Tiếp tục nghiên cứu ứng dụng nhựa trao đổi inon trong phân lập acid shikimic từ đại hồi

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THẢO MY Mã sinh viên: 1101341 TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG NHỰA TRAO ĐỔI ION TRONG PHÂN LẬP ACID SHIKIMIC TỪ ĐẠI HỒI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI-2016 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THẢO MY Mã sinh viên: 1101341 TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG NHỰA TRAO ĐỔI ION TRONG PHÂN LẬP ACID SHIKIMIC TỪ ĐẠI HỒI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: TS Nguyễn Văn Hân Th.s Đỗ Thị Loan Nơi thực hiện: Bộ môn Công nghiệp Dược HÀ NỘI-2016 LỜI CÁM ƠN Trước tiên, xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc đến: Tiến sĩ Nguyễn Văn Hân Người thầy, người trực tiếp hướng dẫn, tạo điều kiện tận tình bảo để hoàn thành khóa luận Tôi xin chân thành cám ơn Thạc sĩ Đỗ Thị Loan – người hướng dẫn, người chị dẫn dắt tôi, bên hướng dẫn, giải đáp thắc mắc, khó khăn suốt trình thực khóa luận Và xin chân thành cám ơn Dược sĩ Trần Trọng Biên thầy cô giáo, anh chị kỹ thuật viên Bộ môn Công nghiệp Dược bạn thực khóa luận tổ Chiết xuất – Bộ môn Công nghiệp Dược Sự giúp đỡ người hỗ trợ thiếu giúp hoàn thành khóa luận thời hạn Cuối cùng, xin gửi lời cám ơn vô hạn đến thầy cô giáo trường Đại học Dược, người nhiệt tình dạy dỗ, bảo tận tình năm tháng học tập trường Và xin gửi lời biết ơn sâu sắc đến gia đình, bạn bè đồng hành, động viên hỗ trợ suốt thời gian qua Do thời gian có hạn trình độ thân hạn chế nên khóa luận không tránh khỏi thiếu sót Vì vậy, mong nhận bảo tận tình thầy cô bạn bè Xin chân thành cám ơn! Hà Nội, tháng 05 năm 2016 Sinh viên Nguyễn Thị Thảo My MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG I TỔNG QUAN .2 1.1 Tổng quan hồi 1.1.1 Vị trí phân loại phân bố .2 1.1.2 Đặc điểm thực vật .2 1.1.3 Bộ phận dùng, thu hái chế biến 1.1.3.1 Bộ phận dùng 1.1.3.2 Thu hái chế biến 1.1.4 Thành phần hóa học 1.1.5 Công dụng 1.2 Tổng quan acid shikimic .4 1.2.1 Công thức hóa học tính chất 1.2.2 Nguồn gốc acid shikimic 1.2.3 Vai trò acid shikimic 1.2.4 Một số nghiên cứu chiết xuất acid shikimic từ Đại hồi 1.3 Tổng quan nhựa trao đổi ion 1.3.1 Phương pháp trao đổi ion 1.3.1.1 Cơ sở phương pháp 1.3.1.2 Vật liệu trao đổi ion 1.3.1.3 Phân loại vật liệu trao đổi ion 10 1.3.2 Nhựa trao đổi ion 10 1.3.2.1 Phân loại .10 1.3.2.2.Tính chất vật lý .11 1.3.2.3 Tính hóa học 12 1.3.2.4 Tính chọn lọc 13 1.3.2.5 Các phản ứng đặc trưng .14 1.3.2.6 Các ứng dụng nhựa trao đổi ion 15 CHƯƠNG : NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Nguyên vật liệu 16 2.1.1 Nguyên liệu 16 2.1.1.1 Dược liệu .16 2.1.1.2 Nhựa anionit 16 2.1.2 Hóa chất, thiết bị, dụng cụ 16 2.1.2.1 Hóa chất 17 2.1.2.2 Thiết bị, dụng cụ 17 2.2 Nội dung nghiên cứu 18 2.2.1 Xác định dung lượng hấp phụ, hiệu suất phản hấp phụ acid shikimic dịch chiết Đại hồi nhựa anionit 18 2.2.2 Khảo sát khả tái sử dụng nhựa anionit phân lập acid shikimic