Nghiên cứu hoá học và hoạt tính sinh học của một số cây trong chi Fissistigma và Miliusa họ Na (Annonaceae)

THƯ VIỀN QUỐC GIÀ VIÊT NAM BBllOHẳQUEHATIOHÃLEDUVỊtllM ■ HAllOHilLtBKAKy0fVltlKAM PHIẾU THÔNG TIN LUẬN ÁN Mã kho LA10.0134.3 Tên luận án Phụ đề Nghiên cứu hoá học hoạt tính sinh học số chi Fissistigma Miliusa họ Na (Annonaceae) LATS Hoáhọc: 62.44.27.01 Tác giả Trần Thị Thanh Thuỷ Noi xuất Hà Nội Noi bảo vệ Viện Hoá học ; Ngày bảo vệ: 17/5/2010 Năm bảo vệ 2010 SỐ trang 121tr Ngôn ngũ Tiếng Việt Từ khóa Hoạt tính, Sinh học, Dược liệu Tóm tắt Tìm kiếm hợp chất có cấu trúc hoá học hợp chất có hoạt tính sinh học lý thú từ Cách thư đa hùng, Cách thư poilanei, Song môi tàu thuộc họ Na ĐỘC giả xem toàn văn luận án Phòng đọc Tài liệu số tập trung, tầng 2, nhà D, Thư viện Quốc gia Việt Nam Mọi chi tiết xỉn liên hệ ỉnfo@nlv.gov.vn đế trợ giúp BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO VIỆN KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN HÓA HỌC Trần Thị Thanh Thủy NGHIÊN CỨU HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA MỘT SỐ CÂY TRONG CHI FISSISTIGMA VÀ MILIUSA HỌ NA (ANNONACEAE) TÓM TẮT LUẬN ÁN TIÉN SỸ HÓA HỌC Hà N ộ i-2010 I GIỚI THIỆU LUẬN ÁN 1.1 Ý nghĩa luận án Trước nguy bùng nổ nhiều dịch bệnh nguy hiểm, tìm kiếm hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học để làm thuốc giải pháp hiệu nhà khoa học lựa chọn Thống kê nhà khoa học Mỹ cho thấy họp chất tự nhiên, dẫn xuất hợp chất tương tự chiếm 50% dược chất sử dụng làm thuốc; hợp chất từ thực vật bậc cao dẫn xuất chiếm khoảng 25% tổng số Trong đó, nhiều đối tượng nghiên cứu lựa chọn dựa vào họ thực vật giàu chất có hoạt tính Những nghiên cứu trước cho thấy họ Na mà đặc biệt hai chi Fissistigma Mỉliusa giàu họp chất flavonoit ancaloit họp chất có nhiều hoạt tính sinh học quý báu hoạt tính gây độc tế bào - chống ung thư, hoạt tính chống oxy hóa, hoạt tính với hệ mạch - chống bệnh tim mạch; hai bệnh gây tử vong hàng đầu Do đó, mục đích luận án là: “Nghiên cứu hóa học hoạt tính sinh học số chi Fissistigma Miliusa họ Na (Annonceae)“ 1.2 Mục tiêu luận án Tìm kiếm hợp chất có cấu trúc hóa học hợp chất có hoạt tính sinh học lý thú từ Cách thư đa hùng [Fissistigma polyanthoides (DC.) Merr.], Cách thư poilanei [Fissistigma poilanei (Ast.) Tsiang & P.T.Li] Song môi tàu (Miliusa sinensis Finet et Gagnep.) thuộc họ Na 1.3 Những đóng góp mói luận án - Từ Cách thư đa hùng (Fissistigma polyanthoỉdes) phân lập họp chất flavonoit - Đã tiến hành nghiên cứu thành phần hóa học Fissistigma poilanei, phân lập xác định cấu trúc họp chất có hai aporphin ancaloit Trước nghiên cứu chưa có công bố thành phần hóa học - Đã phân lập xác định cấu trúc dihydrochalcon từ Milỉusa sinensis 10 họp chất có - Công bố hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định gây độc tế bào nghiên cứu hợp chất phân lập I Bố cục luận án Luận án gồm 121 trang với chương, 10 bảng, 52 hình, 123 tài liệu tham khảo 22 phụ lục gồm 36 hình, bảng Luận án bố cục sau: Mở đầu: trang, Tổng quan: 38 trang, Thực nghiệm: 15 trang, Kết thảo luận: 52 trang, Kết luận: trang, Tài liệu tham khảo: 11 trang, Danh mục công trình liên quan đến luận án: trang II NỘI DUNG CỦA LUẬN ÁN Mở đầu: Đề cập tính thực tiễn, ý nghĩa khoa học, mục đích, đối tượng mục tiêu luận án Chương 1: Tổng quan Trên sở nghiên cứu tài liệu, chương tổng quan đề cập đến đặc điểm tình hình nghiên cứu giới hai chi Fissistigma Miliusa lớp chất thành phần thuộc chi Tình hình nghiên cứu hóa thực vật chi Fissistigma Miliusa họ Na Các hợp chất aporphin ancaloit: cấu trúc hóa học, sinh tổng họp hoạt tính sinh học Các họp chất ílavonoit: cấu trúc hóa học, sinh tổng họp hoạt tính sinh học Chương 2: Thực nghiệm Trình bày phương pháp nghiên cứu, cách phân lập, số vật lý số liệu phổ tất chất thu từ ba Fissistigma polyanthoides, Fissistỉgma poilanei, Miliusa sinensis Mẩu thực vật Mầu thực vật làm sạch, sấy khô nhiệt độ 40°c, xay nhỏ ngâm chiết lần hỗn hợp dung môi MeOH - H20 (95 : 5) nhiệt độ phòng Phân lập chất Sau cất loại dung môi áp suất giảm, dịch nước lại chiết với dung môi n-hexan, etyl axetat, nbutanol cất loại dung môi áp suất giảm thu cặn dịch chiết tương ứng Các cặn chiết thu dung môi tương ứng phân