Chuyên ngành: Nông Lâm Ngư nghiệp Nông nghiệp Nông thôn Sơ lược: Báo cáo chuyên đề tốt nghiệp đề tài Điều tra thành phần vi sinh vật ký sinh trên sâu hại rau vụ xuân hè, năm 2011 tại các vùng trồng rau ngoại thành Hà Nội. Rau sạch và các chỉ tiêu Thành phân sâu chính hại rau trên họ cây thập tự Phương hướng giải quyết
Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Nguyễn Văn Mạnh MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp MỤC LỤC PHẦN I MỞ ĐẦU I Mục đích yêu cầu đề tài I.1 Mục đích I.2 Nội dung I.3 Yêu cầu đạt đề tài PHẦN II TỔNG QUAN TÀI LIỆU II.1 Tình hình nghiên cứu vi sinh vật ký sinh gây bệnh sâu hại rau giới Việt Nam II.1.1 Tình hình nghiên cứu vi sinh vật ký sinh gây bệnh sâu hại rau giới II.1.2 Tình hình nghiên cứu vi sinh vật ký sinh gây bệnh sâu hại rau Việt Nam 10 II.2 Một số dẫn liệu vi sinh vật ký sinh sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ ruộng 12 II.2.1 Nhóm vi khuẩn Bacillus thuringiensis (Bt) 12 II.2.2 Nhóm virus gây bệnh côn trùng 14 II.2.3 Nhóm nấm gây bệnh côn trùng 15 II.3 Một số dẫn liệu loại sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ đồng ruộng 17 II.3.1 Sâu xanh bướm trắng (Pieris rapae) 17 II.3.2 Sâu khoang (Spodoptera litura) 18 II.3.3 Sâu tơ (Plutella xylostella) 19 Nguyễn Văn Mạnh MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp II.4 Ứng dụng chế phẩm vi sinh phòng trừ sâu hại 20 II.4.1 Ứng dụng Bt phòng trừ sâu hại trồng 20 II.4.2 Ứng dụng chế phẩm virus 21 II.4.3 Ứng dụng chế phẩm vi nấm côn trùng 21 PHẦN III VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 III.1 Vật liệu, đối tượng, địa điểm thời gian nghiên cứu 23 III.1.1 Vật liệu nghiên cứu 23 III.1.2 Đối tượng nghiên cứu 23 III.1.3 Địa điểm nghiên cứu 24 III.1.4 Thời gian nghiên cứu 24 III.2 Nội dung phương pháp nghiên cứu 24 III.2.1 Nội dung1: Điều tra thành phần sâu hại rau bắp cải 245 III 2.2 Nội dung 2: Điều tra thành phần vi sinh vật ký sinh sâu hại rau bắp cải 25 III.2.3 Nội dung 3: Điều tra diễn biến vi sinh vật ký sinh sâu hại rau bắp cải… 26 III 2.4 Nội dung 4: Thử hiệu lực số chế phẩm sinh học trừ sâu hại rau điều kiện phòng thí nghiệm 27 PHẦN IV DỰ KIẾN KẾT QUẢ ĐẠT ĐƯỢC 30 PHẦN V TÀI LIỆU THAM KHẢO 31 Nguyễn Văn Mạnh MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp Danh mục viết tắt BVTV: Bảo vệ thực vật Bb: Beauveria bassiana Bt: Bacillus thuringiensis GV: Granulosis Virus Ma: Metarhizium anisopliae Mf: Metarhizium flavoviride NPV: Nucleo Polyhedrosis Virus NPV.Ha: Nucleo Polyhedrosis Virus.Helicoverpa armigera IPM: Hệ thống quản lý dịch hại tổng hợp ĐH: Đại học Tp: Thành phố Nguyễn Văn Mạnh MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp PHẦN I MỞ ĐẦU Rau xanh thực phẩm quan trọng đời sống người, rau cung cấp lượng lớn vitamin, chất khoáng đa lượng ,vi lượng đặc biệt chất xơ cần thiết cho tiêu hóa giúp tăng cường hệ thống miễn dịch, chống mệt mỏi, kéo dài tuổi thọ người Bên cạnh đó, rau có giá trị kinh tế rau cung cấp cho người tiêu dùng sử dụng, làm nguyên liệu cho ngành công nghiệp thực phẩm: chế biến hương liệu, dược liệu, nước giải khát…Ngành sản xuất rau phát triển tạo công ăn việc làm tăng thu nhập cho người nông dân Mặt khác rau nguồn thức ăn phục vụ chăn nuôi gia súc, gia cầm [1] Rau xanh bao gồm nhiều loại khác nhau, rau họ hoa thập tự chiếm 50 % tổng sản lượng rau xuất quanh năm thị trường Cùng với phát triển loại rau phát sinh gây hại loài sâu hại, điển hình sâu khoang, sâu tơ, sâu xanh bướm trắng [12] Các loại sâu hại nguyên nhân làm giảm suất phẩm chất rau Để bảo vệ rau, người nông dân dùng nhiều biện pháp khác nhau, chủ yếu dựa vào biện pháp sử dụng thuốc hoá học… làm xuất nhiều loài sâu hại mang tính kháng thuốc sâu tơ, sâu xanh làm giảm số lượng chủng loại loài thiên địch có ích rau, gây cân sinh thái, ô nhiễm môi trường, làm cho loài sâu hại trước thứ yếu bùng phát số lượng lớn thành loài chủ yếu Đồng thời thuốc hóa học làm cho rau xanh bị nhiễm bẩn, có dư lượng thuốc bảo vệ thực vật (BVTV) vượt mức cho phép, điều dẫn đến bệnh nguy hiểm cho người sử dụng… rau nhiễm độc có chiều hướng gia tăng vấn đề quan tâm nỗi lo toàn xã hội [10] Nhằm khắc phục việc sử dụng thuốc trừ sâu hóa học, nhiều vùng trồng rau người nông dân bước đầu áp dụng hệ thống quản