Nghiên cứu phân loại nấm men moniliella phân lập tại việt nam

Luận văn thạc sĩ K20 – Vi sinh vật học Đinh Đức Hiền Luận văn thạc sĩ `Lời cảm ơn Lời cảm ơn K20 – Vi sinh vật học Đinh Đức Hiền Luận văn thạc sĩ Lời cảm ơn Lời em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Vũ Nguyên Thành PGS TS Bùi Thị Việt Hà - người thầy tận tình hướng dẫn, bảo, tạo điều kiện giúp em thực luận văn Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới tập thể cán Trung tâm Vi sinh vật Công nghiệp - Viện Công nghiệp Thực phẩm giúp đỡ, tạo điều kiện, hỗ trợ kỹ thuật, chia sẻ tài liệu kinh nghiệm nghiên cứu Qua đây, em xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên tận tình truyền đạt kiến thức cho em suốt thời gian sinh viên học viên cao học Cuối cùng, em xin dành lời cảm ơn chân thành đến gia đình, người thân bạn bè người động viên, khích lệ em đường học tập, nghiên cứu khoa học Hà Nội, ngày 25 tháng 11 năm 2014 Học viên Đinh Đức Hiền K20 – Vi sinh vật học Đinh Đức Hiền Luận văn thạc sĩ DANH MỤC HÌNH Hình Hình thái tế bào đặc trƣng Phaeococcus catenatus CBS 650 76 Hình Hình ảnh tế bào Exophiala salmonis CBS 157.67 Hình Hình ảnh tế bào Aureobasidium pullulans Hình Hình ảnh tế bào Moniliella suaveolens CBS 120.63 (trái) Moniliella acetoabuten CBS 169.66 (phải) Hình Cây phả hệ mô tả mối quan hệ loài thuộc chi Moniliella Hình Hình ảnh tế bào Geotrichum candidum (trái) Trichosporon beigelii (phải) Hình Hình ảnh điện di sản phẩm PCR sử dụng mồi đặc hiệu phát Candida albicans Candida dubliniensis Hình Một số mẫu hoa phân lập đƣợc Moniliella Hình Vị trí địa điểm thu thập mẫu phân lập Moniliella Việt Nam Hình 10 Hình ảnh khuẩn lạc tế bào số chủng nấm men Moniliella phân lập đƣợc Hình 11 Phổ fingerprinting 126 chủng Moniliella phân lập đƣợc Hình 12 Vị trí chủng đại diện phân lập đƣợc thuộc chi Moniliella Hình 13 Phổ PCR fingerprinting với mồi (GAC)5 chủng Moniliella carnis Moniliella dehoogii Hình 14 Phổ PCR fingerprinting với mồi (GAC)5 chủng Moniliella byzovii Hình 15 Tế bào sinh dƣỡng Moniliella carnis (KFP 246T) sinh trƣởng môi trƣờng YM 25C sau ngày (trái) môi trƣờng tinh bột ngô Dalmau agar sau ngày (phải) K20 – Vi sinh vật học Đinh Đức Hiền Luận văn thạc sĩ Hình 16 Tế bào sinh dƣỡng Moniliella dehoogii KFP 211T sinh trƣởng YM 25C sau ngày (trái) môi trƣờng Dalmau tinh bột ngô sau ngày (phải) Hình 17 Tế bào sinh dƣỡng chủng TBY 2041.7T sinh trƣởng môi trƣờng Dalmau tinh bột ngô sau ngày Hình 18 Sự hình thành Chlamydospore chủng TBY 2041.7T sinh trƣởng môi trƣờng Yeast Cacbon Base agar nguồn nito Hình 19 Hình thái khuẩn lạc Moniliella byzovii TBY 2041.7T (trái) TBY 2041.8 (phải) môi trƣờng Malt-Glucoseagar sau 45 ngày nuôi cấy 28C Hình 20 Hình thái khuẩn lạc M dehoogii KFP 211T TBY 2041.5 môi trƣờng Malt glucose 2°Bx sau 10 ngày nuôi cấy 28°C K20 – Vi sinh vật học Đinh Đức Hiền Luận văn thạc sĩ DANH MỤC BẢNG Bảng So sánh đặc điểm chi Moniliella số chi khác Bảng Phƣơng pháp trộn lẫn tế bào chủng loài để phát pha sinh sản hữu tính Bảng Các chủng nấm men đen Moniliella phân lập đƣợc Bảng Ký hiệu chủng PCR fingerprinting Bảng Kết phân nhóm chủng fingerprinting Bảng Danh sách chủng Moniliella mô tả loài Bảng Danh sách chủng thuộc nhóm M