Xác định sự lưu hành của vi khuẩn salmonella spp ở lợn nái và lợn con tại một số trại chăn nuôi công nghiệp ở tỉnh thái nguyên và biện pháp phòng trị

82 I HC THI NGUYấN TRNG I HC NễNG LM Nguyễn Thị Nguyệt Tờn ti Xác định lu hành vi khuẩn Salmonella spp lợn nái lợn số trại chăn nuôi công nghiệp tỉnh Thái Nguyên biện pháp phòng trị Chuyờn ngnh: Thỳ y Mó s: 60.62.50 LUN VN THC S KHOA HC NễNG NGHIP Ngi hng dn khoa hc: PGS.TS ng Xuõn Bỡnh THI NGUYấN, 2012 74 i LI CAM OAN Tụi xin cam oan õy l cụng trỡnh nghiờn cu ca riờng tụi Cỏc s liu, kt qu nờu lun l trung thc v cha tng c cụng b bt kỡ cụng trỡnh no khỏc Tụi xin cam oan rng cỏc thụng tin trớch dn lun u ó c ch rừ ngun gc Thỏi Nguyờn, ngy thỏng 10 nm 2012 Tỏc gi Nguyn Th Nguyt ii 75 LI CM N hon thnh lun ny, cựng vi s l lc c gng ca bn thõn, tụi xin c c bit by t lũng bit n sõu sc ti thy: PGS.TS ng Xuõn Bỡnh, ngi ó trc tip hng dn tụi quỏ trỡnh nghiờn cu v hon thnh l un Tụi xin c chõn thnh cm n ti cỏc thy cụ giỏo Khoa Chn nuụi Thỳ y; Trng i hc Nụng Lõm Thỏi Nguyờn ó tn tỡnh giỳp v to mi iu kin cho tụi hon thnh lun ny Tụi xin cm n Ban lónh o vin Khoa hc s sng, cỏc thy cụ, cỏc anh, ch, em B mụn Cụng ngh vi sinh - Vin Khoa hc s sng - trng i hc Nụng Lõm Thỏi Nguyờn v B mụn vi trựng - Vin Thỳ y quc gia ó giỳp tụi quỏ trỡnh hon thnh lun ny V c bit l gia ỡnh ó to mi iu kin thun li nht giỳp tụi quỏ trỡnh thc hin ti Thỏi Nguyờn, ngy thỏng 10 nm 2012 Nguyn Th Nguyt 76 iii MC LC Trang Li cam oan i Li cm n ii Mc lc iii Danh mc cỏc t vit tt .vii Danh mc cỏc bng viii M U 1 t Mc tiờu nghiờn cu í ngha khoa hc v thc tin ca ti 3.1 í ngha khoa hc 3.2 í ngha thc tin Chng TNG QUAN TI LIU 1.1 Tỡnh hỡnh nghiờn cu bnh phú thng hn v ngoi nc 1.1.1 Tỡnh hỡnh nghiờn cu trờn th gii 1.1.2 Tỡnh hỡnh nghiờn cu nc 1.2 c tớnh sinh vt húa hc ca vi khun Salmonella 10 1.2.1 c im hỡnh thỏi 10 1.2.2 Tớnh cht nuụi cy 11 1.2.3 c tớnh sinh hoỏ 12 1.2.4 Sc khỏng ca vi khun Salmonella 12 1.2.5 Mt s c im dch t bnh vt nuụi Salmonella gõy 13 1.2.6 Cu trỳc khỏng nguyờn ca vi khun Salmonella 14 1.2.7 Cỏc yu t gõy bnh ca vi khun Salmonella 16 1.2.7.1 Cỏc yu t khụng phi l c t 16 1.2.7.2 Cỏc yu t l c t 19 1.3 Bnh vi khun Salmonella gõy ln 22 1.3.1 c tớnh sinh bnh 22 77 iv 1.3.2 Th nhim trựng huyt S choleraesuis var kunzendorf gõy 23 1.3.3 Th viờm rut S typhimurium 24 1.4 Bin phỏp phũng tr bnh Salmonella gõy ln 28 1.4.1 Phũng bnh 28 1.4.2 iu tr bnh 28 1.5 Bờ nhim Salmonella 29 1.6 G nhim Salmonella 29 1.7 Ng c thc phm ngi Salmonella 30 Chng NI DUNG, VT LIU V PHNG PHP NGHIấN CU 31 2.1 i tng, thi gian v a im nghiờn cu 31 2.1.1 i tng 31 2.1.2 Thi gian v a im 31 2.2 Vt liu nghiờn cu 31 2.2.1 Mu dựng phõn lp vi khun 31 2.2.2 ng vt thớ nghim 31 2.2.3 Hoỏ cht v dng c nghiờn cu 31 2.2.3.1 Hoỏ cht dựng nhum Gram 31 2.2.3.2 Hoỏ cht dựng th phn ng sinh hoỏ 31 2.2.4 Mụi trng nuụi cy, phõn lp vi khun 32 2.2.5 Dng c thớ nghim 32 2.3 Ni dung nghiờn cu 32 2.3.1 Nghiờn cu c im thi tr ca vi khun Salmonella spp ln nỏi v ln sau cai sa; 32 2.3.2 Phõn lp Salmonella t mu phõn ln nỏi, ln sau cai sa kho v ln sau cai sa nghi mc bnh PTH; 32 2.3.3 Xỏc nh mt s c tớnh sinh vt húa hc, serotyp v xỏc nh kh nng mn cm khỏng sinh ca cỏc chng vi khun phõn lp c 32 2.3.4 Xỏc nh c lc ca cỏc chng vi khun phõn lp c trờn chut bch 32 78 v 2.4 Phng phỏp nghiờn cu 32 2.4.1 Phng phỏp iu tra dch t 32 2.4.2 Phng phỏp nuụi cy, phõn lp v xỏc nh vi khun Salmonella 33 2.4.2.1 Nuụi cy, phõn lp 33 2.4.2.2 Phng phỏp xỏc nh cỏc c tớnh sinh vt, hoỏ hc ca vi khun Salmonella 35 2.4.3 Phng phỏp th c lc trờn chut bch 36 2.4.4 nh type huyt hc cỏc chng Salmonella phõn lp c bng phn ng ngng kt nhanh trờn phin kớnh 36 2.4.5 Xỏc nh tớnh mn cm vi mt s khỏng sinh ca cỏc chng Salmonella phõn lp c bng phn ng th khỏng sinh trờn a thch ca Kirby-Bauer 37 2.4.5.1 Chun b 37 2.4.5.2 Tin hnh 37 2.4.6 Phng phỏp x lý s liu 39 Chng KT QU NGHIấN CU V THO LUN 40 3.1 c im thi tr vi khun Salmonella ln nỏi sinh sn 40 3.1.1 Thi tr Salmonella ln nỏi sinh sn theo n v theo cỏ th 40 3.1.2 Thi tr Salmonella ln nỏi sinh sn theo la 41 3.2 