, xây dựng quy trình giám định định tính và định lượng chất m TFMPP (13(trifluoromethyl)phenylpiperazine) bằng sắc kí khí ghép nối khối phổ. (luận văn thạc sĩ), xây dựng quy trình giám định định tính và định lượng chất m TFMPP (13(trifluoromethyl)phenylpiperazine) bằng sắc kí khí ghép nối khối phổ. (luận văn thạc sĩ), xây dựng quy trình giám định định tính và định lượng chất m TFMPP (13(trifluoromethyl)phenylpiperazine) bằng sắc kí khí ghép nối khối phổ. (luận văn thạc sĩ), xây dựng quy trình giám định định tính và định lượng chất m TFMPP (13(trifluoromethyl)phenylpiperazine) bằng sắc kí khí ghép nối khối phổ. (luận văn thạc sĩ), xây dựng quy trình giám định định tính và định lượng chất m TFMPP (13(trifluoromethyl)phenylpiperazine) bằng sắc kí khí ghép nối khối phổ. (luận văn thạc sĩ), xây dựng quy trình giám định định tính và định lượng chất m TFMPP (13(trifluoromethyl)phenylpiperazine) bằng sắc kí khí ghép nối khối phổ. (luận văn thạc sĩ), xây dựng quy trình giám định định tính và định lượng chất m TFMPP (13(trifluoromethyl)phenylpiperazine) bằng sắc kí khí ghép nối khối phổ. (luận văn thạc sĩ), xây dựng quy trình giám định định tính và định lượng chất m TFMPP (13(trifluoromethyl)phenylpiperazine) bằng sắc kí khí ghép nối khối phổ. (luận văn thạc sĩ), xây dựng quy trình giám định định tính và định lượng chất m TFMPP (13(trifluoromethyl)phenylpiperazine) bằng sắc kí khí ghép nối khối phổ. (luận văn thạc sĩ)
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC - TỰ NHIÊN HÀ HOÀNG LINH XÂY DỰNG QUI TRÌNH GIÁM ĐỊNH VIÊN NÉN TFMPP (m-trifluoromethylphenylpiperzazine) BẰNG GC/MS LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – 2011 -1- ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN HÀ HỒNG LINH XÂY DỰNG QUI TRÌNH GIÁM ĐỊNH VIÊN NÉN TFMPP (m-trifluoromethylphenylpiperzazine) BẰNG GC/MS Chuyên ngành: Hóa phân tích Mã số : 60 44 29 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS NGUYỄN XUÂN TRƯỜNG Hà Nội – 2011 -2- MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU - CHƢƠNG TỔNG QUAN - 1.1 Đối tượng nghiên cứu: - 1.1.1 Lịch sử: - 1.1.2 Dẫn xuất piperazine : - 1.1.3 Công thức cấu tạo: - 1.1.4 Tính chất lý hóa: - 1.1.5 Các dạng tồn thường dùng: - 10 1.1.6 Tác dụng m-TFMPP: - 10 1.2 Các phương pháp phân tích m-TFMPP: - 12 1.2.1 Phương pháp phản ứng màu: - 12 1.2.2 Phương pháp sắc ký mỏng (TLC): - 13 1.2.3 Phương pháp quang phổ hồng ngoại (FTIR): - 13 1.2.4 Phương pháp sắc kí lỏng khối phổ (LC-MS): - 14 1.2.5 Phương pháp sắc kí khí khối phổ (GC-MS): - 15 1.3 Giám định m-TFMPP: - 17 1.3.1 Nguyên tắc giám định ma túy: - 17 1.3.2 Tình hình giám định m-TFMPP Việt Nam: - 19 - CHƢƠNG THỰC NGHIỆM - 20 2.1 Nội dung phương pháp nghiên cứu: - 20 2.2 Hóa chất, thiết bị: - 22 2.2.1 Hóa chất: - 22 2.2.2 Thiết bị: - 23 2.3 Tiến hành thí nghiệm: - 23 2.3.1 Lấy mẫu xử lí mẫu: - 23 2.3.2 Định tính, định lượng m-TFMPP: - 24 - CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN - 25 3.1 Điều kiện phân tích: - 25 3.2 Điều kiện tối ưu trình tách, chiết TFMPP: - 30 3.2.1 Khảo sát dung