KHẢO sát một số PHƯƠNG PHÁP tạo hạt ỨNG DỤNG TRONG điều CHẾ VI hạt CHỨA CURCUMIN

WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN PHAN THANH SANG HUỲNH TRỌNG NGUYỄN KHẢO SÁT MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP TẠO HẠT ỨNG DỤNG TRONG ĐIỀU CHẾ VI HẠT CHỨA CURCUMIN LUẬN VẶN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH HỐ HỌC 2014 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN PHAN THANH SANG HUỲNH TRỌNG NGUYỄN KHẢO SÁT MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP TẠO HẠT ỨNG DỤNG TRONG ĐIỀU CHẾ VI HẠT CHỨA CURCUMIN LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH HOÁ HỌC CÁN BỘ HƯỚNG DẪN Ts LÊ THANH PHƯỚC 2014 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Trường Đại học Cần Thơ CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Khoa Khoa học Tự nhiên Độc lập – Tự – Hạnh phúc Bộ mơn Hố học NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN Cán hướng dẫn: TS Lê Thanh Phước Tên đề tài: Khảo sát số phương pháp tạo hạt ứng dụng điều chế vi hạt chứa Curcumin Sinh viên thực hiện: Phan Thanh Sang Huỳnh Trọng Nguyễn Nội dung nhận xét: MSSV: 2112083 Lớp: Hoá dược- Khoá 37 MSSV: 2112060 Lớp: Hố dược- Khố 37  Nhận xét hình thức luận văn tốt nghiệp: …………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………  Nhận xét nội dung luận văn tốt nghiệp Đánh giá nội dung thực đề tài: …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… Những vấn đề hạn chế: …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… Nhận xét sinh viên thực đề tài: …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… Kết luận, kiến nghị điểm: …… ……………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………… Cần Thơ, ngày ….tháng … năm … Cán hướng dẫn Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Trường Đại học Cần Thơ CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Khoa Khoa học Tự nhiên Độc lập – Tự – Hạnh phúc Bộ mơn Hố học NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN Cán hướng dẫn: TS Lê Thanh Phước Tên đề tài: Khảo sát số phương pháp tạo hạt ứng dụng điều chế vi hạt chứa Curcumin Sinh viên thực hiện: Phan Thanh Sang MSSV: 2112083 Lớp: Hoá dược- Khoá 37 Huỳnh Trọng Nguyễn MSSV: 2112060 Lớp: Hoá dược- Khoá 37 Nội dung nhận xét:  Nhận xét hình thức luận văn tốt nghiệp: …………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………  Nhận xét nội dung luận văn tốt nghiệp: Đánh giá nội dung thực đề tài: …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… Những vấn đề hạn chế: …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… Nhận xét sinh viên thực đề tài: …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… Kết luận, kiến nghị điểm: …………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………… Cần Thơ, ngày ….tháng … năm … Cán phản biện Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON LỜI CẢM ƠN - Khoảng thời gian thực đề tài tốt nghiệp vừa qua chúng em chuỗi ngày vơ q giá Đó tháng ngày chúng em sống với đam mê hồi bão mình, trao dồi học hỏi kiến thức, kinh nghiệm quý báu Để hoàn thành đề tài tốt nghiệp chúng em nhận giúp đỡ, động viên to lớn từ thầy cơ, gia đình, bạn bè giúp đỡ nhiều anh chị khác Qua em xin gửi lời cám ơn chân thành sâu sắc đến: Thầy Lê Thanh Phước, thầy giúp đỡ, quan tâm, chăm lo tạo điều kiện thuận lợi để chúng em hồn thành tốt luận văn Chúng em vô biết ơn thầy kiến thức, kinh nghiệm học quý báu không lĩnh vực chuyên môn mà cách làm người mà thầy truyền đạt Chúng em ghi nhớ điều mà thầy dạy bảo cho chúng em Chúng em chân thành cảm ơn thầy Tất quý thầy cô thuộc môn Hoá học khoa Khoa học Tự nhiên thầy cô thuộc môn, khoa viện khác tận tình giúp đỡ để chúng em hồn thành tốt luận văn Gia đình, bạn bè anh chị, người theo sát, ủng hộ, giúp đỡ động viên chúng em nhiều tháng ngày vừa qua Chúng em xin chân thành cảm ơn tất người Cần Thơ, ngày … tháng … năm… Phan Thanh Sang Huỳnh Trọng Nguyễn I Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON TÓM TẮT Curcumin hợp chất polyphenol tự nhiên có trọng lượng phân tử thấp tìm thấy chủ yếu củ loài Curcuma longa L (cây nghệ vàng) vốn biết đến với nhiều hoạt tính sinh học chống ung thư, chống HIV, chống bệnh tiểu đường, Tuy nhiên, ứng dụng thực tế curcumin cịn hạn chế tính tan nước, bền môi trường kiềm… Trong nghiên cứu này, sử dụng số phương pháp tạo nhũ nhiều lớp, hạt nano lipid rắn để điều chế hạt nanocurcumin Sự thay đổi loại PEG, chất béo, tỷ lệ pha dầu pha nước, thời gian tốc độ ly tâm khảo sát Các hạt nhũ tương có hình dạng hình cầu với kích thước hạt trung bình 200 nm-1m Kích thước sản phẩm kiểm tra kính hiển vi SEM Từ khóa: Nanocurcumin, nhũ tương nhiều lớp, SLNs, Curcuma longa L II Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON ABSTRACT Curcumin, a low-molecular-weight natural polyphenol mainly found in the root of Curcuma longa L (turmeric) is known that have a lot of bioactivities such as anticancer, anti-HIV, anti-diabetes, However, the application of curcumin was limited owing to its water insolubility, instability in high pH… In this study, we use some methods such as multiple emulsion, solid lipid nanoparticles to make the micro, nanocurcumin particle The charged of PEG, solid lipid, water phase to oil phase ratio, time and rate of centrifuging were investigated The particle in the emulsion are essentially spherical with average particle size of 200 nm-1m The size of product was checked by microscope and SEM Key words: Nanocurcumin, multiple emulsion, SLNs, Curcuma longa L III Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN Năm học 2014 - 2015 Đề tài: KHẢO SÁT MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP TẠO HẠT ỨNG DỤNG TRONG ĐIỀU CHẾ VI HẠT CHỨA CURCUMIN LỜI CAM ĐOAN Chúng xin cam đoan luận văn hoàn thành dựa kết nghiên cứu kết nghiên cứu chưa dùng cho luận văn cấp khác, ý tưởng tham khảo kết trích dẫn từ cơng trình khác nêu rõ luận văn Cần Thơ, ngày … tháng … năm 2014 Luận văn tốt nghiệp đại học ngành hoá học Đã bảo vệ duyệt