Nghiên cứu sự vận tải và phân phối thuốc cimetidine của màng bacterial cellulose lên men từ nước dừa già định hướng sử dụng qua đường uống

TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH-KTNN PHẠM THỊ THÚY HẰNG NGHIÊN CỨU SỰ VẬN TẢI VÀ PHÂN PHỐI THUỐC CIMETIDINE CỦA MÀNG BACTERIAL CELLULOSE LÊN MEN TỪ NƢỚC DỪA GIÀ ĐỊNH HƢỚNG SỬ DỤNG QUA ĐƢỜNG UỐNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý học ngƣời động vật HÀ NỘI, 2016 LỜI CẢM ƠN Với lòng trân trọng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Xuân Thành, ngƣời thầy tận tình hƣớng dẫn, giúp đỡ suốt trình thực khóa luận Tôi xin bày tỏ lời cảm ơn tới thầy cô khoa Sinh – KTNN thầy cô Trung tâm Nghiên cứu khoa học Chuyển giao công nghệ trƣờng Đại học Sƣ phạm Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ hoàn thành khóa luận Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn tới ngƣời thân, bạn bè bên động viên, giúp đỡ khích lệ hoàn thành khóa luận Mặc dù có nhiều cố gắng để hoàn thành khóa luận cách hoàn chỉnh Tuy nhiên buổi đầu làm quen với công việc nghiên cứu khoa học nhƣ hạn chế kiến thức kinh nghiệm nên tránh khỏi thiếu sót định mà thân chƣa thấy đƣợc Tôi mong đƣợc góp ý quý thầy cô để khóa luận đƣợc hoàn chỉnh Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, tháng năm 2016 Sinh viên Phạm Thị Thúy Hằng LỜI CAM ĐOAN Tôi xin khẳng định kết khóa luận “Nghiên cứu vận tải phân phối thuốc Cimetidine màng Bacterial cellulose lên men từ nước dừa già định hướng sử dụng qua đường uống” kết nghiên cứu cá nhân dƣới hƣớng dẫn trực tiếp TS Nguyễn Xuân Thành, giảng viên khoa Sinh – KTNN trƣờng Đại học sƣ phạm Hà Nội Đề tài chƣa công bố đâu hoàn toàn không trùng với công trình nghiên cứu tác giả khác Hà Nội, tháng năm 2016 Sinh viên Phạm Thị Thúy Hằng DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT A xylinum Acetobacter xylinum BC Bacterial cellulose BC – CM Màng Bacterial cellulose hấp thụ thuốc Cimetidine CM Cimetidine cs cộng ĐHSP Đại học Sƣ phạm FDA Cục quản lý Thực phẩm Dƣợc phẩm Hoa Kỳ OD Mật độ quang phổ Nxb Nhà xuất rpm Tốc độ quay 100 vòng/phút DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1: Thành phần nƣớc dừa già Bảng 2.1 Môi trƣờng lên men tạo màng BC 16 Bảng 2.2 Nồng độ CM giá trị OD tƣơng ứng (n = 3) 18 Bảng 3.1 Giá trị OD (y) trung bình thuốc CM sau hấp thụ thuốc khoảng thời gian khác (n = 3) 27 Bảng 3.2 Khối lƣợng tỉ lệ thuốc CM hấp thụ vào màng BC (n = 3) 28 Bảng 3.3 Giá trị OD (y) tƣơng ứng với nồng độ CM độ dày màng, môi trƣờng pH thời điểm khác giải phóng từ màng BC – CM (n = 3) 30 Bảng 3.4 Tỉ lệ giải phóng thuốc CM từ màng BC – CM độ dày, thời gian môi trƣờng pH khác (n = 3) 32 Bảng 3.5 Hệ số tƣơng quan R2, tốc độ giải phóng thuốc (k) trị số mũ giải phóng (n) môi trƣờng pH khác (n = 3) 34 DANH MỤC HÌNH VẼ Hình 2.1 Biểu đồ biểu diễn đƣờng chuẩn CM 19 Hình 3.1 Màng BC đƣợc nuôi môi trƣờng ngày thứ 24 Hình 3.2 Thu màng BC thô khoảng thời gian khác 25 Hình 3.3 Màng BC đƣợc tinh chế 26 Hình 3.4 Màng BC đƣợc cho vào 