byzovii Bảng Sự khác đặc tính quan trọng M carnis, M dehoogii, M byzovii loài biết thuộc chi Moniliella Bảng Phân lập Moniliella Việt Nam giới K20 – Vi sinh vật học Đinh Đức Hiền Luận văn thạc sĩ DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT CBS – Centraalbureau voor Schimmelcultures (Bảo tàng giống Vi sinh vật Hà Lan) h – hour (giờ) NRRL-Northern Regional Research Laboratory (hiện National Center For Agricultural Utilization Research) (Bảo tàng giống Bộ Nông nghiệp Hoa Kỳ) DGGE-Denaturing gradient gel electrophoresis rDNA-Ribosomal DNA rRNA-Ribosomal RNA PCR – Polymerase Chain Reaction (phản ứng trùng hợp chuỗi) RFLP-Restriction Fragment Length Polymorphism (đánh giá đa hình DNA theo phƣơng pháp cắt hạn chế) T – Type strain (chủng chuẩn) K20 – Vi sinh vật học Đinh Đức Hiền Luận văn thạc sĩ MỤC LỤC MỞ ĐẦU 10 CHƯƠNG 1- TỔNG QUAN ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 1.1 NHÓM NấM MEN ĐEN ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED Một số chi nấm men đen Error! Bookmark not defined 1.1.1 Chi Phaeococcomyces Error! Bookmark not defined 1.1.2 Chi Exophiala Error! Bookmark not defined 1.1.3 Chi Aureobasidium Error! Bookmark not defined 1.1.4 Chi Moniliella Error! Bookmark not defined 1.2 MộT Số PHƢƠNG PHÁP PHÂN LOạI NấM MEN ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 1.2.1 Các phương pháp phân loại truyền thống Error! Bookmark not defined 1.2.2 Các phương pháp hóa phân loại sinh học phân tử Error! Bookmark not defined 1.3 MộT Số PHƢƠNG PHÁP PHÁT HIệN VÀ ĐÁNH GIÁ ĐA DạNG VI SINH VậTERROR! BOOKMARK NOT DEF CHƯƠNG - ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨUERROR! BOOKMARK NOT DEFINE 2.1 ĐốI TƢợNG ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 2.2 HÓA CHấT, DụNG Cụ, TRANG THIếT Bị MÁY MÓC ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 2.2.1 Hóa chất Error! Bookmark not defined 2.2.2 Dụng cụ trang thiết bị, máy móc Error! Bookmark not defined 2.3 THÀNH PHầN MÔI TRƢờNG Sử DụNG TRONG NGHIÊN CứUERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 2.3.1 Môi trường làm giàu có nồng độ đường cao Error! Bookmark not defined 2.3.2 Môi trường Malt-Glucose 2Bx có axit lactic 1‰ Error! Bookmark not defined 2.3.3 Môi trường Malt-Glucose 2Bx axit lactic Error! Bookmark not defined 2.3.4 Môi trường thử khả chuyển hóa nguồn cacbon khác nhauError! Bookmark not def 2.3.5 Môi trường thử khả đồng hóa nguồn nitơ khác nhauError! Bookmark not defined 2.3.6 Thử khả sinh trưởng môi trường có nồng độ đường muối caoError! Bookmark 2.3.7 Môi trường xác định khả sinh trưởng điều kiện nhiệt độ khác 2.3.8 Môi trường thử khả hình thành tinh bột Error! Bookmark not defined 2.3.9 Môi trường đánh giá hoạt tính phân giải urea Error! Bookmark not defined 2.3.10 Môi trường đánh giá khả sinh trưởng có mặt CycloheximideError! Bookmark not 2.3.11 Môi trường đánh giá khả chống chịu acid acetic %Error! Bookmark not defined 2.4 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CứU ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 2.4.1 Phương pháp phân lập Error! Bookmark not defined 2.4.3 Quan sát hình thái khuẩn lạc, tế bào Error! Bookmark not defined 2.4.4 Phương pháp tách chiết DNA tế bào nấm