Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học trong một số dịch chiết cây nở ngày đấ

Header Page of 145 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG  NGUYỄN ĐĂNG THÙY TRANG NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG MỘT SỐ DỊCH CHIẾT CÂY NỞ NGÀY ĐẤT Chun ngành: Hóa hữu Mã số: 60.44.01.14 TĨM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Đà Nẵng – Năm 2016 Footer Page of 145 Header Page of 145 Cơng trình hồn thành ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG Người hướng dẫn khoa học: GS.TS ĐÀO HÙNG CƯỜNG Phản biện 1: PGS TS Lê Tự Hải Phản biện 2: TS Nguyễn Đình Anh Luận văn bảo vệ Hội đồng chấm Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ Khoa học chuyên ngành Hóa Hữu họp Đại học Đà Nẵng vào ngày 21 tháng năm 2016 Tìm hiểu luận văn tại: Trung tâm Thơng tin-Học liệu, Đại học Đà Nẵng Thư viện trường Đại học Sư phạm, Đại học Đà Nẵng Footer Page of 145 Header Page of 145 MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Từ xưa đến nay, thuốc dân gian đóng vai trị quan trọng việc chăm sóc sức khỏe người Ngày nay, hợp chất tự nhiên có hoạt tính sinh học phân lập từ cỏ ứng dụng nhiều ngành công nghiệp, nơng nghiệp chăm sóc sức khỏe người Người ta sử dụng hợp chất thiên nhiên cách trực tiếp để làm thuốc, sử dụng làm mơ hình để nghiên cứu tổng hợp hoạt chất theo phương pháp phát triển thành thuốc Chúng dùng nguồn nguyên liệu trực tiếp, gián tiếp cung cấp chất đầu cho cơng nghệ bán tổng hợp nhằm tìm kiếm chất mới, dược phẩm có hoạt tính, tác dụng chữa bệnh tốt hơn, hiệu Tuy nhiên, phần lớn sử dụng làm thuốc dân gian chưa nghiên cứu đầy đủ có hệ thống mặt hóa học hoạt tính sinh học mà chủ yếu dựa kinh nghiệm dân gian Dó chưa phát huy hết hiệu nguồn tài nguyên Đất nước Việt Nam ta với nguồn tài nguyên dược liệu dồi dào, phong phú thuận lợi việc nghiên cứu điều chế loại thuốc có nguồn gốc tự nhiên để phục vụ cho nhu cầu chăm sóc sức khỏe người Với điều kiện khí hậu nhiệt đới gió mùa, nước ta xem mảnh đất màu mỡ cho phát triển chủng loại cỏ khơng loại sử dụng làm thuốc hiệu Trong có nở ngày đất loại nhà khoa học nghiên cứu Loài phổ biến Việt Nam đặc biệt vùng nam Hiện nay, Việt Nam có cơng trình nghiên cứu thành Footer Page of 145 Header Page of 145 phần hóa học, tính chất hợp chất hóa học có Nở ngày đất Đây vấn đề cần quan tâm nhằm quy hoạch, khai thác, chế biến ứng dụng sản phẩm Nở ngày đất cách hiệu quả, khoa học Với lý trên, chọn đề tài: “Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học số dịch chiết Nở ngày đất.’’ Mục đích nghiên cứu - Xây dựng quy trình chiết tách hợp chất hóa học thân rễ Nở ngày đất dung mơi khác - Xác định thành phần hóa học, công thức cấu tạo hợp chất thân rễ Nở ngày đất - Thử hoạt tính sinh học hợp chất trong thân rễ nở ngày đất nhằm khai thác tốt nguồn tài nguyên thực vật Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu o Đối tượng nghiên cứu Thân rễ Nở ngày đất thu hái Quế Sơn – Quảng Nam o Phạm vi nghiên cứu - Xác định số tiêu vật lý nguyên liệu độ ẩm, hàm lượng tro, thành phần hàm lượng kim loại nặng; - Chiết tách cấu tử hữu thân rễ Nở ngày đất dung môi n-hexane, ethyl acetate, dichloromethane, methanol; - Định danh, xác định thành phần cấu tử thân rễ Nở ngày đất phương pháp GC-MS; - Thử hoạt tính kháng khuẩn hoạt tính độc tế bào Nở ngày đất Footer Page of 145 Header Page of 145 Phƣơng pháp nghiên cứu o Nghiên cứu lý thuyết - Thu thập thông tin tài liệu, tư liệu, sách báo nước đặc tính hình thái thực vật, thành phần hóa học ứng dụng Cây nở ngày đất - Xử lí thơng tin lý thuyết để đưa vấn đề cần thực trình thực nghiệm o Phương pháp thực nghiệm - Phương pháp nghiên cứu xử lí mẫu; - Phương pháp trọng lượng xác định thông số vật lý nguyên liệu; - Phương pháp AAS xác định thành phần hàm lượng kim loại nặng; - Phương pháp chiết nóng Soxhlet dung mơi nhexane, ethyl acetate, dichloromethane, methanol; - Phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS) để định danh cấu tử có dịch chiết; - Phương pháp thử nghiệm hoạt tính sinh học Nở ngày đất Nội dung nghiên cứu o Nghiên cứu lý thuyết Thu thập, tổng hợp tài liệu, sách báo có liên quan đến đề tài o Nghiên cứu thực nghiệm - Xử lý mẫu, áp dụng phương pháp trọng lượng, phân hủy mẫu phân tích để khảo sát độ ẩm, hàm lượng tro, hàm lượng kim loại nặng - Chiết mẫu phương pháp soxhlet với dung môi nhexane, ethyl acetate, dichloromethane, methanol Footer Page of 145 Header Page of 145 - Nghiên cứu, khảo sát q trình chiết thành phần có Nở ngày đất với dung môi n-hexane, ethyl acetate, dichloromethane, methanol - Thử nghiệm hoạt tính sinh học Nở ngày đất Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài o Ý nghĩa khoa học - Cung cấp thơng tin khoa học quy trình chiết tách thành phần cấu tạo số hợp chất có thân rễ Nở ngày đất - Cung cấp số liệu thực nghiệm cho nghiên cứu sâu Nở ngày đất o Ý nghĩa thực tiễn - Cung cấp tư liệu quy trình chiết tách Nở ngày đất với dung mơi khác nhau, từ đề quy trình ứng dụng thực tế - Giải thích cách khoa học số kinh nghiệm dân gian thuốc cổ truyền ứng dụng Nở ngày đất Bố cục luận văn Ngoài phần mở đầu, kết luận kiến nghị Nội dung luận văn gồm 03 chương: Chương 1: Tổng quan tài liệu Chương 2: Nguyên liệu phương pháp nghiên cứu Chương 3: Kết bàn luận Footer Page of 145 Header Page of 145 CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TÊN GỌI, PHÂN LOẠI KHOA HỌC 1.1.1 Tên gọi 1.1.2 Phân loại khoa học 1.2 PHÂN BỐ VÀ ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT 1.2.1 Phân bố 1.2.2 Đặc điểm thực vật 1.3 MỘT SỐ NGHIÊN CỨU VỀ CÂY NỞ NGÀY ĐẤT VÀ CÔNG DỤNG CỦA CÂY NỞ NGÀY ĐẤT 1.3.1 Thành phần hóa học 1.3.2 Cơng dụng 1.4 KỸ THUẬT CHIẾT TÁCH – XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC THỰC VẬT 1.4.1 Phƣơng pháp chiết rắn – lỏng 1.4.2 Phƣơng pháp chiết Soxhlet 1.4.3 Phƣơng pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS) 1.4.4 Phƣơng pháp sắc ký ghép khối phổ (GC-MS) CHƢƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 