I. LÝ DO CHỌN ĐỀ TÀI. Sự biến đổi khí hậu (BĐKH) toàn cầu đang diễn ra ngày càng nghiêm trọng. Một trong những hệ quả của nó là sự nóng lên của trái đất, băng tan, nước biển dâng cao dẫn đến sự xâm thực của nước mặn vào nội địa làm nhiễm mặn một số lượng lớn đất nông nghiệp. Điều đó gây ra những bất lợi cho quá trình sinh trưởng và phát triển của thực vật, do đó làm giảm năng suất của cây trồng. Cây đậu tương ( Glycine max(L) Merrill) là cây có giá trị kinh tế và hàm lượng chất dinh dưỡng cao. Hạt đậu tương chứa nhiều chất dinh dưỡng quan trọng, trong đó protein chiếm 38 40%, lipit chiếm 18 24% cao hơn so với các loại đậu khác, hydratcacbon chiếm khoảng 30 40%. Protein trong hạt đậu tương có giá trị không những về hàm lượng lớn mà còn có đầy đủ và cân đối các loại axit amin cần thiết, đặc biệt là trong hạt đậu tương có chứa nhiều lizin và triptophan đây là 2 loại axit amin không thay thế có vai trò quan trọng trong sự phát triển của cơ thể 11. Trong hạt đậu tương còn chứa chất sắt, canxi, phot pho và các thành phần chất xơ tốt cho tiêu hoá. Vitamin trong đậu tương có nhiều nhóm B đáng kể là vitamin B1, B2, B6 40. Ngày nay người ta mới biết thêm trong hạt đậu tương còn có chất lexithin, có tác dụng làm cho cơ thể trẻ lâu, tái sinh các mô, làm cứng xương và tăng sức đề kháng cho cơ thể. Trong hạt đậu tương còn chứa nhiều các loại vitamin E, A, B, D, C… và các loại muối khoáng khác. Do đó mà từ hạt đậu tương người ta đã chế biến ra rất nhiều các sản phẩm khác nhau 40. Các kết quả nghiên cứu gần đây cho thấy các chế phẩm đậu tương còn có khả năng ức chế sinh trưởng của tế bào ung thư 10.
Trang 1BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI -
TRẦN THỊ LOAN
NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA Mo, Cu VÀ CHẤT ĐIỀU HÒA SINH TRƯỞNG CCC (Chlor cholin chlorid) ĐẾN KHẢ NĂNG CHỊU
MẶN CỦA MỘT SỐ GIỐNG ĐẬU TƯƠNG
Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm (Sinh lý học thực vật)
Mã số: 60 42 01 14
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC SINH HỌC
Người hướng dẫn khoa học: TS Trần Khánh Vân
Hà Nội – 2014
Trang 2và Ứng dụng đã giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong thời gian học tập
và nghiên cứu tại trường
Tôi xin cảm ơn Sở GD & ĐT Hà Nam , BGH trường THPT Nam Cao
đã tạo điều kiện cho tôi học tập, nghiên cứu hoàn thành luận văn
Tôi cũng xin chân thành cảm ơn các bạn bè, đồng nghiệp, gia đình vàngười thân đã luôn động viên và giúp đỡ tôi trong suốt quá trình tiến hành đề tài
Hà Nội, ngày 09 tháng 09 năm 2014
Tác giả luận văn
Trần Thị Loan
Trang 3DANH MỤC BẢNG
Bảng 1 Đặc điểm chính của các giống đậu tương nghiên cứu 5 Bảng 2 Sản lượng đậu nành Việt Nam từ năm 2008 - 2014 8 Bảng 3 Bố trí các công thức (CT) ở thí nghiệm trong phòng ở giai đoạn nảy mầm của các giống đậu tương 18 Bảng 1.1 Ảnh hưởng của Cu, Mo, CCC đến tỉ lệ nảy mầm các giống đậu tương trong điều kiện mặn (%) 34 Bảng 1.2 Ảnh hưởng của Cu, Mo, CCC kích thước mầm các giống đậu tương trong điều kiện mặn (%) 37 Bảng 1.3 Ảnh hưởng của Cu, Mo, CCC đến khối lượng tươi của mầm các giống đậu tương trong điều kiện mặn (g) 42 Bảng 1.4 Ảnh hưởng của Cu, Mo, CCC đến khối lượng khô mầm các giống đậu tương trong điều kiện mặn (g) 46 Bảng 1.5: Ảnh hưởng của Cu, Mo, CCC đến hoạt tính amylaza mầm các giống đậu tương trong điều kiện mặn (UI/g) 50 Bảng 1.6 Ảnh hưởng của Cu, Mo, CCC đến hoạt tính proteaza các giống đậu tương trong điều kiện mặn (UI/ml) 55 Bảng 3.3 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến hàm lượng diệp lục tổng số trong lá đậu tương ở điều kiện mặn( mg/cm 2 ) 61 Bảng 2.2 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến hàm lượng diệp lục tổng số trong lá đậu tương ở điều kiện mặn( mg/cm 2 ) 66 Bảng 3.3 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến hàm lượng diệp lục a trong
lá đậu tương ở điều kiện mặn( mg/cm 2 ) 69 Bảng 2.4 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến hàm lượng diệp lục b trong
lá đậu tương ở điều kiện mặn( mg/cm 2 ) 72
Trang 4Bảng 2.5 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến hàm lượng diệp lục tổng số trong lá đậu tương ở điều kiện mặn( mg/cm 2 ) 75 Bảng 2.6 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến hàm lượng diệp lục tổng số trong lá đậu tương ở điều kiện mặn( %) 78 Bảng 2.7 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến khả năng trao đổi nước của đậu tương ở điều kiện mặn (%) 81 Bảng 3.1 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến khối lượng 100 hạt đậu tương ở điều kiện mặn (g) 85 Bảng 3.2 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến hàm lượng ni tơ trong hạt đậu tương ở điều kiện mặn (%chất khô) 88 Bảng 3.3 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến hàm lượng lipit trong hạt đậu tương ở điều kiện mặn (% chất khô) 93
Trang 5MỤC LỤC
PHẦN I: MỞ ĐẦU 1
I.LÝ DO CHỌN ĐỀ TÀI 1
II.MỤC ĐÍCH, ĐỐI TƯỢNG VÀ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU 3
1.Mục đích của đề tài 3
2.Ý nghĩa khoa học và ứng dụng của đề tài 3
3.Nhiệm vụ của đề tài 4
4.Đối tượng và phạm vi nghiên cứu 4
III TỔNG QUAN TÀI LIỆU 6
3.1 Tình hình sản xuất đậu tương 6
3.2 Tính chống chịu mặn của thực vật 9
3.3 Vai trò của Molipden ( Mo) với tính chống chịu của thực vật 12
3.4 Vai trò của đồng( Cu) với tính chống chịu của cây đậu tương 14
3.5 Vai trò của chất điều hòa sinh trưởng CCC với khả năng chống chịu của thực vật 15
IV PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17
1.Địa điểm và thời gian nghiên cứu 17
2.Bố trí thí nghiệm 17
2.1Thí nghiệm trong phòng thí nghiệm 17
2.2 Trồng cây trong túi bầu 18
2.3 Các chỉ tiêu nghiên cứu và phương pháp xác định 20
2.3.1 Ðánh giá khả năng chịu mặn của các giống đậu tương thông qua phân tích một số chỉ tiêu sinh lý, hóa sinh ở giai đoạn hạt nẩy mầm 20
2.3.1.1 Tỉ lệ nảy mầm của hạt (%) 20
Những hạt nảy mầm là những hạt có chiều dài rễ mầm đạt từ 3mm trở lên 20
Trang 62.1.4 Xác định hoạt độ enzym proteaza theo phương pháp Anson cải tiếntheo mô tả của Nguyễn Văn Mùi (2001) 222.3.2 Ðánh giá khả năng chịu mặn của các giống đậu tương thông qua phântích một số chỉ tiêu sinh lý, hóasinh ở giai đoạn cây con 232.3.3 Các chỉ tiêu xác định các chỉ tiêu cấu thành năng suất và phẩm chất hạt 272.4 Phương pháp xử lí số liệu 30PHẦN II: NỘI DUNG 32CHƯƠNG I: ẢNH HƯỞNG CỦA Mo, Cu, CCCĐẾN KHẢ NĂNG CHỊU MẶNCỦA CÁC GIỐNG ĐẬU TƯƠNG Ở GIAI ĐOẠN NẢY MẦM 321.1.Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến khả năng nảy mầm của hạt đậu tươngtrong điều kiện mặn nhân tạo 331.2 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến kích thước mầm các giống đậu tươngtrong điều kiện mặn 381.3 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến khối lượng tươi của mầm đậu tươngtrong điều kiện mặn 411.4 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến khối lượng khô của mầm các giốngđậu tương trong điều kiện mặn 441.5 Ảnh hưởng của Cu, Mo, CCC đến hoạt độ của amylaza trong mầm cácgiống đậu tương ở điều kiện mặn 491.6 Ảnh hưởng của Cu, Mo,CCC đến hoạt độ proteaza trong mầm các giốngđậu tương 53CHƯƠNG II: ẢNH HƯỞNG CỦA Mo, Cu, CCCĐẾN KHẢ NĂNG CHỊUMẶN CỦA CÁC GIỐNG ĐẬU TƯƠNGỞ GIAI ĐOẠN CÂY CON 592.1 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến hàm lượng prolin trong lá đậu tương ởđiều kiện mặn 59
Trang 72.2 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến hàm lượng diệp lục trong lá đậu tương
ở điều kiện mặn 64
2.2.1.Ảnh hưởng của Cu, Mo, CCC đến hàm lượng diệp lục tổng số trong lá cây đậu tương ở điều kiện mặn 65
2.2.2 Ảnh hưởng của Cu, Mo, CCC đến hàm lượng diệp lục a trong lá cây đậu tương ở điều kiện mặn 68
2.2.3.Ảnh hưởng của Cu, Mo, CCC đến hàm lượng diệp lục b trong lá cây đậu tương ở điều kiện mặn 71
2.2.1 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến hàm lượng diệp lục liên kết trong lá đậu tương ở điều kiện mặn 74
3 Ảnh hưởng của Cu, Mo, CCC đến hàm lượng nước liên kết trong lá cây đậu tương ở điều kiện mặn 77
4 Ảnh hưởng của Cu, Mo, CCC đến khả năng giữ nước của mô lá cây đậu tương ở điều kiện mặn 80
CHƯƠNG III: ẢNH HƯỞNG CỦA Mo, Cu, CCCĐẾN NĂNG SUẤT VÀ PHẨM CHẤT HẠT 84
3.1 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến các yếu tố cấu thành năng suất các giống đậu tương trong điều kiện mặn 84
3.2.2 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến hàm lượng lipit trong hạt 91
PHẦN III: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 95
I KẾT LUẬN 95
II ĐỀ NGHỊ 95
TÀI LIỆU THAM KHẢO 96
Trang 8PHẦN I: MỞ ĐẦU
I LÝ DO CHỌN ĐỀ TÀI.
