BƯỚC ĐẦU KHẢO SÁT TUYẾN TRÙNG KÝ SINH THỰC VẬT TRÊN MỘT SỐ CÂY DƯỢC LIỆU TẠI ĐÔNG TRIỀU (QUẢNG NINH)

Trong chương trình phát triển cây dược liệu Quốc gia, Quảng Ninh là một trong những vùng trồng trọng điểm của cả nước. Cây dược liệu ngoài giá trị chữa bệnh hoặc bồi bổ sức khoẻ, còn là một nguồn lợi kinh tế lớn. Để phát triển cây dược liệu, một vấn đề quan trọng cần quan tâm là bệnh hại thực vật, trong đó bao gồm cả tuyến trùng ký sinh thực vật.

HỘI NGHỊ KHOA HỌC TOÀN QUỐC VỀ SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT LẦN THỨ BƢỚC ĐẦU KHẢO SÁT TUYẾN TRÙNG KÝ SINH THỰC VẬT TRÊN MỘT SỐ CÂY DƢỢC LIỆU TẠI ĐÔNG TRIỀU (QUẢNG NINH) NGUYỄN HỮU TIỀN, NGUYỄN THỊ DUYÊN LÊ THỊ MAI LINH, TRỊNH QUANG PHÁP Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam NGUYỄN THỊ TUYẾT Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam Trong chương trình phát triển dược liệu Quốc gia, Quảng Ninh vùng trồng trọng điểm nước Cây dược liệu giá trị chữa bệnh bồi bổ sức khoẻ, nguồn lợi kinh tế lớn Để phát triển dược liệu, vấn đề quan trọng cần quan bệnh hại thực vật, bao gồm tuyến trùng ký sinh thực vật Tuyến trùng ký sinh thực vật (TTKSTV) đối tượng gây hại với trồng Ngoài khả gây hại trực tiếp làm cho chủ còi cọc phát triển, chúng tác nhân gián tiếp tạo vết thương rễ làm cho nấm, vi khuẩn bệnh đất xâm nhập gây hại (Perry & Moens, 2006) [5] Tác hại tuyến trùng hoa dược liệu nhiều so với loại khác (Hagan, 2005) [4] Ở Việt Nam, có số công bố TTKSTV dược liệu như: Tylenchorhynchus brassicae, Hirschmanniella mucronata, H shamini Pratylenchus teres bạc hà (Nguyễn Ngọc Châu, Nguyễn Vũ Thanh, 2000) [3]; Ngô Thị Xuyên (2000) [10] cho thấy số dược liệu Ngưu tất, Bạch truật, Bạch chỉ, Hoắc hương, bị gây hại tuyến trùng M incognita Để làm sơ khoa học cho phòng trừ bệnh TTKSTV trồng chuyên canh dược liệu với diện tích lớn, tiến hành nghiên cứu thành phần tuyến trùng gây hại dược liệu Đông Triều, Quảng Ninh I PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tƣợng nghiên cứu Các tuyến trùng gây hại số dược liệu trồng Đông Triều, Quảng Ninh Bảng Danh sách loại dƣợc liệu điều tra Đông Triều, Quảng Ninh TT Tên phổ thông Địa liền Tàu bay Râu mèo Kim ngân Hoài sơn Kim tiền thảo Nghệ vàng Tên khoa học Kaempferia galanga L Crassocephalum crepidioides (Benth.) Orthosiphon stamineus Benth Lonicera japonica Thunb Dioscorea persimilis Prain & Burkill Desmodium styracifolium (Osb.) Curcuma longa L Số mẫu nghiên cứu 2 2 Phƣơng pháp nghiên cứu - Phương pháp thu mẫu vật + Mẫu tuyến trùng thu vùng trồng dược liệu Đông Triều, Quảng Ninh Lựa chọn ruộng đại diện có triệu chứng bệnh vàng lá, còi cọc Thu mẫu rễ mẫu đất 928 HỘI NGHỊ KHOA HỌC TOÀN QUỐC VỀ SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT LẦN THỨ có biểu bệnh (như vàng lá, thối rễ, sần rễ…), đất gạt bỏ lớp bề mặt quanh vùng rễ, đào sâu xuống khoảng 15-20 cm từ mặt đất thu khoảng kg đất, g rễ Đất rễ giữ túi bóng để vào thùng mát vận chuyển phòng thí nghiệm phân tích + Tách lọc tuyến trùng: Tách lọc tuyến trùng từ mẫu rễ theo phương pháp lọc tĩnh tách tuyến trùng từ đất Nguyễn Ngọc Châu (2003) [2] Mỗi mẫu đất định