c im s thi tr vi khun Salmonella ln sau cai sa 43 3.2.1 Thi tr Salmonella ln sau cai sa khụng cú triu chng lõm sng, bnh tớch ca bnh phú thng hn 43 3.2.1.1 Thi tr Salmonella ln sau cai sa theo n v theo cỏ th 43 3.2.1.2 Thi tr Salmonella ln sau cai sa theo cỏc thỏng nm45 3.2.1.3 Thi tr Salmonella ln sau cai sa theo tui 46 3.2.2 Tỡnh hỡnh bnh phú thng hn ln sau cai sa 48 3.2.2.1 Tỡnh hỡnh bnh phú thng hn ln sau cai sa theo n v theo cỏ th 48 3.2.2.2 Tỡnh hỡnh bnh phú thng hn ln sau cai sa theo cỏc thỏng nm 50 79 vi 3.3 Phõn lp Salmonella t phõn ln sau cai sa mc bnh phú thng hn 51 3.4 Giỏm nh c tớnh sinh vt hoỏ hc ca vi khun Salmonella phõn lp c 53 3.5 Xỏc nh tớnh mn cm vi mt s loi khỏng sinh ca vi khun Salmonella phõn lp c 55 3.6 Xỏc nh c lc ca vi khun Salmonella phõn lp c 56 3.7 Giỏm nh serotype ca cỏc chng Salmonella phõn lp c 58 3.8 Kt qu xỏc nh mt s yu t gõy bnh ca cỏc chng vi khun Salmonella phõn lp c 61 KT LUN V NGH 64 TI LIU THAM KHO 66 I TI LIU TING VIT 66 II TI LIU TING NC NGOI 69 vii 80 DANH MC CC T VIT TT ADP Adenosine diphosphate ATP Adenosine triphosphate BHI Brain Heart Infusion BPW Buffered Pepton Water CHO Chinese Hamster Ovary Cell CIRAD Centre de Coopộration Internationale en Recherche Agronomique pour le Dộveloppement DHL Deoxycholate Hydrogen sulfide Lactose DNA Deoxyribonucleic Acid DT104 Definitive phage type 104 EDTA Ethylene Diamine Tetra Acetic acid ETEC Enterotoxigenic E coli GDP Guanin diphosphate GTP Guanin triphosphate InvA Invasion A LIM Lysine Indole Motility LPS Lipopolysaccharide LT Heat- Labile Toxin mARN Messenger Acide RiboNucleotide RPF Rapid Permebility Factor Stn Salmonella toxin TL Thng Li TT Tõn Thỏi TSI Triple- Sugar- Iron PCR Polymerase Chain Reaction PY Ph Yờn RV Rappaports Vassiliadis viii 81 DANH MC CC BNG Bng 3.1 Kt qu kho sỏt thi tr Salmonella ln nỏi sinh sn theo n v theo cỏ th 40 Bng 3.2 Kt qu kho sỏt thi tr Salmonella ln nỏi sinh sn theo la 41 Bng 3.3 Kt qu kho sỏt thi tr Salmonella ln sau cai sa theo n v theo cỏ th 43 Bng 3.4 Kt qu kho sỏt thi tr Salmonella ln sau cai sa theo cỏc thỏng nm .45 Bng 3.5 Kt qu kho sỏt thi tr Salmonella ln sau cai sa theo tui 47 Bng 3.6 Kt qu iu tra Tỡnh hỡnh bnh phú thng hn ln sau cai sa theo n v theo cỏ th 49 Bng 3.7 Kt qu iu tra tỡnh hỡnh bnh phú thng hn ln sau cai sa theo cỏc thỏng nm 50 Bng 3.8 Kt qu phõn lp Salmonella t ln mc bnh phú thng hn .52 Bng 3.9 Mt s c tớnh sinh vt hoỏ hc ca chng Salmonella phõn lp c 54 Bng 3.10 Kt qu xỏc nh tớnh mn cm khỏng sinh ca vi khun Salmonella phõn lp c t ln sau cai sa mc bnh phú thng hn 55 Bng 3.11 c lc ca chng Salmonella sp phõn lp c t ln sau cai sa mc bnh phú thng hn 57 Bng 3.12 Giỏm nh serotype ca cỏc chng Salmonella phõn lp c 59 Bng 3.13 Kt qu kim tra mt s yu t gõy bnh ca cỏc chng vi khun 62 M U t Trong nhng nm gn õy, nn kinh t nc ta ó v ang cú nhng bc phỏt trin vt bc v mi mt, i sng kinh t xó hi ngy cng c ci thin úng gúp mt phn khụng nh cho s thnh cụng ú phi k n cỏc thnh tu ca ngnh nụng nghip, ú cú ngnh chn nuụi thỳ y m c bit l ngnh chn nuụi ln Ngnh chn nuụi ln ó gúp phn ỏp ng nhu cu thc phm nc v mt phn dnh cho xut khu thu ngoi t Theo CIRAD (Trung tõm nghiờn cu v phỏt trin quc t v nụng nghip ca Phỏp) (2006)[40], tht ln chim 77% tng lng cỏc loi tht tiờu dựng hng ngy trờn th trng Vit Nam Tuy nhiờn, mt thỏch thc khụng nh i vi vic phỏt trin chn nuụi ln l dch bnh thng xuyờn xy trờn cỏc n ln mi la tui, lm gim nng sut, gim cht lng ging hoc nhim vo sn phm tht ln gõy nguy c mt an ton v sinh thc phm Mt nhng bnh thng gp phi k n l bnh tiờu chy vi khun Salmonella gõy ln sau cai sa, cũn gi l bnh phú thng hn, khụng n thnh dch ln, nhng vi c im dch t ht sc phc tp, ó v ang gõy nờn nhng thit hi ỏng k cho ngi chn nuụi Cú th núi rng bt k mt c s chn nuụi no dự quy mụ ln hay nh u xut hin bnh ny Khi i sng ca nhõn dõn ngy cng c nõng cao, an ton thc phm, ú cú ln v tht ln sch bnh, khụng b nhim Salmonella l mt yờu cu cp thit Cú rt nhiu tỏc gi ó cụng b rng s nhim Salmonella vo thõn tht ln quỏ trỡnh git m ch yu liờn quan n s nhim trựng Salmonella