lập phương pháp sắc ký cột thường, sắc ký cột nhanh với chất hấp phụ hệ dung môi thích hợp Xác định cấu trúc hóa học cấu trúc họp chất xác định kết họp phương pháp phổ đại phổ tử ngoại, phổ hồng ngoại (FT-IR), phổ khối (EI-, ESI-, HR-MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều hai chiều (COSY, HSQC, HMBC ) Phương pháp thử hoạt tỉnh sinh học: - Phương pháp thử hoạt tính vi sinh vật kiểm định - Phương pháp thử hoạt tính gây độc tế bào Chưong 3: Kết thảo luận 3.1 Các chất phân lập đưọ’c tù’ Fissistigma polyanthoides Cấu trúc hóa học họp chất: taxiíolin (162), epicatechin (190), kaempferol-3-0-glucosit (191), quercetin-3-O-glucosit (192) rutin (193) xác định cách kết họp phương pháp phổ như: phổ FT-IR, EI-, ESI-MS, phổ 1H- 13C- NMR kết họp phổ 2D NMR so sánh tài liệu 3 L L Càcflavonoit * Taxifolin (162): Công thức phân tử chất 162 xác định C 15H,2 dựa vào phổ ESI-MS (pic [M+H]+ m/z 305) phổ 13C-NMR Phổ IR cho thấy có mặt nhóm hydroxy nhóm cacbonyl (vmax 3454 1650 cm'0 Phổ l3C-NMR có mặt 15C đặc trưng cho khung dihydroflavonol: nhóm cacbonyl (198,4 ppm), 7C bậc 4, 7CH có nhóm CH nhân thơm (96,3 - 121,0 ppm) Trên phổ 'H-NMR, hai tín hiệu duplet Ôh 5,94 5,90 (J = Hz) proton vị trí meta gợi ý vị trí C-5 C-7 vòng A bị Cụm tín hiệu proton nhân thơm SH6,98 (1H, d, Hz), 6,82 (1H, d, Hz), 2, ,8 (1H, dd, Hz) cho thấy vị trí C-3’ C-4’ vòng B Hai tín hiệu duplet ÔH 4,52 4,93 ppm (J = 11,5 Hz) ứng với tín hiệu cộng hưởng H-3 H-2 Phân tích số liệu phổ, so sánh với tài liệu tham khảo cho phép kết luận chất 162 taxifolin PPEV7-M80D-1H PPEV7-M«»-C13CH)SDEPT Hình 3.1.3: Phổ 'H-NMR hợp chất 162 “S « “ Hình 3.1.4: Phổ l3C-NMR DEPT họp chất 162 * (-)-Epicatechin (190): Phổ 'H- l3C-NMR cho thấy chất 190 có khung flavan: có mặt nhóm CH2 5c 28,3 hai nhóm metin có gắn với oxy ÔH 4,65 (d, J = 4,5 Hz), ôc 78,1 SH4,02 (m), ôc 65,0 với vắng mặt tín hiệu cacbonyl Ngoài tín hiệu proton cacbon thơm vòng A B tương tự chất 162 cấu trúc 190 xác định (-)-epicatechin so sánh số liệu phổ 190 với tài liệu Báng 3.1: số liệu phổ 'H-NMR (500 MHz) 13C-NMR (125 MHz) hai chất 162,190 162 (C D O D ) Ôh (J = Hz) 4,93 d (11,5) 4,52 d ò 1,5) Vị trí Sc 85,1 (C) 73,7 (C) ,4 (0 10 r 2’ 3’ 4’ 5’ 6’ 165,3 (C) 97,4 CH) 168,9 (C) 96,3 (CH) 164,1 (C) 101,8 (O 129,9 (C) 115,9 (CH) 146,3 (C) 147,1 (C) 116,1 (CH) 120,9 (CH) Sc 78,1 (CH) 65,0 (CH) 28,3(CH2) 190 (DMSO-d6) ỖH (J = Hz) 4,65 d (4,5) 4,02 m 2,69 dd (2, 6) 2,48 dd (3, 6) 156,6 (C) 95,2 (CH) ,3 (0 94,2 (CH) 5 ,8 (0 98,6 (C) ,7 (0 115,0 (CH) 144,5 (C) 144,6 (O 114,8 (CH) 118,0 (CH) - 5,94 d (2) - 5,90 d (2) - 6,98 d (2) - 6,82 d (8) 6,86 dd (2, 8) - 5,89 d (2) - 5,73 d (2) - 6,89 d (1) - 6,68 d (8) 6,65 dd (1, 8) 3.1.2 Cácýlavonoit glycosit * Kaempferol-3-0-Ị3-D-glucosit (191): Từ số liệu phổ ESI-MS (pic [M+H]+ m/z 449) kết họp với phổ 13C-NMR, công thức phân tử 191 xác định C21H20O 11 Phổ 13C-NMR có mặt 21C, tín hiệu CH nhóm CH2 đơn vị đường, phần aglycon với 15C gồm có nhóm cacbonyl (ôc 177,6), 8C bậc bốn nhóm CH vòng thơm (93 - 164 ppm) đặc trưng cho khung flavonoit Phổ 'H-NMR cho thấy hai tín hiệu duplet Ôh 6,20 6,43 với J = Hz hai proton vị trí meta, chứng tỏ vòng A bị hai vị trí C-5 C-7 Hai tín hiệu duplet kép với cường độ cho tín hiệu 2H h 8,03 6,88 cho thấy vị trí C-4’ vòng B bị Đơn vị đường 191 xác định (3-glucose dựa vào độ dịch chuyển hóa học số tương tác tín hiệu cacbon proton anome ôc 101,03; ÔH5,45 (J = 7,5 Hz) * Quercetin-3-0-Ị3-D-glucosit (192): Phổ ESI-MS chất 192 cho pic [M + H]+ m/z 465 ứng với công thức phân tử C21H20O12 Phổ 1H- l3C5 NMR chất 192 hoàn toàn tương tự 191, flavonoit glucosit hóa C-3 Chất 192 có thêm nhóm hydroxy vị trí C-3’ vòng B Điều thể qua tín hiệu proton H-2’ (7,58, d, J = Hz), H-5’ (6,84, d, J = Hz) H-6 ’ (7,58, dd, J = 2; Hz) xuất thêm cacbon bậc bốn, tăng 16 đơn vị khối lượng phân tử chất 192 so với 191 phổ ESI-MS Các số liệu phổ 'H- 13C- NMR 192 hoàn toàn đồng vói số liệu phổ quercetin-3-0-ị3-D-glucosit tài liệu Bàng 3.2: số liệu phổ 'H-NMR (500 MHz) 13C-NMR (125 MHz) chất 191,192,193 191 (CD3OD) VỊ trí ÔH (J = Hz) 5c Aglycon 156,5 (C) 133,3 (C) 177,6 (C) 161,3 (C) 98,8 (CH) 6,20 d (2) 164,3 (C) 93,8 (CH) 6,43 d (2) 156.4(C) 104,1 (C) 10 r 121,0 (C) 