VIRUS CÚM VÀ CÁC VIRUS KHÁC GÂY NHIỄM ĐƯỜNG HÔ HẤP

Lý thuyết Vi sinh VIRUS CÚM VÀ CÁC VIRUS KHÁC GÂY NHIỄM ĐƯỜNG HÔ HẤP PGS.TS.BS Vũ Thị Quế Hƣơng Viện Pasteur TP.HCM MODULE SINH VẬT GÂY BỆNH VÀ BỆNH NHIỄM KHOA Y - ĐHQGTP.HCM, 12-2014 VIRUS CÚM MỤC TIÊU HỌC TẬP Nêu đƣợc cách phân loại, phân type virus cúm Trình bày đƣợc đặc điểm kháng nguyên virus cúm Nêu quy trình nhân lên virus cúm tế bào Hiểu trình bày phƣơng thức lây truyền ổ chứa virus cúm Nêu loại vắc-xin cúm Kể tên thuốc kháng virus cúm dùng điều trị giải thích chế tác dụng thuốc Liệt kê phƣơng pháp phân lập virus cúm Nêu phƣơng pháp sử dụng chẩn đoán bệnh nhiễm virus cúm NỘI DUNG BÀI GIẢNG TÍNH CHẤT CỦA VIRUS TÍNH CHẤT GÂY BỆNH DỊCH TỄ HỌC CHẨN ĐOÁN ĐIỀU TRỊ VÀ PHÕNG BỆNH TÍNH CHẤT CỦA VIRUS ─ PHÂN LOẠI VIRUS ─ CẤU TRÖC VIRUS ─ CHỨC NĂNG CỦA THÀNH PHẦN CẤU TẠO ─ TÍNH CHẤT KHÁNG NGUYÊN ─ CHU KỲ NHÂN LÊN CỦA VIRUS 1.1 PHÂN LOẠI VIRUS ─ Họ Orthomyxoviridae, (bắt nguồn từ gốc Hy Lạp Orthos = trực tiếp, myxa = tuyến nhày) virus công trực tiếp tuyến đƣờng hô hấp ─ Có type virus (A, B, C, Isa Thogoto) dựa epitope KN Nucleoprotein (NP) M (Matrix) ─ Chỉ có type virus cúm A có phân type, dựa KN ngƣng kết hồng cầu (HA) KN có hoạt tính enzyme neuraminidase (NA), bao gồm: ─  16 phân type HA: H1 – H16  phân type NA: N1 – N9 Giới hạn vật chủ phân type cúm A khác nhau:  Chim: tất phân type HA NA  Động vật: ngựa (H3, H7 N7, N8), lợn (H1, H3 N1, N2)  Ngƣời: H1, H2, H3 N1, N2 H5 gây bệnh cho ngƣời nhƣng gặp chƣa có chứng lây truyền từ ngƣời sang ngƣời 1.2 CẤU TRÚC VIRUS ─ Virus cúm đa dạng: hình cầu, hình trứng (đƣờng kính 80-120nm), hình sợi (dài đến 2000nm) ─ Hạt virus cúm A/B có vỏ (từ màng tế bào vật chủ), có gai glycoprotein (là HA NA, tỷ lệ HA:NA = 4:1), virus cúm C có gai glycoprotein ─ RNA sợi đơn, cực âm, phân đoạn (A/B = phân đoạn, C = phân đoạn), dài 10-15kb, mã hóa cho protein cấu trúc (PB1, PB2, PA, HA, NA, NP, M1) protein không cấu trúc (NS1, NS2, M2: cúm A NB: cúm B) • Orthomyxoviridae • RNA cực âm, phân đoạn (mã hóa 10 protein) Ribonucleoproteins (RNPs) Haemagglutinin HA1-16 Neuraminidase NA1-9 Matrix protein lipid envelope M2 RNA genome virus cúm chứa đoạn RNA Và mã hóa 10 protein thiết yếu RNA Protein PB2 PB1 PA HA NA NP M NS PB2, PB1, PB1-F2 PA HA NA NP M1, M2 NS1, NEP 1.3 CHỨC NĂNG CỦA THÀNH PHẦN CẤU TẠO ─ ─ ─ ─ ─ ─ Protein PB1, PB2, PA (tổng hợp từ phân đoạn 1-3): protein có hoạt tính enzyme polymerase Protein HA (tổng hợp từ phân đoạn 4): protein Hemagglutinin, gây ngƣng kết hồng cầu, đƣợc acylat hóa