rut (Borch v cs, 1996[35]; Berends v cs, 1998[33]) Do ú, vic gim t l cỏc tri b nhim mm bnh Salmonella s 59 Bng 3.12 Giỏm nh serotype ca cỏc chng Salmonella phõn lp c a im v i tng phõn lp Salmonella Nhúm huyt Kiu huyt thanh (sero (serogroup) type) Thỏi Nguyờn (n=29) Ln Ln T l kho mc PTH (%) 10 10 100 10 10 100 Ln nỏi Salmonella H (Flagellar) Polyvalent Antiserum (A,B,C,D) Salmonella O (Somatic) Polyvalent Antiserum (A,B,C,D) B Sal.typhimurium 20,69 C1 Sal.choleraesuis 51,72 D1 Sal.enteritidis 0 6,89 Ghi chỳ: PTH: phú thng hn; Sal: Salmonella T bng 3.12, cỏc kt qu cho thy: Cỏc chng Salmonella phõn lp c u cho phn ng ngng kt dng tớnh, t t l 100% vi nhúm khỏng huyt a giỏ O v H Trong 29 chng Salmonella nghiờn cu, cú 15 chng l S choleraesuis, chim 51,72%; chng l S typhimurium, chim 20,69%; chng l S enteritidis, chim 6,89%; Cỏc serotyp xỏc nh c nghiờn cu ny nh S choleraesuis, S typhimurium, S enteritidis u nm s nhng chng thng gp nht t nhng trng hp nhim bnh Salmonella lõm sng ln Ln mc bnh phú thng hn ó xỏc nh Salmonella typhimurium v Salmonella choleraesuis, khụng cú Salmonella enteritidis Kt qu ny 60 cng tng t vi kt qu ca Chiu, 2004[39]) Lờ Vn To (1994)[26] cho cho bit: bnh phú thng hn chng S choleraesuis cú ti 50%, S typhimurium ch xut hin vi 6,25% Trn Xuõn Hnh (1995)[10] xỏc nh serotyp ca vi khun Salmonella phõn lp c ln t 6-16 tun b tiờu chy, cht cỏc tnh xung quanh thnh ph H Chớ Minh ó thụng bỏo: S typhisuis ln bnh l 16,9%; ln bỡnh thng 6-16 tun tui l 4,2%; S paratyphi ln 6-16 tun tui l 2,8% c bit, vi khun S choleraesuis chim 38,7% ln bnh v 2,8% ln bỡnh thng Nghiờn cu ca T Th Vnh, ng Khỏnh Võn (1996)[29] cng ch rng S choleraesuis chim t l cao nht (60%) s cỏc chng Salmonella phõn lp c phõn ln Ba Vỡ, H Tõy Trung C (2004)[5] cho bit: 100% s chng Salmonella phõn lp t ln cht cú biu hin triu chng bnh tớch ca bnh phú thng hn u l S typhimurium Ti Nht Bn, Asai v cs (2002)[31] cng cho bit S typhimurium c phõn lp thy nhiu ln sau cai sa l (72,6%); ln gn xut chung l (73,8%) Vic phỏt hin mt t l cao S typhimurium, S enteritidis v S choleraesuis ln b tiờu chy v cht ó th hin c vai trũ ca cỏc serotyp ny bnh phú thng hn ca ln S phỏt trin bnh cỏc serotyp ny gõy chớnh l s tng tỏc gia vi khun v c th, ng thi cú s tham gia ca yu t ngoi cnh ú l iu kin bỡnh thng, s iu tit ca h sinh thỏi ni ti ngn cn s hỡnh thnh ca nhng vi sinh vt gõy bnh c th Nhng cú yu t bt li ca ngoi cnh, s to iu kin cho cỏc vi sinh vt gõy bnh phỏt trin, nhõn lờn nhiu ln, cỏc yu t gõy bnh nh yu t bỏm dớnh, yu t xõm nhp, kh nng sinh sn c t h qu l ln b bi nhim Salmonella v phỏt bnh 61 Nh vy, phũng v chng bnh phú thng hn, vic phõn lp v nh typ vi khun Salmonella cú ý ngha rt quan trng, lm c s cho vic quyt nh s dng vacxin c sn xut t chng no t hiu qu phũng bnh phú thng hn cho ln tt nht 3.8 Kt qu xỏc nh mt s yu t gõy bnh ca cỏc chng vi khun Salmonella phõn lp c Theo Tsolis v cs (1999)[66], kh nng gõy bnh ca vi khun Salmonella ng vt thng bt u bng kh nng bỏm dớnh ca vi khun lờn cỏc receptor trờn niờm mc rut Sau ú, vi khun xõm nhp vo t bo biu mụ rut nh cỏc yu t xõm nhp cú cu trỳc ca vi khun v gii phúng c t c t ng rut (Enterotoxin) l yu t quan trng nht quyt nh sinh bnh lý tiờu chy cho gia sỳc, ngi núi chung v cho ln núi riờng Theo Peteron (1980)[56], c t ng rut vi khun Salmonella sn sinh cú thnh phn: c t thm xut nhanh (Rapid Difution FactorRDF) cú cu trỳc thnh phn hot tớnh ging vi c t chu nhit ca vi khun E coli nờn phn ln cỏc tỏc gi cũn gi l c t chu nhit ST (Heat Stabile Toxin); c t thm xut chm cú cu trỳc, thnh phn hot tớnh ging c t khụng chu nhit ca vi khun E coli nờn thng gi l c t khụng chu nhit LT (Heat Labile Toxin) Ngoi ra, yu t khỏng khỏng sinh cng úng vai trũ ht sc quan trng quỏ trỡnh sinh bnh ca vi khun Salmonella Theo Cleckner v cs (1977)[42] vi khun cú sn nhng yu t gõy bnh thỡ kh nng khỏng khỏng sinh s lm tng tớnh gõy bnh ca vi khun lờn gp bi Vỡ vy xỏc nh mt s yu t gõy bnh ca cỏc chng vi khun Salmonella phõn lp c, chỳng tụi ó tin hnh xỏc nh kh nng sn sinh c t, yu t xõm nhp v kh nng khỏng khỏng sinh