NGHIÊN cứu THÀNH PHẦN hóa học và HOẠT TÍNH SINH học của một số LOÀI hải MIÊN ở MIỀN TRUNG VIỆT NAM

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - LÊ THỊ HUYỀN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA MỘT SỐ LOÀI HẢI MIÊN Ở MIỀN TRUNG VIỆT NAM Chuyên ngành: Hóa Hữu Mã số : 62.44.01.14 (DỰ THẢO) TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC Hà Nội - 2017 Công trình hoàn thành tại: Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Người hướng dẫn khoa học 1: PGS TS Phan Văn Kiệm Người hướng dẫn khoa học 2: PGS TS Nguyễn Văn Đậu Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ trước Hội đồng cấp Đại học Quốc gia chấm luận án tiến sĩ họp …………………………………………… vào hồi , ngày tháng năm 2017 Có thể tìm hiểu luận án tại: - Thư viện Quốc gia Việt Nam - Trung tâm Thông tin - Thư viện, Đại học Quốc gia Hà Nội I GIỚI THIỆU LUẬN ÁN Đặt vấn đề Dược liệu Biển nguồn cung cấp dồi chất có hoạt tính sinh học thu hút quan tâm đặc biệt nhà khoa học giới Đã có nhiều hợp chất phát từ sinh vật biển sinh sống nơi có điều kiện sống khắc nghiệt từ sinh vật đặc biệt, dị thường, sinh vật có hệ thống phòng vệ Chính thế, hợp chất có đặc tính vô quý báu, tiềm tàng cho việc tạo thuốc chữa bệnh cho người Nhiều hoạt chất chiết xuất từ dược liệu biển định hướng vào nghiên cứu in vitro, nghiên cứu tiền lâm sàng, nghiên cứu lâm sàng nhằm tìm kiếm tác nhân hỗ trợ điều trị bệnh hiểm nghèo ung thư, Alzheimer, viêm nhiễm, sốt rét, bệnh lao Việt Nam nằm khu vực Thái Bình Dương, nơi có nguồn đa dạng sinh học vô phong phú Dọc theo chiều dài đất nước ta diện tích vùng biển vùng ngập mặn, lợi mang lại nguồn lợi vô phong phú quý giá, bao gồm loài cá, động vật đáy, rong biển, động thực vật phù du khu rừng ngập mặn Các nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học giới loài hải miên có cấu trúc hóa học đa dạng phong phú, nhiều hợp chất phát có hoạt tính sinh học lí thú Chính vậy, lựa chọn đề tài “Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học số loài hải miên miền Trung Việt nam” Đối tượng nghiên cứu luận án Mẫu Hải miên Smenospongia cerebriformis Duchassaing & Michelotti, 1864 đươ ̣c thu thập từ vùng biể n Vịnh Mốc, Quảng Trị, Viê ̣t Nam vào tháng năm 2015 Những đóng góp luận án 3.1 Lần nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học loài hải miên Smenospongia cerebriformis vùng biển miền Trung Việt Nam 3.2 Đã phân lập xác định cấu trúc hợp chất từ loài hải miên S.cerebriformis Các hợp chất là: smenohaimien A (SM1), smenohaimien B (SM2), smenohaimien C (SM3), smenohaimien D (SM4), smenohaimien E (SM5), smenohaimien F (SM6), smenocerone A (SM7), smenocerone B (SM8) 3.3 Lần hợp chất diterpene: amijiol (SM21) isoamijiol (SM22) phân lập từ ngành hải miên 3.4 Lần 11 hợp chất merosesquiterpene: Dictyoceratin C (SM9), polyfibrospongol A (SM10), polyfibrospongol B (SM11), 19-hydroxy-polyfibrospongol B (SM12), neodactyloquinone (SM14), dactyloquinone C (SM15), dactyloquinone D (SM16), dactylospongenone A (SM17), dactylospongenone B (SM18), dactylospongenone C (SM19), dactylospongenone D (SM20) phân lập từ giống Smenospongia 3.5 Lần hợp chất phân lập từ loài hải miên S.cerebriformis đánh giá hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư người bao gồm ung thư phổi người LU-1, ung thư vú người MCF-7, ung thư gan người HepG2, ung thư da người SK-Mel2 ung thư bạch cầu người HL-60 3.6 Lần hợp chất phân lập từ loài hải miên S.cerebriformis đánh giá hoạt tính kháng viêm dựa khả ức chế NO đại thực bào kích thích Lipopolysaccharide Bố cục luận án Luận án gồm: 147 trang chưa kể phụ lục, có 27 bảng số liệu, 93 hình vẽ, 69 tài liệu tham khảo Bố cục luận án: Mở đầu (2 trang); Chương 1: Tổng quan tài liệu (27 trang); Chương 2: Phương pháp nghiên cứu (7 trang); Chương 3: Thực nghiệm kết (10 trang); Chương 4: Kết Thảo luận (97 trang); Kết luận (2 trang); Kiến nghị (1 trang), Các công trình công bố (1 trang); Tài liệu tham khảo (6 trang); Phụ lục (97 trang) I NỘI DUNG LUẬN ÁN MỞ ĐẦU Phần mở đầu đề cập ý nghĩa khoa học thực tiễn luận án CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN Phần tổng quan trình bày nghiên cứu nước quốc tế vấn đề: 1.1 Giới thiệu chung hải miên 1.2 Tình hình nghiên