2’ 131,0 (CH) 8,03 dd (2, 7) 115,2 (CH) 6,88 dd (2,7) 3’ 4’ 160,1 (C) 115,2 (CH) 6,88 dd (2,7) 5’ 6’ 131,0 (CH) 8,03 dd (2, 7) Phần đường 1” 101,0 (CH) 5,45 d (7,5) 2” ,12-3,50 74,3 (CH) 3” 76,5 (CH) ,12-3,50 4” ,12-3,50 70,0 (CH) 5” 77,6 (CH) ,12-3,50 6” 61,0 (CH2) ,12-3,50 1” ’ 2” ’ 3’” 4’” 5” ’ 6’” - - Sc 192 (CD3OD) 1ÔH (J = Hz) Sc 193 (CD3OD) 5h (J = H z) 156,3 (C) 133,3 (C) 177,4 (C) 161,2 (C) 98,6 CH) 164,2 (C) 93,5 (CH) 156,1 (C) 104,0 (C) 121,6 (C) 115,2 (CH) 144,8 (C) 148,4 (C) 116,2 (CH) 121,6 (CH) 6,20 d (2) 6,84 d (9) 7,58 dd (2, 9) 158,5 (C) 135,6 (C) 179,4 (C) 162,9 (C) 99,9 CH) 165,9 (C) 94,8 (CH) 159,3 (C) 105,6 (C) 123,1 (C) 117,7 (CH) 145,8 (C) 149,8 (C) 116,1 (CH) 123,7 (CH) 101,0 (CH) 74,1 (CH) 76,5 (CH) 70,0 (CH) 77,5 (CH) 61,0 (CH2) 5,45 3,08 3,08 3,08 3,08 3,08 104,7 (CH) 75,7 (CH) 78,2 (CH) 71,4 (CH) 77,2 (CH) 68,6 ¿ H z ) - - 6,40 d (2) - 7,58 d (2) - d (7,5) - 3,33 - 3,33 - 3,33 - 3,33 - 3,33 102,4 (CH) 72,1 (CH) 72,3 (CH) 73,9 (CH) 69,5 (CH) 17,9 (CH3) - 6,22 d (2,0) 6,41 d (2,0) - 7,69 d (2) - 6,90 d (8,5) 7,65 dd (8,5; 2) 5,12 d (7,5) 3,50 -3,25 3,50 -3,25 3,50 -3,25 3,50 -3,25 3,82 dd (11;1,5) 3,50 -3,25 4,54 d (1,5) 3,66 dd (3,5; 2) 3,56 dd (3,5; 9,5) 3,50 -3,25 3,50 -3,25 1,14 d (6,5) * Quercetin-3-rutinosit (rutin) (193): Phổ ESI-MS chất 193 cho pic [M+H]+ Ở m/z 611 ứng với công thức phân tử C27H30O16 Các số liệu cộng hưởng từ hạt nhân 'H- 13C- NMR cho phép xác định hai gốc đường tương ứng rhamnosyl glucosyl thông qua tín hiệu proton anome ÔH4,84 (J = 1,5 Hz) 5,12 (J = 7,5 Hz) với tín hiệu nhận dạng nhóm metyl metylen õc 17,9 (C-6’” ) 68,6 (C-6”) số liệu phổ 'H- 13C-NMR phàn aglycon phù hợp với cấu trúc quercetin So sánh với tài liệu công bố cho phép kết luận chất 193 quercetin-3rutinosit hay gọi rutin 3.1.3 Nhận xét thành phần hóa học F polyanthoides: Flavonoit lớp chất có Các họp chất có hoạt tính oxy hóa, kháng viêm Điều phần giải thích công dụng Cách thư đa hùng y học cổ truyền 3.2 Các chất phân lập từ Fissistigma poilanei 3.2.1 Các aporphin ancaloit Từ cành F poilanei, họp chất aporphin ancaloit họp chất flavonoit glycosit phân lập 197 wO H \ ^ ?** 198 * 8-Hydroxy-9-metoxy-l,2-metylendioxyaporphin (194): Công thức phân tử chất 194 C 19H 19NO4 suy từ phổ HR-ESI MS (pic [M + H]+ m/z = 326,13887) Phổ 'H-NMR tín hiệu nhóm N-metyl (ÔH 2,61), nhóm metoxy (ÔH 3,92), hai proton nhóm metylendioxy (ỖH 5,92 6,06), tín hiệu singlet proton vòng thơm (ÔH 6,53) cặp tín hiệu proton thơm có tương tác J = 8,5 Hz (ÔH7,62 6,82) Phổ 13CNMR DEPT có 19 tín hiệu cacbon bao gồm nhóm N-metyl ôc 43,6, nhóm metoxy ôc 56,1, bốn nhóm metylen ôc 100,6; 26,2; 28,9; 53,5; bốn nhóm CH nguyên tử cacbon bậc Hình 3.2.8: Phổ HMBC hợp chất 194 Tương tác proton gần H-4/H-5, H-6a/H-7, H-6a-H7 H-10/H-11 thể rõ phổ COSY Thông qua việc phân tích phổ HSQC HMBC, cấu trúc 194 xác định 8-hydroxy-9metoxy-1,2-metylendioxyaporphin Bảng 3.3 : số liệu phổ 'H-NMR (500 MHz) 13C-NMR (125 MHz) hai chất 194,195 _ Vị trí 194 (CDCI3) ÔH(J = Hz) 3a 5c 142,3 (C) 146,7 (C) 106,9 (CH) 126,4 (C) 28,9 (CH2) 53,5 (CH2) 6a 61,8 (CH) 26,2 (CH,) 7a 10 11 lia llb llc -CH2-0 121,4 (C) 142,3 (C) 145,8 (C) 108,6 (CH) 118,7 (CH) 124,8 (C) 116,7 (C) 126,4 (C) 100,6 (CH2) -OCH3 3-OCH3 N-CH3 56,1 (CH3) 5,92 d (1,5) 3,93 s - - 43,6 (CH3) 2,61 s - 6,52 s - 3,16m 2,65 m 3,11 m 2,55 m 3,17 dd (4,5; 15) 3,67 dd (4,5; 15) ôc 142,2 (C) 135,2 (C) 139,5 (C) 119,1(0 22,7 (CH2) 195 (CDCI3) ÔH(J —Hz) 53,5 (CH2) 61,8 (CH) 27,5 (CH,) 2,32 t (15) - 3,14 m 2,77 m 3,09 m 2,50 m 3,15 m 3,68 dd (4,5; 15) 2,291 (15) 124,9 (C) 142,2 (C) 145,3 (C) 108,7 (CH) 118,1 (CH) 126,5 (C) 111,3 (C) 127,2 (C) 100,7 (CH2) - 6,82 d (8,5) 7,62 d (8,5) - 6,10 d (1,5) 56,1 (CH3) 59,5 (CH3) 45,9 (CH3) - 6,81 d (8,5) 7,57 d (8,5) - 6,07 d (1,5) 5,92 d (1,5) 3,94 s 4,02 s 2,61 s * Oxocrebanin (14) kuafumin (16): Hợp chất 14 16 thu dạng hỗn họp kết tinh màu đỏ với tỷ lệ 2,7 : suy từ đường tích phân phổ 'H-NMR Phổ 'H- 13CNMR hỗn hợp có đặc trưng bật hợp chất oxoaporphin với có mặt nhóm xeton C-7 (ôc 181,8) Phổ 'H-NMR thể cặp tín hiệu hai chất theo tỷ lệ với dạng vạch độ dịch chuyển hóa học Điểm phân biệt chúng xuất tín hiệu proton thom H-3 ÔH7,10 họp chất 14 tín hiệu nhóm metoxy