men Error! Bookmark not defined 2.4.5 Phương pháp tinh chế DNA Error! Bookmark not defined 2.4.6 Phương pháp tiến hành phản ứng PCR fingerprintingError! Bookmark not defined 2.4.7 Phương pháp điện di Error! Bookmark not defined 2.4.8 Nhuộn gel đọc kết Error! Bookmark not defined K20 – Vi sinh vật học Đinh Đức Hiền Luận văn thạc sĩ 2.4.9 Phương pháp phân loại nấm men dựa vào đọc trình tự rDNAError! Bookmark not defined 2.4.10 Đánh giá khả sử dụng nguồn cacbon khác nhauError! Bookmark not defined 2.4.11 Đánh giá khả đồng hóa nguồn nito khác nhau.Error! Bookmark not defined 2.4.12 Đánh giá khả sinh trưởng môi trường có nồng độ đường nồng độ muối cao Error! Bookmark not defined 2.4.13 Đánh giá khả sinh trưởng điều kiện nhiệt độ khác nhauError! Bookmark not 2.4.14 Thử khả hình thành tinh bột Error! Bookmark not defined 2.4.15 Thử khả phân giải urea Error! Bookmark not defined 2.4.16 Thử khả chống chịu với cycloheximit Error! Bookmark not defined CHƯƠNG – KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 3.1 KếT QUả PHÂN LậP .ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 3.2 QUAN SÁT HÌNH THÁI KHUẩN LạC, Tế BÀO ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 3.3 PHÂN NHÓM BằNG Kỹ THUậT FINGERPRINTING ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 3.5 MÔ Tả CÁC NHÓM LOÀI MớI THUộC CHI MONILIELLA ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 3.5.1 Phân tích đặc tính di truyền loài Error! Bookmark not defined 3.5.2 Đặc tính kiểu hình, sinh lý, sinh hóa loài Error! Bookmark not defined 3.6 Sự ĐA DạNG MONILIELLA PHÂN LậP TạI VIệT NAM .ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED CÁC CÔNG TRÌNH LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED TÀI LIỆU THAM KHẢO 11 PHỤ LỤC K20 – Vi sinh vật học Đinh Đức Hiền Luận văn thạc sĩ MỞ ĐẦU Chi Moniliella đƣợc thiết lập bởi Stolk Dakin năm 1966 để xác lập vị trí phân loại cho loài tìm đƣợc Moniliella acetoabutens Moniliella tomentosa Năm 2009, vào tƣơng đồng định di truyền nhƣ số đặc tính sinh lý, sinh hóa quan trọng, Rosa cộng xếp chi khác Trichosporonoides vào Moniliella Nhƣ vậy, trƣớc nghiên cứu đƣợc thực hiện, chi Moniliella bao gồm loài, Moniliella acetoabutens, M fonsecae, M megachiliensis, M mellis, M nigrescens, M oedocephalis, M pollinis, M spathulata M suaveolens Phân loại Moniliella thực chƣa rõ ràng Trình tự gần Moniliella fonsecae Genbank Phylloporia pectinata, thành viên Agaricomycotina Với trình tự khác, Moniliella thuộc Ustilagionomycotina Hơn nữa, khác biệt mặt di truyền loài thuộc chi Moniliella lại lớn, tới 15-16% đoạn D1/D2 Do việc tìm kiếm loài trung gian loài biết góp phần làm sáng tỏ phân loại Moniliella Moniliella đƣợc sử dụng công nghiệp sản xuất erythriltol, loại đƣờng chức có giá trị thƣơng mại cao Gần đây, Trung tâm Vi sinh vật Công nghiệp, Viện Công nghiệp Thực phẩm phát số đặc tính công nghệ chƣa đƣợc biết tới Moniliella nhƣ khả chuyển hóa thầu dầu thành γ-declactone (tinh dầu đào) với độ tinh khiết cao, khả sinh lipase, khả sinh loại kháng sinh (zymocin) Các nội dung nghiên cứu luận văn đƣợc thực nhằm đánh giá đa dạng nấm men Moniliella Việt Nam, góp phần củng cố hệ thống phân loại chi tạo sở cho nghiên cứu công nghệ có sử dụng Moniliella, cụ thể nội dung nghiên cứu bao gồm: - Phân lập nấm men Moniliella từ nguồn mẫu khác địa điểm khác Việt Nam - Phân nhóm, phân loại Moniliella phân lập đƣợc hình thái; PCR fingerprinting; giải trình tự DNA; phân tích phả hệ - Phân tích đa dạng nấm men Moniliella phân lập Việt Nam số loài, phân bố K20 – Vi sinh vật học Đinh Đức Hiền Luận văn thạc sĩ TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty (2001), Vi sinh vật học, Nxb Giáo Dục Tiếng Anh Altschul, S F., Madden, T L., Schaffer, A A., Zhang, J., Zhang, Z., Miller, W & Lipman, D J (1997), “Gapped BLAST and PSI-BLAST: a new generation of protein database search programs”, Nucleic Acids Research, 25, pp 3389-3402 Begerow D, Stoll M, Bauer R.(2006), “A phylogenetic hypothesis of Ustilaginomycotina based on multiple gene analyses and morphological data”, Mycologia, 98: 906–916 Boekhout T, Fell JW, O’Donnell K (1995), “Molecular systematics of some yeast-like anamorphs belonging to the Ustilaginales and Tilletiales”, Studies in Mycology, 38: 175–183 De Hoog, G S., A H Gerritis van den Ende, J M Uijthof, and W A Untereiner (1995), “Nutritional physiology of type isolates of currently accepted species of Exophiala and Phaeococcomyces”, Antonie Van Leeuwenhoek, 68, pp 43-49 De Hoog, G S & Guého E (1984), “Deoxyribonucleic acid base composition and taxonomy of Moniliella and allied genera”, Antonie Leeuwenhoek, 50, pp 135-141 De Hoog, G S., J Guarro, J Gene, and M J Figueras (2000), Atlas of Clinical Fungi, 2nd ed, vol 1, Centraalbureau voor Schimmelcultures, Utrecht, The Netherlands De Hoog, G S., Smith, M T & Rosa, C A (2011), “Moniliella Stolk & Dakin (1966)”, The Yeasts, a Taxonomic Study, 5th edn, pp 1837-1846 Edited by C.P Kurtzman, J.W Fell, Teun Boekhout London: Elsevier K20 – Vi sinh vật học Đinh Đức Hiền Luận văn thạc sĩ De Hoog G.S (1999), Ecology and evolution of black yeast and their relative, the Royal NetherlDNAs Academy of Arts and Sciences 10 Edgar, R C (2004), “MUSCLE: multiple sequence alignment with high accuracy and high throughput”, Nucleic Acids Res, 32, pp 1792-1797 11 Esteve-Zarzoso, B., Belloch, C., Uruburu, F & Querol, A (1999), “Identification of yeasts by RFLP analysis of the 5.8S rRNA gene and the two ribosomal internal transcribed spacers”, Int J Syst Bacteriol, 49, pp 329-337 12 Felsenstein, J (1985), “Confidence limits on phylogenies: an approach using the bootstrap”, Evolution, 39, pp 783-791 13 Günther Laufenberg, Pietro Rosato, Benno Kunz (2004), “Adding value to vegetable waste: Oil press cakes as substrates for microbial decalactone production”, Eur J Lipid Sci Technol, 106: 207–217 14 Haase, G., L Sonntag, Y van de Peer, J M Uijthof, A Podbielski, and B Melzer-Kric (1995), “Phylogenetic analysis of ten black yeast species using nuclear small subunit rRNA gene sequences”, Antonie Van Leeuwenhoek, 68, pp 19-33 15 Inglis, G D., Sigler, L & Goettel, M S (1992), “Trichosporonoides megachiliensis, a new Hyphomycete associated with alfalfa leafcutter bees, with notes on Trichosporonoides and Moniliella”, Mycologia, 84, pp 555-570 16 Kimura, M (1980), “A simple method for estimating evolutionary rates of base substitutions