Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu thành phần hoá học dịch chiết nấm Cổ Linh chi (Ganoderma australe Pat.) thuộc họ Ganodermaceae ở Việt Nam Sử dụng các phư¬ơng pháp phổ hiện đại: phổ hồng ngoại IR, phổ khối lượng (EIMS), phổ cộng h¬ưởng từ hạt nhân 1HNMR, 13CNMR, DEPT, HMBC và HSQC để xác định cấu trúc các hợp chất tách được. Các kết quả phổ đã xác định: hợp chất 83 là ergosta4,22dien3on; hợp chất 84 là 5α, 8epidioxyergosta6,22dien3ol.
1 MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Hiện nấm công nhận giới riêng biệt, khác biệt hẳn với thực vật hay động vật, chúng tách xuất xấp xỉ tỷ năm trước [5], tạo thành giới riêng biệt hành tinh Và giới nấm ngày có ý nghĩa to lớn kinh tế quốc dân, khoa học vòng tuần hoàn vật chất Nấm phân bố toàn giới phát triển nhiều dạng môi trường sống khác nhau, kể sa mạc Đa phần nấm sống cạn, số loài lại tìm thấy môi trường nước Dựa theo theo tỉ lệ số loài nấm với số loài thực vật môi trường, người ta ước tính giới Nấm có khoảng 1,5 triệu loài [9] Tuy nhiên có khoảng 70.000 loài nấm nhà phân loại học phát miêu tả Nấm sử dụng dân gian từ hàng ngàn năm có ý nghĩa quan trọng đời sống người Chúng nguồn thực phẩm giàu chất dinh dưỡng (Termitomyces albuminosus, Macrocybe gegantea), nguồn thức ăn quý nhân dân ưa chuộng, chứa nhiều protein, chất khoáng vitamin (A, B, C, D, E ) [17] Nhiều loài nấm ứng dụng công nghiệp dược phẩm, nguồn nguyên liệu để điều chế hoạt chất điều trị bệnh như: Laricifomes officinalis nguyên liệu để chiết aragicin dùng chữa bệnh lao [7,13], dùng làm thuốc nhuận tràng hay chất thay cho quinine [13] Những loại nấm nấm múa, nấm hương , nấm linh chi tập trung nghiên cứu khả chống ung thư, chống virus tăng cường hệ miễn dịch chúng Từ 2000 năm trước, Linh chi sử dụng dân gian loại thuốc quý vua chúa sử dụng Hiện nhà khoa học phát thêm nhiều loài linh chi có đặc tính quý, tốt cho phòng chữa bệnh Các chế phẩm từ nấm linh chi (Ganoderma) dùng để hỗ trợ điều trị nhiều bệnh bệnh gan, tiết niệu, tim mạch, ung thư, AIDS [1, 2, 4, 10] Trong dịch chiết methanol, hexane, ethyl acetate từ thể Ganoderma lucidum có hoạt chất có hoạt tính kháng virus Chúng có tác dụng kìm hãm sinh trưởng phát triển virus HIV [10] Các hoạt chất từ Ganoderma applanatum có hiệu lực chống khối u cao [2], chúng sử dụng điều trị ung thư: ung thư phổi, ung thư vú, ung thư dày [1] Các dẫn xuất adenosine có G.capense G amboinense có tác dụng giảm đau, giãn cơ, ức chế kết dính tiền tiểu cầu [3] Việt Nam nằm trung tâm Đông Nam Á năm có lượng mưa nhiệt độ trung bình tương đối cao Với khí hậu nhiệt đới gió mùa nóng, ẩm tạo cho rừng Việt nam có hệ động, thực vật đa dạng phong phú Nghệ An tỉnh có vườn Quốc gia Pù Mát, khu bảo tồn thiên nhiên Pù Huống khu bảo tồn thiên nhiên Pù Hoạt Đây vùng đánh giá có tính đa dạng sinh học cao, có chứa đựng nguồn