Natto và Nattokinase Natto còn được gọi là pho mai thực vật là những hạt đậu nành đã luộc chín được ủ với men ở một môi trường 40oC trong vòng 1418 giờ để lên men thành những hạt đậu có màu nâu, độ nhờn nhớt cao, có mùi nồng nặc rất khó chịu với người không quen. Theo kinh nghiệm của nhà sản xuất cho biết khi độ nhớt càng cao thì chất lượng Natto càng tốt và vị càng ngọt. Là một món ăn dân dã rất phổ biến ở nông thôn Nhật bản, họ thường ăn cơm sáng với Natto, nước tương với rong biển phơi khô (Nori) và trứng gà sống. Natto có chứa nhiều chất bổ dưỡng cho sức khỏe trong đó enzym Nattokinase là một hoạt chất sản sinh trong quá trình lên men Natto được xem là hoạt chất có hiệu quả trong việc ngăn ngừa các chứng bệnh tim mạchmột phát hiện vô cùng lý thú bởi nhà nghiên cứu sinh lý học Nhật bản nổi tiếng, giáo sư Sumi Hiroyuki vào năm 1980. Nattokinase còn được gọi là: Subtilisin NAT, Subtilisin BSP. Nattokinase là một enzym có hoạt động fibrinolytic rất mạnh mẽ, được chiết xuất và tinh chế từ natto.
Trang 1
BỘ CÔNG THƯƠNGTRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HCM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC & KỸ THUẬT MÔI TRƯỜNG
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Trang 2
BỘ CÔNG THƯƠNGTRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HCM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC & KỸ THUẬT MÔI TRƯỜNG
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Trang 3MỤC LỤC
ĐẶT VẮN ĐỀ 4
PHẦN 1: TỔNG QUAN 5
1.1.Enzyme Nattokinase 5
1.1.1.Đậu tương 5
1.1.2 Natto và Nattokinase 7
1.2 Giới thiệu bệnh huyết khối 13
1.2.1 Khái niệm về huyết khối 13
1.2.2 Nguyên nhân hình thành huyết khối 13
1.2.3 Biến chứng của bệnh huyết khối 14
1.2.4 Tình hình bệnh huyết khối trên thế giới và ở Việt Nam 15
PHẦN 2: VẬT LIỆU – PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16
2.1 Địa điểm – thời gian 16
2.2 Dụng cụ, hóa chất và thiết bị 16
Bảng 2.2 Dụng cụ,thiết bị và hóa chất 16
2.3 Môi trường 18
2.4 Phương pháp nghiên cứu 18
2.4.1 Thu mẫu 19
2.4.2 Phương pháp phân lập VK trong Natto: 19
2.4.3 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm hình thái của vi khuẩn 19
2.4.4 Phương pháp khảo sát ảnh hưởng của điều kiện nuôi cấy tới khả năng sinh tổng hợp Nattokinase của vi khuẩn: 20
2.5 Phương pháp bảo quản giống vi sinh vật 21
2.6 Phương pháp nhân giống vi khuẩn 21
TÀI LIỆU THAM KHẢO 22
Trang 4ĐẶT VẮN ĐỀ
Ngày nay, tỉ lệ bệnh nghẽn mạch (như chứng nhồi máu cơ tim hay nhồi máunão) đang tăng cao ở một số nước châu Á như Nhật Bản, Hàn Quốc, Trung Quốc,Việt Nam, Philippin do xu hướng “âu hóa” trong các chế độ ăn uống Nếu huyết
tụ ở não sẽ làm cản trở việc cung cấp oxy cho các mô não gây ra các bệnh lý nguyhiểm như: tai biến mạch máu não, suy não, giảm trí nhớ, đột quỵ Nếu huyết khối ởtim gây ra các bệnh lý như: co thắt động mạch vành, nhồi máu cơ tim… Theo báocáo của Tổ chức Y tế Thế giới mỗi năm có khoảng 17 triệu người chết vì bệnhtim mạch và dự báo rằng bệnh do nghẽn mạch (hay huyết khối xơ vữa) sẽ lànguyên nhân gây tử vong hàng đầu vào các năm tới đây Huyết khối xơ vữa đã thật
sự trở thành mối đe dọa đối với sức khỏe con người
