QUY TRÌNH THỰC HIỆN TEST HBsAG

QUY TRÌNH THỰC HIỆN TEST HBsAG Rửa giếng trước lần sử dụng ( microplate) Ghi số thứ tự giếng, lưu lại tên thành viên nhóm vị trí well A1 B1 C1 D1 E1 F1 G1 H1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A8 A9 A10 A11 A12 A1: BLACKING WELL A2, A3, A4: CHỨNG ÂM A5,A6: CALIBRATOR A7,A8: CHỨNG DƯƠNG ……TÊN MẪU THỬ Bỏ vị trí giếng A1 Thêm 150μl Negative Control – vào giếng (A2, A3, A4); 150 μ Calibrator vào giếng (A5,A6), 150 μl Positive Control vào giếng (A7, A8) Hút mẫu cần phân tích vào giếng lại Hút 100 μl Enzyme Conjugate vào giếng có đối chứng mẫu trừ A1 (blacking well) Chú ý: không chạm vào thành giếng, nhớ thay đầu tips chạm phải mẫu Dán miếng plastic đậy kín giếng, ủ 38 độ C, 90 phút, cài đặt máy shake 300rpm Màu đổi từ vàng nhạt sang hồng đậm Rửa giếng lần đến lần Hút 200 μl Chromogen cho vào giếng kể giếng A1 Ủ tối 18- 24 độ C, 30 phút 10 Hút 100 μl H2SO4 1N để dừng phản ứng 11 Đọc giếng máy đọc ELISA reader bước sóng 450 nm Blank well NC (-) PC ( +) Calibrator CHẤP NHẬN KẾT QUẢ KHI: < 0,1 OD 450nm < 0,05 OD 450nm > 1.00 OD 450nm S/Co >2 Calculation of cut- off NC (-) + 0,05 = cut- off (Co) S/Co < 0.9 0.9- 1.1 > 1.1 S (OD of sample)/ cut-off (Co) âm tính Equivocal + QUY TRÌNH THỰC HIỆN TEST HCV Ghi số thứ tự giếng, lưu lại tên thành viên nhóm vị trí well A1: BLACKING WELL A2, A3, A4: CHỨNG ÂM A5,A6: CALIBRATOR A7,A8: CHỨNG DƯƠNG ……TÊN MẪU THỬ Bỏ vị trí giếng A1 Thêm 200μl Negative Control – vào giếng (A2, A3, A4); 200 μ Calibrator vào giếng (A5,A6), 200 μl Positive Control vào giếng (A7, A8) Hút 200 μl dung dịch pha loãng mẫu + 10 μl mẫu Phân phối 50 μl Assay Diluent vào giếng trừ A1 Chú ý: không chạm vào thành giếng, nhớ thay đầu tips chạm phải mẫu Dán miếng plastic đậy kín giếng, ủ 37 độ C, 45 phút, cài đặt máy shake 300rpm Quan sát đổi màu Rửa giếng lần đến lần Thêm enzyme Conjugate ( ezyme pha loãng) vào tất giếng Ủ 37 độ C, 45 phút Rửa giếng bước 10 Hút 200 μl Chromogen cho vào giếng kể giếng A1 11 Ủ tối 18- 24 độ C, 15 phút 12 Hút 100 μl H2SO4 1N để dừng phản ứng 13 Đọc giếng máy đọc ELISA reader bước sóng 450 nm Ghi Blank well NC (-) PC ( +) Calibrator CHẤP NHẬN KẾT QUẢ KHI: < 0,1 OD 450nm < 0,05 OD 450nm > 1.00 OD 450nm S/Co >2 Calculation of cut- off NC (-) + 0,35 = cut- off (Co) S/Co < 0.9 0.9- 1.1 > 1.1 S (OD of sample)/ cut-off (Co) âm tính Equivocal + ... off (Co) S/Co < 0.9 0.9- 1.1 > 1.1 S (OD of sample)/ cut-off (Co) âm tính Equivocal + QUY TRÌNH THỰC HIỆN TEST HCV Ghi số thứ tự giếng, lưu lại tên thành viên nhóm vị trí well A1: BLACKING WELL