Nghiên cứu phát triển các nguồn nấm côn trùng Beauveria, Metarhizium phát triển nguồn nầm Cordyceps

Header Page of 133 B KHOA HC V CễNG NGH B NễNG NGHIP V PTNT NHIM V HP TC KHCN THEO NGH NH TH GIA VIT NAM V TRUNG QUC BO CO TNG HP KT QU KHOA HC CễNG NGH TấN NHIM V: NGHIấN CU PHT TRIN CC NGUN NM CễN TRNG BEAUVERIA, METARHIZIUM NG DNG PHềNG TR SU HI CY TRNG, CY RNG V PHT TRIN NGUN NM CORDYCEPS SP LM THC PHM CHC NNG CHO NGI C QUAN CH TRè : VIN BO V THC VT VIN KHOA HC NễNG NGHIP VIT NAM CH NHIM : PGS.TS PHM TH THY 8133 H NI, 2010 Footer Page of 133 Header Page of 133 B KHOA HC V CễNG NGH B NễNG NGHIP V PTNT NHIM V HP TC KHCN THEO NGH NH TH GIA VIT NAM V TRUNG QUC BO CO TNG HP KT QU KHOA HC CễNG NGH TấN NHIM V: NGHIấN CU PHT TRIN CC NGUN NM CễN TRNG BEAUVERIA, METARHIZIUM NG DNG PHềNG TR SU HI CY TRNG, CY RNG V PHT TRIN NGUN NM CORDYCEPS SP LM THC PHM CHC NNG CHO NGI CH NHIM C QUAN CH TRè PGS TS Phm Th Thựy H NI, 2010 Footer Page of 133 Header Page of 133 DANH SCH CN B THAM GIA THC HIN CHNH TT H v tờn Phm Th Thựy Hc v Chc nng C quan PGS.TS NCV cao cp Vin BVTV Ch nhim ti Hong Th Thựy Linh KS Cỏn b CNSH Vin BVTV Thc hin T Nguyn Th Ngc Trõm H Th Thu Giang TS PGS.TS Cỏn b húa dc Cụng ty CP dc Thc hin T TW 2, B Y t Ging viờn chớnh H Nụng nghip Thc hin T Nguyn Th Kim Liờn Th.s Ging viờn chớnh H Tõy Nguyờn Thc hin T H S Quỏt Footer Page of 133 KS Giỏm c BQL Rng Phũng h Thc hin T Hng Lnh, H Tnh Header Page of 133 MC LC Trang LI CM N i Danh mc cỏc ký hiu, cỏc ch vit tt ii Danh mc cỏc bngiii Danh mc cỏc hỡnh.iv M U t .1 Mc tiờu ca nhim v 2.1 Mc tiờu di hn.2 2.2 Mc tiờu chung trc tip.2 Cỏc ni dung hp tỏc thc hin .3 Kt qu cn t Tớnh mi, tớnh sỏng to ca ti.5 Chng TNG QUAN TèNH HèNH NGHIấN CU V NM CễN TRNG BEAUVERIA V METARHIZIUM TRONG PHềNG TR DCH SU HI CY TRNG, CY RNG V NM CORDYCEPS LM NGUYấN LIU THC PHM CHC NNG CHO NGI 1.1 Trờn th gii7 1.1.1 V nm Beauveria v Metarhizium 1.1.2 V nm Cordyceps sp.16 1.2 Vit Nam18 1.1.3 V nm Beauveria v Metarhizium 18 1.1.4 V nm Cordyceps sp 25 Chng I TNG, NI DUNG&PHNG PHP NGHIấN CU 2.1 i tng v nguyờn vt liu dựng nghiờn cu 31 2.1.1 i tng nghiờn cu.31 2.1.2 Nguyờn vt liu 31 2.2 Ni dung v phng phỏp nghiờn cu 31 2.2.1 Thu thp v tuyn chn chng nm Bb, Ma cú c t cao 32 2.2.2 Nghiờn cu phỏt trin cụng ngh sn xut nm Bb, Ma 34 2.2.3 Xõy dng mụ hỡnh ng dng ch phm nm Beauveria tr sõu rúm thụng v sõu khoang hi u tng.35 2.2.4 iu tra thu thp ngun nm ụng trựng h tho Cordyceps sp ti Cỏc quc gia 37 Footer Page of 133 Header Page of 133 Chng KT QU NGHIấN CU T C 3.1 iu tra thu thp v tuyn chn chng nm Bb v Ma40 3.2 Nghiờn cỳ phỏt trin hon thin cụng ngh sn xut ch phm nm Beauveria bassiana v Metarhizium anisopliae . 43 3.3 Nghiờn cu mụ hỡnh ng dng ch phm nm Beauveria tr sõu rúm thụng BQLRPH Hng Lnh v ch phm nm Beauveria, Metarhizium tr sõu hi u tng H Tnh v H Ni53 3.4 iu tra thu thp ngun nm Cordyceps sp ti cỏc quc gia 59 3.4.1 Thớ nghim chuyờn xỏc nh thnh phn mụi trng nuụi nhõn nm ụng trựng h tho Cordyceps militaris 62 3.4.2 Phõn tớch giỏ tr dc liu v thnh phn húa hc ca nm Cor m68 Chng KT QU CA I TC- I HC ANHUY, TRUNG QUC 4.1 Ni dung hp tỏc69 4.2 Kt qu t c69 KT LUN V KIN NGH Kt lun 71 Kin ngh 73 TI LIU THAM KHO CHNH 74 PH LC Bng kờ danh mc bỏo cỏo ó thc hin theo H 78 PH LC Hon thin quy trỡnh cụng ngh sn xut nm Bb v Ma 81 PH LC Cỏc minh chng v ng