Tại Nhật Bản, sản phẩm lên men truyền thống Natto đã rất được phổ biến vàthu hút nhiều sự chú ý Nó được xem là một loại thức ăn giúp giảm thiểu sự nghẽnmạch máu vì Natto chứa enzyme phân hủy huyết khối “Nattokinase”, một nhân tốmang đến sự trường thọ cho người Nhật
Nattokinase là serine protease gồm 275 axit amin, hoạt động ở pH tối ưu
từ 8-10, nhiệt độ tối ưu từ 30 - 70oC, có trọng lượng phân tử từ 27,7 - 44kDa,điểm đẳng điện (pI) = 8 và cấu trúc tương đồng với subtilisin Cơ chế hoạtđộng của nattokianse là trực tiếp phân cắt fibrin trong huyết khối và gián tiếp bằngcách hoạt hóa sự sản xuất urokinase và plasmin trong mô Sự tuần hoàn máu củangười bị tác động bởi một số enzyme đặc biệt Nattokinase hỗ trợ cho máu có thểlưu thông tốt hơn và giúp cho huyết áp ở mức bình thường
Nattokinase có thể được tổng hợp từ các vi sinh vật (nhân sơ và nhân
thật) như là Bacillus subtilis, Fusarium và Rhizomucor sp và các enzyme tương
tự có thể được tổng hợp từ tuyến tụy của người (Trypsin và chymotrypsin) Vi
sinh vật có thể được dùng để sản xuất Nattokinase là Bacillus subtilis (Vi khuẩn)
và Rhizomucor sp (Nấm mốc)
Các đề tài nghiên cứu phân lập, tối ưu hóa và áp dụng các dòng vi khuẩn có
Trang 5khả năng sinh nattokinase được thực hiện khá nhiều trên thế giới Ở Việt Nam các
bài nghiên cứu về vấn đề này còn khá ít Với các lý do trên, đề tài “ Phân lập và khảo sát vi sinh vật sinh tổng hợp enzyme nattokinase từ thực phẩm natto” được
thực hiện để bước đầu giải quyết các vấn đề trên
Từ cổ xưa, đậu nành dùng làm thực phẩm, nhưng gần đây y học thế giới phát hiện
ra nhiều tác dụng chữa bệnh của nó
Đây là kết luận được các chuyên gia Mỹ đưa ra trong hội nghị về khaithác giá trị dinh dưỡng từ đậu nành đối với sức khỏe con người tại Viện Dinhdưỡng thuộc Đại học Columbia (Mỹ)
- Ngừa ung thư vú ở phụ nữ
Một cuộc khảo sát của các nhà khoa học thuộc Đại học Georgetown(Mỹ) cho thấy bổ sung đậu nành ở mức độ vừa phải giúp giảm nguy cơ bị ungthư vú Theo Hiệp hội Ung thư Mỹ, dùng 3 khẩu phần đậu nành mỗi ngày đemlại nhiều ích lợi cho phụ nữ có nguy cơ hoặc có tiền sử gia đình mắc bệnh ung thưvú
-Tác dụng trên tim mạch
Theo một cuộc khảo sát, bổ sung 20-133g protein từ đậu nành mỗi ngày
có thể giúp giảm 7-10% hàm lượng cholesterol xấu LDL trong cơ thể “Dùngđậu nành là một phần của chế độ dinh dưỡng giúp giảm nguy cơ mắc bệnhtim”, Wahida Karmally – Giám đốc dinh dưỡng tại Viện Nghiên cứu Irving nói
Còn theo Cơ quan Quản lý dược phẩm và thực phẩm Mỹ (FDA), thêm 25gprotein từ đậu nành mỗi ngày có tác dụng giảm lượng chất béo bão hòa, qua
đó giảm nguy cơ mắc bệnh tim mạch
Các nhà khoa học thuộc Hội mãn kinh ở Bắc Mỹ đã kết luận: Đậu nành
và các chất chiết từ đậu nành có tác dụng giảm huyết áp tâm trương, giảmcholesterol toàn phần, giảm cholesterol xấu (tức LDL-cholesterol), ngăn chặn sựtiến triển của
các mảng xơ vữa, cải thiện tính đàn hồi của động mạch Do đó, ở Mỹ, cơ quanquản lý thực phẩm và thuốc (FDA) từ năm 1999 đã cho phép dùng đậu nành đểlàm giảm nguy cơ động mạch vành
- Cung cấp đủ dưỡng chất
Các chuyên gia dinh dưỡng Mỹ khẳng định chế phẩm từ đậu nành rất giàu
Trang 6dinh dưỡng và ăn một khẩu phần đậu nành mỗi ngày giúp bổ sung đầy đủdưỡng chất “Đậu nành cung cấp nhiều chất quan trọng như kali, ma-giê, chất xơ,chất chống ô-xy hóa”, hãng tin New Kerala dẫn lời chuyên gia Katherine Tuckercho biết.