100 ml dung dịch CM 5% 27 Hình 3.5 Khả giải phóng thuốc CM màng BC – CM độ dày, thời gian môi trƣờng pH khác 31 DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1 Quy trình thu nhận màng BC 17 Sơ đồ 3.1 Quy trình tinh chế màng BC 26 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN LỜI CAM ĐOAN DANH MỤC VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG, HÌNH, SƠ ĐỒ MỞ ĐẦU 1 Lí chọn đề tài Mục đích nghiên cứu 3 Nội dung nghiên cứu Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn Phƣơng pháp nghiên cứu CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan đối tƣợng lĩnh vực nghiên cứu 1.1.1 Tổng quan màng BC 1.1.2 Tổng quan thuốc CM 1.2 Giới thiệu tổng quan tình hình nghiên cứu Việt Nam giới 11 1.2.1 Tình hình nghiên cứu Việt Nam giới màng BC 11 1.2.2 Tình hình nghiên cứu Việt Nam giới CM 12 1.2.3 Tình hình nghiên cứu Việt Nam giới hƣớng nghiên cứu 13 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 Vật liệu nghiên cứu 15 2.1.1 Giống vi khuẩn 15 2.1.2 Nguyên liệu hóa chất 15 2.2 Thiết bị dụng cụ 15 2.2.1 Thiết bị đƣợc sử dụng nghiên cứu 15 2.2.2 Dụng cụ đƣợc sử dụng nghiên cứu 16 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 16 2.3.1 Phƣơng pháp tạo màng BC 16 2.3.2 Phƣơng pháp dựng đƣờng chuẩn CM 18 2.3.3 Phƣơng pháp xác định lƣợng thuốc CM hấp thụ vào màng BC 19 2.3.4 Phƣơng pháp xác định lƣợng thuốc giải phóng CM từ màng BC – CM 20 2.3.5 Phƣơng pháp phân tích dƣợc động học giải phóng CM 22 2.3.6 Phƣơng pháp xử lý thống kê 23 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 24 3.1 Tạo màng BC A xylinum môi trƣờng nƣớc dừa già 24 3.2 Thu màng BC thô môi trƣờng nƣớc dừa già 24 3.3 Tinh chế màng BC 25 3.4 Lƣợng thuốc hấp thụ vào màng BC 27 3.5 Lƣợng thuốc CM giải phóng khỏi màng BC – CM 29 3.6 Phân tích động dƣợc học giải phóng CM 34 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 37 1.1.Kết luận 37 1.2.Kiến nghị 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Đau bao tử hay loét dày bệnh phổ biến, thƣờng gặp nƣớc ta nhƣ giới, bệnh hiệu ứng ăn da acid pepsin làm lớp niêm mạc dày hành tá tràng lan xuống lớp dƣới niêm mạc, lớp chí đến lớp mạc gây thủng dày CM thuốc kháng H2 đời lựa chọn đầu tay bác sĩ năm 80 kỉ trƣớc để chữa đau bao tử hay loét dày CM lần có mặt thị trƣờng Anh năm 1976, sau 12 năm đƣợc nghiên cứu tập đoàn dƣợc phẩm Smith, Kline French (SK & F GlaxoSmithKline) Các nhà khoa học SK & F nhận thấy vai trò kích thích tiết acid dày histamin thể từ năm 1964, nhƣng thời điểm kháng histamin cổ điển tác dụng để ức chế hoạt động Và kể từ họ chứng minh đƣợc diện receptor histamin H2 tế bào thành dày, mục đích nhóm nghiên cứu tìm chất có khả ức chế cạnh tranh với histamin, gắn vào receptor histamin H2 nhƣng lại ức chế tiết acid Chất chất kháng histamin H2 [9, 22] Vào tháng 11 năm 1976, CM sau trải qua hàng loạt thử nghiệm với kết thành công mỹ mãn, đƣợc mắt thị trƣờng với tên Tagamet Vào ngày 01 tháng 01 năm 1979, CM thức đƣợc Cục quản lí dƣợc mỹ phẩm Hoa Kỳ kê đơn [9] Tuy