vùng giáp ranh với vỏ virus có đầu N liên kết glycan số vị trí định Protein NP (tổng hợp từ phân đoạn 5) Protein NA (tổng hợp từ phân đoạn 6): protein Neuraminidase có hoạt tính enzyme sialidase Protein M1, M2 (tổng hợp từ phân đoạn 7): protein (matrix) Protein NS1, NS2 (tổng hợp từ phân đoạn 8): protein không cấu trúc NS1, NS2 VẮC-XIN PHÒNG BỆNH (tt) A CÁC VẮC-XIN CÖM HIỆN HÀNH A.2 VẮC-XIN SỐNG GIẢM ĐỘC LỰC gồm: ─ Virus cúm sống giảm độc lực thích nghi lạnh: sử dụng Hoa kỳ (từ 2003) Liên xô (trƣớc đây) ─ Virus cúm giảm độc lực tạo công nghệ di truyền chủng (A/Ann Arbor/6/60(H2N2) B/Ann Arbor/1/66): đột biến bền vững gene PA, PB1, PB2 tạo chủng phát triển tốt 250C nhƣng giảm độc lực 370C Gene HA NA chủng cúm hành đƣợc chèn vào chủng  tạo chủng vắc-xin  Ưu điểm: sử dụng qua đƣờng mũi khí dung  tao đáp ứng MD chỗ, MD qua trung gian tế bào  có MD chéo thời gian MD lâu dài  Nhược điểm: có an toàn ngƣời suy giảm MD? Có đột biến ngƣợc thành chủng hoang dại? VẮC-XIN PHÒNG BỆNH (tt) B NĂNG LỰC SẢN XUẤT VẮC-XIN CÚM ─ Thế giới: 300 triệu liều vắc-xin tam liên (H1N1, H3N2 B) năm ─ Từ nƣớc: Öc, Canada, Pháp, Đức, Ý, Nhật, Hà lan, Anh, Hoa kỳ ─ 4-5 triệu liều vắc-xin cúm sống giảm độc lực, lại vắc-xin bất hoạt  NGUY CƠ KHÔNG ĐỦ VẮC-XIN CUNG CẤP NẾU CÓ ĐẠI DỊCH XẢY RA VẮC-XIN PHÒNG BỆNH (tt) C NGHIÊN CỨU MỚI VỀ SẢN XUẤT VẮC-XIN CÚM C.1 TRÊN NUÔI TẾ BÀO: ─ Sử dụng dòng tế bào Vero MDCK, thay cho công nghệ trứng gà có phôi ─ Lợi thế: nâng cao sản lƣợng vắc-xin, giảm công lao động, dễ tự động hóa Nhƣng nghiên cứu C.2 THEO CÔNG NGHỆ DI TRUYỀN NGƢỢC: ─ Dùng công nghệ sinh học phân tử ─ Tạo chủng vắc-xin từ chủng virus cúm gốc giảm độc lực nhân lên tốt trứng gà có phối nhƣ A/PR8/34(H1N1) theo nguyên lý 6+2 (6 plasmid mang gene PA-PB1-PB2-NP-NS1M chủng plasmid mang gene HA-NA chủng lƣu hành) MỤC TIÊU HỌC TẬP Nêu đƣợc cách phân loại, phân type virus cúm Trình bày đƣợc đặc điểm kháng nguyên virus cúm Nêu quy trình nhân lên virus cúm tế bào Hiểu trình bày phƣơng thức lây truyền ổ chứa virus cúm Nêu biện pháp dự phòng điều trị cúm Nếu loại vaccin cúm Kể tên thuốc kháng virus cúm dùng điều trị giải thích chế tác dụng thuốc Mô tả quy trình phân lập virus cúm Trình bày kỹ thuật miễn dịch, sinh học phân tử ứng dụng chẩn đoán nghiên cứu cúm CÁC VIRUS KHÁC GÂY NHIỄM ĐƯỜNG HÔ HẤP Tiêu chuẩn chẩn đoán Viêm phổi nặng ≤ tuổi Viêm phổi nặng >5 tuổi Ho khó thở VÀ Một dấu hiệu sau: Thở nhanh: o< th: ≥ 60 lần/phút o2 -12 th: ≥ 50 lần/phút o1 – t: ≥ 40 lần/phút Co lõm ngực Dấu hiệu nguy hiểm: bỏ uống, bỏ bú; nôn ói; co giật; hôn mê ý thức VÀ khởi phát vòng ngày Sốt đột ngột ≥ 38oC VÀ Ho đau họng khó thở VÀ Một dấu hiệu sau: oThở nhanh ≥ 30 lần/phút oKhó nói thành câu hoàn chỉnh oSử dụng hô hấp phụ (cổ, ngực, liên sƣờn, bụng) oHình ảnh X-quang thâm nhiễm kg điển hình tiến triển nhanh oSaO2 ≤ 92% VÀ khởi phát vòng ngày BỆNH PHẨM VÀ XÉT NGHIỆM Virus (Bệnh nhân SARI người tiếp xúc) Bệnh phẩm Phết họng Xét nghiệm phát Multiplex RT-PCR (5) Tác nhân vi sinh (18) 1-cúm A/B; hRSV (human respiratory syncytial virus); hMPV (human metapneumovirus) 2-á cúm-1,-2,-3,-4 3-PicornaV (RhinoV & ENV), SARS-CoronaV, cúm C 4-hCoronaV (OC43, 229E, NL63, HKU1) 5-AdenoV & hBocaV Phƣơng pháp xét nghiệm Phương pháp xét nghiệm Các virus gây nhiễm đƣờng hô hấp Virus Họ Vật liệu di truyền Orthomyxoviridae (-) ssRNA, thẳng, 8/7 phân đoạn Á cúm (1-4) Paramyxoviridae (-) ssRNA, thẳng hMPV hRSV Rhinovirus Picornaviridae (+) ssRNA, thẳng Enterovirus Cúm A/B/C Vỏ + + - Coronavirus Coronaviridae Adenovirus Adenoviridae (+) ssRNA, thẳng dsDNA, thẳng + - Bocavirus ssDNA, thẳng - Parvoviridae KẾT QUẢ GIÁM SÁT SARI TẠI BẾN TRE 08/2008 – 06/2010 600 500 Số ca 400 300 200 100 Tháng Nhập viện Thu nhận Dương tính Phân bố tác nhân gây SARI theo tháng RSV Rhino Boca A/H3 A/H1 • Rhino lƣu hành suốt năm • RSV, Boca, Cúm thay đổi theo chu kỳ Boca Phân bố theo tháng virus cúm phát bệnh nhân SARI, 08/2008-06/2010 100% C 90% 80% 70% B Rate (%) 60% 50% A/H3 40% A/H1pdm 30% 20% 10% A/H1 0% 10 11 12 10 Tháng A/H1 A/H1pdm A/H3 Flu A Flu B Flu C 11 12 Kết đồng nhiễm tác nhân vi sinh bệnh nhân SARI Tổng Tác nhân Tần suất Tỉ lệ (%) Boca/RSV Rhino/Boca Rhino/Adeno Rhino/RSV Flu B/RSV 1 1 20 20 20 20 20 Tổng 100 RSV/Staphylococcus non coagulase 10 55.56 Rhino/Staphylococcus non coagulase Adeno/Serratia Rhino/Acinobacter 1 22.22 5.56 5.56 Pandemic influenza A/H1N1 2009/Ralstonia 5.56 RSV/Acinobacter 5.56 Tổng 18 100 Vi rut – Vi rut (n = 5) Vi rut – Vi khuẩn (n = 18) ...1 VIRUS CÚM MỤC TIÊU HỌC TẬP Nêu đƣợc cách phân loại, phân type virus cúm Trình bày đƣợc đặc điểm kháng nguyên virus cúm Nêu quy trình nhân lên virus cúm tế bào Hiểu trình... chứa virus cúm Nêu loại vắc-xin cúm Kể tên thuốc kháng virus cúm dùng điều trị giải thích chế tác dụng thuốc Liệt kê phƣơng pháp phân lập virus cúm Nêu phƣơng pháp sử dụng chẩn đoán bệnh nhiễm virus. .. tuần lộc) Còn virus cúm B có ngƣời 3.3 CÚM MÙA-ĐẠI DỊCH ─ Virus cúm A B lƣu hành năm nhƣng có type phân type trội mùa cúm Biến chủng virus cúm xuất cuối mùa dự báo cho chủng trội vào năm sau ─