Nghiên cứu phân lập nấm ở trên cá rô đầu vuông (Anabas testudineus )

Header Page of 133 PHẦN ĐẶT VẤN ĐỀ Nuôi trồng thủy sản năm gần ngày phát triển mạnh mẽ quy mô, hình thức diện tích nuôi Trong nuôi trồng nước phát triển với nhiều đối tượng xuất cá tra, cá basa… So với nghề nuôi trồng thủy sản nước lợ mặn nuôi trồng thủy sản nước phát triển lâu đời giữ vai trò quan trọng thị trường xuất thị trường tiêu thụ nội địa Nước ta có vị trí địa lý thuận lợi cho việc nuôi trồng đánh bắt thủy sản nước lợ, nước mặn, nước có bờ biển trải dài từ Bắc tới Nam, nhiều sông lớn chảy biển nhiều kênh rạch thuận tiện cho việc nuôi đánh bắt thủy sản Những năm gần viêc nuôi thủy sản nước mặn, lợ có nhiều biến đổi xấu ảnh hưởng đến việc nuôi trồng thủy sản nước, việc nuôi tôm tràn lan, sử dụng nhiều hóa chất thuốc kháng sinh nuôi tôm gây ảnh hưởng nghiêm trọng nguồn nước mặn nguồn nước ngầm Vì việc nuôi thủy sản nước nước lợ trọng nhằm hạn chế việc nuôi tôm gây ô nhiễm khôi phục nguồn nước Ngoài đối tượng nước quen thuộc cá tra, basa, trắm cỏ, mè trắng, cá trê lai …thì cá rô đầu vuông xem đối tượng để đa dạng hóa sản phẩm nhằm đóng góp việc tiêu thụ nội địa xuất thủy sản tương lai Theo tài liệu Chi cục Quản lý chất lượng Nông Lâm sản Thuỷ sản tỉnh Hậu Giang, cá rô đầu vuông ông Nguyễn Văn Khải, thuộc ấp 5, xã Vĩnh Thuận Tây, huyện Vị Thuỷ phát đầu năm 2008 với số lượng khoảng 70 lẫn ao nuôi cá rô đồng Đây đối tượng có giá trị kinh tế với nhiều ưu điểm vượt trội sức sống cao, dễ nuôi, với hệ số tiêu thụ thức ăn thấp, lớn nhanh, bệnh tật, kích thước lớn nhiều so với cá rô đồng bình thường Cá rô đầu vuông sống nơi có điều kiện môi trường khắc nghiệt, thiếu ô xy Tuy kích thước trọng lượng lớn chất lượng thịt cá rô đầu vuông thơm ngon cá rô đồng Nếu thời gian nuôi cá kéo dài, kích thước trọng lượng cá lớn chất lượng thịt cá tăng theo trọng lượng cá, cá có thớ thịt dày, xương dăm cá rô đồng bình thường nhiều Đặc biệt cá đực, không khác kích cỡ, trọng lượng, hình thể tăng trưởng ao Đây sản phẩm thị trường ưa chuộng bán chạy với giá bán trung bình 30.000đ/kg loại (100-120g/con) Hiện cá Footer Page of 133 Header Page of 133 rô đầu vuông nuôi phổ biến tỉnh Đồng sông Cửu Long Đồng Nai Trong tương lai, loài cá philê để xuất sang thị trường nước ngoài.[8] Quy trình nuôi cá rô đầu vuông giống nuôi cá rô đồng bình thường không đòi hỏi kỹ thuật cao, cần quản lý tốt môi trường ao nuôi cộng với chế độ cho ăn hợp lý mang lại hiệu cao Hầu hết người nuôi thả cá với mật độ cao sử dụng thức ăn công nghiệp làm cho môi trường nuôi ngày bị ô nhiễm từ dịch bệnh phát sinh gây thiệt hại lớn Những bệnh thường gặp sình bụng, đen thân, nấm nhớt, xuất huyết…Trong bệnh nấm thường xuất vào mùa mưa nhiệt độ hạ thấp, nấm thường phát triển tốt nhiệt độ 18 – 25oC Hiện có công trình nghiên cứu bệnh gây cá rô đầu vuông Xuất phát từ thực tế sản xuất kết hợp nguyện vọng thân đồng ý khoa Thuỷ sản giáo viên hướng dẫn, định tiến hành đề tài: “Nghiên cứu phân lập nấm cá rô đầu vuông (Anabas testudineus ) nuôi tỉnh Thừa Thiên Huế” Mục tiêu đề tài: - Xác định nấm cá rô đầu vuông, thử nghiệm ảnh hưởng pH NaCl đến khả phát triển nấm phân lập - Bước đầu làm quen với nghiên cứu khoa học nâng cao kiến thức thực tế Footer Page of 133 Header Page of 133 PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Đặc điểm sinh học cá rô đầu vuông 2.1.1 Phân loại[10] Cá rô đầu vuông - Tên Tiếng Anh: Square-head anabas - Tên Tiếng Việt: Cá rô đầu vuông Phân loại khoa học Ngành: Chordata Lớp: Anabantidae Bộ: Anabas Họ: Actinopterygii Giống: Perciformes Loài:Anabas testudineus Hình 2.1: Cá rô đầu vuông 2.1.2 Phân bố Cá phát nhân giống vào năm 2008 từ ao nuôi hộ nông dân huyện Vị Thủy, tỉnh Hậu Giang Hiện chưa rỏ nguồn gốc thật loài cá này.