dng nm Bb, Ma tr sõu v phõn tớch giỏ tr ca nm Cordyceps militaris 83 PH LC Hỡnh nh thc hin ti Trung Quc v Vit Nam .86 PH LC Danh sỏch cỏc bi bỏo v sỏch ó cụng b 90 Footer Page of 133 Header Page of 133 BO CO KHOA HC TNG KT KT QU THC HIN TI NGH NH TH VIT NAM TRUNG QUC (2008-2010) NGHIấN CU PHT TRIN CC NGUN NM BEAUVERIA V METARHIZIUM NG DNG PHềNG TR SU HI CY TRNG, CY RNG V PHT TRIN NGUN NM CORDYCEPS SP LM THC PHM CHC NNG CHO NGI NM 2008- 2010 M U T VN Trong nhng nm qua, Vin Bo v thc vt ó sn xut v trin khai ng dng ch phm nm Beauveria bassiana (Bb) phũng tr sõu rúm hi thụng, nm Metarhizium anisopliae (Ma) tr chõu chu hi ngụ, mớa, b cỏnh cng hi da, ry nõu hi lỳa, mi t hi cõy trng v hai nm Bb v Ma phũng tr mt s loi sõu hi rau, u tng nhiu tnh thnh c nc t kt qu tt Mc dự vy, vic nghiờn cu ch phm nm trờn ch dng li cht lng ca nm Bb t x109 bo t trờn gram v nm Ma t 5,5 x109 bo t trờn gram phỏt trin cỏc ngun nm Bb, Ma ng dng vo phũng tr mt s sõu hi cõy trng, cõy rng t hiu qu cao, t nm 2008 n 2010 ni dung ti ngh nh th Vit Nam- Trung Quc, chỳng tụi ó hon thin quy trỡnh cụng ngh sn xut cỏc ch phm nm Beauveria v Metarhizium t c nng sut v cht lng cao, trin khai ng dng loi nm trờn vo phũng tr mt s sõu hi cõy trng, cõy rng t hiu qu k thut v kinh t cao, va bo v mụi trng sinh thỏi ng rung, va bo v sc khe cng ng ng thi tin hnh iu tra thu thp ngun nm ụng trựng h tho Cordyceps sp cú Vit Nam, t ú nghiờn cu mụi trng nhõn nuụi v bc u xỏc nh giỏ tr dc liu ca ngun nm Cordyceps sp cú trin vng, lm c s to ngun nguyờn liu, thc phm chc nng cho ngi Footer Page of 133 Header Page of 133 Ni dung bỏo cỏo ny, chỳng tụi xin trỡnh by kt qu t c nm 2008- 2010 MC TIấU NGHIấN CU 2.1 Mc tiờu di hn: S hp tỏc s giỳp cho cỏn b khoa hc Vit Nam tip cn v hc chuyờn gia TQ v k nng nghiờn cu phõn lp nm v kh nng nhn bit v c tớnh sinh hc, v xỏc nh s phỏt sinh c t ca cỏc loi nm cụn trựng khỏc nhau, c bit l nm ụng trựng h tho Cordyceps sp v phỏt trin phng phỏp hon thin cụng ngh sn xut v ng dng nm tr sõu hi cõy trng, cõy rng t hiu qu 2.2 Mc tiờu trc tip: Nghiờn cu sn xut v ng dng thuc nm cụn trựng Beauveria v Metarhizium phũng tr sõu hi cõy trng, cõy rng thụng qua iu tra tuyn chn cỏc chng nm nc cú hot tớnh cao, ng thi phỏt trin cụng ngh, hon thin mụi trng, quy mụ sn xut t nng sut 50- 100 kg/ngy, cht lng tt 1010 bt/gr, cú kh nng phũng tr sõu hi cõy trng trờn din rng t 70 % sau 2- tun thớ nghim iu tra phỏt hin v thu thp ngun nm ụng trựng h tho Cordyceps sp Vit Nam, trờn c s xỏc nh hot cht ca nm v thnh phn mụi trng nhõn nuụi nm Cordyceps militaris lm nguyờn liu sn xut thc phm chc nng phc v sc kho cng ng NI DUNG NGHIấN CU, TRIN KHAI 3.1- Phớa Vin Bo v thc vt Vit Nam: 3.1.1- Phỏt trin nhng chng nm cụn trựng mi: iu tra, thu thp cỏc ngun nm Bb, nm Ma ký sinh trờn cỏc sõu chớnh hi cõy trng v cõy rng Footer Page of 133 Header Page of 133 Phõn lp cỏc ngun nm cụn trựng thu c, la chn 5-10 chng nm cú c t cao a vo sn xut, m bo cht lng 3.1.2- Cú quy trỡnh cụng ngh sn xut ch phm nm Beauveria bassiana (Bb) v Metarhizium anisopliae (Ma) trờn c s phỏt trin hon thin cụng ngh sn xut, nõng cao hiu lc tng cht lng ch phm t x 1010 bt/gr: - Phỏt trin chng Bb hoc Ma mi, ngun a phng - Hon thin cụng ngh sn xut bng vic xỏc nh t l thnh phn mụi trng phự hp cho nm phỏt trin tng nng sut 50-100 kg/ngy - Nghiờn cu cỏc yu t mụi trng (nhit v m ) nh hng n hiu qu dit sõu ca nm cụn trựng, nhm xỏc nh iu kin thớch hp phũng tr - Nghiờn cu kh nng ng dng nm Bb, Ma tr sõu hi ngoi ng rung 3.1.3- Xõy dng mụ hỡnh (2 nm), mi mụ hỡnh ng dng ch phm nm Beauveria bassiana tr sõu rúm thụng ti H Tnh, hiu qu t 70 80 % Hng dn nụng dõn ng dng ch phm nm Bb v Ma phũng tr sõu hi u tng H Ni v H Tnh trờn mụ hỡnh kho nghim 3.1.4- iu tra thu thp nm cụn trựng ụng trựng h tho (THT) Cordyceps sp cú Vit Nam ti cỏc vựng nỳi cao phớa Bc, Tõy Nguyờn v cỏc rng quc gia trờn c nc lm c s ngun nguyờn liu phỏt trin ngun thc phm chc nng phc v sc kho cng ng, xỏc nh mụi trng thớch hp nhõn nuụi nm phỏt trin, nghiờn cu tỏch chit xỏc nh hot cht ca nm 3.1.5- Trao i hp tỏc cụng ngh gia cỏc nh khoa hc Trung Quc v Vit Nam v cỏc loi nm cụn trựng cng nh kh nng ng dng nm vo phũng tr sõu hi cõy trng v cõy rng t hiu qu 3.2- Phớa i tỏc Trng i hc Anhuy, Trung Quc: 3.2.1- Phõn lp nm Bb v Ma bng phng phỏp truyn thng t mt s ngun nm cụn trựng thu thp c Footer Page of 133 Header Page of 133 3.2.2- Cựng vi cỏn b Vit Nam phỏt trin hon thin cụng ngh sn xut thuc nm Bb v Ma 3.2.3- Xỏc nh vic th nghim nm Bb v Ma phũng tr cỏc loi sõu hi cõy trng v cõy rng 3.2.4 - o to v chuyn giao cụng ngh phõn lp, la chn chng nm, sn xut v ng dng ch phm nm Bb phũng tr sõu rúm thụng cho cỏn b khoa hc Vit Nam 3.2.5- C cỏn b sang Vit Nam tham gia iu tra, trao i nghiờn cu v cụng ngh sn xut, ng dng cỏc ch phm nm Bb v Ma phũng tr sõu hi cõy trng v trc tip phõn loi cỏc chng nm Cordyceps Vit Nam 1.4 KT QU CN T TRONG QU TRèNH HP TC VI I HC AN HUY TRUNG QUC 1.4.1 Thu thp c 10 ngun nm Bb v 10 ngun nm Ma ký sinh trờn sõu rúm thụng, ry nõu hi lỳa, ve su hi c phờ, b xớt xanh hi u, b hi da, b hi mớa, mi t hi cõy ti H Tnh, Thanh Hoỏ, Ninh Bỡnh, H Ni, Vnh Phỳc, c Lk, Lõm ng, Bc Giang, Sn La v Kiờn Giang Phõn lp, phõn loi v tuyn chn c 10 chng nm Bb v 10 chng nm Ma cú c tớnh cao lm chng ging thun a vo sn xut nm Beauveria v Metarhizium, nhm nõng cao cht lng ca ch phm 1.4.2 Hon thin cụng ngh sn xut ch phm nm Bb v Ma trờn c s chng ging mi bn a, nghiờn cu t l mụi trng thớch hp v nghin bi 1.4.3 ỏnh giỏ v th nghim hiu lc ca ch phm nm Bb v Ma phũng tr sõu rúm thụng ti H Tnh v sõu hi u tng H Tnh v H Ni 1.4.4 iu tra thu thp ngun nm Cordyceps rng Cỳc Phng, Bc Giang, Vnh Phỳc, H Tnh v Tõy Nguyờn xỏc nh s phõn b ca nm ny Vit Nam Nghiờn cu xỏc nh hot cht ca chng nm cú trin vng Footer Page of 133 Header Page 10 of 133 1.4.5 C cỏn b sang i hc Anhuy, Trung Quc hc v k thut v cụng ngh sn xut v s dng ch phm nm sinh hc phũng tr sõu hi ng thi hc phng phỏp iu tra phỏt hin v thu thp nm Cordyceps sp v Vit Nam thc hin 1.4.6 Cụng b 1- bi bỏo v cỏc kt qu ca ti (ng cỏc Tp khoa hc nc) 1.4.7 Cú kt qu o to sinh viờn v tin s v nm cụn trựng 1.5 TNH MI, TNH SNG TO 1.5.1 ó hon thin quy trỡnh cụng ngh sn xut ch phm nm cụn trựng Beauveria bassiana v Metarhizium anisopliae trờn c s phõn lp c chng ging Bb v Ma mi bn a, nghiờn cu t l thnh phn mụi trng n nh v nghin bi, phỏt trin quy mụ 50-100 kg/ ngy, cht lng cao t 1,12 x1010 bt/gr (nm Bb) v 1,35 x 1010 bt/gr (nm Ma) Cao hn hn nhng nm trc khong 2,2- 2,5 ln (ch phm nm Bb ch t x 109 bt/gr v ch phm nm Ma t 5,5 x 109 bt/gr, vỡ dựng chng nm c, t l mụi trng 60% cỏm go, 30% bt ngụ v 10% tru vi 30 ml nc 100 gram mụi trng), õy l tớnh mi ca ti Nghiờn cu c nh hng ca