Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh do Trypanosoma Evansi ở trâu, bò tại Thái Nguyên và Lạng Sơn và phác đồ điều trị hiệu quả

1 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM DIỆP THỊ HUYỀN TRANG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ BỆNH DO TRYPANOSOMA EVANSI Ở TRÂU, BÒ TẠI THÁI NGUYÊN VÀ LẠNG SƠN VÀ PHÁC ĐỒ ĐIỀU TRỊ HIỆU QUẢ Chuyên ngành: Thú Y Mã số: 60.62.50 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Thái Nguyên - năm 2012 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn MỞ ĐẦU TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Bệnh tiên mao trùng hay gọi bệnh ngã nƣớc, trâu bò mắc bệnh thể cấp tính thƣờng sốt cao 410C - 41,70C với triệu chứng thần kinh nhƣ ngã quỵ, kêu rống, vòng tròn… Trâu bò bệnh chết sau - 15 ngày Ở thể mãn tính, triệu chứng lâm sàng nhẹ bệnh kéo dài - tháng, vật ngày gầy, da khô mốc, niêm mạc mắt tụ máu màu đỏ tía, có chấm máu, chảy nƣớc mắt mắt có nhiều dử đặc nhƣ keo, niêm mạc mắt vàng nhạt hay sẫm Sức khoẻ suy yếu dần, ăn, nhai lại, phân táo có lẫn máu tháo lỏng mùi thối khắm, có vật ỉa màng ruột, nát đoạn Thƣờng thấy có thuỷ thũng hầu, ức, nách, chân, háng Trƣờng hợp bệnh nặng, vật đột ngột sốt cao, bụng chƣớng to lăn chết Wuyts N cs (1994) [66] cho biết, Đông Nam Á, bệnh tiên mao trùng Trypanosoma evansi bệnh gây thiệt hại lớn kinh tế cho ngƣời chăn nuôi ảnh hƣởng đến sức khỏe trâu, bò lợn Các triệu chứng giai đoạn cấp tính gồm: sảy thai, rối loạn hệ thống thần kinh trung ƣơng chí chết; nhiễm bệnh thể mãn tính ảnh hƣởng lớn đến khả lao tác suất vật nuôi Theo số liệu Phạm Sỹ Lăng (1982) [13], Phan Địch Lân (2004) [18], Phan Văn Chinh (2006) [2], tỷ lệ mắc Trypanosoma evansi gia súc vùng núi trung du cao vùng đồng ven biển Trong đó, nƣớc ta, chăn nuôi gia súc nhai lại để cung cấp sức kéo, thịt, sữa lại tập trung chủ yếu tỉnh miền núi trung du - vùng có điều kiện tự nhiên thích hợp cho phát triển chăn nuôi gia súc nhai lại, nhƣng sở hạ tầng phục vụ công tác chẩn đoán điều trị địa phƣơng lạc hậu dẫn tới hệ bệnh tiên mao trùng trở nên phổ biến hơn, nghiêm trọng gây thiệt hại lớn Trong hai năm trở lại đây, Việt Nam phát Trypanosoma spp gây bệnh cho ngƣời Các nghiên cứu ban đầu cho thấy, loài Trypanosoma spp gây bệnh cho ngƣời có đặc tính sinh học giống với Trypanosoma evansi gây bệnh cho gia Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn súc Một số quốc gia giới nhƣ: Thái Lan, Ấn Độ xác định đƣợc Trypanosoma evansi có khả gây bệnh cho ngƣời gia súc Việc thích nghi gây bệnh cho ngƣời Trypanosoma evansi, hay ngƣợc lại, việc thích nghi gây bệnh cho gia súc Trypanosoma cruzi, Trypanosoma brucei… hoàn toàn xảy Từ phân tích mức độ phổ biến thiệt hại bệnh tiên mao trùng gây vật nuôi Việt Nam, biến đổi dịch tễ bệnh tạo chủng Trypanosoma spp gây bệnh chung cho ngƣời gia súc, khó khăn công tác chủ động phòng ngừa bệnh, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh Trypanosoma evansi trâu, bò Thái Nguyên Lạng Sơn phác đồ điều trị hiệu quả” MỤC TIÊU ĐỀ TÀI - Xác định đặc điểm bệnh lý, lâm sàng bệnh tiên mao