nhiên, khả hòa tan nƣớc CM thấp làm giảm hiệu điều trị, sinh khả dụng thực tế CM ngƣời đau dày khoảng 56 – 68%, nửa đời thải trừ CM [33] Do cần thiết kế hệ thống vận tải phân phối thuốc CM để giúp thuốc giải phóng cách kéo dài Uống đƣờng ƣa thích truyền thống để phân phối thuốc So với đƣờng tiêm, lợi an toàn, đơn giản, tiện lợi dễ có tuân thủ bệnh nhân nên làm tăng hiệu điều trị thuốc [32] Trong năm gần đây, có ý đặc biệt việc sử dụng vật liệu sinh học sản phẩm chăm sóc sức khỏe khả tái tạo, tƣơng thích sinh học phân hủy sinh học chúng Một vật liệu sinh học có đặc tính đƣợc ý cellulose BC hay màng sinh học sản phẩm loài vi khuẩn, đặc biệt chủng A xylinum BC có cấu trúc đặc tính giống với cellulose thực vật nhƣng có số tính chất hóa lí đặc biệt nhƣ: độ bền học khả thấm hút cao, độ polymer hóa lớn, có khả phục hồi độ ẩm ban đầu, bị phân hủy enzyme, … Vì BC đƣợc ứng dụng nhiều lĩnh vực công nghệ nhƣ: thực phẩm, công nghệ giấy, công nghệ pin, lĩnh vực y học BC đƣợc dùng làm màng trị bỏng, mặt nạ dƣỡng da [2, 6] Ngoài ra, BC hàng rào cản oxi sinh vật khác, ngăn cản phân hủy chất tế bào ngăn cản tác động UV, ổn định kích thƣớc hƣớng, màng BC có ý nghĩa giữ thuốc kéo dài thời gian giải phóng thuốc [8, 12] Bên cạnh đó, sợi cellulose có cấu trúc mạng hệ thống vận chuyển phân phối thuốc làm tăng sinh khả dụng thuốc, giúp thuốc không bị phá hủy môi trƣờng acid Các nghiên cứu cho thấy màng BC đƣợc tạo từ nguyên liệu rẻ tiền, dễ kiếm, sản xuất quy mô công nghiệp Môi trƣờng nuôi cấy vi khuẩn A xylinum đa dạng nhƣ nƣớc dừa già, rỉ đƣờng, nƣớc mía, … Trong nƣớc dừa già đƣợc coi môi trƣờng kinh điển nuôi cấy A xylinum với hàm lƣợng chất dinh dƣỡng cao, rẻ tiền, phổ biến, phù hợp với phát triển loại vi khuẩn [2] Với mục đích khảo sát khả hấp thụ giải phóng thuốc CM qua màng BC định hƣớng sử dụng qua đƣờng uống, chọn đề tài nghiên cứu: Ở môi trƣờng pH = 6,8 pH = 12 giá trị OD trung bình thuốc CM giải phóng từ màng BC – CM đạt cực đại Giá trị OD (y) trung bình môi trƣờng pH = cao  Từ giá trị OD (y) trung bình bảng 3.3 thuốc CM tiến hành giải phóng từ màng BC – CM , thay vào phƣơng trình (2.1) tính đƣợc nồng độ CM tƣơng ứng với khoảng thời gian Thay giá trị nồng độ CM vừa tính đƣợc vào công thức (2.4) ta xác định đƣợc tỉ lệ giải phóng thuốc CM màng BC – CM độ dày, thời gian môi trƣờng pH khác nhƣ bảng 3.4 Bảng 3.4 Tỉ lệ giải phóng thuốc CM từ màng BC – CM độ dày, thời gian môi trường pH khác (n = 3) pH Tỉ lệ thuốc CM giải phóng đƣợc từ màng BC – CM (%) Thời gian Độ dày màng 0,5 cm cm 0,5 cm 6,8 cm 0,5 cm 12 cm 0,5 giờ giờ 12 24 45,81 ± 50,04 ± 56,80 ± 63,75 ± 75,71 ± 74,92 ± 72,75 ± 0,269 1,552 0,905 0,521 0,626 0,927 1,102 43,53 ± 47,70 ± 51,95 ± 58,70 ± 70,53 ± 69,07 ± 67,4 ± 1,269 0,667 1,120 1,272 0,485 0,956 0,662 41,00 ± 45,04 ± 49,10 ± 51,02 ± 50,44 ± 49,76 ± 49,00 ± 0,906 1,620 1,29 1,075 0,89 1,34 0,034 38,70 ± 40,24 ± 44,21 ± 48,27 ± 47,63 ± 47,02 ± 44,60 ± 0,54 0,98 1,62 1,76 1,5 0,2 0,8 33,75 ± 37,5 ± 38,9 ± 42,8 ± 41,9 ± 40,10 ± 42,30 ± 