ỖH4,25 họp chất 16 Nhóm metoxy C-3 chất 16 khẳng định khác biệt rõ ràng độ dịch chuyển hóa học H-4 (Aô = 0,37) 10 14 16 Cuối cùng, cấu trúc 14 xác định oxocrebanin 16 kuafiimin thông qua việc so sánh liệu phổ ^-N M R với tài liệu tham khảo 3.2.2 Các ýỉavonoit glycosit * Astilbin (196): Chất 196 cho pic [M+H]+ m/z 451 phổ ESI-MS, phù hợp với công thức phân tử C21H20O 11 Phổ 13C-NMR có mặt 21 nguyên tử cacbon, tín hiệu CH nhóm CH3 đơn vị đường, phần aglycon với 15C gồm có nhóm cacbonyl liên họp (ôc 196,0), c bậc bốn nhóm CH có nhóm CH vòng thơm (93,0 164,0 ppm) đặc trưng cho khung flavonol số liệu phổ 1H- l3C-NMR phần aglycon phù họp với cấu trúc taxifolin Đơn vị đường chất 196 xác định a-L-rhamnose độ dịch chuyển hóa học số tương tác tín hiệu cacbon proton anome ôc 02,1 ; Ôh 4,09 (J = 1,5 Hz) Đơn vị rhamnose kết nối với phần aglycon vị trí C-3 thể qua tương tác H -l” với C-3 phổ HMBC Dựa vào phổ ID-, 2D-NMR kết hợp với tài liệu công bố, chất 196 xác định: (2R,3 R)-3,3 ’,4 ’,5,7-pentahydroxyflavanon-3 -O-a-L-rhamnosit hay gọi astilbin * (+)-Catechin-3-0-a-L-rhamnosit (197): Phổ ESI-MS chất 197 cho pic [M + H]+ m/z 439 ứng với công thức phân tử C21H20O 10 Phổ 'H- 13C-NMR cho thấy flavan rhamnosit: nhóm CH2 ôc 28,0 hai nhóm methin có gắn với oxy ÔH4,63 (1H, d, J = 8,0 Hz), ôc 81,1 ÔH 3,96 m, ôc 76,0 với vắng mặt tín hiệu cacbonyl Ngoài tín hiệu nêu trên, phổ ]H- 13C-NMR chất 197 tương tự phổ chất 196 Các số liệu phổ 'H- 13C- NMR 197 hoàn toàn đồng với số liệu phổ (+)-catechin 3-O-a-L-rhamnopyranosit Chất tách từ Erythroxylum novogranatense *Quercetin-3,7-dimetylete-3 ’-0-a-L-rhamnopyranosyl-(l —>2)-/3-Dglucopyranosit (198): Họp chất 198 cho pic [M+H]+ m/z 639 phổ ESI-MS, phù họp với công thức phân tử C29H34O16 Phổ 'H-NMR cho thấy tín hiệu vùng nhân thơm ÔH7,77 (1H, d, J = 2,0 Hz), 7,68 (1H, dd, J 11 = 8,5 2,0 Hz), 6,99 (1H, d, J = 8,5 Hz), 6,79 (1H, J = 2,0 Hz) 6,35 (1H, d, J = 2,0 Hz) Các tín hiệu gán cho H-2’, H-6’, H-5’, H-8 H-6 tưong ứng Bên cạnh đó, hai tín hiệu singlet Ôh 3,80 3,85 có mặt nhóm metoxy Tín hiệu ÔH5,24 (1H, d, J = 1,5 Hz) 5,07 (1H, d, J = 7,5 Hz) tưcmg ứng với proton anome gốc rhamnosyl glucosyl Phần rhamnosyl liên kết với gốc glucosyl vị trí C-2” thể dịch chuyển tín hiệu C-2” phía trường thấp (ôc 77,0) tín hiệu C -l” phía trường cao (ôc 99,2) phổ 13CNMR So sánh với tài liệu công bố cho phép rút kết luận chất 198 quercetin-3,7-dimetylete-3 ’-0-a-L-rhamnopyranosyl-( 1—»2)-ß-D-gluco pyranosit Hợp chất phân lập lần từ Dasymaschalon sootepense, họ Annonaceae 3.2.3 Nhận xét thành phần hóa học F poilanei: Cây F poilanei mang đặc điểm chung với khác chi Fissistigma: giàu aporphin ancaloit ílavonoit - lớp chất có hoạt tính sinh học Từ định hướng cho việc nghiên cứu hoạt tính hợp chất 3.3 Các chất phân lập từ Miliusa sinensis Từ cành Mỉliusa sinenis, phân lập 10 hợp chất: ílavanon (4 hợp chất), chalconoit (3 họp chất) số chất khác (1 triterpen, oxoaporphin ancaloit flavon) 12 3.3.1 Các hợp chất flavanon * Pỉnostrobin (113): Công thức phân tử C 16ỈỈ 14O4 chất 113 đưa dựa vào việc phân tích liệu phổ EI-MS ([M]+ = 270) kết họp với phổ NMR Dải hấp thụ 1644 cm' phổ IR cho biết có mặt nhóm cacbonyl liên hợp Trên phổ 13C-NMR xuất 16 tín hiệu gồm 5C bậc nhóm cacbonyl liên hợp (195,7 ppm), nhóm CH nhân thơm (94 128 ppm), nhóm metylen (43,3 ppm) nhóm metoxy (55,6 ppm) (bảng 3.6) Vùng nhân thơm phổ 'H-NMR cụm tín hiệu proton Sh 7,36 - 7,45 hai tín hiệu duplet ÔH6,06 (J = Hz) 6,02 (J = Hz) cho thấy vòng A chất 113 bị vị trí 5, vòng B không bị Tín hiệu OH 5h 12,01 đặc trưng cho nhóm OH C-5 (có liên kết cầu hidro nội phân tử), nhóm metoxy C-7 Cụm tín hiệu duplet kép Ôh 5,39 (H-2, J= 13 Hz); 2,80 (H-3a, J = 17 Hz) 3,06 (H-3b, J= 17 13 Hz) xem “vân tay” nhận dạng nhóm hợp chất khung flavanon Từ việc phân tích phổ kết hợp so sánh tài liệu cho phép xác định chất 113 5-hydroxy-7-metoxy-flavanon hay gọi pinostrobin * 5-Hydroxy-7,4’-dimetoxy-flavanon (114): Các liệu phổ cho thấy chất 114 có cấu trúc khung flavanon tương tự chất 113 Chất 114 có khối lượng phân tử lớn chất 113 30 đơn vị khối, điều gợi ý phân tử có gắn thêm nhóm metoxy Giả thiết khẳng định thêm qua việc xuất tín hiệu nhóm metoxy ôc 55,7 5h 3,83 phổ 