lượng 250 g đất để tách lọc Mẫu rễ có triệu chứng u sưng tách trực tiếp kính hiển vi soi thu cá thể loài Meloidogyne spp phục vụ cho phân loại - Phương pháp tính mật độ tần suất bắt gặp tuyến trùng: mẫu đất sau định lượng tách lọc để thu tuyến trùng đưa lên đĩa đếm, đặt kính hiển vi soi để đếm toàn số lượng tuyến trùng giống Tần suất bắt gặp giống tuyến trùng = (số mẫu bắt gặp giống đó/ tổng số mẫu điều tra)×100% - Phương pháp làm tiêu cố định tuyến trùng: Để phục vụ cho việc lưu giữ lâu dài tiêu cần tiến hành xử lý làm tiêu cố định tuyến trùng Trước xử lý nước cho mẫu tuyến trùng cố định tuyến trùng thời gian từ 4-5 ngày dung dịch TAF, sau cho vào glycerin qua phương pháp bay Seinhorst (1959) [7] Quy trình xử lý tuyến trùng để làm tiêu cố định mô tả Nguyễn Ngọc Châu, 2003[2] Riêng tuyến trùng sần rễ Meloidogyne, pattern tách riêng phục vụ cho phân loại Perry et al (2009) [6] - Phương pháp phân loại tuyến trùng: Tuyến trùng sau lên tiêu đo vẽ kính CH40 phân loại dựa theo tài liệu Nguyễn Ngọc Châu, Nguyễn Vũ Thanh, 2000) [3], Siddiqi (2000) [8] Các loài nghi ngờ tiếp tục tra cứu tài liệu giống Pratylenchus (Castillo & Vovlas, 2008) [1], Meloidogyne (Perry et al, 2009) [6] II KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Thành phần tuyến trùng ký sinh Thành phần tuyến trùng ký sinh thực vật vùng trồng chuyên canh số dược liệu Đông Triều, Quảng Ninh liệt kê bảng Kết phân tích 16 mẫu đất thuộc 16 địa điểm vùng trồng dược liệu Quảng Ninh cho thấy thành phần tuyến trùng ký sinh thực vật gồm: 13 loài thuộc giống, họ tuyến trùng ký sinh thực vật Trong đó, tuyến trùng ngoại ký sinh thuộc giống Helicotylenchus có tần suất bắt gặp cao 26%, tuyến trùng gây sần rễ giống Meloidogyne với tần suất 22%, giống Rotylenchulus (20%), giống Criconemella (11%), giống Pratylenchus (9%) Các giống Xiphinema, Hoplolaimus Paratricodorus có tần suất bắt gặp thấp 7%, 2% 2% Bảng Thành phần tuyến trùng ký sinh thực vật vùng trồng chuyên canh dƣợc liệu Đông Triều, Quảng Ninh TT Tên loài BỘ TYLENCHIDA THORNE, 1949 Họ Hoplolaimidae Filipjev, 1934 Giống Rotylenchulus Linford & Oliveira, 1940 R reniformis Linford & Oliveira, 1940 Giống Helicotylenchus Steiner, 1945 H dihystera Sher, 1961 Helicotylenchus sp 929 HỘI NGHỊ KHOA HỌC TOÀN QUỐC VỀ SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT LẦN THỨ Giống Hoplolaimus Daday, 1905 H seinhorsti Luc, 1958 Họ Criconematidae Thorne, 1949 Giống Criconemella de Grisse & Loof, 1965 Criconemella magnifica Rasky & Luc, 1987 Họ Meloidogynidae Filipjev, 1934 Giống Meloidogyne Goeldi, 1892 M incognita (Kofoid & White, 1919) Chitwood, 1949 M arenaria (Neal, 1889) Chitwood, 1949 M javanica (Treub, 1885) Chitwood, 1949 Họ Pratylenchidae Thorne, 1949 Giống Pratylenchus Filipjev, 1936 P brachyurus (Godfrey, 1929) Filipjev & Stekhoven, 1941 10 P coffeae (Zimmerman, 1898) Filipjev & Schuurmans Stekhoven, 1941 11 Pratylenchus spec BỘ DORYLAIMIDA PEARSE, 1942 Họ Longidoridae Thorne, 1935 Giống Xiphinema Cobb, 1913 12 X elongatum Stekhoven & Teunissen, 1938 BỘ TRIPLONCHIDA COBB, 1920 Họ Trichodoridae Giống Paratrichodorus 13 Paratrichodorus