0,93 1,52 1,37 0,71 0,26 0,95 1,61 33,86 ± 35,21 ± 38,89 ± 40,40 ± 41,89 ± 42,27 ± 42,2 ± 0,63 1,73 1,00 1,27 1,81 0,99 0,79 32 Nhận xét: Qua bảng 3.4 thấy: Tại pH = 2, tỉ lệ thuốc CM giải phóng đƣợc từ màng BC – CM cao Tại pH = 2, tỉ lệ thuốc CM màng 0,5 cm giải phóng cực đại 75,71% ± 0,626 Tỉ lệ thuốc CM màng cm giải phóng cực đại 70,53% ± 0,489 So sánh tỉ lệ giải phóng thuốc CM trung bình độ dày màng 0,5 cm 1cm môi trƣờng pH = hàm t – Test: Two Sample Assuming Unequal Variances, kết có khác biệt khả giải phóng thuốc CM từ độ dày màng P = 0,0059 (T 71%), thuốc CM giải phóng dung dịch đệm pH = 12, pH = 6,8 phù hợp với mô hình Higuchi Korsmeyer – Peppas (R2 > 35%) Khi thuốc giải phóng dung dịch đệm pH = 6,8 thấy phù hợp với mô hình Hixson – Crowel Những kết cho thấy khả ứng dụng mô hình Korsmeyer – Peppas cho trƣơng nở sợi cellulose màng BC, sợi cellulose trƣơng nở nhiều, tạo nhiều khoảng không gian rộng thuốc CM khuếch tán nhanh từ màng BC – CM môi trƣờng đệm Trong hệ thống khuếch tán Fickian [25, 26], n < 0,43 giải phóng thuốc xảy theo chế khuếch tán, 0,43 < n < 0,85 giải phóng thuốc xảy ra, n > 0,85 có ăn mòn vật liệu (màng BC) Các giá trị n thu đƣợc từ bảng 3.5 n < 0,43 giải thích giải phóng thuốc chế khuếch tán thuốc CM từ màng BC – CM môi trƣờng đệm Kết luận: Sự trƣơng nở sợi cellulose màng BC có ảnh hƣởng phần đến khuếch tán thuốc CM ngƣợc lại Nhƣ vậy, chế giải phóng 35 thuốc CM bị ảnh hƣởng môi trƣờng đệm, tính chất màng BC nồng độ thuốc CM 36 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 1.1 Kết luận Từ kết thu đƣợc từ khóa luận này, đƣa số kết luận nhƣ sau: Tạo đƣợc màng BC độ dày 0,5 cm cm, cảm quan thấy màng có độ tinh khiết cao, chất dẻo dai, khả thấm hút tốt Màng BC độ dày 0,5 cm có khả hấp thụ thuốc tốt màng BC có độ dày cm Khả hấp thụ thuốc màng BC đạt cực đại 1,5 Màng BC hấp thụ thuốc độ dày khác đƣợc giải phóng môi trƣờng đệm pH =2, pH = 6,8, pH = 12 thời điểm khác cho thấy màng 0,5 cm có khả giải phóng tốt màng cm Đệm pH = môi trƣờng tốt để giải phóng thuốc tốt giúp kéo dài thời gian giải phóng thuốc, tăng sinh khả dụng thuốc 1.2 Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu khả vận tải phân phối thuốc CM màng BC tạo chủng A xylinum từ loại môi trƣờng khác Tiếp tục nghiên cứu khả vận tải phân phối loại thuốc khác màng BC nhằm tăng sinh khả dụng kéo dài thời gian giải phóng loại thuốc Với nghiên cứu sau thay đƣờng glucose đƣờng saccarose để giảm chi phí cho việc nghiên cứu 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt [1] Hà Nguyên Phƣơng Anh, Trần Hậu Khang, Nguyễn Duy Hƣng (2014), “Đánh giá hiệu Cimetidine phòng tái phát bệnh sùi mào gà Bệnh viện Da liễu trung ƣơng”, Tạp chí Da liễu học Việt Nam, sô 16 (7/2014), trang – 10 [2] Huỳnh Thị Ngọc Lan, Nguyễn Văn Thanh (2006), “Nghiên cứu đặc tính màng cellulose vi khuẩn từ Acetobacter xylinum sử dụng làm màng trị bỏng”, Tạp chí Dược học số 361/2006, trang 18-20 [3] Nguyễn Văn Mã, La Việt Hồng, Ong Xuân Phong (2013), Phương pháp nghiên