Hiệu trưởng …………………………………………… Trưởng khoa …………………………………………… Cán hướng dẫn Ts Lê Thanh Phước Sinh viên thực Phan Thanh Sang Huỳnh Trọng Nguyễn IV Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT ii ABSTRACT iii LỜI CAM ĐOAN iv MỤC LỤC v DANH MỤC BẢNG viii DANH MỤC HÌNH ẢNH ix DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT xi CHƯƠNG GIỚI THIỆU 1.1 Tổng quan đề tài 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Nội dung nghiên cứu CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan nghệ vàng curcumin 2.1.1 Giới thiệu nghệ vàng 2.1.2 Tổng quan curcumin hợp chất curcuminoid 2.2 Nhũ Tương 15 2.2.1 Khái niệm, thành phần, phương pháp 15 2.2.2 Phân loại 15 2.2.3 Ứng dụng nhũ tương 17 2.3 Tổng quan phương pháp chiết Shoxlet 18 2.3.1 Thiết bị 18 2.3.2 Cơ chế hoạt động 19 2.3.3 Ưu điểm nhược điểm 19 2.4 Tổng quan SLN (Solid Lipid Nanoparticles) 20 2.4.1 Giới thiệu 20 V Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON 2.4.2 Ưu điểm nhược điểm kỹ thuật SLN 21 2.4.3 Mục tiêu nghiên cứu SLN 21 2.4.4 Phương pháp điều chế 21 2.5 Chỉ số HLB 22 2.5.1 Khái niệm số HLB 22 2.5.2 Tính tốn số HLB cho hỗn hợp chất nhũ hóa 23 2.6 Một số nghiên cứu thực công bố 24 2.6.1 Nghiên cứu nước 24 2.6.2 Nghiên cứu giới 25 CHƯƠNG 27 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 3.1 Phương tiện nghiên cứu 27 3.1.1 Thời gian địa điểm thực đề tài 27 3.1.2 Hoá chất, nguyên liệu, vật liệu 27 3.1.3 Thiết bị, dụng cụ 28 3.1.4 Phương pháp phân tích kết 28 3.2 Giới thiệu sơ lược số thiết bị sử dụng 29 3.2.1 Kính hiển vi điện tử quét (SEM) 29 3.2.2 Kính hiển vi 30 3.3 Phương pháp nghiên cứu 31 3.3.1 Tách chiết Curcumin từ củ nghệ 31 3.3.2 Xác định độ tan curcumin số dung môi thông dụng 32 3.3.2 Chế tạo hạt chứa Curcumin thông qua tạo nhũ hai lớp 33 3.3.3 Chế tạo vi hạt thông qua phương pháp SLN 34 CHƯƠNG 36 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 36 4.1 Kết 36 4.1.1 Tách chiết tinh chế curcumin từ củ nghệ 36 4.1.2 Khảo sát chế tạo vi hạt chứa curcumin thông qua tạo nhũ hai lớp 39 4.1.3 Khảo sát chế tạo vi hạt chứa curcumin thông qua phương pháp SLN 46 CHƯƠNG 54 VI Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Hình 4.5 Dung dịch (1) (4) khơng đạt, khảo sát thời gian phân tán sóng siêu âm 4.1.2.3 Khảo sát nồng độ Curcumin, tỷ lệ pha, thời gian ly tâm Trong thí nghiệm này, đồng thời khảo sát thông số bao gồm: nồng độ curcumin, tỷ lệ nhũ (I) pha dầu (2), thời gian ly tâm Các thông số cố định bao gồm: - Loại chất mang: PEG 4.000 Tỷ lệ pha dầu pha nước: 1:4 Thời gian phân tán sóng siêu âm: phút Tốc độ ly tâm: 10.000 vóng/phút Kết thí nghiệm trình bày bảng bên Mẫu Nồng độ Tỉ lệ nhũ Thời gian ly Thời gian ly Thời gian ly curcumin pha dầu tâm phút tâm 10 phút tâm 20 phút 1% 1:20 X X O 5% 1:20 X X V 10% 1:20 X X V 1% 1:30 X O O 5% 1:30 X O O 10% 1:30 X O O 1% 1:40 X O O 5% 1:40 X V V 10% 1:40 X V V Bảng 4.6 Kết khảo sát số thơng số q trình tạo hạt 42 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM Lưu ý: O: Tách WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON X: Không tách V: Xuất curcumin Loại bỏ mẫu có xuất curcumin hạt tạo thành không bền vững, tiến hành kiểm tra hạt dung dịch hạt kính hiển vi có độ phóng đại X400 43 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM Mẫu WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Hình ảnh Kết (1) Có xuất hạt có kích thước từ 0.25-0.5 mm thang đo trắc vi, song kích thước hạt khơng đồng ghi nhận thiết bị thông thường (4) Phát tồn hạt nhỏ với kích thước nhỏ 0.25 mm thang đo trắc vi (nhỏ m kích thước thật) song khơng thể chụp ảnh thiết bị thông thường hạn chế độ phân giải Kích thước hạt khơng đồng nhất, có kích thước từ 0.25-1mm thang đo trắc vi, xảy tượng bết dính hạt (5) (6) Các hạt có kích thước lớn từ 0.5-2 mm thang đo trắc vi, hình dạng hạt khơng đồng (7) Kích thước hạt khơng ghi nhận kính hiển vi, xuất bết dính thành mảng lớn Bảng 4.7 Kết khảo sát số thơng số q trình tạo hạt kính hiển vi Các mẫu (5), (6), (7) có tồn hạt bé (có thể đạt kích thước vài trăm nm hay nhỏ hơn) song lại xảy tượng bết dính hạt tạo thành khối hạt lớn nên khơng thoả theo điều kiện thí nghiệm Mẫu (1), hạt đơn lẻ nhiên kích thước hạt lại nằm khoảng vài m lớn so với mẫu (4) nên tiến hành ghi nhận kết SEM mẫu (4) Kết chụp SEM dung dịch (4): 44 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Hình 4.6 Kết SEM dung dịch nhũ (4) Ở độ phóng đại 1.700 lần cho thấy xuất hạt có kích thước bé m Khi phóng đại hình ảnh lên mức 2.700 lần, hạt tồn hầu hết kích thước trung bình từ 400-800 nm, cá biệt có hạt có kích thước bé 200 nm nhiên lượng hạt có kích thước tương đối Kết chụp SEM hạt tách từ dung dịch (4): Hình 4.7 Kết SEM hạt tách từ dung dịch nhũ (4) Ở mức phóng đại 1.700 lần, nhận thấy tồn chủ yếu hạt có kích thước bé m, nhiên có bết dính hạt tạo nên khối hạt kích thước lớn Ở độ phóng đại 2.700 lần cho thấy xác tồn tiểu phân có kích thước từ 200 nm đến 800 nm, nhiên hạt không tồn dạng hạt riêng rẻ mà gắn kết với tạo thành khối hạt Vậy bản, việc tạo hạt kỹ thuật tạo nhũ hai lớp thực thành cơng, phương pháp tạo hạt có kích thước nằm khoảng từ 200 nm đến 800 nm với thông số sau: - Nồng độ Curcumin: 1% - Tỷ lệ chất nhũ hoá: 5% - Loại PEG: PEG 4000 - Tỷ lệ pha dầu (2) nhũ (I): 40:1 45 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON - Thời gian phân tán siêu âm: phút - Thời gian ly tâm: 20 phút - Tốc độ ly tâm: 10.000 rpm 4.1.3 Khảo sát chế tạo vi hạt chứa curcumin thông qua phương pháp SLN 4.1.3.1 Khảo sát chế tạo hạt với chất béo bơ cacao a Một số thông số thử nghiệm - Chỉ số HLB yêu cầu bơ cacao - Tỉ lệ chất nhũ hoá: Tween 80 17%, Span 80 83% - Dung môi: Ea - Khối lượng Curcumin: 0,2 g - Khối lượng bơ Cacao: 0,78 g - Khối lượng nước: tùy theo tỷ lệ khảo sát - Phương pháp phân tán: phân tán sóng siêu âm - Thời gian phân tán: phút b Kết thử nghiệm Khảo sát nồng độ chất nhũ hố: thơng số thí nghiệm giữ cố định, tỉ lệ hai pha dầu: nước thử nghiệm 1:40 Kết trình tạo nhũ xác định thông qua việc hai pha có phân tán tốt vào hay khơng Mẫu Nồng độ chất nhũ hóa Kết 2% Dung dịch tách lớp 4% Dung dịch đồng 6% Dung dịch đồng Bảng 4.8 Kết khảo sát nồng độ chất nhũ hoá với chất béo bơ Cacao Khảo sát tỷ lệ pha dầu pha nước: thơng số thí nghiệm giữ tương tự thí nghiệm cố định tỷ lệ chất nhũ hoá 4% thay đổi tỷ lệ hai pha dầu nước 46 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON STT mẫu Tỷ lệ pha dầu: Pha nước Kết 1’ 1:20 Dung dịch đồng 2’ 1:40 Dung dịch đồng 3’ 1:60 Dung dịch đồng Bảng 4.9 Kết khảo sát tỷ lệ pha nươc pha dầu với chất béo bơ Cacao Các dung dịch nhũ giữ nhiệt độ phòng 24 giờ, tiến hành ly tâm tách lấy phần rắn phía Khối rắn thu bị chảy lỏng nhiệt độ phịng Do chất béo bơ Cacao không phù hợp với thử nghiệm 4.1.3.2 Khảo sát chế tạo hạt với chất béo sáp ong a Một số thông số thử nghiệm - Chỉ số HLB yêu cầu: 12 - Tỷ lệ chất nhũ hoá: Tween 80 72% Span 80 28% - Dung môi: Ea - Khối lượng Curcumin: 0,04 g - Khối lượng sáp ong: 0.36 g - Khối lượng nước: tuỳ theo tỷ lệ khảo sát - Phương pháp phân tán: khuấy từ kết hợp gia nhiệt - Tốc độ khuấy: 600 rpm - Thời gian khuấy: 45 phút - Nhiệt độ khuấy: 65oC b Kết thử nghiệm Khảo sát nồng độ chất nhũ hố: thơng số thử nghiệm giữ cố định trên, tỷ lệ pha dầu pha nước giữ 1:100 Thay đổi tỷ lệ chất nhũ hoá tiến hành thực nghiệm 47 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM Mẫu WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Tỷ lệ pha dầu: Nồng độ chất nhũ Kết pha nước hóa 1:100 8% Dung dịch suốt 1:100 7% Dung dịch suốt 1:100 6% Dung dịch suốt Bảng 4.10 Kết khảo sát nồng độ chất nhũ hoá với chất béo sáp ong Cả dung dịch tiến hành ly tâm với tốc độ 5000 rpm 45 phút Kết dung dịch (3) có xuất phần tử lơ lửng không tách khỏi dung dịch được, riêng hai dung dịch (1) (2) hồn tồn khơng có tượng khác biệt so với dung dịch ban đầu Vậy với tỷ lệ chất nhũ hoá 6% phù hợp Ta tiến hành khảo sát tỷ lệ hai pha dầu nước để thu hạt có kích thước tốt Khảo sát tỷ lệ pha dầu pha nước: tiến hành khảo sát tỷ lệ hai pha dầu nước với thông số cố định tương tự thử nghiệm tỷ lệ chất nhũ hoá 6% Mẫu Tỷ lệ pha dầu: pha nước Nồng độ chất nhũ hóa 1’ 2’ 3’ 1:100 1:80 1:60 6% 6% 6% Bảng 4.11 Kết khảo sát tỷ lệ pha nươc pha dầu với chất béo sáp ong Các mẫu thử nghiệm có độ giảm dần theo thứ tự (1’), (2’), (3’) Ly tâm dung dịch với tốc độ 5000 rpm 45 phút Dung dịch (1’), (2’) xuất phần tử lơ lửng không cô lập Ở dung dịch (3’) xuất mảng hạt phần ống ly tâm lập Vậy với tỷ lệ pha dầu pha nước 1:60 nồng độ chất nhũ hoá 6%, hiệu tạo hạt tách hạt sáp ong tối ưu 48 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Hình 4.8 Mẫu thử nghiệm với chất béo sáp ong c Xác định kích thước hạt nhũ tạo thành Sau tách hạt nhũ khỏi dung dịch, tiến hành kiểm tra kích thước hạt với hệ thống kính hiển vi quét thu hình ảnh sau: Hình 4.9 Kết SEM hạt nhũ với chất béo sáp ong Từ hình ảnh ghi nhận được, nhận thấy có diện hạt có kích thước từ 0,2 đến 1,5 m, có xảy tượng bết dích