từ dịch chiết Đại hồi 18 2.2.3 Chiết xuất phân lập acid shikimic từ dịch chiết Đại hồi 18 2.3 Phương pháp nghiên cứu .18 2.3.1 Phương pháp định lượng acid shikimic 18 2.3.2 Phương pháp xác định dung lượng hấp phụ acid shikimic dịch chiết dược liệu anionit 20 2.3.3 Phương pháp xác định hiệu suất phản hấp phụ acid shikimic dược liệu nhựa anionit 21 2.3.4 Phương pháp phân lập acid shikimic dịch chiết dược liệu anionit 22 CHƯƠNG THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 23 3.1 Xác định hàm lượng acid shikimic có dược liệu 23 3.2 Xác định dung lượng hấp phụ, hiệu suất phản hấp phụ acid shikimic dịch chiết dược liệu nhựa anionit 23 3.3 Khảo sát khả tái sử dụng nhựa anionit phân lập acid shikimic từ Đại hồi 26 3.3.1 Khảo sát với dung dịch acid shikimic tinh khiết .26 3.3.2 Khảo sát với dịch chiết dược liệu 28 3.4 Chiết xuất phân lập acid shikimic với mẻ 150g Đại hồi 30 3.5 Bàn luận 35 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC BẢNG Tên bảng Trang Bảng 1.1 Vị trí phân loại hồi (Illicium verum Hook f.) Bảng 1.2 Cấu trúc chất trao đổi ion Bảng 2.1 Các loại anionit sử dụng 16 Bảng 2.2 Các hóa chất sử dụng 17 Bảng 3.1 Bảng 3.2 Bảng 3.3 Bảng 3.4 Kết giai đoạn trình phân lập acid shikimic nhựa anionit từ dịch chiết dược liệu Kết khảo sát số lần tái sử dụng nhựa anionit chất chuẩn Hiệu tái sử dụng nhựa anionit phân lập acid shikimic từ Đại hồi Kết ứng dụng nhựa anionit phân lập acid shikimic từ Đại hồi Bảng 3.5 Kết phân tích phổ 1H-NMR, 13C NMR acid shikimic 25 27 29 33 35 DANH MỤC CÁC HÌNH VÀ SƠ ĐỒ Tên hình Trang Hình 1.1 Cấu trúc acid shikimic Hình 2.1 Nguyên liệu Đại hồi 16 Hình 3.1 Cột sắc ký 15×300 (mm×mm) 24 Hình 3.2 Hình 3.3 Hình 3.4 Hình 3.5 Hình 3.6 So sánh khác dùng dung dịch acid shikimic tinh khiết dịch chiết dược liệu Biểu đồ dung lượng hấp phụ acid shikimic nhựa anionit Biểu đồ hiệu suất phản hấp phụ acid shikimic nhựa anionit Dung lượng hấp phụ acid shikimic từ dịch chiết Đại hồi nhựa anionit qua lần sử dụng Hiệu suất phản hấp phụ acid shikimic qua lần sử dụng 25 27 28 29 30 Sản phẩm acid shikimic thô, tinh khiết thu sau Hình 3.7 mẻ 150g dược liệu phân lập nhựa Diaion SA12A Cấu trúc sản phẩm 34 Sơ đồ tóm tắt quy trình phân lập acid shikimic từ 32 Hình 3.8 Sơ đồ 3.1 34 dịch chiết dược liệu nhựa anionit DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT HPLC : High Performance Liquid Chromatography – sắc ký lỏng hiệu cao ĐẶT VẤN ĐỀ Từ trước đến nay, acid shikimic biết đến sản phẩm biến dưỡng trung gian đường shikimate thực vật, vi sinh vật nhiều nghiên cứu chứng minh tác dụng chống oxy hóa, chống viêm, kháng tiểu cầu, kháng khuẩn [24], [29] Ngoài acid shikimic nguyên liệu để tổng hợp hợp chất acid 6-fluoroshikimic, acid triacetylshikimic, acid shikimic monopalmityloxy thuộc nhiều nhóm tác dụng kháng khuẩn, kháng ký sinh trùng, chống huyết khối, chống ung thư [20], [22] Gần đây, acid shikimic dùng làm nguyên liệu để điều chế oseltamivir phosphat hoạt chất có tác dụng chống cúm type