yu t nhit v m n hiu qu ca nm Bb v Ma phũng tr sõu rúm thụng v b xớt hi nhón vi Xỏc nh c nhit thớch hp t 25-270C v m l trờn 80 % th nghim nm Bb v Ma tr sõu hi t hiu qu cao trờn 70 % sau 15 ngy phun õy l tớnh mi giỳp cho nụng dõn hng phũng tr sõu hi cõy trng t hiu qu cao 1.5.2 Xõy dng mụ hỡnh ng dng ch phm nm Bb tr sõu rúm hi thụng trờn din tớch 10 nm, vi hiu qu t t 70 90 % sau 2- tun phun, thu c 10% nm Bb ký sinh sõu rúm trờn rng thụng Xõy dng mụ hỡnh ng dng ch phm nm Bb v Ma tr sõu hi u tng trờn din tớch ha, hiu qu t 60- 68,7% Nng sut u tng 90 kg/ so, cht lng u an ton Nụng dõn Footer Page 10 of 133 Header Page 68 of 133 3.4.1 Thớ nghim chuyờn xỏc nh thnh phn mụi trng nhõn nuụi nm Cordyceps militaris: Nh phng phỏp nờu, chỳng tụi tin hnh nuụi cy trờn mụi trng Czapex- Dox, PDA v MYPS, kt qu v s phỏt trin ca ng kớnh khun lc nm iu kin phũng thớ nghim Vin BVTV thu c bng 21 Bng 21 Xỏc nh thnh phn mụi trng phự hp phõn lp v nhõn nuụi nm Cordyceps militaris STT Tờn mụi trng Thnh phn K Khun lc (mm) sau 30 ngy Czapex- Dox Agar, Sacharoza, mui khoỏng PDA Khoai tõy, Dextroza, Agar 28,5 MYPS Maltoza, Cao nm men, Pepton, ng Sacharoz, Agar 45,0 S liu bng 21, chỳng tụi nhn thy trờn mụi trng MYPS, nm Cordyceps militaris phỏt trin tt sau 30 ngy nuụi cy: ng kớnh khun lc nm t 45 mm, cũn trờn mụi trng PDA ch t 28,5 mm v mụi trng Czapex- Dox nm khụng phỏt trin Theo chỳng tụi mụi trng gm Maltoza, Cao nm men, Pepton, Sacharoza v agar l mụi trng nuụi cy thớch hp cho nm Cordyceps militaris phỏt trin, vỡ nú cú thnh phn dinh dng ging nh nhng sõu sng t Kt qu thớ nghim, chỳng tụi ó chp hỡnh nh v ng kớnh khun lc nm trờn mụi trng hỡnh v trờn ng thch hỡnh Footer Page 68 of 133 63 Header Page 69 of 133 Hỡnh Nm Cordyceps militaris phỏt trin trờn mụi trng sau 30 ngy nuụi cy Hỡnh Nm Cordyceps militaris phỏt trin trờn mụi trng thch Qua s liu v hỡnh nh trờn cho thy rừ rng l mụi trng MYPS gm Maltoza, Cao nm men, Pepton, Sacharoza, Agar l mụi trng nhõn nuụi thớch hp cho nm Cordyceps militaris, nm phỏt trin tt, si nm bụng xp T kt qu trờn, chỳng tụi ó la chn mụi trng MYPS nhõn nuụi nm ụng trựng h tho Cordyceps militaris cho nhng thớ nghim tip theo Footer Page 69 of 133 64 Header Page 70 of 133 Nghiờn cu nh hng ca iu kin nhit v m n s phỏt trin ca nm Cordyceps militaris trờn mụi trng MYPS iu kin phũng thớ nghim ti Vin BVTV (bng 22) Bng 22 nh hng ca iu kin nhit v m n s phỏt trin ca ng kớnh khun lc nm Cordyceps militaris trờn mụi trng MYPS t thớ nghim ng kớnh TB (mm) ca khun lc nm C militaris sau thi gian nuụi cy (ngy) ngy 10 15 20 25 30 35 T0 C H% Tb TB I 10,5 18,2 29,0 31,0 33,0 35,0 37,0 20,8 85,1 II 14,0 20,3 29,0 36,0 38,0 42,0 44,0 24,5 83,2 III 18,0 24,7 34,3 40,0 43,5 45,0 47,5 26,5 82,0 S liu bng 22 cho thy nm Cordyceps militaris phỏt trin trờn mụi trng MYPS cú ph thuc vo iu kin nhit v m : Trong t TN thỡ t thỏng 4, cú nhit trung bỡnh l 26,50C v m l 82 %, nm phỏt trin tt nht t 47,5 mm sau 35 ngy nuụi cy, khong nhit thp hn thỡ nm phỏt trin yu hn mụi trng nhõn to? õy l kt qu thớ nghim thc t ti Vin BVTV nm 2010, theo chỳng tụi thỡ nờn tin hnh thớ nghim tip nhng nm ti rỳt kt lun chớnh xỏc v s phỏt trin ca nm ny iu kin Vit Nam v cng nờn xỏc nh xem nm Cordyceps militaris cú th phỏt trin c qu th ging nh trờn nhng sõu khụng v nm phỏt trin c thỡ iu kin no? Cú kt qu thỡ mi cú th khng