NGUYÊN LIỆU, HÓA CHẤT VÀ DỤNG CỤ THÍ NGHIỆM 2.1.1 Ngun liệu 2.1.2 Hóa chất 2.1.3 Dụng cụ, thiết bị 2.2 CÁC NGHIÊN CỨU THỰC NGHIỆM Footer Page of 145 Header Page of 145 2.2.1 sơ đồ thực nghiệm 2.2.2 Cách xác định tiêu hóa lý a Độ ẩm Cơng thức tính độ ẩm sau: %W= (m1  m0 )  m2 *100% m1 n  %w % W tb = n Trong đó: m0: Khối lượng cốc (gr) m1: Khối lượng bột dược liệu (gr) m2: Khối lượng cốc + bột dược liệu sau sấy (gr) n: Số lần xác định độ ẩm W: Độ ẩm (%) b Hàm lượng tro Cơng thức tính hàm lượng tro sau: %tro  m3  m1  100% m2 n  %tro % tro trung bình = n 2.2.3 Xác định hàm lƣợng kim loại nặng phƣơng pháp đo quang phổ (AAS) 2.2.4 Phƣơng pháp tách chất từ nở ngày đất dung môi n- hexane ethylacetate phƣơng pháp chiết Soxhlet Footer Page of 145 Header Page of 145 o Cơng thức tính phần trăm khối lượng chiết ra: D= (g/ml) d= (g/ml) %m = (%) Trong đó: m1 khối lượng bột thân (rễ) m2 khối lượng cốc dùng đo đo khối lượng riêng dung môi; m3 khối lượng 10ml dung môi cốc; m4 khối lượng cốc dùng đo khối lượng riêng dịch chiết; m5 khối lượng 10ml dịch chiết cốc V thể tích dịch chiết thu được; d khối lượng riêng dịch chiết; D khối lượng riêng dung môi o Khối lượng cặn thu được tính sau: m cặn = m2 – m1 2.2.5 Định tính nhóm hợp chất dịch chiết thân rễ nở ngày đất a Nhóm Saponin b Nhóm Alkaloid c Nhóm Coumarin d Nhóm Flavonoid e Đường khử f Poliphenol 2.2.6 Phƣơng pháp xác định thành phần hóa học dịch chiết nở ngày đất phƣơng pháp sắc ký khí ghép khối phổ GC - MS Footer Page of 145 Header Page 10 of 145 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH MỘT SỐ CHỈ TIÊU HÓA LÝ TRONG CÂY NỞ NGÀY ĐẤT 3.1.1 Độ ẩm Bảng 3.1 Kết đo độ ẩm nở ngày đất 3.1.2 Hàm lƣợng tro Bảng 3.2 Kết hàm lượng tro nở ngày đất Footer Page 10 of 145 Header Page 12 of 145 10 b Kết xác định thành phần hóa học từ thân Nở ngày đất dung môi n- hexane Kết sau đo GC - MS trình bày phổ đồ Hình 3.1 Hình 3.1 Sắc ký đồ đo GC – MS biểu thị thành phần hóa học thân Nở ngày đất dịch chiết n-hexane Kết thành phần hóa học có dịch chiết thân Nở ngày đất từ dung môi n-hexane: Dung môi n-hexane: hexadecanoic acid (10.7%), dodecanoic acid (0.32%); naphthalene 1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 8a-octahydro-4a; 8dimethy-(0.27%); 1(3H)-Isobenzofuranone, 3-butylidene- (0.65%); cycloheptane, 4-methylene-1-methyl-2-(2-methyl-1-propen-1-yl)-1vinyl (0.32%); bicyclo [3.1.1] heptan 2, 6, 6-trimethyl (0.79%); falcarinol (0.3%); phytol (1.18%); vitamin E (0.52%); campesterol (1.33%); octacosanol (0.67%); ergost-7-en-3-ol (3.beta) (4.8%); beta.