Sự biến đổi khí hậu (BĐKH) toàn cầu đang diễn ra ngày càng nghiêmtrọng Một trong những hệ quả của nó là sự nóng lên của trái đất, băng tan,nước biển dâng cao dẫn đến sự xâm thực của nước mặn vào nội địa làmnhiễm mặn một số lượng lớn đất nông nghiệp Điều đó gây ra những bất lợicho quá trình sinh trưởng và phát triển của thực vật, do đó làm giảm năng suấtcủa cây trồng
Cây đậu tương ( Glycine max(L) Merrill) là cây có giá trị kinh tế và
hàm lượng chất dinh dưỡng cao Hạt đậu tương chứa nhiều chất dinh dưỡngquan trọng, trong đó protein chiếm 38- 40%, lipit chiếm 18- 24% cao hơn sovới các loại đậu khác, hydratcacbon chiếm khoảng 30- 40% Protein trong hạtđậu tương có giá trị không những về hàm lượng lớn mà còn có đầy đủ và cânđối các loại axit amin cần thiết, đặc biệt là trong hạt đậu tương có chứa nhiềulizin và triptophan đây là 2 loại axit amin không thay thế có vai trò quan trọngtrong sự phát triển của cơ thể [11] Trong hạt đậu tương còn chứa chất sắt,canxi, phot pho và các thành phần chất xơ tốt cho tiêu hoá Vitamin trong đậutương có nhiều nhóm B đáng kể là vitamin B1, B2, B6 [40]
Ngày nay người ta mới biết thêm trong hạt đậu tương còn có chấtlexithin, có tác dụng làm cho cơ thể trẻ lâu, tái sinh các mô, làm cứng xương
và tăng sức đề kháng cho cơ thể Trong hạt đậu tương còn chứa nhiều các loạivitamin E, A, B, D, C… và các loại muối khoáng khác Do đó mà từ hạt đậutương người ta đã chế biến ra rất nhiều các sản phẩm khác nhau [40]
Các kết quả nghiên cứu gần đây cho thấy các chế phẩm đậu tương còn
có khả năng ức chế sinh trưởng của tế bào ung thư [10]
Ngoài ra, cây đậu tương còn có khả năng cố định Nitơ tự do nhờ sự
cộng sinh với vi khuẩn cố định đạm Rhizobium Japonicum Sau mỗi vụ trồng,
Trang 9đậu tương đã cố định và bổ sung vào đất từ 60-80 kg N/ha, tương đương
300-400 kg đạm sunphat Do vậy, cây đậu tương ngoài giá trị kinh tế còn là câycải tạo đất rất tốt [24], [42]
Nhờ những ưu điểm nổi bật trên mà cây đậu tương đã trở thành một trongnhững cây trồng quan trọng trong sản xuất nông nghiệp và trong đời sống xã hộinhiều nước trên thế giới Hạt đậu tương là mặt hàng xuất khẩu đem lại nguồn thuđáng kể cho nhiều quốc gia Nhiều nước đã tập trung nghiên cứu và sản xuất câyđậu tương với số lượng lớn như Mỹ, Braxin, Achentina …
Ở Việt Nam diện tích và sản lượng đậu tương trong những năm gần đâyliên tục tăng Đến nay cây đậu tương đã trở thành cây trồng chính trong cơcấu cây trồng của nhiều vùng sản xuất ở nước ta
Tuy nhiên đậu tương là cây trồng rất mẫn cảm với các điều kiện bất lợicủa môi trường như nhiệt độ, hạn, rét, mặn … [14], [23], [26], [60], [65] Đậutương nói riêng có nhu cầu nước cao, trong các giai đoạn phát triển nếu khôngđược cung cấp đủ nước thì quá trình sinh trưởng và phát triển bị kìm hãm dẫnđến làm giảm năng suất của chúng [7], [46] Nên trước thực trạng của sự biếnđổi khí hậu, việc tăng diện tích trồng cây đậu tương và tăng năng suất gặpnhiều khó khăn Do đó, nghiên cứu về khả năng chống chịu của thực vật làhướng được các nhà khoa học đã, đang tiến hành và vẫn cần được chú trọng.Hiện nay, các đề tài nghiên cứu tính chống chịu của cây đậu tương theo nhiềuhướng khác nhau: nghiên cứu đặc điểm hóa sinh, sự đa dạng di truyền phânlập gen chịu hạn, chọn tạo giống chịu hạn, chịu rét, bổ sung nguyên tố vilượng (NTVL) tăng tính chịu hạn [12], [14], [16], [17], [19] Tuy nhiên cácnghiên cứu về khả năng chịu mặn của đậu tương còn chưa nhiều
Rất nhiều nghiên cứu đã chỉ ra rằng: khi bón bổ sung các NTVL chocây trồng sẽ làm tăng khả năng chống chịu với điều kiện bất lợi của môitrường[19], [46], [56], [65] Khiphun NTVL vào lá đã làm tăng độ nhớt và
Trang 10hàm lượng các keo ưa nước của lá cây ở điều kiện đất mặn và tăng lượngnước liên kết và khả năng giữ nước của lá [66], [67].
Chlorcholin chlorid (CCC) cũng có thể làm tăng khả năng chống chịucủa cây trồng với các điều kiện bất lợi của môi trường như: khả năng chịumặn, khả năng chịu hạn cũng như khả năng chịu rét cho cây trồng [37], [48]
Xuất phát từ những lý do trên, chúng tôi tiến hành đề tài: “ Nghiên cứuảnh hưởng của Mo, Cu và chất điều hòa sinh trưởng CCC (Chlorcholinchlorid) đến khả năng chịu mặn của một số giống đậu tương”nhằm tìm hiểutác động của Mo, Cu và CCC đến sự biến đổi về sinh lý, sinh hóa của cácgiống đậu tương khi gặp điều kiện môi trường mặn Kết quả này có thể làm
cơ sở khoa học để đưa ra các giải pháp khắc phục cho những đất nông nghiệp
Từ đó, đề ra các giải pháp tích cực nhằm nâng cao năng suất, chấtlượng sản phẩm đậu tương khi canh tác ở vùng đất nhiễm mặn
2 Ý nghĩa khoa học và ứng dụng của đề tài
Bổ sung nguồn tư liệu cho công tác giảng dạy, nghiên cứu khoa học vềkhả năng chịu mặn của đậu tương ở Việt Nam
Đề tài nghiên cứu góp phần đánh giá giống đậu tương tốt khuyến cáocho người nông dân trồng ở các vùng đất nhiễm mặn; đồng thời có kế hoạch
bổ xung một số NTVL và chất điều hòa sinh trưởng cho cây trồng nhằm nângcao sức chống chịu đem lại hiệu quả kinh tế cao
Trang 113 Nhiệm vụ của đề tài
Bố trí thí nghiệm gieo hạt trong phòng thí nghiệm và ở vườn thựcnghiệm
- Đánh giá khả năng chịu mặn của đậu tương khi được bổ xung cácnguyên tố vi lượng: Cu, Mo, chất điều hòa sinh trưởng CCC ở giai đoạn nảymầm:
+ Các chỉ tiêu sinh lí: xác định khả năng nảy mầm, khối lượng tươi,khô của hạt mầm ở ngày 3, ngày 5, ngày 7 sau khi gieo
+ Các chỉ tiêu sinh hóa: xác định hoạt tính của enzim proteaza, amylazatrong mầm đậu tương ở ngày 3, ngày 5, ngày 7 sau khi gieo
- Đánh giá khả năng chịu mặn của đậu tương khi được bổ xung cácnguyên tố vi lượng: Cu, Mo, chất điều hòa sinh trưởng CCC ở giai đoạn cây con:
+ Xác định số lượng nốt sần ở giai đoạn 7 lá
+ Xác định hàm lượng diệp lục tổng số, hàm lượng diệp lục liên kết,hàm lượng prolin, hàm lượng nước liên kết, khả năng giữ nước của mô lá ởgiai đoạn cây có 3 lá, 5 lá, 7 lá thật
- Đánh giá ảnh hưởng của Cu, Mo, chất điều hòa sinh trưởng CCC đếnyếu tố năng suất và phẩm chất hạt
+ Xác định khối lượng 100 hạt
+ Xác định hàm lượng nitơ protein, nitơ phi protein, nitơ tổng số, hàmlượng lipit trong hạt đậu sau thu hoạch
4 Đối tượng và phạm vi nghiên cứu
Đối tượng: Các giống đậu tương ĐVN9, ĐT2008, ĐT26, ĐT22 do
Viện Di truyền Nông nghiệp Việt Nam cung cấp
Trang 12Bảng 1 : Đặc điểm chính của các giống đậu tương nghiên cứu
ĐVN9 - Lai tạo và chọn lọc từ tổ hợp lai ĐT-12 x VN20-5 Giống được công
nhận cho sản xuất thử năm 2007 và hiện đang được nhân ra diện rộng.
