Định lượng sildenafil trong một số viên nén trên thị trường bằng máy quang phổ cận hồng ngoại (NIR) cầm tay

BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI HOÀNG SƠN HẢI Mã sinh viên: 1101144 ĐỊNH LƢỢNG SILDENAFIL TRONG MỘT SỐ VIÊN NÉN TRÊN THỊ TRƢỜNG BẰNG MÁY QUANG PHỔ CẬN HỒNG NGOẠI (NIR) CẦM TAY KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI - 2016 BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI HOÀNG SƠN HẢI Mã sinh viên: 1101144 ĐỊNH LƢỢNG SILDENAFIL TRONG MỘT SỐ VIÊN NÉN TRÊN THỊ TRƢỜNG BẰNG MÁY QUANG PHỔ CẬN HỒNG NGOẠI (NIR) CẦM TAY KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Người hướng dẫn: 1.Ths Đặng Thị Ngọc Lan Ds Bùi Văn Trung Nơi thực hiện: Viện kiểm nghiệm thuốc TW HÀ NỘI – 2016 LỜI CẢM ƠN Lời xin gửi lời cảm ơn chân thành đến ThS Đặng Thị Ngọc Lan, ngƣời tận tình hƣớng dẫn giúp đỡ trình thực khóa luận Tôi xin chân thành cảm ơn DS Bùi Văn Trung bảo kiến thức thiết thực giúp có thêm nhiều hiểu biết để hoàn thành tốt đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn anh chị Khoa Vật lý đo lƣờng - Viện kiểm nghiệm thuốc TW tạo điều kiện thuận lợi để đƣợc học tập thực tập Viện Tôi xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc đến toàn thể Quý thầy cô Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội dạy dỗ, truyền đạt kiến thức quý báu cho suốt năm học tập rèn luyện trƣờng Cuối xin gửi lời cảm ơn đến bố mẹ, bạn bè, ngƣời bên cạnh ủng hộ suốt trình học tập thực khóa luận Mặc dù cố gắng để hoàn thành đề tài, song hạn chế thiếu sót Tôi mong đƣợc nhận ý kiến đóng góp, phê bình Quý thầy cô anh chị Xin chân thành cảm ơn! Hà nội, ngày 12 tháng năm 2016 Sinh viên Hoàng Sơn Hải MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Sildenafil 1.1.1 Công thức 1.1.2 Tính chất 1.1.3 Các dạng bào chế hay dùng sản phẩm thị trƣờng 1.1.4 Các phƣơng pháp định tính, định lƣợng thông thƣờng 1.2 Tổng quan phƣơng pháp quang phổ cận hồng ngoại 1.2.1 Lịch sử phát triển 1.2.2 Nguyên lý phƣơng pháp quang phổ NIR 1.2.3 Các kỹ thuật đo phổ NIR 11 1.2.4 Thiết bị 13 1.2.5 Ƣu nhƣợc điểm phƣơng pháp quang phổ NIR 14 1.2.6 Ứng dụng phổ NIR ngành Dƣợc 15 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 19 2.2 Nguyên vật liệu thiết bị 19 2.2.1 Nguyên liệu 19 2.2.2 Thiết bị .20 2.3 Nội dung nghiên cứu 20 2.3.1 Xây dựng quy trình phân tích 20 2.3.2 Thẩm định quy trình phân tích 21 2.3.3 Khảo sát định lƣợng số chế phẩm thị trƣờng 21 2.4 Phƣơng pháp tiến hành 21 2.4.1 Xây dựng quy trình phân tích 21 2.4.2 Thẩm định quy trình phân tích 23 2.4.3 Ứng dụng phân tích thuốc thị trƣờng 24 CHƢƠNG THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 25 3.1 Xây dựng quy trình phân tích 25 3.1.1 Chế tạo viên nén mô hình 25 3.1.2 Thiết lập đƣờng tuyến tính cho viên nén mô hình mẫu phân tích 29 3.2 Thẩm định quy trình phân tích 32 3.2.1 Thẩm định độ tuyến tính 32 3.2.2 Thẩm định độ đặc hiệu 32 3.2.3 Thẩm định độ 33 3.2.4 Thẩm định độ lặp lại 35 3.2.5 Độ xác trung gian 38 3.3 Ứng dụng phân tích thuốc thị trƣờng 40 3.4 Bàn luận 41 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu viết tắt AOTF Tiếng Anh Acousto-optic tunable filter DĐVN IV Tiếng Việt Bộ phận điều tiết quang âm Dƣợc điển Việt Nam IV ED Erectile dysfunction Rối loạn cƣơng dƣơng FIR Far Infrared Hồng ngoại xa HPLC High-performance