môi chiết: - 30 3.2.2 Khảo sát môi trường pH: - 31 3.2.3 Khảo sát hiệu suất chiết: - 33 3.2.4 Giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng thiết bị: - 33 3.3 Phương pháp định lượng m-TFMPP: - 34 3.3.1 Phương trình hồi qui tuyến tính: - 34 3.3.2 Giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng phương pháp: - 35 3.3.3 Đánh giá tính phù hợp phương pháp: - 36 3.3.4 Hiệu suất thu hồi phương pháp: - 37 3.3.5 Quy trình giám định m-TFMPP thiết bị GC-MS: - 38 3.4 Ứng dụng: - 41 - -3- 3.5 Dẫn xuất hóa m-TFMPP: - 42 3.5.1 Nguyên tắc dẫn xuất hóa m-TFMPP: - 42 3.5.2 Định tính lượng vết m-TFMPP: - 43 3.5.3 Độ nhạy phương pháp sau dẫn xuất hóa: - 46 - KẾT LUẬN - 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO .- 55 - -4- MỞ ĐẦU Tệ nạn ma tuý hiểm hoạ cho toàn xã hội, gây tổn hại sức khoẻ, làm suy thối nịi giống, phẩm giá người, phá hoại hạnh phúc gia đình gây ảnh hưởng nghiêm trọng đến trật tự, an toàn xã hội an ninh quốc gia Tệ nạn ma túy tác nhân tăng nhanh loại tội phạm khác, đặc biệt nguyên nhân làm lây lan đại dịch HIV/AIDS [1] Lợi dụng sách mở cửa, hội nhập kinh tế giới, bọn tội phạm tìm cách thẩm lậu ma tuý qua biên giới, biến nước ta thành địa bàn sử dụng trung chuyển ma tuý (Hầu hết chất ma tuý tổng hợp (ATS) giới kích thích thần kinh trung ương kiểu amphetamine) Trong năm gần đây, với phát triển mạnh mẽ kinh tế, vũ trường, sàn nhảy xuất ngày nhiều Trong đó, số biến thành tụ điểm thu hút lượng không nhỏ thiếu niên đến sử dụng ma tuý hoạt động tệ nạn khác làm nhức nhối xã hội Giám định ma tuý hoạt động tố tụng, sản phẩm kết luận giám định Theo quy định pháp luật, kết luận chất ma tuý nguồn chứng bắt buộc để luận tội định khung hình phạt, ảnh hưởng trực tiếp đến sinh mạng, trị cơng dân Do đó, q trình giám định chất ma t phải thực theo quy trình chuẩn thẩm định để đảm bảo kịp thời, xác, khách quan đồng kết phòng thí nghiệm m-TFMPP chất tổng hợp gây nghiện có tác dụng kích thích thần kinh trung ương kiểu thuốc lắc (ecstasy) Trên giới, chúng thường giới trẻ sử dụng vũ trường, sàn nhảy để thay cho thuốc lắc Trước bùng phát chất gây nghiện này, nhiều quốc gia đưa mTFMPP vào danh mục cần kiểm soát như: Đan mạch (12/2005), Thụy Điển (3/2006), New Zealand (Ở nước ta nay, m-TFMPP quan tham mưu đề xuất Chính Phủ đưa vào danh mục chất ma túy cần kiểm sốt Ngày 22/2/2011 phủ ban hành nghị định số -5- 17/2011/NĐCP bổ sung vào danh mục chất ma túy [22,39]) Cho đến chưa có cơng trình nghiên cứu, xây dựng quy trình giám định m-TFMPP Điều gây khó khăn khơng nhỏ cho quan điều tra thời hiệu tạm giữ đối tượng có hạn khó khăn cho giám định viên bảo vệ kết luận giám định trước tòa Trên giới tiến hành nghiên cứu, giám định loại ma túy GC-MS sử dụng rộng rãi phổ biến Vì vậy, luận văn tập trung tiến hành nghiên cứu, xây dựng quy trình giám định định tính định lượng chất m- TFMPP (1-[3-(trifluoromethyl)phenyl]piperazine) sắc kí khí ghép nối khối phổ -6- CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Đối tƣợng nghiên cứu: 1.1.1 Lịch s ử: - Chất m-TFMPP dẫn xuất piperazine Vào cuối