- Dạng cây đứng, lá hình trứng nhọn, hoa tím, vỏ quả chín màu vàng rơm, hạt vàng, rốn hạt nâu nhạt.Khối lượng 1000 hạt từ 148-172 gam ĐT2008 - Là giống lai giữa DT2001 x HC100 (gốc Mehico) kết hợp đột biến và
chọn lọc theo tiêu chuẩn thích ứng và chống chịu Giống được Cục trồng trọt công nhận năm 2010.
- Là giống đậu tương chịu hạn.
- Dạng cây đứng, cao, phân nhiều nhánh nên số quả trên cây cao, hoa tím, lông nâu, vỏ quả vàng, hạt vàng to, rốn hạt màu đen.Khối lượng
1000 hạt: 200 – 260 gam
ĐT26 - Được chọn lọc từ tổ hợp lai giữa ĐT2000 ĐT12 Được công nhận
giống cho sản xuất thử năm 2008 theo Quyết định số 111/QĐ-TT-CCN ngày 03 tháng 06 năm 2008.
- Hoa màu trắng, hạt vàng, rốn nâu đậm, quả chín có màu nâu, phân cành khá.Khối lượng 1000 hạt từ 180-190 gam Giống ĐT26 có khả năng kháng bệnh gỉ sắt, đốm nâu, chịu ruồi đục thân, chống đổ khá.
ĐT22 - Được chọn tạo từ dòng đột biến hạt lai của tổ hợp DT95 và ĐT12 và
được công nhậnlà giống năm 2006.
- Giống đậu tương ĐT22 có thời gian sinh trưởng trung bình 85-90 ngày Giống có thể trồng được 3 vụ trong năm, giống chịu đất ướt và nhiễm bệnh mức nhẹ đến trung bình đối với một số bệnh hại chính.
Hoa màu trắng, phân cành trung bình, số quả chắc trung bình đạt 25-45 quả/cây, có khoảng 16-20% số quả 3 hạt Khối lượng 1000 hạt từ 140 -
150 gam, hạt màu vàng sáng, rốn hạt màu nâu, nâu đen Chiều cao cây 45-70 cm.
III TỔNG QUAN TÀI LIỆU
Trang 133.1 Tình hình sản xuất đậu tương
Tình hình sản xuất đậu tương trên thế giới
Đậu tương là cây trồng ngắn ngày, có khả năng thích ứng rộng đồngthời là một trong những cây trồng có giá trị dinh dưỡng và kinh tế cao nênđược trồng phổ biến ở nhiều quốc gia trên thế giới Các quốc gia có diện tích
và sản lượng đậu tương lớn nhất là: Mỹ, Braxin, Argentina, Trung Quốc và
Ấn Độ, trong đó Mỹ là nước có diện tích trồng đậu tương lớn nhất thế giới.Theothống kê của USDA Mỹ năm 2008 sản lượng đậu tương của Mỹ 33%, xuấtkhẩu 31,6 triệu tấn (chiếm khoảng 40% lượng đậu tương xuất khẩu trên toànthế giới), diện tích trồng đậu tương của toàn nước Mỹ là 30,6 triệu ha, năng suấtđạt được 39,6tạ/mẫu tương đương với 26,6 tạ/ha, trong đó diện tích trồng đậutương chuyển gen của Mỹ là 95% tương đương với 28,36 triệu ha Tiếp đến làBraxin 28% (xuất khẩu trong năm đạt 25,4 triệu tấn chiếm 32% tổng lượngđậu tương xuất khẩu trên toàn thế giới), Argentina 21% tổng sản lượng đậutương toàn thế giới[72]
Cây đậu tương chiếm vị trí quan trọng hàng đầu trong 8 cây lấy dầuquan trọng của thế giới: đậu tương, bông, lạc, hướng dương, cải dầu, lanh,dừa và cọ dầu Do vậy, đậu tương được trồng phổ biến ở hầu khắp các nướctrên thế giới, nhưng tập trung nhiều nhất ở các nước châu Mỹ chiếm tới73,0%, tiếp đó là các nước thuộc khu vực châu Á (Trung Quốc, Ấn Độ)chiếm 23,15% [19] [56]
Theo tổ chức Nông - Lương thế giới FAO (2005), diện tích đậu tươngtoàn thế giới năm 2005 là 91,42 triệu ha, tăng 38,35 triệu ha so với năm 1985.Năm 2006 diện tích toàn thế giới đạt 95,25 triệu ha so với năm 1985 là 53,07triệu ha (tăng gần 1,8 lần) Sang năm 2007 diện tích sản xuất là 90,11 triệu hagiảm hơn so với năm 2006 là 5,14 triệu ha tuy nhiên sản lượng không giảm
mà trái lại còn tăng hơn năm 2006 Đạt được điều này là do năng suất đậutương trung bình toàn thế giới năm 2007 tăng lên đáng kể đạt mức 24,36
Trang 14tạ/ha, trong khi đó năm 2006 năng suất chỉ đạt 22,92 tạ/ha Theo thống kênăm 2009 cho thấy, diện tích đậu tương toàn thế giới tăng nhưng sản lượng lạithấp hơn so với năm 2008, điều này là do năng suất của năm 2009 chỉ đạt22,49 tạ/ha thấp hơn so với các năm trước đó [69].
Tính riêng từng châu lục thì hiện nay châu Mỹ vẫn là châu lục sản xuấtđậu tương lớn nhấtchiếm trên 75% tổng diện tích, sản lượng đạt trên 85%tổng sản lượng thế giới và là châu lục có năng suất đậu tương cao nhất Tiếpđến là châu Á chiếm trên 20% diện tích và 12% sản lượng toàn thế giới Cácchâu lục khác chiếm tỉ lệ rất nhỏ cả về diện tích và sản lượng Riêng châu Phihiện vẫn là châu lục có diện tích, sản lượng và năng suất đậu tương thấp nhấtthế giới, năng suất năm 2009 cao nhất cũng chỉ đạt 12,1 tạ/ha [69]
Hiện nay, trên thế giới có khoảng trên 100 nước trồng đậu tương nhưngkhông phải nước nào cũng tự túc được nhu cầu đậu tương trong nước, phần lớncác nước đều phải nhập khẩu đậu tương Ở châu Á, sản xuất đậu tương cũng đượcthúc đẩy mạnh do nhu cầu thức ăn và dinh dưỡng của con người, cũng như gia súcrất lớn Châu Á là châu lục có nhiều nước sản xuất đậu tương nhất, tuy nhiên năngsuất đậu tương ở châu Á vẫn còn thấp hơn nhiều so với năng suất bình quân củathế giới mặc dù diện tích trồng đậu tương ở châu Á đứng thứ hai trên thế giới Sở
dĩ như vậy là do đậu tương ở châu Á được trồng ở nhiều nơi đất xấu, không đượcđầu tư về phân bón chỉ với mục đích cải tạo đất vì vậy sản lượng đậu tương cũngmới chỉ đáp ứng được khoảng 1/2 nhu cầu cho các nước thuộc châu lục này Hàngnăm, các nước châu Á vẫn phải nhập khẩu khoảng 8 triệu tấn hạt đậu tương, 1,5triệu tấn dầu, 1,8 triệu tấn sữa đậu nành, nước nhập khẩu đậu tương nhiều nhất làTrung Quốc, Nhật Bản, Đài Loan
Tình hình sản xuất đậu tương ở trong nước.
Ở Việt Nam, đậu tương được trồng từ rất sớm vào khoảng thế kỷ XVI,cho đến nay có thể nói đậu tương là một trong số các cây trồng quan trọngtrong việc bố trí luân canh tăng vụ Do đó, diện tích cũng như sản lượng đậu
Trang 15tương không ngừng được mở rộng và tăng lên, tuy nhiên năng suất đậu tươngcủa Việt Nam vẫn còn rất thấp so với trung bình của toàn thế giới.