trùng điều kiện chăn nuôi miền núi - Xác định phác đồ điều trị bệnh Trypanosoma evansi có hiệu điều trị khỏi bệnh đạt 98% Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ Ý NGHĨA THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI 3.1 Ý nghĩa khoa học Kết đề tài thông tin khoa học đặc điểm dịch tễ, quy trình phòng chống bệnh tiên mao trùng trâu, bò 3.2 Ý nghĩa thực tiễn Kết đề tài sở khoa học để khuyến cáo ngƣời chăn nuôi áp dụng quy trình phòng, trị bệnh tiên mao trùng; nhằm hạn chế tỷ lệ nhiễm thiệt hại T evansi gây ra; góp phần nâng cao suất chăn nuôi; thúc đẩy ngành chăn nuôi trâu, bò phát triển Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 CƠ SỞ KHOA HỌC CỦA ĐỀ TÀI Bệnh tiên mao trùng đƣợc Blanchard (1888) phát Việt Nam Sau đó, bệnh đƣợc xác định phổ biến hầu hết tỉnh thành nƣớc Bệnh loài tiên mao trùng Trypanosoma evansi gây Trâu, bò, ngựa mắc bệnh dễ chết thiếu máu, suy nhƣợc, giảm khả sinh sản sức sản xuất 1.1.1 Đặc điểm hình thái, cấu trúc phân loại tiên mao trùng 1.1.1.1 Vị trí tiên mao trùng Trypanosoma hệ thống phân loại động vật học Theo Levine cs (1980) (dẫn theo Lƣơng Văn Huấn cs., 1997 [8]), vị trí tiên mao trùng hệ thống phân loại nguyên bào (Protozoa) nhƣ sau: Ngành Sarcomastigophora Phân ngành Mastigophora Lớp Zoomastigophorasida Bộ Kinetoplastorida Phân Trypanosomatorida Họ Trypanosomatidae Donein, 1901 Giống Trypanosoma Gruby, 1843 Giống phụ Megatrypanum Hoare, 1964 Loài Trypanosoma (M) theileria Giống phụ Herpetosoma Donein, 1901 Loài Trypanosoma (H) leisi Giống phụ Schizotrypanum Chagas, 1909 Loài Trypanosoma (S) cruzi Giống phụ Duttonella Chalmers, 1918 Loài Trypanosoma (D) vivax Loài Trvpanosoma (D) uniform Giống phụ Nalmomonas Hoare, 1964 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Loài Trypanosoma (N) congolense Loài Trypanosoma (N) siminae Loài Trypanosoma (N) vanhogi Giống phụ Trypanozoon Liihe, 1906 Loài Trypanosoma (T) brucei Loài Trypanosoma (T) gambience Loài Trypanosoma (T) rhodesiense Loài Trypanosoma (T) equiperdum Giống phụ Pycnomonas Hoare, 1964 Loài Trypanosoma (P) suis Giống phụ Trypanosoma Gruby, 1843 Loài Trypanosoma evansi (Steel, 1885) Trong loài tiên mao trùng trên, có loài đƣợc tổ chức dịch tễ quốc tế (OIE) thông báo có khả gây bệnh cho ngƣời động vật có vú, là: T brucei, T congolense, T cruzi, T evansi, T gambiense, T siminae, T vivax 1.1.1.2 Đặc điểm hình thái, cấu tạo tiên mao trùng Tiên mao trùng T evansi đƣợc xếp vào loại đơn hình thái, thể tế bào, có kích thƣớc nhỏ, chiều dài 18 - 34 μm (trung bình 25 μm), chiều rộng 1,5 - 2μm Cơ thể có hình suốt mảnh hình thoi, cuối thân nhọn Nhìn chung, cấu trúc T evansi giống nhƣ cấu trúc loài tiên mao trùng khác thuộc họ Trypanosomatidae Cấu trúc từ vào đƣợc chia thành phần chính: - Vỏ: lớp vỏ dày 10 - 15 nm, vỏ đƣợc chia làm lớp (lớp lớp tiếp giáp với nguyên sinh chất dầy lớp giữa) Lớp vỏ đƣợc cấu tạo từ phân tử glycoprotein biến đổi (Vanant Glycoprotein Surface -VGS) Tiếp giáp với lớp cặp vi ống xếp song song dọc theo chiều dài thân tiên mao trùng Chính nhờ xếp cặp vi ống nên tiên mao