nh chớnh xỏc c nm C militaris cú kh nng s dng lm ngun nguyờn liu thc phm chc nng cho ngi Vit Nam Footer Page 70 of 133 65 Header Page 71 of 133 Hỡnh Nm Cordyceps militaris phỏt trin trờn mụi trng MYPS sau 20 ngy nhõn nuụi ti phũng thớ nghim Qua hỡnh nh, quan sỏt trờn b mt thch mt trc ca a Petri chỳng tụi thy si nm ban u mu trng xỏm, sau ú chuyn sang trng xỏm vng, si bụng xp, hi ngn, mc chng cht v bỏm cht vo mt thch, mt sau thy cú sc t ca nm mu vng sỏng, cú khớa mỳi mu vng m (hỡnh 9), ging vi nm C militaris mt s ti liu mụ t ca Chuyờn gia Trung Quc [11] Hỡnh Sc t ca KL nm Cordyceps militaris trờn mụi trng MYPS Footer Page 71 of 133 66 Header Page 72 of 133 Hỡnh 10 Nm Cordyceps militaris phỏt trin trờn mụi trng MYPS Hỡnh 11 Nm Cordyceps militaris phỏt trin trờn mụi trng MYPS sau 35 ngy nuụi cy ti Vin BVTV T s liu thu c v hỡnh nh trờn, chỳng tụi rỳt kt lun mụi trng MYPS l thớch hp nhõn nuụi nm Cordyceps militaris ti Vit Nam Footer Page 72 of 133 67 Header Page 73 of 133 3.4.2 Phõn tớch giỏ tr dc liu v thnh phn húa hc ca nm THT Cordyceps militaris: Kt qu phõn tớch v giỏ tr dc liu v thnh phn húa hc ca nm Cordyceps miritalis Cụng ty C phn dc liu TW thc hin bng 23 Bng 23 Xỏc nh giỏ tr dc liu v thnh phn húa hc ca nm Cordyceps miritalis STT Giỏ tr dc liu ca nm Cordyceps miritalis Cordycepin Thnh phn húa hc deoxyadenosine HEAA Hydroxy-Ethyl-Adenosine-Analogs VTM VTMA, B12, B2, VTMC, VTME, VTMK Nguyờn t vi lng Na, K, Al, Si Qua bng 21 phõn tớch giỏ tr dc liu sinh nm Cordyceps miritalis, chỳng tụi thy cú cht Cordycepin (3 deoxyadenosine), th l nhúm hot cht HEAA (Hydroxy- Ethyl- Adenosine- Analogs), th l nhúm vitamin gm vitamin A, vitamin B12, vitamin B2- riboflavin, vitamin C, vitamin E, vitamin K v cỏc nguyờn t vi lng Na, K, Al, Si Di õy l cụng thc ca cht Cordycepin Footer Page 73 of 133 68 Header Page 74 of 133 CHNG KT QU CA I TC THC HIN (TRNG I HC ANHUY- TRUNG QUC) 4.1- NI DUNG HP TC 4.1.1- Phõn lp nm Bb v Ma bng phng phỏp truyn thng t mt s ngun nm cụn trựng thu thp c 4.1.2- Cựng vi cỏn b Vit Nam phỏt trin hon thin cụng ngh sn xut thuc nm Bb v Ma 4.1.3- Xỏc nh vic th nghim nm Bb v Ma phũng tr cỏc loi sõu hi cõy trng v cõy rng 4.1.4 - o to v chuyn giao cụng ngh phõn lp, la chn chng nm, sn xut v ng dng ch phm nm Bb phũng tr sõu rúm thụng cho cỏn b khoa hc Vit Nam 4.1.5- C cỏn b sang Vit Nam tham gia iu tra, trao i nghiờn cu v cụng ngh sn xut, ng dng cỏc ch phm nm Bb v Ma phũng tr sõu hi cõy trng v trc tip phõn loi cỏc chng nm Cordyceps Vit Nam 4.2- KT QU T C 4.2.1- Theo ni dung hp tỏc vi vin Bo v thc vt thỡ trng i hc Anhuy, Trung Quc giỳp cỏn b Vit Nam phng phỏp phõn lp v phõn loi truyn thng 10 chng nm Bb-01 n Bb-10, GS Li Zengzhi, chuyờn gia Trung Quc ó phõn lp 10 chng nm Bb vin BVTV phõn lp c, GS Li Zengzhi ó xỏc nh c 10 chng nm trờn cú chung loi nm Beauveria bassiana, thuc h nm bụng Moniliaceae, b nm bụng Moniliales C 10 chng nm ny l ging Bb thun v cú s bo t l 4,75- 4,88 x109 bt/cm2 thch Th nghim chng nm Bb phũng tr cỏc sõu hi, xỏc nh c c 10 chng nm Footer Page 74 of 133 69 Header Page 75 of 133 Bb cú hiu qu tr sõu hi cao, sau 12 ngy hu ht cỏc chng t trờn 70%, riờng vi sõu rúm thụng thỡ hiu lc t 86,7 - 96,6% Phõn loi 10 chng nm Ma 01 n Ma -10 vin BVTV phõn loi u chung loi nm Metarhizium anisopliae thuc h nm bụng Moniliaceae, b nm bụng Moniliales