Thủ tướng Chính phủ cũng đã phê duyệt Quy hoạch tổng thể phát triển sảnxuất ngành nông nghiệp đến năm 2020 và tầm nhìn đến năm 2030 Theo đó, diệntích đất quy hoạch khoảng 100 ngàn ha, tận dụng tăng vụ trên đất lúa để năm 2020diện tích gieo trồng khoảng 350.000 ha, sản lượng 700.000 tấn; vùng sản xuấtchính là đồng bằng sông Hồng, trung du miền núi phía Bắc, Tây Nguyên
Bảng 2 – Sản lượng đậu nành Việt Nam từ năm 2008 - 2014
Nguồn: Tổng cục thống kê *số liệu dự báo của USDA
Số liệu thống kê trong bảng 2 và hình 1 đã cho thấy sản lượng và diệntích của đậu tương từ năm 2008 đến nay có nhiều biến động, tăng giảm
Trang 16không theo một xu hướng nhất định Cụ thể năm 2008, cả nước có 192,1nghìn ha trồng đậu tương cho tổng sản lượng 267,6 nghìn tấn Năm 2009,diện tích trồng đậu tương đã có sự sụt giảm mạnh (giảm 45,9 nghìn ha so vớinăm 2008), nên mặc dù năng suất được cải thiện nhưng tổng sản lượng chỉ đạt213,6 nghìn tấn Đến năm 2010, quy mô sản xuất đậu tương đã phát triểnmạnh, năng suất bình quân tiếp tục tăng nên tổng sản lượng đậu tương đạt gần
300 nghìn tấn, cao nhất trong mấy năm trở lại đây
Năm 2012, sản lượng đậu tương nước ta giảm 34,3% so với cùng kỳ nămtrước, xuống còn 175,2 nghìn tấn do thời tiết lạnh khác nghiệt vào cuối năm
2011 và đầu năm 2012 khiến cho năng suất và diện tích gieo trồng giảm mạnh.Điều kiện thời tiết không thuận lợi đã khiến sản lượng đậu tương nước ta năm
2013 giảm 3% so với năm 2012, xuống còn 168 nghìn tấn Mưa bão nặng nề vàkéo dài suốt năm đã khiến năng suất cây trồng và diện tích thu hoạch đậu tươnggiảm.Quy mô sản xuất nhỏ lẻ so với các loại cây trồng khác chính là nguyênnhân khiến ngành đậu tương vẫn không đáp ứng được nhu cầu tiêu thụ trongnước Tổ chức USDA dự báo nếu điều kiện thời tiết thuận lợi, diện tích gieotrồng đậu tương năm 2013 và 2014 lần lượt đạt 120 nghìn và 130 nghìn héc-ta,với mức sản lượng tăng nhẹ khoảng 176 và 192 nghìn tấn Khả năng cạnh tranhcủa đậu tương so với ngô vẫn còn thấp do sản lượng tính trên mỗi héc-ta trồngđậu tương thấp hơn so với trồng ngô Khu vực trồng đậu tương chính tập trung ởvùng Đồng bằng sông Hồng, miền Bắc nước ta
Trang 1754 triệu ha đất bị nhiễm mặn và 27 triệu ha đất có tiềm năng trồng lúa ở vùngnhiệt đới nóng ẩm Châu Á không thể canh tác vì nhiễm mặn [70].
Tất cả các loại đất đều chứa hỗn hợp muối tan trong đó có một số chấttan cần cho hoạt động sinh trưởng của cây Đất mặn là loại đất chứa hàmlượng muối cao (>0,2%) có nhiều ion độc Do nồng độ muối cao nên áp suấtthẩm thấu của dung dịch đất ở đây rất cao, có thể đạt 200-300atm hay còn cóthể cao hơn gây ức chế sự sinh trưởng của cây [3]
Trong đất mặn, hàm lượng muối tan thay đổi khá rộng và có xu thếtăng dâng theo chiều sâu Các ion thường có trong đất gồm: các anion Cl-,
SO42-, HCO3- và các cation Na+, Mg2+, Ca2+,…Nếu đất chỉ chứa một loại muốitan sẽ độc hơn rất nhiều so với đất có cùng độ mặn nhưng chứa nhiều loạimuối tan do có sự đối kháng ion [3]
Ở Việt Nam, có khoảng trên 1 triệu ha đất mặn chiếm 3% diện tích tựnhiên của cả nước.Đất mặn chủ yếu phân bố ở ĐBSCL và ĐBSH [3] Thực tế,trên các vùng đất mặn cuả nước ta hiện nay hoặc bỏ hoang hoá hoặc trồng trọtmột số cây hạn chế với năng suất thấp Chính vì vậy mà việc nghiên cứu bảnchất sinh lý tính chống chịu mặn của thực vật có ý nghĩa rất lớn trong sản xuấtnông nghiệp, đặc biệt trong việc tạo ra các giống có tính chống chịu mặn vàviệc tìm các biện pháp tăng cường tính chống chịu mặn cho cây
Tác hại của mặn phụ thuộc vào nồng độ muối, loại muối, đất, giống và giaiđoạn sinh trưởng phát triển của cây Mặn ảnh hưởng xấu đến sinh trưởng pháttriển của cây và cuối cùng ảnh hưởng đến năng suất cây trồng [54], [56], [65]
Do đất mặn có áp suất thẩm thấu cao cho nên cây không thể hút đượcnước gây nên hiện tượng hạn sinh lý Mặn và hạn đều là hiện tượng câykhông thể hút được đủ nước cho quá trình phát triển Tỉ lệ nảy mầm của hạtcây họ đậu nói chung, cây đậu tương nói riêng giảm mạnh trong điều kiệnthiếu nước [35], [59],
Trang 18Trong đất mặn chứa nhiều ion độc, một số ion ở nồng độ thấp không độcnhưng ở nồng độ cao lại gây độc Các ion này lại cạnh tranh với chất dinh dưỡngtrong quá trình hút của rễ làm cho rễ khó hút chất dinh dưỡng [59], [71].
Mặn gây ra sự tích lũy các chất oxy hóa mạnh gây tổn hại đến lipit màng
tế bào, protein, axit nucleic [54] Sự tích lũy các gốc tự do cũng làm suy giảmchức năng của màng, thay đổi tính thấm của màng Nồng độ gây độc của muốiphá huỷ tính thấm của màng tế bào Điều đó dẫn đến cây bị mặn mất khảnăng kiểm tra nồng độ Pi nội tế bào cũng như các chất trao đổi khác, kìm hãm
sự vận chuyển tích cực của các chất đi qua màng của tế bào rễ cây cũng nhưcác tế bào khác [65]
Mặn đã làm thay đổi hoạt động của enzim gây rối loạn trao đổi chất,
đặc biệt là trao đổi protein [68] Mặn có thể làm chuyển hướng từ trao đổi
CO2 của axit hữu cơ sang tổng hợp axit amin nên cây bị mặn có khuynh
hướng tích luỹ axit amin và amit Người ta phát hiện ra rằng NaCl và
Na2SO4 có tác dụng gây rối loạn trao đổi gluxit ở đỉnh rễ theo hướng giảm glucose hấp thụ, giảm sự đường phân và giảm hô hấp, dẫn đến giảm sinh
trưởng của rễ [54]
Mặn làm tăng sự phân hủy diệp lục, ức chế quá trình tổng hợp sắc tố,giảm diện tích lá dẫn đến quá trình quang hợp giảm mạnh [60],[62] Trong điềukiện mặn hô hấp trong tế bào diễn ra mạnh, nhưng hiệu quả năng lượng thấp,phần lớn năng lượng của các quá trình phân huỷ đều thải ra dưới dạng nhiệtlàm cho tế bào thiếu ATP để hoạt động [49], [54],[60] [65], [67] Phân huỷmạnh, tổng hợp lại yếu nên không bù đủ lượng vật chất do hô hấp phân huỷ,chất dự trữ dần dần bị hao hụt, cây không sinh trưởng được, do vậy cây còicọc, năng suất thấp
Trong quá trình sống và phát triển, cây trồng sống trong mối tươngquan chặt chẽ với môi trường và với các sinh vật, đặc biệt là các vi sinh vật
Trang 19trong đất Ở cây đậu tương,vi khuẩn Rhizobium Japonicumcộng sinh trong
các nốt sần giúp tổng hợp đạm từ nitơ không khí cho cây Khi đất bị nhiễmmặn, các vi sinh vật này bị ảnh hưởng đáng kể về số lượng, làm giảm sốlượng nốt sần hữu hiệu dẫn đến làm giảm khả năng tích lũy nitơ, giảm năngsuất cây đậu tương [52], [65]
Khả năng chịu mặn (tính chịu mặn) của cây được hiểu là khả năng để câytrồng có thể lớn lên, phát triển và sống hết vòng đời trong môi trường đất bị nhiễmmặn Các loại cây trồng khác nhau có khả năng chịu mặn cũng khác nhau
Khi gặp điều kiện môi trường bất lợi thực vật có xu hướng tăng cườngtích lũy các hợp chất hữu cơ tan, tăng cường tổng hợp các hợp chất liên kết đểgiảm tác động tiêu cực của môi trường sống Do đó, ở cây chống chịu tốt khigặp điều kiện bất lợi hàm lượng axit amin đặc biệt là prolin, hàm lượngđường tan, hàm lượng diệp lục liên kết có xu hướng tăng so với đối chứng[1],[21], [31], [41], [55], [58]
Như vậy, mặn ảnh hưởng tiêu cực đến các giai đoạn phát triển của câytrồng; kìm hãm sự sinh trưởng, từ đó làm giảm năng suất, chất lượng, sảnlượng nông nghiệp, gây thiệt hại lớn kinh tế cũng như ảnh hưởng đến an ninhlương thực toàn cầu nếu chúng ta không có các biện pháp chủ động đối phó