[8] Cá rô đầu vuông loài cá nước ngọt, sống vùng nhiệt đới Ở Việt Nam cá rô đầu vuông phổ biến miền Nam miền Bắc.[10] Footer Page of 133 Header Page of 133 Ngoài tự nhiên cá sống sông, ao, hồ, mương vườn, ruộng, cá sống cửa sông lớn, miền núi gặp Trong điều kiện nhân tạo, cá rô sống bể xi măng, ao mương có diện tích nhỏ Ngoài cá nơi mát bề mặt thể giử ẩm, cá sống không khí nhiều nhờ có quan hô hấp phụ mang sử dụng khí trời, ưu việc vận chuyển nuôi với mật độ cao ao.[10] 2.1.3 Đặc điểm hình thái[10] Cá rô đầu vuông có nguồn gốc xuất phát cá rô đồng nên cá rô đầu vuông có hình thái không khác biệt so với cá rô đồng Cá lớn đầu to vuông, vẩy màu vàng sậm, đuôi xòe đỏ lợt, dài cong, có hai chấm đen gần đuôi mang cá Cá rô đầu vuông có thân hình bầu dục, dẹp bên, cứng Đầu cá có hình vuông, môi trề, bụng sệ, đuôi dài, vây dày Thân cá dài có hai chấm đen gần đuôi mang cá Miệng trên, rộng vừa, rạch miệng xiên kéo dài đến đường thẳng đứng kẻ qua mắt Răng nhỏ nhọn Mỗi bên đầu có hai lỗ mĩu, lỗ phía trước mở ống ngắn Mắt to, tròn nằm lệch nửa đầu gần chót mõm gần điểm cuối nắp mang Lúc nhỏ hình dáng cá rô đầu vuông giống cá rô đồng bình thường cá có kích thước lớn Đặc điểm khác cá rô đầu vuông cá rô đồng bình thường cá đực cá có tốc độ tăng trưởng tương đương (cá rô đồng bình thường tăng trưởng nhanh gấp đôi cá rô đồng đực) Phần trán mắt cong lồi tương đương 1,5 đường kính mắt Cạnh xương lệ, xương nắp mang, xương nắp mang cạnh sau xương nắp mang có nhiều gai nhỏ nhọn, tạo thành cưa Lỗ mang rộng, màng mang hai bên dính có phủ vảy Trên đầu có nhiều lỗ cảm giác Vảy lược phủ toàn thân, đầu gốc vi lưng, vi hậu môn vi đuôi, vảy phủ lên vi nhỏ vảy thân đầu Gốc vi bụng có vảy nách hình mũi mác Đường bên nằm ngang chia làm hai đoạn: Đoạn từ bờ lỗ mang đến ngang vi lưng cuối Đoạn từ ngang gai vi lưng cuối đến điểm gốc vi đuôi, hai đoạn cách hang vảy Gốc vi lưng lưng dài, phần gai gần bốn lần phần tia mềm Khởi điểm vi lưng vảy đường bên thứ ba kéo dài đến gốc vi đuôi Khởi điểm Footer Page of 133 Header Page of 133 vi hậu môn ngang vảy đường bên thứ 14 – 15, gần điểm giữ gốc vi đuôi gần chót mõm chạy dài dến gốc vi đuôi Vi đuôi tròn, không chẻ đôi Gai vi lưng, vi hậu môn, vi bụng cứng nhọn Mặt lưng đầu thân có màu xám đen xám xanh lựot dần xuống bụng, số cá thể ửng lên màu vàng nhạt Cạnh sau sương nắp mang có màng da nhỏ màuv đen Có đốm đen đậm gốc vi đuôi có số điểm đen nằm rải rác thân Đặc biệt, khác với cá rô đồng bình thường, cá rô đầu vuông đực không chênh lệch nhiều kích cỡ, trọng lượng, hình thể tăng trưởng ao 2.1.4 Dinh dưỡng[7] Cá bắt đầu ăn từ ngày thứ ba, thức ăn ưa thích cá giống loài động vật phù du cỡ nhỏ ao bọn giáp xác râu ngành, chì chúng ăn ấu trùng tôm cá Khi trưởng thành cá sử dụng nhiều loại thức ăn, thức ăn ưa thích cá động vật đáy giun tơ, ấu trùng côn trùng, mầm non thuỷ thựcvật Ngoài cá rô có khả sử dụng thức ăn chế biến phụ phẩm nông nghịệp tốt Cá rô đầu vuông loài cá dữ, ăn tạp, thiên động vật Tính thể đàn cá có cá chết sống công ăn thịt chết giai đoạn cá giống, thiếu thức ăn cá lớn ăn cá nhỏ, nguyên nhân làm giảm tỷ lệ sống cá Cá có hệ số tiêu thụ thức ăn thấp tốn 1,4kg thức ăn cho 1kg cá thành phẩm, nuôi cá rô đồng bình thường tốn tới 2kg thức ăn Giai đoạn đầu cá sử dụng thức ăn có độ đạm 40% giảm từ từ đến 32% giai đoạn thu hoạch Cá thường nuôi thương phẩm ao với mật độ dày từ 40-80con/m2 Với mật độ 80con/m2nếu nuôi tốt sau 3-4 tháng cho xuất 70tấn/ha Nếu nuôi thâm canh thức ăn cho cá rô đầu vuông chủ yếu thức ăn công nghiệp chế biến: - Thức ăn công nghiệp nên có độ đạm từ 28-35% tùy giai đoạn cá nuôi mà cho thức ăn có độ đạm khác + Cá giai đoạn thả đến tháng tuổi: Cho ăn 35% độ đạm, phần ăn 5-7% trọng lượng thể Footer Page of 133 Header Page of 133 + Cá giai đoạn tháng đến tháng tuổi: Cho ăn 30% độ đạm, phần ăn 4-6% trọng lượng thể + Cá giai đoạn tháng đến thu hoạch: Cho ăn 28% độ đạm, phần cho ăn 2-3% trọng lượng thể - Thức ăn chế biến: Gồm 30% bột cá cá tạp xay nhuyễn, cám gạo 70% Trộn loại lại nấu chín cho cá ăn, phần cho ăn tương tự cho cá ăn thức ăn công nghiệp 2.1.5 Sinh trưởng Cá lớn nhanh, với thời gian nuôi tháng trọng lượng cá nuôi đạt 100-120g/con Trung bình thời gian nuôi tháng đầu đạt trọng lượng con/kg Nếu nuôi kéo dài tháng trọng lượng cá đạt từ 500-800g/con Cá bố mẹ nặng từ 0,7 đến 0,8 kg/con, nhiều cặp cá bố mẹ nuôi lâu ngày đạt trọng lượng 900g/con [10] Trong điều kiện nhân tạo, cá rô đầu vuông sống bể xi măng, ao mương có diện tích nhỏ, cá nơi mát bề mặt thể giữ ẩm, cá sống không khí nhiều nhờ có quan hô hấp phụ mang sử dụng khí trời, ưu việc vận chuyển nuôi với mật độ cao ao.[7] 2.1.6 Sinh sản[10] Ngoài tự nhiên cá có tính sinh sản vào mùa mưa Đầu mùa mưa cá di chuyển từ nơi sinh sống đến nơi vừa ngập nước sau đám mưa lớn đầu mùa như: ruộng, ao, đìa v.v… nơi có chiều sâu cột nước 30 – 40 cm để sinh sản Cá rô đầu vuông tập tính giữ Cá rô đầu vuông thành thục sau tháng tuổi Loài cá có tập tính giữ con, sinh sản tập trung vào mùa mưa, tháng 6-7 có khả sinh sản nhiều lần năm Cá nuôi khoảng 3- tháng mang trứng Ở chiều dài 10 – 13 cm, cá rô đầu vuông tham gia sinh sản lần thứ nhất, sức sinh sản cá cao đạt 30 – 40 vạn trứng/kg cá cái, trứng cá thuộc loại trứng có màu vàng Cá đẻ – lần/năm Theo Dương Nhựt Long (2003) trứng cá rô thành thục thường có màu trắng ngà màu trắng ngà vàng, đường kính trứng sau trương nước dao động từ 1,1-1,2mm trứng cá rô thuộc loại trứng Sức sinh sản cá cao đạt khoảng 300.000 đến 700.000 trứng/kg cá Footer Page of 133 Header Page of 133 2.2 Tình hình nuôi cá rô đầu vuông Thừa Thiên Huế Tại A Lưới: Nhằm góp phần đa dạng nguồn giống ntts nước ngọt, có giá trị dinh dưỡng cao, giá trị kinh tế lớn, Phòng Nông nghiệp PTNT tham mưu xây dựng mô hình “trình diễn nuôi cá rô đầu vuông”, với qui mô 5.000 m2 15.000 cá giống Tại Hội nghị nghe cán trực tiếp đạo báo cáo mô hình nuôi thử nghiệm cá Rô đầu vuông phát triển tốt, bị bệnh tật, tỷ lệ hao hụt thấp, loài cá ăn tạp, phù hợp với điều kiện tự nhiên khí hậu A Lưới, phù hợp cho hộ dân, chất lượng thịt cá thơm ngon, giá trị dinh dưỡng cao Cá rô đầu vuông giống cá nhập từ tỉnh đồng sông cửu Long, ưu điểm thịt thơm, ngon Tổng kinh phí thực hiện: 50.000.000 đồng; Quy mô: 10 hộ, diện tích ao hộ từ 300 m2 – 400 m2 Địa điểm thực hiện: xã Hồng Kim, Nhâm, Hồng Trung, Bắc Sơn Hương Phong với 15000 giống, thức ăn, vôi bột khử độc ao, đồng thời cử cán chuyên trách thường xuyên hướng dẫn kỹ thuật chăn nuôi cho chủ hộ.[14] Đồng chí Văn Lập – Phó trưởng Phòng Nông nghiệp PTNT quan trực tiếp tham mưu cho UBND huyện triển khai mô hình đã chủ trì phát biểu Hội nghị Đây mô hình triển khai địa bàn huyện A Lưới, mới, kinh nghiệm trình triển khai thiếu sót không số quy trình kỷ thuật Tuy nhiên qua 3,5 tháng triển khai thực hiện, nhận thấy thành công, cá phát triển nhanh (150-200gam/con), ước giá trị thu sản lượng: 2.100kg; Năng suất: 4,2 tấn/ha; Tổng giá trị: 147.000.000đ hiệu kinh tế đem thu nhập cho bà khoảng 82.000.000đ Đây mô hình cần nhân rộng địa bàn huyện năm 2013.[14] Tại Hương Trà: Hội nghị tổng kết mô hình nuôi cá rô đầu vuông ngày 28-12-2012 cho thấy Mô hình nuôi thử nghiệm nuôi xã Hương Vân , Hương Văn Hương Toàn Sau tháng thả nuôi hộ thu 53,4 triệu đồng, trừ chi phí giống, thức ăn, công chăm sóc, hộ lãi ròng 21,3 triệu đồng Trong thời gian tới Trạm Khuyến Nông – Lâm – Ngư Hương Trà tiếp tục nhân rộng mô hình nuôi cá rô đầu vuông toàn địa bàn.