sp Các giống thuộc họ Tylenchidae (như Filenchus, Tylenchus Aglenchus), giống Aphelenchoides, Aphelenchus bắt gặp trình phân tích mẫu giống không ký sinh chủ yếu dược liệu thường coi tuyến trùng ăn nấm (hay hoại sinh) nên không liệt kê bảng Mật độ ảnh hƣởng nhóm tuyến trùng ký sinh thực vật số dƣợc liệu Mỗi loài dược liệu trồng vùng Đông Triều có thành phần tuyến trùng khác nên khả gây hại tuyến trùng ký sinh thực vật loài khác Đối với Râu mèo có số lượng giống tuyến trùng ký sinh cao với giống: Helicotylenchus, Meloidogyne, Pratylenchus, Rotylenchulus, Xiphinema, Criconemella Hoplolaimus Trong giống Helicotylenchus có số lượng cá thể nhiều chiếm 50,25% (288 con/ 250g đất) Trong trình điều tra thực địa với mẫu bị vàng cho thấy tỷ lệ nốt sần râu mèo 30-40%, phân tích thành phần loài cho thấy tuyến trùng Meloidogyne incognita Meloidogyne arenaria tạo tổ hợp nốt sần rễ Bên cạnh mức độ vết thương loài Pratylenchus sp số loài ngoại ký sinh khác Helichotylenchus dihystera Hoplolaimus seinhorsti Triệu chứng điển hình tuyến trùng ký sinh thực vật gây làm cho còi cọc vàng lá, rễ có nhiều nốt sần vết thương Cây Tàu bay có giống ký sinh: Helicotylenchus, Meloidogyne, Xiphinema, Criconemella, Rotylenchulus Paratrichodorus Trong giống Helicotylenchus có số lượng cá thể nhiều chiếm 41,76% (545 con/ 250g đất) Tỷ lệ nốt sần tàu bay từ 10-20% Bên cạnh xuất loài Paratrichodorus sp mẫu đất với mật độ lớn, loài tuyến trùng thuộc nhóm mang truyền virus Một số Tàu bay chết rạp ruộng, tương tác tuyến trùng ký sinh thực vật với nấm, vi khuẩn gây bệnh đất khác cần nghiên cứu sâu 930 HỘI NGHỊ KHOA HỌC TOÀN QUỐC VỀ SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT LẦN THỨ Paratrichodorus 0.35% Hoplolaimus 0.02% Helicotylenchus 38.54% Rotylenchulus 37.68% Criconemella 0.15% Xiphinema 0.16% Meloidogyne 21.01% Pratylenchus 2.08% Hình 1: Biểu đồ phần trăm số lƣợng tuyến trùng thuộc giống Bảng Mật độ tuyến trùng số thuốc (250g/ 1mẫu đất) Helicotylenchus spp Meloidogyne spp Pratylenchus spp Xiphinema elongatum Criconemella magnifica Hoplolaimus seinhorsti Rotylenchulus reniformis Paratrichodorus sp Tàu bay 545 435 10 230 80 Râu mèo 288 234 5 37 Nghệ vàng 440 35 0 2690 Kim ngân 335 26 14 0 58 Hoài sơn 17.5 430 0 337.5 Kim tiền thảo 480 1135 7.5 0 Địa liền 90 0 0 1860 Cây Kim ngân có giống tuyến trùng ký sinh là: Pratylenchus, Rotylenchulus, Helicotylenchus Xiphinema Trong giống Helicotylenchus có số lượng cá thể nhiều chiếm 77,36% (335 cá thể/250 g đất) Bộ rễ Kim ngân cho thấy vết thương nhiều mật độ loài ngoại ký sinh Helicotylenchus dihystera nội ký sinh di chuyển Pratylenchus brachyurus gây nên Cây Nghệ vàng có giống tuyến trùng ký sinh là: Meloidogyne, Rotylenchulus Helicotylenchus Trong giống Rotylenchulus có số lượng cá thể nhiều chiếm 94,36% (2690 cá thể/250 g đất) Trong tỷ lệ nốt sần rễ cao từ 20-30% mẫu thu phân tích tổ hợp nốt sần thấy xuất loài M incognita, M arenarea M javanica Nhóm tuyến trùng gây vết thương bắt gặp loài Pratylenchus coffeae với mật độ không cao Do vậy, với triệu chứng vàng còi cọc Nghệ vàng liên quan tới nhóm tuyến trùng gây hại quan trọng