liquid chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao IR Infrared Hồng ngoại LC-MS Liquid Chromatography Sắc ký lỏng- khối phổ Coupled Mass Spectroscopy MIR Mid Infrared Hồng ngoại NIR Near Infrared Hồng ngoại gần NIRS Near Infrared Spectroscopy Phổ cận hồng ngoại NIDQC National Institute of Drug Quality Control Viện kiểm nghiệm thuốc trung ƣơng RMSEC Root Mean Square Error of Calibration Căn bậc hai sai số bình phƣơng trung bình RSD Relative Standard Deviation Độ lệch chuẩn tƣơng đối UV-Vis Ultraviolet-Visible Tử ngoại- khả kiến DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Ứng dụng phổ NIR ngành Dược 16 Bảng 2.1 Thông tin mẫu thử nghiên cứu 19 Bảng 2.2 Các tá dược sử dụng trình nghiên cứu 20 Bảng 3.1 Thành phần viên Activ-gra không bao 25 Bảng 3.2 Lượng dược chất placebo cân trình xây dựng viên mô hình Activ-gra 26 Bảng 3.3 Thành phần viên Siloflam-50 không bao 27 Bảng 3.4 Lượng dược chất placebo cân trình xây dựng viên mô hình Siloflam-50 27 Bảng 3.5 Thành phần cho viên Majegra-50 không bao 28 Bảng 3.6 Lượng dược chất placebo cân trình xây dựng viên mô hình Majegra-50 29 Bảng 3.7 Kết khảo sát độ đặc hiệu phương pháp NIRS với mẫu phân tích 33 Bảng 3.8 Kết khảo sát độ phương pháp NIRS viên nén mô hình Activ-gra 34 Bảng 3.9 Kết khảo sát độ phương pháp NIRS viên nén mô hình Siloflam-50 34 Bảng 3.10 Kết khảo sát độ phương pháp NIRS viên nén mô hình Majegra-50 35 Bảng 3.11 Kết khảo sát độ lặp lại phương pháp NIRS với mẫu Activgra 36 Bảng 3.12 Kết khảo sát độ lặp lại phương pháp NIRS với mẫu Siloflam50 37 Bảng 3.13 Kết khảo sát độ lặp lại phương pháp NIRS với mẫu Majegra-50 37 Bảng 3.14 Kết khảo sát độ xác trung gian phương pháp NIRS với mẫu Activ-gra 38 Bảng 3.15 Kết khảo sát độ xác trung gian phương pháp NIRS với mẫu Siloflam-50 39 Bảng 3.16 Kết khảo sát độ xác trung gian phương pháp NIRS với mẫu Majegra-50 40 Bảng 3.17 Kết định lượng mẫu thuốc thị trường 41 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1 Công thức cấu tạo cấu trúc phân tử Sildenafil Hình 1.2 (a,b,c) Mô hình kiểu dao động hóa trị phân tử Hình 1.3 (a,b,c) Mô hình kiểu dao động uốn phân tử Hình 1.4 Giản đồ phân bố dao động phân tử Hình 1.5 Phổ MIR đo ATR phổ NIR đo phản xạ khuếch tán Magie stearat 10 Hình 1.6 Máy quang phổ NIR đo truyền qua 13 Hình 1.7 Máy quang phổ NIR đo phản xạ 13 Hình 1.8 Phân tích phổ NIR xuyên qua bao bì 16 Hình 1.9 Phân tích hàng loạt viên dây chuyền sản xuất NIR 16 Hình 2.1 Sơ đồ dập viên 22 Hình 2.2 Thiết bị NIR 23 Hình 3.1 Tuyến tính viên nén mô hình Activ-gra 30 Hình 3.2 Tuyến tính viên nén mô hình Siloflam-50 31 Hình 3.3 Tuyến tính viên nén mô hình Majegra-50 32 ĐẶT VẤN ĐỀ Xã hội phát triển nhu cầu chăm sóc sức khỏe đƣợc trọng Do thuốc liên tục đƣợc nghiên cứu cho đời nhằm đáp ứng nhu cầu ngƣời bệnh Nhƣng với tình trạng sản xuất thuốc giả, thuốc chất lƣợng trở nên phổ biến trở thành vấn nạn xã hội Năm 1998, hoạt chất Sildenafil với tên biệt dƣợc Viagra đƣợc FDA công nhận thuốc điều trị rối loạn cƣơng dƣơng (ED) giới Rối loạn cƣơng dƣơng ảnh hƣởng lớn tới chất lƣợng sống gia đình, thƣờng xuất tuổi trung niên nhu cầu sử dụng thuốc chứa Sildenafil ngày cao Bên cạnh đó, giá thành dƣợc phẩm đắt, đặc biệt sản phẩm thuốc ngoại cao nhiều lần so với thuốc nội Chính vậy, phải đối mặt với việc làm giả, làm