3.3 Vai trò của Molipden ( Mo) với tính chống chịu của thực vật.
Molipden tồn tại trong đất ở dạng ion molipdat thuận lợi cho quá trìnhhấp thụ của cây trồng Hàm lượng Mo từ 0,1 đến 0,5 mg/kg đất khô và có thểlên đến 1,4 g/kg đất khô.Trong cây, hàm lượng Mo rất nhỏ (trung bìnhkhoảng 0,2 – 2,0 mg/kg chất khô, ở cây họ đậu thì hàm lượng Mo chiếmnhiều hơn từ 0,5 – 2,0 mg/kg chất khô) Tuy hàm lượng rất nhỏ nhưng Mo lànguyên tố vi lượng (NTVT) có tầm quan trọng đặc biệt trong đời sống câytrồng nói chung và cây họ Đậu nói riêng
Trang 20Molypden là thành phần củaenzim nitrogenaza rất cần thiết cho quá
trình cố định đạm của vi khuẩn Rhyzobium japonicum sống cộng sinh trong
nốt sần ở rễ cây đậu tương Molypden cũng được tìm thấy trong enzim khửnitrat chịu trách nhiệm trong quá trình khử nitrat trong cây và trong đất.Molypden còn có vai trò quan trọng trong việc vận chuyển các electron trong
hệ thống enzim thực hiện các phản ứng oxi hóa khử trong cây Molypdencũng rất cần thiết cho sự chuyển hóa đạm trong tế bào cũng như trong cây[45] MoMolypden có vai trò quan trọng trong sự cố định nitơ và đồng hóanitrat Do đó,Mo có tác dụng rất tốt đối với sự sinh trưởng của các loài cây họĐậu Molypden còn có vai trò quan trọng trong sự tổng hợp vitamin C củacây Thiếu Mo cấu trúc bình thường của lục lạp cũng bị ảnh hưởng
Các loại cây đậu đỗ được xử lý bằng dung dịch muối Mo trước khi gieođều cho quả sáng, hạt to và ít lép[18], [31]
Trong cây xanh, Mo còn có tác dụng thúc đẩy quá trình sinh tổng hợpdiệp lục, tăng mối liên hệ giữa sắc tố và protein Do đó, trong điều kiện bất lợihay bóng tối, diệp lục không bị phân giải [36], [38] Thiếu Mo, hàm lượngdiệp lục trong cây giảm, quá trình tổng hợp protein cũng giảm do giảm hàmlượng axitamin như alanin, asparagin, prolin…
Trong điều kiện bất lợi bổ sung phân vi lượng có tác dụng hạn chế ảnhhưởng tiêu cực của môi trường, tăng khả năng chống chịu và cường độ quanghợp ở cây trồng [12], [19], [28]
Nếu thiếu Mo sẽ ảnh hưởng tới các quá trình sinh lý của cây Biểu hiệnđầu tiên là màu vàng lục xuất hiện ở lá Sự thiếu hụt Mođã làm quá trình đồnghóa bị ngừng trệ, cây sinh trưởng chậm Đối với cây bộ Đậu, nốt sần nhỏ đi,quá trình trao đổi đạm bị phá vỡ, quá trình khử nitrat chậm hoặc nghiêm trọnghơn là ngưng hoạt động dẫn tới cây bị đói đạm Molipden trở nên hữu dụngnhiều khi pH tăng, điều đó ngược lại với đa số vi lượng khác Chính vì điều
Trang 21này nên hiện tượng thiếu Mo thường xảy ra ở đất chua Đất nhẹ thường dễ bịthiếu Mo hơn so với đất nặng [29].
Như vậy, Mo ảnh hưởng tích cực đến toàn bộ quá trình sinh trưởng vàphát triển của cây Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng khi một số loại cây như đậutương, lúa, lạc, ngô… được xử lý ở nồng độ Mo thích hợp đã làm tăng tốc độ
và tỷ lệ nảy mầm của hạt lên rõ rệt Đồng thời, các chỉ tiêu sinh trưởng của câycũng tăng hơn so với đối chứng: chiều cao, sinh khối tươi, khô, khả năng đẻnhánh tăng năng suất của cây [4], [6], [11], [12]
3.4 Vai trò của đồng( Cu) với tính chống chịu của cây đậu tương.
Từ lâu, người ta đã phát hiện được vai trò đặc biệt quan trọng của Cuđối với sự sinh trưởng và phát triển của đời sống thực vật đó là: Cu tuyệt đốicần cho cây trồng, không thể thay bằng bất cứ nguyên tố hay tổng các nguyên
tố nào khác cho dù hàm lượng Cu trong dung dịch đất rất nhỏ chỉ khoảng 0,01mg/kg đất
Đồng là thành phần của chuỗi chuyển vận điện tử trong quang hợp.Đồng hoạt hoá nhiều enzim oxi hoá khử, các enzim mà Cu hoạt hoá liên quanrất nhiều đến quá trình sinh lý, hoá sinh trong cây như: tổng hợp protein, axitnucleic, dinh dưỡng nitơ, hoạt động quang hợp,…[33]
Đồng tham gia vào thành phần của các loại enzym tham gia tích cực vàocác phản ứng oxy hóa khử mà đặc biệt là các phản ứng tối trong quá trìnhquang hợp Đồng còn cấu trúc thành phần chuỗi vận chuyển điện tử trong phasáng của quang hợp Tuy rằng, nguyên tố vi lượng Mn, Zn và vài nguyên tốkhác có ảnh hưởng lớn đến tốc độ của quá trình oxy hóa khử trong cơ thểnhưng tác động của Cu trong những phản ứng đó là đặc thù và không thể donguyên tố khác thực hiện được [43]
Đồng cũng ảnh hưởng lớn đối với quá trình quang hợp và đặc biệt là đốivới việc hình thành chất diệp lục và đối với tính bền vững của chất diệp lục,
Trang 22làm cho diệp lục không bị phá hỏng nên nó kéo dài hoạt động quang hợp củacác cơ quan có mầu lục, làm trì hoãn quá trình già sinh lý của lạp thể [38].
Khi bón phân đồng cũng như một vài phân vi lượng khác, tính chốngchịu của cây với các điều kiện không thuận lợi của môi trường bên ngoài đãtăng như tính chống chịu hạn, nhiệt độ thấp, sâu bệnh, [43]
Khi thiếu ít Cu, sinh trưởng, phát triển của cây bị kìm hãm và năng suấtgiảm, khí đói nặng có xuất hiện những triệu chứng bệnh cây rất rõ rệt, khôngnhững làm cho thu hoạch bị mất trắng mà còn làm cho cây bị chết [43]
Tuy nhiên nếu nồng độ Cu cao sẽ gây độc cho cây, làm giảm khả năngchống chịu của cây với các điều kiện bất lợi của môi trường [59]
3.5 Vai trò của chất điều hòa sinh trưởng CCC với khả năng chống chịu của thực vật.
Các chất điều hòa sinh trưởng là những sản phẩm bình thường của quátrình sống ở thực vật được tham gia vào điều khiển quá trình trao đổi chất vàcác quá trình hình thành mới các cơ quan ở tất cả các giai đoạn sinh trưởng,phát triển của cây Những chất điều hòa sinh trưởng hiện nay được biết nhiềunhất là auxin, gibbrellin, cytokinin, axit absisic, etylen và chlorcholin chlorid(CCC) Các chất điều hòa sinh trưởng có khả năng điều hòa sinh trưởng pháttriển cây và dẫn tới tăng năng suất cây trồng Tùy theo mục đích thu hoạch làthu hoạch lá, hoa, quả, thân rễ mà người ta phải sử dụng tùy chất điều hòasinh trưởng riêng biệt hoặc hỗn hợp chúng
Điều lưu ý là trong quá trình sinh trưởng và phát triển của cây đã có mặtcùng lúc nhiều phytohormon khác nhau, nhưng với những tỷ lệ rất khác nhau.Đặc điểm quan trọng của các chất điều hòa sinh trưởng thực vật này là: với mộthàm lượng rất ít đã có khả năng gây nên tác động làm thay đổi những đặc trưng
về hình thái sinh lý của thực vật và chúng có thể di chuyển trong cây được
Trang 23Nhìn chung, khi phun chất điều hòa sinh trưởng lên cây trồng vào đúnggiai đoạn thì có thể cho năng suất tăng trung bình từ 10 – 15%, nhiều trườnghợp tăng cao hơn từ 15 –50% Ví dụ, phun gibberellin hoặc a- NAA cho câyđậu tương vào thời kỳ trước khi ra hoa rộ đã làm cho cây phát triển tốt, tăng
số lượng lá trên cây, tăng số lượng và kích thước nốt sần ở rễ và tăng năngsuất đậu từ 15 tới 17% [6], [39]
Chlor cholin chlorid là chất ức chế sinh trưởng mà khi xử lý lên câytrồng sẽ làm cho cây có lóng ngắn, thân cây cứng hơn, tăng cường màu xanhcủa lá, dày hơn và cây giảm chiều cao rõ rệt, chống hiện tượng đổ, ngã chocây trồng Ngoài ra, CCC còn giúp cây thúc đẩy mạnh quá trình quang hợp[25], [37], [39]
Chlor cholin chlorid có khả năng điều hòa sinh trưởng thực vật đối vớicây cảnh và cây cho hoa bao gồm hạn chế chiều cao của cây, sự phân nhánhđều và phong phú, kiểm soát ra hoa đồng loạt của cây hoa, kiểm soát tăngtrưởng thực vật quá mức Vì vậy, CCC được dùng nhiều tronglĩnh vực sảnxuất cây cảnh và trồng hoa ở các nước phát triển như Úc, Israel, Thái Lan…Trong sản xuất cây ăn quả, CCC được ứng dụng rộng rãi trong xử lý kíchthích mầm hoa ở cây xoài, sầu riêng, cây có múi: chanh, cam, bưởi … Câytrồng được xử lý CCC sẽ chuyển từ giai đoạn sinh trưởng sang giai đoạn sinhsản nhanh hơn rất nhiều so với cây không xử lý
Còn trong sản xuất lương thực, ở Thái Lan CCC được phun lên
câylúa chống đổ ngã giúp thân lúa cứng cáp hơn, làm lùn thân lúa tăng năng suất lúa lên 20-30% mà không ảnh hưởng đến chất lượng hạt lúa.
