Bài thuyết trình nhóm màng tái tổ hợp PLLA bmattacin2 từ peptide kháng khuẩn của tằm và poly l lactic acid (PLLA) cho ứng dụng y sinh học

ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA SINH HỌC – CÔNG NGHỆ SINH HỌC Màng tái tổ hợp PLLA/Bmattacin2 từ peptide kháng khuẩn tằm Poly L- lactic acid (PLLA) cho ứng dụng y sinh học GVHD: PGS.TS Trần Lê Bảo Hà Nhóm 10 Thành viên: Mai Thị Thùy Duyên 1318051 Văn Mỹ Lan 1318177 Trần Thị Ngọc 1318251 NỘI DUNG I ĐẶT VẤN ĐỀ II MÀNG PLLA III BMATTACIN2 IV MÀNG PLLA/BMATTACIN2 V KẾT LUẬN I ĐẶT VẤN ĐỀ Thiết kế vật liệu có chức chống oxy hóa, chống viêm, kháng khuẩn chống ung thư cách bổ sung: → Hạt nano bạc: tăng nồng độ → hoạt tính kháng khuẩn tăng lại tăng khả gây độc tế bào + Mohiti-Asli, M et al + Jin, G et al → Một số loại thuốc 5-fluorouracil (5-FU): điều trị ung thư lại gây hại đến tế bào bình thường Thiết kế vật liệu kháng khuẩn, chống ung thư cao, gây độc thấp Màng PLLA/Bmattacin2 T UẤ X ĐỀ II MÀNG PLLA Polymer nhiệt dẻo, bán Poly L - lactic acid tinh thể, giòn rắn Ứng dụng màng Có khả phân hủy sinh bao thực phẩm, dẫn học truyền thuốc, vật liệu y sinh… Tương thích sinh học III BMATTACIN2 - Là peptide kháng khuẩn tạo dòng từ gen attacin2 cecropinB1 tằm + Peptide kháng khuẩn (AMP) nhóm peptide có khả tiêu diệt vi sinh vật xâm nhập hệ thống miễn dịch bẩm sinh hầu hết sinh vật + AMPs mang đặc điểm chung có điện tích cation bề mặt có vùng ưa nước vùng kỵ nước tạo thành màng lưỡng cực (phân cực) + AMPs thường có ổn định nhiệt kháng sinh phổ rộng - Khả nhắm mục tiêu tế bào ung thư Khả kháng khuẩn III BMATTACIN2 ĐẶC TÍNH: a Khả Bmattacin2 nhắm mục tiêu tế bào ung thư • Đối tượng: Tế bào ung thư (tế bào hắc tố ác tính A375 tế bào ung thư đại trực tràng HCT116 người) Tế bào đối ứng bình thường (nguyên bào sợi da bao quy đầu người HFF-1 tế bào ruột kết thai nhi FHC) a Khả Bmattacin2 nhắm mục tiêu tế bào ung thư Kết quả: mM Bmattacin2 sau 24 ủ • Kết luận Bmattacin2 giết chọn lọc tế bào ung thư A375 HCT116 mà trì tế bào đối ứng bình thường III BMATTACIN2 ĐẶC TÍNH: b Khả kháng khuẩn Bmattacin2 • Đối tượng: S maicesceis B Bombysepticus ( loại vi khuẩn thường tìm thấy tằm nhiễm) E coli ATCC25922, E coli DH5α S aureus ATCC25923 (ba chủng vi khuẩn phổ biến phòng thí nghiệm) b Tác dụng kháng khuẩn Bmattacin2 Kết quả: KẾT LUẬN: Bmattacin2 có phổ kháng khuẩn rộng, với lượng khác Bmattacin2 ức chế tiêu diệt vi khuẩn gram âm gram dương Thí nghiệm so sánh tác động Bmattacin2 Ủ với Bmattacin2 30’ Đối tượng: +E Coli + S aureus +HCT116 +FHC +A375 +HFF-1 CƠ CHẾ BMATTACIN2: Bám lên màng tế bào vi khuẩn Peptide kháng khuẩn chèn vào lớp màng lipid kép, hình thành kênh vận chuyển tự dẫn đến làm dung giải màng tế bào vi khuẩn Khi xâm nhập vào tế bào, kết hợp với thành phần quan trọng tế bào, kích hoạt giải phóng enzyme tự phân giải, ức chế tổng hợp DNA, RNA, Sự tác động chọn lọc peptide kháng khuẩn Bmattacin2 • Các yếu tố liên quan đến tác động chọn lọc : + Điện tích màng + Cholesterol làm giảm hoạt động peptide kháng khuẩn + Tế bào vi khuẩn dễ bị nhân tố lạ xuyên màng => Các peptide kháng khuẩn ưu tiên tương tác với vi khuẩn với tế bào động vật, nhờ chúng tiêu diệt vi sinh vật mà không gây độc đáng kể đến tế bào chủ IV MÀNG PLLA/BMATTACIN2 ĐẶC TÍNH PHƯƠNG PHÁP TẠO MÀNG ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2 a Hoạt động chống ung thư màng PLLA/Bmattacin2 • Khả di động HCT116 sau gieo hạt màng phức hợp chế tạo giờ, ngày ngày 1 ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2 a Hoạt động chống ung thư màng PLLA/Bmattacin2 - Tế bào quan sát: HCT116 -Cấy bề mặt màng phức hợp chế tạo -Thời gian: ngày -Kết quả: +(b1-b4) nhuộm tế bào sống/chết + (b5-b8) nhuộm huỳnh quang tế bào DAPI/FITC +(b9-b16) SEM quan sát ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2 b Hiệu lực kháng khuẩn màng PLLA/Bmattacin2 Tính kháng khuẩn: Khảo sát đặc tính khác khuẩn màng PLLA/Bmattacin2 + Đối tượng: E coli and S aureus + Đối chứng âm: màng PLLA ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2 b Hiệu lực kháng khuẩn màng PLLA/Bmattacin2 Nhuộm vi khuẩn SYTO propidium iodide + vi khuẩn sống (xanh) +vi khuẩn chết (màu đỏ) => tác dụng kháng khuẩn PLLA/Bmattacin2 1 ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2 c Khả tương thích màng PLLA/Bmattacin2 IV MÀNG PLLA/BMATTACIN2 PHƯƠNG PHÁP TẠO MÀNG: bước - Tạo dòng Chuẩn bị dung dịch PLLA/Bmattcin2 Phương pháp quay điện hóa (electrospinning) để tạo màng PLLA/Bmattacin2 V KẾT LUẬN - Màng PLLA / Bmattacin2 vật liệu có tính tương thích sinh học cao, có khả kháng khuẩn, chống tế bào ung thư mà không gây ảnh hưởng đến tế bào bình thường - Với đặc điểm này, màng nano PLLA / Bmattacin2 loại vật liệu hứa hẹn, có tiềm lớn cho ứng dụng y sinh học việc tái tạo da, điều trị ung thư, chữa lành vết thương