C 10 chng nm ny l ging Ma thun v cú hiu lc cao vi s bo t l 4,95- 5,06 x109 bt/cm2 thch Th sinh hc nhng chng nm Ma phũng tr cỏc loi sõu hi cõy trng, kt qu sau 12 ngy thớ nghim, nng x108 bt/ml, hiu lc ca cỏc chng nm Ma tr b xớt en hi lỳa, mi nh, b hi mớa, b hi da, b xớt xanh hi u tng t 73,3 % - 100% 4.2.2- Phỏt trin hon thin cụng ngh sn xut thuc nm Bb quy mụ cụng nghip m l tn, cú nh mỏy sn xut t nm 1980 ó giỳp Vit Nam hng quy mụ lm trờn khay t nng sut m cht lng cao 1-3 x1010 bt/gr Thi gian bo qun thuc 12 thỏng 4.2.3- Xỏc nh vic th nghim nm Bb phũng tr sõu rúm hi rng thụng, hiu lc tr sõu t trờn 75- 90 % sau 15-30 ngy th nghim Ch phun ln/ nm bo t tinh nhng ó kim soỏt c sõu rúm thụng Hin Trung Quc hu nh khụng s dng húa cht phũng tr sõu rúm thụng 4.2.4- ó hng dn phõn lp, la chn chng nm, sn xut v ng dng ch phm nm Bb phũng tr sõu rúm thụng cho cỏn b khoa hc Vit Nam 4.2.5- GS Li Zengzhi trc tip sang Vit Nam tham gia iu tra, trao i cựng nghiờn cu cụng ngh sn xut, ng dng cỏc ch phm nm Bb v Ma phũng tr sõu hi cõy trng v trc tip phõn loi cỏc chng nm Cordyceps Vit Nam: Kt qu phõn loi c chng nm: Cordyceps nutans ký sinh trờn b xớt hoa quc gia Tam o Vnh Phỳc v nm Cordyceps militaris ký sinh trờn nhng t quc gia V Quang, H Tnh Footer Page 75 of 133 70 Header Page 76 of 133 KT LUN V KIN NGH KT LUN: Sau 30 thỏng thc hin, cn c vo cỏc ni dung ký hp ng v vi nhng kt qu mi t c, chỳng tụi xin rỳt mt s kt lun nh sau: 1.1- iu tra thu thp, phõn lp v tuyn chn c 10 chng nm Bb (Beauverria bassiana) thun, cú hiu lc cao vi rúm thụng, b phn trng hi c chua, ve su hi c phờ v b xớt xanh hi u tng iu tra thu thp, phõn lp v tuyn chn c 10 chng nm Ma (Metarhizium anisopliae) thun, cú hiu lc cao vi b xớt xanh hi u tng, b xớt en hi lỳa, b hi da, v b hi mớa H Ni, mi t hi chố v b xớt hi nhón vi 1.2- Hon thin quy trỡnh sn xut ch phm nm Beauverria bassiana v Metarhizium anisopliae n nh, t cht lng cao trờn c s cỏc chng nm Bb, Ma mi phõn lp ngun a phng, cú ci tin thnh phn nguyờn liu vi t l 50% cỏm go, 30% bt ngụ, 10 % bt u, 10 % tru v 35 % nc 100 % mụi trng sn xut Hong khụ nm t nhiờn khụng khớ 30-350 C 24 gi, nghin bi, cht lng ch phm nm Beauveria t 1,12 x1010 bt/gr v ch phm nm Metarhizium t 1,35 x 1010 bt/gr (tng ng Trung Quc 1010 bt/gr) Bo qun ch phm nm Beauveria v Metarhizium ni cao, khụ rỏo, iu kin bỡnh thng, hn s dng ch phm 12 thỏng 1.3- Xỏc nh c nh hng ca nhit v m ti hiu lc dit tr sõu hi ca nm Bb v Ma: Sau 12 ngy thớ nghim, vi nhit trung bỡnh l 26,80C & m l 82,9% thỡ hiu lc ca nm Bb tr sõu rúm thụng t 100% v hiu lc ca nm Ma tr b xớt hi nhón vi t 72,4% 1.4- Xõy dng c mụ hỡnh ng dng ch phm nm Beauveria bassiana phũng tr sõu rúm trờn din tớch 10 thụng, ti Ban QLR Hng Lnh, H Tnh Footer Page 76 of 133 71 Header Page 77 of 133 nm 2008 2009, phun ln sau 14 -28 ngy, hiu qu t 67,7- 81,3%, phun ln 2, hiu qu t cao t 73,5 - 85,1% v kộo di n 42 ngy phun ó thu c 10% sõu rúm thụng b nm Bb ký sinh ti rung phun nm Hng dn nụng dõn ng dng ch phm nm Beauveria v Metarhizium tr sõu xanh (Ha) c qu u tng ti mụ hỡnh Vin BVTV nm 2008, mụ hỡnh tr sõu khoang hi u tng H Tnh nm 2008 Mụ hỡnh phũng tr sõu khoang hi u tng v xuõn hố nm 2010 Kim Chung, ụng Anh, H Ni: Hiu lc ca ch phm nm Beauveria t 62,8- 65,0 % v hiu lc ca nm Metarhizium t 64,5- 68,2 % sau 12- 15 ngy phun, hiu lc ny cao hn nhng nm trc khong 