ca chỳng Cú rt nhiu phng phỏp xỏc nh c t ng rut (enterotoxin), kh nng xõm nhp (invasion) v kh nng khỏng khỏng sinh (definitive phage type 104) ca Salmonella, nhiờn phng phỏp u vit nht hin 62 c ỏp dng rng rói v ngoi nc nghiờn cu vi khun Salmonella l phng phỏp PCR (Polymerase Chain Reaction) u im ca phng phỏp ny l nhy v c hiu cao, cú th thc hin vi s lng mu ln v cho kt qu nhanh, chớnh xỏc thi gian ngn Trong khuụn kh ca nghiờn cu ny, chỳng tụi ó s dng phng phỏp PCR xỏc nh mt s yu t c lc ca vi khun Salmonella Kt qu c trỡnh by bng 3.13 Kt qu cho thy: Trong tng s 23 chng Salmonella c kim tra, cú 22 chng mang gen Stn (chim t l 83,3%), 21 chng mang gen InvA (chim 77,8%) v khụng cú chng no mang yu t DT104 - 100% cỏc chng S choleraesuis c kim tra cú mang gen Stn v InvA - Trong s chng S typhimurium c kim tra thỡ 100% cỏc chng cú cha gen Stn v 83,33% cỏc chng cú cha gen InvA - Cú 50,00% cỏc chng S enteritidis c kim tra cú gen Stn v 50,00% cỏc chng cú gen InvA - Khụng cú chng vi khun no em kim tra cú mang yu t DT104 Bng 3.13 Kt qu kim tra mt s yu t gõy bnh ca cỏc chng vi khun Salmonella phõn lp c TT Serotyp S chng kim tra Yu t gõy bnh Stn InvA (%) (+) (%) 100,0 15 100,0 DT104 (+) (%) 0 S choleraesuis 15 (+) 15 S typhimurium 6 100,0 83,33 0 S enteritidis 50,0 50,0 0 23 22 83,3 21 77,8 0 Tng 63 T kt qu ny cho thy: Hu ht cỏc chng Salmonella cú kh nng sn sinh c t ng rut (83,3) u mang yu t xõm nhp (77,8) Theo Finlay v cs (1988)[47]: kh nng xõm nhp vo cỏc t bo cú nhõn, vo lp niờm mc ng rut l c tớnh ca mt s chng Salmonella cú c lc, cũn cỏc bin chng Salmonella khụng cú kh nng xõm nhp vo t bo thng l cỏc chng khụng cú c lc Theo Rahman v cs (1992)[59]; Nusera v cs (2006)[54]: gen xõm nhp InvA ó c phỏt hin thy cú mt hu ht cỏc chng S enterica Theo Trung C (2001)[3]: 72,7% cỏc chng Salmonella phõn lp c t ln sau cai sa b m, cht nghi Phú thng hn cú sn sinh c t chu nhit Trung C v cs (2003)[4] ó kt lun: 81,81% s chng S typhimurium phõn lp t ln mc bnh tiờu chy sn sinh c t khụng chu nhit (LT) cú kh nng gõy tớch nc rut non ca ln thớ nghim Kishima v cs (2008)[51] tin hnh kim tra kh nng xõm nhp ca 16 chng S typhimurium phõn lp c t ln khe Nht Bn ó xỏc nh c cú ti chng dng tớnh, chim t l 26,9% Cng theo Kishima v cs (2008)[51], t l mang gen khỏng thuc ca cỏc chng S typhimurium phõn lp c t ln khe Nht Bn cng khỏ cao (16/26 chng, chim t l 61,5%) Kt qu nghiờn cu ca chỳng tụi l hon ton khỏc bit iu ny cng cú th c gii thớch l ngun gc phõn lp ca cỏc chng dựng nghiờn cu ca hai nghiờn cu l khỏc T cỏc kt qu ny, cú th s b kt lun: Cỏc chng vi khun c kim tra thuc loi serotyp phõn lp c nghiờn cu ny u cú mang nhng yu t c lc cn thit tham gia vo quỏ trỡnh gõy bnh ng vt 64 KT LUN V NGH Kt lun T nhng kt qu nghiờn cu thu c v qua phn tho lun, tụi rỳt c mt s kt lun sau: Thi tr Salmonella ln nỏi kho sỏt theo n ti Thỏi Nguyờn chim t l 85,46%, theo cỏ th l 40,9 % Ln nỏi thi tr Salmonella cú s bin ng theo la , ln cng nhiu la (ln nỏi cng gi) s thi tr Salmonella cng cao Ln sau cai sa khụng biu hin triu chng ca bnh phú thng hn cú mang v thi tr Salmonella qua phõn T l thi tr theo n l 17,5% T l thi trr theo cỏ th l 2,31% Ln sau cai sa mc bnh phú thng hn vi t l 5,56% T l phõn lp Salmonella t ln mc bnh phú thng hn ti Thỏi Nguyờn chim t 72,73%-75,0% Salmonella phõn lp c mn cm mnh vi khỏng sinh Oxytetracycline t 89,28%; mn cm vi Nalidixic acid t 92,85%; Salmonella phõn lp c cú c lc mnh gõy cht chut thớ nghim t 90,91%-100% sau gõy nhim chut vũng 168 gi Ln nỏi sinh sn thi tr Salmonella typhimurium cú chng, cú chng Salmonella choleraesuis v chng Salmonella enteritidis Ln sau cai sa mc bnh phú thng hn Salmonella typhimurium v Salmonella choleraesuis Khụng phõn lp c Salmonella enteritidis t ln mc bnh 100% cỏc chng S choleraesuis c kim tra cú mang gen Stn v InvA; 100% cỏc chng S typhimurium cú mang gen Stn v 83,33% cỏc chng 65 cú mang gen InvA; 50,0% cỏc chng S enteritidis cú mang gen Stn v 50,0% cỏc chng mang gen InvA Khụng cú chng vi khun no mang gen DT104 ngh M rng i tng nghiờn cu g, vt v c im thi tr Salmonella