lợi lớn đa dạng sinh học, có nguồn lợi lớn nấm sử dụng chúng làm nguyên liệu tốt cho ngành công nghiệp thực phẩm, dược phẩm… Tuy nhiên, nghiên cứu nấm Việt Nam nói chung Nghệ An nói riêng vấn đề mẻ, chưa nhận quan tâm mức nhà khoa học Do vậy, việc nghiên cứu nấm Nghệ An yêu cầu thiết, có ý nghĩa lý luận thực tiễn quan trọng, góp phần quan trọng việc tìm hiểu nguồn tài nguyên thiên nhiên, giá trị kinh tế tầm quan trọng nguồn dược liệu thiên nhiên nước ta nói chung tỉnh Nghệ An nói riêng Vì lý chọn đề tài: “Nghiên cứu thành phần hóa học nấm cổ linh chi (Ganoderma australe (Fr.) Pat.) Nghệ An ” Đối tượng nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu luận văn dịch chiết từ loài nấm cổ linh chi (Ganoderma australe (Fr.) Pat.) thuộc họ Nấm Linh chi (Ganoderma) Nghệ An Nhiệm vụ nghiên cứu Nhiệm vụ nghiên cứu luận văn bao gồm: Trong dịch chiết methanol, hexane, ethyl acetate từ thể Ganoderma lucidum có hoạt chất có hoạt tính kháng virus Chúng có tác dụng kìm hãm sinh trưởng phát triển virus HIV [10] Các hoạt chất từ Ganoderma applanatum có hiệu lực chống khối u cao [2], chúng sử dụng điều trị ung thư: ung thư phổi, ung thư vú, ung thư dày [1] Các dẫn xuất adenosine có G.capense G amboinense có tác dụng giảm đau, giãn cơ, ức chế kết dính tiền tiểu cầu [3] Việt Nam nằm trung tâm Đông Nam Á năm có lượng mưa nhiệt độ trung bình tương đối cao Với khí hậu nhiệt đới gió mùa nóng, ẩm tạo cho rừng Việt nam có hệ động, thực vật đa dạng phong phú Nghệ An tỉnh có vườn Quốc gia Pù Mát, khu bảo tồn thiên nhiên Pù Huống khu bảo tồn thiên nhiên Pù Hoạt Đây vùng đánh giá có tính đa dạng sinh học cao, có chứa đựng nguồn lợi lớn đa dạng sinh học, có nguồn lợi lớn nấm sử dụng chúng làm nguyên liệu tốt cho ngành công nghiệp thực phẩm, dược phẩm… Tuy nhiên, nghiên cứu nấm Việt Nam nói chung Nghệ An nói riêng vấn đề mẻ, chưa nhận quan tâm mức nhà khoa học Do vậy, việc nghiên cứu nấm Nghệ An yêu cầu thiết, có ý nghĩa lý luận thực tiễn quan trọng, góp phần quan trọng việc tìm hiểu nguồn tài nguyên thiên nhiên, giá trị kinh tế tầm quan trọng nguồn dược liệu thiên nhiên nước ta nói chung tỉnh Nghệ An nói riêng Vì lý chọn đề tài: “Nghiên cứu thành phần hóa học nấm cổ linh chi (Ganoderma australe (Fr.) Pat.) Nghệ An ” Đối tượng nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu luận văn dịch chiết từ loài nấm cổ linh chi (Ganoderma australe (Fr.) Pat.) thuộc họ Nấm Linh chi (Ganoderma) Nghệ An Nhiệm vụ nghiên cứu Nhiệm vụ nghiên cứu luận văn bao gồm: CHƯƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Chi Ganoderma (Linh chi) 1.1.1 Đặc điểm hình thái phân loại nấm Linh chi Linh chi sử dụng dân gian từ lâu, theo cách hiểu dân gian Linh chi loại nấm có lớp vỏ cuống màu đỏ, nâu đỏ, nâu đen, bóng, lông, phủ suốt lên mặt tán nấm Mũ nấm có màu đỏ đỏ hồng Nhưng loài nấm họ nấm Linh chi - Ganodermataceae Lịch sử nghiên cứu nấm Linh chi trải qua 200 năm với nhiều biến đổi ngày thu kết khoa học có giá trị Lần W Curtis (1871) phát đặt tên cho l n ấ m L i n h c h i Một trăm năm sau, Karsten xác lập chi Ganoderma nghiên cứu hệ thống học, phân loại học nhóm nấm thực phát triển Từ xác lập thành chi riêng, Ganoderma Karst.