[13] Quảng Điền Phú Vang: Năm 2011, giúp đỡ hỗ trợ Chương trình Hỗ trợ nghành thuỷ sản giai đoạn (FSPS II); Trung tâm Khuyến nông – lâm – ngư phối hợp với ban tư vấn nước tổ chức hoạt động “Tập huấn quy trình nuôi thương phẩm cá rô đầu vuông ao đất kết hợp làm mô hình trình diễn” Cho nông nghèo xã Quảng Thái – huyện quảng Điền Vinh Thái – huyện Phú Vang.[12] Footer Page of 133 Header Page of 133 Theo đánh giá bước đầu đến sau tháng nuôi cá phát triển tốt tỷ lệ sống ước đạt 94%, trọng lượng bình quân đạt 30g/con, dự kiến sau tháng nuôi sản lượng đạt 160kg, hiệu kinh tế 2.144.000 đồng/2.000m2 ao Bên cạnh việc xây dựng mô hình trình diễn, chuyên gia kết hợp tập huấn chuyển giao kỹ thuật cho 40 hộ nông ngư dân nghèo xã Quảng Thái Vinh Thái.[12] Đây mô hình phù hợp với quy mô đầu tư có khả nhân rộng cho hộ nghèo địa bàn tỉnh Mặc dù cá rô đầu vuông đối tượng nuôi có nhiều triển vọng để phát triển địa bàn tỉnh Thừa Thiên Huế Tại Hương Thủy: Anh Ngô Phước Hảo, cán Phòng Kinh tế thị xã Hương Thủy cho biết: “Từ ngân sách địa phương, năm 2011 Phòng Kinh tế thị xã Hương Thủy xây dựng mô hình thí điểm cá rô đầu vuông diện tích 1,3 Mô hình thực 13 hộ gia đình Mỗi hộ thả nuôi diện tích 1.000m2, hỗ trợ giống, thức ăn, thuốc thú y kỹ thuật, với kinh phí triệu đồng Mô hình thực từ tháng 11/2011, đến cá phát triển tốt, số hộ thu tỉa bán với giá 80 ngàn đồng/kg Đây đối tượng nuôi mới, tỷ lệ sống cao, giúp bà đa dạng đối tượng nuôi”.[12] 2.3 Tình hình nghiên cứu bệnh nấm động vật thủy sản 2.3.1 Trên giới Trên giới bệnh nấm cá nghiên cứu sớm (Swan, 1889) Vào năm 1960 bệnh nấm xuất tôm đỏ Tây Ban Nha lan sang đảo Anh Quốc, Thổ Nhĩ Kỳ, Hy Lạp Nauy Nấm làm tổn thương lớp kitin mô bệnh làm tôm chết nhanh, tỷ lệ chết lên đến 100% Loài nấm gây thiệt hại Aphanomyces astaci(Sharon and Rohana,2004).Đến năm 1974, Ameson phân lập Lagenidium sp gây tượng chết hàng loạt ấu trùng tôm sú Năm 1972, dịch bệnh lở loét (EUS-Epizootic Ulcerative Syndrome) xảy Úc sau lan sang nhiều nước giới Ở Việt Nam, bệnh xuất từ năm 1973, dịch bệnh gây thiệt hại cho nghề nuôi cá Việt Nam nhiều nước giới (Bùi Quang Tề,1994) Rất nhiều loài cá ảnh hưởng loại bệnh này, có 100 loài cá bị nhiễm bệnh lở loét (Frerich,1998) Năm 1980, Hatai phân lập chủng nấm Aphanomyces piscicida cá bị bệnh lở loét Nhật Bản Nấm Aphanomyces sp phân lập từ cá bị bệnh lở loét Châu Á Úc(Callinan,1995;Lilley,1997) Năm 1997, Chutina Hanjavanit ctv phân lập Aphanomyces sp cá lóc nuôi Singapore Năm 1999, Footer Page of 133 Header Page of 133 Suprance Chinabut and Ronal J.Robets phân lập loài nấm Aphanomyces invadans cá bị lở loét.[1] Năm 1996, Lightner phân lập Lagenidium sp trứng ấu trùng cua xanh(Scylla spp), (Callinectes spp), tỷ lệ nhiễm cao, bệnh xảy có 90% trứng ấu trùng bị nhiễm nấm Trứng ấu trùng tôm hùm Châu Mỹ(Homarus spp) bị tác hại bệnh nấm, thường nhiễm nặng loại nấm Lagenidium sp gây chết 90% ấu trùng (Nison, 1976; CJ.Sinderman, 1990) Năm 1995, Nakamura nghiên cứu bệnh nấm trứng ấu trùng cua xanh(Scylla serrata) Indonesia xác định loài nấm Lagenidium thermophilum Từ ấu trùng Zoea trứng ghẹ(Portunus pelagicus) bị bệnh nhiều tác giả phân lập giống nấm khác là: Lagenidium callinectes, Haliphthoros milfodensis Atkinsienlla okinawaersis (K.Hatai, 2000) Bào ngư (Haliotis sp) nuôi Nhật Bản bị bệnh nấm Atkinsienlla, bệnh gây tỷ lệ chết cao (K.Hatai, 2000).[15] Năm 1999, Motarda phân lập loài nấm Saprolegnia salmonis cá hồi(Onchrhynchus nerka) Loài nấm làm cho cá có tượng lở loét đầu vây, gây thiệt hại lớn giai đoạn nuôi thương phẩm.[1] Hai giống nấm Acremonium Fusarium phân lập đối tượng thủy sản nước nước lợ ( Yanong, 2003; Khoa et al, 2004; Khoa and Hatai, 2005; Duc et al, 2009; Trần Ngọc Tuấn Phạm Minh Đức , 2010) Đối với cá nhiễm Fusarium, Hatai et al, (1986) Crow et al (1995) mô tả dấu hiệu đốm trắng thân cá, vết phù phần đầu nhớt có màu trắng đục.