Đối với lạc, xử lí CCC vào giai đoạn sau khi ra hoa có thể hạn chế chiềucao thân, lá, kéo dài tuổi thọ và khả năng quang hợp tích lũy chất hữu cơ và vậnchuyển chất về cơ quan dự trữ nhờ đó tăng năng suất [39]
Trang 24Xử lí CCC kết hợp với mặntrên cây đậu xanh thì hàm lượng diệp lục, cáchợp chất hữu cơ tan trong nước đặc biệt là axit amin prolintăng giúp điều hòa ápsuất thẩm thấu của tế bào [37], [39], [48] Điều đó thể hiện CCC góp phần làm tăngkhả năng chống chịu của cây trồng với các điều kiện bất lợi của môi trường.
IV PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
1 Địa điểm và thời gian nghiên cứu
Địa điểm:
Thí nghiệm trong phòng thí nghiệm:
+ Phòng thí nghiệm bộ môn Sinh lý Thực vật và Ứng dụng, khoa Sinh học,trường ĐHSP Hà Nội
+ Phòng thí nghiệm bộ môn Hóa sinh – Tế bào, khoa Sinh học, trườngĐHSP Hà Nôi
Thí nghiệm trồng cây trong túi bầu: tại Vườn thực nghiệm khoa Sinhtrường ĐHSP Hà Nội
Thời gian: Từ tháng 9 năm 2013 đến tháng 7 năm 2014
Gồm vụ đông 2013 và vụ xuân 2014 nhưng số liệu trong luận văn làcủa vụ xuân 2014
2 Bố trí thí nghiệm.
2.1 Thí nghiệm trong phòng thí nghiệm.
Chuẩn bị
5 khay nhựa kích thước 20× 40 cm
Chọn những hạt giống khỏe, đều đặn, tỷ lệ nảy mầm trên 85%, lấy hạttrong cùng một năm và cùng một nơi nhân ra (Viện Di truyền Nông Nghiệp).Trước khi thí nghiệm nhúng hạt trong dung dịch KMnO4 1% trong 5-10 phút
để khử trùng
Xếp những giấy lọc gấp nếp 23x 15 x 2 (cm) (2 là chiều cao nếp gấp)
để trải trên khay Khử trùng khay gieo hạt bằng cồn, giấy thấm sấy ở 130o Ctrong 1 giờ, khi dùng mới bỏ ra
Dung dịch Mo 0.03% ở dạng(NH ) MoO ;
Trang 25Dung dịch Cu 0.04% ở dạngCuSO4 5H2 O;
Dung dịch chất điều hòa sinh trưởng CCC (chlorcholin chlorid) ởnồng độ 1 g/l;
Nước cất
b Gieo hạt theo công thức:
Sử dụng 5 khay, gieo hạt thành 4 hàng trên giấy thấm ứng với 4 giốngtrong mỗi khay, mỗi hàng gieo 30 hạt và đặt biển đánh dấu.Cung cấp 10 mldung dịch/ngày theo các CT ở bảng 1 như sau:
Bảng 3 Bố trí các công thức (CT) ở thí nghiệm trong phòng ở
giai đoạn nảy mầm của các giống đậu tương
NaCl 0,3 %
(CT 1)
NaCl 0,3 %+
CCC(1g/l) (CT 2)
Hóa chất: Chuẩn bị dung dịch các nguyên tố vi lượng 0.025% Mo ởdạng (NH4)MoO4; 0.04% Cu ở dạngCuSO4 5H2 O; Chất điều hòa sinh trưởng:CCC (Chlorcholin chlorid): 1g/l
Trang 26Túi bầu, cân, dụng cụ đong đất, túi bầu bằng nilon (màu đen) kíchthước 30cm x 30cm, có5 lỗ dưới đáy.
Xếp các túi bầu vào 4 lô thí nghiệm ứng với 4 công thức thí nghiệm, mỗigiống tương ứng với 1 công thức có 8 túi bầu:
Công thức 1 (CT1): Đối chứng (cung cấp nước)
Công thức 2 (CT2): Dung dịch CCC nồng độ 1g/l
Công thức 3 (CT3): Dung dịch vi lượng 0.04% CuSO4 5H2 O
Công thức 4 (CT4): Dung dịch vi lượng 0.03% Mo ở dạng( NH4)2MoO4
Gieo hạt vào các thùng xốp, mỗi giống gieo vào 2 thùng, mỗi thùnggieo 150 hạt Hàng ngày, tưới 4 lít (L) nước cho tất cả các công thức thínghiệm từ khi gieo hạt đến giai đoạn một lá thật, chọn những cây khỏe,đềunhau trồng ra các túi bầu Mỗi túi bầu trồng 6 cây nhưng sau đó tỉa để lại 5 cây vàtreo biển đánh dấu
Sau đó, hàng ngày sử dụng bình phun 1.5 l nước (CT1), 1.5 l dung dịchcho CT2, CT3 và CT4 với tần suất 1 tuần một lần, các ngày khác tưới nướccho tất cả các công thức Các túi bầu thí nghiệm được đặt ở cùng một nơitrong điều kiện tự nhiên, có ánh sáng đồng đều từ các hướng
Phương pháp lấy mẫu phân tích
Trang 27Tiến hành lấy mẫu và phân tích các chỉ tiêu sau 3, 5, 7 ngày gieo hạt.Lấy 4 mẫu ở cùng 1 công thức ở 5 thời điểm: 3 lá thật, 5 lá thật, 7 lá thật.
2.3 Các chỉ tiêu nghiên cứu và phương pháp xác định.
2.3.1 Ðánh giá khả năng chịu mặn của các giống đậu tương thông qua phân tích một số chỉ tiêu sinh lý, hóa sinh ở giai đoạn hạt nẩy mầm.
2.3.1.1 Tỉ lệ nảy mầm của hạt (%).
Những hạt nảy mầm là những hạt có chiều dài rễ mầm đạt từ 3mm trở lên.Đếm số hạt nảy mầm vào các ngày thứ 3 và 5, 7 sau khi gieo hạt và tínhtheo công thức sau:
P = a/b x 100
Trong đó: P(%) làtỉ lệ nảy mầm của hạt trong các công thức thí nghiệmvới đối chứng
a: Số hạt nảy mầm trong mẫu thí nghiệm
b: Số hạt nảy mầm trong mẫu đối chứng
2.3.1.2 Xác định khả năng sinh trưởng của mầm.
Sinh trưởng của mầm (mm): Dùng thước chia đến mm đo chiều dàicủa mầm từ chóp rễ đến chồi mầm Thời gian đo sau khi gieo là 3 ngày,
5 ngày và 7 ngày
Khối lượng tươi của mầm (g): Rửa sạch mầm bằng nước, dùng giấythấm thấm sạch nước, sau đó cân bằng cân phân tích ở thời điểm sau khi gieo
3 ngày, 5 ngày và 7 ngày
Khối lượng khô của mầm (g): sau khi cân khối lượng tươi, gói mầmtrong giấy bạc, sau đó sấy 2 ngày trong tủ sấy ở nhiệt độ 600 Cđến khi khốilượng không đổi Xác định khối lượng khô bằng cân phân tích ở thời điểm saukhi gieo là 3 ngày, 5 ngày và 7 ngày
Trang 282.3.1.3 Hoạt độ của enzim α- amilaza theo phương pháp Rukhliadiva
Gericheva.
Nguyên vật liệu: mầm, dung dịch đệm photphat 5,2, dung dịch HCl 0,1
N ,dung dịch iot gốc, dung dịch iot phân tích được pha từ 2ml iot gốc với 98mldung dịch HCl 0,1 N, dung dịch tinh bột 1%
Cách tiến hành:
Chuẩn bị dịch enzim: Cân 1g mầm nghiền với 2ml H2O, thêm 1ml đệmphotphat, chắt lấy nước cho vào ống fancol Lặp lại 3 lần chiết rút, sau dẫn đến10ml, li tâm 1200 vòng/ phút trong 15 phút Thu dịch trong để làm thí nghiệm, cóthể pha loãng 1 số lần
Cho các dung dịch vào ống eppendorl theo thứ tự bảng sau:
Ủ ở 30o C trong 10 phút
Lắc đều và ủ ở 30oC trong 10 phútSau đó lấy 20µl hỗn hợp trên cho vào 2 ống eppendorf khác tương ứng vàthêm vào mỗi ống 1ml dung dịch iot phân tích Ống đối chứng có màu xanh, ốngthí nghiệm có màu tím
Lấy 250µl dung dịch mỗi ống cho vào các giếng ở đĩa 96 giếng và lặplại 3 lần Đo độ hấp thụ ở bước sóng 656nm, dùng dung dịch iot phân tích đểđưa về blank
Lượng tinh bột bị thủy phân ( C ) được tính theo công thức:
C= [( Ađối chứng - Athí nghiệm )/ (Ađối chứng - Ablank) ] *0,01
Trong đó A: độ hấp thụ ở các mẫu đo
0,01: lượng tinh bột phân tích trong 1ml tinh bột 1% (g)
C
* 100
* ) 029388 ,
0
* 8789 , 6
Trong đó: C: lượng tinh bột bị thủy phân( g)
Trang 29W: khối lượng mẫu (g)