nhái tạo sản phẩm chứa Sildenafil không đạt chất lƣợng, làm ảnh hƣởng tới sức khỏe ngƣời bệnh Trong báo cáo thƣờng niên hội đồng dƣợc điển Mỹ (USP) năm 2007 nêu rõ “trộn Sildenafil dẫn chất” trở thành vấn đề mang tính toàn cầu [21] Các phƣơng pháp phân tích thông thƣờng nhƣ sắc ký lớp mỏng (TLC), sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC), sắc ký lỏng khối phổ (LC_MS), quang phổ UV_Vis, IR …cho kết với độ xác cao, nhƣng tốn nhiều thời gian, chi phí để phân tích khó kiểm soát hết đƣợc chất lƣợng tất thuốc thị trƣờng Trƣớc thực trạng trên, việc tìm phƣơng pháp phân tích nhanh để kiểm soát đƣợc chất lƣợng thuốc thị trƣờng, thuốc có nguy bị làm giả cao nhƣ Sildenafil vấn đề cấp thiết 40 Bảng 3.16 Kết khảo sát độ xác trung gian phương pháp NIRS với mẫu Majegra-50 Kiểm nghiệm viên Lần đo Kiểm nghiệm viên Kiểm nghiệm viên ● Nhận xét: RSD Hàm lƣợng Sildenafil Hàm lƣợng citrate thu đƣợc (%) trung bình (%) 23,61 23,45 23,28 23,42 23,67 23,79 23,78 23,95 23,03 23,11 23,34 23,21 23,47 RSD (%) 1,24 % với mẫu => Phƣơng pháp định lƣợng đạt yêu cầu độ xác trung gian Nhƣ vậy, phƣơng pháp định lƣợng phổ cận hồng ngoại đạt yêu cầu thẩm định nhƣ độ tuyến tính, độ đặc hiệu, độ đúng, độ lặp lại, độ xác trung gian nên phƣơng pháp NIRS đƣợc ứng dụng để định lƣợng mẫu thuốc thị trƣờng 3.3 Ứng dụng phân tích thuốc thị trƣờng - Từ kết thẩm định độ lặp lại ta có kết định lƣợng mẫu thuốc thị trƣờng thể bảng sau: 41 Bảng 3.17 Kết định lượng mẫu thuốc thị trường Mẫu Hàm lƣợng Sildenafil đo đƣợc so với hàm lƣợng Sildenafil ghi nhãn (%) Activ-gra 97,77 Siloflam-50 96,65 Majegra-50 97,55 ● Nhận xét: Kết định lƣợng mẫu thuốc Activ-gra, Siloflam-50, Majegra-50 cho hàm lƣợng Sildenafil so với hàm lƣợng Sildenafil ghi nhãn nằm khoảng 90,00% - 110,00% Nhƣ theo DĐVN IV kết định lƣợng Sildenafil mẫu đạt yêu cầu 3.4 Bàn luận - Qua nhiều nghiên cứu giới Việt Nam chứng minh đƣợc phƣơng pháp quang phổ cận hồng ngoại phƣơng pháp phân tích nhanh, không phá hủy mẫu, phải chuẩn bị mẫu, không tốn dung môi, hóa chất, dùng đƣợc để định lƣợng nhanh chế phẩm thuốc thị trƣờng Mặt khác tiết kiệm đƣợc thời gian, nhƣ chi phí so với phƣơng pháp phân tích thông thƣờng khác nhƣ HPLC, UV-VIS - Trong khóa luận này, phƣơng pháp nghiên cứu đƣợc thẩm định tiêu nhƣ độ tuyến tính, độ đặc hiệu, độ đúng, độ lặp lại, độ xác trung gian cho kết với độ xác cao Kết định lƣợng 03 mẫu Activ-gra, Siloflam-50, Majegra-50 nằm giới hạn cho phép, ứng dụng phƣơng pháp quang phổ cận hồng ngoại để định lƣợng nhanh chế phẩm viên nén chứa Sildenafil 42 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Sau hoàn thành khóa luận ―Định lượng Sildenafil số viên nén thị trường máy quang phổ cận hồng ngoại (NIR) cầm tay‖ có số kết luận sau: ● Đã xây dựng đƣợc quy trình định lƣợng Sildenafil mẫu thuốc Activ-gra, Siloflam-50, Majegra-50 cách thu thập công thức mẫu thuốc, chế tạo viên nén mô hình chứa Sildenafil citrate có hàm lƣợng thay đổi dựa thành phần công bố in bao bì mẫu thuốc Activ-gra, Siloflam50 Majegra-50 Sau đo phổ viên nén mô hình đƣợc xây dựng, đặt tên lƣu liệu phổ phân tích, thiết lập đƣờng chuẩn dựa phổ đo đƣợc nhờ phần mềm Method Generator cho công thức ● Thẩm định đƣợc quy trình định lƣợng xây dựng cách đánh giá đƣợc độ tuyến tính, độ đặc hiệu, độ đúng, độ lặp lại, độ xác