[3] Một số loài cá cá chép, cá măng, cá hồi, cá rô phi cá tra giai đoạn trứng nuôi thương phẩm ghi nhận nhiễm nhóm nấm noãn, Oomycetes (Kitancharoen et al., 1995; Kitancharoen et al., 1997; Hussein and Hatai, 1999; Chukanhom and Hatai, 2004; Loan et al., 2006; Panchai et al., 2007) Các ghi nhận trước cho thấy giống nấm Achlya thuộc nhóm nấm noãn, Oomycetes, gây bệnh chủ yếu trứng loài cá nước (Yanong, 2003) Khi ký sinh cá, sợi nấm tập trung thành búi gòn bên thể ký chủ phát triển nhanh (Neish and Hughes, 1980; Kabata, 1985) Sự tương đồng đặc điểm hình thái, trình sinh sản vô tính dấu hiệu bệnh lý chủng thuộc loài Achlya bisexualis với loài nấm phân lập cá lóc giống nghiên cứu tìm thấy Loài Achlya bisexualis ghi nhận nhiễm trứng cá rô phi vằn bột, Footer Page of 133 Header Page 10 of 133 Oreochromis niloticus Thái Lan (Panchai et al., 2005; Panchai et al., 2007), trứng cá tra dầu Thái Lan (Abking et al., 2009).[3] 2.3.2 Ở nước ta Trong trại sản xuất giống nước nước lợ Việt Nam, bệnh nấm có khả gây đợt dịch lớn, gây thiệt hại đáng kể đến sản xuất giống (Khoa,2004) Bệnh nấm thủy my gây tượng ung trứng cá, đặc biệt trứng cá chép, bệnh xảy phải xả bỏ hoàn toàn (Bùi Quang Tề,1994).Bệnh nấm gây tượng chết hàng loạt ấu trùng tôm sú (Đỗ Thị Hòa, 2004), tác nhân gây tượng Lagenidium sp.Tôm nuôi Việt Nam thường hay bị bệnh đen mang, nguyên nhân nấm Fusarium (Khoa,2004), từ ao tôm bị bệnh đen mang, tác giả phân loài nấm Fusarium incarnatum, Fusarium solani.[1] Tháng 11 năm 2008, Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Chiểu, Phạm Văn Ty nghiên cứu hội chứng lở loét cá nước ngọt, phân lập từ vết loét từ cá bệnh phát số giống nấm thuộc giống Aphanomyces, Achlya, Saprolegnia có tác dụng làm tăng mức độ bệnh, tăng tỷ lệ chết 2.4 Một số bệnh nấm gây động vật thủy sản 2.4.1 Bệnh nấm thủy my[1] Tác nhân gây bệnh: Gây bệnh số loài thuộc giống: Leptolegnia, Saprolegnia Achlya; Họ Saprolegniaceae; Bộ Saprolegniales Dấu hiệu bệnh lý: - Khi cá bị bệnh nhẹ khó phát mắt thường, phát mắt thường bệnh nặng Đầu tiên, da cá xuất vùng trắng xám, sau vài ngày mọc lên sợi nấm mảnh phát triển lên thành búi nấm trắng bông, đầu sợi nấm bám vào da cá, đầu tự môi trường nước Nấm thủy my tiết chất làm tan rã protein tế bào tổ chức thể cá, kích thích tế bào tổ chức tiết dịch nhờn làm cản trở hô hấp tuần hoàn Cá bị bệnh nấm thủy my có tượng bơi lội hỗn loạn, không bình thường, bị kích thích ngứa ngáy, thích cọ sát vào vật thể nước, làm tróc vẩy trầy da tạo hội thuận lợi cho vi khuẩn kí sinh trùng gây bệnh xâm nhập làm cá bị bệnh nặng tác hại nghiêm trọng thêm - Nấm thủy my ký sinh làm ung trứng cá Phần gốc sợi nấm cắm sâu vào màng trứng, phần sợi nấm lơ lửng nước tủa xung quanh, nhìn trứng cá giống bị nấm thủy my giống hoa gạo Trứng cá 10 Footer Page 10 of 133 Header Page 25 of 133 Bảng 4.2: Đặc điểm hình thái cấu tạo giống nấm phân lập Loài nấm Achlya Đường kính trung bình khuẩn lạc 7,4±0,07cm sau ngày nuôi cấy Hình dạng khuẩn lạc Tròn đều, sợi nấm dày mọc nhô lên khỏi bề mặt môi trường, mịn gòn Màu sắc khuẩn lạc Trắng vàng Hình dạng khuẩn ty Dạng sợi, mãnh, phân nhánh, chằng chịt, vách ngăn Loại bào tử Bào tử động Hình dạng bào tử Hình cầu, có màng bao bọc bên Hình dạng túi bào tử Hình que Kết luận: Giống nấm phân lập Achlya Qua trình nuôi cấy phân lập tạo khuẩn lạc sau ngày nuôi cấy tương ứng với đường kính khuẩn lạc đo 7,4cm Hình dạng khuẩn lạc tròn sợi nấm dày mọc nhô lên khỏi môi trường nuôi túi gòn, có màu trắng vàng Khuẩn ty dạng sợi , mãnh phân nhánh, vách ngăn Dạng bào tử động, hình cầu, có màng bao bọc bên Túi bào tử hình que Như dựa vào tài liệu phân loại xác định giống nấm gây bệnh cá rô đầu vuông Achlya thuộc họ nấm Saprolegniaceae 25 Footer Page 25 of 133 Header Page 26 of 133 Hình 4.1: Hình dạng khuẩn lạc nấm Achlya sau ngày nuôi cấy Hình 4.2: Hình dạng sợi nấm