Nghiờn cu xỏc nh mt s yu t gõy bnh ca Salmonella nh: kh nng bỏm dớnh, kh nng xõm nhp ca vi khun Salmonella phõn lp c M rng nghiờn cu, ch to v th nghim autovacxin phũng bnh phú thng hn cho ln Trong iu tr bnh, cn lm khỏng sinh chn khỏng sinh m vi khun mn cm cao, trỏnh s dng tu tin gõy lóng phớ, kộo di thi gian iu tr v to iu kin cho vi khun nhn, khỏng khỏng sinh 66 TI LIU THAM KHO I TI LIU TING VIT Vừ Th Tr An, Nguyn Ngc Tuõn, Lờ Hu Ngc (2006), Tỡnh hỡnh nhim Salmonella phõn v thõn tht (bũ, heo, g) ti mt s tnh phớa Nam, Tp Khoa hc k thut thỳ y, s 2, tr 37-42 Phựng Quc Chng (1995), Tỡnh hỡnh nhim Salmonella ln ti vựng Tõy Nguyờn v kh nng phũng tr Lun ỏn PTS khoa hc nụng nghip, Trng i hc Nụng nghip I H Ni Trung C, Trn Th Hnh, Nguyn Quang Tuyờn (2001), Kt qu phõn lp v xỏc nh mt s yu t gõy bnh ca vi khun Salmonella spp gõy bnh Phú thng hn ln mt s tnh nỳi phớa Bc Tp Khoa hc k thut thỳ y, s 3, tr 10-17 Trung C, Trn Th Hnh, Nguyn Quang Tuyờn, Th Lan Phng (2003), Xỏc nh mt s yu t gõy bnh ca Salmonella Typhimurium phõn lp t ln b tiờu chy mt s tnh nỳi phớa Bc Tp Khoa hc k thut thỳ y, s 4, tr 33-37 Trung C (2004), Phõn lp v xỏc nh yu t gõy bnh ca Salmonella ln ti mt s tnh nỳi phớa Bc v bin phỏp phũng tr Lun ỏn Tin s nụng nghip, Vin Thỳ y Quc gia c Diờn (1999), Vai trũ ca E coli v Salmonella hi chng tiờu chy ln Kim Bng (H Nam) v th nghim mt s gii phỏp phũng tr Lun ỏn Thc s Nụng nghip Trn Quang Diờn (2002), Nghiờn cu tỡnh hỡnh nhim, c tớnh gõy bnh ca Salmonella gallinarum pullorum trờn g cụng nghip v ch khỏng nguyờn chn oỏn Lun ỏn Tin s nụng nghip, Trng i hc Nụng nghip I, H Ni 67 Trng Vn Dung, Yoshihara shinobu (2002), Cm nang chn oỏn tiờu chun v cỏc bnh gia sỳc Vit Nam Vin Thỳ y Quc gia v T chc hp tỏc quc t Nht Bn o Trng t, Phan Thanh Phng, Lờ Ngc M (1995), Bnh ng tiờu húa ln NXB Nụng nghip, tr 63- 96 10 Trn Xuõn Hnh (1995), Phõn lp v giỏm nh vi khun Salmonella trờn ln tui git tht Tp Khoa hc k thut Thỳ y, s 3, tr 89-93 11 Trn Th Hnh v cng s (2009), T l nhim Salmonella spp ti c s git m ln cụng nghiờp v th cụng nghip Tp Khoa hc k thut thỳ y, s 2, tr 51-56 12 Nguyn Bỏ Hiờn (2001), Mt s vi khun ng rut thng gp v bin ng ca chỳng gia sỳc khe mnh v b tiờu chy nuụi ti vựng ngoi thnh H Ni Lun ỏn Tin s Nụng nghip, Trng i hc Nụng nghip I, H Ni 13 Archie Hunter (2002), S tay dch bnh ng vt Cụng ty in Thng nht, H Ni 14 Nguyn Vn Lóm (1968), Ch vacxin Phú thng hn ln Kt qu nghiờn cu khoa hc v k thut thỳ y 1968- 1978, NXB Nụng nghip, tr 250- 289 15 Nguyn Th Kim Lan, Lờ Minh, Nguyn Th Ngõn-i hc Nụng Lõm Thỏi Nguyờn, Mt s c im dch t hi chng tiờu chy ln ti Thỏi Nguyờn, Tp Khoa hc K thut Thỳ Y, s 3, 2006, trang 96 16 Laval A (2000), Dch t Salmonellosis Bỏo cỏo ti hi tho v bnh ln ti Vin Thỳ y H Ni thỏng 6/2000, Ti liu dch ca Trn Th Hnh Vin Thỳ y 17 Phm S Lng, Phan ch Lõn, Trng Vn Dung (2004), Bnh ph bin ln v bin phỏp phũng tr NXB Nụng nghip 68 18 V Bỡnh Minh, Cự Hu Phỳ (1999), Kt qu phõn lp vi khun E.coli v Salmonella ln mc bnh tiờu chy, xỏc nh mt s c tớnh sinh vt hoỏ hc ca chng phõn lp, KHKT Thỳ y, s 1, tr.15-22 19 H Vn Nam, Nguyn Th o Nguyờn, Trng Quang, Phựng Quc Chng, Chu c Thng, Phm Ngc Thch (1997), Tỡnh hỡnh nhim Salmonella v vai trũ ca Salmonella bnh viờm rut a chy ln Tp Khoa hc k thut thỳ y, s 2, tr 39-45 20 Nguyn Th Ni, Nguyn Ngc Nhiờn, Cự Hu Phỳ, Nguyn Th S (1989), Kt qu iu tra tỡnh hỡnh nhim vi khun ng rut ti mt s c s chn nuụi ln Kt qu nghiờn cu khoa hc k thut Thỳ y (19851989) Vin Thỳ y, NXB nụng nghip, H ni 1989, tr 50-53 21 Cự Hu Phỳ, Nguyn Ngc Nhiờn, V Bỡnh Minh, Ngc Thuý (2000), Phõn lp vi khun E.coli v Salmonella ln mc bnh tiờu chy, xỏc nh mt s c tớnh sinh vt hoỏ hc ca cỏc chng vi khun phõn lp c v bin phỏp phũng tr Kt qu nghiờn cu Khoa hc k thut thỳ y (1996-2000), NXB Nụng nghip, H Ni, tr 171-176 22 Nguyn Vnh Phc (1970), Vi sinh vt hc thỳ y NXB i hc v trung hc chuyờn nghip H Ni 23 Phan Thanh Phng (1988), Phũng v chng bnh Phú thng hn ln NXB Nụng thụn, H Ni 24 Lờ Minh Sn (2003), Nghiờn cu mt s vi khun gõy ụ nhim tht ln vựng hu ngn sụng Hng Lun ỏn Tin s Nụng nghip 