lý dịch hại tổng hợp (IPM) Nguyễn Văn Mạnh MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp có hiệu Nội dung IPM tăng cường điều hòa tự nhiên bổ sung thêm nguồn vi sinh vật có ích vào đồng ruộng Trong hệ thống IPM biện pháp sinh học giữ vai trò cốt lõi, trọng tới việc sử dụng chế phẩm sinh học như: Vi khuẩn Bacillus thuringiensis (Bt), virus đa diện nhân Nucleo Polyhedrosis Virus (NPV), nấm Metarhizium anisopliae (Ma), Beauveria bassiana (Bb)… loại thuốc vi sinh vật không gây ô nhiễm môi trường, không phá vỡ hệ sinh thái đồng ruộng, sản phẩm rau đạt chất lượng an toàn dư lượng thuốc hóa học Việc điều tra, phát để tìm chủng vi sinh vật có hoạt tính sinh học cao làm sở để phát triển chủng giống phục vụ cho sản xuất thuốc trừ sâu sinh học đạt hiệu phải đặt lên hàng đầu Thực tế Việt Nam cho thấy lĩnh vực hoàn toàn mẻ, bước đầu có số nhà khoa học số sinh viên trường đại học nghiên cứu thu số kết khả quan Vì vậy, việc điều tra thành phần diễn biến loài vi sinh vật ký sinh sâu hại cần thiết cần trọng mức Công nghệ Sinh học bảo vệ thực vật Nhằm đáp ứng nhu cầu sản xuất rau sạch, rau an toàn việc sử dụng thuốc trừ sâu vi sinh nông nghiệp, giao nhiệm vụ tiến hành đề tài: “ Điều tra thành phần vi sinh vật ký sinh gây bệnh số sâu hại rau vụ Xuân Hè, năm 2011 vùng Hà Nội” I Mục đích yêu cầu đề tài: I.1 Mục đích: Xác định thành phần vi sinh vật loài sâu hại rau vụ Xuân Hè, năm 2011 vùng ngoại thành Hà Nội I.2 Nội dung: Điều tra thành phần sâu hại ruộng rau vùng trồng rau bắp cải, su hào, súp lơ thuộc ngoại thành Hà Nội Nguyễn Văn Mạnh MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp Điều tra thành phần vi sinh vật ký sinh sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ đồng ruộng vụ Xuân Hè, năm 2011 Điều tra diễn biến vi sinh vật ký sinh sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ trồng (tỷ lệ % sâu bị nhiễm bệnh vi sinh vật) đồng ruộng Thử hiệu lực số chế phẩm sinh học trừ sâu hại rau điều kiện phòng thí nghiệm I.3 Yêu cầu đạt đề tài: Xác định thành phần sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ vụ Xuân Hè, năm 2011 vùng ngoại thành Hà Nội Điều tra thành phần vi sinh vật ký sinh sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ đồng ruộng vụ Xuân Hè, năm 2011 Xác định diễn biến (tỷ lệ %) số vi sinh vật ký sinh sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ Đánh giá số chế phẩm sinh học để phòng trừ sâu hại rau phòng thí nghiệm Nguyễn Văn Mạnh MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp PHẦN II TỔNG QUAN TÀI LIỆU II.1 Tình hình nghiên cứu vi sinh vật ký sinh gây bệnh sâu hại rau giới Việt Nam II.1.1 Tình hình nghiên cứu vi sinh vật ký sinh gây bệnh sâu hại rau giới Phòng trừ sâu hại trồng chế phẩm sinh học giới nghiên cứu triển khai ứng dụng từ sớm Những công trình nghiên cứu tập trung chủ yếu vào loại vi khuẩn Bacillus thuringiensis (Bt), chủng vi nấm Beauveria bassiana (Bb), Metarhizium anisopliae (Ma) chủng vi sinh vật khác có khả lây bệnh gây chết côn trùng sâu hại [5] Năm (2004), tác giả Phạm Thị Thùy [8] cho biết đến giới có 100.000 loài nấm khác nhau, chúng thích hợp giới tương đương với thực vật, giới động vật, giới nguyên thủy thể giới hữu Bên cạnh Úc, nhà khoa học sử dụng nấm Beauveria bassiana để phòng trừ bọ hại mía bọ hại củ cải đường đạt hiệu tốt, loài bọ khó phòng trừ thuốc hóa học Ngoài nhà khoa học sử dụng nấm Beauveria bassiana nồng độ 8x107 bào tử/ml để phòng trừ ruồi hại rễ bắp cải, làm giảm mật độ sâu nhộng khoảng 70 % Theo GS.TS Nguyễn Lân Dũng (1981) [3] cho biết bệnh nấm côn trùng gây côn trùng Vallineri phát năm 1709, đến năm 1835 Agostino Bassi tìm thấy nấm bạch cương gây bệnh tằm dâu Năm 1972, tác giả Đường Hồng Dật, cho biết sâu hại xuất hàng loạt bệnh vi sinh vật tự nhiên gây ra, thành phần phong phú gồm loài virus, vi khuẩn Bt nấm ký sinh côn trùng Năm 1975 Martignoi, Iwai đưa danh sách gồm loài côn trùng thuộc họ khác bị bệnh virus gây Nguyễn Văn Mạnh MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp Năm 1870 nhà bác học Louis Pasteur phát chủng vi khuẩn gây bệnh làm cho tằm dâu chết, tác giả đặt tên cho vi khuẩn Bacillus bombyces, sau đổi tên Bacillus thuringiensis (Bt) [13] Năm (1978) Falcon cho biết bệnh virus côn trùng Phillip mô tả từ năm 1802 Năm 1891 Mally nghiên cứu virus gây bệnh sâu xanh hại Nucleo Polyhedrosis Virus.Helicoverpa armigera (NPV.Ha) [10] Theo tác giả Nguyễn Lân Dũng 1981 [3] cho biết việc sử dụng virus Baculovirus phòng trừ sâu hại nghiên cứu từ kỷ XIX Người nghiên cứu Baculovirus phòng trừ sâu hại rừng tác giả Cunighom, ông thông báo kết áp dụng thành công vài loài virus để phòng trừ sâu róm thông quy mô vài nghìn hecta Những năm 1960 – 1975, Faclcon cho biết Tây Bán cầu có khoảng 30% sâu hại trừ virus côn trùng Baculovirus Việc sử dụng chế phẩm virus Nucleo Polyhedrosis Virus (NPV) sâu khoang có nhiều tác giả giới nghiên cứu, năm 1997 nhà khoa học Trung Quốc khẳng định hiệu lực diệt sâu NPV cao hẳn so với thuốc trừ sâu hóa học Methylparathion thử nghiệm nồng độ 2x1012 đến 3x1012 PIB/ml hiệu lực diệt sâu NPV 98.6 % Trung Quốc coi nước tiên phong việc ứng dụng thuốc trừ sâu vi sinh Bacillus thuringiensis Hiện nước có hai hướng sử dụng virus nhập nội dùng chế phẩm virus hỗn hợp với thuốc trừ sâu Nếu virus gây bệnh chưa xuất quần thể sâu hại việc nhập nội có tác dụng với sâu khoang Spodoptera litura Quảng Châu, hiệu gây chết sau tuần 90% Các chế phẩm bán rộng rãi thị trường quốc tế như: Biotrol, VH2, Virin, Viron ( diệt sâu xanh hại bông), Virus Tricholusis, Biotrol VTN (diệt sâu đo hại cải), Biotrol VPO (diệt sâu khoang sọc vàng) [10] Nguyễn Văn Mạnh MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp II.1.2 Tình hình nghiên cứu vi sinh vật ký sinh gây bệnh sâu hại rau Việt Nam Phòng trừ sâu hại trồng chế phẩm sinh học nhiều nước giới nghiên cứu từ lâu Các công trình nghiên cứu ứng dụng cho sản phẩm thuốc trừ sâu vi sinh khả quan Theo GS.TS Phạm Thị Thùy [9] cho biết Việt Nam việc nghiên cứu thành phần vi sinh vật gây bệnh côn trùng mẻ, thực tế vấn đề nghiên cứu vài năm gần đây, từ năm 1990 kỷ XX Viện Bảo vệ thực vật, Viện Công nghệ Sinh học trường đại học Nông nghiệp I, từ đến mang lại kết khả quan cho ngành nông nghiệp – lâm nghiệp Một chế phẩm nhà khoa học Việt Nam quan tâm vi khuẩn Bacillus thuringiensis (Bt), chúng có khả diệt trừ nhiều loại sâu hại thuộc nhóm ăn dựa việc hấp thu nội độc tố endotoxin (tinh thể độc) ngoại độc tố từ Bt qua thức ăn Theo số liệu điều tra sâu tơ hại rau bắp cải Hà Nội GS.TS Phạm Thị Thùy, Viện Bảo vệ thực vật năm 1997 [5], tác giả phát loài vi sinh vật ký sinh có khả gây bệnh làm chết sâu hại rau nấm trắng Beauveria bassiana (Bb), hai loài nấm xanh Metarhizium anisopliae (Ma), Metarhizium flavoviride (Mf), vi khuẩn Bacillus thuringiensis (Bt) virus hạt Granulosis Virus (GV) Tháng 5/2000, tác giả Phạm Thị Thùy cộng [6] thông báo thành phần vi sinh vật ký sinh sâu tơ hại rau cải thảo Đà Lạt năm 1998 Các tác giả cho biết có nhóm vi sinh vật ký sinh có nhóm vi khuẩn Bt chiếm 0,9 – 6,2 %, nhóm virus hạt Granulosis Virus (GV.Px), ký sinh sâu tơ nấm bạch cương Beauveria bassiana (Bb), nấm bột Nomuraea rileyi, nấm Entomophthora sp nấm lục cương Metarhizium anisopliae (Ma) Nguyễn Văn Mạnh 10 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp Sâu xanh non tuổi - nở gặm chất xanh rau, từ tuổi trở lên gặm thủng rau ăn kiệt gân Vì để sâu có mật độ cao ruộng rau bị trơ trụi xơ xác [11] II.3.2 Sâu khoang (Spodoptera litura) Theo tài liệu Cục Bảo vệ thực vật [2] sâu khoang phân bố rộng nước giới, sâu khoang họ ngài đêm Noctuidae thuộc cánh vảy Lepidoptera Đặc điểm hình thái: Bướm có thân dài 16 – 21 mm, cánh trước xòe rộng 37 – 42 mm, màu nâu vàng, cánh có nhiều đường vân đẹp, hình bầu dục, có màu xám, xung quanh vàng, cánh sau màu xám loang Trứng hình bán cầu, mặt trứng có nhiều đường khía dọc ngang, lúc đẻ có màu trắng vàng, sau chuyển thành màu vàng tro, nở có màu vàng tối Trứng đẻ ổ bầu dục, dẹp phủ lớp màu nâu vàng bên Sâu khoang gọi sâu ăn tạp gây hại tất loại rau, đối tượng gây hại nặng rau, đậu Sâu non hình ống tròn, màu xanh xám xám tro, vạch lưng màu vàng, đốt bụng thứ có khoang đen, to nên gọi sâu khoang, gần đầu có hai chấm đen Sâu đẫy sức dài 38 – 51 mm, nhộng dài 18 – 20 mm, hình ống, mầu nâu đỏ, bóng láng Mép trước mép bụng thứ – có nhiều chấm lõm Cuối bụng có đôi gai ngắn, sâu làm nhộng đất Vòng đời sâu: từ 25 – 48 ngày có biến thái hoàn toàn với giai đoạn - Trứng – ngày - Sâu non 12 – 27 ngày - Nhộng – 10 