through comparative studies of nucleotide sequences”, J Mol Evol, 16, pp 111-120 17 Kurtzman C P., Blanz P A (1998), “Ribosomal RNA/DNA sequence comparisons for assessing phylogentic relationships”, Elsevier Science Publishers, pp 69-74 18 Kurtzman C P., Jack W Fell, T Boekhout, (2011), The Yeasts: A Taxonomic Study, 5th, Elsevier K20 – Vi sinh vật học Đinh Đức Hiền Luận văn thạc sĩ 19 Kurtzman, C P & Robnett, C J (1998), “Identification and phylogeny of ascomycetous yeasts from analysis of nuclear large subunit (26S) ribosomal DNA partial sequences”, Antonie van Leeuwenhoek, 73, pp 331-371 20 Lachance, M A., Starmer, W T., Rosa, C A., Bowles, J M., Barker J S & Janzen, D H (2001), “Biogeography of the yeasts of ephemeral flowers and their insects”, FEMS Yeast Res, 1, pp 1-8 21 Martinez A T (1979), “Ultrastructure of Moniliella, Trichosporonoides and Hyalodendron”, Stud Mycol, 19, pp 50-57 22 Martínez A T., Hoog GS de, Smith M T (1979), “Physiological characteristics of Moniliella, Trichosporonoides and Hyalodendron”, Studies in Mycology, 19: 58–68 23 Perko, R & DeCock, P (2007), “Erythritol”, Sweeteners and Sugar Alternatives in Food Technology, pp 151-176 Edited by H Mitchell Oxford: Wiley-Blackwell 24 Rosa, C A., Jindamorakot, S., Limtong, S., Nakase, T., Lachance, M A., Fidalgo-Jiménez, A., Daniel, H M., Pagnocca, F C., Inácio, J & Morais, P B (2009), “Synonymy of the yeast genera Moniliella and Trichosporonoides and proposal of Moniliella fonsecae sp nov and five new species combinations”, Int J Syst Evol Microbiol, 59, pp 425-429 25 Saitou, N & Nei, M (1987), “The neighbor-joining method: a new method for reconstructing phylogenetic trees”, Mol Biol Evol, 4, pp 406-425 26 Sawada, K., Taki, A., Yamakawa, T & Seki, M (2009), “Key role for transketolase activity in erythritol production by Trichosporonoides megachiliensis SN-G42”, J Biosci Bioeng, 108, pp 385-390 27 Sipiczki, M (2012), “ Detection of yeast species also occurring in substrates associated with animals and identification of a novel dimorphic species in Verbascum flowers from Georgia”, Antonie van Leeuwenhoek, 103, pp 567–576 28 Stolk, A C & Dakin, J C (1966), “Moniliella, a new genus of Moniliales”, Antonie Leeuwenhoek, 32, pp 399-409 K20 – Vi sinh vật học Đinh Đức Hiền Luận văn thạc sĩ 29 Tamura, K., Peterson, D., Peterson, N., Stecher, G., Nei, M & Kumar, S (2011), “MEGA5: Molecular evolutionary genetics analysis using maximum likelihood, evolutionary distance, and maximum parsimony methods”, Mol Biol Evol, 28, pp 2731-2739 30 Thanh, V N., Hai, D A & Lachance, M A (2006), “Cryptococcus bestiolae and Cryptococcus dejecticola, two new yeast species isolated from frass of the litchi fruit borer Conopomorpha sinensis Bradley”, FEMS Yeast Res, 6, pp 298-304 31 Yamada, Y & Kondo, K (1973), “Coenzyme Q system in the classification of the yeast genera Rhodotorula and Cryptococcus, and the yeast-like genera Sporobolomyces and Rhodosporidium”, J Gen Appl Microbiol, 19, pp 59-77 32 Yarrow, D (1998), “Methods for the isolation and identification of yeasts”, The yeasts, a taxonomic study, 4th ed, pp 77-100 Edited by C P Kurtzman & J W Fell Amsterdam: Elsevier K20 – Vi sinh vật học Đinh Đức Hiền [...]