- Điều trị chứng mãn kinh
Gần đây, người ta phát hiện thấy trong hạt đậu nành có isoflarm còn gọi làestrogen thực vật (phytoestrogen); hoạt chất này góp phần làm cân bằng hormon ởphụ nữ mãn kinh, cải thiện rõ rệt các triệu chứng khác của tuổi mãn kinh như: Bốchỏa, đổ mồ hôi đêm, trầm cảm, khô âm đạo…
- Tác dụng chuyển hoá xương
Thống kê dịch tễ học cho thấy: Tỷ lệ gãy xương ở phụ nữ châu Á thấp hơn
rõ rệt so với phụ nữ ở các nước phương Tây Kết quả này có liên quan tới sửdụng nhiều thức ăn chế biến từ đậu nành.(Isoflarm của đậu nành) làm tăng mật độkhoáng tại các đốt sống 1,2 đến 1,4 lần (so sánh với phụ nữ dùng thức ăn ít có đậunành) Ở chuột thực nghiệm, làm giảm nguy cơ loãng xương do ức chế hoạt tínhcủa hủy cốt bào, nên có tác dụng hiệp đồng chống tiêu xương
- Tác dụng trên các khối u phụ thuộc và hormon
Thống kê dịch tễ học cũng cho thấy một số loại khối u phụ thuộcvào hormon (ở màng trong tử cung, ở vú, buồng trứng…) có tỷ lệ rất thấp ởphụ nữ châu Á Nhận xét này có liên quan tới chế độ ăn giàu đậu nành ở công dânchâu Á Kết quả nghiên cứu về thực nghiệm và lâm sàng cho thấy (isoflarm ở đậunành) có tác dụng làm giảm nguy cơ ung thư ở tử cung, vú và buồng trứng
- Ung thư
Genistein trong đậu nành làm giảm nguy cơ ung thư bằng cách giảm sự tổnthương tế bào, và chất ức chế Protease BowmanBirk có trong Protein đậu nànhcũng có thể ức chế sự khởi phát ung thư Chất Daidzein trong Protein đậu nành,nếu được sử dụng với liều cao sẽ có tác dụng kích thích hệ thống miễn dịch, để pháhủy những chất có hại cho cơ thể, do đó có tác động lên việc giảm nguy cơ bị ungthư
- Xương khớp
Qua nghiên cứu, người ta thấy rằng những phụ nữ dùng nhiều đạm độngvật sẽ gây mất Calcium qua nước tiểu, do đó sẽ có nguy cơ gãy xương nhiều hơn lànhững phụ nữ dùng Protein thực vật Nghiên cứu cho thấy rằng dùng Protein đậunành, đặc biệt là Isoflavones có thể có tác động tốt lên đậm độ khoáng trongxương ở những phụ nữ mãn kinh mà không dùng Ostrogen thay thế
- Đậu nành dùng trong dinh dưỡng và công nghiệp
Trong dinh dưỡng bột đậu nành trộn với bột ngũ cốc, dùng làm thức ăncho trẻ sơ sinh, người bị bệnh đái tháo đường, bệnh gút… Trong công nghiệp
Trang 7dược, bột đậu nành dùng trong môi trường nuôi cấy kháng sinh.