cứu loài hải miên thuộc giống Smenospongia 1.3 Tình hình nghiên cứu loài hải miên Việt Nam CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Mẫu Hải miên Smenospongia cerebriformis Duchassaing & Michelotti, 1864 đươ ̣c thu thập từ vùng biể n Vịnh Mốc, Quảng Trị, Viê ̣t Nam vào tháng năm 2015 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp phân lập hợp chất Phối hợp phương pháp sắc ký bao gồm: sắc ký lớp mỏng (TLC), sắc ký lớp mỏng điều chế sắc ký cột (CC) 2.2.2 Phương pháp xác định cấu trúc hoá học hợp chất Phương pháp chung để xác định cấu trúc hóa học hợp chất kết hợp thông số vật lý với phương pháp phổ đại bao gồm: phổ khối phân giải cao (HR-ESI-MS), độ quay cực ( [ ]25D ), phổ cộng hưởng từ nhân NMR phổ lưỡng sắc tròn CD 2.2.3 Phương pháp xác định hoạt tính sinh học 2.2.3.1 Phương pháp đánh giá hoạt tính gây độc tế bào Hoa ̣t tính gây đô ̣c tế bào của các hoa ̣t chấ t đươ ̣c xác định theo phương pháp SRB 2.2.3.2 Phương pháp xác định khả cảm ứng apoptosis Xác định khả gây apoptosis mẫu thí nghiệm phương pháp nhuộm Hoechst 33342 Cơ chế gây chết hợp chất xác định dựa khả cảm ứng với enzyme caspase 2.2.3.3 Phương pháp đánh giá hoạt tính kháng viêm Đánh giá hoạt tính kháng viêm hợp chất phân lập thông qua tác dụng ức chế hợp chất sản sinh NO điều kiện đại thực bào RAW 264.7 kích thích với LPS CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 3.1 Phân lập hợp chất từ loài S cerebriformis Phần trình bày cách thức phân lập hợp chất từ loài hải miên S cerebriformis Hình 3.1 Sơ đồ phân lập hợp chất từ loài S.cerebriformis 3.2 Thông số vật lý kiện phổ hợp chất 3.2.1 Hợp chất SM1: Smenohaimien A (chất mới) Chất bột vô định hình, màu trắng [ ]25D : –11.0 (c 0.1, CHCl3) H- NMR (500 MHz, CDCl3) H (ppm): 1.83 (m, H-1)/1.44 (m, H-1), 1.27 (m, H-2)/1.88 (m, H-2), 2.09 (m, H-3)/2.29 (m, Hβ3), 1.56 (m, H-6)/1.59 (m, H-6), 1.48 (m, H-7)/1.44 (m, H-7), 1.65 (m, H-8), 1.21 (dd, J = 2.0, 12.0 Hz, H-10), 4.49 (s, H-11)/4.50 (s, H-11), 1.07 (s, H-12), 0.86 (d, J = 7.0 Hz, H-13), 0.77 (s, H-14), 1.29 (dd, J = 10.5, 15.5 Hz, H-15)/2.06 (dd, J = 2.0, 15.5 Hz, H-15), 2.27 (m, H-16), 5.30 (s, H18), 4.42 (d, J = 2.5 Hz, H-20), 3.87 (s, 19-OCH3) 13 C-NMR (125 MHz, CDCl3) C (ppm): 21.4 (C-1), 28.5 (C-2), 33.1 (C-3), 160.6 (C-4), 40.1 (C-5), 37.1 (C-6), 27.8 (C-7), 37.3 (C8), 39.6 (C-9), 48.5 (C-10), 102.5 (C-11), 20.7 (C-12), 16.5 (C-13), 18.0 (C-14), 37.9 (C-15), 50.7 (C-16), 203.6 (C-17), 103.7 (C-18), 186.3 (C-19), 76.1 (C-20), 58.9 (19-OCH3) 3.1.2 Hợp chất SM2: Smenohaimien B (chất mới) Chất bột màu trắng, vô định hình; [ ]25D : -12.0 (c 0,1, CHCl3) 1H- NMR (500 MHz, CDCl )  (ppm): 1.87 (m, H-1)/1.45 (m, H H-1), 1.22 (m, H-2)/1.90 (m, H-2), 2.11 (m, H-3)/2.32 (m, H-3), 1.48 (m, H-6)/1.61 (m, H-6), 1.49 (m, H-7)/1.45 (m, H-7), 1.39 (m, H-8), 0.90 (dd, J = 2.0, 12.0 Hz, H-10), 4.49 (s, H-11), 1.06 (s, H-12), 0.98 (d, J = 7.0 Hz, H-13), 0.80 (s, H-14), 1.75 (dd, J = 10.5, 15.5 Hz, H15)/1.78 (dd, J = 2.0, 15.5 Hz, H-15), 2.45 (m, H-16), 5.25 (s, H-18), 4.49* (H-20, tín hiệu bị chập), 3.84 (s, 19-OCH3) 13C-NMR (125 MHz, CDCl )  (ppm): 21.9 (C-1), 29.0 (C-2), C 33.1 (C-3), 160.6 (C-4), 40.1 (C-5), 37.3 (C-6), 27.5 (C-7), 37.3 (C8), 40.3 (C-9), 50.3 (C-10), 103.0 (C-11), 20.5 (C-12), 16.2 (C-13), 17.7 (C-14), 29.6 (C-15), 46.4 (C-16), 205.8 (C-17), 102.6 (C-18), 187.0 (C-19), 71.1 (C-20), 58.7 (19-OCH3) 3.1.3 Hợp chất SM3: Smenohaimien C (chất mới) Chất bột màu trắng, vô định hình; [ ]25D : - 43.0 (c 0,1, CHCl3) H- NMR (500 MHz, CDCl3) H (ppm): 2.30 (m, H-1)/1.56 (m, H-1), 1.25 (m, H-2)/1.91 (m, H-2), 2.06 (m, H-3)/2.34 (m, H-3), 1.22 (m, H-6)/1.46 (m, H-6), 1.42 (m, H-7)/1.39 (m, H-7), 1.43 (m, H-8), 0.93 (dd, J = 2.0, 12.0 Hz, H-10), 4.34 (s, H-11)/4.38 (s, H-11), 1.06 (s, H-12), 1.05 (d, J = 7.0 Hz, H-13), 0.94 (s, H-14), 2.86 (d, J = 14.5 Hz, H-15)/2.95 (d, J = 14.5 Hz, H-15), 7.10 (m, H-19), (s, H-22), 3.94 (s, 19-OCH3) 13 C-NMR (125 MHz, CDCl3) C (ppm): 23.3 (C-1), 28.7 (C-2), 33.0 (C-3), 160.4 (C-4), 40.4 (C-5), 36.4 (C-6), 28.0 (C-7), 37.4 (C-8), 43.0 (C-9), 49.4 (C-10), 102.5 (C-11), 20.5 (C-12), 18.2 (C-13), 17.4 (C14), 34.6 (C-15), 109.5 (C-16), 144.4 (C-17), 145.0 (C-18), 99.3 (C-19), 131.0 (C-20), 145.7 (C-21), 150.9 (C-22), 56.5 (18-OCH3.) 