trung gian quy trình vừa thiết lập Kết đánh giá đáp ứng yêu cầu chất lƣợng với phƣơng pháp thử ● Đã định lƣợng đƣợc hàm lƣợng Sildenafil mẫu thuốc Activ-gra, Siloflam-50, Majegra-50 Kết định lƣợng nằm giới hạn cho phép với hàm lƣợng Sildenafil đo đƣợc so với hàm lƣợng Sildenafil ghi nhãn (%) lần lƣợt 97,77%; 96,65%; 97,55% KIẾN NGHỊ - Tiếp tục nghiên cứu để ứng dụng phƣơng pháp quang phổ cận hồng ngoại việc kiểm soát chất lƣợng thuốc 43 - Tiếp tục nghiên cứu ứng dụng phƣơng pháp quang phổ cận hồng ngoại định lƣợng chế phẩm khác chứa Sildenafil nhiều hoạt chất lƣu hành thị trƣờng 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO A Tiếng Việt Lê Thị Quỳnh Nga (2011), Xây dựng phương pháp phân tích phát số chất ức chế men phosphodiesterase – trộn trái phép thuốc đông dược thực phẩm chức năng, Luận văn thạc sĩ dƣợc học, Trƣờng Đại Học Dƣợc Hà Nội B Tiếng Anh Alcala Manel, Leon Joshua, Ropero Jorge, Blanco Marcelo, Romanach Rodolfo J (2008), "Analysis of Low Content Drug Tablets by Transmission Near Infrared Spectroscopy: Selection of Calibration Ranges According to Multivariate Detection and Quantitation Limits of PLS Models", Journal of pharmaceutical sciences, 97(12), pp 5318-5327 Bristish Pharmacopeia (2014) Cai Wensheng, Li Yankun, Shao Xueguang (2008), "A variable selection method based on uninformative variable elimination for multivariate calibration of near-infrared spectra", Chemometrics and Intelligent Laboratory Systems 90, pp 188-194 D A Burns and E W Ciurczak (eds.) (1992), Handbook of Near-Infrared Anaylsis, Marcel Dekker, New York Dowell Floyd E., Maghirang Elizabeth B., Fernandez Facundo M., Newton Paul N., Green Michael D (2008), "Detecting counterfeit antimalarial tablets by near-infrared spectroscopy", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 48, pp 1011–1014 45 Dubois Janie, Wolff Jean-Claude, Warrack John K., Schoppelrei Joseph, Lewis E Neil (2007), "NIR Chemical Imaging for Counterfeit Pharmaceutical Products Analysis", Spectroscopy, 22(2), pp 40-50 E Smith and G Dent (2005), Modern Raman Spectroscopy — A Practical Approach, John Wiley & Sons, Chichester H.W Siesler, Y Ozaki, S Kawata, and H M Heise (eds.) (2002), NearInfrared Spectroscopy, Wiley-VCH, Weinheim 10 J Chalmers and P R Griffiths (eds.) (2002), Handbook of Vibrational Spectroscopy, JohnWiley & Sons Ltd., Chichester 11 Jie W, Ming P, Jin L, Wei Z, & Hai-xia T (2004), “ Identification of sildenafil in medicinal substances and in traditional Chinese medicines by infrared spectrophotometry”, Central South Pharmacy, 3, 005 12 Luypaert J., Massart D.L., Heyden Y Vander (2007), "Near-infrared spectroscopy applications in pharmaceutical analysis", Talanta, 72, pp 865-883 13 Merck & Co JNC (2006), The Merck Index, 14th edition, pp 8558-8567 14 Ni Zhen, Feng Yan-Chun, Hu Chang-Qin (2011), "Analyzing the Methods to Remove Artifacts Encountered in the Development of a NIR Quantitative Model for Powder Medicines", J Anal Bioanal Techniques, 1(3), pp 1-7 15 P R Griffiths and J A de Haseth (1986), Fourier Transform Infrared Spectrometry, Wiley-Interscience, New York 16 Peinder P de, Vredenbregt M.J., Visser T., D.deKaste (2008), "Detection of Lipitor® counterfeits: A comparison of NIR and Raman spectroscopy in combination with