Những sản phẩm đi từ đậu nành như Tàu hủ, tương, chao, sữa, natto… lànhững thực phẩm giàu protein (đạm) cung cấp nhiều loại acid amin cần thiết cho
cơ thể Những acid amin của đậu nành kết hợp rất tốt với các loại acid amin củanhững ngũ cốc khác Đậu nành còn là nguồn của Lecithin và Vitamin E là nhữnghoạt chất chống oxy- hóa thiên nhiên ngăn chận tác hại của Cholesterol nồng độthấp (LDL) mặt khác đậu nành lại giàu Magnesium giữ vai trò quan trọng choxương, tim mạch và chống xơ vữa động mạch Hơn thế nữa đậu nành còn cótác dụng rất tốt cho Thận thực hiện chức năng của mình (phế thải chất bã dochuyển hóa của đạm, phế thải nước, khoáng chất dư thừa trong cơ thể, độc tố trongthực phẩm…) Đạm thực vật có trong đậu nành thay thế đạm động vật (từ thịt) làmcho Thận làm việc ít hơn, lượng protein trong nước tiểu giảm, ngăn ngừa nguy cơsạn thận Tại hội nghị quốc tế về dinh dưỡng tổ chức tại New Zealand, GSMasafumi Kitakaze đã khẳng định Natto có tác dụng làm giảm rõ rệt các chứng
Mỡ (Triglyceride và Cholesterols) trong máu cao qua nghiên cứu chung của 4
cơ quan y tế Nhật Bản, kêu gọi cộng đồng thế giới cải thiện nếp sinh hoạt(Lifestyle) và tiêu thụ Natto thiên nhiên trước nguy cơ béo phì do “thừa” dinhdưỡng và các chứng bệnh hiểm nghèo, nan y (tiểu đường, ung thư) ngày càng tăngkhắp nơi trên thế giới
1.1.2 Natto và Nattokinase
Natto còn được gọi là pho mai thực vật là những hạt đậu nành đã luộc chínđược ủ với men ở một môi trường 40oC trong vòng 14-18 giờ để lên men thànhnhững hạt đậu có màu nâu, độ nhờn nhớt cao, có mùi nồng nặc rất khó chịu vớingười không quen Theo kinh nghiệm của nhà sản xuất cho biết khi độ nhớt càngcao thì chất lượng Natto càng tốt và vị càng ngọt Là một món ăn dân dã rất phổbiến ở nông thôn Nhật bản, họ thường ăn cơm sáng với Natto, nước tương vớirong biển phơi khô (Nori) và trứng gà sống Natto có chứa nhiều chất bổ dưỡngcho sức khỏe trong đó enzym Nattokinase là một hoạt chất sản sinh trong quá trìnhlên men Natto được xem là hoạt chất có hiệu quả trong việc ngăn ngừa các chứngbệnh tim mạch-một phát hiện vô cùng lý thú bởi nhà nghiên cứu sinh lý họcNhật bản nổi tiếng, giáo sư Sumi Hiroyuki vào năm 1980
Nattokinase còn được gọi là: Subtilisin NAT, Subtilisin BSP Nattokinase làmột enzym có hoạt động fibrinolytic rất mạnh mẽ, được chiết xuất và tinh chế từnatto
Trang 8Hình 1: Natto và enzyme Nattokinase 1.1.2.1 Nguồn gốc của Natto và Nattokinase
Natto là một món ăn truyền thống từ hàng ngàn năm của Nhật Bản
Nó được biết đến như là bí quyết giúp người Nhật sống lâu, khỏe mạnh, kéodài tuổi thọ Người ta cho rằng natto rất hữu hiệu trong việc phòng chốngbệnh cảm cúm, ngộ độc thức ăn (kiết lỵ, tiêu chảy cấp…), làm chắc xương, tiêudiệt vi trùng gây bệnh cũng như giúp cho phụ nữ mang thai sinh con khỏekhoắn Trong suốt thời kì chiến tranh Nhật-Nga (1904-1905), quân đội Nhật Bản
đã phải ăn ngày