Meloidogyne, Pratylenchus R reniformis Cây Hoài sơn có giống tuyến trùng ký sinh: Meloidogyne, Pratylenchus, Rotylenchulus Helicotylenchus Trong giống Pratylenchuslus có số lượng cá thể nhiều chiếm 54,43% (430 cá thể/250 g đất) Triệu chứng mẫu bệnh rễ có tỷ lệ nốt sần với 10-20% tỷ lệ vết thương củ rễ 20%, cho thấy khả ký sinh nhóm tuyến trùng gây sần rễ (Meloidogyne spp.) tuyến trùng gây vết thương (P brachyurus) Hoài sơn cao ảnh hưởng đến chất lượng củ 931 HỘI NGHỊ KHOA HỌC TOÀN QUỐC VỀ SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT LẦN THỨ Cây Kim tiền thảo có giống tuyến trùng ký sinh: Pratylenchus, Meloidogyne, Criconemella Helicotylenchus Trong giống Meloidogyne có số lượng cá thể nhiều chiếm 69,82% (1135 con/250 g đất) Triệu chứng rễ có nốt sần với tỷ lệ 30-40% tỷ lệ vết thương 20% còi cọc phát triển Triệu chứng nốt sần tuyến trùng Meloidogyne incognita triệu chứng vết thương tuyến trùng Pratylenchus brachyurus Helicotylenchus dihystera gây Cây Địa liền có giống tuyến trùng ký sinh Rotylenchulus Helicotylenchus Trong giống Rotylenchulus có số lượng cá thể nhiều chiếm 95,38% (1860 con/ 250 g đất) Mật độ tuyến trùng Rotylenchulus reniformis cao cho thấy khả ảnh hưởng nhóm tuyến trùng tới rễ sinh trưởng Địa liền lớn Như vậy, số giống tuyến trùng ký sinh số dược liệu có giống: Meloidogyne, Pratylenchus, Rotylenchulus, Helicotylenchus giống ký sinh quan trọng chúng có tần suất bắt gặp mật độ cao Những nhóm tuyến trùng với mật độ cao không gây hại trực tiếp thuốc làm cho sinh trưởng kém, rễ bị hủy hoại mà tác động gián tiếp làm tăng nguy mắc bệnh vi khuẩn, nấm đất bệnh khác Các vết thương rễ tuyến tuyến trùng gây tạo tiền đề cho tác nhân khác xâm nhập vào rễ nhanh Hơn nữa, nhóm tuyến trùng sần rễ Meloidogyne spp ký sinh làm thay đổi cấu trúc tế bào rễ cách tạo dịch chiết làm cho tế bào rễ phình to (nốt sần) điều ảnh hưởng đến chất lượng phẩm chất thuốc lấy củ Hoài sơn, Nghệ vàng Hơn số loài có khả ký sinh đa thực loài Meloidogyne spp R reniformis, H dihystera, P coffeae P brachyurus có khả lan tràn thành dịch lớn trồng chuyên canh phổ ký chủ loài rộng III KẾT LUẬN Qua kết điều tra sơ cho thấy thành phần TTKSTV dược liệu điều tra gồm 13 loài thuộc giống, họ Các nhóm tuyến trùng gây hại phổ biến nghiêm trọng tuyến trùng sần rễ Meloidogyne spp., tuyến trùng nội ký sinh Pratylenchus coffeae, P brachyurus, tuyến trùng bán nội ký sinh Helicotylenchus dihystera tuyến trùng bán nội ký sinh R reniformis tìm thấy hầu hết thuốc điều tra với mật độ cao Tuyến trùng gây sần rễ Meloidogyne tìm thấy loại thuốc: Crassocephalum crepidioides, Orthosiphon stamineus, Curcuma longa, Dioscorea persimilis, Desmodium styracifolium Lonicera japonica Pratylenchus tìm thấy loại thuốc: Orthosiphon stamineus, Curcuma longa, Dioscorea persimilis, Desmodium styracifolium R reniformis tìm thấy hầu hết loại điều tra ngoại trừ Desmodium styracifolium Đặc biệt giống Helicotylenchus xuất tất loại thuốc điều tra Với triệu chứng gây hại điển hình xuất với mật độ lớn chứng tỏ tuyến trùng thực vật có khả cao đối tượng trực tiếp gây giảm suất chất lượng thuốc Quảng Ninh TÀI