năm 1970 m-TFMPP biết đến chất có tác dụng làm giảm đau, chống viêm tên biệt dược (Stakane), m-TFMPP làm hoạt hóa thụ thể (5-HT1B 5-HT2C) Serotonin chất làm phóng thích Serotonin làm tăng mức độ Serotonin khe tế bào thần kinh Vào năm 1985, m-TFMPP bị lạm dụng chất ma túy tổng hợp khác Năm 2002, quan phòng chống ma túy Mỹ (DEA) phát hiện, công bố chất mTFMPP giới trẻ Mỹ sử dụng để lắc hộp đêm Hoạt chất thường phối hợp với chất ma túy khác BZP, MDMA, MDA để tăng tác dụng kích thích khối cảm dùng để lắc Trong thời gian này, Mỹ nhiều quốc gia khác Đan mạch (12/2005), Thụy Điển (3/2006), New Zealand (4/2008), Singapore (2007) đưa m-TFMPP vào danh mục chất ma túy cần kiểm soát [14,17,18,28,36] - Tháng năm 2010 phát số lượng lớn viên nén giới trẻ dùng để lắc (có thành phần m-TFMPP ) số vũ trường Việt Nam có nguy bùng phát Đây hoạt chất gây nghiện quan ban ngành tham mưu đề xuất phủ đưa vào danh mục chất ma túy cần kiểm sốt Ngày 22/02/2011, Chính phủ ban hành Nghị định số 17/2011/NĐ-CP bổ sung chất m-TFMPP vào danh mục chất ma túy cần kiểm soát Cho đến chưa có cơng trình nghiên cứu, xây dựng quy trình giám định m-TFMPP Điều gây khó khăn không nhỏ cho quan điều tra thời hiệu tạm giữ đối tượng có hạn khó khăn cho giám định viên bảo vệ kết luận giám định trước tòa Trên giới -7- giám định, nghiên cứu loại ma túy GC-MS sử dụng rộng rãi phổ biến Vì vậy, luận văn đặt vấn đề nghiên cứu, xây dựng quy trình giám định định tính định lượng chất m- TFMPP sắc kí khí ghép nối khối phổ [2] 1.1.2 Dẫn xuất piperazine : Các dẫn xuất piperazine chia thành nhóm: Các dẫn xuất 1-Phenylpiperazine dẫn xuất 1-Benzylpiperazine [6,7] * Các dẫn xuất 1-Phenylpiperazine: Khung cấu trúc dẫn xuất nhóm 1-phenylpiperazin có dạng: R3 R2 N R1 NH Nhóm Tên chất R1 R2 R3 1-(3-trifluoromethylphenyl)piperazine mTFMPP H CF3 H 1-(2-trifluoromethylphenyl)piperazine oTFMPP CF3 H H 1-(4-trifluoromethylphenyl)piperazine pTFMPP H H CF3 1-(2-methoxyphenyl)piperazine oMeOPP OCH3 H H 1-(4-methoxyphenyl)piperazine pMeOPP H H OCH3 1-(3-chlorophenyl)piperazine mCPP H Cl H 1-(4-chlorophenyl)piperazine pCPP H H Cl 1-(2-fluorophenyl)piperazine oFPP F H H 1-(4-fluorophenyl)piperazine pFPP H H F 1-(3-methylphenyl)piperazine mMPP H CH3 H 1-(4-methylphenyl)piperazine pMPP H H CH3 * Các dẫn xuất 1-Benzylpiperazine: -8- Các hợp chất nhóm 1-benzylpiperazin có khung cấu trúc sau: N N R4 Tên chất Viết tắt Nhóm R4 1-Benzylpiperazine BZP H 1-Benzy-4-methyllpiperazine MBZP CH3 1,4-Dibenzylpiperazine DBZP C6H5CH2 1.1.3 Công thức cấu tạo: TFMPP (Trifluoromethylphenylpiperazine hay 1-[3-(trifluoromethyl) phenyl] piperazine, N-(α, α, α-trifluoro-m-tolyl)piperazine) dẫn xuất 1Phenylpiperazine có cơng thức phân tử C11H13F3N2 TFMPP có đồng phân ortho, meta, para tuỳ thuộc vào vị trí nhóm trifluormethyl nhân phenyl vị trí 2, 3, so với gốc piperazine: NH NH F3C CF3 N N NH N F3C m-TFMPP p-TFMPP o-TFMPP Hình 1.1.3 Cơng thức cấu tạo TFMPP 1.1.4 Tính chất lý hóa: Trong tự nhiên, TFMPP tồn chủ yếu hai dạng: Dạng bazơ dạng muối hydroclorit, hai dạng bền điều kiện thường Các