15- 20% 1.5- iu tra thu c ngun nm THT Cordyceps sp c min: Cordyceps sp1 ký sinh trờn b xớt nõu quc gia Cỳc Phng, nm Cordyceps sp2 ký sinh trờn sõu hi sng t khu bo tn Tõy Yờn T, Sn ng, Bc Giang, nm Cordyceps nutans ký sinh trờn b xớt hoa quc gia Tam o Vnh Phỳc, nm Cordyceps militaris ký sinh trờn nhng sng t quc gia V Quang, H Tnh v nm Cordyceps sp3 trờn nỳi Ngc Tiờn, xó Tõn Hi, huyn Tõn Thnh, Tnh B Ra- Vng Tu 1.6- Xỏc nh c mụi trng nhõn to nuụi cy nm Cordyceps militaris ký sinh trờn nhng quc gia V Quang l MYPS gm cú Maltoza, Cao nm men, Pepton, Sacharoz v Agar - Xỏc nh c hot cht ca nm Cordyceps militaris gm cordycepin, HEAA, s vitamin A, B, C, E, Kv cỏc nguyờn t vi lng Na, K, Al v Si 1.7- ó cú NCS bo v v ti nghiờn cu nm Metarhizium anisopliae tr b cỏnh cng hi da ng bng sụng Cu Long v ang o to nghiờn cu sinh m Ngc Hõn ti Vin Khoa hc Nụng nghip Vit Nam (2008- 2011) nghiờn cu v nm Beauveria bassiana phũng tr b phn hi c chua vựng H Footer Page 77 of 133 72 Header Page 78 of 133 Ni v 10 sinh viờn ca trng i hc v nm Bb, nm Ma v nm Cordyceps militaris nm 2008- 2010 KIN NGH: ngh tip tc nghiờn cu trin khai ng dng ch phm nm Beauveria v Metarhizium phũng tr sõu hi cõy trng, cõy rng trờn din rng, nhm to sn phm an ton v bn vng Chuyn giao kt qu ca ti ngh nh th ny vo sn xut trờn quy mụ cụng nghip ngh Nh nc cho xõy dng mt nh mỏy sn xut thuc nm Beauveria bassiana, nhm s lng cung cp cho cỏc a phng cú rng thụng c nc s dng vo phũng tr sõu rúm thụng t hiu qu kinh t v xó hi cao Tip tc iu tra thu thp v nghiờn cu v nm ụng trựng h tho Cordyceps militaris lm c s nguyờn liu ngun thc phm chc nng phc v cho ngi Vit Nam Footer Page 78 of 133 73 Header Page 79 of 133 TI LIU THAM KHO Cc Bo v thc vt, 2001 Phng phỏp iu tra phỏt hin sõu bnh hi cõy trng, Nh Xut bn Nụng nghip T Kim Chnh, 1996, Tuyn chn cỏc chng nm Metarhizium v Beauveria phũng tr mi Lun ỏn tin s sinh hc, vin Cụng ngh sinh hc, Nguyn Lõn Dng, 1981 S dng vi sinh vt phũng tr sõu hi cõy trng Nh xut bn Khoa hc v K thut H Ni Trang 22-108 Nguyn Lõn Dng, Nguyn Qunh Uyn, Dng Vn Hp, 2009, Nm ụng trựng h tho, bit dc quý cho ngi? Webside Bỏch khoa ton th m Wikipedia Trn Vn Móo, 1980, Nghiờn cu nm bch cng tr sõu rúm hi rng thụng, ti liu dch, trng i hc Lõm nghip Qung Ninh Phm Quang Thu, 2009 Phỏt hin nm ụng trựng h tho ( Cordyceps guinnii Berk.) ti quc gia Tam o Tp Nụng nghip & PTNT s 6/2009 , trang 96- 99 Phm Quang Thu, 2009 Phỏt hin nm nhng trựng tho Cordyceps militaris ti quc gia Hong Liờn, tnh Lao Cai Tp Nụng nghip & PTNT s 9/2009 , trang 109-112 Phạm Thị Thùy, Videnova E., Velichcova K (1988), Tác động tơng hỗ chế phẩm vi khuẩn Bacillus thuringiensis hỗn hợp với virus đa diện nhân NPV Mb chất kích thích sinh trởng Dimilin lên sâu hại bắp cải Mamestra brassicae L Báo cáo tiếng Nga Hội nghị Quốc tế thuốc vi sinh vật ngày 24-26/10/1988 Plopdip- Bungaria Footer Page 79 of 133 74 Header Page 80 of 133 Phm Th Thu, 1996 To sinh nm Beauveria bassiana Tuyn cụng trỡnh nghiờn cu cỏc bin phỏp sinh hc, Nh Xut bn Nụng nghip, trang 73-81 10 Phm Th Thu, 1999 Kt qu th nghim ch phm nm Beauveria bassiana phũng tr sõu rúm thụng Lõm trng Phự Bc Yờn Sn La nm 1998 Tp Nụng nghip & PTNT s 5, trang 202-205 11 Phm Th Thu, 2004 Cụng ngh sinh hc bo v thc vt Nh xut bn i hc Quc gia H Ni Trang 109-146 12 Phm Th Thu, 2009 Nghiờn cu phỏt trin nm