3 bữa bằng natto với cơm nhờ vậy binh lính gìn giữ được sức khỏe không bị đaubụng, tiêu chảy hay táo bón trên đường hành quân Natto đã trở thành một đềtài nóng hổi khi TS Sumi Hiroyuki đưa ra những kết quả bất ngờ về hiệu quả củanatto trong việc làm tan các huyết khối trong động mạch, một trong những nguyênnhân suy tim và tử vong của bệnh nhân bị các chứng xơ vữa động mạch vành hayđột quị vì nghẽn hay xuất huyết não vào năm 1980
Trong bữa cơm trưa tại nhà ăn của đại học Y khoa Chicago, Sumi lấymột mẫu natto đặt vào khay thủy tinh có cục máu đông thì 18 giờ sau cục máuđông này
tan rã hoàn toàn, điều đó gợi ý rằng trong natto có thể có một hay nhiều hoạtchất có thể phân hủy huyết khối nhờ thủy phân sợi fibrin có khả năng làm đôngmáu (tụ máu) để ngăn chứng xuất huyết nội Sumi bắt đầu lưu ý tới vai tròcủa “Nattokinase” và Vitamin K2 có trong natto để chứng minh nó là hoạt chấtgiúp cho người Nhật Bản sống lâu, làm tăng khả năng tạo ra plasmin nội sinhgiúp cho cơ thể tránh được tai biến hay đột quị bởi huyết khối hay cácchứng xơ vữa động mạch, suy tim biến chứng gây nên Theo kết quả nghiên cứucủa 3 cơ quan y tế đại học bang Oklahoma (Mỹ), JCR Pharmaceuticals (N) và
Trang 9Trường Y khoa Miyazaki phối hợp thử nghiệm trên cơ thể người bằng cách cho
ăn natto 200 g/ngày và đã kiểm chứng được những hiệu ứng kể trên, đặc biệtphát hiện lượng plasmin nội sinh giảm sụt ở người cao tuổi không đủ để làmtan huyết khối, vón cục trong động mạch thì hiệu quả càng rõ rệt
Năm 1987, Sumi Hiroyuki công bố toàn bộ kết quả nghiên cứu về tác dụngcủa Nattokinase sau khi thử nghiệm gần 200 loại thực phẩm khác nhau để
so sánh, xác định Nattokinase là một loại enzyme mang khả năng phân hủy huyếtkhối một cách hữu hiệu và mạnh nhất trong các loại enzym, gấp 4 lầnplasmin,enzym nội sinh làm tan máu đông, đồng thời tuyệt đối an toàn cho cơ thểkhi hấp thụ qua đường ăn uống
1.1.2.2 Cơ chế tác động của Nattokinase
Nattokinase phân hủy fibrin trực tiếp hay gián tiếp thông qua 3con
- Nattokinase giúp tăng cường t-PA để sản sinh plasmin Đây là enzyme nộisinh tiêu hủy fibrin tự nhiên trong cơ thể
Đặc biệt Nattokinase không ảnh hưởng đến quá trình hình thành fibrin
từ fibrinogen, do đó không làm suy giảm cơ chế đông máu bình thường của cơthể Vì vậy, Nattokinase không gây ra biến chứng chảy máu như các thuốcchống đông máu bình thường
Nattokinase, hoạt chất chính chiết xuất từ Natto,là một enzyme tìmthấy trong tự nhiên có trọng lượng phân tử 20,000 ± 5000 Nó bền với nhiệt đến60ºC với pH 6–12 Mặc dù cơ thể con người có vài loại enzyme tạo ra cục máuđông nhưng chỉ có một enzyme duy nhất là “plasmin” để phá hủy và hòa tan nó.Đặc tính của Nattokinase gần giống với plasmin Nattokinase chiết xuất từ Natto,
là một enzyme thủy phân hiệu quả các mảng bám và huyết khối khi các sợi fibrinnày kết hợp lại với nhau Nattokinase có cấu trúc của một protein, được tạo rabởi chuỗi đơn polypeptide có 275 phân tử, có Ala ở N-cuối cùng Nó thủyphân sợi huyết mạnh mẽ Nattokinase là một enzyme thủy phân fibrin mạnhnhất trong gần 200 loại thực phẩm bổ xung qua đường ăn uống được nghiên cứu