Achlya 26 Footer Page 26 of 133 Header Page 27 of 133 Hình 4.3: Hình dạng bào tử nấm Achlya Hình 4.4: Hình dạng túi bào tử nấm Achlya 4.3 Kết thử nghiệm NaCl đến phát triển nấm Achlya Chúng tiến hành thí nghiệm ảnh hưởng NaCl lên tốc độ phát triển nấm Achlya, nhằm xác định xem nồng độ NaCl phù hợp cho nấm sinh trưởng phát triển, để có biện pháp nhằm giảm khẳ gây bệnh chúng đối tượng nuôi 27 Footer Page 27 of 133 Header Page 28 of 133 Bảng 4.3: Ảnh hưởng NaCl đến phát triển nấm Achlya sau ngày nuôi cấy Thành phần NaCl môi trường nuôi cấy Đường kính khuẩn lạc (cm) sau khoảng thời gian nuôi cấy (ngày) 0% 1,6±0,08 2,4±0,1 3,4±0,14 4,3±0,12 1% - - - - 2% - - - - 3% - - - - Ghi chú: (-) nấm không phát triển Qua thí nghiệm bảng kết thấy qua ngày nuôi cấy nấm Achlya phát triển môi trường không bổ sung NaCl, tương ứng với đường kính khuẩn lạc đo qua ngày nuôi cấy 4,3cm Nấm phát triển tương đối nhanh chưa phát triển tràn đĩa, loài nấm gây bệnh cá nước nên ta bổ sung thêm NaCl kìm hãm phát triển chúng Chúng tiếp tục quan sát phát triển nấm qua ngày Bảng 4.4 Ảnh hưởng NaCl đến phát triển nấm Achlya sau ngày nuôi cấy Thành phần NaCl môi trường nuôi cấy Đường kính khuẩn lạc (cm) sau khoảng thời gian nuôi cấy (ngày) 0% 1,6±0,08 2,4±0,1 1% - - - - 1±0,14 2% - - - - - - - 3% - - - - - - - 3,4±0,14 4,3±0,12 5,4±0,08 6,4±0,08 7,4±0,07 1,8±0,13 2,5±0,07 Ghi chú: (-) nấm không phát triển 28 Footer Page 28 of 133 Header Page 29 of 133 Như sau ngày môi trường 1% NaCl qua ngày thứ khuẩn lạc phát triển chậm tương ứng với đường kính khuẩn lạc đo sau ngày nuôi cấy 2,5cm, môi trường có nồng độ 2%, 3% NaCl không thấy nấm phát triển Dù nấm gây bệnh đối tượng nuôi nước bổ sung thêm 1% NaCl sau thời gian chúng phát triển chậm Còn môi trường 0% NaCl khuẩn lạc phát triển tràn đĩa tương ứng với đường kính khuẩn lạc đo 7,4cm Chúng tiếp tục quan sát phát triển khuẩn lạc ngày Bảng 4.5 Ảnh hưởng NaCl đến phát triển nấm Achlya sau 14 ngày nuôi cấy Thành phần Đường kính khuẩn lạc (cm) sau khoảng thời gian nuôi cấy (ngày) NaCl 10 11 12 13 14 môi trường nuôi cấy 0% + + + + + + + 1% 3,4±0,07 4,2±0,1 4,9±0,08 5,5±0,08 6,3±0,05 6,9±0,08 7,3±0,1 2% - - - - - - - 3% - - - - - - - Ghi chú: (+) nấm phát triển tràn đĩa (-) nấm không phát triển Qua 14 ngày nuôi cấy ta thấy môi trường 1% NaCl khuẩn lạc phát triển tràn đĩa môi trường 0% NaCl tương ứng với đường kính khuẩn lạc đo 7,3cm, phát triển tương đối chậm Còn môi đĩa môi trường có 2%NaCl 3%NaCl thấy không phát triển Tóm lại nấm Achlya điều kiện bình thường chúng phát triển tốt bổ sung thêm NaCl vào kìm hãm phát triển chúng Từ ta áp dụng vào thực tiễn để phòng trị bệnh cho cá cách tắm nước có pha NaCl 2% hoăc 3% trước thả nuôi 29 Footer Page 29 of 133 Header Page 30 of 133 Hình 4.5 Hình dạng khuẩn lạc môi trường có nồng độ NaCl 0% sau ngày nuôi cấy 4.4 Kết thử nghiệm pH đến phát triển nấm Achlya Chúng tiến hành thí nghiệm ảnh hưởng pH lên tốc độ phát triển nấm Achlya, nhằm xác định xem giá trị pH phù hợp cho nấm sinh trưởng phát triển, để có biện pháp nhằm giảm khẳ gây bệnh chúng đối tượng nuôi Bảng 4.6 Ảnh hưởng pH đến phát triển nấm Achlya sau ngày pH môi trường nuôi cấy Đường kính khuẩn lạc (cm) sau khoảng thời gian nuôi cấy (ngày) - - - - 1,5±0,07 2,4±0,19 3,4±0,13 4,5±0,11 2,2±0,12 3,5±0,2 4,5±0,16 5,6±0,24 - 1,1±0,19 1,7±0,18 2,4±0,2 Ghi : ( - ) nấm không phát triển Cũng thử nghiệm NaCl thử nghiệm yếu tố pH cho bảng kết Chúng thấy môi trường có pH khác khẳ phát triển nấm Achlya không giống Sau ngày nuôi cấy môi trường có pH 7, 8, tương ứng với đường kính khuẩn lạc đo 30 Footer Page 30 of 133 Header Page 31 of 133 4.5cm, 5.8cm 2.4cm Còn môi trường có pH không phát triển Hình dạng khuẩn lạc môi trường pH khác không thay đổ thay đổ tốc độ phát triển Bảng 4.7 Ảnh hưởng pH