mảnh phổ đặc trưng cho TFMPP sau (m/z): 188, 230, 145, 56, 172, 73, 221 Dạng bazơ có tên khoa học 1-[3-(trifluoromethyl)phenyl] piperazine, công thức phân tử: C11H13F3N2, tỷ trọng: 1,226g/ml, sôi nhiệt độ 100 - -9- 102oC, nóng chảy nhiệt độ 65 – 71oC Dạng muối có tên khoa học 1-[3-(trifluoromethyl)phenyl] piperazine hydrochloride, cơng thức phân tử: C11H13F3N2 HCl, khối lượng phân tử: 266,66, nóng chảy nhiệt độ 239-241oC Ở dạng bazơ, TFMPP thường tồn dạng bột kết tinh màu trắng 1.1.5 Các dạng tồn thƣờng dùng: Các dẫn xuất piperazin nói chung thường tồn dạng bột kết tinh tinh thể nguyên chất, không màu màu trắng Chất m-TFMPP thường tồn dạng muối hydroclorit, pha chế để tiêm, hút uống m-TFMPP dễ hấp thụ qua đường dày, ruột qua hàng rào máu não để tác dụng nên não Từ xuất nước ta nay, m-TFMPP chủ yếu lưu hành dạng viên nén, viên nhộng với nhiều hình dạng, kích thước, màu sắc kí hiệu khác Trong dạng chứa nhiều thành phần chất ma túy tùy sở sản xuất [13,24] 1.1.6 Tác dụng m-TFMPP: Tác dụng dƣợc lý: m-TFMPP có tác dụng hướng tâm thần kinh, vừa có tác dụng kích thích thuốc lắc (ecstasy), vừa có tác dụng gây ảo giác mescalin, psilocybin LSD Khi dùng m-TFMPP, người “bùng phát” thấy nhạy cảm hơn, tinh tế cảm nhận tốt Tác dụng thay đổi tùy theo liều dùng: Ở liều uống khoảng 25mg, tác dụng kích thích thuốc lắc thể rõ, với liều uống 75-105mg, tác dụng gây ảo giác hay “loạn sắc” lại chiếm ưu Tác dụng phụ xảy bao gồm phản ứng da, tiêu chảy hay rối loạn tiêu hóa, tăng thân nhiệt, tăng nhịp tim, buồn nôn nôn [7,8] Tác dụng kích thích hệ thần kinh trung ƣơng: m-TFMPP chất tổng hợp gây nghiện có tác dụng kích thích thần kinh trung ương kiểu thuốc lắc (ecstasy) Trên giới, chúng thường giới trẻ sử dụng vũ trường, sàn nhảy thay cho thuốc lắc Nó tác dụng lên vỏ não, kích thích - 10 - Thí nghiệm 3: Làm tương tự thí nghiệm thêm xác lượng chất chuẩn cho nồng độ m-TFMPP 1500ppb Mỗi thí nghiệm làm lặp lại lần lấy trung bình Kết trình bày bảng 3.3.4 sau đây: Bảng 3.3.4 Hiệu suất thu hồi phƣơng pháp mẫu thật [TFMPP] thêm vào (ppb) 250 1500 STFMPP SIS STFMPP/SIS [TFMPP] tìm (ppb) 30752238 16822520 1,8280 254,3 37065083 19782094 1,8737 261,0 35035843 19056786 1,8385 255,9 47167257 13466023 3,5027 500,6 42132408 12038272 3,4999 500,2 39327562 11639169 3,3789 482,4 191131565 15936153 11,9936 1749,3 247235388 21122662 11,7047 1706,8 235883788 21016964 11,2235 1636,0 H (%) 95 96 Từ kết thu ta nhận thấy, với mức độ tin cậy 95% phương pháp có độ thu hồi tốt Do đó, kết phân tích hồn tồn tin cậy 3.3.5 Quy trình giám định m-TFMPP thiết bị GC-MS: Trên sở điều kiện tối ưu khảo sát, kết phân tích cho thấy phương pháp có độ lặp lại tốt, độ xác cao, đáp ứng yêu cầu phân tích định tính định lượng Do vậy, chúng tơi đưa quy trình giám định định tính định lượng m-TFMPP mẫu viên nén thiết bị GC-MS sau: - 38 - Xử Lý mẫu: mẫu viên nén xử lý theo sơ đồ hình 3.3.5 Viên nén m-TFMPP Bước 1: Đồng hoá mẫu Nghiền thành bột, trộn Bột viên Bước 2: Hoà tan mẫu Thêm HCl loãng 0,1M (1mg bột/1ml) Lắc siêu âm 30phút Lọc bỏ phần không tan Dịch lọc Bước 