trùng có dạng hình suốt mảnh (Hoare, 1972 [44]; Phạm Sỹ Lăng, 1982 [13]; Nguyễn Quốc Doanh, 1999 [5]) Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn - Nguyên sinh chất: gồm lớp lớp Trong nguyên sinh chất có chứa nội quan: ribosome có màu thẫm xen kẽ vùng không bào màu sáng, kinetoplast (thể động), mitochrondrio, reticulum (lƣới nội bào) mạng lƣới golgi - Nhân: nhân tiên mao trùng có chứa ADN, hình bầu dục hình trứng Nhân thƣờng nằm vị trí trung tâm gần vị trí trung tâm thể Ngoài nhân, phía cuối thân kinetoplast chứa ADN (KADN) Từ kinetoplast có roi chạy vòng quanh thân lên đầu phía thể thành roi tự Roi tiên mao trùng có lớp vỏ giống lớp vỏ thân Trong roi có cặp vi ống xung quanh cặp trung tâm, xếp song song dọc chiều dài roi (Hoare, 1972 [44]; Nguyễn Quốc Doanh,1999 [5]) Tiên mao trùng di động đƣợc máu nhờ roi tự xuất phát từ phía sau thân, chạy vòng quanh thân tạo thành màng rung Khi di động, roi tự vung phía trƣớc màng rung chuyển động giúp cho tiên mao trùng di chuyển nhanh máu vật chủ (Phạm Sỹ Lăng cs., 2002 [15]) Hình 1.1 Cấu tạo Trypanosoma A Roi; B.Tổ hợp cytoskeleton; C Nhân; D Mitochrondrio; E Thể động kinetoplast; F Thể đặc; G Túi tiên mao; H Phần thân chính; L Golgi; J Lƣới nội sinh chất; K Màng rung; L Chỗ tiếp xúc roi với màng rung; M Chỗ tiếp xúc roi với thân (Nguồn: Nguyễn Thị Kim Lan, 2012 [11]) 1.1.1.3 Cấu trúc kháng nguyên T evansi Kháng nguyên T evansi gồm hai loại: kháng nguyên ổn định (kháng nguyên không biến đổi) kháng nguyên biến đổi Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn * Kháng nguyên ổn định (kháng nguyên không biến đổi) Phần lớn thành phần kháng nguyên tiên mao trùng không biến đổi trình sống ký sinh Bằng phƣơng pháp điện di miễn dịch huyết thỏ tối miễn dịch với T evansi, Kageruka (1982) phát tới 30 thành phần kháng nguyên khác Ngƣời ta xác định có ba loại kháng nguyên không biến đổi màng nguyên sinh chất tế bào (ISG: Invanant Surface Glycoprotein): ISG 65, ISG 75 ISG 100 Do cấu trúc không gian ba chiều đặc tính ƣa nƣớc, loại không kết hợp với kháng thể vật chủ * Kháng nguyên biến đổi Cần đề cập đến biến đổi lớp vỏ bề mặt VSG (Variant Surface Glycoprotein), quan điểm xuất kháng nguyên biến đổi tiên mao trùng chế di truyền kháng nguyên biến đổi Theo Nguyễn Thị Kim Lan (2012) [11], nhờ kháng thể đặc hiệu đƣợc đánh dấu mà Vickerman Luckins (1969) phát biến đổi lớp kháng nguyên bề mặt Cross (1975) mô tả lớp áo bề mặt tiên mao trùng có thành phần glycoprotein bao phủ toàn bề mặt tế bào lớp phân tử giống (mỗi tiên mao trùng có 107 phân tử) Lớp áo bề mặt kích thích thể vật chủ tạo kháng thể đặc hiệu với type kháng nguyên biến đổi VAT (Variable Antigen Type) Chỉ có kháng nguyên biến đổi có khả kích thích vật chủ tạo miễn dịch chủ động Ngƣời ta ƣớc lƣợng rằng, tiên mao trùng có vài trăm vài nghìn VSG, nghĩa 5% - 10% số gen tiên mao trùng cung cấp cho kháng nguyên bề mặt Nhiều tác giả nghiên cứu miễn dịch học cho rằng, tiên mao trùng biến đổi kháng nguyên bề mặt để né tránh miễn dịch đặc hiệu vật chủ Tuy nhiên, Van Meirvence (1995) [62] cho biết, biến đổi kháng