ngày - Bướm vũ hóa sau – ngày đẻ trứng Nguyễn Văn Mạnh 18 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp Tập tính sinh học: Sau nở vài ngày, sâu sống tập trung sau phân tán Ở tuổi nhỏ – thường gây hại nghiêm trọng hàng trăm sâu non tập trung lại ăn nhanh chóng làm xơ xác Sâu non gặm ăn vỏ làm giảm phẩm chất nông sản Sâu phá hại mạnh vào ban đêm, ngày ẩn nấp mặt đất, khô cỏ dại Bướm hoạt động đêm, đẻ trứng lá, bướm đẻ 500 – 1000 trứng hàng năm sâu phát sinh gây hại mạnh từ tháng đến tháng 10 [11] II.3.3 Sâu tơ (Plutella xylostella) Theo tài liệu Cục Bảo vệ thực vật [2] sâu tơ thuộc họ ngài rau Plutellidae, cánh vảy Lepidoptera Đặc điểm hình thái: Bướm sâu tơ nhỏ, dài – mm, cánh trước xòe rộng 13 – 16 mm, mầu nâu xám, dọc mép có đường sọc màu nhạt hơn, chia thành ba đoạn Cánh sau có màu xám lông nhỏ, dài mịn Trứng có hình bầu dục tròn, dài khoảng – mm Sâu non hình ống, màu xanh nhạt, đẫy sức dài – 12 mm, đầu màu nâu vàng có phiến cứng phiến có chấm màu nâu nhạt, đốt thân có nhiều lông tơ Nhộng màu xanh nhạt vàng nhạt, dài – 10 mm, bọc kén mỏng màu trắng xốp, dạng lưới Vòng đời sâu: từ 20 – 50 ngày có biến thái hoàn toàn qua giai đoạn - Trứng – ngày - Sâu non – 25 ngày - Nhộng – 13 ngày - Trưởng thành – ngày Nguyễn Văn Mạnh 19 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp Đặc điểm sinh học: Vòng đời sâu từ 20 – 25 ngày, sâu non có tuổi, thời gian phát triển kéo dài khoảng 11 – 15 ngày, nhộng ngày, lứa sâu tơ nở gối liên tiếp suốt vụ rau Tập tính sinh học: Bướm hoạt động ngày lẫn đêm, ban ngày bướm đậu mặt lá, sâu non nở đục lá, tạo thành đường rãnh Sâu non thường nhả tơ để di chuyển ăn phần xanh mềm mặt chừa lại lớp màng mỏng, mật độ sâu tơ cao gây hại tạo lỗ thủng lá, làm cải xơ xác Sâu tơ gây hại tất thuộc họ thập tự (cải) nguy hiểm, gây hại lớn tới sản phẩm rau có giá trị kinh tế cao như: bắp cải, súp lơ, su hào… Đặc biệt sâu tơ loài sâu có khả kháng thuốc hóa học cao [12] II.4 Ứng dụng chế phẩm vi sinh phòng trừ sâu hại II.4.1 Ứng dụng Bt phòng trừ sâu hại trồng Theo GS.TS Phạm Thị Thùy 2004 [8] cho biết việc sản xuất Bt tiến hành số sở Viện công nghệ Thực phẩm Liên hiệp hóa chất TP Hồ Chí Minh thuộc công nghiệp, trường ĐH Tổng hợp, Viện Công nghệ Sinh học…việc ứng dụng chế phẩm Bt phổ biến nhiều địa phương Đã có nhiều công trình nghiên cứu đánh giá hiệu lực diệt sâu hại chế phẩm sinh học từ nhiều năm nay, tập chung chủ yếu vào: - Bt phòng trừ sâu tơ, sâu khoang, sâu xanh bướm trắng… hại rau vùng trồng rau chuyên canh thành phố Hà Nội, Hải Phòng, Đà Lạt, Thái Nguyên…trên diện tích hàng vạn hecta, hiệu 75 – 90 % sau ngày phun - Bt trừ sâu róm thông Thanh Hóa, Nghệ An, Sơn La… diện tích hàng nghìn hecta thông, hiệu đạt 80 % sau – 10 ngày phun Nguyễn Văn Mạnh 20 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp - Bt trừ sâu hại đậu đỗ, thuốc lá, sâu hại bông… diện tích hàng trăm hecta, hiệu phòng trừ 65 – 85 % sau – 14 ngày phun Theo nghiên cứu tác giả Phạm Thị Thùy [8] chế phẩm Bt có hiệu cao với sâu tơ, khả gây chết đạt 90 % với thí nghiệm phòng, sâu xanh hại 70 – 80 % sau ngày thí nghiệm Bt có hiệu lực không cao sâu khoang, sâu xanh hại tính kháng thuốc sâu chất lượng bt, Viện Bảo vệ thực vật nghiên cứu sử dụng hỗn hợp Bt với virus, mục đích làm tăng hiệu diệt sâu theo chế đồng tác động II.4.2 Ứng dụng chế phẩm virus Theo tài liệu GS TS Phạm Thị Thùy (2004) [8] cho biết Viện Bảo vệ thực vật sản xuất virus sâu xanh NPV.Ha để phòng trừ sâu xanh đục vùng trồng nước ta thu kết đáng khích lệ Ngoài thuốc virus sâu khoang NPV.SI trừ sâu khoang hại rau, đậu… Hà Nội, Hải Phòng thuốc virus sâu keo da láng NPV.Se sử dụng để phòng trừ keo da láng hại hành Quảng Ngãi, Ninh Thuận… từ năm 1990 – 2004 Hiệu phòng trừ sâu tơ, sâu khoang hại su hào chế phẩm virus xã Tiền Phong, Mê Linh, Vĩnh Phúc năm 2002 [7] Kết cho thấy hiệu chế phẩm virus trừ sâu tơ hại su hào đạt 62,3 – 71,9 % sau – ngày phun, hiệu trừ sâu khoang sau phun ngày đạt trung bình 69,5 % tần suất xuất vi sinh vật gây bệnh côn trùng: virus 13,4 – 20,2 %, vi khuẩn Bt 16,4 – 19,3 %, nấm loại đạt 6,8 – 14,8 % II.4.3 Ứng dụng chế phẩm vi nấm côn trùng Theo tài liệu tác giả Phạm Thị Thùy (2004) [8] thuốc nấm ứng dụng rộng rãi đối tượng sâu rau công nghiệp + Mô hình ứng