-amyrin (2.28%); lanosterol (0.24%); 9.19-cyclolanost-24-en-3ol, acetate, (3.beta.) (0.26%) Footer Page 12 of 145 Header Page 13 of 145 11 3.2.2 Kết khảo sát thời gian chiết xác định thành phần hóa học có thân nở ngày đất dung môi ethyl acetate a Kết khảo sát thời gian chiết từ thân Nở ngày đất dung môi ethyl acetate Bảng 3.5 Kết khảo sát thời gian chiết thân Nở ngày đất dung mơi ethylacetale b Kết xác định thành phần hóa học có thân Nở ngày đất dung mơi ethyl acetate Hình 3.2 Sắc ký đồ đo GC-MS biểu thị thành phần hóa học thân Nở ngày đất dịch chiết ethylacetale Footer Page 13 of 145 Header Page 14 of 145 12 Kết thành phần hóa học có dịch chiết thân Nở ngày đất từ dung môi ethylacetate: Dung môi ethylacetate: n-hexadecanoic acid (10.7%); 2methoxy-4-vinylphenol (0.18%); naphthalene 1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 8aoctahydro-4a, 8-dimethyl-2-(1-methylethenyl), [2R- (2.alpha.4a.alpha.8a.beta)] (0.22%); bezoic acid, 4-hydroxy-3methoxy (1.19%); 1(3H)-Isobenzofuranone, 3-butylidene (1.82%); 2(1H) naphthalenon 3, 5, 6, 7, 8, 8a-hexahydro 4, 8a-dimethyl-6-(1methylethenyl) (1.97%); tetradecanoic acid (1.24%); bicyclo [3.1.1] heptane, 2, 6, 6-trimethyl (2.18%); 9,12-octadecadienoic acid (Z,Z) (4.88%); cis-vaccenic acid (3.04%); campesterol (1.71%); betaamyrin (2.35%); octacosanol (1.36%) 3.2.3 Kết khảo sát thời gian chiết xác định thành phần hóa học có thân nở ngày đất dung môi dichloromethane a Kết khảo sát thời gian chiết thân Nở ngày đất dung môi dichloromethane Bảng 3.6 Kết khảo sát thời gian chiết thân Nở ngày đất dung môi dichloromethane Footer Page 14 of 145 Header Page 15 of 145 13 b Kết xác định thành phần hóa học thân Nở ngày đất dung mơi dichloromethane Hình 3.3 Sắc ký đồ đo GC-MS biểu thị thành phần hóa học thân Nở ngày đất dịch chiết dichloromethane 3.2.4 Kết khảo sát thời gian chiết xác định thành phần hóa học có thân nở ngày đất dung mơi methanol a Kết khảo sát thời gian chiết thân Nở ngày đất dung môi methanol Bảng 3.7 Kết khảo sát thời gian chiết thân Nở ngày đất dung môi methanol Footer Page 15 of 145 Header Page 16 of 145 14 b Kết thành phần hóa học từ thân Nở ngày đất dung môi methanol Kết sau đo GC - MS trình bày phổ đồ Hình 3.4 Hình 3.4 Sắc ký đồ đo GC-MS biểu thị thành phần hóa học thân Nở ngày đất dịch chiết methanol Kết thành phần hóa học có dịch chiết thân nở ngày đất từ dung môi methanol Dung môi Methanol: Undecane, 2-methyl (0.30%), Nonandecanoic acid, methyl ester (0.92%), 4H-Pyran-4-one, 2,3dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl- (1.44%), 2-methoxy-4-vinylphenol (1.54%), 3-hydroxy-4-methoxybenzoic acid (3.89%), Bicyclo[3.1.1] heptane, 2,6,6-trimethyl (0.97%), Hexanoic acid (Acid caproic) (0.59%), n-hexadecanoic acid (Acid Palmitic) (5.69%), Phytol (1.30%), 9,12-octadecadienoic acid (z,z)- (Acid linoleic) (1.78%), Octadecanoic acid (3.17%), Vitamin E (1.11%), D-allose (1.47%) 3.3 KẾT QUẢ KHẢO SÁT THỜI GIAN CHIẾT VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÓ TRONG RỄ CÂY NỞ NGÀY ĐẤT BẰNG PHƢƠNG PHÁP CHIẾT SOXHLET 3.3.1 Kết khảo sát thời gian chiết thành phần hóa học có rễ Nở ngày đất dung môi n- hexane Footer Page 16 of 145 Header Page 17 of 145 15 a Kết khảo sát thời gian chiết rễ nở ngày đất dung môi n-hexan Bảng 3.8 Kết khảo sát thời gian chiết rễ Nở ngày đất dung môi n-hexan Thời gian (h) m1 (g) V (ml) D (g/ml) d (g/ml) %m 10.024 146.2 