nguyên bề mặt ký sinh trùng có pha trình nhiễm (trƣớc xuất đáp ứng miễn dịch thể vật chủ) Theo Hajduc Vickernlan (1981), tƣợng biến đổi kháng nguyên bề mặt tiên mao trùng thấy gia súc bị tiêm thuốc làm suy giảm miễn dịch Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Weir et al (1986) [65] cho biết, glucoprotein chịu trách nhiệm thay đổi kháng nguyên T evansi Cấu trúc kháng nguyên, đặc tính chức glucoprotein bề mặt khó hiểu kháng nguyên ký sinh trùng Giai đoạn nhân lên T evansi máu dài hơn, giai đoạn Trypamasigote ngắn ngủi Sự nhân lên T.evansi tiếp tục tới ký chủ có khả sản sinh kháng thể làm ngƣng kết, tiêu tan T evansi Kháng thể xuất làm số lƣợng T evansi giảm tụt xuống T evansi xuất có tính kháng nguyên khác với tính kháng nguyên T evansi xuất lần đầu, sau T evansi đợt lại bị kháng thể tiêu diệt, tới T evansi phát triển giai đoạn thứ ba Quá trình phát triển nhịp nhàng T evansi kháng thể ký chủ làm T evansi suy yếu gây nên thể bệnh mãn tính Chu kỳ xuất thƣờng ngày Sự thay đổi tính kháng nguyên có thay đổi độ dày chất bề mặt T evansi Nishikawa H cs (1990) [49] nghiên cứu kháng nguyên T evansi Thái Lan, phƣơng pháp miễn dịch huỳnh quang thấy rằng, kháng nguyên T evansi không phản ứng chéo với Babesia bovis, Babesia bigemina, Anaplasma maginale Theileria sergenti hiệu giá 1:30 Dome T.W (1992) [42] so sánh type kháng nguyên từ 15 chủng T evansi phân lập từ vùng khác Indonesia thấy, có nhóm nhóm phụ, nhóm có khác type kháng nguyên, type kháng nguyên giống nhƣ type kháng nguyên phân lập từ Châu Phi Nam Mỹ Những quan điểm hoàn toàn để lý luận xuất kháng nguyên biến đổi tiên mao trùng Nhƣ vậy, quan điểm biến đổi kháng nguyên lớp vỏ tiên mao trùng chƣa thống * Cơ chế di truyền kháng nguyên biến đổi Khi kháng thể đặc hiệu kết hợp với phân tử kháng nguyên bề mặt (VSG), làm tiêu tan tiên mao trùng nguyên nhân thúc đẩy hoạt hoá gen Kết phân tử kháng nguyên VSG đƣợc thay đổi hoàn toàn phân tử VSG Lúc này, kháng thể đặc hiệu lúc trƣớc không tác dụng kháng nguyên Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Theo Barry J D cs (1991) [37], Vanhamme cs (1995) [63], VSG đƣợc mã hoá nhờ gen chuyên biệt, từ kho chứa hàng nghìn gen khác nhau, gen VSG đƣợc hoạt hoá cách chọn lọc, dẫn đến tổng hợp loại kháng nguyên VSG Mỗi bên VSG tạo loại kháng nguyên VSG Trong gen tiên mao trùng tồn số lớn gen VSG, gen sử dụng nhiều chế xếp khác nhau, tiên mao trùng tạo nhiều VSG khác gia súc bị bệnh mãn tính Cơ chế biến đổi kháng nguyên theo cách: cách thứ sử dụng lần lƣợt điểm biểu gen khác nhau, xếp ADN Các điểm biểu khác mang gen VSG khác nhau, luân phiên dẫn đến thay đổi type kháng nguyên Cơ chế quan sát đƣợc chủ yếu giai đoạn đầu trình cảm nhiễm Có lẽ giai đoạn đầu chƣa có đáp ứng miễn dịch vật chủ VSG, điều không gây cản trở hoạt hoá tự nhiên điểm biểu gen Cách thứ hai là, tập hợp lại đoạn ADN khác để tái tổ hợp gen, mà việc tái tổ hợp cho phép thay hoàn toàn phần gen; việc thay diễn dựa vào chuyển đổi gen dựa vào tái tổ hợp gen Trƣờng hợp đƣợc diễn giải nhƣ sau: gen hoạt hoá đƣợc thay chép gen khác Do có thay phần