932 Cx Cs C2 C3 2,14 3,18 150000 50000 -2,5 Diện tích S (mAu.s) 250000 100000 -3,0 ∆C -0,5 0,0 CPEN (mg/l) 0,5 1,0 1,5 2,0 PEN G 4,15 5,17 PHƯƠNG PHÁP NỘI CHUẨN Không có mặt mẫu (mà phải thêm vào) - Tín hiệu phân tích nội chuẩn phân biệt rõ với chất phân tích tạp chất khác mẫu - Thời gian lưu gần với chất phân tích tốt - Lượng nội chuẩn tất dung dịch chuẩn mẫu - Nồng độ nội chuẩn nên có để tín hiệu phân tích nằm khoảng 1/3 đường chuẩn chất phân tích PHƯƠNG PHÁP CHUẨN HÓA DIỆN TÍCH BÀI TẬP 1) Cho chất có thời gian lưu tR1=1,43, tR2= 4,5 bề rộng đáy Wb1=0,1; Wb2 = 0,3 Tính số đĩa lý thuyết ứng với chất 2) Mội cặp peak có độ chọn lọc a = 1,1 hệ số phân giải Rs=1, hệ số chứa K’2=0,5 Tính số đĩa lý thuyết N? 3) Một hỗn hợp gồm chất có hệ số chứa K’1= 2,58 K’2=2,64 Tính hệ số chọn lọc α? 3) Một hệ thống sắc ký lỏng hoạt động với thông số sau: Chiều dài phần cột nhồi pha tĩnh: 25,2 cm Tốc độ dòng: 0,312ml/ph, Thể tích pha động: V M=1,4ml, Thể tích pha tĩnh: Vs=0,168ml Sau cho qua cột chứa cấu tử AB ta sắc ký đồ với liệu sau: tM = 1,2ph; thời gian lưu A B 12,5 13,8ph, chiều rộng chân peak A B 1,34 1,44ph Hãy tính: N, H, K, K’, Rs, a ... Thành phần, thông số đặc trưng, lực liên kết Pic sắc ký sắc đồ Đĩa lý thuyết phương trình vandemter Ứng dụng ĐẠI CƯƠNG VỀ SẮC KÝ I Khái niệm Sắc ký trình tách dựa phân bố liên tục cấu tử chất phân... trị lớn hay nhỏ tác động đến trình tách sắc ký IV PIC SẮC KÝ VÀ SẮC ĐỒ  Hình dáng pic sắc ký Tính cân đối pic sắc ký AF b AF = a 0,9 < AF