2.1.4 Xác định hoạt độ enzym proteaza theo phương pháp Anson cải tiến theo mô tả của Nguyễn Văn Mùi (2001).
Nguyên lý của phương pháp
Casein bị phân giải trong môi trường kiềm dưới tác dụng của proteasetạo sản phẩm là các đoạn peptit ngắn hòa tan trong tricloroacetic acid (TCA),xác định lượng tyrosine và tryptophan hòa tan bởi thuốc thử Folin
Chuẩn bị dịch chiết enzim từ mầm: cân chính xác 1g mầm, nghiền trong
15 ml đệm photphat 6,5 lắc đều trong 1 giờ và sau đó li tâm 8000 vòng trong 10phút, dịch trong phía trên được sử dụng để phân tích hoạt độ của enzim
Lấy 2 ống nghiệm sạch, khô, tiến hành như sau:
Dung dịch hóa chất Thử thậtỐng nghiệmThử không
Lắc đều và giữ ở 35,5oC trong 20 phút
Để yên 30 phút, li tâm 5000 vòng trong 5 phút, thu dịch trong
Lấy 2 ống nghiệm mới khác,cho vào ống thứ nhất 2ml dịch trong củaống thử thật và cho vào ống thứ hai 2ml dịch trong của ống thử không
Tiếp tục thêm vào mỗi ống 4ml Na2CO3 6% và 1,2ml thuốc thử Folin,lắc mạnh, sau 10 phút đo OD ở bước sóng 660nm ΔOD = ODOD = ODTT – ODTK, sau
đó dựa vào đồ thị chuẩn suy ra được µM tyrosine
Trang 30Tính kết quả
Định nghĩa đơn vị Anson: một đơn vị Anson là lượng enzyme tối thiểutrong điều kiện thí nghiệm thủy phân casein trong 1 phút tạo thành sản phẩmhòa tan trong TCA, phản ứng với thuốc thử Folin cho ta độ hấp thu OD ởbước sóng 660nm tương ứng với 1 µM tyrosine trong đường chuẩn
Hđ Protease =
μMM Tyrosin* V∗ L
t∗v (UI /ml )
Với: Hđ Protease : hoạt độ enzym protease (UI/ml)
V : tổng thể tích hỗn hợp trong ống thử thật hoặc ống thử không (ml)
v : thể tích dịch lọc đem phân tích (ml)
t : thời gian thủy phân (phút)
L: độ pha loãng enzym
µM Tyrosin: lượng µM Tyrosin trong v (ml) suy ra từ đường chuẩn
2.3.2 Ðánh giá khả năng chịu mặn của các giống đậu tương thông qua phân tích một số chỉ tiêu sinh lý, hóasinh ở giai đoạn cây con
2.3.2.1 Xác định hàm lượng prolin bằng phương pháp Bates và cs (1973).
Prolin tự do và prolin trong phân tử protit và các thành phần bắt buộccủa tế bào hàm lượng prolin tăng gấp nhiều lần khi gặp hạn, gặp mặn
Phương pháp xác định hàm lượng axit amin prolin: theo phương phápcủa Bates và cộng sự (1973) đã được Đinh Thị Phòng cải tiến [16]
Cân 0,5 gam mẫu nghiền kĩ, thêm 10ml dung dịch axit sulfosalicylic3%, ly tâm 7000 vòng/phút trong thời gian 20 phút, lọc lấy dịch lọc Lấy 2mldịch chiết cho vào bình, thêm 2ml axit axetic và 2ml ninhydrin, ủ trong nướcnóng 1000 C trong thời gian 1 giờ sau đó ủ nước đá 5 phút Bổ sung vào bìnhphản ứng 4ml toluen, lắc đều Lấy phần dịch màu hồng ở trên đem đo mật độquang học (OD – Optical density) ở bước sóng λ = 520nm
Trang 31Hàm lượng axit amin được tính theo công thức (công thức được suy ra
từ việc lập đường chuẩn prolin)[16]
Y( µg/ml) = 1,4083 x X + 0,014.
Prolin (µg/g) =
Y ∗V m
Trong đó
Y: nồng độ prolin (µg/ml)
X: giá trị OD đo được ở bước sóng λ = 520 nm
V: thể tích dịch chiết prolin (ml)
m: khối lượng mẫu tươi (g)
2.3.2.2 Xác định hàm lượng diệp lục tổng số bằng máy SPAD- 502 (phương pháp nghiên cứu sinh lí học thực vật)
Nguyên tắc : Sử dụng máy đo hàm lượng diệp lục là phương pháp xácđịnh nhanh hàm lượng diệp lục mà không gây tổn thương tới cây trồng Máydựa trên nguyên tắc đo mật độ quang tại 2 bước sóng 940nm và 660nm do đóxác định được hàm lượng diệp lục tổng số
Đơn vị đo của máy là SPAD, từ đơn vị này qui đổi sang mg/cm2 theoRichardson A.D:
Trang 32Nguyên lý: dung môi benzen chỉ hòa tan những phân tử diệp lục tự do.Dùng dung môi phân cực mạnh (axeton 100%) để rút diệp lục liên kếtdính ở đáy cối vào trong dung dịch Đo trên máy quang phổ sẽ tính được hàmlượng diệp lục a + b liên kết trong dung dịch.
- Lấy mẫu: Mẫu lá được lấy ở cùng vị rí, cùng số lá Mỗi thí nghiệm lấy
3 mẫu ( số mẫu bằng số lần lặp lại của thí nghiệm)
- Tiến hành thí nghiệm:
Cân 50 mg lá tươi cho vào cối sứ nghiền nhỏ cùng benzen cho tới khimẫu dính vào đáy cối Loại bỏ dung dịch benzen đi, tiếp tục cho benzen vàonghiền, lặp lại cho đến khi dung dịch benzen không còn màu xanh, đổ dungdịch benzen đi Cho dung dịch axeton 100% và tiếp tục nghiền Sau đố, thêm
5 ml axeton 100% và nghiền mẫu cho đến khi thành hỗn hợp đồng nhất
Chuyển dịch nghiền sang phễu lọc thủy tinh xốp gắn với bình Bunsen.Nối bình với máy hút chân không và hút Đổ 2 ml axeton dể tráng phễu vàtiếp tục cho đến khi giọt axeton trên phễu nhỏ xuống không còn màu xanh.Chuyển dung dịch diệp lục vào bình định mức 10 ml và thêm axeton cho đếnvạch 10 ml
So màu trên máy quang phổ ở bước sóng 662 nm và 644 nm
Nồng độ diệp lục được tính theo công thức Wettstein (1957)như sau:
Ca (mg/l) = 9,784 x E662 - 0,99 x E644
Cb (mg/l) = 21,426 x E644 - 4,65 x E662
Ca+b (mg/l) = 5,134 x E662 + 20,436 x E644
Hàm lượng diệp lục liên kết trong 1 g lá tươi được tính theo công thức sau:
C×VA=
P×1000 (mg/g lá tươi)
Trong đó:
E662 và E644: Kết quả so màu diệp lục ở bước sóng 662 nm và 644 nm
Trang 33Ca, Cb, Ca+b: Nồng độ diệp lục a,b và tổng số.