3: Kiềm hóa dịch lọc Thêm NaOH 25% ( pH > 12) Thêm Docosan (1mg/1ml) (tỷ lệ thể tích Docosan với Dịch lọc 1: 10 ) Dịch lọc kiềm Bước 4: Chiết xuất Thêm Cloroform (tỷ lệ thể tích 1:1) Lắc xoáy 30 phút, để phân lớp phút Ly tâm phút 3000 vòng/phút Hút lấy pha dung mơi, lấy 1ml Phân tích thiết bị GC-MS điều kiện tối ưu Hình 3.3.5 Sơ đồ quy trình chiết m-TFMPP mẫu viên nén - 39 - Nhận dạng thiết bị: - Điều kiện tối ưu GC-MS Loại khối phổ sử dụng: Tứ cực Cột Rtx-5MS (30m x 0,25mm x 0,25µm) Chế độ chạy EI + (Electron Impact) Kiểu va chạm điện tử điện 70 ev Chế độ MS: full Scan Khoảng m/z: 40-500 Chế độ MS: SIM ( m/z: 43, 44, 57, 58, 72, 91, 134, 135, 142, 180, 182, 188, 230) Điều kiện GC: Khí mang heli, tốc độ dịng 1,2 ml/phút Lị sắc kí: 80oC giữ 0,5 phút, tăng 20oC/ phút đến 170oC, giữ phút, tăng 15oC/phút đến 270oC giữ đẳng nhiệt phút Tổng chương trình sắc kí 15,7 phút Điều kiện MS: nhiệt độ Transferline: 2800 Các mảnh ion TFMPP : 230 (M+), 189, 188, 173, 172, 145, , 85, 57, 56 Ion target: 188, 145, 230 Các mảnh Docosan ( C22H46 ) : 310(M+),176, 134, 91, 85, 71, 57, 43 Ion target: 57, 71, 85, 43, 310 - Đọc kết phân tích Việc xây dựng tính kết thực dựa phần mềm (Xcalibul ) thiết bị - 40 - 3.4 Ứng dụng: Các mẫu viên nén chứa thành phần m-TFMPP chuẩn bị phân tích sơ đồ hình 3.3.5 Kết thu bảng 3.4 sau đây: Bảng 3.4 Kết định lƣợng GC-MS số mẫu thực tế Đặc điểm, logo Hình ảnh viên Số vụ án, khối lượng TB viên (mg) STFMPP/SIS mTFMPP viên (mg), Phần trăm % 19829666 11668518 1,6994 235,4 79 % STFMPP SIS Chữ C màu hồng 2549 298 mg Mào gà màu vàng 1955 M1 303 mg 8934149 12466023 0,7167 90,9 30 % Đầu chuột màu trắng 1955 M2 297 mg 7264616 12038272 0,6035 74,3 25 % Hai trái tim lồng, màu hồng 2287 306 mg 17615929 11639169 1,5135 208,1 68 % Hai trái tim lồng, màu đỏ 132 292 mg 13933738 14942154 0,9325 122,6 42 % Chữ M màu hồng 2008 335 mg 23418766 12959595 1,8071 251,3 75 % Không logo màu hồng 2008 306 mg 20003079 11982484 1,6694 231,0 75 % - 41 - 3.5 Dẫn xuất hóa m-TFMPP: 3.5.1 Nguyên tắc dẫn xuất hóa m-TFMPP: m-TFMPP hợp chất dị vòng Trong vòng phân tử m-TFMPP có chứa hai nguyên tử N Do vậy, sắc kí đồ quan sát thấy chân pic ln ln bị kéo vết Điều gây khó khăn việc định tính định lượng mTFMPP Trên sở đó, nhiều tác giả nghiên cứu đến việc dẫn xuất hóa mTFMPP để tăng độ nhạy việc định tính định lượng m-TFMPP [9, 11, 22] Phản ứng dẫn xuất hóa xảy theo chế nguyên tử hydro linh động m-TFMPP với nhóm trifluoro acetic axit để tạo thành chất dẫn xuất m-TFMPP-TFA theo phương trình phản ứng sau: Sơ đồ phân mảnh m-TFMPP-TFA sau: - 42 - Hình 3.5.1 Sơ đồ phân mảnh TFMPP-TFA 3.5.2 Định tính lƣợng vết m-TFMPP: Đối với công tác giám định, để phục vụ cho điều tra, việc phân tích định tính định lượng chất ma túy quan trọng Nếu phân tích định lượng để định khung hình phạt phân tích định đính để tìm dấu vết phục vụ cho điều tra phá án Do đó, bên cạnh việc định tính, định lượng mTFMPP, chúng tơi bước đầu nghiên cứu định tính lượng vết m-TFMPP - 43 - Tiến hành thí nghiệm sau: Lấy vào ống nghiệm 1ml m-TFMPP 100 ppb, thổi khơ dịng khí N2, thêm 200μl Etylacetat Lắc xốy phút với tốc độ 1500 vịng/phút, thêm 200μl dung dịch TFA lắc xoáy phút với tốc độ 1500 vịng/phút Việc chuyển hóa thực 700C thời gian dụng cụ gia nhiệt Hỗn hợp sau phản ứng sấy dịng khí N2 đến khơ, thêm 1ml Etylacetat, lắc xốy phút, sau phân tích GC-MS điều kiện tối ưu khảo sát Kết sau [13,20] Hình 3.5.2.1 Sắc kí đồ m-TFMPP chƣa dẫn xuất Thời gian lƣu m- TFMPP 6,12 phút, - 44 - Hình 3.5.2.2 Phổ khối m-TFMPP chƣa dẫn xuất Hình 3.5.2.3 Sắc kí đồ m-TFMPP dẫn xuất hóa thành m-TFMPP-TFA Thời gian lƣu m- TFMPP-TFA 7,68 phút - 45 - Hình 3.5.2.4 Phổ khối m-TFMPP dẫn xuất hóa thành m-TFMPP-TFA Kết phân tích cho thấy: Thí nghiệm dẫn xuất hóa thành cơng Chúng tơi chuyển lượng m-TFMPP thành m-TFMPP-TFA Trên sắc kí đồ cho pic rõ nét, chân pic không kéo vết chưa dẫn xuất Do vậy, việc gắn nhóm cấu trúc vào phân tử m-TFMPP thành công tạo tiền đề để tăng độ nhạy, độ xác phân tích định tính, định lượng mTFMPP sau 3.5.3 Độ nhạy phƣơng pháp sau dẫn xuất hóa: Lấy vào ống nghiệm 1ml m-TFMPP 10 ppb, 100µl Docosan 1mg/ml, thổi khơ dịng khí N2, thêm 200μl Etylacetat Lắc xốy phút với tốc độ 1500 vịng/phút, thêm 200μl dung dịch TFA lắc xoáy phút với tốc độ 1500 vòng/phút Giữ nhiệt 700C thời gian dụng cụ gia nhiệt Hỗn hợp sau phản ứng sấy dịng khí N2 đến khơ, thêm 1ml Etylacetat, lắc đem phân tích GC-MS điều kiện tối ưu chọn Kết thể hình 3.5.3 sau - 46 - Hình 3.5.3 Sắc kí đồ, phổ khối m-TFMPP-TFA nồng độ 10ppb Như vậy, cách dẫn xuất hóa chúng tơi phát mTFMPP giới hạn phát phương pháp Điều có ý nghĩa lớn công tác điều tra, khám nghiệm trường - 47 - KẾT LUẬN Từ kết thực nghiệm nghiên cứu xây dựng quy trình giám định m-TFMPP phương pháp sắc kí khí khối phổ sau Đã tìm điều kiện tối ưu thiết bị GC-MS để định tính định lượng m-TFMPP: Loại khối phổ sử dụng: Tứ cực Cột Rtx-5MS (30m x 0,25mm x 0,25µm) Chế độ chạy EI + (Electron Impact) Kiểu va chạm điện tử điện 70 ev Chế độ MS: full Scan Khoảng m/z: 40-500 Chế độ MS: SIM( m/z: 56, 57, 72, 85, 91, 134, 135, 145, 176, 180, 182, 188, 230, 310) Điều kiện GC: Khí mang heli, tốc độ dịng 1,2 ml/phút Lị sắc kí: 80oC giữ 0,5 phút, tăng 20oC/ phút đến 170oC, giữ phút, tăng 15oC/phút đến 270oC giữ đẳng nhiệt phút Tổng chương trình sắc kí 15,7 phút Điều kiện MS: nhiệt độ Transferline: 2800 Các mảnh ion TFMPP: 230 (M+), 189, 188, 173, 172, 145, , 85, 57, 56, 42, 29 Ion target: 188, 145, 230 Các mảnh BZP: 176(M+), 134, 91, 85, 56 Ion target: 134, 176, 91 Các mảnh Docosan ( C22H46 ) : 310(M+),176, 134, 91, 85, 71, 57, 43 Ion target: 57, 71, 85, 43, 310 - Đọc kết phân tích Việc xây dựng tính kết thực dựa phần mềm (Xcalibul ) thiết bị - 48 - Tìm điều kiện tối ưu cho trình tách chiết m-TFMPP mẫu viên nén: Chiết m-TFMPP Cloroform với tỉ lệ chiết 1:1, hiệu suất chiết 98,1%, môi trường chiết xuất: kiềm mạnh (NaOH 25%) Định lượng m-TFMPP phương pháp đường chuẩn: Xây dựng phương trình hồi qui tuyến tính để xác định mTFMPP khoảng nồng độ 100 - 2000 ppb, xác định giới hạn phát giới hạn định lượng phương pháp với LOD = 22,3 ppb, LOQ = 74,4 ppb Đánh giá