gen nên tạo loại gen phức hợp đặc trƣng 1.1.2 Dịch tễ học bệnh T evansi 1.1.2.1 Phân bố bệnh T evansi Bệnh tiên mao trùng phân bố rộng, từ phía Tây sang phía Đông bán cầu Phía Tây bán cầu thuộc châu Mỹ, phía Đông bán cầu trải dài từ châu Phi Philippine Theo Euzeby (1984), bệnh phổ biến trâu, bò, ngựa nƣớc nhiệt đới châu Phi, châu Á Nam Mỹ Ở châu Phi, bệnh trải dài từ Tây sang Đông, phía Bắc qua vùng sa mạc Sahara, dọc theo bờ biển Atlantique Địa trung hải Bệnh tiên mao trùng xảy với tên gọi "bệnh Surra” Ả rập Saudi, Yêmen, Sultanate, Ả Rập thống nhất, Thổ Nhĩ Kỳ, Israel, Syrie, Afganistan, Pakistan Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 10 Ở châu Á, bệnh xuất Trung Á (thuộc Liên Xô cũ), Ấn Độ, Malaysia, bán đảo Đông Dƣơng, Trung Quốc, Indonexia, Philippine Ở châu Âu, bệnh xuất Bungaria (nay đƣợc toán), vùng Volga Nam Capcase (Liên Xô cũ) Ở châu Mỹ, bệnh xuất Trung Mỹ, Nam Mỹ, đặc biệt phổ biến Brazil, Mexico, Venezuela, Colombia Châu Úc đƣợc xác định có bệnh tiên mao trùng (Reid, 2000 [52]) Losos G J (1972) [45] cho rằng, bệnh tiên mao trùng phổ biến châu Á châu Phi, từ Ấn Độ đến Srilanca, Trung Quốc, Indonexia, Thái Lan, Lào, Camphuchia, Iran, Philippine Ở Việt Nam, bệnh tiên mao trùng thấy hầu hết vùng sinh thái khác nhau: miền núi, trung du, đồng bằng, ven biển Theo Phạm Sỹ Lăng (1982) [13], bệnh tiên mao trùng có tất tỉnh miền Bắc (Bắc Kạn, Lạng Sơn, Tuyên Quang, Thái Nguyên, Ninh Bình, Hà Tây) Trâu, bò nhiễm bệnh với tỷ lệ cao thay đổi vùng khác (trâu, bò đồng nhiễm tiên mao trùng cao vùng trung du miền núi, đặc biệt trâu, bò có nguồn gốc từ miền núi chuyển xuống vùng đồng bằng) Theo Nguyễn Phƣớc Tƣơng (2002) [34], hai “bệnh ngủ” ngƣời bị lây nhiễm ký sinh trùng máu trâu bò bệnh tiên mao trùng Trypanosoma gambiense Trypanosoma rhodesiense, thƣờng thấy miền Trung miền Tây Châu Phi Bệnh tiên mao trùng Trypanosoma gambiense ngƣời lây bệnh từ trâu bò mắc bệnh thông qua loài ruồi Glossina palpalis Loài ruồi hoạt động vào ban đêm chủ yếu sống hút máu ngƣời, đồng thời chúng hút máu trâu bò từ 30% - 38% bữa ăn chúng Do truyền bệnh tiên mao trùng từ bò sang ngƣời Bệnh tiên mao trùng từ trâu lây sang ngƣời Trypanosoma rohodesiene có chế truyền bệnh tƣơng tự Bệnh thƣờng thấy vùng sa mạc Sahara Châu Phi gây ngủ liên miên, hồng cầu bị phá vỡ dẫn đến máu, Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read ... Trypanosoma evansi trâu, bò Thái Nguyên Lạng Sơn phác đồ điều trị hiệu quả MỤC TIÊU ĐỀ TÀI - Xác định đặc điểm bệnh lý, lâm sàng bệnh tiên mao trùng điều kiện chăn nuôi miền núi - Xác định phác đồ điều. .. biến đổi dịch tễ bệnh tạo chủng Trypanosoma spp gây bệnh chung cho ngƣời gia súc, khó khăn công tác chủ động phòng ngừa bệnh, tiến hành nghiên cứu đề tài: Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh Trypanosoma. .. đồ điều trị bệnh Trypanosoma evansi có hiệu điều trị khỏi bệnh đạt 98% Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ Ý NGHĨA THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI 3.1 Ý nghĩa khoa học Kết đề tài thông tin khoa học đặc điểm dịch tễ, quy