13Cvà 'H-NMR, tương ứng Nhóm metoxy vào vị trí 4’ vòng B thể qua dịch chuyển C-4’ phía trường thấp (ôc 160,1) Tín hiệu proton nhân thơm thuộc vòng B chất 114 chia thành 13 duplet ÔH 7,38 (J = 8,5 Hz) 6,95 (J = 8,5 Hz) phổ 'H-NMR lần khẳng định giả thiết Các liệu phổ phù hợp với chất công bố là: 5-hydroxy-7,4’-dimetoxy-flavanon Bảng 3.6: số liệu phổ 13C-NMR (CDCI3, 125 MHz) chất 113,114, 115,116 Vị trí c 10 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ 6’ -OCH3 4’- OCH3 -OCH3 -OCH3 113 79,2 43,3 195,7 164,1 95,1 168,0 94,2 162,8 103,1 138,4 126,1 128,8 128,8 128,8 126,1 55,6 - 114 79,0 43,2 196,0 164,2 95,1 168,1 94,3 162,9 103,2 130,5 127,7 114,3 160,1 114,3 127,7 55,6 55,7 115 79,2 43,4 196,0 159,9 93,1 161,6 129,9 153,6 103,0 138,5 126,0 128,8 128,7 128,8 126,0 56,3 116 79,6 43,4 196,3 155,1 130,7 161,0 91,7 158,7 103,1 138,3 126,1 128,9 129,0 128,9 126,1 56,1 - - - 61,3 - - - 60,8 * 5-Hydroxy-7,8-dỉmetoxy-flavanon (115) 5-hydroxy-6,7-dimetoxyflavanon (116): Chất 115 chất 116 có giá trị m/z ion phân tử 300 ứng với công thức phân tử C 17H16O5 Hai chất có phổ 'H- 13C-NMR hoàn toàn tương tự Cả hai chất có cấu trúc giống chất 113 có thêm nhóm metoxy vào vị trí vòng A khung flavanon (bảng 3.6, 3.7) Khi có thêm nhóm metoxy vị trí độ dịch chuyển hóa học C-5 C-9 chuyển dời phía trường cao Nếu nhóm vị trí ảnh hưởng lên C-5 mạnh C9 ngược lại nhóm vị trí C-8 ảnh hưởng lên C-9 mạnh C-5 Qua việc phân tích phổ kết họp tham khảo tài liệu công bố xác định cấu trúc chất 115 5-hydroxy-7,8-dimetoxyflavanon chất 116 5-hydroxy-6,7-dimetoxy-flavanon 14 Báng 3.7: số liệu phổ ' h NMR (CDCỈ3 , 500 MHz) chất 113,114, 115,116 H 2’ 3’ 4’ 5’ 6’ 5-OH 7-OCH3 4’OCH3 8-OCH3 6-OCH3 113 5,39 (dd, 13,2) 2,80 (dd, 17, 2) 114 5,37 (dd, 13, 3) 2,80 (dd, 17, 3) 115 5,48 (dd, 12, 3) 2,80 (dd, 17, 3) 116 5,42 (dd, 13, 3) 2,80 (dd, 17, 3) 3,06 (dd, 17, 13) 6,06 (d, 2) 6,02 (d, 2) 3,10 (dd, 17, 13) 6,07 (d, 2) 6,04 (d, 2) 7,38 (d, 8,5) 6,95 (d, 8,5) 3,10 (dd, 17, 12) 6,12 (s) 3,10 (dd, 17, 13) - 6,13 (s) 7,36 - 7,48 (m) 7,38 - 7,48 (m) 11,95 (s) 3,89 (s) - 11,90 (s) 3,88 (s) - - - 12,01 3,79 (s) - 6,95 (d, 8,5) 7,38 (d, 8,5) 12,02( s) 3,80 (s) 3,83 (s) - - 3,79 (s) - - - - 3,85 (s) 7,36 - 7,45 (m) 3.3.2 Các họp chất chalconoit * Pashanon (2 ’,6 ’-dihydroxy-4’,5 ’-dimetoxy chalcon) (199): Phổ hồng ngoại có mặt nhóm cacbonyl liên họp (1645 cm'1) Công thức phân tử chất 199 xác định C^HiôOsdựa vào liệu phổ NMR phổ EI-MS Các liệu cho thấy chất 199 có cấu trúc đặc trưng chalcon Trên phổ 13C-NMR xuất 17 tín hiệu gồm cacbon bậc có tín hiệu nhóm cacbonyl liên họp (192,4 ppm), nhóm CH nhân thơm (92,8 - 128,9 ppm), nhóm olephin (126,7 143,4 ppm) nhóm metoxy (55,6 61,4 ppm) Hai tín hiệu duplet độ dịch chuyển 7,86 (J = 15,5 Hz) 8,14 (J = 15,5 Hz) phổ 'H-NMR đặc trưng cho hai proton vị trí a Ị3 khung chalcon Tín hiệu singlet Ôh 13,88 dấu hiệu nhận biết nhóm hydroxy tạo liên kết cầu hidro với nhóm cacbonyl, cho phép xác định nhóm OH vị trí 2’ Cụm tín hiệu ÔH 7,38 - 7,64 vòng B khung chất 199 không bị Vị trí nhóm vòng A khẳng định lại qua phân tích phổ HMBC thông qua tương tác proton OH-2’ với C -l’, C-2’ C-3’; H-3’ với C-l \ C -5\ Từ cho phép kết luận chất 199 15 là: 2,,6’-dihydroxy-4’,5’-dimetoxy chalcon hay gọi pashanon Chất phân lập từ Didymocarpus pedicellata, họ Na (Annonacea) Onychium auratum * Dỉhydropashanon (112): Chất 112 có khối lượng phân tử 302 phù hợp với công thức C17H18O5 Phổ ^-N M R cho thấy tín hiệu nhóm - CH2 CH2 - ÔH 3,03 3,42 (t, J = 8,0 Hz), hai nhóm metoxy ÔH 3,83 3,88, tín hiệu singlet proton nhân thom ÔH6,06, tín hiệu vòng phenyl ÔH7,21 - 7,31 Giống chất 199, phổ 'H-NMR chất 112 xuất tín hiệu nhóm hydroxy Ôh 13,41 Các số liệu gợi ý hợp chất 2’-hydroxy-dihydrochalcon với hai nhóm hydroxy, hai nhóm metoxy vòng A Phổ 13C-NMR chất 112 có nhiều điểm chung với chất 199 (bảng 3.8), ngoại trừ khác độ dịch chuyển hóa học C a CỊ3 với dịch chuyển phía trường thấp nhóm cacbonyl (Aô =12,1 ppm) Chất phân lập lần từ Lindera erythrocarpa, họ Long não (Lauraceae) * ’-Dihydroxy-4’,5’,4-trimetoxy-dihydrochalcon (200) Chất 200 cho pic [M-H]" m/z 331,11889 phổ HR-ESI MS, giá trị tính toán lý thuyết cho CigHiọCV 331,11871 Từ suy công thức phân