đến phát triển nấm Achlya sau 10 ngày nuôi cấy pH môi trường nuôi cấy Đường kính khuẩn lạc (cm) sau khoảng thời gian nuôi cấy (ngày) 10 - - - - - - 7±0,14 7,5±0,08 + 5,3±0,08 5,9±0,08 6,5±0,16 6,6±0,16 7,5±0,15 + + + + 2,8±0,15 3,4±0,18 4,1±0,3 5,5±0,17 6,4±0,12 7,4±0,09 Ghi chú: (-) nấm không phát triển (+) nấm phát triển tràn đĩa Qua thí nghiệm ta thấy ngưỡng pH 7, 8, nấm phát triển môi trường có pH 7, phát triển nhanh ngưỡng pH phát triển tốt môi trường có pH phát triển chậm Ở môi trường có pH nấm không phát triển Như đối tượng nuôi loài nấm Achlya phát triển tốt ngưỡng pH – 8, ngưỡng pH tốt cho chúng gây bệnh cho đối tượng nuôi Hình 4.6 Hình dạng khuẩn lạc môi trường có pH sau ngày nuôi cấy 31 Footer Page 31 of 133 Header Page 32 of 133 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận - Kết phân lập từ mẫu cá rô đầu vuông bị bệnh xác định giống nấm gây bệnh Achlya - Qua thử nghiêm ảnh hưởng NaCl thấy bổ sung thêm 1% NaCl nấm phát triển chậm bổ sung thêm 2%, 3% NaCl nấm không phát triển - pH tốt cho nấm Achlya phát triển 8; pH nấm phát triển chậm 5.2 Kiến nghị - Áp dụng biện pháp kĩ thuật cao trình phân lập để định danh xác đến loài giống nấm phân lập - Nghiên cứu thêm số yếu tố có khẳ ảnh hưởng đến tốc độ phát triển nấm để phòng trị bệnh cho đối tượng nuôi 32 Footer Page 32 of 133 Header Page 33 of 133 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu nước: [1] Trương Thị Hoa (2008), Bài giảng “Bệnh nấm ĐVTS”, Đại Học Nông Lâm Huế [2] Đỗ Thị Hòa, Bùi Quang Tề, Nguyễn Hữu Dũng, Nguyễn Thị Muội (2004), Bệnh học thủy sản [3] Tạp chí khoa hoc- Đại học Cần Thơ (2012) [4] Bùi Quang Tề, 2009, Bệnh Học Thủy Sản, Viện Nghiên Cứu Nuôi Trồng Thủy Sản I [5] Ths Kim Văn Vạn, Bài giảng bệnh học thủy sản, Trưởng môn bệnh học thủy sản ĐH Nông Nghiệp Hà Nội [6] TS Nguyễn Thị Thu Hòe, Giáo trình "bệnh cá" , Đại Học Tây Nguyên Một số trang web: [7] http://kythuat-nuoitrong.blogspot.com/2012/04/ac-iem-sinh-hoc-ca-roong.html [8] http://sonongnghiep.haugiang.gov.vn [9] http://www.baodatviet.vn/khoa-hoc/201009/Tri-benh-cho-ca-ro-dau-vuong2276358/ [10] http://tepbac.com/species/full/83/Ca-ro-dau-vuong.htm [11] http://en.wikipedia.org/wiki/Anabas_testudineus [12] http://www.baothuathienhue.vn [13] http://trt.com.vn/tabid/5itemid/14989/categoryid/0/type/1/default.aspx [14] http//aluoi.hue.gov.vn Tài liệu nước ngoài: [15] L.V.khoa, K Hatai and Aoki (2002), Fusarium incarnatum isolated from black tiger shrimp, Penaeus monodon Fabricus, With black gill disease culture in Vietnam, Journal of Fish Diseases, 27, 507, 511 [16].Kishio Hatai, Des Roza and Takane Nakayama, Identification of love fungi isolated from larvae of mangrove crab, Scylla serata, 2000, in Indonesia, Mycosicience, Japan Footer Page 33 of 133 Header Page 34 of 133 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 4.1: Chiều dài khối lượng cá kiểm tra 24 Bảng 4.2: Đặc điểm hình thái cấu tạo giống nấm phân lập 25 Bảng 4.3: Ảnh hưởng NaCl đến phát triển nấm Achlya sau ngày nuôi cấy 28 Bảng 4.4 Ảnh hưởng NaCl đến phát triển nấm Achlya sau ngày nuôi cấy 28 Bảng 4.5 Ảnh hưởng NaCl đến phát triển nấm Achlya sau 14 ngày nuôi cấy 29 Bảng 4.6 Ảnh hưởng pH đến phát triển nấm Achlya sau ngày 30 Bảng 4.7 Ảnh hưởng pH đến phát triển nấm Achlya sau 10 ngày nuôi cấy 31 Footer Page 34 of 133 Header Page 35 of 133 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1: Cá rô đầu vuông Hình 2.2: Cá rô đầu vuông bị bệnh nấm 15 Hình 3.1 Sơ đồ nội dung nghiên cứu 21 Hình 4.1: Hình dạng khuẩn lạc nấm Achlya sau ngày nuôi cấy 26 Hình 4.2: Hình dạng sợi nấm Achlya 26 Hình 4.3: Hình dạng bào tử nấm Achlya 27 Hình 4.4: Hình dạng túi bào tử nấm Achlya 27 Hình 4.5 Hình dạng khuẩn lạc môi trường có nồng độ NaCl 0% sau ngày nuôi cấy 30 Hình 4.6 Hình