dụng chế phẩm nấm Beauveria Metarhizium trừ sâu khoang sâu xanh (Ha) đục đậu Viện BVTV Hà Nội nồng độ 5x108 bt/ml cho Nguyễn Văn Mạnh 21 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp thấy sau 12 – 15 ngày phun, hiệu lực chế phẩm nấm Beauveria đạt 63,7 – 64,5 % chế phẩm nấm Metarhizium đạt 67,9 – 69,7 % Hiệu lực chế phẩm nấm Beauveria với sâu khoang sâu keo da láng ăn đậu tương Hà Tĩnh sau 10 – 15 ngày phun thuốc đạt 60,1 – 64,5 % chế phẩm Metarhizium nấm Ma đạt 62,8 – 67,2 % + Dịch sâu róm thông xuất gây hại cho thông nghiêm trọng Hà Trung, Thanh Hóa nông trường Phù Bắc Yên, Sơn La năm 1996 – 1998, Sơn Động, Bắc Giang năm 1998 – 2000, Nghệ An, Hà Tĩnh năm 2003, thuốc nấm Boverit Mat Viện Bảo vệ thực vật dập tắt nạn sâu róm thông diện tích hàng nghìn hecta với hiệu đạt 70 – 97,8 % sau tới tháng phun, hiệu kéo dài đến vài năm mà thuốc hóa học không đáp ứng Các chế phẩm nấm Metarhizium anisopliae Beauveria bassiana triển khai ứng dụng rộng rãi phòng trừ: bọ dừa, châu chấu, róm thông, sâu kèn…trên nông nghiệp như: sâu xanh bướm trắng, sâu khoang, sâu tơ… hại rau nhiều vùng thu kết tốt [4] Nguyễn Văn Mạnh 22 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp PHẦN III VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU III.1 Vật liệu, đối tượng, địa điểm thời gian nghiên cứu III.1.1 Vật liệu nghiên cứu Cây ký chủ: rau thuộc họ thập tự loại rau khác xã Kim Chung, Đông Anh; Trúc Sơn, Chương Mỹ thành phố Hà Nội Các chế phẩm sinh học Bt vi nấm Trung tâm Sinh học Nông nghiệp bảo vệ môi trường Các nguồn vi sinh vật ký sinh sâu hại rau Những loại sâu hại rau trình điều tra sâu xanh bướm trắng (Pieris rapae), sâu tơ (Plutella xylostella), sâu khoang (Spodoptera litura) Các hóa chất sử dụng làm môi trường để phân lập vi sinh vật ký sinh sâu hại rau thu thập được: + Aga + Pepton + Glucoza + Cồn + KH2PO4 + MgSO4.7H2O Dụng cụ thiết bị phòng thí nghiệm: ống nghiệm, bình tam giác, tủ cấy… III.1.2 Đối tượng nghiên cứu Các loại sâu xanh bướm trắng, sâu khoang, sâu tơ hại rau thu đồng ruộng vụ Xuân Hè, năm 2011 vùng Hà Nội Nguyễn Văn Mạnh 23 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp Các vi sinh vật ký sinh gây bệnh loại sâu hại rau vùng điều tra III.1.3 Địa điểm nghiên cứu Một số vùng trồng rau ngoại thành Hà Nội: + Xã Kim Chung, huyện Đông Anh + Xã Tây Tựu, huyện Từ Liêm + Xã Tràng An, huyện Chương Mỹ Trung tâm Sinh học Nông nghiệp bảo vệ môi trường Phòng thí nghiệm môn Công nghệ Sinh học khoa sinh trường Đại học Sư phạm Hà Nội III.1.4 Thời gian nghiên cứu Từ ngày 14/01/2011 đến ngày 03/05/2011 III.2 Nội dung phương pháp nghiên cứu III.2.1 Nội dung: Điều tra thành phần sâu hại rau vụ Xuân Hè, năm 2011 vùng trồng rau ngoại thành Hà Nội theo (bảng 1) Điều tra thành phần vi sinh vật ký sinh sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ đồng ruộng vụ Xuân Hè, năm 2011 theo (bảng 2) Điều tra diễn biến vi sinh vật ký sinh sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ trồng (tỷ lệ sâu bị nhiễm bệnh vi sinh vật đồng ruộng theo bảng 3, 4, 5) Thử hiệu lực số chế phẩm sinh học trừ sâu hại rau điều kiện phòng thí nghiệm (bảng 6, 7) Nguyễn Văn Mạnh 24 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp III.2.2 Phương pháp nghiên cứu III.2.2.1 Nội dung 1: Điều tra thành phần sâu hại đồng ruộng vùng trồng rau Hà Nội Mục đích: Xác định thành phần sâu hại đồng ruộng vùng trồng rau ngoại thành Hà Nội Thời gian địa điểm điều tra: Định kỳ điều tra vào ngày thứ thứ hàng tuần vùng trồng rau ngoại thành (xã Kim Chung, huyện Đông Anh; xã Tây Tựu, huyện Từ Liêm; xã Tràng An, huyện Chương Mỹ) thành phố Hà Nội Phương pháp điều tra: Thu mẫu mang phân tích để xác định thành phần sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ sau trình điều tra (GS Phạm Thị Thùy phân loại) Ghi chép độ ẩm, nhiệt độ, thời tiết số liệu điều tra vào bảng III.2.2.2 Nội dung 2: Điều tra thành phần vi sinh vật ký sinh sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ đồng ruộng vụ Xuân Hè, năm 2011 Mục đích: Xác định thành phần vi sinh vật ký sinh sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ đồng ruộng vụ Xuân Hè, năm 2011 Thời gian địa điểm điều tra: Định kỳ điều tra vào ngày thứ thứ hàng tuần vùng trồng rau ngoại thành (xã Kim Chung, huyện