cứu sinh lí học thực vật, Nxb Đại học Quốc gia Hà Nội [4] Nguyễn Văn Mùi (2001), Thực hành hóa sinh học phần 2, Nxb Đại học Quốc gia Hà Nội [5] Đinh Thị Kim Nhung, Nguyễn Thị Thùy Vân, Trần Nhƣ Quỳnh (1996), “Nghiên cứu vi khuẩn Acetobacter xylinum tạo màng Bacterial Cellulose ứng dụng điều trị bỏng”, Tạp chí khoa học công nghệ, 50 (4), trang 453 – 462 [6] Nguyễn Thị Nguyệt (2008), Nghiên cứu vi khuẩn Acetobacter xylinum cho màng Bacterial Cellulose làm mặt nạ dưỡng da, Luận án thạc sỹ sinh học ĐHSP Hà Nội Tài liệu tiếng anh [7] A K Srivastava et al (2005), “Floating microspheres of Cimetidine: Formulation, characterization and in vitro evaluation”, Actapharm, 55, 277 - 285 [8] Almeida, I.F., et al (2013), “ Bacterial cellulose membranes as drug delivery systems: An in vivo skin conpatibility study”, Eur J Pharm Biopharm, in press [9] American Chemical Society (2001), “Tagamet: Discovery of histamine H2 – receptor Antagonists”, National Historic Chemical Landmarks [10] Amin MCIM, Ahmad N, et al., “Bacterial cellulose film coating as drug delivery system: physicochemical, themal and drug release properties”, Sain Malaysiana, 41 (5), 561 – [11] Andrew Somogyi, Roland Gugle, (1983), Clinical pharmacokinetics of Cimetidine, Clin Pharmakokinet, Now – Pec: (6): 463 – 95 [12] Arisawa T, Shibata T, et at.(2006), “Effects of sucralfate, cimetidine and rabeprazole on mucosalhydroxyproline content in healing of ethanol-hclinduced gastric lesions”, Pharmacol Physion, 33(7):628-32 [13] Dr G Bodermar, B Norlander, A Walan (Aug 1981), “Pharmacokinetics of Cimetidine after single doses and during continuous treatment”, Clinical pharmacokinetics, vol 6, issue 4, 306 – 315 [14] Franco I (2000), “Oral Cimetidine for the management of genital and perigenital warts in children, J Urol 2000 Sep, 164, 1074 – [15] Fukuda M, et al.(2008), “Cimetidine inhibits salivary gland tumor cell adhesion to neural cells and induces apoptosis by blocking NCAM expression”, Cancer, 10(2407) 8-376 [16] Jayswal BD, Yadav VT, Patel KN, Patel BA (2012), “ Fomulation and evaluation of floating in situ gel based gastro rententive drug delivery of Cimetidine”, International journal for pharmaceutical research scholars [17] Kurosumi, A., C., Yamashita, Y & Nakamura, Y (2009), “Utilization of various fruit juices as carbon source for production of bacterial cellulose by Acetobacter xylinum NBRC 13693”, Carbohydrate Polymer 76 (2): 333 – 335 [18] Levine M, Law EY, Bandiera SM, Chang TK, Bellward GD (February 1998), “In vivo Cimetidine inhibits hepatic CYP2C6 and CYP2C11 but not CYP1A1 in adult male rats”, The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 284 (2): 493 – [19] Lin Huang, Xiuli Chen, Thanh Nguyen Xuan, Huiru Tang, Liming Zhang and Guang Yang (2013), “Nano- cellulose 3D- networks as controlledrelease drug carriers”, Journal of Materials Chemistry B, 2013,1, 2976 – 2984 [20] M Sonnenblick, A.J Rosin, N Weissberg (July 1982), “ Neurological and psychiatric side effects of Cimetidine report of cases with review of the literature”, Postgraduate Medical Journal 58: 415 – 418 [21] Mohd Amin MC, Ahmad N, Pandey M, Jue Xin C (2014), “Stimuli – responsive bacterial cellulose – g – poly (acrylic acid – co – acrylamide) hydrogels for oral controlled release drug delivery”, Drug Dev Ind Pharm 40 (10): 1340 – [22] Molinder HK (1994), “The development of Cimetidine: 1964 – 1976, A human story”, Jclin Gastroenterol, 19 (3): 248 – 54 [23] Pedersen P.U, Miller R (1980), “Pharmacokinetic and bioavailability of Cimetidine in humans”, J Pharm Sci., 69, 394 – 398 [24] Ramakrishna et al (2015), “Formulation and evaluation of Cimetidine floating matric tablets”, International journal of pharmaceutical, chemical, and biological sciences [25] Ritger P L, Peppas N A (1987), “A simple equation for description of solute release, Fickian and non – Fickian release from non – swellable devices in the form of slabs, spheres, cylinders or discs”, Journal of Controlled Release, (1): 23 – 36 [26] Shaker D S, El – Leithy E S, Ghorab M K, et al (2010), “Optimization and characterization of diclofenac sodium microspheres prepared by a modified coacervation method”, Drug discoveries & therapeutics, (3): 208 – 216 [27] Sabesin SM (1993), “Safety issues relating to long – term treatment with histamine H2 – receptor antagonists”, Aliment Pharmacol Ther Suppl 2: 35 – 40 [28] Saltissi, A Crowther et al (1981), “ The effects of chronic oral Cimetidine therapy on the cardiovascular system in man”, Br J clin Pharmac, 11, 497 – 503 [29] Scheinfeld (2003), “Cimetidine: a review of the recent developments and reports in cutaneous medicine”, Dermatol Online J.9 (2): – 80 [30] Sivelle PC, Underwood AH, Jelly JA (March 1982), “The effects of histamine H2 receptor antagonists on androgen action in vivo and dihydrotestosterone binding to the rat prostate androgen receptor in vitro”, Biochemical Pharmacology 31 (5): 677 – 84 [31] Stephen J Winters, Judy Lee, Philip Troen (1979), “Competition of the histamine H2 antagonist Cimetidine for androgen binding sites in men”, American Journal of Andrology, vol 1: 111 – 114 [32] Thanh Xuan Nguyen, et al (2014), “Chitosan – coated nano – liposomes for the oral delivery of Berberin hydrochloride”, J Mater Chem B, 2, 7149 – 7159 [33] W.L Burland, W.A.M Duncan, T Hesselbo et al (1975), “Pharmacological evaluation of Cimetidine, a new histamine H2 - receptor antagonist, in healthy man”, Br J clin Pharmac.2: 481 – 486 [34] Yong Zhang, Meirong Huo, Jianping Zhou, Aifeng Zou, Weize Li, Chengli Yao and Shaofei Xie (2010), “DDSlover: An add – in program for modeling and comparison of drug dissulution profiles”, The AAPS Journal (2010), 263 – 271 PHỤ LỤC Bảng So sánh giá trị OD (y) trung bình thuốc CM khoảng thời gian 1,5 độ dày màng 0,5 cm t-Test: Two-Sample Assuming Unequal Variances 1,5h 2h Mean 0,025 0,0249 Variance 9E-06 0,00000013 Observations 3 Hypothesized Mean Difference Df t Stat 0,057323 P(T