tính phù hợp phương pháp với RSD thời gian lưu RSD tỉ lệ diện tích pic so với nội chuẩn điểm đầu điểm cuối đường chuẩn nhỏ ( 95%) Ứng dụng qui trình để phân tích định tính định lượng mTFMPP số vụ án có chứa m-TFMPP Việt Nam Mẫu viên nén chứa thành phần m-TFMPP xuất Việt Nam với nhiều logo, hình dạng, màu sắc khác nhau, hàm lượng m-TFMPP có mẫu viên dao động khoảng 25-79% tùy sở sản xuất Bước đầu dẫn xuất hóa m-TFMPP TFA để phân tích định tính lượng vết m-TFMPP phát m-TFMPP giới hạn phát phương pháp (10 ppb) - 49 - TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt: Nguyễn Xuân Yêm, Trần Văn Luyện, Hiểm họa ma túy chiến mới, NXB Công an nhân dân, năm 2002 Nghị định phủ số 17/2011/ND-CP, ngày 22 tháng 02 năm 2011, bổ sung danh mục chất ma túy tiền chất Nguyễn Văn Ri, Các phƣơng pháp tách, Khoa Hóa học - Trường Đại học khoa học Tự nhiên - ĐHQG Hà Nội, năm 2009 Tiếng Anh: Balmelli, C., Kupferschmidt, H., Rentsch, K And schneemann, M.: Fatalbrain edema after ingestion of ecstasy and benzylpiperazine Dtsch Med Wochenschr.,126, 809-811 (2001) Baumann, M H, R D Clark, A G Budzynski, J S Partilla, B E Blough, and R B Rothman (2004), “Effects of , Legal X ( piperazine analogues on dopamine and serotonin release in rat brain)”, Ann N Y Acad Sci 1025: 189-197 Berger M Trifluoromethylphenylpiperazine (TFMPP): An Entheogenic Entactogen Retrieved October 24, 2006 Baumann, M.H., Clark, R.D., Budzynski, A.G., Partilla, J.S., Blough, B.E., & Rothman, R.B (2005) N-substituted piperazines abused by humans mimic the molecular mechanism of 3,4methylenedioxymethamphetamine (MDMA, or „Ecstasy‟) Neuropsychopharmacology, 30, 550 – 560 Brennan, K., Johnstone, A., Fitzmaurice, P., Lea, R., & Schenk, S (2006) Chronic Benzylpiperazine (BZP) exposure produces behavioural sensitization and cross-sensitization to methamphetamine (MA) Drug and Alcohol Dependence, 88 (2-3), 204 – 213 Brown J.B, Schedules of controlled substances: temporary placement of benzylpiperazine and trifluoromethylphenylpiperazine into Schedule I, Fed Register 67, (2002) 59161–59162 - 50 - 10 Blau K and Halket J Handbook of Derivatives for Chromatography (2nd ed.) John Wiley & Sons, New York, 1993 11 Cunningham, K.A and Appel, J.B Possible (5-HT1) receptor involvement in the stimulus properties of of 1-(3Trifluoromethylphenyl)Piperazine” J.Pharmacol Exp ther.,237,369377(1986) 12 Caccia, S., I Conti and A Notarnicola (1985): “In-vivo metabolism in the rat and mouse of antrafenine to 1-mtrifluoromethylphenylpiperazine,” J Pharmacy Pharmacol 37: 75-77 13 Chal mers., (2007, February 3) Dangerous taste for that party buzz The Dominion Post, p A17 14 De Boer D, Bosman I, Hidvegi E, et al Piperazine-like compounds: a new group of designer drugs-of-abuse on the European market Forensic Science International; 2001, 121: 47-56 15 Elliott, S, and C Smith (2008), “Investigation of the first deaths in the United Kingdom involving the detection and quantitation of the piperazines BZP and 3-TFMPP”, J Analyt Tox 32: 172-177 16 Folker Westphal a,*, Thomas