3.1.4 Hợp chất SM4: Smenohaimien D (chất mới) Chất bột màu trắng, vô định hình; [ ]25D : +75.0 (c 0,1, CHCl3) 1H- NMR (500 MHz, CDCl )  (ppm): 2.14 (m, H-1)/1.30 (m, H H-1), 1.28 (m, H-2)/1.90 (m, H-2), 2.10 (m, H-3)/2.32 (m, H-3), 1.38 (m, H-6)/1.66 (m, H-6), 1.82 (m, H-7)/1.65 (m, H-7), 1.46 (m, H-8), 1.20 (br d, J = 10.5 Hz, H-10), 4.47 (s, H-11)/4.50 (s, H-11), 1.07 (s, H-12), 1.13 (d, J = 7.0 Hz, H-13), 10.08 (s, H-14), 2.80 (d, J = 15.0 Hz, H-15)/3.05 (d, J = 15.0 Hz, H-15), 7.29 (s, H-21), 3.97 (s, 18OMe), 3.90 (s, 22-OCH3) 13C-NMR (125 MHz, CDCl )  (ppm): 23.2 (C-1), 27.8 (C-2), C 32.6 (C-3), 159.7 (C-4), 39.8 (C-5), 36.0 (C-6), 27.9 (C-7), 34.4 (C8), 56.8 (C-9), 49.2 (C-10), 103.9 (C-11), 21.5 (C-12), 17.8 (C-13), 207.3 (C-14), 28.2 (C-15), 114.8 (C-16), 154.1 (C-17), 133.7 (C-18), 153.2 (C-19), 105.4 (C-20), 128.5 (C-21), 170.5 (C-22), 60.8 (18OCH3), 52.1 (22-OCH3) 3.1.5 Hợp chất SM5: Smenohaimien E (chất mới) Chất bột màu trắng, vô định hình; [ ]25D : -84,0 (c 0,1, CHCl3) H- NMR (500 MHz, CDCl3) H (ppm): 2.10 (m, H-1)/1.59 (m, H-1), 1.28 (m, H-2)/1.83 (m, H-2), 2.10 (t, J = 15.5 Hz, H-3)/2.28 (dt, J = 4.5, 13.5 Hz, H-3), 1.28 (m, H-6)/1.51 (m, H-6), 1.48 (m, H7)/1.41 (m, H-7), 1.37 (m, H-8), 1.08* (tín hiệu bị chập), 4.40 (s, H11)/4.43 (s, H-11), 1.04 (s, H-12), 1.09 (d, J = 7.0 Hz, H-13), 3.80 (d, J = 12.0 Hz, H-14)/ 3.90 (d, J = 12.0 Hz, H-14), 2.86 (d, J = 14.5 Hz, H-15)/3.10 (d, J = 14.5 Hz, H-15), 7.40 (d, J = 1.5 Hz, H-19), 7.50 (d, J = 1.5 Hz, H-21), 3.88 (18-OCH3), 3.87 (22-OCH3) 13 C-NMR (125 MHz, CDCl3) C (ppm): 24.1 (C-1), 28.3 (C-2), 33.1 (C-3), 159.8 (C-4), 40.1 (C-5), 36.9 (C-6), 28.0 (C-7), 37.5 (C8), 46.5 (C-9), 49.8 (C-10), 103.2 (C-11), 20.9 (C-12), 18.9 (C-13), 64.0 (C-14), 32.1 (C-15), 124.7 (C-16), 149.5 (C-17), 146.2 (C-18), 109.4 (C-19), 120.4 (C-20), 127.7 (C-21), 167.3 (C-22), 56.0 (18OCH3), 51.9 (22-OCH3) 3.1.6 Hợp chất 6: Smenohaimien F (chất mới) Chất bột màu trắng, vô định hình; [ ]25D : +32.0 (c 0,1, CHCl3) 1H- NMR (500 MHz, CDCl )  (ppm): 1.56 (m, H-1)/1.48 (d, J H = 3.5 Hz, H-1), 1.20 (m, H-2)/1.83 (m, H-2), 2.07 (m, H-3)/2.26 (m, H-3), 1.42 (m, H-6)/2.02 (m, H-6), 2.04 (m, H-7)/1.98 (m, H-7), 1.06 (d, J = 7.5 Hz, H-8), 4.48 (s, H-11)/4.52 (s, H-11), 1.11 (s, H-12), 1.24 (d, J = 7.0 Hz, H-13), 1.06 (s, H-14), 2.77 (d, J = 18.5 Hz, H-15)/1.87 (d, J = 18.5 Hz, H-15), 5.55 (s, H-19), 5.12 (s, 20-NH2) 13C-NMR (125 MHz, CDCl )  (ppm): 22.1 (C-1), 28.3 (C-2), C 32.6 (C-3), 158.6 (C-4), 39.9 (C-5), 31.2 (C-6), 30.4 (C-7), 84.9 (C8), 37.0 (C-9), 44.7 (C-10), 103.6 (C-11), 20.9 (C-12), 23.2 (C-13), 21.2 (C-14), 27.7 (C-15), 111.3 (C-16), 154.5 (C-17), 182.4 (C-18), 99.2 (C-19), pic không xuất (C-20), 182.4 (C-21) 3.1.7 Hợp chất SM7: Smenocerone A (chất mới) Chất dạng dầu, màu vàng; [ ]25D : +27.2 (c 0,1, CHCl3) H- NMR (500 MHz, CDCl3) H (ppm): 7.48 (s, H-8), 2.04 (s, 2Me), 4.07 (s, 3-OMe), 3.98 (s, 5-OMe), 4.04 (s, 7-OMe) 13C-NMR (125 MHz, CDCl )  (ppm): 185.2 (C-1), 129.7 (C3 C 2), 158.3 (C-3), 179.7 (C-4), 147.0 (C-5), 143.9 (C-6), 151.1 (C-7), 105.6 (C-8), 126.2 (C-9), 118.5 (C-10), 9.12 (2-Me), 61.0 (3-OMe), 61.7 (5-OMe), 56.6 (7-OMe) 3.1.8 Hợp chất SM8: Smenocerone B (chất mới) Chất dạng dầu, màu vàng; [ ]25D : +34.6 (c 0,1, CHCl3) H- NMR (500 MHz, CDCl3) H (ppm): 2.03 (s, 2-Me), 4.11 (s, 3-OMe), 4.02 (s, 5-OMe), 3.92 (s, 6-OMe), 4.05 (s, 7-OMe), 13.31 (s, 8-OH) 13C-NMR (125 MHz, CDCl )  (ppm): 190.8 (C-1), 129.1 (C3 C 2), 159.3 (C-3), 178.9 (C-4), 152.9 (C-5), 149.2 (C-6), 147.1 (C-7), 153.9 (C-8), 110.1 (C-9), 118.4 (C-10), 8.4 (2-Me), 61.1 (3-OMe), 61.7 (5-OMe), 61.6 (6-OMe), 61.4 (7-OMe) 3.1.9 Hợp chất SM9: Dictyoceratin C Chất bột màu trắng, vô định hình; [ ]25D : +20.5 (c 0.1, CHCl3) 1H- NMR (500 MHz, CDCl )  (ppm): 1.57 (m, H-1)/2.08 (br d, H J = 13.5 Hz, H-1), 1.40 (m, H-2)/1.91 (m, H-2), 2.08 (br d, J = 13.5 Hz, H-3)/2.33 (ddd, J = 5.5, 13.5, 13.5 Hz, H-3), 1.21 (m, H-6)/1.46 (ddd, J = 3.0, 3.0, 12.5 Hz, H-6), 1.40 (m, H-7), 1.30 (m, H-8), 0.96 (dd, J = 1.0, 3.0, 11.5 Hz, H-10), 4.37 (br s, H-11)/4.41 (br s, H-11), 1.06 (s, H-12), 1.02 (d, J = 6.5 Hz, H-13), 0.88 (s, H-14), 2.63 (d, J = 14.5 Hz, H-15)/2.67 (d, J = 14.5 Hz, H-15), 2.86 (d, J = 14.5 Hz, H15)/3.10 (d, J = 14.5 Hz, H-15), 6.75 (d, J = 8.0 Hz, H-19), 7.75 (d, J = 8.0 Hz, H-21), 7.76 (s, H-21), 5.94 (17-OH), 3.87 (22-OCH3) 13C-NMR (125 MHz, CDCl )  (ppm): 23.3 (C-1), 27.9 (C-2), C 33.0 (C-3), 160.0 (C-4), 40.2 (C-5), 36.6 (C-6), 27.7 (C-7), 36.4 (C-8), 11 17.4 (C-14), 32.4 (C-15), 117.2 (C-16), 153.2 (C-17), 182.9 (C-18), 102.0 (C-19), 161.9 (C-20), 182.0 (C-21), 56.8 (20-OCH3) 3.1.14 Hợp chất SM14: Neodactyloquinone Chất bột màu trắng, vô định hình; [ ]25D : +25.4 (c 0.1, CHCl3) 1H- NMR (500 MHz, CDCl )  (ppm): 1.56 (m, H-1)/1.77 (m, H H-1), 1.27 (m, H-2)/1.83 (m, H-2), 2.10 (m, H-3)/2.23 (m, H-3), 1.41 (m, H-6)/2.00 (ddd, J = 3.5, 3.5, 14.0 Hz, H-6), 1.57 (m, H-7)/1.78 (br d, J = 14.0 Hz, H-7), 1.44 (dd, J = 2.5, 12.0 Hz, H-10), 4.54 (br s, H-11), 1.08 (s, H-12), 0.93 (d, J = 6.5 Hz, H-13), 1.41 (s, H-14), 2.04 (d, J = 16.5 Hz, H-15)/2.72 (d, J = 16.5 Hz, H-15), 5.74 (s, H-19), 3.80 (20-OCH3) 13C-NMR (125 MHz, CDCl )  (ppm): 21.2 (C-1), 27.7 (C-2), C 32.7 (C-3), 158.3 (C-4), 41.4 (C-5), 30.9 (C-6), 32.4 (C-7), 34.6 (C8), 84.6 (C-9), 47.8 (C-10), 103.7 (C-11), 20.9 (C-12), 24.3 (C-13), 19.1 (C-14), 26.8 (C-15), 114.5 (C-16), 151.3 (C-17), 181.5 (C-18), 104.7 (C-19), 159.5 (C-20), 181.5 (C-21), 56.4 (20-OCH3) 3.1.15 Hợp chất SM15: Dactyloquinone C Chất bột màu trắng, vô định hình; [ ]25D : +56.4 (c 0.1, CHCl3) 1H- NMR (500 MHz, CDCl )  (ppm): 4.15 (dt, J = 5.5, 10.5 H Hz, H-1), 1.80 (m, H-2)/2.52 (m, H-2), 2.26 (m, H-3)/2.40 (m, H-3), 1.64 (m, H-6), 1.53 (m, H-7)/1.60 (br d, J = 14.0 Hz, H-7), 1.39 (m, H-8), 1.50 (d, J = 10.5, H-10), 4.62 (s, H-11), 0.96 (s, H-12), 1.03 (d, J = 6.5 Hz, H-13), 0.73 (s, H-14), 1.99 (d, J = 14.0 Hz, H-15)/3.13 (d, J = 14.0 Hz, H-15), 5.80 (s, H-19), 3.81 (20-OCH3) 13C-NMR (125 MHz, CDCl )  (ppm): 78.5 (C-1), 35.5 (C-2), C 30.7 (C-3), 157.2 (C-4), 40.3 (C-5), 37.4 (C-6), 27.8 (C-7), 41.8 (C8), 37.4 (C-9), 60.2 (C-10), 104.1 (C-11), 21.8 (C-12), 16.4 (C-13), 15.0 (C-14), 34.8 (C-15), 130.3 (C-16), 156.3 (C-17), 183.0 (C-18), 105.2 (C-19), 159.0 (C-20), 182.6 (C-21), 56.4 (20-OCH3) 12 3.1.16 Hợp chất SM16: Dactyloquinone D Chất bột màu trắng, vô định hình; [ ]25D : +38.5 (c 0.1, CHCl3) H- NMR (500 MHz, CDCl3) H (ppm): 1.49 (m, H-1)/1.56 (m, H-1), 1.17 (m, H-2)/1.84 (m, H-2), 2.06 (m, H-3)/2.25 (m, H-3), 1.47 (m, H-6)/2.00 (m, H-6), 2.02 (m, H-7), 1.03 (m, H-10), 4.49 (s, H11)/4.52 (s, H-11), 1.11 (s, H-12), 1.23 (s, H-13), 1.07 (s, H-14), 1.90 (d, J = 19.0 Hz, H-15)/2.83 (d, J = 19.0 Hz, H-15), 5.76 (s, H-19), 3.80 (20-OCH3) 13C-NMR (125 MHz, CDCl )  (ppm): 22.0 (C-1), 28.3 (C-2), C 32.6 (C-3), 158.6 (C-4), 39.4 (C-5), 31.2 (C-6), 30.4 (C-7), 84.8 (C8), 37.1 (C-9), 44.9 (C-10), 103.5 (C-11), 20.9 (C-12), 23.1 (C-13), 21.1 (C-14), 27.8 (C-15), 113.9 (C-16), 152.6 (C-17), 181.7 (C-18), 104.9 (C-19), 159.4 (C-20), 181.0 (C-21), 56.4 (20-OCH3) 3.1.17 Hợp chất SM17: Dactylospongenone A Chất bột màu trắng, vô định hình; [ ]25D : -80.5 (c 0.1, CHCl3) 1H- NMR (500 MHz, CDCl )  (ppm): 1.41 (m, H-1)/2.09 (m, H H-1), 1.31 (m, H-2)/1.87 (m, H-2), 2.08 (m, H-3)/2.30 (m, H-3), 1.47 (m, H-6)/1.57 (m, H-6), 1.46 (m, H-7), 1.41 (m, H-8), 0.89 (dd, J = 2.0, 12.0 Hz, H-10), 4.46 (br s, H-11), 1.05 (s, H-12), 0.74 (d, J = 6.5 Hz, H-13), 0.75 (s, H-14), 0.98 (dd, J = 4.0, 16.0 Hz, H-15)/2.06 (dd, J = 4.0, 16.0 Hz, H-15), 2.63 (t, J = 4.0, H-16), 5.94 (s, H-18), 3.74 (19-OCH3), 3.75 (21-OCH3) 13C-NMR (125 MHz, CDCl )  (ppm): 22.0 (C-1), 28.4 (C-2), C 33.0 (C-3), 160.5 (C-4), 40.2 (C-5), 36.9 (C-6), 27.5 (C-7), 36.9 (C-8), 39.5 (C-9), 48.8 (C-10), 102.5 (C-11), 20.5 (C-12), 16.4 (C-13), 17.7 (C14), 33.7 (C-15), 54.8 (C-16), 80.6 (C-17), 121.6 (C-18), 158.8 (C-19), 198.3 (C-20), 174.8 (C-21), 57.2 (19-OCH3), 53.6 (21-OCH3) 3.1.18 Hợp chất SM18: Dactylospongenone B Chất bột màu trắng, vô định hình; [ ]25D : +20.2 (c 0.1, CHCl3) 13 H- NMR (500 MHz, CDCl3) H (ppm): 1.38 (m, H-1)/1.45 (m, H-1), 1.33 (m, H-2)/1.83 (m, H-2), 2.09 (m, H-3)/2.29 (m, H-3), 1.45 (m, H-6)/1.56 (m, H-6), 1.45 (m, H-7), 1.23 (m, H-8), 1.07* (H-10), 4.48 (br s, H-11), 1.03 (s, H-12), 1.00 (d, J = 6.5 Hz, H-13), 0.75 (s, H-14), 1.09 (dd, J = 2.5, 16.0 Hz, H-15)/1.87 (dd, J = 5.0, 16.0 Hz, H-15), 2.65 (dd, J = 2.5, 5.0, H-16), 5.92 (s, H-18), 3.73 (19-OCH3), 3.75 (21-OCH3) 13 C-NMR (125 MHz, CDCl3) C (ppm): 22.0 (C-1), 28.1 (C-2), 32.9 (C-3), 160.0 (C-4), 40.0 (C-5), 36.8 (C-6), 27.7 (C-7), 37.1 (C-8), 39.7 (C-9), 48.3 (C-10), 102.8 (C-11), 20.3 (C-12), 16.7 (C-13), 17.8 (C14), 33.6 (C-15), 54.7 (C-16), 80.6 (C-17), 121.5 (C-18), 158.9 (C-19), 198.3 (C-20), 174.9 (C-21), 57.2 (19-OCH3), 53.6 (21-OCH3) 3.1.19 Hợp chất SM19: Dactylospongenone C Chất bột màu trắng, vô định hình; [ ]25D : +42.3 (c 0.1, CHCl3) 1H- NMR (500 MHz, CDCl )  (ppm): 1.43 (m, H-1)/1.90 (m, H3 H 1), 1.30 (m, H-2)/1.87 (m, H-2), 2.10 (m, H-3)/2.31 (m, H-3), 1.38 (m, H-6)/1.60 (m, H-6), 1.42 (m, H-7), 0.90 (m, H-8), 0.89 (dd, J = 2.5, 12.0, H-10), 4.47 (s, H-11)/4.48 (s, H-11), 1.05 (s, H-12), 0.79 (d, J = 6.5 Hz, H-13), 0.77 (s, H-14), 1.79 (d, J = 5.0 Hz, H-15), 2.74 (dd, J = 5.0, 5.0 Hz, H-16), 6.03 (s, H-18), 3.84 (19-OCH3), 3.74 (21-OCH3) 13C-NMR (125 MHz, CDCl )  (ppm): 21.9 (C-1), 28.4 (C-2), C 33.1 (C-3), 160.8 (C-4), 40.1 (C-5), 37.3 (C-6), 27.7 (C-7), 38.2 (C-8), 39.5 (C-9), 49.7 (C-10), 102.4 (C-11), 20.4 (C-12), 16.6 (C-13), 17.6 (C14), 32.6 (C-15), 49.1 (C-16), 76.6 (C-17), 123.3 (C-18), 157.8 (C-19), 201.6 (C-20), 175.8 (C-21), 57.3 (19-OCH3), 53.7 (21-OCH3) 3.1.20 Hợp chất SM20: Dactylospongenone D Chất bột màu trắng, vô định hình; [ ]25D : -17.6 (c 0.1, CHCl3) 1H- NMR (500 MHz, CDCl )  (ppm): 1.42 (m, H-1)/1.59 (m, H H-1), 1.16 (m, H-2)/1.81 (m, H-2), 2.07 (m, H-3)/2.29 (m, H-3), 1.44 (m, H-6)/1.56 (m, H-6), 1.46 (m, H-7), 1.44 (m, H-8), 0.66 (dd, J = 14 2.0, 12.0, H-10), 4.47 (s, H-11)/4.48 (s, H-11), 1.04 (s, H-12), 0.94 (d, J = 5.5 Hz, H-13), 0.77 (s, H-14), 1.94 (dd, J = 5.0, 16.0 Hz, H15)/1.58* (H-15), 2.87 (dd, J = 4.5, 5.0 Hz, H-16), 6.00 (s, H-18), 3.81 (19-OCH3), 3.74 (21-OCH3) 13C-NMR (125 MHz, CDCl )  (ppm): 21.9 (C-1), 27.9 (C-2), C 33.0 (C-3), 160.6 (C-4), 40.3 (C-5), 37.1 (C-6), 27.6 (C-7), 37.7 (C-8), 40.0 (C-9), 49.9 (C-10), 102.3 (C-11), 20.4 (C-12), 16.4 (C-13), 17.7 (C14), 32.8 (C-15), 48.2 (C-16), 76.8 (C-17), 123.6 (C-18), 157.9 (C-19), 201.8 (C-20), 175.6 (C-21), 57.4 (19-OCH3), 53.9 (21-OCH3) 3.1.21 Hợp chất SM21: Amijiol Chất bột màu trắng, vô định hình; [ ]25D : -45.6 (c 0.1, CHCl3) 1H- NMR (500 MHz, CDCl )  (ppm): 2.00 (m, H-2)/2.84 (m, H H-2), 1.73 (m, H-3)/1.86 (m, H-3), 3.40 (br d, J = 7.5 Hz, H-4), 1.39 (m, H-6)/2.90 (m, H-6), 2.21 (m, H-7)/2.49 (m, H-7), 2.19 (m, H-10), 1.57 (m, H-11)/1.68 (m, H-11), 1.51 (d, J = 14.5 Hz, H-13)/2.02 (d, J = 14.5 Hz, H-13), 4.83 (s, H-15)/4.89 (s, H-15), 0.74 (s, H-16), 2.63 (m, H-17), 0.92 (d, J = 7.0 Hz, H-18), 0.95 (d, J = 7.0 Hz, H-19), 1.36 (s, H-20) 13C-NMR (125 MHz, CDCl )  (ppm): 152.3 (C-1), 26.6 (C-2), C 30.7 (C-3), 80.7 (C-4), 44.2 (C-5), 28.3 (C-6), 22.2 (C-7), 138.4 (C8), 139.4 (C-9), 27.3 (C-10), 43.0 (C-11), 50.8 (C-12), 47.9 (C-13), 81.3 (C-14), 109.3 (C-15), 17.6 (C-16), 26.9 (C-17), 20.3 (C-18), 21.2 (C-19), 26.7 (C-20) 3.1.22 Hợp chất SM22: Isoamijiol Chất bột màu trắng, vô định hình; [ ]25D : -60.0 (c 0.1, CHCl3) 1H- NMR (500 MHz, CDCl )  (ppm): 4.30 (br s, H-2), 1.78 H (m, H-3)/1.82 (m, H-3), 0.94 (m, H-4)/2.12 (m, H-4), 1.08 (m, H6)/2.62 (m, H-6), 2.11 (m, H-7)/2.52 (m, H-7), 2.19 (m, H-10), 1.56 (m, H-11)/1.67 (m, H-11), 1.62 (d, J = 14.5 Hz, H-13)/1.99 (d, J = 14.5 Hz, H-13), 5.02 (s, H-15)/5.08 (s, H-15), 1.34 (s, H-16), 2.62 15 (m, H-17), 0.91 (d, J = 6.5 Hz, H-18), 0.94 (d, J = 6.5 Hz, H-19), 0.77 (s, H-20) 13 C-NMR (125 MHz, CDCl3) C (ppm): 151.0 (C-1), 75.9 (C-2), 29.7 (C-3), 32.7 (C-4), 41.9 (C-5), 31.4 (C-6), 22.7 (C-7), 138.4 (C8), 139.1 (C-9), 27.4 (C-10), 42.9 (C-11), 50.7 (C-12), 47.2 (C-13), 80.9 (C-14), 113.2 (C-15), 26.6 (C-16), 26.8 (C-17), 20.3 (C-18), 21.3 (C-19), 17.7 (C-20) 3.1.23 Hợp chất SM23: Indole-3-aldehyde Tinh thể màu vàng, hình kim H- NMR (500 MHz, CD3OD) H (ppm): 8.04 (s, H-2), 8.13 (d, J = 7.5 Hz, H-4), 7.20 (dd, J = 7.5, 8.0 Hz, H-5), 7.24 (dd, J = 7.5, 8.0 Hz, H-6), 7.45 (d, J = 8.0 Hz, H-7), 9.84 (s, H-8) 13C-NMR (125 MHz, CD OD)  (ppm): 139.7 (C-2), 120.1 (C3 C 3), 125.7 (C-3a), 122.4 (C-4), 123.6 (C-5), 125.0 (C-6), 113.1 (C-7), 138.9 (C-7a), 187.4 (C-8) 3.1.24 Hợp chất SM24: Indole-3-cacboxylic methyl ester Tinh thể màu vàng, hình kim 1H- NMR (500 MHz, CD OD)  (ppm): 7.93 (d, J = 3.0 Hz, H3 H 2), 8.20 (dd, J = 3.0, 9.0 Hz, H-4), 7.28* (H-5), 7.27* (H-6), 7.42 (dd, J = 3.0, 9.0 Hz, H-7), 3.93 (s, 8-OMe) 13C-NMR (125 MHz, CD OD)  (ppm): 131.0 (C-2), 111.5 (C3 C 3), 136.1 (C-3a), 121.6 (C-4), 122.1 (C-5), 123.2 (C-6), 108.9 (C-7), 125.8 (C-7a), 165.6 (C-8), 51.1 (8-OMe) CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Xác định cấu trúc hợp chất Phần trình bày kết phân tích phổ xác định cấu trúc 24 hợp chất phân lập từ loài loài hải miên S.cerebriformis 16 SM1: α-H: Smenohaimien A (chất mới) SM2: β-H: Smenohaimien B (chất mới) SM3: Smenohaimien C (chất mới) SM5: R1=CH2OH, R2=α-CH3 Smenohaimien E (chất mới) SM10: R1= CH3, R2= β -CH3 Polyfibrospongol A SM11: R1=CH2OH, R2=β-CH3 Polyfibrospongol B SM6: R = NH2 Smenohaimien F (chất mới) SM16: R = OMe Dactyloquinone D SM4: R = CHO Smenohaimien D (chất mới) SM12: R = CH2OH 19-hydroxyl-polyfibrospongol B SM7: R1 = OH R2 = H Smenocerone A (chất mới) SM8: R1 = OMe R2 = H Smenocerone B (chất mới) SM9: Dictyoceratin C SM13: Ilimaquinone SM14: Neodactyloquinone SM15: Dactyloquinone C SM16: Dactyloquinone D SM21: R1= H, R2= OH Amijiol SM22: R1= OH, R2= H Isoamijiol SM23: R= CHO Indole-3-aldehyde SM24: R = COOMe : Indole-3cacboxylic methyl est SM17: α-H, α-OH, β-COOMe Dactylospongenone A SM18: β-H, β-OH, α-COOMe Dactylospongenone B SM19: α-H, β-OH, α-COOMe Dactylospongenone C SM20: β-H, α-OH, β-COOMe Dactylospongenone D 17 Dưới trình bày chi tiết phương pháp xác định cấu trúc hợp chất điển hình 4.1.3 Hợp chất SM3: Smenohaimien C (mới) Hợp chất SM3 thu dạng chất bột vô định hình màu trắng Công thức phân tử SM3 xác định C23H31NO3 dựa vào kết phổ khối lượng phân giải cao HR-ESI-MS xuất pic ion giả phân tử [M+H]+ m/z 370.2372 (tính toán lý thuyết cho công thức [C23H32NO3]+: 370.2377) Phổ HR-ESI-MS SM3 Phổ 1H-NMR hợp chất SM3 Trên phổ 1H-NMR xuất tín hiệu proton nhóm methyl bậc ba δH 0.94 1.06 (3H, s); nhóm methyl bậc hai δH 1.05 (3H, d, J = 7.0 Hz); nhóm methoxy δH 3.94 (s); geminal proton olefinic δH 4.34 (s), 4.38 (s); proton vòng thơm δH 7.10 (s) 7.92 (s) Trên phổ 13C-NMR DEPT SM3 xuất tín hiệu 23 nguyên tử cacbon có cacbon không liên kết trực tiếp với hydro δC 40.4, 43.0, 109.5, 131.0, 144.4, 145.0, 145.7, 160.4 ; nhóm methine δC 37.4, 49.4, 99.3, 150.9; nhóm methylene δC 23.3, 28.0, 28.7, 33.0, 34.6, 36.4, 102.5; nhóm methyl δC 17.4, 18.2, 20.5; nhóm methoxy δC 56.4 Phân tích kiện phổ 1D 2D NMR SM3 xuất khung 4,9friedodrim-4(11)-ene-type sesquiterpene vòng benzoxazole Prod 2011, 74, 65–68} {J Nat 18 Phổ 13C-NMR hợp chất SM3 Các kiện phổ 1H 13C Phổ HSQC hợp chất SM3 NMR SM3 giống với kiện phổ hợp chất (-)-nakijinol B (SM3a) {J Nat Prod 2011, 74, 65–68} ngoại trừ xuất thêm tín hiệu nhóm methoxy vị trí C-18 Các tương tác HMBC H-19 (δH 7.10) với C-17 (δC 144.4)/C-18 (δC 145.0)/C-20 (δC 131.0)/C-21 (δC 145.7) khẳng định vị trí nhóm hydroxyl methoxy vị trí C-17 C-18 Các tương tác HMBC H-15 (δH 2.86 2.95) với C-16 (δC 109.5)/C-17 (δC 144.4)/C-21 (δC 145.7) khẳng định vòng benzoxazole liên kết với khung sesquiterpene C-15 Phổ HMBC hợp chất SM3 Phổ COSY hợp chất SM3 Phổ NOESY hợp chất SM3 Từ tất phân tích trên, cấu trúc hợp chất SM3 xác định hợp chất đặt tên smenohaimien C Cấu trúc hóa học SM3 hợp chất tham khảo Các tương tác HMBC, COSY NOESY hợp chất SM3 19 Bảng 4.3 Số liệu phổ NMR hợp chất SM3 hợp chất tham khảo # C δC δC@ δH@ (mult., J, Hz) 24.8 23.3 1.56 (m)/2.30 (m) 30.2 28.7 1.25 (m)/1.91 (m) 34.4 33.0 2.06 (m)/2.34 (m) 161.8 160.4 41.8 40.4 38.3 36.4 1.22 (m)/1.46 (m) 29.4 28.0 1.39 (m)/1.42 (m) 38.7 37.4 1.43 (m) 44.2 43.0 10 51.1 49.4 0.93 (dd, 2.0, 12.0) 11 103.4 102.5 4.34 (s)/4.38 (s) 12 20.7 20.5 1.06 (s) 13 19.2 18.2 1.05 (d, 7.0) 14 18.3 17.4 0.94 (s) 15 35.8 34.6 2.86 (d, 14.5)/2.95 (d, 14.5) 16 111.0 109.5 17 146.7 144.4 18 145.2 145.0 19 102.1 99.3 7.10 (s) 20 131.7 131.0 21 146.7 145.7 22 153.2 150.9 7.92 (s) 18-OCH3 56.5 3.94 (s) #δ C nakijinol B (SM3a) đo CD3OD {J Nat Prod 2011, 74, 65–68}, @ đo CDCl3 4.2 Kết thử hoạt tính sinh học 4.2.1 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào hợp chất Phân đoạn CH2Cl2 22 hợp chất SM1-SM22 đánh giá hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư người LU-1 (ung thư phổi người), MCF-7 (ung thư vú người), HepG2 (ung thư gan người), SKMel2 (ung thư da người), HL-60 (ung thư bạch cầu người) Ellipticine sử dụng chất đối chứng với giá trị IC50 0.4 µg/mL 20 Bảng 4.26 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào hợp chất IC50 (µg/mL) Hợp chất LU-1 MCF-7 HepG2 SK-Mel2 HL-60 SM1 50.58±1.38 60.36±1.37 41.08±1.40 36.55±3.12 60.52±1.83 SM2 48.60±5.85 48.95±1.06 49.64±1.37 45.57±5.66 45.62±5.09 SM3 >100 >100 >100 >100 >100 SM4 43.41±3.68 34.12±3.37 41.45±2.85 36.42±2.31 39.57±3.85 SM5 17.56±2.12 24.13±3.55 28.22±2.21 34.73±1.13 23.46±0.34 SM6 46.81±0.76 46.39±1.25 53.86±2.93 50.09±1.02 36.53±1.26 SM7 46.11±1.76 49.10±3.17 43.65±4.83 46.72±3.07 56.14±4.25 SM8 SM9 5.73±1.07 3.95±0.65 41.52±3.56 27.22±1.02 30.42±2.97 22.04±2.24 25.18±2.66 5.48±0.77 4.08±0.83 3.20±0.15 SM10 >100 >100 >100 >100 >100 SM11 >100 >100 >100 >100 >100 SM12 41.27±2.63 40.70±2.65 32.12±2.77 35.49±2.34 28.38±3.17 SM13 91.59±6.95 96.18±4.45 72.54±6.07 91.55±4.87 68.61±2.37 SM14 SM15 SM16 SM17 >100 >100 >100 >100 52.21±1.98 44.13±2.01 63.07±3.06 41.23±1.59 1.10±0.02 1.62±0.23 20.61±1.45 15.72±1.54 0.65±0.13 >100 51.81±3.31 1.33±0.07 0.73±0.13 9.22±0.17 10.93±1.69 16.80±1.01 SM18 >100 >100 >100 >100 >100 SM19 >100 >100 >100 >100 >100 SM20 >100 >100 >100 >100 >100 SM21 >100 >100 >100 >100 >100 SM22 >100 >100 >100 >100 >100 PĐ CH2Cl2 19.42±2.37 14.95±2.67 32.96±3.49 28.68±1.10 Ellipticine 0.43±0.03 0.53±0.12 0.40±0.08 0.58±0.09 33.35±4.32 0.61±0.11 21 Trong số 16 hợp chất thuộc khung sesquiterpene từ loài S cerebriformis hợp chất SM16 thể hoạt tính gây độc tế bào mạnh với giá trị IC50 khoảng 0.65 ÷1.62 µg/mL dòng tế bào ung thư người LU-1, MCF-7, HepG2, SK-Mel2 HL-60; hợp chất naphtoquinone SM8 thể hoạt tính gây độc tế bào mạnh dòng tế bào LU-1, MCF-7, HepG2, SK-Mel2 HL-60 với giá trị IC50 khoảng 3.20 ÷5.48 µg/mL Các hợp chất SM1, SM2, SM4-SM7, SM9, SM12, SM15 SM17 thể hoạt tính gây độc tế bào mức độ trung bình với giá trị IC50 khoảng 9.22 ÷ 63.07 µg/mL dòng tế bào ung thư người thử nghiệm Các hợp chất lại hoạt tính Riêng với dòng tế bào ung thư phổi người LU-1 hợp chất SM8 SM16 thể hoạt tính gây độc tế bào mạnh với giá trị IC50 5.48±0.77 1.10±0.02 µg/mL so sánh với ellipticine (IC50: 0.4 µg/mL) Vì vậy, hai hợp chất SM8 SM16 nghiên cứu sâu khả gây chết với dòng tế bào LU-1 có theo chế apoptosis hay không? Hoạt tính gây apoptosis dòng tế bào ung thư phổi người LU-1 mẫu nghiên cứu thông qua phương pháp nhuộm Hoechst 33342 Kết tỉ lệ tế bào có tượng apoptosis mẫu SM8 SM16 14.25% 11.40%, cao so với đối chứng âm (4.60%) (p 95%) Các hợp chất sàng lọc nồng độ 40 µM tác dụng chúng sản sinh NO môi trường đại thực bào RAW 264.7, bị kích thích với LPS Những chất có khả ức chế sản sinh NO đại thực bào lớn 50% tiếp tục thử nghiệm nồng độ khác nhau: 10, 20, 40 µM để xác định giá trị IC50 Chất đối chứng dương sử dụng thí nghiệm L-NMMA, loại chất ức chế sản sinh NOS, với IC50 22.1 µM Kết thử nghiệm cho bảng Bảng 4.27 Tác dụng ức chế NO đại thực bào Hợp chất SM1 SM2 SM3 IC50 (μM) 30.133.27 28.331.40 >40 SM4 SM5 SM6 SM7 >40 24.372.50 24.441.43 >40 SM16 SM17 SM18 SM19 13.072.86 >40 28.753.42 23.642.16 SM8 SM9 16.663.54 >40 SM20 SM21 25.362.16 >40 SM10 SM11 SM12 >40 30.432.96 24.443.12 SM22 PĐ CH2Cl2 L-NMMA Hợp chất SM13 SM14 SM15 IC50 (μM) 10.401.28 >40 35.851.37 >40 3.801.27 (μg/mL) 22.10 ± 1.20 Kết cho thấy phân đoạn CH2Cl2 có hoạt tính ức chế sản sinh NO mạnh với giá trị IC50 3.801.27 (μg/mL) Ba hợp chất SM8, SM13 SM16 gây ức chế mạnh (mạnh chất đối chứng dương) sản sinh NO đại thực bào RAW 264.7 điều kiện bị kích thích LPS với giá trị IC50 16.663.54, 23 10.401.28 16.663.54 µM; 10 hợp chất SM1, SM2, SM5, SM6, SM11, SM12, SM15, SM18 -SM20 ức chế đáng kể sản sinh NO với giá trị IC50 nằm khoảng 24.44 đến 35.85 µM KẾT LUẬN Đây công trình nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học loài hải miên Smenospongia cerebriformis thu thập vùng biển miền Trung Việt nam Từ loài hải miên S cerebriformis phân lập xác định cấu trúc hóa học 24 hợp chất bao gồm: - hợp chất mới:  