25 Lờ Vn To (1993), Phõn lp, nh danh vi khun Salmonella gõy bnh cho ln Bỏo cỏo khoa hc mó s KN 02 15, NXB Nụng nghip, H Ni 26 Lờ Vn To, Nguyn Th Vui (1994), Phõn lp v nh typ vi khun Salmonella gõy bnh cho ln Tp Nụng nghip v cụng nghip thc phm, s 11, tr 430- 431 69 27 Nguyn Nh Thanh 2001 Vi sinh vt Thỳ y NXB Nụng nghip, H Ni 28 Tụ Liờn Thu (2005), Nghiờn cu tỡnh trng ụ nhim mt s vi khun vo tht ln, tht g sau git m H Ni v mt s phng phỏp lm gim s nhim khun trờn tht Lun ỏn Tin s Nụng nghip, Vin Thỳ y Quc gia H Ni 29 T Th Vnh, ng Khỏnh Võn (1996), Bc u thm dũ v xỏc nh E.coli v Salmonella trờn ln bỡnh thng v ln mc hi chng tiờu chy ti H Tõy v H Ni Tp Khoa hc k thut thỳ y, s 1, tr 41- 44 II TI LIU TING NC NGOI 30 Andrijana Rajic, Juia Keenliside (2001) Salmonella in swine Advances in Pork production 2001 Volume 12 31 Asai T, Otagiri Y, Osumi T, Namimatsu T, Hirai H and Sato S (2002), Isolation of Salmonella from Diarrheic Feces of Pig J Vet Med Sci 64, 2, p 159- 160 32 Barners D.M, Sorensen K.D (1975), Salmonellosis Diseases of Swine, 4th Edition Iowa State University press, p 12-18 33 Berends B.R, Van Knapen F, Mossel D.A.A, Burt S.A and Snij J.M.A (1998), Impact on human health of Salmonella spp on pork in the Netherlands and the anticipated effects of some currently proposed control strategies Int J Food Mcrobiol, 44, p 219-229 34 Bergeys (1994), Manual of determinative Bacteriology, 9th Edition, by the Williams and Wilkings Company 35 Borch E, Nesbakken T and Christensen H (1996), Hazard identification in swine slaughter with respect to foodborne Bacteria Int J Food Microbiol, 30, p 9-25 36 Bradley S.G (1979), Cellular and molecular mechanisms of action of 70 bacterial endotoxins Ann Rev Microbiol, 33, p 67-94 37 Bryan F (1988), Risks associated with vehicles of foodborne pathogens and toxins J Food Prot, 51, p 498-508 38 Chiu C.H and Ou J.T (1996), Rapid identification of Salmonella serovars in feces by specific detection of the virulence genes, invA and spvC, by an enrichment broth culture multiplex PCR combination assay J Clin Microbiol, 34, p 2619-2622 39 Chiu C.H, Su L.H and Chu C (2004), Samonella enterica serotype Choleraesuis: Epidemiology, Pathogenesis, Clinical Disease and Treatment Clinical Microbiology Reviews 2, p 311-322 40 CIRAD Training Course Salmonella, 23 37 October 2006 41 Clarke G.J, Wallis T.S, Starkey W.J, Collins J, Spencer A.J, Daddon G.J, Osborne M.P, Candy D.C and Stephen I (1988), Expression of an antigen in strains of Salmonella typhimurium with antibodies tocholeratoxin Med Microbiol, 25, p 139-146 42 Cleckner N, Roth J.R, Bostein D (1977), Genetic engineering invivo using translocatable drug resistance elements new methods in bacterial genetics Hol Sen Gonet , 116, p 125 159 43 Crosa J.H, Brenner D.J, Ewing W.H and Falkow S (1973), Molecular relationship among Salmonella J Bacteriol, 115, p 307-315 44 Ewing, Edward (1970), Indentification of Enterobacteriaceae Edicion Revolucionnalria, Instituto Cubano Del libro 19 No 1002, Vedado Habana 45 Euzộby J.P (1999), Revised Salmonella nomenclature: designation of Salmonella enterica (exjjj Kauffmann and Edwards 1952) Le Minor and Propoff 1987 sp nov., nom rev as the neotype species of the genus Salmonella Lignieres 1900 (Approved Lists 1980), rejection of the name Salmonella choleraesuis (Smith 1894) Weldin 1927 (Approved Lists 71 1980), and conservation of the name Salmonella typhi (Schroeter 1886) Warren and Scott 1930 (Approvied Lists 1980), Request for an opinion Int J Sist Bacteriol, 49, p 927-930 46 Farmer J.J (1995), Enterobacteriaceae: Introduction and identification p 438-449 In Murray P.R, Baron E.J and Pfaller M.A (ed.), Manual of Clinical Microbiology, 6th Edition, American Society for Microbiology, Washington D.C 47 Finlay B.B and Falkow (1988), Virulence factors associated with Salmonella species Microbiological Sciences Vol 5, No.11 48 Gray J.T, Fedorka-Gray P.J and Stabel T.S (1995), Influence of inoculation route on the carrier state of Salmonella