Đông Anh; xã Tây Tựu, huyện Từ Liêm; xã Tràng An, huyện Chương Mỹ) thành phố Hà Nội Phương pháp điều tra: Thu mẫu mang về, tiến hành nuôi theo dõi thường xuyên sâu để phân tích, phân lập xác định thành phần vi sinh vật ký sinh sâu hại thu thập từ vùng điều tra Quan sát xác định triệu chứng chết sâu bị nhiễm vi sinh vật mắt thường dựa theo tài liệu GS TS Phạm Thị Thùy [7] Nguyễn Văn Mạnh 25 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp + Triệu chứng sâu chết Bacillus thuringiensis (Bt): sâu bị nhiễm lúc đầu tê liệt toàn thân, sau ngừng ăn, có biểu chậm chạp không hoạt động Sâu chết có mầu đen, toàn thân khô cứng + Triệu chứng sâu chết nhiễm virus: bị nhiễm virus sâu giảm ăn, hoạt động yếu Sau – ngày bị bệnh đốt thân chân sâu bị căng phồng mọng nước, da mỏng dần dễ vỡ, sâu chết có tượng bị nhũn Sau – ngày chết nhũn có dịch chảy + Triệu chứng sâu chết nhiễm nấm: sâu bị nhiễm nấm thường chết cứng sợi nấm mọc thể sâu Sau thời gian sợi nấm đâm xuyên thể sâu hình thành lớp bao phủ đầy bề mặt thể sâu hại Ghi chép độ ẩm, nhiệt độ, thời tiết số liệu điều tra vào bảng Nhờ giúp đỡ GS TS Phạm Thị Thùy phân loại xác định tên loài vi sinh vật ký sinh sâu hại rau sau trình điều tra Thu loại sâu tối thiểu 50 để xác định vi sinh vật ký sinh sau thời gian theo dõi III.2.2.3 Nội dung 3: Điều tra diễn biến vi sinh vật ký sinh sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ trồng (tỷ lệ sâu bị nhiễm bệnh vi sinh vật đồng ruộng) Mục đích: Xác định tỷ lệ nhiễm vi sinh vật phổ biến ký sinh sâu hại rau trồng (tỷ lệ sâu bị nhiễm bệnh vi sinh vật đồng ruộng) Thời gian địa điểm điều tra: Định kỳ điều tra vào ngày thứ thứ hàng tuần vùng trồng rau ngoại thành (xã Kim Chung, huyện Đông Anh; xã Tây Tựu, huyện Từ Liêm; xã Tràng An, huyện Chương Mỹ) thành phố Hà Nội Phương pháp điều tra: Điều tra theo điểm chéo góc, điểm cách bờ 3m Nguyễn Văn Mạnh 26 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp Thu mẫu sâu tay tối thiểu 50 loại sâu (bao gồm sâu sống sâu chết ký sinh) mang theo dõi phân tích Xác định tỷ lệ (%) sâu bị nhiễm bệnh vi sinh vật đồng ruộng Tỷ lệ sâu nhiễm bệnh đợt điều tra tính theo công thức: Tổng sâu nhiễm bệnh vi sinh vật Tỷ số sâu bị bệnh (%) = Tổng sâu điều tra x100 Ghi chép nhiệt độ, độ ẩm, số liệu điều tra vào bảng Nhận xét: Xác định theo dõi hàng ngày tỷ lệ nhiễm vi sinh vật phổ biến có triển vọng việc khống chế sâu hại III.2.2.4 Nội dung 4: Thử hiệu lực số chế phẩm sinh học trừ sâu hại rau điều kiện phòng thí nghiệm Mục đích: Đánh giá hiệu lực số chế phẩm sinh học để phòng trừ sâu hại rau phòng thí nghiệm Nuôi sâu thí nghiệm: bắt sâu tự nhiên làm thí nghiệm a Thí nghiệm sử dụng chế phẩm Bt để phun trừ sâu tơ (Plutella xylostella) tuổi Bố trí công thức thí nghiệm: Công thức I: đối chứng (không phun dịch bào tử) Công thức II: phun nồng độ thấp (1x108 bt/ml) Công thức III: phun nồng độ trung bình (2x108 bt/ml) Công thức IV: phun nồng độ cao (3x108 bt/ml) b Thí nghiệm phun nấm lục cương Metarhizium anisopliae để trừ sâu sâu xanh bướm trắng (Pieris rapae) tuổi Bố trí công thức thí nghiệm: Công thức I: đối chứng (không phun dịch bào tử) Công thức II: phun nồng độ thấp Nguyễn Văn Mạnh 27 (2x108 bt/ml) MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp Công thức III: phun nồng độ trung bình (4x108 bt/ml) Công thức IV: phun nồng độ cao (6x108 bt/ml) c Thí nghiệm phun nấm bạch cương Beauveria bassiana để trừ sâu khoang (Spodoptera litura) tuổi Bố trí công thức thí nghiệm: Công thức I: đối chứng (không phun dịch bào tử) Công thức II: phun nồng độ thấp (3x108 bt/ml) Công thức III: phun nồng độ trung bình (6x108 bt/ml) Công thức IV: phun nồng độ cao (9x108 bt/ml) Phương pháp thực hiện: Thí nghiệm phòng: Phương pháp dùng chung cho thí nghiệm trên: loại sâu bố trí công thức, công thức nhắc lại lần, lần nhắc lại 10 sử dụng nguồn chế phẩm Bt, vi nấm Trung tâm Sinh học cung cấp Tính theo cách pha phun chế phẩm: Cân 7,2g chế phẩm để pha với 60 ml nước đánh kỹ sau lọc lấy dịch nấm Cho thêm 1-2 giọt chất bám dính Agral đánh kỹ Chia 60 ml dịch nấm phần theo tỉ lệ; 10 ml : 20 ml : 30 ml sau thêm vào phần lượng nước vừa đủ để đạt 30 ml Ta thu công thức với nồng độ khác 2x108 bt/ml, 4x108 bt/ml, 6x108 bt/ml + Lấy 10ml dung dịch + 20ml nước = nồng độ 2x108bt/ml, dùng để phun cho công thức II + Lấy tiếp 20ml dung dịch + 10ml nước = nồng độ 4x108bt/ml, dùng để phun cho công thức III + Lấy tiếp 30ml dung dịch nồng độ 6x108 bt/ml, để phun cho công thức IV Nguyễn Văn Mạnh 28 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp Chỉ tiêu theo dõi hàng ngày: - Thay khay thức ăn liên tục - Ghi chép số sâu chết công thức - Xác định tỷ lệ nhiễm vi sinh vật phổ biến có triển vọng việc khống chế sâu hại Xác định hiệu lực chế phẩm vi sinh vật công thức Abbott: Ca – Ta M (%) = Ca x100 Trong đó: M (%): Là tỷ lệ sâu hại chết Ta: Số sâu sống lô thí nghiệm sau thí nghiệm Ca: Số sâu sống lô đối chứng sau thí nghiệm Số sâu chết vi sinh vật Tỷ số sâu chết vi sinh vật (%)= x 100 Tổng số sâu chết chung Nhận xét: Nguyễn Văn Mạnh 29 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp PHẦN IV DỰ KIẾN KẾT QUẢ ĐẠT ĐƯỢC Xác định thành phần loài sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ vụ Xuân Hè, năm 2011 vùng ngoại thành Hà Nội Điều tra thành phần vi sinh vật ký sinh sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ đồng ruộng vụ Xuân Hè, năm 2011 Xác định diễn biến sinh học số vi sinh vật ký sinh phổ biến sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ vùng điều tra Đánh giá hiệu số chế phẩm trừ sâu vi sinh vật loại sâu (sâu xanh bướm trắng, sâu khoang, sâu tơ) hại rau phòng thí nghiệm Nguyễn Văn Mạnh 30 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp PHẦN V TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu nước: Tạ Thu Cúc (2005) Giáo trình kỹ thuật trồng rau Nhà Xuất Hà Nội Trang – 13 Cục bảo vệ thực vật (1995) Phương pháp điều tra phát sâu bệnh hại trồng Nhà Xuất Nông nghiệp Hà Nội Trang 96 – 132 Nguyễn Lân Dũng (1981) Sử dụng vi sinh vật để phòng trừ sâu hại trồng Nhà Xuất Khoa học kỹ thuật Hà Nội Nguyễn Sĩ Tiệp Đề cương thực tập tốt nghiệp, đề tài: “điều tra thành phần vi sinh vật ký sinh gây bệnh số sâu hại rau vụ xuân hè năm 2010 vùng hà nội” trường ĐHDL Phương đông – Hà Nội – khoa Công nghệ Sinh học Phạm Thị Thùy (1997) Kết phân lập thành phần vi sinh vật sâu tơ bước đầu thử nghiệm chế phẩm nấm Beauveria bassiana (Bb) Metarhizium anisopliae (Ma) trừ sâu tơ hại bắp cải Tuyển tập công trình nghiên cứu biện pháp sinh học bảo vệ thực vật NXBNN Trang 38 – 41 Phạm Thị Thùy (2000) Thành phần vi sinh vật sâu tơ hại rau cải thảo Đà Lạt năm 1998 Tạp chí NN & CNTP số Trang 223 – 225 Phạm Thị Thùy, Trần Quang Tấn cộng (2001 - 2004) Nghiên cứu sản xuất ứng dụng thuốc trừ sâu sinh học Bt, NPV, V – Bt, nấm Beauveria bassiana (Bb), Metarhizium anisopliae (Ma), để sản xuất rau an Nguyễn Văn Mạnh 31 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp toàn Hải Phòng Vĩnh Phúc Tuyển tập công trình nghiên cứu biện pháp sinh học bảo vệ thực vật Nhà Xuất Nông nghiệp Trang 65- 73 Phạm Thị Thùy (2004) Công nghệ sinh học bảo vệ thực vật NXB Đại học Quốc gia Hà Nội Phạm Thị Thùy, Nguyễn Văn Sơn, cộng (2006 – 2007) Nghiên cứu ứng dụng biện pháp sinh học tổng hợp phòng trừ sâu, bệnh hại số trồng Lâm Đồng Tuyển tập công trình nghiên cứu biện pháp sinh học bảo vệ thực vật NXBNN Tr 129 - 143 10 Phạm Thị Thùy cộng (2007) Nghiên cứu công nghệ sản xuất ứng dụng chế phẩm Bacillus thuringiensis để phòng trừ sâu hại trồng Tuyển tập công trình nghiên cứu biện pháp sinh học bảo vệ thực vật NXBNN Tr 42 -47 Tài liệu nước ngoài: Tài liệu internet: 11 http://rausach.com.vn - IPM trồng trọt 12 http://agriviet.com – sâu hại cải bắp 13 http://vi.wikipedia.org – Louis Pasteur công trình nghiên cứu Hà nội, ngày tháng năm 2011 Giáo viên hướng dẫn Sinh viên thực GS TS Phạm Thị Thùy Nguyễn Văn Mạnh Nguyễn Văn Mạnh 32 MSSV: 507301065 [...]