Junge a, Ulrich Girreser b, Stefan Stobbe c, Sylvia Brunet Pe´ rez c, (2009), “Structure elucidation of a new designer benzylpiperazine: 4-Bromo-2,5-dimethoxybenzylpiperazine”, Forensic Science International 187, 87-96 17 Fantegrossi, W.E., Winger, G., Woods, J.H., Woolverton, W.L., & Coop, A (2005) Reinforcing and discriminative stimulus effects of 1benzypiperazine and trifluoromethylphenylpiperazine in rhesus monkeys Drug and Alcohol Dependence, 77, 161 – 168 18 Glennon, R A.; Pierson, M E.; McKenney, J D Stimulus generaiization of l-(3-trifluoromethylphenyl)piperazine (TFMPP) to propranolol, pindolol and mesulergine Pharmacol Biochem Behav 29:197-199; 1988 19 Gee, P & Fountain, J (2007) Party on? BZP party pills in New Zealand The New Zealand Medical Journal, 120(1249).249 - 51 - 20 Herndon, J.L, Pierson, M E And Glennon, R.A (1992), “Mechanistic Investigation of the Stimulus Properties of 1-(3Trifluoromethylphenyl)Piperazine”, Vol 43, pp 739-748 21 Imogen Thompson, Glen Williams, Sarah Aldington, Mathew Williams, Brent Caldwell, Stuart Dickson, Natasha Lucas, John MacDowall, Mark Weatherall, Anita Frew Geoff Robinson, Richard Beasl, “The benzylpiperazine (BZP) / trifluoromethylphenylpiperazine (TFMPP) and alcohol safety study”, report for the ministry of health, November 24, 2006 22 Inoue H, Iwata Y-T, Kanamori T, Miyaguchi H, Tsujikawa K, Kuwayama K, Tsutsumi H, Katagi M, Tsuchihashi H, Kiski T (2004) ,“Analysis of benzylpiperazine-like compounds”, 9(2):165-184 23 Johnstone, A.C., Lea, R.A., Brennan, K.A., Schenk, S., Kennedy, M.A., & Fitzmaurice, P.S (2007) Benzylpiperazine: a drug of abuse? Journal of Psychopharmacology, 21(8), 888 – 894 24 Maher, H.M., Awad, T, Clark C.R , Differentiation of the regioisomeric 2, 3, and 4-trifluoromethylphenylpiperazines (TFMPP) by GC-IRD and GC–MS, Forensic Sci.Int 188 (2009) 31–39 25 Measham, F & Shiner, M (2009) The legacy of „normalisation‟: The role of classical and contemporary criminological theory in understanding young people‟s drug use International Journal of Drug Policy, in press Ministerial Committee on Drug Policy, (2007) National Drug Policy 2007 – 2012 26 Peters, F.T , Schaefer, S , Staack, R.F , Kraemer, T., Maurer, H.H , Screening for and validated quantification of amphetamines as well as of amphetamine- and piperazine-derived designer drugs in human blood plasma by gas chromatography/mass spectrometry, J Mass Spectrom, 38 (2003) 659–676 - 52 - ... Phương pháp sắc kí khí khối phổ (GC-MS): - 15 1 .3 Gi? ?m định m- TFMPP: - 17 1 .3. 1 Nguyên tắc gi? ?m định ma túy: - 17 1 .3. 2 Tình hình gi? ?m định m- TFMPP Việt Nam: -... tích định tính định lượng m- TFMPP như: Phản ứng m? ?u, sắc ký lớp m? ??ng (TLC), quang phổ hồng ngoại (FTIR), sắc ký khí, sắc kí khí khối phổ (GC-FID, GC-MS), sắc ký lỏng khối phổ (LC/MS) [32 ,37 ,38 ]... lượng m- TFMPP sắc kí khí khối phổ Định lượng m- TFMPP phương pháp sắc kí khí khối phổ dựa vào việc lựa chọn số m? ??nh phổ đặc trưng (56, 145, 188, 230 ) Thông qua tỷ lệ chiều cao m? ??nh đặc trưng m- TFMPP