... (1984), “Deoxyribonucleic acid base composition and taxonomy of Moniliella and allied genera”, Antonie Leeuwenhoek, 50, pp 135-141 7 De Hoog, G S., J Guarro, J Gene, and M J Figueras (2000), Atlas of Clinical Fungi, 2nd ed, vol 1, Centraalbureau voor Schimmelcultures, Utrecht, The Netherlands 8 De Hoog, G S., Smith, M T & Rosa, C A (2011), Moniliella Stolk & Dakin (1966)”, The Yeasts, a Taxonomic Study,... of the yeasts of ephemeral flowers and their insects”, FEMS Yeast Res, 1, pp 1-8 21 Martinez A T (1979), “Ultrastructure of Moniliella, Trichosporonoides and Hyalodendron”, Stud Mycol, 19, pp 50-57 22 Martínez A T., Hoog GS de, Smith M T (1979), “Physiological characteristics of Moniliella, Trichosporonoides and Hyalodendron”, Studies in Mycology, 19: 58–68 23 Perko, R & DeCock, P (2007), “Erythritol”,... A., Jindamorakot, S., Limtong, S., Nakase, T., Lachance, M A., Fidalgo-Jiménez, A., Daniel, H M., Pagnocca, F C., Inácio, J & Morais, P B (2009), “Synonymy of the yeast genera Moniliella and Trichosporonoides and proposal of Moniliella fonsecae sp nov and five new species combinations”, Int J Syst Evol Microbiol, 59, pp 425-429 25 Saitou, N & Nei, M (1987), “The neighbor-joining method: a new method... Luận văn thạc sĩ 9 De Hoog G.S (1999), Ecology and evolution of black yeast and their relative, the Royal NetherlDNAs Academy of Arts and Sciences 10 Edgar, R C (2004), “MUSCLE: multiple sequence alignment with high accuracy and high throughput”, Nucleic Acids Res, 32, pp 1792-1797 11 Esteve-Zarzoso, B., Belloch, C., Uruburu, F & Querol, A (1999), “Identification of yeasts by RFLP analysis of the 5.8S... Leeuwenhoek, 68, pp 19-33 15 Inglis, G D., Sigler, L & Goettel, M S (1992), “Trichosporonoides megachiliensis, a new Hyphomycete associated with alfalfa leafcutter bees, with notes on Trichosporonoides and Moniliella , Mycologia, 84, pp 555-570 16 Kimura, M (1980), “A simple method for estimating evolutionary rates of base substitutions through comparative studies of nucleotide sequences”, J Mol Evol, 16,... phylogenetic hypothesis of Ustilaginomycotina based on multiple gene analyses and morphological data”, Mycologia, 98: 906–916 4 Boekhout T, Fell JW, O’Donnell K (1995), “Molecular systematics of some yeast-like anamorphs belonging to the Ustilaginales and Tilletiales”, Studies in Mycology, 38: 175–183 5 De Hoog, G S., A H Gerritis van den Ende, J M Uijthof, and W A Untereiner (1995), “Nutritional physiology of...Luận văn thạc sĩ TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt 1 Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty (2001), Vi sinh vật học, Nxb Giáo Dục Tiếng Anh 2 Altschul, S F., Madden, T L., Schaffer, A A., Zhang, J., Zhang, Z., Miller, W & Lipman, D J (1997),... occurring in substrates associated with animals and identification of a novel dimorphic species in Verbascum flowers from Georgia”, Antonie van Leeuwenhoek, 103, pp 567–576 28 Stolk, A C & Dakin, J C (1966), Moniliella, a new genus of Moniliales”, Antonie Leeuwenhoek, 32, pp 399-409 K20 – Vi sinh vật học Đinh Đức Hiền Luận văn thạc sĩ 29 Tamura, K., Peterson, D., Peterson, N., Stecher, G., Nei, M & Kumar,