(1881) đến nhóm nấm quý họ linh chi có 386 tên loài ghi nhận toàn giới, 221 loài nhà khoa học công nhận, 200 loài lại loài đồng nghĩa, loài xếp nhầm vào họ linh chi gần 10 loài chưa xác định loại Riêng loài G.lucidum có 40 thứ Chúng phân bố khắp nơi giới, thường mọc rộng rãi nơi có khí hậu nhiệt đới, môi trường sống nấm thường rừng kín xanh ẩm, độ cao từ vài chục mét đến 1500 m [5], [16], [18] Điểm đặc biệt có nhóm nấm màng bào tử đảm lớp - dấu hiệu di truyền bật, nhiều nhà khoa học đề nghị để bậc taxon cao xếp chúng thành họ độc lập: họ Linh chi (Ganodermataceae Donk) Theo Donk (1993), phân họ Ganodermataceae thuộc: - Giới nấm (Mycetalia) - Ngành nấm đảm (Basimydiomycetes) - Bộ nấm lỗ (Alphyllophorales) - Họ Linh chi (Gannodermataceae Donk) Năm 1971, Ainsworth G.C dựa vào đặc điểm hình thái q u ả thể, cấu trúc bào tử đảm, đưa hệ thống phân loại cách hoàn chỉnh Cho đến hệ thống phân loại nhiều nhà khoa học giới sử dụng [16], [17], [18] Nấm Linh chi có đặc điểm chung ngành là: cấu tạo tế bào có nhân thật, diệp lục, nhận thức ăn từ môi trường bên cách hấp thu từ giá thể (sống dị dưỡng) [18] Ngoài có đặc điểm riêng [16], [17], [18], [22]: + Sợi nấm gồm nhiều đoạn ngăn cách với vách ngang Mỗi đoạn coi tế bào có hay nhiều nhân Trên vách ngang có lỗ nhỏ, từ chất nguyên sinh nhân qua + Cuống thể biến dị lớn: Các loại đa niên thường không cuống loài có cuống phong phú: Từ loài có cuống ngắn (0,5cm), mảnh (0,2cm) loài dài cỡ hàng 5–10cm dài (20–25cm), to mập (đường kính tới 3,3cm) Cuống nấm phân nhánh không, màu sắc thay đổi khác tuỳ loài Cuống thường đính bên, đính gần tâm trình liên tán mà thành + Mũ nấm: Dạng thận, gần tròn xoè thành hình quạt nhiều dị dạng Trên mặt mũ có vân gợn đồng tâm có tia rãnh phóng xạ Màu sắc từ vàng nâu, vàng cam, đỏ nâu, đỏ tím, nâu đen, nhẵn, bóng, láng vecni, sẫm màu dần già Lớp vỏ láng phủ suốt mặt mũ chạy dài theo cuống nấm Kích thước tán biến động từ 2–30cm, dày 0,8 – 2,5cm tuỳ loại Phần đính với cuống gồ lên lõm xuống + Thịt nấm dày từ 0,4–1,8 cm màu vàng kem, nâu nhạt, trắng Nấm mềm dai tươi, khô chắc, cứng nhẹ Hệ sợi có đầu tận phình hình chuỳ, màng dày, đan kết vào tạo thành lớp vỏ láng phủ mặt mũ + Bào tầng lớp ống dày từ 0,2–1,7cm, gồm ống nhỏ thẳng, miệng tròn, trắng, vàng ánh xanh + Đảm đơn bào mang bào tử đảm hình trứng, trứng cụt + Bào tử đảm có cấu trúc vỏ kép, màu vàng mật ong sáng, tụ dạng giọt dầu, kích thước (5 –6) x (8,8 – 12) µm Vỏ bào tử dày cỡ 0,7 –12 µm, có cấu trúc phức tạp: Màng suốt, màng sần