A, B [4] Với nhiều ứng dụng acid shikimic, yêu cầu nghiên cứu tìm kiếm nguồn nguyên liệu, phương pháp hiệu nhằm thu acid shikimic với hiệu suất cao cần thiết Đại hồi dược liệu có hàm lượng acid shikimic cao, từ - 10% nguyên liệu có sẵn, tiềm nước ta [5] Vì vậy, Đại hồi nguồn nguyên liệu chủ yếu dùng để phân lập acid shikimic nước ta Có hai hướng phân lập acid shikimic từ Đại hồi nghiên cứu là: sử dụng dung môi hữu sử dụng nhựa trao đổi ion Nhược điểm lớn việc sử dụng dung môi hữu phân lập acid shikimic từ Đại hồi dung môi độc hại với môi trường người nghiên cứu Trong đó, sử dụng nhựa trao đổi ion lại khắc phục nhược điểm đồng thời hạt nhựa anionit dùng thông dụng, rẻ tiền sẵn có Việt Nam Khóa luận Dược sĩ Nguyễn Thị Khuyên (2015) bước đầu cho kết khả quan việc sử dụng nhựa anionit phân lập acid shikimic Vì vậy, đề tài tiếp tục đánh giá khả ứng dụng nhựa trao đổi ion phân lập acid shikimic từ Đại hồi với mục tiêu: Xác định khả hấp phụ, khả tái sử dụng hai loại nhựa Diaion SA 12A Trilite SAR 20 phân lập acid shikimic từ Đại hồi Xây dựng quy trình phân lập acid shikimic từ dịch chiết Đại hồi nhựa trao đổi ion CHƯƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan hồi 1.1.1 Vị trí phân loại phân bố Vị trí phân loại hồi (Illicium verum Hook f.) theo hệ thống phân loại thực vật Takhtajan [1], [9] thể bảng sau Bảng 1.1: Vị trí phân loại hồi (Illicium verum Hook f.) Giới Thực vật – Plantae Không phân hạng Thực vật có hoa - Angiospermae Bộ Mộc lan dây - Austrobaileyales Họ Hồi – Illiciaceae Chi Hồi – Illicium Loài I verum Cây hồi ( Illicium verum Hook f.) trồng nhiều tỉnh Cao Bằng, Lạng Sơn, số hai tỉnh Quảng Tây Quảng Đông (Trung Quốc) giáp giới Việt Nam Một số nơi khác có trồng không đáng kể Hà Giang, Tuyên Quang, Bắc Cạn, Thái Nguyên [11] Nó có tên gọi khác đại hồi, bát giác hồi hương, hồi hương, hồi sao, mác chác, mác hồi (Tày), pít cóc (Dao),… [2] 1.1.2 Đặc điểm thực vật Cây đại hồi gỗ nhỏ, cao - 10m Thân thẳng to, cành thẳng, nhẵn, lúc non màu lục nhạt sau chuyển sang màu nâu xám Lá mọc so le, phiến nguyên, dày, cứng giòn, nhẵn bóng, dài - 12cm, rộng - 4cm, hình mác trúng thuôn, nhọn đầu, mặt xanh bóng mặt Hoa mọc đơn độc nách lá, có xếp - cái, cuống to ngắn, đài màu trắng có mép màu hồng, - cánh hoa màu hồng thẫm Quả kép gồm - đại, xếp thành hình đường kính 2,5 - 3cm, 34 dịch phản hấp phụ với nhựa, đặc biệt vào sâu cấu trúc nhựa, làm giảm hiệu suất phản hấp phụ Hình 3.7 Sản phẩm acid shikimic thô(trái), acid shikimic tinh khiết(phải) thu sau mẻ 150g dược liệu phân lập nhựa Diaion SA12A Kiểm tra chất lượng sản phẩm Sản phẩm acid shikimic thu đem tiến hành kiểm tra chất lượng đo thông số vật lý, đo phổ IR, phổ NMR Kết thu sau: - Đặc điểm sản phẩm acid shikimic: COOH HO OH OH Hình 3.8 Cấu trúc sản phẩm Hình thức cảm quan: Bột kết tinh trắng Nhiệt độ nóng chảy: 184,3°C (Merck Index 183 - 184,5°C) Năng suất quay cực: [α]D20 = -183,6° (dung dịch 4,03% nước, Merck Index: 183,8°) 35 Phổ hồng ngoại (IR): vmax (cm-1): 3477, 