chemometrics", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 47 (2008) 688–694, 47, pp 688-694 46 17 Pojić Milica, Mastilović Jasna, Majcen Nineta (2012), "The Application of Near Infrared Spectroscopy in Wheat Quality Control", Infrared Spectroscopy – Life and Biomedical Sciences, ISBN 978-953-51-0538-1, pp 167-185 18 R Kramer (1998), Chemometric Techniques for Quantitative Analysis, Marcel Dekker, New York 19 Rodionova Oxana Ye., Houmøller Lars P., Pomerantsev Alexey L., Geladi Paul, Burger James, Dorofeyev Vladimir L., Arzamastsev Alexander P (2005), "NIR spectrometry for counterfeit drug detection: A feasibility study", Analytica Chimica Acta, 549, pp 151-158 20 Rodionova O.Ye., Pomerantsev A.L (2010), "NIR-based approach to Trends counterfeit-drug detection", Trends in Analytical Chemistry, 29(8), pp 795-803 21 Samuel R Gatz, PhD (2007), E.D Drugs and analogs: Charactriation of phosphodiesterase – inhibitor in suspect Couterfeit and herbal products, USP Annual Scientific Meeting 22 Scafi Sérgio Henrique Frasson, Pasquini Celio (2001), "Identification of counterfeit drugs using near-infrared spectroscopy", Analyst, 126, pp 22182224 23 USP 38 (2014) 24 Vredenbregt M.J., Blok-Tip L., Hoogerbrugge R., Barends D.M., Kaste D de (2006), "Screening suspected counterfeit Viagra® and imitations of Viagra® with near-infrared spectroscopy", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 40, pp 840-849 25 Zhangn Chao, JinghuaSu (2014), "Application of near-infrared spectroscopy to the analysis and fast quality assessment of traditional Chinese medicinal products", Acta PharmaceuticaSinicaB, 4(3), pp 182-192 47 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Kết hàm lượng (%) Sildenafil citrat chuẩn đo viên mô hình mẫu thuốc Activ-gra, Siloflam-50, Majegra-50 Công thức viên mô hình Công thức viên mô hình Công thức viên mô hình Activ-gra Hàm Hàm lƣợng lƣợng xây đo dựng đƣợc (%) (%) 5,02 5,12 5,02 Siloflam-50 Hàm Hàm lƣợng lƣợng xây đo dựng đƣợc (%) (%) 102,02 10,02 9,86 5,03 100,14 10,02 5,02 5,12 101,93 5,02 5,12 5,02 Majegra-50 Hàm Hàm lƣợng lƣợng xây đo dựng đƣợc (%) (%) 98,43 5,04 5,11 101,37 9,99 99,75 5,04 5,06 100,31 10,02 10,17 101,46 5,04 5,04 100,02 101,93 10,02 9,98 99,55 5,04 4,96 98,42 5,11 101,89 10,02 9,96 99,43 5,04 5,08 100,74 5,02 4,93 98,27 10,02 10,21 101,92 5,04 5,02 99,61 5,02 4,96 98,72 10,02 10,19 101,66 5,04 5,11 101,33 5,02 5,12 102,08 10,02 10,15 101,30 5,04 5,06 100,48 5,02 5,11 101,83 10,02 10,19 101,65 5,04 5,05 100,13 5,02 4,97 98,94 10,02 10,01 99,86 5,04 5,11 101,41 5,02 5,02 99,92 10,02 9,96 99,35 5,04 4,99 98,98 5,02 5,12 102,08 10,02 9,96 99,42 5,04 5,02 99,53 5,02 5,12 101,98 10,02 9,95 99,32 5,04 5,02 99,63 5,02 5,12 102,08 10,02 9,97 99,46 5,04 5,09 101,05 % Thu hồi % Thu hồi % Thu hồi 48 5,02 5,08 101,19 10,02 9,86 98,45 5,04 5,11 101,30 5,02 4,98 99,27 10,02 10,07 100,52 5,04 4,96 98,48 5,02 4,95 98,52 10,02 10,18 101,58 5,04 4,97 98,59 5,02 4,93 98,17 10,02 10,15 101,26 5,04 5,06 100,33 5,02 4,99 99,32 10,02 10,18 101,56 5,04 5,03 99,73 5,02 5,04 100,45 10,02 10,09 100,71 5,04 4,99 98,95 5,02 4,96 98,87 10,02 9,86 98,42 5,04 4,98 98,88 5,02 4,94 98,44 10,02 9,88 98,56 5,04 5,01 99,41 5,02 4,98 99,13 10,02 10,14 101,18 5,04 4,99 98,97 5,02 5,05 100,64 10,02 9,88 98,64 5,04 