choleraesuis in swine Vet Microbiol, 47, p 43 49 49 Jones J.W, Richardson A.L (1981), The attachment to invasion of helacells by Salmonella typhimurium the contribution of manose sensitive and manose sensitive haemaglutinate activities J Gen Microbiol, V127, p 361-370 50 Khakhria R and Johnson W (1995), Prevalence of Salmonella serotypes and phage types in Canada Southeast Asian J Trop Med Public Health 26 (Suppl 2) p 42-44 51 Kishima M, Uchida i, Namimatsu T, Osumi T, Takahashi S, Tanaka K, Aoki H, Matsuura K and Yamamoto K (2008), Nationwide Surveillance of Salmonella in the Faeces of Pigs in Japan 52 Krause M, Fang F.C, Gedaily A.E, Libby S and Guiney D.G (1995), Mutational Ananysis of SpvR Binding to DNA in the Regulation of the Salmonella Plasmid Virulence Operon Academic Press Inc Plasmid, 34, p 37-47 53 Nielsen B and Wegener H.C (1997), Public health and pork and fork 72 products: regional perspectives of Denmark Rev Sci Tech, 16, p 513-524 54 Nusera D.M, Maddox C.W, Hoien-Dalen P and Weigel R.M (2006), Comparison of API 20E and invA PCR for identification of Salmonella enterica isolates from swine production units J Clin Microbiol, 44, p 3388-3390 55 Peter Davies (1998) Fecal shedding of Salmonella by pigs housed in buildings with open-flush gutters Swine Health and Production 1998: (3): 101-106 56 Peteron J.W (1980), Salmonella toxin Pharm Ather, VII, p 719-724 57 Plonait H, Bickhardt (1997), Salmonella infectionand Salmonella lehrbuchder Schweine Krankheiten Parey Buchverlag, Berlin, p 334 338 58 Quinn P.J, Carter M.E, Makey B, Carter G.R (2002), Clinical veterinary microbiology Wolfe Pulishing, London WC1 H9LB, England, p 209-236 59 Rahman K, De Grandis S.A, Clarke R.C, McEwen S.A, Galỏn J.E, Ginocchio C, Curtiss III R and Gyles C.L (1992), Amplification of a invA gene sequence of Salmonella typhimurium by polymerase chain reaction as a specific method of Salmonella Mol Cell Probes, 6, p 271-279 60 Robin C Anderson, Ken J Genovese, Roger B Harvey, Larry H Stanker, John R DeLoach, David J Nisbet (2000) Assessment of the long term shedding pattern of Salmonella serovar choleraesuis following experimental infection of neonatal piglets J Vet Diagn Invest 12: 257-260.2000 61 Schwartz K.J (1999), Salmonellosis In: Straw, B E., S D Allaire, W L Mengeling, and D J Taylo (eds), Disease of Swine, p 535-551 Iowa State University Press, Ames 62 Schwartz.K.J (2006) Salmonellosis Diseases of swine IOWA State University press / AMES, IOWA U.S.A.8th Edition 63 Selbitz H.J (1995), Grundsaetzliche Sicherheisanfornderungen bein 73 Einsatz von lebendimpfstoffen bei lebensmittelliefernden Tieren Berl Much Tieruzl Wschr, 144, p 428-423 64 Su L.H, Chiu C.H, Kuo A.J, Chia J.H, Sun C.F, Leu H.S and Wu T.L (2001), Secular trends in incidence and antimicrobial resistance among clinical isolates of Salmonella at a university hospital in Taiwan, 19831999 Epidemiol Infect, 127, p 207-213 65 Timoney J.F, Gillespie J.H, Baelough J.E, Hagan and Bruners (1988), Microbiology and infection disease of domentic animals, Inthca and London Comstock Publising Associates, A Division of cornell University press, p 209-230 66 Tsolis R.M, Adams L.G, Fitcht T.A and Baumler A.J (1999), Contribution of Salmonella enterica serovar Typhimurium virulence factors to diarrheal disease in calves Infect Immun, 67, p 1879-1885 67 Valtonen M.V (1977), Role of phagocytosis in mouse virulence of Salmonella typhimurium recombinmant with O- antigen 6, or 4, 12. Infect Immun, 18, p 574 68 Weinstein D.L, Carsiotis M, Lissner CH.R, Osrien A.D (1984), Flagella help Samonella typhimurium survive within murine macrophages Infection and Immuniti, 46 p 819-825 69 Wilcock B.P, Schwartz K.J (1992), Salmonella Disease of Swine, 7th Edition, p 570-583 70 Wilcock B.P (1995), Salmonellosis Disease of Swine, Sixth Edition, Iowa state University Press, U.S.A, p 508-518 [...]