sùi mụn cóc, gai nhọn, gò trống Đặc biệt, dù hình thái bên nấm biến đổi đa dạng, song cấu tạo bào tử đảm có độ ổn định cao, dù chủng nuôi trồng Nhật Bản, Trung Quốc hay chủng Lim đà Lạt, Hà Bắc Các bào tử đảm đơn bào, điều kiện thuận lợi, nảy mầm tạo hệ sợi sơ cấp qua loạt phát triển tạo tán nấm Tán nấm hình thành bào tầng lại phát tán bào tử đảm tạo thành chu trình sống nấm Linh chi Chu trình sống tương tự chu trình sống nấm đảm khác Hình 1.1 Chu trình phát triển nhóm Nấm họ Linh chi Nấm hoá gỗ, sống năm hay lâu năm Quả thể có mũ dạng thận, tròn dạng quạt, dày, đường kính 3-10cm, cuống dài dính lệch, hình trụ tròn hay dẹt, có phân nhánh, mặt mũ có vòng đồng tâm, mép lượn sóng Bào tử hình bầu dục hình trứng, cụt đầu, màu gỉ sắt, có mấu lồi nhiều gai nhọn Nấm Linh chi sinh sản chủ yếu bào tử nằm mặt thể Phần có chức sinh dưỡng hệ sợi nấm mọc ẩn gỗ mục đất Hiện Trung Quốc, Nhật Bản Việt Nam, người ta chủ động nghiên cứu trồng nhiều loại nấm linh chi giá thể nhân tạo để dùng làm thuốc Nấm Linh chi mọc gỗ (thường thuộc đậu Fabales) sống hay chết Quả thể gặp rộ vào mùa mưa (từ tháng đến tháng 11), mọc thân cây, quanh gốc từ rễ cây, thích hợp với bóng rợp, ánh sáng khuyếch tán nhẹ với nhiệt độ ôn hoà Nên vùng núi đồi cao 1000m so với mực nước biển, thường có chủng thích hợp nhiệt độ thấp từ 21 - 260 vùng Tam Đảo, Pù Mát, Thừa Thiên Huế, Trường Sơn nước ta Các loài Nấm Linh chi phát Việt Nam sớm Dựa theo màu sắc mũ nấm, Lý Thời Trân (1590) phân biệt thành sáu loại Linh Chi với tên gọi tương ứng: Linh chi trắng (Bạch chi hay Ngọc chi), Linh chi vàng (Hoàng chi hay Kim chi), Linh chi xanh (Thanh chi hay Long chi), Linh chi đỏ (Xích chi hay hồng chi), Linh chi tím (Tử chi), Linh chi đen (Hắc chi hay huyền chi) Các nhà Thực vật học, Y- Dược học kế tục Tuệ Tĩnh phát 26 loài thuộc chi Ganoderma [18]: Ganoderma amboinense (Lam & Fr.) Pat G annulare (Fn) Gilbn G applanatum (Pers) Pat G australe Pat G balabacense Murr G boninense Pat G capense (L.Loyd) Pat G cochlear (Bl & Nees) Bress G fulvelum Bres 10 G guinanense Zhao et Zhang 11 G hainanense Zhao, Xu & Zhang 12.G koningsberg Li (L.Loyd), Teng 13.G lobattum (Schow) Atk 14 G lucidum (Leyss ex Fr) Karst 15 G mastoporum (Mont) Pat 16.G ochrolacctum (Mont) Pat 17.G orflavum (L Loyd) Teng 18.G philipii (Bress et Henn) Bres 19.G virulosum Pat et Har 20.G sasile Murr 21.G sichuanense Zhao & Zhang 22.G sinense Zhao, Xu & Zhang 23 G subtornatum Murr 24.G toantum (Pers) Pat 25.G tropicum (Jungh) Bres 26.G tsugae Theo nghiên cứu Trần Văn Mão, Trịnh Tam Kiệt, đàm Nhận, Phạm Quang Thu, Lê Xuân Thám phát 46 loài Linh chi lãnh thổ nước ta, có loài chuẩn chủng [5], [15], [18] Theo thống kê tổ chức lương thực giới (FAO) G lobatum sử dụng làm thuốc Trung Quốc G.lobatum phát Cộng hoà Sec, quần đảo Sky Arizona [31], [36] Ở Việt Nam G.lobatum phát rừng