0.6423 0.6644 3.22 10.034 145.3 0.6423 0.6708 4.12 10.046 144.6 0.6423 0.6786 5.23 10 10.056 143.2 0.6423 0.6768 4.92 12 10.064 142.3 0.6423 0.6757 4.72 b Kết thành phần hóa học rễ Nở ngày đất dung môi n- hexane Kết sau đo GC - MS trình bày phổ đồ Hình 3.4 Hình 3.5 Sắc ký đồ đo GC-MS biểu thị thành phần hóa học rễ Nở ngày đất dịch chiết n-hexan Kết thành phần hóa học có dịch chiết rễ nở ngày đất từ dung môi n- hexane Dung môi n- hexan: Heptan, 2,2,4,6,6- pentamethyl(0.23%); Footer Page 17 of 145 Header Page 18 of 145 limonene(1.66%);4Shisool(0.2%); 16 Isopropenylcyclohexanone(0.37); Caryophyllene(0,2%); Trans- Cyclohexene,1-methyl-4- (1methylethylidene)(0.43%); Alpha- caryophyllene(0.2%); 3.3.2 Kết khảo sát thời gian chiết xác định thành phần hóa học rễ Nở ngày đất dung môi ethyl acetate a Kết khảo sát thời gian chiết từ rễ Nở ngày đất dung môi ethyl acetate Bảng 3.9 Kết khảo sát thời gian chiết rễ Nở ngày đất dung môi ethyl acetate b Kết xác định thành phần hóa học từ rễ Nở ngày đất dung môi ethyl acetate Kết sau đo GC - MS trình bày phổ đồ Hình 3.5 Hình 3.6 Sắc ký đồ đo GC-MS biểu thị thành phần hóa học rễ Nở ngày đất dịch chiết ethyl acetate Footer Page 18 of 145 Header Page 19 of 145 17 Dung môi ethylacetate: 2-Methoxy-4-vinylphenol(0.25%); 1(3H)-Isobenzofuranone,3-butylidene-(0.53%); Bicyclo [3.1.1] heptane, 2,6,6- trimethyl (2.47%) ;n-hexadecanoic acid (0.59%); Phytol (2.46%); Stigmasterol(2.77%); Beta- Sitosterol(3.19%) 3.3.3 Kết khảo sát thời gian chiết thành phần hóa học rễ Nở ngày đất dung môi dichloromethane a Kết khảo sát thời gian chiết từ rễ Nở ngày đất dung môi dichloromethane Bảng 3.10 Kết khảo sát thời gian chiết rễ Nở ngày đất dung môi dichloromethane Thời gian (h) m1 (g) V (ml) D (g/ml) d (g/ml) %m 10.065 146.4 0.987 1.0339 6.82 10.08 145.7 0.987 1.037 7.22 10.01 144.8 0.987 1.0453 8.43 10 12 10.049 10.082 143.1 142.5 0.987 0.987 1.0518 1.0501 9.23 8.92 b Kết xác định thành phần hóa học rễ Nở ngày đất dung môi dichloromethane Hình 3.7 Sắc ký đồ đo GC-MS biểu thị thành phần hóa học dịch chiết Footer Page 19 of 145 Header Page 20 of 145 18 Dung môi Dichloromethane: Bicyclo[3.1.1]heptane, 2,6,6trimethyl(1.6%);Phytol(0.91%);Heptacosane, 1- choloro-(0.91%); 9Octadecenamide(0.54%);VitaminE(0.71%);Stigmasterol(2.77%);Bet a- Sitosterol(2.3%) 3.3.4 Kết khảo sát thời gian chiết xác định thành phần hóa học có rễ Nở ngày đất dung môi methanol a Kết khảo sát thời gian chiết rễ Nở ngày đất dung môi methanol Bảng 3.11 Kết khảo sát thời gian chiết rễ Nở ngày đất dung môi methanol Thời gian (h) m1 (g) V (ml) 10.032 146.5 0.7667 0.9038 20.023 10.043 145.4 0.7667 0.9241 24.782 10.056 144.7 0.7667 0.9341 24.092 10 10.023 144 0.7667 0.9539 26.892 12 10.064 143.4 0.7667 0.9498 26.098 D (g/ml) d (g/ml) %m b Kết xác định thành phần hóa học từ rễ Nở ngày đất dung môi methanol Hình 3.8 Sắc ký đồ đo GC-MS biểu thị thành phần hóa học rễ Nở ngày đất dịch chiết methanol Footer Page 20 of 145 Header Page 21 of 145 19 Kết thành hóa học có dịch chiết rễ nở ngày đất từ dung môi methanol Dung môi Methanol: 9- Octadecenamide (Z- (1.23%); Vitamin E(2.07%);Stigmasterol(3.67%); Beta- Sitosterol(4.44%) 3.3.5 Nhận xét chung Qua trình khảo sát ảnh hưởng thời gian đến trình chiết tách, thu thời gian chiết tốt thân rễ Nở ngày đât sau: Dung môi Thân Rễ N- hexane 8h 8h Ethyl acetate 10h 10h Dichloromethane 8h 10h Methanol 10h 10h Khối lượng cắn chiết với dung môi methanol thân rễ thời gian tốt với tỉ lệ khối lượng lớn lần lược là: 25.98% 26.982% 3.4 TỔNG HỢP THÀNH PHẦN CÁC CẤU TỬ VÀ ĐỊNH DANH CÁC HỢP CHẤT CÓ TRONG THÂN VÀ RỄ CÂY NỞ NGÀY ĐẤT Kết tổng hợp thành phần cấu tử hàm lượng cấu tử thu phương pháp chiết….trên hai phận thân rễ nở ngày đất với dung môi: Hexan, Ethylacetate, Dichloromethane, Methanol a Trong thân Nở ngày đất + Dung môi n-hexane: hexadecanoic acid (10.7%), dodecanoic acid (0.32%); naphthalene 1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 8a-octahydro-4a; 8dimethy-(0.27%); 1(3H)-Isobenzofuranone, 3-butylidene- (0.65%); cycloheptane, 4-methylene-1-methyl-2-(2-methyl-1-propen-1-yl)-1vinyl (0.32%); bicyclo [3.1.1] heptan 2, 6, 6-trimethyl (0.79%); Footer Page 21 of 145 Header Page 22 of 145 20 falcarinol (0.3%); phytol (1.18%); vitamin E (0.52%); campesterol (1.33%); octacosanol (0.67%); ergost-7-en-3-ol (3.beta) (4.8%); beta.-amyrin (2.28%); lanosterol (0.24%); 9.19-cyclolanost-24-en-3ol, acetate, (3.beta.) (0.26%) + Dung môi ethylacetate: n-hexadecanoic acid (10.7%); 2methoxy-4-vinylphenol (0.18%); naphthalene 1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 8aoctahydro-4a, 8-dimethyl-2-(1-methylethenyl), [2R(2.alpha.4a.alpha.8a.beta)] (0.22%); bezoic acid, 4-hydroxy-3methoxy (1.19%); 1(3H)-Isobenzofuranone, 3-butylidene (1.82%); 2(1H) naphthalenon 3, 5, 6, 7, 8, 8a-hexahydro 4, 8a-dimethyl-6-(1methylethenyl) (1.97%); tetradecanoic acid (1.24%); bicyclo [3.1.1] heptane, 2, 6, 6-trimethyl (2.18%); 9,12-octadecadienoic acid (Z,Z) (4.88%); cis-vaccenic acid (3.04%); campesterol (1.71%); betaamyrin (2.35%); octacosanol (1.36%) + Dung môi Dichloromethane: 1(3H)-Isobenzofuranone, 3butylidene- (0.12%), Bicyclo[3.1.1]heptane, 2,6,6-trimethyl (0.52%), Phytol (0.5%) + Dung môi Methanol: Undecane, 2-methyl (0.30%), Nonandecanoic acid, methyl ester (0.92%), 4H-Pyran-4-one, 2,3dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl- (1.44%), 2-methoxy-4-vinylphenol (1.54%),3-hydroxy-4-methoxybenzoic acid(3.89%), Bicyclo[3.1.1] heptane, 2,6,6-trimethyl (0.97%), Hexanoic acid (Acid caproic) (0.59%), n-hexadecanoic acid (Acid Palmitic )( 5.69%), Phytol (1.30%), 9,12-octadecadienoic acid (z,z)- (Acid linoleic)( 1.78%), Octadecanoic acid (3.17%), Vitamin E (1.11%), D-allose (1.47%) b Trong rễ Nở ngày đất + Dung môi n- hexan: Heptan, 2,2,4,6,6- pentamethyl(0.23%); limonene(1.66%);4- Isopropenylcyclohexanone(0.37); Trans- Footer Page 22 of 145 Header Page 23 of 145 21 