Tiêu chuẩn này qui định phương pháp định tính axit boric và muối borat trong sản phẩm thủy sản. Giới hạn phát hiện của phương pháp là 0,1 % khối lượng. 2. Nguyên tắc Mẫu sản phẩm thủy sản được chiết thử sơ bộ bằng dung dịch nước hoặc thử xác nhận bằng than hoá trước khi chiết. Axit boric và muối borat có trong dịch chiết đã được axít hoá tác dụng với curcumin trên giấy nghệ tạo thành phức màu cam đỏ. Trong môi trường hơi amoniac (NH3) màu cam đỏ chuyển thành màu xanh lục và trở lại màu đỏ bởi hơi axit clohydric (HCl).
TIÊU CHUẨN VIỆT NAM TCVN 8343 : 2010 THUỶ SẢN VÀ SẢN PHẨM THUỶ SẢN ( PHÁT HIỆN AXIT BORIC VÀ MUỐI BORAT Fish and fishery products − Detection of boric acid and borates Lời nói đầu TCVN 8343 : 2010 xây dựng sở AOAC 970.33 Boric acid and borates in food; TCVN 8343 : 2010 : 2009 Cục Chế biến, Thương mại nông lâm thuỷ sản nghề muối biên soạn, Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn đề nghị, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ công bố Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn qui định phương pháp định tính axit boric muối borat sản phẩm thủy sản Giới hạn phát phương pháp 0,1 % khối lượng Nguyên tắc Mẫu sản phẩm thủy sản chiết thử sơ dung dịch nước thử xác nhận than hoá trước chiết Axit boric muối borat có dịch chiết axít hoá tác dụng với curcumin giấy nghệ tạo thành phức màu cam đỏ Trong môi trường amoniac (NH 3) màu cam đỏ chuyển thành màu xanh lục trở lại màu đỏ axit clohydric (HCl) Thuốc thử vật liệu Chỉ sử dụng thuốc thử tinh khiết phân tích, trừ có quy định khác, sử dụng nước cất loại khoáng nước có độ tinh khiết tương đương 3.1 Dung dịch axit clohydric (HCl), đậm đặc 3.2 Dung dịch amoni hydroxit (NH4OH), đậm đặc 3.3 Nước vôi sữa vôi 3.4 Giấy nghệ, chuẩn bị sau: Hòa tan 0,5 g curcumin (hoặc 1,5 g đến 2,0 g bột nghệ) 100 ml etanol 80 % bình nón 250 ml (4.2) Lắc mạnh bình lọc lấy dịch Nhúng tờ giấy lọc (4.7) vào dung dịch vừa lọc để khô Sau h, cắt giấy nghệ thành mảnh có kích thước cm x cm Bảo quản giấy nghệ nơi tối Thiết bị, dụng cụ Sử dụng thiết bị, dụng cụ phòng thử nghiệm thông thường cụ thể sau: 4.1 Cân phân tích, cân xác đến 0,1 g 4.2 Bình nón, dung tích 125 250 ml 4.3 Ống nghiệm, dung tích 15 ml 4.4 Đũa thủy tinh 4.5 Máy xay 4.6 Bếp điện 4.7 Giấy lọc Whatman số 02 4.8 Chén nung, làm sứ 4.9 Lò nung, trì nhiệt độ 350 oC 4.10 Giấy pH Cách tiến hành 5.1 Thử sơ Dùng đũa thuỷ tinh (4.4) khuấy trộn 25 g mẫu xay với 10 ml nước bình nón 125 ml (4.2) đậy miệng bình mặt kính đồng hồ Đun từ từ bình nón bếp điện (4.6) dung dịch sôi Chú ý phải lắc đun Làm nguội mẫu lọc dịch giấy lọc (4.7) Axit hóa dịch lọc dung dịch HCl (3.1) đến pH = rót dịch vào ống nghiệm 15 ml (4.3) Nhúng đầu giấy nghệ (3.4) vào ống nghiệm chứa dịch mẫu cho ngập khoảng 1/2 chiều dài tờ giấy Lấy giấy để khô tự nhiên Quan sát màu giấy thử, tiến hành đọc kết theo Điều 5.2 Thử xác nhận Tiến hành thử khẳng định mẫu cho kết dương tính phép thử sơ theo qui trình sau: a) Kiềm hoá 25 g mẫu với nước vôi sữa vôi (3.3) chén sứ (4.8) b) Đun từ từ mẫu chén sứ bếp điện (4.6) cho bay đến khô c) Đặt chén sứ vào lò nung (4.9) nhiệt độ 350 0C h chất hữu cháy thành than hoàn toàn Sau đó, để nguội hoà tan cặn với ml nước thêm giọt dung dịch HCl (3.1) dung dịch có tính axit rõ rệt (pH = 5) Lọc dung dịch vào ống nghiệm (4.3) d) Nhúng đầu giấy nghệ (3.4) vào ống nghiệm chứa dịch mẫu cho ngập khoảng 1/2 chiều dài tờ giấy Lấy giấy để khô tự nhiên Quan sát màu giấy thử, tiến hành đọc kết theo Điều 6 Đọc kết Nếu có borat mẫu giấy nghệ chuyển sang màu cam đỏ đặc trưng Đặt giấy nghệ lên miệng ống nghiệm chứa dung dịch amoni hydroxit (3.2) Giấy nghệ phải chuyển sang màu xanh lục trở lại màu đỏ đặt giấy ống nghiệm chứa axit clohydric (3.1) Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ: a) thông tin cần thiết việc nhận biết đầy đủ mẫu thử; b) phương pháp lấy mẫu sử dụng, biết; c) phương pháp thử sử dụng viện dẫn tiêu chuẩn này; d) thao tác không quy định tiêu chuẩn này, điều coi tự chọn, chi tiết có ảnh hưởng tới kết quả; e) kết thử nghiệm thu ... lắc đun Làm nguội mẫu lọc dịch giấy lọc (4 .7) Axit hóa dịch lọc dung dịch HCl (3 .1) đến pH = rót dịch vào ống nghiệm 15 ml (4 .3) Nhúng đầu giấy nghệ (3 .4) vào ống nghiệm chứa dịch mẫu cho ngập... tan cặn với ml nước thêm giọt dung dịch HCl (3 .1) dung dịch có tính axit rõ rệt (pH = 5) Lọc dung dịch vào ống nghiệm (4 .3) d) Nhúng đầu giấy nghệ (3 .4) vào ống nghiệm chứa dịch mẫu cho ngập khoảng... sau: a) Kiềm hoá 25 g mẫu với nước vôi sữa vôi (3 .3) chén sứ (4 .8) b) Đun từ từ mẫu chén sứ bếp điện (4 .6) cho bay đến khô c) Đặt chén sứ vào lò nung (4 .9) nhiệt độ 350 0C h chất hữu cháy thành