hợp chất merosesquiterpene: Smenohaimien A (SM1), smenohaimien B (SM2), smenohaimien C (SM3), smenohaimien D (SM4), smenohaimien E (SM5), smenohaimien F (SM6);  hợp chất naphtoquinone: Smenocerone A (SM7), smenocerone B (SM8) - 16 hợp chất biết:  12 hợp chất merosesquiterpene: Dictyoceratin C (SM9), polyfibrospongol A (SM10), polyfibrospongol B (SM11), 19hydroxy-polyfibrospongol B (SM12), ilimaquinone (SM13), neodactyloquinone (SM14), dactyloquinone C (SM15), dactyloquinone D (SM16), dactylospongenone A (SM17), dactylospongenone B (SM18), dactylospongenone C (SM19), dactylospongenone D (SM20);  hợp chất diterpene: Amijiol (SM21), isoamijiol (SM22);  hợp chất indole: indole-3-aldehyde (SM23), indole-3cacboxylic methyl ester (SM24); 24  hợp chất diterpene lần đầu phân lập từ ngành hải miên: SM21, SM22 11 hợp chất merosesquiterpene lần đầu phân lập từ giống Smenospongia: SM9-SM12, SM14-SM20 Đã tiến hành đánh giá hoạt tính gây độc dòng tế bào ung thư LU-1, MCF-7, HepG2, SK-Mel2 HL-60 22 hợp chất phân đoạn CH2Cl2 Phân đoạn CH2Cl2 có hoạt tính trung bình dòng ung thư người thử nghiệm với giá trị IC50 khoảng 14.95 ÷33.45 µg/mL Hai hợp chất SM8 SM16 thể hoạt tính gây độc tế bào mạnh với giá trị IC50 khoảng 0.65 ÷5.48 µg/mL dòng tế bào ung thư thử nghiệm Các hợp chất SM1, SM2, SM4-SM7, SM9, SM12, SM15 SM17 thể hoạt tính gây độc tế bào mức độ trung bình Hợp chất SM8 SM16 thể hoạt tính ức chế phát triển dòng tế bào ung thư phổi người LU-1 với giá trị IC50 5.48±0.77 1.10±0.02 µg/mL Nghiên cứu chế gây chết tế bào ung thư người hai hợp chất hai hợp chất gây chết theo chương trình Đã nghiên cứu hoạt tính kháng viêm thông qua ức chế sản sinh NO điều kiện đại thực bào hợp chất phân đoạn CH2Cl2 Kết thu cho thấy phân đoạn CH2Cl2 hợp chất SM8, SM13 SM16 ức chế mạnh sản sinh NO với giá trị IC50 khoảng 10.40 ÷ 16.66 µM, hoạt tính cao chất đối chứng dương sử dụng L-NMMA (IC50 22.1 µM) DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ Phan Van Kiem, Le Thi Huyen, Dan Thuy Hang, Nguyen Xuan Nhiem, Bui Huu Tai, Hoang Le Tuan Anh, Pham Van Cuong, Tran Hong Quang, Chau Van Minh, Nguyen Van Dau, Young-A Kim, Lalita Subedi, Sun Yeou Kim, Seung Hyun Kim Sesquiterpene derivatives from marine sponge Smenospongia cerebriformis and their anti-inflammatory activity Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2017, 27, 1525–1529 Le Thi Huyen, Dan Thuy Hang, Nguyen Xuan Nhiem, Bui Huu Tai, Hoang Le Tuan Anh, Tran Hong Quang, Pham Hai Yen, Chau Van Minh, Nguyen Van Dau and Phan Van Kiem Sesquiterpene quinones and diterpenes from Smenospongia cerebriformis and their cytotoxic activity Natural Products Communications, 2017, 12, 477-478 Le Thi Huyen, Dan Thuy Hang, Nguyen Xuan Nhiem, Pham Hai Yen, Hoang Le Tuan Anh, Tran Hong Quang, Bui Huu Tai, Nguyen Van Dau, Phan Van Kiem Naphtoquinones and sesquiterpene cyclopentenones from the sponge Smenospongia cerebriformis with their cytotoxic activity Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 2017, 65, 589–592 Le Thi Huyen, Dan Thuy Hang, Nguyen Xuan Nhiem, Bui Huu Tai, Hoang Le Tuan Anh, Pham Hai Yen, Nguyen Van Dau, Chau Van Minh, Phan Van Kiem Sequiterpene phenols from marine sponge Smenospongia cerebriformis Vietnam Journal of Chemistry, International Edition, 2017, 55(2), 148-152 Le Thi Huyen, Dan Thuy Hang, Nguyen Xuan Nhiem, Bui Huu Tai, Hoang Le Tuan Anh, Pham Hai Yen, Nguyen Van Dau, Chau Van Minh, Phan Van Kiem Merosesquiterpenes from marine sponge Smenospongia cerebriformis Vietnam Journal of Chemistry, International Edition, 2017, 55(2), 153-157 ... phát có hoạt tính sinh học lí thú Chính vậy, lựa chọn đề tài Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học số loài hải miên miền Trung Việt nam Đối tượng nghiên cứu luận án Mẫu Hải miên Smenospongia... Trị, Viê ̣t Nam vào tháng năm 2015 2 Những đóng góp luận án 3.1 Lần nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học loài hải miên Smenospongia cerebriformis vùng biển miền Trung Việt Nam 3.2... quý giá, bao gồm loài cá, động vật đáy, rong biển, động thực vật phù du khu rừng ngập mặn Các nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học giới loài hải miên có cấu trúc hóa học đa dạng phong