Nattokinase hoạt động mạnh gấp 4 lần plasmin nội sinh, một loạienzyme làm tan fibrin trong cơ thể Do sức khỏe và tuổi tác, cơ thể giảm sản sinhplasmin càng làm tăng nguy cơ hình thành cục máu đông Nattokinase cũng
Trang 10giúp tăng cường plasmin của cơ thể và các thành phần chống đông máu khác nhưurokinase tăng cường lưu thông máu, ngăn chặn xơ vữa mạch Không giốngnhư aspirin và hầu hết các thuốc chống đông máu khác sẽ ức chế sản xuất fibrin,Nattokinase trực tiếp làm tiêu sợi fibrin nên giải phóng tiểu cầu và giải tỏa nhữngnơi máu bị cản trở lưu thông
Bằng cách kích thích cơ thể tăng cường sản xuất plasmin, Nattokinasekhông những giúp làm tan cục máu đông đã hình thành mà còn hoạt động như mộtthành phần chống hình thành cục máu đông
Các tác dụng của Nattokinase:
- Làm tan cục máu đông: Nattokinase làm tan cục máu đông bằng cáchlàm tan sợi fibrin (chất sợi buộc các tiểu cầu vón kết lại với nhau hình thành cụcmáu đông) Nattokinase hoạt động mạnh gấp 4 lần plasmin nội sinh (loạienzyme duy nhất trong cơ thể làm nhiệm vụ phá tan sợi fibrin) với cơ chế tương tựnhư plasmin này Do sức khỏe và tuổi tác, cơ thể giảm sản sinh plasmin càng làmtăng nguy cơ hình thành cục máu đông Nattokinase cũng giúp tăng cường plasmincủa cơ thể và các thành phần chống đông máu khác như urokinase
- Huyết áp: Nattokinase làm giảm huyết áp Người Nhật ăn loại đậu lênmen đã hơn 1000 năm vì mục đích này Các nghiên cứu chỉ ra rằng nó làm giảmhuyết áp bằng cách ức chế enzyme chuyển đổi angiotensin (ACE) ACE khiếnmạch máu bị hẹp lại và huyết áp tăng cao Nattokinase có khả năng ức chế ACE,ngăn cản dầy nội mạc mạch
- Tăng cường lưu thông máu: Nattokinase trợ giúp máu lưu thông bằng cách
hỗ trợ bù trừ trong tuần hoàn Nó cũng được chứng minh là có tác dụng ngănchặn xơ vữa mạch
- Các lợi ích khác: làm chắc xương, trợ giúp đau khớp, giảm nhứcđầu, kháng khuẩn, ngừa bệnh tả, thương hàn, bệnh lị
Cục máu đông làm tắc mạch máu là nguyên nhân chính dẫn đến sa súttrí nhớ, xuất huyết não, nhồi máu cơ tim, đau thắt ngực và trĩ Lợi ích tuyệt vời từNattokinase hứa hẹn mang lại nhiều lợi ích cho những người bệnh này
* Các nghiên cứu:
- Hoạt động tiêu huyết khối
Tiến sĩ Hiroyuki Sumi khám phá ra Nattokinase vào năm 1980 trong khitiến hành nghiên cứu tại Đại học Chicago Tiến sĩ thử nghiệm với gần 200 loạithực phẩm và phát hiện ra tiềm năng của đậu natto khi cho nó vào cục máu nhântạo và giữ ở nhiệt độ cơ thể Ông nhận thấy huyết khối bị tan dần và hoàn toànbiến mất sau 18 tiếng
TS Sumi kế tiếp thử nghiệm lâm sàng với con người và động vật Trongnghiên cứu đầu tiên, 12 tình nguyện viên được cho sử dụng 200g Natto hàng ngày
Trang 11Các hoạt động Fibrinolytic máu của họ được đo theo 2 cách Lấy mẫu máu và kíchthích tạo một cục máu đông trong mẫu sau đó đo thời gian cục máu đông tan hoàntoàn Nhóm sử dụng Nattokinase mất một nửa thời gian so với nhóm đối chứng.