thuộc địa phận tỉnh Ninh Bình Với giá trị ngày khẳng định, loài chuẩn nấm Linh chi màu đỏ – Hồng chi , xích chi, đơn chi…là vài ba loài nấm nghiên cứu kỹ lưỡng nhất, nuôi trồng cho sản lượng ngày lớn, kể nước Âu - Mỹ - Chiết chọn lọc với dung môi thích hợp để thu hỗn hợp hợp chất từ dịch chiết thể nấm Cổ Linh chi - Phân lập xác định cấu trúc số hợp chất 10 Hình 1.5 Ganoderma tsugae Hình 1.6 Ganoderma appalanatum 1.1.2 Thành phần hóa học: Tổng kết từ nghiên cứu trước đây, thành phần hoá học loài Ganoderma lucidum số loài khác chi Ganoderma có thành phần sau [5], [16], [18]: - Nước 12 - 13%, lignin 13 - 14% - Hợp chất nitơ: 1,6 - 2,1% 55 giá trị độ dịch chuyển hoá học 62 với esgosterol peroxit cho thấy nhóm hydroxy gắn vào C-3 với cấu hình β Công thức phân tử dự kiến C28H44O3 với khối lượng phân tử 428 đvc khẳng định kết thu phổ khối lượng EI-MS với xuất pic ion m/z 428 [M]+ Bảng 3.2 Số liệu phổ NMR hợp chất 84 C DEPT δC δH CH2 29,9 1,59 m; 1,85 m CH2 34,5 1,72 m; 1,86 m CH 64,6 3,58 m CH2 38,7 1,98m C 81,4 - CH 135,2 6,23 d (J = 8,5 Hz) 4,5,7,8,10 CH 130,1 6,44 d (J = 8,5 Hz) 5,6,8,9 C 78,4 - CH 50,9 1,52 m 10 C 36,9 - 11 CH2 21,7 1,37 m; 1,49m 12 CH2 36,5 1,94 m; 1,99 m 13 C 44,0 - 14 CH 51,2 1,53 m 15 CH2 22,8 1,56 m; 1,26 m 16 CH2 28,2 1,43 m; 1,78 m 17 CH2 55,4 1,28 m 18 CH3 12,5 0,87 s 12,13,14,17 19 CH3 17,9 0,95 s 1,5,9,10 20 CH 40,1 1,98 m 21 CH3 20,2 1,05 d (J=6,5 Hz) HMBC (H-C) 17, 20, 22 56 22 CH 135,6 5,28 m 23 CH 131,5 5,18 m 24 CH 42,0 1,87 m 25 CH 32,4 1,52 m 26 CH3 19,4 0,87 d (J=6,5 Hz) 24, 25 27 CH3 19,7 0,89 d (J=6,5 Hz) 24, 25 28 CH3 17,2 0,96 d (J= 7,0 Hz) 23, 24, 25 Từ liệu trên, hợp chất 84 xác định 5α, 8α-epidioxyergosta-6,22dien-3β-ol) Hợp chất phân lập từ Ajuga remot, từ bọt biển Axinella cannabina Typha latifolia số loài khác Hợp chất egrosterol peroxit biết đến với hoạt tính kháng khuẩn ức chế phát triển tế bào ung thư cao HO O O (84) (5α, 8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol 57 Hình 3.16: Phổ khối lượng hợp chất 84 Hình 3.17: Phổ 1H-NMR hợp chất 84 58 Hình 3.18: Phổ 1H-NMR hợp chất 84 Hình 3.19: Phổ 13C-NMR hợp chất 84 59 Hình 3.20: Phổ 13C-NMR hợp chất 84 Hình 3.21: Phổ 13C-NMR hợp chất 84 60 Hình 3.22: Phổ DEPT hợp chất 84 Hình 3.23: Phổ DEPT hợp chất 84 61 Hình 3.24: Phổ HMBC hợp chất 84 62 Hình 3.25: Phổ HSQC hợp chất 84 63 KẾT LUẬN Nghiên cứu thành phần hoá học dịch chiết nấm Cổ Linh chi (Ganoderma australe Pat.) thuộc họ Ganodermaceae Việt Nam thu số kết sau: - Nấm Cổ Linh chi chiết với dung môi metanol ngày, cất thu hồi dung môi thu cao metanol thô (154g) - Bằng phương pháp phân bố cao metanol nước chiết với dung môi chọn lọc chưng cất chân không thu 42 g cao etyl axetat 67g cao butanol - Phân lập hợp chất từ cao etyl axetat phương pháp sắc ký thu hợp chất 83 (358 mg), hợp chất 84 (332 mg) - Sử dụng phương pháp