Shisool(0.2%); Caryophyllene(0,2%); Cyclohexene,1-methyl-4(1methylethylidene)(0.43%); Alpha- caryophyllene(0.2%); 1(3H)-Isobenzofuranone, 3-butylidene-(0.28%); 3-hydroxy-4methoxybenzoic acid(0.19%); Bicyclo[3.1.1]heptane, 2,6,6trimethyl(0.31%); Vitamin E(0.2%); Campesterol(1.09%) + Dung môi ethylacetate: 2-Methoxy-4-vinylphenol(0.25%); 1(3H)-Isobenzofuranone, 3-butylidene-(0.53%); Bicyclo[3.1.1] heptane, 2,6,6-trimethyl(2.47%); n-hexadecanoic acid(0.59%); Phytol(2.46%); Stigmasterol(2.77%); Beta- Sitosterol(3.19%) + Dung môi Dichloromethane: Bicyclo[3.1.1]heptane, 2,6,6trimethyl(1.6%);Phytol(0.91%);Heptacosane, 1- choloro-(0.91%); 9Octadecenamide(0.54%);VitaminE(0.71%);Stigmasterol(2.77%);Bet a- Sitosterol(2.3%) + Dung môi Methanol: 9- Octadecenamide (Z- (1.23%); Vitamin E(2.07%);Stigmasterol(3.67%); Beta- Sitosterol(4.44%) Nhận xét chung: Bằng phương pháp GC-MS định danh 41 cấu tử, đó: Trong thân : dịch chiết n- hexane 15 cấu tử, dịch chiết ethylacetate 13 cấu tử, dịch chiết dichloromethane cấu tử, dịch chiết methanol 14 cấu tử Trong rễ: dịch chiết n- hexane 14 cấu tử, dịch chiết ethylacetate cấu tử, dịch chiết dichloromethane cấu tử, dịch chiết methanol cấu tử Từ kết luận, 41 cấu tử có cấu tử có mặt thân rễ chiết n- hexane 1(3H)-Isobenzofuranone, 3-butylidene; Bicyclo[3.1.1]heptane, 2,6,6-trimethyl ; Phytol; Vitamin E; Campesterol, có cấu tử xuất thân rễ chiết Footer Page 23 of 145 Header Page 24 of 145 22 ethylacetate 1(3H)-Isobenzofuranone, 3-butylidene-; Bicyclo [3.1.1]heptane, 2,6,6-trimethyl; n-hexadecanoic, có cấu tử xuất thân rễ chiết dichoromethane Phytol; Bicyclo[3.1.1]heptane, 2,6,6-trimethyl có Vitamin E xuất thân rễ chiết methanol Trong 41 cấu tử định danh chúng tơi quan tâm đến cấu tử có hoạt tính hàm lượng tương đối cao dịch chiết thân rễ nở ngày đất từ dung mơi n-hexane có hợp chất có hoạt tính sinh học đáng quan tâm như: campesterol, octacosanol lanosterol Camepsterol phytosterol, theo nhà nghiên cứu hợp chất phytosterol có ích cơng tác phịng, chống số bệnh ung thư, làm giảm nồng độ cholesterol máu Lanosterol tetracyclic triterpenoid, nghiên cứu sơ cho thấy lanosterol ngăn ngừa chí đảo ngược hình thành dục thủy tinh thể Octacosanol hoạt chất có tiềm nghiên cứu, theo nghiên cứu sơ octacosanol có tiềm với bệnh Parkinson cịn có khả nhăng ức chế sản sinh cholesterol Ngồi ra, cịn có vitamin E chất tocopheron Vitamin E tham gia vào trình điều hịa sinh sản (phái nữ), chống oxy hóa mạnh caroten vitamin A lí nên vitamin E tham gia vào trình chống lão hóa tế bào da Ngồi ra, vitamin E cịn có tác dụng rõ việc phịng ngừa bệnh tim mạch, giảm mệt mỏi, suy nhược Các nhà nghiên cứu cho biết vitamin E chống lại hai loại bênh ung thư phổ biến ung thư tuyến tiền liệt ung thư bàng quang Khi tiến hành nghiên cứu phát người có lượng vitamin máu cao có nguy mắc bệnh ung thư tuyến tiền liệt thấp Với thành phần chủ yếu acid béo góp phần giải thích cho Footer Page 24 of 145 Header Page 25 of 145 23 khả kháng khuẩn, đồng thời thể acid béo thiết yếu sử dụng chủ yếu