tử họp chất 200 Ci8H2o06 Các liệu phổ cho thấy chất 200 có cấu trúc khung dihydroxychalcon tương tự chất 112 Sự chênh lệch 30 đơn vị khối khối lượng phân tử hai chất gợi ỷ phân tử 200 có thêm nhóm metoxy Giả thiết khẳng định thêm qua việc xuất tín hiệu nhóm metoxy ôc 55,3 ÔH 3,78 phổ l3C- 'HNMR, tương ứng Nhóm metoxy vào vị trí vòng B thể qua dịch chuyển C-4 phía trường thấp (200 õc 157,9) so với chất 112 (ôc 126,0) Tín hiệu proton nhân thơm thuộc vòng B chất 200 chia thành triplet kép ÔH7,18 (dt, J = 8,5; Hz) 6,84 (dt, J = 8,5; Hz) phổ 'H-NMR Nhận định khẳng định thông qua tương tác nhóm metoxy ÔH3,78 với ôc 129,4 (C-2, C-6); ỖH3,78 với 5c 157,9 (C-4) phổ HMBC 16 “BS" MSH32-CDC13-1H il MSH32-CDC13-C13CPD&DEPT fl f f, JJ5 III DEPT13S JL ■JL ■ J _ L i_ J _ au CH3 iL v ' .■■■• Hình 3.3.7: Phổ ]H-NMR hợp chất 200 L III Hình 3.3.8: Phổ I3C-NMR DEPT hợp chất 200 Qua việc phân tích phổ hai chiều HSQC, HMBC cấu trúc 200 xác định 2,,6,-dihydroxy-4,,5’,4-trimetoxy-dihydrochalcon Theo tra cứu chúng tôi, chưa có tài liệu công bố 17 việc phân lập họp chất từ tự nhiên Do vậy, hợp chất từ Miliusa sinensis Bảng 3.8: số liệu phổ 13C-NMR (125 MHz) 'H-NMR (500 MHz) cua chất 112,199, 200 (CPC13) Vi trí r 2’ 3’ 4’ 5’ 6’ c =0 Ca Cị3 5’-OMe 4’-OMe 4-OMe 6’ OH 2’-OH 112 141,6 128,4 128,5 126,0 128,5 128,4 103,8 162,0 92,6 158,0 127,8 151,2 204,5 45,3 30,5 61,4 56,0 - Sc 199 200 112 135,5 133,6 128,6 129,4 7,26-7,31 128,9 113,9 130,2 157,9 7,21 (tt, 8,5; 1,5) 128,9 113,9 7,26-7,31 128,6 129,4 104,3 103,8 163,1 162,0 92,8 92,6 6,07 (s) 158,3 158,0 128,0 127,8 151,0 151,2 192,4 204,6 126,7 45,5 3,42 (t, 8) 143,4 29,6 3,03 (t, 8) 61,4 61,4 3,83 (s) 56,0 56,0 3,89 (s) 55,3 6,77 (s) 13,41 (s) ÔH 199 200 - - 7,64 (dd, 8, 2,5) 7,38 (t, 8) 7,39 (m) 7,38 (t, 8) 7,64 (dd, 8; 2,5) 7,18 (dt, 8,5; 2) 6,84 (dt, 8,5; 2) - - - 6,84 (dt, 8,5; 2) 7,18 (dt, 8,5; 2) - - 6,10 (s) 6,06 (s) - - - - - - 7,86 (d, 15,5) 8,14 (d, 15,5) 3,86 (s) 3,90 (s) 3,38 (t, 8) 2,97 (t, 8) 3,83 (s) 3,89 (s) 3,78 s 6,80 (s) 13,40 (s) - 6,93 (s) 13,88 (s) * 24-Metylencycloartan-3p,2ỉ-dìol (201): Phổ EI-MS chất 201 cho pic [M]+ m/z 456, tưong ứng với công thức C31H52O2 Phổ IR gợi ý có mặt nhóm hydroxy (3350 cm"1) liên kết đôi (1650 cm"1) Trên phổ 13C-NMR xuất 31 cacbon gồm nhóm metyl, 13 nhóm CH2, nhóm CH cacbon bậc Phân tích phổ !H- 13C-NMR cho thấy họp chất thuộc khung cycloartan, thể rõ tín hiệu proton H19 vòng cyclopropan ỗH 0,31 0,54 (2H, d, J = 4,5 Hz), cấu hình nhóm hydroxy xác định |3 dựa vào tín hiệu H-3 Ôh 3,26 (m) Hai tín hiệu proton Ôh 3,71 (1H, d, J = 5,5 Hz) 3,60 (1H, dd, J = 10 Hz) nhóm metylhydroxy ôc 62,5 Hai cacbon sp2 cộng hưởng ôc 156,6 106,3 (CH2) tưong ứng với liên kết đôi > c = CH2 (Ôh 4,72 4,67) Kết phân tích phổ cho thấy số liệu phổ 18 chất 201 phù hợp với số liệu 24-metylencycloartan-3ị3,21-diol Chất phân lập từ Lithocarpus polystacha, họ sồi (Fagaceae) * Liriodenin (13): Phổ EI-MS chất 13 cho pic ion phân tử m/z = 275 [M ]+ ứng với công thức phân tử C17H19NO3 Phổ 'H-NMR cho thấy tín hiệu proton thơm từ 7,15 đến 8,85 ppm tín hiệu singlet proton ÔH6,36 - đặc trưng cho proton nhóm dioxymetylen khung oxoaporphin ancaloit Điều thể rõ phổ l3C-NMR với có mặt tín hiệu cacbon tương ứng Sc= 102,5 đặc biệt tín hiệu nhóm xeton C-7 (§c= 182,3) Việc xuất tín hiệu proton thom phổ proton cho thấy vị trí khung chưa Cặp tín hiệu ÔH 8,79 7,76 với J = Hz đặc trưng cho H-5 H-4 Bốn proton lại với số J = Hz proton vòng D khung Từ việc phân tích số liệu phổ kết họp với so sánh tài liệu, cấu trúc 13 xác định liriodenin MSE6-CDC13&MeOD-lH Hình 3.3.11: Phổ lH-NMR hợp chất 13 *3,5-Dihydroxy-7,3’,4’-trimetoxyflavon (202): Pic phân tử m/z 344 hợp chất 202 phổ EI-MS ứng với công thức C i8H i60 Trên phổ 13CNMR xuất 18 tín hiệu gồm 10 cacbon bậc có tín hiệu nhóm cacbonyl liên hợp (175,2 ppm), nhóm CH nhân thơm (92,3 - 123,5 19 ppm), nhóm metoxy (56,1; 56,0; 55,9 ppm) Vùng nhân thơm phổ 'H-NMR tín hiệu proton ÔH7,84 - 6,38 Hai tín hiệu duplet ÔH 6,50 (J = Hz) 6,38 (J = Hz) gợi ý vòng A bị hai vị trí C-5 C-7 Tín hiệu OH Ôh 11,71 đặc trưng cho OH có liên kết cầu hidro nội phân tử vị trí C-5 Ba tín hiệu proton lại thuộc vòng B có ôh7,83 (dd, J = 8,0; 2,0 Hz), 7,79 (d, J = 2,0 