hạt kích thước nhỏ để tạo thành hạt có kích thước lớn Vậy với chất béo sáp ong thành công việc chế tạo vi hạt chứa curcumin vơi kích thước bé 1,5 m với thông số sau: - Tỷ lệ chất nhũ hoá: Tween 80 72% Span 80 28% - Tỷ lệ chất nhũ hoá: 4% - Dung môi: Ea - Khối lượng Curcumin: 0,04 g - Khối lượng sáp ong: 0.36 g - Tỷ lệ pha dầu pha nước: 1:60 - Phương pháp phân tán: khuấy từ kết hợp gia nhiệt 49 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON - Tốc độ khuấy: 600 rpm - Thời gian khuấy: 45 phút - Nhiệt độ khuấy: 65oC 4.1.3.3 Khảo sát trình chế tạo hạt với chất béo sáp đậu nành a Một số thông số thử nghiệm Trong thử nghiệm với chất béo rắn sáp đậu nành, số HLB yêu cầu nguyên liệu không xác định thơng qua tài liệu Nhưng dựa đặc tính chung loại sáp số HLB yêu cầu thường nằm khoảng 10 đến 12 nên đề tài tiến hành thử nghiệm với giá trị HLB yêu cầu 12 - Chỉ số HLB yêu cầu: 12 - Tỷ lệ chất nhũ hoá: Tween 80 72% Span 80 18% - Dung môi: Ea - Khối lượng Curcumin: 0,04 g - Khối lượng sáp đậu nành: 0,36 g - Khối lượng nước: tuỳ theo tỷ lệ khảo sát - Phương pháp phân tán: khuấy từ kết hợp gia nhiệt - Tốc độ khuấy: 600 rpm - Thời gian khuấy: 45 phút - Nhiệt độ khuấy: 65oC b Kết thử nghiệm Khảo sát nồng độ chất nhũ hố: thơng số thử nghiệm giữ cố định viết phía trên, tỷ lệ pha dầu pha nước giữ tỷ lệ 1:100 Thay đổi tỷ lệ chất nhũ hoá tiến hành thực nghiệm 50 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Mẫu Tỷ lệ pha dầu: pha nước Nồng độ chất nhũ hóa Kết 1:100 8% Dung dịch suốt 1:100 7% Dung dịch suốt 1:100 6% Dung dịch suốt 1:100 5% Dung dịch suốt 1:100 4% Dung dịch tương đối suốt Bảng 4.12 Kết khảo sát nồng độ chất nhũ hoá với chất béo sáp đạu nành Độ mẫu thử nghiệm giảm dần theo nồng độ chất nhũ hoá tương đối rõ mẫu số (5) Tương tự khảo sát thực trên, dung dịch (1), (2), (3), (4) sử dụng biện pháp ly tâm để tách riêng hạt nhũ Mẫu số (5) ly tâm cho thấy có khác biệt hai phần dung dịch tách riêng Lựa chọn tỷ lệ chất nhũ hoá cho thử nghiệm sau 4%, tiến hành thử nghiệm thay đổi tỷ lệ hai pha dầu: nước Khảo sát tỷ lệ pha dầu pha nước: với tỷ lệ pha dầu pha nước 1:100 trên, hạt tạo thành tách Đề tài tiến hành khảo sát tỷ lệ hai pha dầu nước với thông số cố định tương tự thử nghiệm tỷ lệ chất nhũ hoá 4% Mẫu Tỷ lệ pha dầu: pha nước Nồng độ chất nhũ hóa Kết 1’ 2’ 3’ 1:100 1:80 1:60 4% 4% 4% Dung dịch suốt Dung dịch vẩn đục Dung dịch vẩn đục Bảng 4.13 Kết khảo sát tỷ lệ pha nươc pha dầu với chất béo sáp đậu nành Tiến hành ly tâm dung dịch trên, dung dịch (3’) có xuất phần tử kết thành khối, lên phía dung dịch, cịn dung dịch (1’) (2’) khơng 51 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON thấy tượng Gạn lấy phần dung (3’) tiến hành xác định kích thước tiểu phân khối hạt phương pháp SEM Hình 4.10 Mẫu thử nghiệm với chất béo sáp đậu nành c Xác định kích thước hạt nhũ tạo thành Phần vật chất thu từ mẫu (3’) tiến hành ghi nhận hình ảnh bề mặt (nhằm xác định kích thước) SEM Kết hình ảnh thu sau: Hình 4.11 Kết