để sản xuất chất nội tiết tố điều chỉnh loạt chức như: điều chỉnh áp lực máu, máu đông, hàm lượng mỡ máu, phản ứng miễn dịch phản ứng viêm nhiễm trùng vết thương Các acid béo acid n-hexadecanoic, dodecanoic acid có vai trị hệ thần kinh trung ương, phát triển não trẻ, dung mơi để hấp thu tốt vitamin A, D, E, K Các nghiên cứu octacosanol rằng: octacosanol chịu nghiên cứu sơ cho lợi ích tiềm bệnh nhân Pakinson Các nghiên cứu tìm thấy octacosanol ức chế sản xuất cholesterol Đây hoạt chất có tiềm cá nhà khoa học quan tâm 3.5 KẾT QUẢ ĐỊNH TÍNH CÁC NHĨM HỢP CHẤT CHÍNH VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CĨ TRONG DỊCH CHIẾT THÂN VÀ RỄ CÂY NỞ NGÀY ĐẤT 3.5.1 Kết định tính nhóm hợp chất có dịch chiết n-hexane, ethylacetate, dichloromethane, methanol 3.5.2 Kết hoạt tính sinh học có nở ngày đất a Hoạt tính kháng sinh b Hoạt tính độc tế bào Nhận xét: Mẫu thử đạt Trong dịch chiết nở ngày đất với dung mơi nhexane có chất ức chế đến hoạt tính độc tế bào KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Qua q trình nghiên cứu thực nghiệm, tơi thu kết sau: Footer Page 25 of 145 Header Page 26 of 145 24 - Độ ẩm trung bình bột nở ngày đất 8.816% - Hàm lượng tro trung bình bột nở ngày đất 3.467% - Hàm lượng kim loại nặng có bột nở ngày đất tất kim loại Pb, Cu, As nằm giới hạn cho phép, riêng Hg không phát - Thời gian chiết thích hợp dịch chiết thân Nở ngày đất từ dung môi n-hexane giờ, dung môi ethylacetate 10 giờ, dung môi dichloromethane , dung môi methanol 10 Thời gian chiết thích hợp dịch chiết rễ Nở ngày đất từ dung môi nhexane giờ, dung môi ethylacetate 10 giờ, dung môi dichloromethane 10 , dung môi methanol 10 - Định tính nhóm hợp chất xác định hợp chất có dịch chiết n-hexan dịch chiết ethylacetate có chung ba nhóm sponin, đường khử flavonoid - Bằng phương pháp đo GC - MS định danh thành phần hóa học số hợp chất có dịch chiết: - Thử hoạt tính sinh học dịch chiết nở ngày đất từ dung mơi n-hexan + Hoạt tính kháng khuẩn: khơng đạt + Hoạt tính độc tế bào: có hoạt tính Kiến nghị - Tiếp tục nghiên cứu chiết tách cấu tử có hoạt tính sinh học cao thân rễ Nở ngày đất để ứng dụng vào chăm sóc sức khỏe - Tiếp tục nghiên cứu xác định thành phần hóa học có thân rễ Nở ngày đất dung môi khác địa phương khác phận khác - Tiếp tục nghiên cứu chất rắn thu từ dịch chiết thân rễ Nở ngày đất Footer Page 26 of 145 ... chất trong thân rễ nở ngày đất nhằm khai thác tốt nguồn tài nguyên thực vật Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu o Đối tượng nghiên cứu Thân rễ Nở ngày đất thu hái Quế Sơn – Quảng Nam o Phạm vi nghiên. .. không loại sử dụng làm thuốc hiệu Trong có nở ngày đất loại nhà khoa học nghiên cứu Loài phổ biến Việt Nam đặc biệt vùng nam Hiện nay, Việt Nam có công trình nghiên cứu thành Footer Page of 145... Page of 145 Phƣơng pháp nghiên cứu o Nghiên cứu lý thuyết - Thu thập thông tin tài liệu, tư liệu, sách báo nước đặc tính hình thái thực vật, thành phần hóa học ứng dụng Cây nở ngày đất - Xử lí