Kỹ thuật làm tiêu bản KST SR

PHƯƠNG PHÁP LÀM TIÊU BẢN MÁU ĐÀN, GIỌT ĐẶC MỤC TIÊU Sau học xong, học viên có khả năng: Trình bày phương pháp làm tiêu máu giọt đàn, giọt đặc Tiến hành kỹ thuật làm tiêu máu giọt đàn, giọt đặc từ máu ngoại vi Tiến hành kỹ thuật nhuộm giemsa Nhận định kết làm tiêu NỘI DUNG Kỹ thuật làm tiêu máu ngoại vi, tìm ký sinh trùng sốt rét Kỹ thuật nhuộm tiêu Giemsa Làm tiêu máu ngoại vi CHUẨN BỊ -Bông -Cồn -Kim chích Lam kính Lam kéo Giá lam Bút ghi kính Phiếu xét nghiệm Chuẩn bị đủ dụng cụ, hóa chất Ghi phiếu XN Sát khuẩn vị trí lấy máu Chích máu Lấy máu làm tiêu Kéo lam giọt đàn Đánh máu giọt đặc Làm khô tiêu ghi số hiệu lam máu Đóng gói ghi thông tin bao gói Xử lý dụng cụ, chất thải Tiến hành Chuẩn bị dụng cụ, hóa chất, bệnh nhân Lấy máu tìm KST SR tốt bệnh nhân lên sốt Ghi phiếu xét nghiệm Hỏi BN ghi đầy đủ mục cần thiết Sát khuẩn vị trí lấy máu Chích máu  Chích nhanh, dứt khoát, sâu khoảng 1,5 – 2mm  Dùng khô lau bỏ giọt máu đầu Động tác chích máu Tiến hành Lấy máu làm tiêu • Lấy giọt máu đầu que diêm (khoảng 12mm3) vào lam để làm giọt đàn • Lấy giọt máu giọt khoảng 1mm3 giọt máu tương đương 3mm3 vào 1/4 lam lại để làm giọt đặc Tiến hành Kéo lam giọt đàn • Đặt lam kéo chạm phía trước giọt máu, nghiêng góc khoảng 300- 450 • Chờ máu lan cách mép lam khoảng 2mm • Giữ nguyên góc độ đẩy nhẹ lam kéo phía trái Tiến hành Đánh máu giọt đặc Dùng góc lam đánh giọt máu theo chiều từ đến giọt máu dàn đều, có kích thước khoảng 1cm, không đánh động tác 2 Tiến hành Làm khô tiêu ghi số hiệu lam máu • Để khô tự nhiên • Dùng bút chì ghi số hiệu lam ngày lấy máu vào phần đầu (dày) giọt máu đàn Ghi SHM ngày lấy máu Đuôi Đầu Tiến hành Đóng gói • Ghi đủ mục cần thiết phiếu xét nghiệm • Gói lam máu (chú ý: giọt máu khô hẳn gói) • Bên ghi đủ mục sau: số lượng lam, người gửi, ngày gửi, nơi gửi, nơi nhận 10 Xử lý dụng cụ, chất thải Theo quy định thu dọn sẽ, gọn gàng Yêu cầu kỹ thuật • Vị trí: - Giọt đặc: tâm giọt đặc nằm ¼ lam kính - Giọt đàn: đầu giọt máu lam kính • Kích thước: - Giọt đặc: đường kính khoảng cm - Giọt đàn: dài khoảng - 2,5 cm; cách mép lam khoảng 2mm Yêu cầu kỹ thuật • Độ dày mỏng: đánh giá xác soi kính hiển vi vật kính 100x - Giọt đặc: trung bình vi trường có 15 – 20 bạch cầu - Giọt đàn: có lớp hồng cầu xếp sát đặn • Độ đồng đều: - Giọt đặc: dàn đồng đều, không bị đông - Giọt đàn: đồng đều, mỏng dần phía đuôi, không loang lổ, không sóng, không xước Nhuộm tiêu máu – Nhuộm Giemsa Chuẩn bị - dụng cụ - Ống Đong có chia độ với nhiều loại khác nhau: 10ml, 50ml, 100ml – Ống hút nhỏ giọt – Cốc nhỏ 50 – 250ml – Khay – Giá nhuộm tiêu bình nhuộm – Giá đựng lam kính – Đồng hồ báo phút - Bút ghi kính… Chuẩn bị - hóa chất - Thuốc nhuộm Giemsa – Methanol – Dung dịch đệm (dung dịch phosphat, pH = 7,2) gồm có: 0,7g KH2PO4 1,0 g Na2HPO4 Nước cất lít Hòa tan, thử pH Chỉnh pH = 7,2 dd KH2PO4 2% Na2HPO4 2% Thời hạn sử dụng dung dịch đệm vài tuần Khi thấy có cặn bỏ Chuẩn bị - hóa chất - Thuốc nhuộm Giemsa – Methanol – Dung dịch đệm (dung dịch