... nghiên cứu và yêu cầu của sản xuất, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: Xác định sự lưu hành của vi khuẩn Salmonella spp ở lợn nái và lợn con tại một số trại chăn nuôi công nghiệp ở tỉnh Thái Nguyên và biện pháp phòng trị 2 Mục tiêu nghiên cứu - Xác định sự lưu hành của vi khuẩn Salmonella ở lợn nái sinh sản, lợn con sau cai sữa; - Xác định đặc tính sinh vật hoá học, tính gây bệnh và serotype của các... gây bệnh và serotype của các chủng Salmonella phân lập được; - Đề xuất biện pháp khống chế tình trạng thải trừ Salmonella ở lợn tại các cơ sở chăn nuôi 3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài 3.1 Ý nghĩa khoa học - Xác định tình trạng thải trừ vi khuẩn Salmonella ở lợn nái sinh sản, lợn con sau cai sữa; 3 - Giám định đặc tính sinh vật hoá học và serotype vi khuẩn Salmonella phân lập được 3.2 Ý nghĩa... typhimurium và số còn lại thuộc các serotyp khác Trần Xuân Hạnh (1995)[10] đã phân lập và giám định vi khuẩn Salmonella ở lợn tại Thành phố Hồ Chí Minh cho kết quả: S typhisuis ở lợn bệnh là 16,9%; ở lợn bình thường 6-16 tuần tuổi là 4,2%; S paratyphi ở lợn 6-16 tuần tuổi là 2,8% Đặc biệt, vi khuẩn S choleraesuis chiếm 38,7% ở lợn bệnh và 2,8% ở lợn bình thường Theo Phùng Quốc Chướng (1995)[2] ở Tây Nguyên, ... Tây Nguyên, mùa khô lợn mắc bệnh do vi khuẩn Salmonella gây ra là 20,03%, vụ đông là 28,66% Kết quả phân lập vi khuẩn Salmonella ở lợn mắc bệnh tiêu chảy tại 4 cơ sở chăn nuôi lợn thuộc miền Bắc nước ta của Cù Hữu Phú và cs (2000)[21] cho biết: Tỷ lệ tìm thấy Salmonella trung bình ở lợn tiêu chảy nuôi tại 4 cơ sở trên là 80% Đây là điều đáng lo ngại đối với ngành chăn nuôi lợn ở nước ta Theo Nguyễn... vậy, nhóm tác giả này đã nghiên cứu và chế tạo thành công vacxin đa giá Salsco phòng bệnh ỉa chảy 9 cho lợn con Vacxin đã được áp dụng để phòng bệnh có hiệu quả ở nhiều trại chăn nuôi lợn, tỷ lệ lợn bị tiêu chảy giảm từ 30-50%, tỷ lệ lợn chết do tiêu chảy giảm xuống còn 10-20% Lê Văn Tạo và cs (1994)[26] đã phân lập và xác định serotyp của vi khuẩn Salmonella gây bệnh ở lợn, kết quả cho thấy: 50% các chủng... loài vi khuẩn được mô tả và xếp vào giống Salmonella 5 Năm 1926, với những công trình nghiên cứu của White về cấu trúc kháng nguyên của Salmonella đã bắt đầu một thời kỳ khoa học mới về giống vi khuẩn này Sau đó Kauffmann cũng rất thành công trong lĩnh vực nghiên cứu về vi khuẩn Salmonella (Selbizt và cs, 1995[63]) Năm 1934, Kauffmann và White đã thiết lập được bảng cấu trúc kháng nguyên đầu tiên và. .. lần đầu tiên xuất hiện trong báo cáo năm của phòng chăn nuôi công nghiệp Mỹ Thời gian này, Salmon, D.E là trưởng phòng nghiên cứu, vì vậy mà tên ông được lấy đặt cho vi khuẩn mới này Song Smith, người cộng sự của Salmon mới thật sự là người phát hiện ra vi khuẩn Salmonella Một vài năm sau đó, lần lượt các loài Salmonella khác đã được phát hiện và những loài vi khuẩn đó vẫn có ý nghĩa trong y học cho... ở vật nuôi do Salmonella gây ra Vi khuẩn Salmonella gây bệnh cho người và vật nuôi, phân bố ở khắp nơi trên thế giới, vì vậy các nghiên cứu về cách truyền lây của vi khuẩn này được nhiều nhà khoa học nghiên cứu Một đặc điểm dịch tễ quan trọng của Salmonella là trạng thái mang trùng và thải trùng của gia súc Theo Archie Hunter (2002)[13], một nguồn bệnh đặc biệt quan trọng là gia súc mang vi khuẩn Salmonella. .. 1999[45]) Vi khuẩn Salmonella được phân lập từ thịt lợn chết bởi bệnh phó thương hàn thường gặp ở miền Tây của nước Mỹ là S choleraesuis var kunzendorf, S typhimurium và S typhisuis (Barnes và Sorensen, 1975[32]) Trong một vài trường hợp, ở lợn còn tìm thấy S dublin và S enteritidis Hai serotyp S dublin và S enteritidis cũng gặp ở lợn con đang theo mẹ Những báo cáo gần đây cho thấy: Ở một số nước như... choleraesuis) (Ewing và Edwards, 1970[44]) Trong quá trình phân lập và giám định vi khuẩn Salmonella thì đặc tính sinh hóa có ý nghĩa rất quan trọng Đây là bước không thể bỏ qua khi xét nghiệm vi khuẩn nói chung và vi khuẩn Salmonella nói riêng 1.2.4 Sức đề kháng của vi khuẩn Salmonella Vi khuẩn Salmonella mẫn cảm với nhiệt độ và các chất sát trùng mạnh Ở nhiệt độ 50oC trong 1 giờ, 70oC trong 20 phút, 100oC trong