5,03 99,88 5,02 4,96 98,74 10,02 10,18 101,63 5,04 4,96 98,46 15,03 15,25 101,44 20,02 19,95 99,63 15,01 14,98 99,83 15,03 15,28 101,68 20,02 19,89 99,33 15,01 15,31 102,00 15,03 15,26 101,56 20,02 19,86 99,19 15,01 15,07 100,40 15,03 15,11 100,55 20,02 19,91 99,44 15,01 15,23 101,47 15,03 15,26 101,52 20,02 19,99 99,84 15,01 14,87 99,05 15,03 14,97 99,58 20,02 19,88 99,32 15,01 14,94 99,53 15,03 14,99 99,72 20,02 20,01 99,94 15,01 15,10 100,58 15,03 15,01 99,85 20,02 19,90 99,39 15,01 15,21 101,34 15,03 14,90 99,14 20,02 19,88 99,31 15,01 15,06 100,36 15,03 14,90 99,12 20,02 19,92 99,50 15,01 15,31 101,97 15,03 14,90 99,10 20,02 20,23 101,05 15,01 14,84 98,89 15,03 14,86 98,90 20,02 20,11 100.43 15,01 15,29 101,84 15,03 14,95 99,48 20,02 19,93 99,54 15,01 15,02 100,07 49 15,03 15,32 101,92 20,02 19,87 99,25 15,01 14,99 99,83 15,03 15,31 101,87 20,02 20,30 101,42 15,01 15,00 99,95 15,03 14,80 98,45 20,02 19,94 99,60 15,01 15,05 100,26 15,03 14,78 98,34 20,02 20,34 101,62 15,01 14,85 98,97 15,03 15,02 99,93 20,02 19,86 99,18 15,01 15,20 101,28 15,03 15,03 100,01 20,02 19,91 99,43 15,01 14,87 99,10 15,03 15,19 101,05 20,02 19,95 99,67 15,01 15,18 101,12 15,03 15,23 101,35 20,02 19,90 99,40 15,01 14,84 98,89 15,03 15,22 101,29 20,02 19,88 99,29 15,01 15,12 100,71 15,03 15,32 101,95 20,02 19,90 99,39 15,01 15,04 100,21 15,03 14,78 98,37 20,02 20,04 100,11 15,01 15,07 100,39 15,03 14,78 98,37 20,02 19,93 99,56 15,01 15,21 101,33 25,03 25,02 99,97 29,99 29,88 99,64 25,05 25,34 101,18 25,03 24,82 99,14 29,99 30,04 100,18 25,05 25,28 100,90 25,03 24,58 98,20 29,99 29,62 98,76 25,05 25,16 100,43 25,03 24,62 98,35 29,99 30,40 101,38 25,05 25,01 99,86 25,03 25,53 100,98 29,99 29,76 99,24 25,05 25,46 101,63 25,03 25,17 100,55 29,99 30,38 101,29 25,05 24,61 98,25 25,03 25,19 100,62 29,99 29,86 99,55 25,05 24,59 98,16 25,03 25,22 100,75 29,99 30,31 101,08 25,05 24,58 98,12 25,03 25,09 100,26 29,99 30,15 100,53 25,05 25,08 100,12 25,03 25,12 100,38 29,99 30,21 100,73 25,05 24,70 98,58 25,03 24,69 98,64 29,99 30,00 100,04 25,05 25,54 101,94 25,03 24,84 99,23 29,99 30,26 100,91 25,05 25,26 100,85 50 25,03 24,88 99,4 29,99 30,22 100,76 25,05 25,47 101,69 25,03 25,03 99,99 29,99 30,31 101,05 25,05 25,36 101,22 25,03 24,79 99,06 29,99 30,34 101,15 25,05 25,52 101,89 25,03 25,13 100,41 29,99 29,67 98,94 25,05 24,96 99,66 25,03 24,69 98,66 29,99 29,97 99,92 25,05 24,68 98,50 25,03 25,10 100,27 29,99 30,35 101,20 25,05 24,84 99,14 25,03 24,67 98,55 29,99 30,13 100,48 25,05 24,89 99,37 25,03 24,99 99,84 29,99 30,30 101,04 25,05 24,94 99,57 25,03 25,35 101,28 29,99 30,25 100,85 25,05 24,74 98,74 25,03 25,40 101,48 29,99 30,29 101,02 25,05 24,79 98,94 25,03 25,53 101,99 29,99 30,40 101,38 25,05 24,96 99,66 25,03 25,44 101,63 29,99 30,20 100,70 25,05 25,23 100,70 25,03 25,11 100,34 29,99 30,35 101,19 25,05 24,66 98,46 35,01 35,35 100,98 40,00 39,34 98,35 34,99 34,59 98,85 35,01 35,53 101,48 40,00 39,61 99,03 34,99 34,45 98,45 35,01 34,67 99,02 40,00 39,66 99,14 34,99 34,39 98,29 35,01 35,66 101,84 40,00 39,75 99,38 34,99 34,41 98,35 35,01 35,48 101,34 40,00 39,51 98,76 34,99 35,10 100,31 35,01 34,76 99,29 40,00 40,55 101,36 34,99 34,37 98,23 35,01 34,42 98,32 40,00 39,97 99,91 34,99 34,43 98,41 35,01 34,85 99,54 40,00 40,26 100,65 34,99 34,82 