3373, 3211(OH); 1678 (C=O); 1645 (C=C) Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (1H-NMR, 13C NMR) Bảng 3.5 Kết phân tích phổ 1H-NMR, 13C NMR acid shikimic 13 C NMR H NMR, ppm Vị Thực nghiệm Tài liệu [21] Thực nghiệm Tài liệu [21] trí (500 MHz, (75 MHz, D2O, (500 MHz, MeOD, (300 MHz, C MeOD, ppm) ppm) ppm) D2O, ppm) 130,72 129,8 138,81 137,1 6,80 (t, 1H) 6,70 (m, 1H) 72,74 75,1 4,37 (m, 1H) 4,30 (m, 1H) 68,40 66,5 3,68 (dd, 1H) 3,67 (dd, 1H) 67,31 65,8 3,99 (m, 1H) 3,93 (m, 1H) 31,65 30,4 2,70 (m, 1H H-6α) 2,64 (dd, 1H) 2,20 (m, 1H, H-6β) 2,12 (dd, 1H) 170,02 170,1 3.5 Bàn luận Kết thu cho thấy nhựa trao đổi anion dùng lọc nước hấp phụ acid shikimic tốt Trong nghiên cứu này, để phân lập acid shikimic từ 150g Đại hồi dùng 100g nhựa, tiết kiệm lượng nhựa sử dụng nghiên cứu Payne với 25 g Đại hồi dùng đến 25g Amberlite IRA-400 nghiên cứu Zirbs với 1g Đại hồi dùng 25g Amberlite IRA-400, hiệu suất phân lập cho kết tương đương Ngoài ra, loại hạt Amberlite IRA hạt anionit dùng phòng thí nghiệm, giá thành cao thông dụng loại nhựa trao đổi ion dùng công nghệ lọc nước Diaion SA12A, Trilite SAR-20 Khi muốn tái sử dụng nhựa trao đổi ion, cần hoàn nguyên hạt nhựa trao đổi ion để hoạt hóa hạt nhựa Quy trình hoàn nguyên hạt anionit đơn giản, dễ thao tác, sử dụng NaOH 1% rửa nước cất đến pH trung tính Hóa chất 36 dùng để hoàn nguyên nhựa hóa chất an toàn, rẻ dễ kiếm Sau bốn lần sử dụng khả tái sử dụng Diaion SA 12A, Trilite SAR-20 đạt khoảng 7080% so với lần đầu Cho thấy hai loại nhựa tái sử dụng thêm nhiều lần Ứng dụng hạt Diaion SA12A, Trilite SAR-20 để phân lập acid shikimic 150g Đại hồi cho hiệu suất ổn định cao 75,1% 63,3%, sản phẩm acid shikimic có độ tinh khiết khoảng 98,8% So với hiệu suất 78,2% trình phân lập acid shikimic từ phế phẩm trình sản xuất tinh dầu Đại hồi [7], quy trình tinh chế cho hiệu suất tương đương, phương pháp ứng dụng nhựa trao đổi ion không cần sử dụng đến dung môi aceton So sánh với quy trình Payne Zirbs, phương pháp có ưu điểm không dùng dung môi độc hại formaldehyd, không dùng dung môi đắt tiền ion lỏng để chiết xuất, quy trình phân lập đơn giản Như việc sử dụng nhựa trao đổi ion để phân lập acid shikimic đại hồi có nhiều ưu điểm: - Phương pháp sử dụng loại thiết bị đơn giản, dễ vận hành - Quy trình phân lập đơn giản - Các loại anionit sử dụng nghiên cứu hạt anionit thông dụng, dùng công nghệ lọc nước, rẻ tiền sẵn có Việt Nam, tái sử dụng nhiều lần - Dung dịch phản hấp phụ NaCl 0,9M loại dung môi dễ thông dụng, dễ pha chế không độc hại cho người, môi trường, dễ tách khỏi acid shikimic - Dung môi khác dùng trình phân lập ethanol 96% dung môi độc hại dễ thu hồi 37 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ I Kết luận Sau trình nghiên cứu làm thực nghiệm, đạt số kết sau: Xác định đặc tính hấp phụ số nhựa anionit phân lập acid shikimic từ Đại hồi - Dung lượng hấp phụ acid shikimic từ dịch chiết Đại hồi của: nhựa Diaion SA12A 128,5 mg/1g hạt, nhựa Trilite SAR-20 102,21 mg/1g hạt - Hiệu suất phản hấp phụ acid shikimic: nhựa Diaion SA12A 92,4%, nhựa Trilite SAR-20 91,0% - Khảo sát khả tái sử dụng nhựa Diaion SA12A, Trilite SAR-20 hấp phụ dịch chiết Đại hồi Sau quy trình hấp phụ - phản hấp phụ - hoàn nguyên, hiệu làm việc nhựa Diaion SA 12A giảm 5-7%, nhựa Trilite SAR-20 giảm 8-12% Ở lần sử dụng thứ 4, Diaion SA12A cho dung lượng hấp phụ 107,7 mg/1g hạt, hiệu suất phản hấp phụ đạt 72,0%; Trilite SAR-20 cho dung lượng 73,0 mg/1g hạt, hiệu suất phản hấp phụ đạt 75,4% Xây dựng phương pháp phân lập acid shikimic từ dịch chiết nhựa trao đổi ion Từ thông số khảo sát, xây dựng quy trình phân lập acid shikimic từ Đại hồi với nhựa anionit gồm bước: chiết xuất nước – loại tạp ethanol – phân lập acid shikimic nhựa anionit – tẩy màu kết tinh lại ethanol 96% Hiệu suất trình phân lập so với lượng acid shikimic chiết từ Đại hồi thu qua lần thí nghiệm đồng đều, đạt trung bình 75,1% Diaion SA12A 63,3% Trilite SAR-20 Hiệu suất trình phân lập acid shikimic sử dụng Diaion SA12A Trilite SAR-20 đạt 4,5% 3,8% so với khối lượng dược liệu sử dụng Sản phẩm tinh khiết có hàm lượng acid shikimic khoảng 98% 38 II Kiến nghị - Tiếp tục khảo sát để xác định thông số tối ưu cho phương pháp phân lập acid shikimic nhựa trao đổi ion - Nâng cấp quy mô với lượng lớn Đại hồi TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Nguyễn Tiến Bân (1997), Cẩm nang tra cứu nhận biết họ thực vật hạt kín Việt Nam, Nxb Nông nghiệp, tr.9 Đỗ Huy Bích, Nguyễn Thượng Dong cs (2004), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt nam, Nxb Khoa học Kỹ thuật Hà Nôi, tập I, tr 986-990 Nguyễn Quyết Chiến, Đoàn Thị Mai Hương, Phạm Văn Cường, Trần Thị Thu Thủy, Lê Anh Tuấn, Phạm Xuân Vũ, Nguyễn Văn Hùng (2006), “Phân lập axit shikimic từ hồi Việt Nam (Illicium verum Hook.f-Illciaceae)”, Tạp chí hóa học, 44(6), tr 745-748 Nguyễn Quyết Chiến (2006), “Chọn lựa hướng nghiên cứu tổng hợp Oseltamivir (Tamiflu) Việt Nam”, Tạp chi hóa học, 45, tr 199-206 Nguyễn Thượng Dong, Nguyễn Thị Bích Thu (2010), Nghiên cứu phát triển hồi làm nguyên liệu sản xuất acid shikimic khai thác tinh dầu, Đề tài Khoa học Công nghệ cấp Bộ Y tế, Viện Dược liệu Lê Minh Đức (2013), Bài giảng nhựa trao đổi ion, Bộ môn công nghệ hóa học vật liệu, Trường Đại học Bách khoa Đà Nẵng Nguyễn Văn Hân, Phùng Thị Mỹ Hạnh (2016), “Phân lập acid shikimic từ phế phẩm trình sản xuất tinh dầu đại hồi”, Tạp chí Dược học, 478, tr 45-47 Nguyễn Thị Thu Hiền (2010), Nghiên cứu chiết xuất acid shikimic từ Đại hồi, Khóa luận tốt nghiệp dược sỹ khóa 2005-2010, Trường đại học Dược Hà Nội Trần Công Khánh, Nguyễn Thị Sinh (1997), Thực vật dược, Trường Đại học Dược Hà Nội 10 Nguyễn Thị Khuyên, Đỗ Thị Loan (2015), Nghiên cứu sử dụng nhựa trao đổi ion để phân lập acid shikimic từ đại hồi, Khóa luận tốt nghiệp dược sỹ khóa 2010 – 2015, Trường đại học Dược Hà Nội 11 Đỗ Tất Lợi (1999), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, tr 323324, tr 524-525 12 Nguyễn Đình Luyện (2006), “Chiết xuất acid shikimic từ hoa hồi (Illicium verum Hook.f”, Tạp chí Dược học, 358, tr 8-9 13 Nguyễn Đình Luyện, Hà Thị Mai Trang (2008), “Nghiên cứu định lượng acid shikimic Đại hồi (Illicium verum Hook.f ) phương pháp HPLC”, Tạp chí dược học, 386, tr 28-30 14 Cao Thị Thúy Nga (2010), Ứng dụng phương pháp trao đổi ion xử lý nước, Trường Đại học Công nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh, Viện Khoa học công nghệ quản lý môi trường 15 Phạm Xuân Sinh (2006), Dược học cổ truyền, NXB Y học, tr 144-145 16 Đào Chánh Thuận (2013), Nghiên cứu trình trao đổi ion amoni nhựa C100, Đồ án tốt nghiệp, Viện Khoa học Môi trường TÀI LIỆU TIẾNG ANH 17 Ambhaikar N (2005), Shikimic acid, The Baran laboratory Group Meeting The Scripps Research Institute 18 Bogosian G et al (2008), “Use of glyphosate to produce shikimic acid in microorganisms”, World intellectual property organization, 128076 19 Bui Quang Thuat, Bui Thi Bich Ngoc (2010), “Obtaining Essential Oil and Shikimic Acid from Star Anise Fruit (Illicium verum Hook)”, VNU Journal of Science, Natural Sciences and Technology, 26, pp 110-113 20 Davies GM, Barrett-Bee KJ, Jude DA, Lehan M, Nichols WW, Pinder PE, Thain JL, Watkins WJ, Wilson RG (1994), “(6S)-6-fluoroshikimic acid, an antibacterial agent acting on the aromatic biosynthetic pathway”, Antimicrob Agents Chemother., 38(2), pp 403-406 21 Denis V Bochkov et al (2012), “Shikimic acid: review of its analytical, isolation, and purification techniques from plant and microbial sources”, J.Chem Biol., 5(1), pp – 17 22 Derek S Tan et al (1999), “Synthesis and preliminary evaluation of a library of polycyclic small molecules for use in chemical genetic assays”, J Am Chem Soc., 121 (39), pp 9073 – 9087 23 Enrich L B., Scheuermann M L., Mohadjer A., Matthias K R., Eller C F., Newman M S., Fujinaka M., Poon T., (2008), “Liquidambar styraciflua: a renewable source of shikimic acid”, Tetrahedron Letters, 49, 2503–2505 24 Huang I et al (2002), “Anti-Platelet and Anti-Thrombotic Effects of Triacetylshikimic Acid in Rats”, Journal of Cardiovascular Pharmacology, 39(2), pp 262-270 25 JI Yubin, Yu Miao, Wang Bing and Zhang Yao (2014), “The extraction, separation and purification of alkaloids in the natural medicine”, Journal of Chemical and Pharmaceutical Research, 6(1), pp 338-345 26 Katarína Hroboňováa, Jozef Lehotaya and Jozef Čižmárik (2007), “Determination of Quinic and Shikimic Acids in Products Derived from Bees and their Preparates by HPLC”, Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies, 30(17), pp.2635-2644 27 LI Wei, CAO Yong, WEI Hua, ZHOU Dong-wu (2008), “Reversed-Phase HPLC Determination of Shikimic Acid in Illicium Verum Hook F.” – Journal of Jishou University (Natural Sciences Edition), 01 28 Merck & Co., Inc (2001), The Merk Index 13th edition, pp 1457-1458 29 Ohira H., Torii N., Aida M T., Watanabe M., Smith L R (2009), “Rapid separation of shikimic acid from Chinese star anise (Illicium verum Hook f.) with hot water