dạng khuẩn lạc môi trường có pH sau ngày 31 nuôi cấy 31 Footer Page 35 of 133 Header Page 36 of 133 MỤC LỤC PHẦN 1: ĐẶT VẤN ĐỀ PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Đặc điểm sinh học cá rô đầu vuông 2.1.1 Phân loại[10] 2.1.2 Phân bố 2.1.3 Đặc điểm hình thái[10] 2.1.4 Dinh dưỡng[7] 2.1.5 Sinh trưởng 2.1.6 Sinh sản[10] 2.2 Tình hình nuôi cá rô đầu vuông Thừa Thiên Huế 2.3 Tình hình nghiên cứu bệnh nấm động vật thủy sản 2.3.1 Trên giới 2.3.2 Ở nước ta 10 2.4 Một số bệnh nấm gây động vật thủy sản 10 2.4.1 Bệnh nấm thủy my[1] 10 2.4.2 Bệnh nấm mang[1] 13 2.4.3 Hội chứng lỡ loét cá [1] 13 2.4.4 Bệnh nấm nhớt[10] 14 2.4.5 Bệnh nấm hạt (Dermocystidiosis)[4] 16 2.4.6 Bệnh nấm hạt – Ichthyophonosis [1] 16 2.5 Một số loại thuốc thường dùng để phòng trị bệnh nấm 17 2.5.1 Nhóm polyen (Nystatin, amphotericin)[1] 17 2.5.2 Griseophuvin (fulcine, fulcigin, funvigin)[1] 17 2.5.3 Nhóm Chidazol (ketoconazol)[1] 18 2.5.4 Thuốc tím- KMnO4[1] 18 2.5.5 Hydrogen peroxide- H202- nước oxy già[1] 18 2.5.6 Chlorine[1] 18 Footer Page 36 of 133 Header Page 37 of 133 2.5.7 Khí ozon (03)[1] 19 2.5.8 Formaline- Formadehyde 36-38% - Formol – CH2O[1] 19 2.5.9 Xanh methylen[1] 19 2.5.10 Polyvinyl- pvp iodine[1] 19 PHẦN 3: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 3.1 Đối tượng, thời gian địa điểm nghiên cứu 20 3.1.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 20 3.1.2 Địa điểm nghiên cứu 20 3.1.3 Thời gian nghiên cứu 20 3.2 Nội dung nghiên cứu 20 3.3 Phương pháp nghiên cứu 21 3.3.1 Sơ đồ nghiên cứu 21 3.3.2 Thu mẫu 21 3.3.3 Chuẩn bị môi trường nuôi cấy nấm 22 3.3.4 Phương pháp phân lập nấm cá 22 3.3.5 Định danh nấm 22 3.3.6 Phương pháp thử nghiệm pH NaCl đến khả phát triển nấm 23 2.4 Phương pháp xử lý số liệu 23 PHẦN 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 24 4.1 Số lượng, chiều dài khối lượng mẫu kiểm tra 24 4.2 Kết phân lập nấm cá rô đầu vuông 24 4.3 Kết thử nghiệm NaCl đến phát triển nấm Achlya 27 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 32 PHẦN 6: TÀI LIỆU THAM KHẢO Footer Page 37 of 133 Header Page 38 of 133 DANH MỤC VIẾT TẮC CTV: Cộng tác viên ĐVTS: Động vật thủy sản NTTS: Nuôi trồng thủy sản Footer Page 38 of 133 Header Page 39 of 133 LỜI CẢM ƠN Trong trình thực đề tài tốt nghiệp nỗ lực thân, nhận nhiều quan tâm giúp đỡ quý báu tập thể, cá nhân trường Tôi xin gứi lời biết ơn sâu sắc tới bố mẹ gia đình tạo điều kiện tốt để học tập thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn quý thầy cô giáo Khoa Thủy Sản- Đại Học Nông Lâm Huế trang bị cho vốn kiến thức quý báu để hoàn thành đề tài tốt nghiệp vững vàng công việc sau Tôi xin chân thành bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến cô giáo ThS.Trương Thị Hoa tận tâm hướng dẫn, giúp đỡ, bảo động viên suốt thời gian thực đề tài Tôi xin cảm ơn toàn thể ban quản lý phòng thí nghiêm - ban quản lý Trung tâm thực hành, thực tập, nuôi trồng thủy sản Phú Thuận – Đại học Nông Lâm Huế tạo điều kiện cho hoàn thành đề tài tốt nghiệp Kính chúc thầy cô, bạn mạnh khỏe, hạnh phúc thành công sống Xin chân thành cảm ơn! Huế, tháng 05, 2013 Sinh viên Nguyễn Quốc Footer Page 39 of 133 ... Nghiên cứu phân lập nấm cá rô đầu vuông (Anabas testudineus ) nuôi tỉnh Thừa Thiên Huế” Mục tiêu đề tài: - Xác định nấm cá rô đầu vuông, thử nghiệm ảnh hưởng pH NaCl đến khả phát triển nấm phân. .. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Đối tượng, thời gian địa điểm nghiên cứu 3.1.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu: Một số giống nấm phân lập cá rô đầu vuông Vật liệu: Cá rô đầu vuông nuôi... thước lớn Đặc điểm khác cá rô đầu vuông cá rô đồng bình thường cá đực cá có tốc độ tăng trưởng tương đương (cá rô đồng bình thường tăng trưởng nhanh gấp đôi cá rô đồng đực) Phần trán mắt cong lồi