VI KHUẨN HAEMOPHILUS INFLUENZAE

VI KHUẨN HAEMOPHILUS INFLUENZAE Mã bài: XN2 18.26 Thời lượng: LT: 1tiết TH:0 GIỚI THIỆU: Haemophilus influenzae Richard Pfeiffer phân lập từ bệnh nhân bị chết vụ dịch cúm lớn năm 1892 từ người ta cho vi khuẩn nguyên gây bệnh cúm (influenzae) đặt tên Bacterium influenzae Năm 1917, sở hiểu biết vi khuẩn này, Winslow cộng chuyển chúng sang giống Haemophilus, từ đến chúng mang tên Haemophilus influenzae (Haemo: máu, Philus: ưa, thích) MỤC TIÊU: Sau học xong này, học sinh có khả năng: Trình bày đặc điểm sinh vật học khả gây bệnh Haemophilus influenzae Nêu phương pháp chẩn đoán vi khuẩn học Haemophilus influenzae NỘI DUNG Đặc điểm sinh vật học 1.1 Hình thể tính chất bắt màu H influenzae vi khuẩn đa hình thái, trực khuẩn cầu khuẩn, kích thước 0,3µm x 0,5 -3µm Không có lông, không di động, có vỏ, không sinh nha bào, nhuộm bắt màu gram âm 1.2 Tính chất nuôi cấy Vi khuẩn hiếu khí, phát triển môi trường có yếu tố X V Yếu tố X bao gồm chất màu chứa sắt Hemin, Hematin Yếu tố có môi trường thạch máu H influenzae dùng yếu tố X để tổng hợp số men catalase, peroxidase Yếu tố V NAD (nicotinamid adenin dinucleotid) nằm tế bào máu Ở môi trường thạch sôcôla, NAD giải phóng Vì phải nuôi cấy H influenzae môi trường sôcôla khí trường có 3-5% CO 2, khuẩn lạc khoảng 1mm, dẹt, không màu Những chủng có vỏ khuẩn lạc nhầy, màu xám nhạt Trên môi trường thạch máu vi khuẩn có mọc khuẩn lạc nhỏ không tan máu Có thể gặp khuẩn lạc H influenzae xung quanh khuẩn lạc bội nhiễm tụ cầu to vùng xa khuẩn lạc khuẩn lạc bé Đó tượng vi khuẩn bội nhiễm tiết yếu tố V nên H influenzae phát triển mạnh Trên môi trường thạch socola khuẩn lạc đục nhẹ, dẹt, đường kính khoảng 1mm Trên môi trường lỏng, vi khuẩn làm đục môi trường, lắc có gợn sợi 1.3 Tính chất sinh vật hoá học - Lên men đường glucose - Catalase (+) Dựa vào khả sinh indol, men urease men ornithindecarboxylase để phân H influenzae thành typ sinh học: Tính chất Typ I II III IV V VI VII VIII Indol + + + + - Urease + + + + - Ornithindecarboxylase + + + + - 1.4 Cấu trúc kháng nguyên H influenzae có kháng nguyên vỏ có chất polysaccharid có tính đặc hiệu typ Dựa vào kháng nguyên vỏ chia H influenzae typ huyết thanh: a, b, c, d, e, f typ b gây bệnh cho người đặc biệt gây viêm màng não trẻ em Vỏ có vai trò quan trọng giúp vi khuẩn chống lại tượng thực bào Vỏ typ b dùng để sản xuất vaccin 1.5 Sức đề kháng H influenzae có sức đề kháng yếu, chúng dễ bị tiêu diệt chất sát khuẩn thông thường Ra khỏi thể vi khuẩn chết nhanh đặc biệt để tiếp xúc với ánh sáng mặt trời điều kiện khô lạnh Khả gây bệnh H influenzae phế cầu hai vi khuẩn hàng đầu gây nhiễm khuẩn đường hô hấp trẻ em tuổi H influenzae ký sinh bắt buộc đường hô hấp người, gặp nhiều trẻ em, khoảng 75% trẻ có mang vi khuẩn mũi họng không gây bệnh Bệnh H.influenzae thường gây bệnh thứ phát sau bệnh cúm, sởi, thường gặp nhiều trẻ tháng - tuổi Vi khuẩn gây nhiễm khuẩn đường hô hấp trên, viêm họng, viêm mũi, viêm xoang, viêm tai đặc biệt gây viêm phổi viêm màng phổi Vi khuẩn xâm nhập vào máu đến màng não gây viêm màng não H influenzae tác nhân hay gặp gây viêm màng não trẻ tháng – tuổi, gặp trẻ tuổi.Viêm