extraction”, Separation and Purification Technology, 69, p 102108 30 Payne R., Edmonds M (2005), “Isolation of Shikimic Acid from Star Aniseed”, Journal of Chemical Education, 82(4), pp 599-600 31 Ronald Harmetz , Louis A Laurenzo , David V Petrocine (1990), “Method of making a coca leaf flavor extract”, United stated patent, 19, 956 429 32 Ronald Z., Katharina S., Peter G., Christian S va Katharina B (2013) “Exploring ionic liquid–biomass interactions: towards the improved isolation of shikimic acid from star anise pods”, The Royal Society of Chemistry, 3, pp 26010 – 26016 33 Sakaguchi I et al (2004), “The water soluble extract of Illicium anisatum stimulas mouse vibrissae follicles in organs culture”, Exp Dermaton, 13(8), pp 449 – 504 34 Sankar I V et al (2007), “Method for obtaining shikimic acid”, WIPO Patent Application WO/2007/138607 35 Singh G., Jiang S (1998), “Chemical synthesis of shikimic acid and its analogues”, Tetrahedron, 54, pp 4697-4753 36 Stavric B., Stoltz D R (1976), “Shikimic acid”, Food Cosmet Toxicol., 14 (2), pp.141-145 37 Zirbs R., Strassl K., Gaertner P , Schroder C Bica K (2013) “Exploring ionic liquid–biomass interactions: towards the improved isolation of shikimic acid from star anise pods”, The Royal Society of Chemistry, 3, pp 26010 – 26016 PHỤ LỤC Phụ lục Phổ 1H-NMR acid shikimic Phụ lục Phổ 13C-NMR acid shikimic Phụ lục Phổ IR acid shikimic Phụ lục Sắc ký đồ HPLC 4.1 Sắc ký đồ HPLC acid shikimic chuẩn, a = 99,8% 4.2 Sắc ký đồ HPLC acid shikimic dịch chiết Đại hồi 4.3 Sắc ký đồ HPLC mẫu dịch chiết sau hấp phụ 4.4 Sắc ký đồ HPLC mẫu dịch phản hấp phụ Phụ lục 4: Sắc ký đồ HPLC 4.1 Sắc ký đồ HPLC acid shikimic chuẩn, a = 99,8% 4.2 Sắc ký đồ HPLC acid shikimic dịch chiết Đại hồi 4.3 Sắc ký đồ HPLC mẫu dịch chiết dược liệu sau hấp phụ 4.4 Sắc ký đồ HPLC mẫu dịch phản hấp phụ [...]... cần nghiên cứu Ứng dụng nhựa trao đổi ion trong phân lập acid shikimic từ Đại hồi đang là hướng nghiên cứu cho thấy kết quả khả quan và có tính ứng dụng cao trong sản xuất 1.3 Tổng quan về nhựa trao đổi ion 1.3.1 Phương pháp trao đổi ion 1.3.1.1 Cơ sở của phương pháp Trao đổi ion là một quá trình gồm các phản ứng hoá học đổi chỗ (phản ứng thế) giữa các ion trong pha lỏng và các ion trong pha rắn (là nhựa. .. anionit trong phân lập acid shikimic từ dịch chiết Đại hồi Khảo sát dung lượng hấp phụ, hiệu suất phản hấp phụ acid shikimic từ dược liệu của nhựa Diaion SA12A, Trilite SAR-20 qua 4 lần lặp lại quy trình hấp phụ - phản hấp phụ - hoàn nguyên anionit 2.2.3 Chiết xuất và phân lập acid shikimic từ dịch chiết Đại hồi Xây dựng phương pháp chiết xuất và phân lập acid shikimic từ dịch chiết mẻ Đại hồi 150g bằng nhựa. .. dung nghiên cứu 2.2.1 Xác định dung lượng hấp phụ, hiệu suất phản hấp phụ acid shikimic trong dịch chiết Đại hồi của nhựa anionit Xác định dung lượng hấp phụ, hiệu suất phản hấp phụ acid shikimic từ dịch chiết Đại hồi của hai loại nhựa Diaion SA12A và Trilite SAR-20 Từ đó thiết kế thí nghiệm