LIỆU THAM KHẢO Castillo P., N Vovlas, 2008 Pratylenchus (Nematoda: Pratylenchidae): Diagnosis, Biology, Pathogenicity and Management, 529 pp Nguyễn Ngọc Châu, 2003 Tuyến trùng thực vật sở phòng trừ, Nxb KHKT, Hà Nội, 302 trang Nguyễn Ngọc Châu, Nguyễn Vũ Thanh, 2000 Động vật chí Việt Nam, Tuyến trùng ký sinh thực vật, Nxb KHKT, Hà Nội, 401 trang 932 HỘI NGHỊ KHOA HỌC TOÀN QUỐC VỀ SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT LẦN THỨ Hagan, A., 2005 “Nematode Pests of Annual and Perennial Flowers, Herbs, Woody Shrubs, and Trees” Eds, 12 pp Perry, R N., and Moens M., 2006 Plant Nematology CABI Publishing: Wallingford, UK 447 pp Perry R N., Moens M., Starr J L., 2009: Root-knot nematodes CAB International, Wallingford, UK, 483pp Seinhorst, J W., 1959 Nematologica, 4: 67-69 Siddiqi, M R., 2000 Tylenchida: Parasites of Plants and Insects, 2nd Edition CABI Publishing, Dec 2000, 848 pp Walker, J T., 1995 Hortscience, 30(2): 292–293 10 Ngô Thị Xuyên, 2000 Nghiên cứu đặc điểm sinh học khả phòng chống tuyến trùng nốt sưng (Meloidogyne incognita Kofoid et White, 1919/Chitwood, 1949) số trồng vùng Hà Nội phụ cận Luận án Tiến sĩ nông nghiệp, 140 trang PRELIMINARY STUDY ON PLANT PARASITIC NEMATODES ON SOME IMPORTANT HERBS IN DONG TRIEU (QUANG NINH PROVINCE) NGUYEN HUU TIEN, NGUYEN THI DUYEN, LE THI MAI LINH, TRINH QUANG PHAP, NGUYEN THI TUYET SUMMARY Quang Ninh is known as a specialized cultivation region of medicinal plants Our investigation collected 13 species belonging to genera, families and orders of nematodes Among these genera, Helicotylenchus has the highest appearance frequency with 26%, followed by Meloidogyne (22%), Rotylenchulus (20%), Criconemella (11%), Pratylenchus (9%) Xiphinema, Hoplolaimus and Paratrichodorus have the lowest appearance rate (with 6%, 2%, 2%, respectively) The plant parasitic nematode of genera Meloidogyne, Pratylenchus, and Rotylenchulus and Helicotylenchus could be considered as the most dangerous pest in medicinal plants in Dong Trieu (Quang Ninh) Meloidogyne spp were found on medicinal plants: Crassocephalum crepidioides, Orthosiphon stamineus, Curcuma longa, Dioscorea persimilis, Desmodium styracifolium, Lonicera japonica Pratylenchus spp were found on medicinal plants: Orthosiphon stamineus, Curcuma longa, Dioscorea persimilis, Desmodium styracifolium R reniformis was found on almost all examined medicinal plants, except for Desmodium styracifolium Helicotylenchus was found on all of surveyed medicinal plants 933 ... SOME IMPORTANT HERBS IN DONG TRIEU (QUANG NINH PROVINCE) NGUYEN HUU TIEN, NGUYEN THI DUYEN, LE THI MAI LINH, TRINH QUANG PHAP, NGUYEN THI TUYET SUMMARY Quang Ninh is known as a specialized cultivation... vùng trồng chuyên canh số dược liệu Đông Triều, Quảng Ninh liệt kê bảng Kết phân tích 16 mẫu đất thuộc 16 địa điểm vùng trồng dược liệu Quảng Ninh cho thấy thành phần tuyến trùng ký sinh thực vật... Helicotylenchus could be considered as the most dangerous pest in medicinal plants in Dong Trieu (Quang Ninh) Meloidogyne spp were found on medicinal plants: Crassocephalum crepidioides, Orthosiphon