THÔNG TIN TÀI LIỆU
BÀI SẮC KÝ GIẤY VÀ SẮC KÝ TRAO ĐỔI ION MỤC TIÊU Tách riêng acid amin hỗn hợp phương pháp sắc ký giấy Tách riêng ion Ni++ ion Co++ phương pháp sắc ký trao đổi ion TIẾN HÀNH THÍ NGHIỆM Sắc ký trao đổi ion: tách riêng ion Ni++ ion Co++ Sắc ký giấy: Tách riêng acid amin hỗn hợp SắC KÝ TRAO ĐổI ION: TÁCH RIÊNG ION NI++ & ION CO++ Sắc ký trao đổi ion trường hợp hấp phụ đặc biệt gồm trình hấp phụ trao đổi ion Cấu tạo nhựa trao đổi ion: polymer + ion trao đổi Nhựa trao đổi ion dương (cationit): R-H Nhựa trao đổi ion âm (anionit): R-OH SắC KÝ TRAO ĐổI ION: TÁCH RIÊNG ION NI++ & ION CO++ Cơ chế tách Ni2+ & Co2+ RH2 + Ni2+ RNi + 2H+ (1) (2) RH2 + Co2+ RCo + 2H+ Citrat (NH4)2 Citrat2- + 2NH4+ RNi + 2NH4+ R(NH4)2 + Ni2+ RCo + 2NH4+ R(NH4)2 + Co2+ (4) Ni2+ + Citrat2- Ni-Citrat (5) Co2+ + Citrat2- Co-Citrat Phục hồi cột: R(NH4)2 + 2H+ (3) (6) RH2 + 2NH4+ Sắc ký trao đổi ion: tách riêng ion Ni++ ion Co++ Bình chiết Cột sắc ký Nhựa trao đổi ion cationit Sắc ký trao đổi ion: tách riêng ion Ni++ ion Co++ Kiểm tra cột sắc ký Nước cất + giọt cam methyl ống màu chuẩn Nước / cột sắc ký + giọt cam methyl Nước cột SK acid Nước / cột sắc ký + giọt cam methyl Sắc ký trao đổi ion: tách riêng ion Ni++ ion Co++ Dùng pipette hút 1,2 ml NiCl2 0,6 ml Co(NO3)2 cho vào ống nghiệm, lắc cho vào cột sắc ký Sắc ký trao đổi ion: tách riêng ion Ni++ ion Co++ Cho nước cất qua cột (khoảng 300 ml) đến nước chảy không ion H+ Nước / cột sắc ký + giọt cam methyl Sắc ký trao đổi ion: tách riêng ion Ni++ ion Co++ Cho dung dịch Citrat I qua cột với vận tốc – ml/ phút Dùng ống đong để hứng 10 ml Nếu màu đổ bỏ, có màu cho vào ống nghiệm Citrat I Ni++ 10 Sắc ký trao đổi ion: tách riêng ion Ni++ ion Co++ Khi dung dịch chảy hết màu màu nhạt cho tiếp Citrat II vào Thực tương tự với Citrat I để thu ống nghiệm có màu Citrat II 11 Sắc ký trao đổi ion: tách riêng ion Ni++ ion Co++ Hồi phục cột: cho 20 ml dung dịch HCl 5% rửa cột nước cất nước chảy không H+ 20 ml dung dịch HCl 5% Nước cất 12 SắC KÝ GIấY Cơ chế: phân bố Pha tĩnh: nước hấp phụ giấy Pha động: dung môi Partridge Giấy: giá mang 13 Sắc ký giấy: Tách riêng acid amin hỗn hợp Chấm acid amin lên giấy Vạch tiền tuyến 10 cm 1cm Vạch xuất phát Vết chấm acid amin 14 Sắc ký giấy: Tách riêng acid amin hỗn hợp Triển khai sắc ký: treo giấy sắc ký vào bình sắc ký Nắp bình Giấy sắc ký Vạch tiền tuyến 10 cm Dung môi Partridge Vạch xuất phát 1cm Vết chấm acid amin 15 Sắc ký giấy: Tách riêng acid amin hỗn hợp Phát acid amin cách phun ninhydrin Rf = x/ 10 x1 x2 x’2 x1 = x’1 x’1 x2 = x’2 Đạt yêu cầu kỹ thuật 16 BÁO CÁO KếT QUả BÀI SẮC KÝ GIẤY VÀ SẮC KÝ TRAO ĐỔI ION Mục tiêu Kết thực nghiệm: Sắc ký trao đổi ion Quan sát biến thiên màu thu qua ống nghiệm Ion trước, ion sau? Giải thích? Giải thích chế sắc ký trao đổi ion? Chỉ thị metyl da cam đổi màu môi trường H+ OH-? 17 BÁO CÁO KếT QUả BÀI SẮC KÝ GIẤY VÀ SẮC KÝ TRAO ĐỔI ION Sắc ký giấy Nộp giấy sắc ký kèm với báo cáo Tính Rf so sánh Rf acid amin vết đơn chất với Rf acid amin tên vết hỗn hợp (nếu Rf acid amin không giống phải giải thích) Giải thích chế sắc ký giấy 18 ... 1cm Vạch xuất phát Vết chấm acid amin 14 Sắc ký giấy: Tách riêng acid amin hỗn hợp Triển khai sắc ký: treo giấy sắc ký vào bình sắc ký Nắp bình Giấy sắc ký Vạch tiền tuyến 10 cm Dung môi Partridge... RH2 + 2NH4+ Sắc ký trao đổi ion: tách riêng ion Ni++ ion Co++ Bình chiết Cột sắc ký Nhựa trao đổi ion cationit Sắc ký trao đổi ion: tách riêng ion Ni++ ion Co++ Kiểm tra cột sắc ký Nước cất +... lắc cho vào cột sắc ký Sắc ký trao đổi ion: tách riêng ion Ni++ ion Co++ Cho nước cất qua cột (khoảng 300 ml) đến nước chảy không ion H+ Nước / cột sắc ký + giọt cam methyl Sắc ký trao đổi ion:
Ngày đăng: 14/05/2017, 15:31
Xem thêm: Sắc Ký Động hoá học