phân lập acid shikimic từ dịch chiết Đại hồi bằng hai loại nhựa này 2.2.2 Khảo sát khả năng tái sử dụng của nhựa. .. type A và type B, đặc biệt với chủng H5N1, H1N1 1.2.4 Một số nghiên cứu chiết xuất acid shikimic từ Đại hồi Các nghiên cứu không sử dụng nhựa trao đổi ion Năm 2007, Iyer Sankar công bố một phương pháp phân lập acid shikimic từ Đại hồi, gồm các bước: chiết hồi lưu nguyên liệu Đại hồi (400g) với 2 lần × 2L isopropanol 95% trong 6 giờ Cất thu hồi dung môi dưới áp suất giảm để thu được dịch chiết đậm đặc... 127,4 mg/g - Chọn được dung dịch NaCl 7% dùng để phản hấp phụ acid shikimic trong nhựa - Dung lượng hấp phụ acid shikimic trong dịch chiết Đại hồi của nhựa Diaion SA12A là 128,5 mg acid shikimic/ 1g nhựa anionit Phần trăm acid shikimic phản hấp phụ từ nhựa là: 90,89% 9 Như vậy, có rất nhiều phương pháp phân lập acid shikimic trong Đại hồi và đều đạt hiệu suất khá cao Tuy nhiên, để tìm ra một phương... trình thuận nghịch, phản ứng hoá học dị thể giữa các nhóm hoạt động của nhựa và các ion trong dung dịch Quá trình trao đổi tuân theo định luật tác dụng khối lượng 1.3.2.6 Các ứng dụng của nhựa trao đổi ion - Làm mềm nước: Trong ứng dụng này, nhựa trao đổi ion được sử dụng để thay thế các ion Mg2+ và Ca2+ được tìm thấy trong nước cứng bằng Na+ - Lọc nước: Trong ứng dụng này nhựa ion dùng để loại bỏ... loại nhựa trên còn ở mức cao, ứng dụng được ở quy mô lớn hơn Vì vậy, dựa trên các thông số này, chúng tôi thiết kế thí nghiệm phân lập acid shikimic từ Đại hồi bằng nhựa anionit 3.3 Khảo sát khả năng tái sử dụng nhựa anionit trong phân lập acid shikimic từ đại hồi 3.3.1 Khảo sát với dung dịch acid shikimic tinh khiết - Mục đích Thí nghiệm khảo sát khả năng tái sử dụng của nhựa anionit trên chất chuẩn... phản ứng hữu cơ - Sản xuất đường: Nhựa trao đổi ion được sử dụng trong sản xuất đường từ nhiều nguồn khác nhau Chúng giúp làm sạch siro đường - Trong dược phẩm: Nhựa trao đổi ion được sử dụng trong sản xuất dược phẩm không chỉ làm chất xúc tác phản ứng nhất định mà cũng dùng để phân lập các hợp chất tự nhiên Đã có nhiều nghiên cứu sử dụng nhựa trao đổi ion như: sử dụng nhựa cation để tách cocain và ecgonin... tính năng hóa học của nhựa trao đổi ion [16]: - Dung lượng trao đổi: biểu thị mức độ nhiều ít của lượng ion có thể trao đổi trong một loại chất trao đổi ion - Tính năng thuận nghịch của phản ứng trao đổi ion: Phản ứng trao đổi ion là phản ứng thuận nghịch Dựa trên tính chất này người ta dùng dung dịch hoàn nguyên, thông qua việc trao đổi ion đã mất để khôi phục lại năng lực trao đổi của nó Ví dụ: 2HR+... ethanol 96% trong 24 giờ Sản phẩm thu được có độ tinh khiết 99,2% Hiệu suất của quy trình phân lập đạt 78,2% [7] Quy trình cho sản phẩm có độ tinh khiết cao, sử dụng ít loại dung môi (ethanol 96% và aceton) và đơn giản hơn các quy trình tinh chế acid shikimic từ Đại hồi trước đó Các nghiên cứu có sử dụng nhựa trao đổi ion Năm 2005, Richard Payne và các cộng sự đã chiết xuất acid shikimic từ 25g Đại hồi với