99,52 35,01 34,52 98,59 40,00 40,64 101,60 34,99 34,83 99,53 35,01 34,99 99,95 40,00 40,61 101,54 34,99 34,89 99,72 35,01 35,32 100,88 40,00 40,04 100,09 34,99 35,23 100,70 51 35,01 35,35 100,97 40,00 40,40 100,99 34,99 34,83 99,53 35,01 35,58 101,64 40,00 40,17 100,42 34,99 35,07 100,22 35,01 35,23 100,64 40,00 40,41 101,02 34,99 35,09 100,29 35,01 35,30 100,83 40,00 40,64 101,59 34,99 35,28 100,84 35,01 35,25 100,68 40,00 40,06 100,14 34,99 35,45 101,32 35,01 34,87 99,59 40,00 39,21 98,03 34,99 35,37 101,09 35,01 34,81 99,42 40,00 40,14 100,35 34,99 35,07 100,23 35,01 35,44 101,23 40,00 40,22 100,54 34,99 35,19 100,56 35,01 34,98 99,93 40,00 40,65 101,63 34,99 35,19 100,58 35,01 34,54 98,66 40,00 39,91 99,79 34,99 35,47 101,36 35,01 35,07 100,18 40,00 39,30 98,25 34,99 35,32 100,95 35,01 34,43 98,33 40,00 39,92 99,80 34,99 34,96 99,92 35,01 34,47 98,45 40,00 40,71 101,78 34,99 35,02 100,09 35,01 34,42 98,32 40,00 39,76 99,39 34,99 35,19 100,59 45,00 44,90 99,78 49,99 49,89 99,80 45,03 45,51 101,06 45,00 44,20 98,22 49,99 50,33 100,68 45,03 45,01 99,97 45,00 45,25 100,56 49,99 49,54 99,10 45,03 44,98 99,89 45,00 44,36 98,57 49,99 50,01 100,05 45,03 44,89 99,70 45,00 44,76 99,46 49,99 50,68 101,38 45,03 45,46 100,95 45,00 45,25 100,55 49,99 49,70 99,43 45,03 45,02 99,98 45,00 44,63 99,17 49,99 49,87 99,76 45,03 44,59 99,01 45,00 44,64 99,19 49,99 49,70 99,43 45,03 44,48 98,79 45,00 44,74 99,43 49,99 49,52 99,05 45,03 44,85 99,61 45,00 45,55 101,23 49,99 49,49 99,01 45,03 44,54 98,92 52 45,00 44,34 98,54 49,99 50,10 100,21 45,03 45,21 100,40 45,00 44,78 99,50 49,99 50,04 100,10 45,03 44,92 99,75 45,00 44,64 99,19 49,99 50,26 100,54 45,03 44,82 99,54 45,00 45,61 101,36 49,99 50,95 101,91 45,03 45,28 100,55 45,00 45,44 100,97 49,99 50,39 100,81 45,03 45,26 100,52 45,00 45,16 100,36 49,99 50,29 100,60 45,03 45,21 100,41 45,00 44,63 99,17 49,99 50,75 101,52 45,03 44,97 99,86 45,00 44,64 99,20 49,99 49,56 99,15 45,03 44,93 99,78 45,00 45,28 100,62 49,99 49,50 99,02 45,03 45,06 100,07 45,00 44,29 98,43 49,99 50,86 101,74 45,03 44,57 98,98 45,00 45,85 101,88 49,99 50,37 100,77 45,03 45,62 101,30 45,00 45,46 101,02 49,99 49,46 98,93 45,03 45,28 100,57 45,00 45,65 101,44 49,99 49,02 98,05 45,03 45,35 100,71 45,00 45,72 101,59 49,99 49,21 98,45 45,03 45,38 100,79 45,00 45,63 101,39 49,99 50,45 100,92 45,03 44,80 99,48 Phụ lục 2: Hình ảnh phổ NIR viên mô hình Sildenafil 53 Phụ lục 3:Bước tiến hành xây dựng đường chuẩn viên nén mô hình Sildenafil 54 [...]... cầu cấp thiết trên Sau quá trình tìm hiểu, tôi đã chọn đề tài: Định lượng Sildenafil trong một số viên nén trên thị trường bằng máy quang phổ cận hồng ngoại (NIR) cầm tay làm đề tài cho báo cáo khóa luận tốt nghiệp của mình Đề tài có 3 mục tiêu nhƣ sau: 1 Xây dựng đƣợc quy trình định lƣợng Sildenafil 2 Thẩm định quy trình định lƣợng đã xây dựng 3 Ứng dụng phân tích một số chế phẩm trên thị trƣờng 3... 