... dung: Điều tra thành phần sâu hại chính trên rau vụ Xuân Hè, năm 2011 các vùng trồng rau ngoại thành Hà Nội theo (bảng 1) Điều tra thành phần vi sinh vật ký sinh trên sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ ngoài đồng ruộng vụ Xuân Hè, năm 2011 theo (bảng 2) Điều tra diễn biến của vi sinh vật chính ký sinh trên sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ trồng (tỷ lệ sâu bị nhiễm bệnh do vi sinh vật trên đồng... trình điều tra Thu mỗi loại sâu tối thiểu 50 con để xác định vi sinh vật ký sinh sau thời gian theo dõi III.2.2.3 Nội dung 3: Điều tra diễn biến của vi sinh vật chính ký sinh trên sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ trồng (tỷ lệ sâu bị nhiễm bệnh do vi sinh vật trên đồng ruộng) Mục đích: Xác định tỷ lệ nhiễm của vi sinh vật phổ biến ký sinh trên sâu hại rau trồng (tỷ lệ sâu bị nhiễm bệnh do vi sinh vật. .. ẩm, nhiệt độ, thời tiết và số liệu điều tra được vào bảng 1 III.2.2.2 Nội dung 2: Điều tra thành phần vi sinh vật ký sinh trên sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ ngoài đồng ruộng vụ Xuân Hè, năm 2011 Mục đích: Xác định được thành phần vi sinh vật ký sinh trên sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ ngoài đồng ruộng vụ Xuân Hè, năm 2011 Thời gian và địa điểm điều tra: Định kỳ điều tra vào các ngày thứ 2 và... nghiệp Thu mẫu sâu bằng tay tối thiểu 50 con mỗi loại sâu (bao gồm cả sâu sống và sâu chết do ký sinh) mang về theo dõi và phân tích Xác định tỷ lệ (%) sâu bị nhiễm bệnh do vi sinh vật trên đồng ruộng Tỷ lệ sâu nhiễm bệnh ở các đợt điều tra tính theo công thức: Tổng sâu nhiễm bệnh do vi sinh vật Tỷ số sâu bị bệnh (%) = Tổng sâu điều tra x100 Ghi chép nhiệt độ, độ ẩm, số liệu điều tra được vào bảng... tra thành phần vi sinh vật ký sinh trên sâu chính hại rau vụ xuân hè và vụ đông tại Vi n Bảo vệ thực vật, xã Tây Tựu, xã Minh Khai, Từ Liêm, Hà Nội và vụ rau Đông Xuân tại xã Do Hạ, Tiền Phong, Mê Linh, Vĩnh Phúc kết quả thu được chủ yếu là virus sâu tơ Granulosis Virus.Px (GV.px) ký sinh trên sâu tơ, virus sâu xanh bướm trắng Granulosis Virus Pieris rapae (GV.pr) ký sinh trên sâu xanh bướm trắng, virus... chép số sâu chết ở mỗi công thức - Xác định tỷ lệ nhiễm của vi sinh vật phổ biến và có triển vọng trong vi c khống chế sâu hại Xác định hiệu lực của các chế phẩm vi sinh vật bằng công thức Abbott: Ca – Ta M (%) = Ca x100 Trong đó: M (%): Là tỷ lệ sâu hại chết Ta: Số sâu sống trên lô thí nghiệm sau thí nghiệm Ca: Số sâu sống trên lô đối chứng sau thí nghiệm Số sâu chết do vi sinh vật Tỷ số sâu chết do vi. .. trồng rau Nhà Xuất bản Hà Nội Trang 5 – 13 2 Cục bảo vệ thực vật (1995) Phương pháp điều tra phát hiện sâu bệnh hại cây trồng Nhà Xuất bản Nông nghiệp Hà Nội Trang 96 – 132 3 Nguyễn Lân Dũng (1981) Sử dụng vi sinh vật để phòng trừ sâu hại cây trồng Nhà Xuất bản Khoa học kỹ thuật Hà Nội 4 Nguyễn Sĩ Tiệp Đề cương thực tập tốt nghiệp, đề tài: điều tra thành phần vi sinh vật ký sinh gây bệnh trên một số sâu. .. Mỹ thành phố Hà Nội Các chế phẩm sinh học Bt và vi nấm do Trung tâm Sinh học Nông nghiệp và bảo vệ môi trường Các nguồn vi sinh vật ký sinh trên sâu hại rau Những loại sâu chính hại rau trong quá trình điều tra như sâu xanh bướm trắng (Pieris rapae), sâu tơ (Plutella xylostella), sâu khoang (Spodoptera litura) Các hóa chất được sử dụng làm môi trường để phân lập các vi sinh vật ký sinh trên sâu. .. 2011 Xác định được diễn biến sinh học của một số vi sinh vật ký sinh phổ biến trên sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ trong vùng điều tra Đánh giá được hiệu quả của một số chế phẩm trừ sâu vi sinh vật đối với mỗi loại sâu (sâu xanh bướm trắng, sâu khoang, sâu tơ) hại rau trong phòng thí nghiệm Nguyễn Văn Mạnh 30 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp PHẦN V TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu... sinh vật Tỷ số sâu chết do vi sinh vật (%)= x 100 Tổng số sâu chết chung Nhận xét: Nguyễn Văn Mạnh 29 MSSV: 507301065 Khoa CNSH & MT Chuyên đề tốt nghiệp PHẦN IV DỰ KIẾN KẾT QUẢ ĐẠT ĐƯỢC Xác định được thành phần các loài sâu hại chính trên cây rau bắp cải, su hào, súp lơ vụ Xuân Hè, năm 2011 vùng ngoại thành Hà Nội Điều tra được thành phần vi sinh vật ký sinh trên sâu hại rau bắp cải, su hào, súp lơ ... cứu vi sinh vật ký sinh gây bệnh sâu hại rau giới Vi t Nam II.1.1 Tình hình nghiên cứu vi sinh vật ký sinh gây bệnh sâu hại rau giới II.1.2 Tình hình nghiên cứu vi sinh vật ký. .. Điều tra thành phần sâu hại rau bắp cải 245 III 2.2 Nội dung 2: Điều tra thành phần vi sinh vật ký sinh sâu hại rau bắp cải 25 III.2.3 Nội dung 3: Điều tra diễn biến vi sinh vật ký. .. tài: “ Điều tra thành phần vi sinh vật ký sinh gây bệnh số sâu hại rau vụ Xuân Hè, năm 2011 vùng Hà Nội” I Mục đích yêu cầu đề tài: I.1 Mục đích: Xác định thành phần vi sinh vật loài sâu hại rau