màng não trẻ nhỏ H influenzae thường nặng cần chẩn đoán sớm điều trị kịp thời Ngoài ra, H influenzae gây viêm màng tim, viêm niệu đạo, nhiễm trùng sinh dục gặp Chẩn đoán vi khuẩn học 3.1 Nhuộm soi Trường hợp chẩn đoán viêm màng não, lấy dịch não tuỷ ly tâm lấy cặn nhuộm gram thấy trực khuẩn gram âm đa hình, thái to nhỏ không đều, bắt màu mờ nhạt vi trường có nhiều bạch cầu đa nhân, ý nghĩa xác định chẩn đoán 3.2 Nuôi cấy - Bệnh phẩm máu cấy vào môi trường canh thang máu glucose - Bệnh phẩm dịch khoang kín (dịch não tuỷ, dịch màng phổi) cấy vào môi trường sôcôla thường - Bệnh phẩm đờm, mủ, chất ngoáy họng, dịch có nhiễm vi khuẩn khác nuôi cấy vào môi trường thạch sôcôla có bacitracin (300µg/1ml) để ức chế tạp khuẩn Các môi trường để tủ ấm 35-37 0C khí trường 3-5% CO2 Sau 18-24 nhuộm soi khuẩn lạc xác định tính chất sinh vật hoá học, tiến hành thử nghiệm X, V định typ vi khuẩn Đồng thời cấy bệnh phẩm vào môi trường thạch máu để xác định vi khuẩn gây bệnh khác 3.3 Thử nghệm X V Lấy khuẩn lạc từ môi trường sôcôla hoà vào canh thang pepton, ria cấy mặt môi trường thạch thường, để tủ ấm 37 0C sau 15-30 phút cho khô mặt thạch Đặt khoanh giấy X V cách 2cm khoanh giấy XV, để tủ ấm 370C Sau 18-24 giờ, H influenzae mọc khoanh giấy X V xung quanh khoanh giấy XV Nếu đủ khoanh giấy X V dùng tụ cầu tiến hành kỹ thuật " vệ tinh" tụ cầu vàng có khả tổng hợp yếu tố V, yếu tố khuếch tán môi trường thạch máu giúp cho H influenzae phát triển 3.4 Tìm kháng nguyên vỏ typ b bệnh phẩm Để chẩn đoán nhanh nhiễm trùng H influenzae typ b gây ra, ngày dùng kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang, ngưng kết thụ động, đồng ngưng kết… để phát kháng nguyên typ b dịch não tuỷ, máu, nước tiểu Phòng bệnh điều trị 4.1 Phòng bệnh - Phòng đặc hiệu: Vaccin tinh chế từ vỏ polysaccharid H influenzae typ b Đáp ứng miễn dịch vaccin tốt trẻ tuổi với trẻ tuổi Vì ngày người ta gắn kháng nguyên vào protein mang tạo nên hỗn hợp protein mang hoạt động tá chất nên tính sinh miễn dịch tốt - Phòng không đặc hiệu: Trường hợp bệnh nhân viêm màng não H influenzae phải cách ly, dùng kháng sinh dự phòng cho người tiếp xúc với bệnh nhân 4.2 Điều trị Ampicilin, cloramphenicol, cotrimoxazol thường dùng để điều trị có nhiều chủng H influenzae kháng lại thuốc nên tốt điều trị theo kháng sinh đồ Loại kháng sinh tác dụng tốt với H influenzae cephalosposin hệ 2,3 cefotaxim, ceftriaxon LƯỢNG GIÁ Trả lời ngắn câu sau: - Môi trường nuôi cấy H influenzae phải có yếu tố: A……………………………… B………………………………… - Nêu phương pháp chẩn đoán trực tiếp vi khuẩn H influenzae: A………………………………B…………………………………… C……………………………….D…………………………………… - Môi trường dùng để phân lập H influenzae từ đờm ……………………… - Môi trường phân lập H influenzae từ bệnh phẩm máu là…………………… - H influenzae có……………… typ sinh học - H influenzae có ……….typ huyết Trả lời sai câu sau: TT Nội dung Đ S - Thử nghiêm X V tiến hành môi trường thạch máu Bacitracin kháng sinh để ức chế tạp khuẩn môi trường sôcôla có bacitracin H influenzae có hình thể dễ thay đổi, bắt màu gram âm Thử nghiệm " vệ tinh" tiến hành môi trường thạch thường Trên môi trường thạch thường, H influenzae mọc xung quanh khoanh giấy XV