phổ đại: phổ hồng ngoại IR, phổ khối lượng (EI-MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, HMBC HSQC để xác định cấu trúc hợp chất tách Các kết phổ xác định: hợp chất 83 ergosta-4,22-dien-3-on; hợp chất 84 5α, 8αepidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol 64 DANH MỤC CÔNG TRÌNH Nguyễn Huy Hùng, Hồ Thị Hải Yên, Trần Đình Thắng Các hợp chất steroit tritecpenoit từ thể Linh chi đỏ ( Ganoderma lucidum L) Việt Nam, tạp chí hoá học 10 Hình 1.5 Ganoderma tsugae Hình 1.6 Ganoderma appalanatum 1.1.2 Thành phần hóa học: Tổng kết từ nghiên cứu trước đây, thành phần hoá học loài Ganoderma lucidum số loài khác chi Ganoderma có thành phần sau [5], [16], [18]: - Nước 12 - 13%, lignin 13 - 14% - Hợp chất nitơ: 1,6 - 2,1% 66 Tiếng Anh 11 Abdul K D (1999) Spectroscopy and chemical studies on the chemical constituents of Savia triloba and related plant species University of Karachi, Pakistan 12 Ahammadsahib K I., Hollingworth R M., McGovren J P., Hui Y H., McLaughlin J L (1993), Mode of action of bullatacin a potent antitumor and pesticidal Annonaceous acetogenin, Life Sci., 53, 11131120 13 Alexandra L (2000)., Triterpenes and Sterols from Ganoderma australe (Fr.) Pat (Aphyllophoromycetideae), Vol 2, 4, 128 14 Amolak C J., (1984), The isolation of lanosta-7,9(11),24-trien-3β,21diol from the fungus G.australe Phytochemistry, Vol.23, No.3, 686-687 15 Anna L P., Attilio V., Siro P., Francesco D S., Luca R (2007), Flavonol glycosides from whole cottonseed by-product, Food chemistry, 100, 344–349 16 Artur S J, (2006), Derivatization Does Not Influence Antimicrobial and Antifungal Activities of Applanoxidic Acids and Sterols from Ganoderma spp, Z Naturforsch 61c, 31-34 17 Buckingham J (2005), Dictionary of Natural Products Vol 3, Chapman & HallInc, London, 53660 18 Chaichantipyuth C., Tiyaworanan S., Mekaroonreung S., Ngamrojnavanich N., Roengsumran S., Puthong S., Petsom A and Ishikawa T (2001) Oxidized heptenes from flower of Melodorum fruticosum, Phytochemistry, 58(8), 1311-1315 19 Charoenpanich J., Chulalaksananukul W and Yongvanich T (2005), Synthesis of amyl acetate by immobilized lipases from mucor miehei and Aspergillus niger in n-hexane, Journal of Scientific Research of Chulalongkorn University, 30(2), 153-159 67 20 Chulalaksananukul W., Buaboocha T., Wongkasemsombat A and Yongvanich T (1998), Synthesis of amyl acetate by lipases from various microorganisms, Thai J Agri Sci., 31(4), 594-600 21 De Smet AGM Peter (1997), The role of plant derived drugs and herbal medicines in healthcare, Drugs, 54(6), 801-840 22 Dictionary of Natural product on CD-Rom (2005), Chapman and HallCRC 23 George I., Ndukwe C and Yimin Z., Pharmacological activity of 2,3,8tri-O-methyl ellagic acid isolated from the stem bark of Irvingia gabonensis, African Journal of Biotechnology, (16), pp 1910-1912 24 George I., Ndukwe C., Amupitan J O and Yimin Z (2008), Isolation and characterization of 2, 3, 8-tri-me ether ellagic acid from the stem bark of Irvingia gabonensis (Baill), Journal of Medicinal Plants Research, 2(9), 234-236 25 Gerald D C (2006), Annonaceae, [Online], Botany department, University of Hawaii Available from: www.botany.hawaii.edu/faculty/carr/annon.htm.