phosphat, pH = 7,2) gồm có: 0,7g KH2PO4 1,0 g Na2HPO4 Nước cất lít Hòa tan, thử pH Chỉnh pH = 7,2 dd KH2PO4 2% Na2HPO4 2% Thời hạn sử dụng dung dịch đệm vài tuần Khi thấy có cặn bỏ Quy trình nhuộm thường quy Làm tiêu máu giọt đàn, giọt đặc Để khô Cố định giọt đàn cồn methanol Để khô Nhuộm thường quy: - Pha dung dịch nhuộm Giemsa 3% (3 giemsame: 97 dung dịch đệm) - Phủ dd nhuộm kín vùng bệnh phẩm - Để 30-45 phút - Rửa nhẹ nhàng - Để khô Quy trình nhuộm nhanh Như quy trình thường quy Dung dịch nhuộm giemsa 10% Thời gian nhuộm 5-10 phút NHẬN XÉT TIÊU BẢN NHUỘM - Tiêu sạch, không cặn, không bụi - Hồng cầu bắt màu xanh tím xanh da trời, có màu hồng nhạt - Nếu có hồng cầu bị nhiễm KST SR, thấy có hạt sắc tố hạt đặc hiệu (hạt Schuffner, hạt Maurer) - Bạch cầu rõ nhân NSC - KST SR có hình thể rõ ràng: nhân thường bắt màu đỏ sẫm đỏ tía, tế bào chất bắt màu xanh lơ, hạt sắc tố ký sinh trùng bắt màu tím sẫm màu nâu đen Xin trân trọng cảm ơn! [...]... quy 1 Làm tiêu bản máu giọt đàn, giọt đặc Để khô 2 Cố định giọt đàn bằng cồn methanol Để khô 3 Nhuộm thường quy: - Pha dung dịch nhuộm Giemsa 3% (3 giemsame: 97 dung dịch đệm) - Phủ dd nhuộm kín vùng bệnh phẩm - Để 30-45 phút - Rửa nhẹ nhàng - Để khô Quy trình nhuộm nhanh 1 Như quy trình thường quy 2 Dung dịch nhuộm là giemsa 10% 3 Thời gian nhuộm là 5-10 phút NHẬN XÉT TIÊU BẢN NHUỘM - Tiêu bản sạch,... đồng đều, không bị đông - Giọt đàn: đồng đều, mỏng dần về phía đuôi, không loang lổ, không sóng, không xước Nhuộm tiêu bản máu – Nhuộm Giemsa Chuẩn bị - dụng cụ - Ống Đong có chia độ với nhiều loại khác nhau: 10ml, 50ml, 100ml – Ống hút nhỏ giọt – Cốc nhỏ 50 – 250ml – Khay – Giá nhuộm tiêu bản hoặc bình nhuộm – Giá đựng lam kính – Đồng hồ báo phút - Bút ghi kính… Chuẩn bị - hóa chất - Thuốc nhuộm Giemsa... nhận 10 Xử lý dụng cụ, chất thải Theo đúng quy định và thu dọn sạch sẽ, gọn gàng Yêu cầu kỹ thuật • Vị trí: - Giọt đặc: tâm giọt đặc nằm đúng giữa ¼ lam kính - Giọt đàn: đầu giọt máu ở giữa lam kính • Kích thước: - Giọt đặc: đường kính khoảng 1 cm - Giọt đàn: dài khoảng 2 - 2,5 cm; cách mép lam khoảng 2mm Yêu cầu kỹ thuật • Độ dày mỏng: được đánh giá chính xác nhất khi soi trên kính hiển vi ở vật kính... TIÊU BẢN NHUỘM - Tiêu bản sạch, không cặn, không bụi - Hồng cầu bắt màu xanh tím hoặc xanh da trời, hoặc có màu hồng nhạt - Nếu có hồng cầu bị nhiễm KST SR, thấy có những hạt sắc tố và hạt đặc hiệu (hạt Schuffner, hạt Maurer) - Bạch cầu rõ nhân và NSC - KST SR có hình thể rõ ràng: nhân thường bắt màu đỏ sẫm hoặc đỏ tía, tế bào chất bắt màu xanh lơ, hạt sắc tố của ký sinh trùng bắt màu tím sẫm hoặc màu... trái 2 Tiến hành 7 Đánh máu giọt đặc Dùng một góc lam đánh đều giọt máu theo một chiều từ trong ra ngoài đến khi giọt máu dàn đều, có kích thước khoảng 1cm, không đánh quá 6 động tác 2 Tiến hành 8 Làm khô tiêu bản và ghi số hiệu lam máu • Để khô tự nhiên • Dùng bút chì ghi số hiệu lam và ngày lấy máu vào phần đầu (dày) của giọt máu đàn Ghi SHM và ngày lấy máu Đuôi Đầu 2 Tiến hành 9 Đóng gói • Ghi đủ các