Bài kiểm tra thứ hai dùng máu cho vào đĩa với một loại polymefibrinogen đặc biệt Mức độ tan được đo 4 tiếng 1 lần Nhóm đối chứng cho thấykhông tan trong khi nhóm Nattokinase có tốc độ tan là 14mm/h
Một thử nghiệm thứ ba sau đó được thực hiện để đo các mô hoạt hóaplasminogen (t-PA) trong máu Nhóm dùng Nattokinase cho thấy có sự tăngtPA tPA làm tăng plasmin, do đó các nghiện chỉ ra rằng ngoài khả năng trực tiếptiêu sợi Fibrin, nó còn tăng cường hoạt động chống hình thành cục máu đông của
cơ thể
TS Sumi cũng tiến hành một thử nghiệm lâm sàng liên quan đến chó.Một cục máu đông được tạo ra trong tĩnh mạch chân của chó gây tắc nghẽn hoàntoàn Sau 5h nhóm được cho ăn đậu Natto tĩnh mạch đã hoàn toàn lưu thông.Trong khi đó nhóm dùng giả dược vẫn còn những cục máu đông gây tắc nghẽn 18giờ sau đó
Năm 1995, nhà nghiên cứu ở phòng thí nghiệm Nghiên cứu Công nghệ sinhhọc và JCR Pharmaceuticalscủa Kobe, Nhật Bản đã thử nghiệm hiệu quảcủa Nattokinase trong việc giảm huyết khối động mạch cảnh trên chuột Một sốchuột được tiêm huyết khối ở động mạch cảnh, nguồn cung cấp dinh dưỡng chonão Ba enzym là Nattokinase, plasmin và elastase được dùng để thử nghiệm trênchuột Elastase cho thấy không mở lại các động mạch bị chặn Nhóm ăn Plasmincho thấy lưu thông phục hồi 16% sau một giờ Còn nhóm ăn Nattokinase chothấy phục hồi 62% lưu thông trong cùng khoảng thời gian Kết quả này giúp nhànghiên cứu kết luận rằng "các kết quả cho thấy các khả năng tiêu fibrin củaNattokinase là mạnh hơn so với plasmin hoặc elastase trong cơ thể”
Các nhà nghiên cứu từ JCR Pharmaceuticals, Oklahoma State University vàMiyazaki Medical College tiến hành một nghiên cứu sâu hơn nữa trong đó có
12 tình nguyện viên được cho uống 200 mg Nattokinase và sau đó theo dõi khảnăng tiêu Fibrin của họ thông qua một loạt các xét nghiệm huyết tương Các đốitượng tham gia thí nghiệm cho thấy khả năng phân hủy cục máu đông cao trong 2-
8 giờ Năm 2003, Cesarin và cộng sự đã làm thí nghiệm với Nattokinase vàgiả dược đã được trao cho 184 tình nguyện viên trước khi lên một chuyến bay 7-8giờ 7 trong số 92 người trong nhóm dùng giả dược cho thấy cục máu đông hìnhthành Không ai trong số 92 người trong nhóm Nattokinase hình thành cục máuđông
- Hoạt động huyết áp
Năm 1995, các nhà nghiên cứu từ Trường y khoa Miyazaki Kurashiki