400mg - Xây dựng 03 viên placebo cho mỗi mẫu phân tích - Dập viên theo quy trình sau: 22 Hình 2.1.Sơ đồ dập viên 2.4.1.2 Định lượng Sildenafil citrat bằng phương pháp quang phổ cận hồng ngoại - Thiết bị: 23 Hình 2.2 Thiết bị NIR + Máy quang phổ cận hồng ngoại cầm tay Micro PHAZIR, khoa Vật lý – Đo lƣờng, Viện Kiểm nghiệm thuốc TW + Chế độ đo: Phản xạ khuếch tán, thu phổ trực tiếp trên viên + Dải đo: 6250... hay dùng và sản phẩm trên thị trường - Dạng viên nén bao phim là chủ yếu - Các sản phẩm chứa Sildenafil lƣu hành trên thị trƣờng: + Viagra 25mg, 50mg, 100mg + Activ-gra, Siloflam-50, Majegra-50 1.1.4 Các phương pháp định tính, định lượng thông thường - Định tính: Phƣơng pháp phổ hồng ngoại Phổ hồng ngoại của mẫu thử phải phù hợp với phổ chuẩn của Sildenafil citrate hoặc với phổ của Sildenafil citrate... cơ bản của phương pháp quang phổ NIR Bức xạ cận hồng ngoại (NIR) là các bức xạ có bƣớc sóng từ 780 nm đến 2500 nm nằm trong vùng hồng ngoại [3], [5], [23] Phổ cận hồng ngoại là phổ dao động phân tử, nó khác với phổ Raman và phổ hồng ngoại giữa (MIR) [8], [10] Để tìm hiểu chi tiết về phổ NIR, chúng ta cùng tìm hiểu về mô hình dao động của các nguyên tử trong phân tử Các liên kết trong phân tử có các kiểu...2 Cùng với sự phát triển của khoa học, kỹ thuật, phƣơng pháp quang phổ cận hồng ngoại ngày càng đƣợc ứng dụng rộng rãi, đặc biệt ở một số nƣớc nhƣ Mỹ, Pháp, Singapore nó đã trở thành một trong những công cụ hữu hiệu để định lƣợng các chế phẩm thuốc trên thị trƣờng Phƣơng pháp quang phổ cận hồng ngoại đƣợc biết đến là kỹ thuật mới mang những ƣu điểm nhƣ phân tích nhanh, ít phá... bản chất phổ và kỹ thuật đo phổ, phƣơng pháp phân tích phổ NIR có một số ứng dụng điển hình sau: 16 Bảng 1.1.Ứng dụng phổ NIR trong ngành Dược Định tính Định lƣợng + Định tính nguyên liệu, tá dƣợc, bao + Xác định độ ẩm trong nguyên liệu, bì đựng thành phẩm + Nhận dạng thành phẩm thuốc ở dạng + Xác định hàm lƣợng dƣợc chất, tá dƣợc phân liều ở dạng bào chế + Định tính dƣợc chất trong các dạng + Định lƣợng... 2.3.3 Khảo sát định lượng một số chế phẩm trên thị trường Khảo sát với 3 chế phẩm Activ-gra, Siloflam-50, Majegra-50 2.4 Phƣơng pháp tiến hành 2.4.1 Xây dựng quy trình phân tích 2.4.1.1 Xây dựng các viên nén mô hình - Với mỗi mẫu, xây dựng các viên nén mô hình có hàm lƣợng Sildenafil thay đổi xung quanh hàm lƣợng viên thực tế trên các nền placebo tƣơng ứng Với mỗi hàm lƣợng chế tạo 05 viên có khối lƣợng... 1.6 Máy quang phổ NIR đo truyền qua Hình 1.7 Máy quang phổ NIR đo phản xạ 1.2.4.2 Nguyên tắc hoạt động 14 Nguyên tắc hoạt động chung của máy quang phổ NIR cũng tƣơng tự nhƣ máy quang phổ MIR Chùm tia sáng từ nguồn đi vào hệ quang đƣợc tách thành các dải phổ đơn sắc hoặc đƣợc biến điệu thành các đặc trƣng riêng cho mỗi loại tia đơn sắc Sau khi qua hệ quang, bức xạ này đƣợc chia làm hai phần bằng gƣơng... hành: + Đo phổ các viên mô hình của mẫu đang cần định lƣợng, ở mỗi hàm lƣợng đo 05 viên, mỗi viên đo 05 lần + Lƣu dữ liệu các phổ phân tích + Dựa trên phổ NIR thu đƣợc thiết lập đƣờng chuẩn thông qua phần mềm Method Generator + Từ đƣờng chuẩn thiết lập trên, đo và xác định hàm lƣợng % (kl/kl) Sildenafil citrat trong mỗi viên thử , từ đó tính ra hàm lƣợng thực tế của viên so với hàm lƣợng ghi trên nhãn... (MLR) - Đo phổ mẫu thử, sử dụng đƣờng tuyến tính để xác định hàm lƣợng thành phần cần phân tích trong mẫu đo - Trong quá trình thiết lập đƣờng chuẩn cần chú ý một số vấn đề sau: + Chọn khoảng phổ thích hợp: Nên chọn khoảng phổ mà đáp ứng của chất phân tích là tốt nhất Có thể chọn bằng cách so sánh phổ chất phân tích với phổ nền mẫu hoặc bằng đạo hàm bậc 2, bậc 3 của phổ chất phân tích + Lựa chọn số điểm