SEM hạt nhũ với chất béo sáp đậu nành Ở độ phóng đại 6.500 lần, khơng thấy tồn tiểu phân dạng hạt mà thay vào khối có hình dạng khơng xác định Tuy nhiên nâng độ phóng đại lên thành 11.000 lần cho thấy có tồn tiểu phân dạng hạt có kích thước bé 100 nm, tiểu phân tập hợp thành khối giữ cấu trúc tiểu phân Vậy với phương pháp sử dụng chất béo sáp đậu nành, đề tài chế tạo thành công hạt nanocurcumin có kích thước khoảng 100 nm với thơng số sau: - Tỷ lệ chất nhũ hoá: Tween 80 72% Span 80 28% - Nồng độ chất nhũ hố: 4% - Dung mơi: Ea 52 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON - Khối lượng Curcumin: 0,04 g - Khối lượng sáp đậu nành: 0,36 g - Tỷ lệ pha dầu pha nước: 1:60 - Phương pháp phân tán: khuấy từ kết hợp gia nhiệt - Tốc độ khuấy: 600 rpm - Thời gian khuấy: 45 phút - Nhiệt độ khuấy: 65oC 53 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Sau tháng thực hiện, đề tài hoàn thành mục tiêu đề sau: - Tách chiết tinh chế thành công curcumin từ củ nghệ tươi Chế tạo thành công hạt nanocurcumin hai phương pháp Kích thước sản phẩm kiểm tra kính hiển vi kính hiển vi điện tử quét 5.1 Kiến nghị Do hạn chế thời gian trang thiết bị nên đề tài chưa thể khảo sát hết tất yếu tố ảnh hưởng đến trình tạo hạt chưa thực nghiên cứu chuyên sâu hơn, nhóm thực đề tài xin đưa số kiến nghị: - Tiếp tục nghiên cứu khảo sát phương pháp tạo hạt khác nhằm tìm kiếm phương pháp tối ưu Nghiên cứu yếu tố khác ảnh hưởng đến trình tạo hạt nhiệt độ, loại dung mơi, chất nhũ hố, tỷ lệ chất nhũ hố… Mở rộng tìm kiếm khảo sát số loại chất mang khác có giá thành thấp nhằm mang đến giá trị thương mại cho sản phẩm Từ hạt chứa curcumin thu tiến hành chế tạo thành dạng chế phẩm kem thoa, viên nén, dung dịch uống, Tiến hành thử nghiệm sinh học để đánh giá xác hiệu sản phẩm so với cách dùng nghệ truyền thống 54 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] P T H Anh, "NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH TÁCH CHIẾT, TỔNG HỢP DẪN XUẤT VÀ XÁC ĐỊNH TÍNH CHẤT, HOẠT TÍNH CỦA TINH DẦU VÀ CURCUMIN TỪ CÂY NGHỆ VÀNG (CURCUMA LONG L.) BÌNH DƯƠNG," Đại học Bách khoa TP Hồ Chí Minh, Hồ Chí Minh, 2013 [2] N T M Phượng, "Tách tinh chế dẫn xuất curcumin trích ly từ củ nghệ vàng (Curcuma longa L.)," Hồ Chí Minh, 2008 [3] http://rcmp.org.vn/chi-tiet-bai-viet/198/cay-nghe.html [4] W Y G D P W P Y a B B A Shiyou Li, "Chemical Composition and Product Quality Control of Turmeric (Curcuma longa L.)," Pharmaceutical Crops, vol 2, pp 28-54, 2011 [5] M S.-U A A U K H A N H A B D U L M E & A M Akram, "Curcuma longa and Curcumin: A Review article," Romanian Journal of Biology, vol 55, pp 65-70, 2010 [6] J a E Hardcastle, A study of the curcumin method for boron determination, 1960 [7] D Frawley, "Nanotechnology-Enhanced Curcumin: Symbiosis of Ancient Wisdom of East with Modern Medical Science," Nanotech insights, pp 17-27 [8] Y F S O a H I Songyot Anuchapreeda, "Preparation of Lipid Nanoemulsions Incorporating Curcumin for Cancer Therapy," Journal