A: Hàm lượng diệp lục liên kết mg/g lá tươi
C: Nồng độ diệp lục trong dịch chiết (mg/l)
a Xác định khả năng giữ nước của mô lá
Cắt lá vào buổi sáng cho vào túi nilon và đưa nhanh vào phòng thínghiệm cân trên cân phân tích để xác định khối lượng tươi của lá Sau đó đểhéo tự nhiêt ở phòng thí nghiệm rong thời gian 4 giờ, cân lại mẫu Sau đó, sấykhô ở 105 độ C đến khi khối lượng không đổi để xác định khói lượng khô củamẫu
Khả năng giữ nước được xác định theo công thức sau:
X =
B−b B−v∗100 %
Trong đó:
X: Lượng nước mất/ tổng lượng nước (%)
B: Khối lượng tươi ban đầu của lá (g)
b: Khối lượng tươi của lá sau khi để héo (g)
V: Khối lượng khô của lá (g)
b.Xác định hàm lượng nước liên kết trong mô lá
Lá của mỗi giống được cắt vào buổi sáng, trên cùng tầng (lá thứ 3 từtrên xuống), đưa ngay vào phòng thí nghiệm cân xác định khối lượng tươi của
lá Ngâm lá trong dung dịch saccarozo 70% trong 6 giờ, lấy lá thấm khô, cânlại khối lượng Sau đó đem sấy khô ở 105oC trong 3 giờ xác định khối lượngkhô của lá
Trang 34Hàm lượng nước liên kết trong mô được tính theo công thức sau:
W =
A 2−A 3
A 1−A 3∗100 (%)
Trong đó:
W: Hàm lượng nước liên kết (% nước tổng số)
A1: Khối lượng tươi của mẫu (g)
A3: Khối lượng khô của mẫu (g)
A2: Khối lượng mẫu sau khi ngâm trong dung dịch saccarozo (g)
2.3.3 Các chỉ tiêu xác định các chỉ tiêu cấu thành năng suất và
Lấy 200 mg mẫu khô đã nghiền nhỏ cho vào bình tam giác có dung tích
100 ml Dùng ống hút thêm vào bình 1 ml H2O2 30%, sau 3 phút cho vào bình
2 ml dung dịch H2SO4 đậm đặc và 3 giọt axit HCl Song song với thí nghiệm
ta tiến hành làm mẫu đối chứng Cách làm tương tự chỉ khác trong bình đốichứng không có mẫu cây
Dặt mẫu trên bếp điện đun cho đến khi có khói trắng bay ra Lấy mẫu ra đểnguội sau đó thêm vào 0,5 ml H2O2 và lại đun lại cho đến khi có khói trắng bay ra.Lấy ra để nguội và lại cho thêm vào 1 - 2 giọt H2O2 vào và đun cho đến khi cókhói trắng bay ra Cứ như vậy, lặp đi lặp lại nhiều lần cho đến khi chất lỏng trongbình trở nên không màu (trắng trong, dưới đáy bình có một ít cặn) Lấy ra để
Trang 35nguội và thêm mộ ít nước cất lắc đều và chuyển dung dịch sang bình định mức
100 ml Tráng bình vài lần bằng nước cất Nước tráng bình cũng đổ vào bình địnhmức Thêm nước cất cho dung dịch trong bình dâng lên vạch 100 ml Dung dịchtrong bình dùng để xác định Nitơ tổng số
Chưng cất: Sử dụng máy cất đạm Kjedahl
Lấy 25 ml dung dịch mẫu ở trên đổ vào bình chưng cất Thêm vào bìnhmột vài giọt thuốc thử Tashio Bổ sung 30 ml NaOH 30 %, dung dịch trongbình lúc này có màu xanh lá cây
Bình hứng chứa 20 ml dung dịch axit boric 3% Thêm vài giọt chỉ thịTashio
Chạy máy chưng cất, tất cả lượng NH3 thoát ra được cố định trong bìnhhứng Thử phản ứng dung dịch chảy ra từ ống sinh hàn bằng quỳ tím, khôngthấy quỳ đổi màu thì quá trình chưng cất dừng Lấy bình hứng ra và chuẩn độtetraborat amon (NH4)B4O7 bằng H2SO4 0,01 N cho đến khi xuất hiện màuhồng nhạt
Tính kết quả:
Lượng N tổng số (%) =
A∗0 , 142∗V C∗m ∗100 (%)
Trong đó:
A: Lượng axit H2SO4 0,01 N dùng để chuẩn độ (ml)
V: Thể tích dung dịch mẫu pha loãng (100ml)
C: Lượng dung dịch mẫu đem chưng cất (25ml)
m: số mg mẫu đem vô cơ hóa (200mg)
0,142: Số mg Nitơ tương đương với 1 ml H2SO4 0,01 N dùng chuẩn độ.-Xác định nitơ phi protein
Cách tiến hành:
Trang 36Cân 5g nguyên liệu cho vào cối nghiền nhỏ với etylic 70% (tỷ lệ thể tíchnguyên liệu/ cồn là 1/4) trong khoảng 20 phút Ngâm 40 - 60 phút, khuấy liêntục Sau khi ngâm lọc tách bã, bã dem chiết lại bằng cồn theo tỷ lệ 1/4 Sau đó,
bã đem chiết lại bằng nước cất không đạm (nước cất 2 lần) đến khi thử khôngcòn phản ứng màu với ninhydrin nữa Dồn tất cả dịch chiết lại và mang kết tủaprotein bằng CuSO4 10% trong hỗn hợp NaOH 10 % với tỷ lệ 1 : 1
Sau khi kết tủa hết, lọc bỏ kết tủa Trong dung dịch chỉ còn chứa dạngNitơ phi protein Đem vô cơ hóa dịch này và dùng phương pháp Kejldahl đểxác định Nitơ phi protein
Vô cơ hóa: Chuyển dịch lọc vào bình Thêm vào đó 1 ml dung dịch H2 SO4
đậm đặc (D = 1,84) Đun đến khi dung dịch còn 10 - 15 ml Sau đó lại thêm 3 -5
ml dung dịch H2 SO4 đậm đặc và xúc tác bằng 1 - 2 giọt H2O2 30% Đun cho đếnkhi dung dịch có màu trắng Quá trình vô cơ hóa kết thúc
Cất đạm: Chuyển dung dịch sang bình định mức có dung tích 100 ml.Tráng bình vài lần bằng nước cất không đạm Nước tráng bình cũng đổ vào bìnhđịnh mức Dùng nước cất không đạm dâng thể tích đến vạch 100 ml Sau đó, cấtđạm bằng máy cất đạm Kjeldahl như trường hợp xác định Nito tổng số
+ Tính kết quả: Sử dụng công thức ở phần xác định Nitơ tổng số
- Xác định protein trong mẫu
Nitơ protein = Nitơ tổng số - Nitơ phi protein
Protein = Nitơ protein × 6,25
Tỷ lệ Nitơ có trong phân tử protein là 16%
Pr
N protein otein
Trang 37Lipit là một hợp chất hữu cơ trong tế bào sống, không hòa tan trongnước nhưng tan được trong các dung môi hữu cơ.
Thiết bị và vật liệu: cân, tủ lạnh, máy li tâm, tủ sấy, ống fancol, dungdịch petrolium ether, mẫu
Cách tiến hành: Mẫu hạt được sấy khô, bóc vỏ và nghiền mịn Cân 1,5gmẫu cho vào các ống fancol, cho thêm 5ml petrolium ether lắc đều để trong tủlạnh 4oC trong 24 giờ Sau đó đem li tâm 8000 vòng/phút trong 20 phút, chắt
bỏ dịch và lặp lại thí nghiệm 3 lần
Đem mẫu sau khi đã loại bỏ lipit được sấy khô trong các ống fancol ở
70oC đến khối lượng không đổi rồi cân mẫu
Hàm lượng lipit (% khối lượng chất khô) =
Xi X
1
n i i
Trang 38 2 1
n i i
md: Sai số của hiệu các trung bình số học
td: Tiêu chuẩn độ tin của hiệu
Tiêu chuẩn độ tin của hiệu (td) được so sánh với bảng tiêu chuẩn Studenvới số bậc tự do: n1 + n2 – 2 (trong đó: n1 số lần nhắc lại ở công thức thínghiệm, n2: số lần nhắc lại ở công thức đối chứng) Sự sai khác giữa các trị sốtrung bình chỉ có ý nghĩa khi td lớn hơn hoặc bằng giá trị tương ứng với mứcxác suất 0,95
(v i n ≥ 30) ới n < 30)
Trang 39PHẦN II: NỘI DUNG CHƯƠNG I: ẢNH HƯỞNG CỦA Mo, Cu, CCC
ĐẾN KHẢ NĂNG CHỊU MẶN CỦA CÁC GIỐNG ĐẬU TƯƠNG
Ở GIAI ĐOẠN NẢY MẦM
Đậu tương là cây có nhu cầu nước cao do trong hạt đậu tương có hàmlượng protein và lipit cao Để tổng hợp 1kg chất khô cần khoảng 500 – 530 kgnước; để hạt nảy mầm hạt đậu tương phải có độ ẩm khoảng 50% [23]
Nảy mầm là giai đoạn đầu tiên, tạo cơ sở trong quá trình phát triển củacây, có vai trò quan trọng trong chu kỳ sinh trưởng và phát triển của thực vật.Trong giai đoạn này cây rất mẫn cảm với nhiều yếu tố môi trường bất thuậnđặc biệt là hạn và muối Sự thiếu nước trong giai đoạn này sẽ làm giảm tỉ lệmọc mầm và ảnh hưởng lớn đến sinh trưởng của cây mầm [35], [36]
Theo Zonetti & cs., stress muối ảnh hưởng đáng kể đến sự tăng trưởngcủa đậu tương ở giai đoạn mầm và giai đoạn cây con, tác động này tỉ lệ thuậnvới nồng độ của NaCl Muối làm giảm tỉ lệ nảy mầm, giảm khối lượng tươi
và khối lượng khô của mầm, chiều dài và số lượng rễ mầm, làm cây còi cọcgià cỗi [69] Cũng theo các trích dẫn của tác giả, trong các nghiên cứu tácđộng của NaCl ức chế sự nảy mầm của hạt giống, sự tăng trưởng sinh khốicủa cây lúa, đậu, ngô,…Căng thẳng mặn ảnh hưởng tới hoạt động của enzymchống oxi hóa trong mầm như peroxyeza, đây là phản ứng của thực vật bảo vệcây khỏi tác động tiêu cực của muối
Ảnh hưởng của NTVL đối với quá trình nảy mầm của hạt cũng đượcnhiều tác giả nghiên cứu trên các đối tượng cây trồng khác nhau, ở nồng độthích hợp có tác động tích cực tới sinh trưởng và phát triển của mầm Khinồng độ của chúng cao gây kìm hãm sinh trưởng của mầm, thậm chí làmgiảm khả năng chống chịu của cây trồng với các stress khác [59]
Trang 40Trong thí nghiệm của mình, chúng tôi đánh giá tác động của Mo, Cu,CCC đến khả năng chịu mặn của đậu tương thông qua các chỉ tiêu về tỉ lệ nảymầm, khối lượng tươi, khô, hoạt tính của enzim amylaza, proteaza.
1.1 Ảnh hưởng của Mo, Cu, CCC đến khả năng nảy mầm của hạt đậu tương trong điều kiện mặn nhân tạo.
Khả năng nảy mầm của hạt trong điều kiện gây mặn nhân tạo là mộttrong các chỉ tiêu để đánh giá khả năng chịu mặn của hạt Tuy nhiên trongmôi trường mặn 0,3% có nhiều nước nhưng chứa nhiều chất tan, áp suất thẩmthấu cao dẫn đến hạt không lấy đủ được lượng nước cần, khả năng nảy mầmgiảm Công thức nào có tỉ lệ nảy mầm cao, phần trăm so với đối chứng giảm
ít thì chứng tỏ khả năng chống chịu của đậu tương trong công thức đó tốt
Trong điều kiện hạn nhân tạo, khả năng nảy mầm của đậu tương giảm
so với khi được cung cấp đủ nước Khi sung Mo 0,03% đã thúc đẩy quá trìnhnảy mầm của các giống đậu tương tốt hơn, còn Cu 0,04% lại làm giảm khảnăng nảy mầm của chúng trong điều kiện hạn [37]