Beauveria v Metarhizium phũng tr sõu hi cõy trng, cõy rng Vit Nam Tp Nụng nghip & PTNT s 12, trang 18-22 13 Phm Th Thu, 2010, Kt qu iu tra v nghiờn cu nm ụng trựng h tho Cordyceps sp Viờt Nam, Tp Nụng nghip v PTNT s 5/ 2010, trang 55- 58 14 Ti liu ni b ca Ban Qun lý Quc gia Cỳc Phng, 2006 15 Ti liu ni b ca Ban Qun lý Quc gia Tam o, 2007 16 Ti liu ni b ca Ban Qun lý Quc gia Quang, 2007 17 Ti liu ni b ca Ban Qun lý Khu bo tn Tõy Yờn T, 2006 18 Abbott W S., 1925 A method for computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology, 18, pp 265 - 267 19 Aguda R M Saxena R C Litsinger and Roberts D S (1994), Inhibitory effect of insecticides on entomogenous fungi Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana Rice Res New 9(6).16-17 20 Barnett H L and Barry B Hunter (1972), Illustrated genera of imperfect fungi Bugress Publishing Company Minneapolis Minnesota 250 pp Footer Page 80 of 133 75 Header Page 81 of 133 21 Bateman R P., Carey M., Moore D and Prior C (1998), The enhanced infectivity of Metarhizium flavoviride in oil formulations to desert locusts at low humidities Ann Appl Biol 122, 145-152 22 Chen L T., Cao H.F & Huang W.F , 2005 Components, pharmacological activities and applications of Cordyceps militaris, Modern Food Science, 21(3), 192- 195 23 Feng-Lin Hu, Zeng- Zhi Li, Ya- Qiong He, Chu- Ru Li, Bo Huang, MeiZhen Fan, 2009 Secondary metabolistes in a soybean fermentation broth of Paecilomyces militaris Journal of Food Chemistry 116, pp 198- 201 24 Henderson, C.F and E W Tilton, 1955 Tests with acaricides again the plant with minite Journal Econ Entomol Number 48, pag 157-161 25 Milner R J (1989), Identification of the Bacillus popilliae group of insect pathogens In Microbial control of pest and plant diseases 1970 - 1980 (ed H D Burges) , pp 45-59 Academic Press, London 26 Milner R J (1995), Recent progress with Metarhizium anisopliae for pest control in Autralia In Proceeding of the frist Asia/ Pacific conference on Entomology Chiang Mai, November 27 Ohta Y Lee, J B Hayashi, K Fujita A., Park D K, 2007 In vivo antiinfluenza virus activity of an immunomodulatory acidic polysaccharide isolated from Cordyceps militaris grown on germinated soybeans Journal of Agricutural and Food Chemistry, 55 (25), 10194- 10199 28 He Ni, Xiao-Hong Zhou, Hai-Hang Li*, Wen-Fang Huang, 2008 Guangdong Provincial Key Lab of Biotechnology for Plant Development, College of Life Sciences, South China Normal University, Guangzhou 510631, China Footer Page 81 of 133 76 Header Page 82 of 133 29 Webside ca xó Tõn Hi, huyn Tõn Thnh, Tnh B Ra Vng Tu, nm 2010 Xỏc nhn ca Vin BVTV Ch nhim ti PGS.TS Phm Th Thựy Xỏc nhn ca Ch tch H Footer Page 82 of 133 Phn bin 77 Phn bin ... ngh sn xut ch phm nm Beauveria v Metarhizium [9]: * Sử dụng chủng nấm: Sản xuất nấm Beauveria bassiana la chọn chủng Bb đợc phân lập sõu rúm thụng Sản xuất nấm Metarhizium anisopliae, la chọn... BEAUVERIA V METARHIZIUM TRONG PHềNG TR DCH SU HI CY TRNG, CY RNG V NM CORDYCEPS LM NGUYấN LIU THC PHM CHC NNG CHO NGI 1.1 Trờn th gii7 1.1.1 V nm Beauveria v Metarhizium 1.1.2 V nm Cordyceps sp.16... thit b lên men lớn sn xut nấm Metarhizium anisopliae theo quy mụ công nghiệp, nên phơng pháp cha thực đợc Vit Nam - Lên men xốp: Chuẩn bị loại môi trờng cấp khử trùng 0,8 at 30 phút Môi trờng