[Accessed 2006 April 27] 26 Jung J H., Chang C J., McLaughlin J L., Pummangura S., Chaichantipyuth C and Patarapanich C (1991), Additional bioactive heptenes from Melodorum fruticosum, J Nat Prod., 54(2), 500-505 27 Jung J H., Pummangura S., Chaichantipyuth C., Patarapanich C and McLaughlin J L (1990), Bioactive constituents of Melodorum fruticosum, Phytochemistry, 29(5), 1667-1670 28 Jung J H., Pummangura S., Chaichantipyuth C., Patarapanich C., Fanwick P E., Chang C J and McLaughlin J L (1990), New bioactive heptenes from Melodorum fruticosum (Annonaceae), Tetrahedron, 46(15), pp 5043-5054 29 Kim D S., Baek N I., Oh S R., Jung K Y., Lee I S., Kim J H., Lee H 68 K., (1997) Anticomplementary activity of ergosterol peroxide from Naematoloma fasciculare and reassignment of NMR data Arch Pharm Res., 20 (3) 201-205 30 Kuo R Y., Chang F C and Wu Y C (2002), Chemical constituents and their pharmacological activities from formosan Annonaceous plants, The Chinese Pharmaceutical Journal, 54, 155-173 31 Lee J H., Ku C H., Baek N I., Kim S H., Park H W and Kim D K (2004), Phytochemical constituents from Diodia teres, Arch Pharm Res., 27(1), 40-43 32 Liu J Q., (2012), Isolation and Bioactivity Evaluation of Terpenoids from the Medicinal Fungus Ganoderma sinense, Planta Med, 78, 368– 376 33 Martinez A T (1991), Fatty acid composition and taxonomic status of Ganoderma australe from Southern Chile, Mycol Res 95 (7), 782-784 34 Moreno H P., (2011), Vitae Volume 18, No 1, page 11-15 35 Ng S L., Razak I A., Fun H K., Boonsri S., Chantrapromma S and Prawat U (2005), A second monoclinic polymorph of 1-(2,4dihydroxy-6-methoxyphenyl)-3-(4-methoxy-phenyl) propan-1-one, Acta crystallographica section E., E61, 3234-3236 36 Richard J S (2006), ANNONACEAE, [Online] The botanical dermatology database (BoDD), http://bodd.cf.ac.uk/BotDermFolder dvailable from: /BotDermA/ANNO.html [Accessed 2006 april 27] 37 Riham S D.,(2008), Anti-HIV-1 Protease Activity of Lanostane Triterpenes from the Vietnamese Mushroom Ganoderma colossum, J Nat Prod., 71, 1022–1026 38 Sang H L., (2006), Constituents from the fruiting bodies of Ganoderma applanatum and their aldoso reducetase inhibitory Arch Pharm Res, Vol 29, No 6, 479-483 69 ... Hình 1.12.3 Bề mặt G.australe Nấm tươi ta chạm tay vào phía mũ nấm, chuyển màu vàng, có 4-5 lỗ chân lông tròn trong 1mm, độ dài ống từ 10-15 nm Hình 1.12.4 Lớp chân lông phía G.australe Các thể