Hz), 7,01 (d, J = 8,0 Hz) gán cho H-6 ’, H-2’, H -5\ Ba tín hiệu đơn ÔH3,99; 3,97 3,90 thuộc nhóm metoxy Tóm lại, liệu phổ 202 phù họp với chất công bố 3,5-dihydroxy-7,3’,4,-trimetoxyflavon phân lập lần đầu vào năm 1972 từ Lurrea cuneifolia Cav 3.3.4 Nhận xét thành phần hóa học M sinensis: Cây có đặc điểm với nghiên cứu chi Miliusa giàu flavonoit Bên cạnh đó, thành phần có chứa ancaloit triterpen 3.4 Kết thử hoạt tính sinh học 3.4.1 Kết thử hoạt tính vỉ sinh vật kiểm định Các dịch chiết số hợp chất tách từ F polyanthoides, F poilanei, M sinensis thử hoạt tính vi sinh vật kiểm định chủng gram (-): Pseudomonas aeruginosa (Pa), E coli (Ec); chủng gram (+): Staphylococcus aureus (Sa), Bacillus subtillis (Bs), Lactobasillus fermentum (Lf), Enterococus faecium (Ef) chủng nấm: Candida albicans (Ca.) Kết cho thấy dịch chiết etyl axetat M.sinensỉs có hoạt tính chủng vi sinh gram (+): Staphylococcus aureus Hai aporphin ancaloit từ F poilanei, họp chất 194: (-)-8-hydroxy-9metoxy-1,2- metylendioxyaporphin 195: (-)-8-hydroxy-3,9-dimetoxy1 ,2 - metylendioxyaporphin có hoạt tính kìm hãm phát triển số chủng vi sinh vật Chất 194 có hoạt tính chủng gram (+): Staphylococcus aureus, Bacillus subtillis với giá trị IC50 14,8 18,7 Ịig/ml Chất 195 có hoạt tính với 20 chủng với giá trị IC50 tương ứng 15,5 29,8 pg/ml Bên cạnh đó, chất 195 có hoạt tính với chủng Lactobasillus fermentum, Enterococus faecium với giá trị IC50 tương ứng 38,8 41,4 pg/ml Đáng ỷ chất 13 (liriodenin) từ Miliusa sinensis', hợp chất thể hoạt tính ức chế chủng vi khuẩn gram (+) chủng nấm men c albicans Trong đó, hoạt tính ức chế mạnh với chủng Staphylococcus aureus, Bacillus subtillis với giá trị IC50 tương ứng 0,59 0,68 Jig/ml Bảng 3.9: Kết thử hoạt tính vi sinh vật kiểm định STT Tên mẫu Cặn n-hexan Cặn EtOAC Cặn BuOH Cặn n-hexan Cặn EtOAC Cặn BuOH Cặn n-hexan Cặn EtOAC Cặn BuOH 10 Chất 194 11 Chất 195 12 Chất 200 13 Chất 202 14 Chất 13 Tên chủng vi sinh vât kiểm đinh Sa Bs Ec Lf Ef IC50 (ug/ml) IC 50 (M g / m l) >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 > 128 38,8 >256 > 128 8,95 IC í u g / m l ) Pa Ca IC 50 ( u g / m l ) IC 50 ( u g / m l ) >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 > 128 > 128 > 128 >64 >256 > 128 >256 >64 >256 > 128 >256 >64 >256 > 128 6,94 IC 50 ( n g / m l ) IC 50 ( | ig / m l ) Cây F polyanthoides >256 >256 >256 >256 >256 >256 Cây F poilanei >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 Cây Miliusa sinensis >256 >256 >256 >256 153 >256 >256 >256 >256 Chất > 128 14,8 18,7 41,4 15,5 29,8 >256 >256 > 256 > 128 > 128 > 128 0,59 0,68 10,18 3.4.2 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào Hoạt tính gây độc tế bào dịch chiết số họp chất tách từ F polyanthoides, F poilaneỉ M.sinensis thử dòng tế bào ung thư người là: ung thư biểu mô KB; ung thư gan Hep G2; ung thư phổi LU; ung thư vú MCF - Dịch chiết n-hexan etyl axetat M sinensis có hoạt tính với dòng tế bào, có hoạt tính tốt dòng tế bào Hep G2 21 Đáng ý aporphin ancaloit từ F poilanei, chất 194 195 có hoạt tính dòng tế bào ung thư Trong đó, hợp chất 194 thể hoạt tính mạnh với dòng tế bào MCF - với IC50 4,11 pg/ml họp chất 195 có hoạt tính gây độc mạnh với dòng tế bào Hep G2 (IC50 3,39 pg/ml) Chất 13, liriodenin, oxoaporphin ancaloit từ M sinensis thể hoạt tính dòng tế bào ung thư, hoạt tính mạnh với hai dòng tế bào KB MCF - với IC50 tưong ứng 2,30 2,89 pg/ml Báng 3.10: Kết thử hoạt tính gây độc tế bào STT Tên mẫu Tên dòng tế bào MCF IC50 (ug/ml) Cây Cặn n-hexan Cặn EtOAC Cặn BuOH Cặn n-hexan Cặn EtOAC Cặn BuOH Cặn n-hexan Cặn EtOAC Cặn BuOH KB IC50 (ug/ml) - - - - - - >128 >128 >128 F poilanei >128 >128 >128 Cây HepG2 IC50 (ug/ml) F polyanthoides >128 >128 >128 Cây Lu IC50 (ug/ml) >128 62,24 - - - - 59,87 > 128 >128 Milỉusa sinensis 86,60 72,52 >128 78,33 75,09 36,72 42,50 - - 82,04 59,13 >128 6,30 3,59 >128 >128 5,23 7,05 >128 >128 2,30 Chất 10 11 12 13 14 Chất 194 Chất 195 Chất 200 Chất 202 Chất 13 4,11 7,85 >128 >128 2,89 7,20 8,51 >128 >128 6,66 8,86 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Từ Cách thư đa hùng (Fissistigma polyanthoỉdes) phân lập hợp chất flavonoit là: taxifolin (162), -(-)epicatechin (190), 22 