of Nanotechnology, pp 1-11, 2012 [9] G G a P Ślifirski, "Curcumin and curcuminoids in quest for medicinal status," Biochimica Polonica, vol 59, no 2, pp 201-212, 2012 [10] N K P Phụng, Phương pháp cô lập hợp chất thiên nhiên, Hồ Chí Minh: Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh, 2007 [11] M K W a S H K Ajay Thakur, "NANOEMULSION IN ENHANCEMENT OF BIOAVAILABILITY OF POORLY SOLUBLE DRUGS: A REVIEW," Pharmacophore, vol 4, no 1, pp 15-25, 2013 [12] B R a K I Pal, "A Method to Prepare Solid Lipid Nanoparticles with Improved Entrapment Efficiency of Hydrophilic Drugs," Current Nanoscience, vol 9, pp 1-10, 2013 55 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON [13] A A H S a K P P EKAMBARAM, "SOLID LIPID NANOPARTICLES: A REVIEW," Scientific Review and Chemical Communications, vol 2, no 1, pp 80-102, 2011 [14] R H K M a S G " l n ( f c d d r o t s o t a E j o p a b ( 1.-1 MuÈller [15] W a K M " l n p c a a A d d r ( 1.-1 Mehnert [16] Emulsions and the HLB System, Orono: Convergent Cosmetics [17] The HLB SYSTEM a time-saving guide to emulsifier selection, ICI Americas, 176 [18] T Q HUY, "NGHIÊN CỨU TRÍCH LY HỢP CHẤT CURCUMIN TRONG CỦ NGHỆ VÀNG Ở HUYỆN KRÔNG BÔNG, TỈNH ĐĂK LĂK," ĐÀ NẴNG, 2012 [19] T C a W T Nataporn, "nanoencapsulation of Curcumin in Biodegradable Chitosan via Multiple Emulsion/ solvent Evaporation," International Journal of Pharmaceutics, vol 347, pp 93-101, 2008 [20] "Curcuma Longa," in Alternative Medicine Review Monographs, Thorne Research, 2002, pp 119-125 [21] B B A K a A C B Aggarwal, "Anticancer potential of curcumin: preclinical and clinical studies.," Anticancer Res, vol 23, pp 363-398, 2003 [22] http://ducthe.wordpress.com/2010/01/04/sem/ [23] M Abramowitz, Microscope Basics and Beyond, New York: Olympus America Inc., Scientific Equipment Division, 2003 [24] V a Y R Pongrakhananon, "Anticancer Properties of Curcumin," in Cancer Treatment, Open Access Publisher, 2011, pp 345-366 [25] "Isolation, Purification and Identification of Curcuminoids from Turmeric (Curcuma longaL.) by Column Chromatography," Journal of experimental sciences, vol 2, no 7, pp 21-25, 2011 [26] J Anthony J O'Lenick, Three Dimensional HLB 56 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM ... 36 4.1.2 Khảo sát chế tạo vi hạt chứa curcumin thông qua tạo nhũ hai lớp 39 4.1.3 Khảo sát chế tạo vi hạt chứa curcumin thông qua phương pháp SLN 46 CHƯƠNG 54 VI Đóng góp... hạt ứng dụng chế tạo vi hạt curcumin? ?? đời 1.2 Mục tiêu nghiên cứu Mục tiêu đề tài khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến q trình tạo hạt, kích cỡ hạt, độ bền hạt? ?? góp phần nghiên cứu khả chế tạo vi hạt curcumin. .. THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN PHAN THANH SANG HUỲNH TRỌNG NGUYỄN KHẢO SÁT MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP TẠO HẠT ỨNG DỤNG TRONG ĐIỀU CHẾ VI HẠT CHỨA CURCUMIN LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH HOÁ HỌC CÁN BỘ HƯỚNG