kaempferol-3-O-p-D-glucopyranosit (191), quercetin-3-O-p-D- glucopyranosit (192) rutin (193) Từ cành Cách thư poilanei (Fissistigma poilanei) phân lập hợp chất thuộc khung aporphin ancaloit flavonoit gồm: 8hydroxy-9-metoxy-l,2-metylendioxyaporphin (194), 8-hydroxy-3,9dimetoxy-l,2-metylendioxyaporphin (195), hỗn họp oxocrebanin (14) kuafumin (16), astilbin (196), catechin-3-O-a-L-rhamnopyranosit (197) quercetin-3,7-dimetoxy-3’-0-a-L-rhamnopyranosyl-( 1-^2)-p-D-glucopyranosit (198) Trong đó, chất 194 195 hai họp chất mói Đây kết nghiên cứu thành phần hóa học F poilanei Từ cành Song môi tàu (Miliusa sinensis), phân lập 10 hợp chất gồm flavanon, chalconoit, triterpen, oxoaporphin ancaloit flavon Đó là: pinostrobin (113), 5-hydroxy-7,4’-dimetoxyflavanon (114), 5-hydroxy-7,8-dimetoxy-flavanon (115), 5-hydroxy-6,7dimetoxy-flavanon (116), dihydropashanon (112), pashanon (199), 2’,6’dihydroxy-4’,5’,4-trimetoxy-dihydrochalcon (200), 24-metylencyc loarían 3p,21-diol (201), liriodenin (13), s^-dihydroxy^^’^ ’-trimetoxyflavon (202) Trong đó, chất 200 hợp chất lần phân lập từ tự nhiên Các dịch chiết số họp chất phân lập từ nghiên cứu thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định hoạt tính gây độc tế bào Kết cho thấy chất 194 có hoạt tính ức chế chủng gram (+): Staphylococcus aureus, Bacillus subtillis (IC50: 14,8; 18,7 pg/ml) Chất 195 có hoạt tính ức chế với chủng Staphylococcus aureus, Bacillus subtillis Lactobasillus fermentum, Enterococcus (IC50: 15,5 ; 29,8; 38,8; 41,4 pg/ml) Cả hai ancaloit có hoạt tính ức chế dòng tế bào ung thư thử nghiệm Hợp chất 194 thể hoạt tính mạnh với dòng tế bào ung thư vú MCF - (IC50: 4,11 pg/ml) họp chất 195 có hoạt tính gây độc mạnh với dòng tế bào ung thư gan Hep G2 (IC50 3,39 pg/ml) Bên cạnh hoạt tính ức chế mạnh phát triển chủng vi khuẩn gram (+) chủng nấm 23 c albicans, họp chất 13 - liriodenin - thể hoạt tính dòng tế bào ung thư, hoạt tính ức chế mạnh với hai dòng ung thư biểu mô KB ung thư vú MCF - (IC50: 2,30; 2,89 pg/ml) KIÉN NGHI Nên tiếp tục nghiên cứu sâu, rộng hoạt tính sinh học chất phát 194,195 liriodenin (13) DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ LĨÊN QUAN ĐÉN LUẬN ÁN Trần Thi Thanh Thủy, Trần Đức Quân, Phạm Thị Ninh, Nguyễn Thị Hoàng Anh, Trần Văn Sung, 2009 Nghiên cứu thành phần hóa học Cách thư đa hùng [Fissistigma polyanthoides (DC.) Merr.] họ Na (Annonaceae) Tạp chí Hóa học, T.47 (4A) tr 455 - 458 Tran Thi Thanh Thuv, Tran Due Quan, Nguyen Thi Hoang Anh, Tran Van Sung, 2008 Aporphine and Oxoaporphine from Fissistigma poilanei (Ast) Tsiang & p T Li (Annonaceae) International Scientific Conference on “Chemistry for Development and Intergration”Proceeding, Publishing House for Science and Technology, Hanoi, Vietnam, 9/2008,234-239 Trần Thi Thanh Thủy Trần Đức Quân, Nguyễn Thị Hoàng Anh, Trần Văn Sung, 2007 Flavonol glucosit flavan từ Cách thư đa hùng [Fissistigma polyanthoỉdes (DC.) Merr.] họ Na (Annonaceae) Tạp chí Hóa học, T.45 (6A) tr 162 - 165 Tran Thi Phuong Thao, Nguyen Vu Anh, Ho Ngoe Anh, Tran Due Quan, Nguyen Thi Hoang Anh, Tran Thi Thanh Thuv, Tran Van Sung; Chemical studies on the two Vietnamese medicinal plants, Fissistigma petelotii and Fissistigma polyanthoides (Annonaceae) Proceeding of Vietnam-Japan Joint Symposium for Biotechnology and Material Science, Cantho, Vietnam, 2/2008, 12-18 Trần Thi Thanh Thủy, Trần Đức Quân, Nguyễn Thị Hoàng Anh, Trần Văn Sung, 2009 Flavonol glycosit từ Cách thư poilanei [Fissistigma poilaneỉ (Ast.) Tsiang & P.T.Li] họ Na (Annonaceae) Tạp chí Hóa học 47 (4), 434 - 437 24 ... ĐÀO TẠO VIỆN KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN HÓA HỌC Trần Thị Thanh Thủy NGHIÊN CỨU HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA MỘT SỐ CÂY TRONG CHI FISSISTIGMA VÀ MILIUSA HỌ NA (ANNONACEAE) TÓM TẮT LUẬN... luận án là: Nghiên cứu hóa học hoạt tính sinh học số chi Fissistigma Miliusa họ Na (Annonceae)“ 1.2 Mục tiêu luận án Tìm kiếm hợp chất có cấu trúc hóa học hợp chất có hoạt tính sinh học lý thú... sinh tổng họp hoạt tính sinh học Các họp chất ílavonoit: cấu trúc hóa học, sinh tổng họp hoạt tính sinh học Chương 2: Thực nghiệm Trình bày phương pháp nghiên cứu, cách phân lập, số vật lý số liệu