Đang tải... (xem toàn văn)
Xác định hoạt độ LDH ở bệnh nhân đã xuất hiện từ 12 24h trước khi vào viện hoặc bệnh nhân có tiền sử và điện tim gợi ý là nhồi máu cơ tim cấp. Nếu lấy máu xét nghiệm vào ngày thứ 2 (24 48h) mà LDH đều tăng cao thì gần như chắc chắn bệnh nhân bị nhồi máu cơ tim mà không cần làm các xét nghiệm chẩn đoán khác nữa.
CHỈ THỊ PHÂN TỬ Chủ đê lactate dehydrogenase TS Nguyễn Thị Thu Liên Nhóm NỘI DUNG CHÍNH II Ứng dụng isoenzyme LDH III Ví dụ I Giới thiệu tổng quan LDH GIỚI THIỆU TỔNG QUAN LACTATE DEHYDROGENASE LÀ GÌ • Enzym lactat đehdrogenase (LDH) tên quen dùng, hệ thống danh pháp hoá học thuộc loại enzym oxy-hoá khử có tên L-lactat NAD-oxydoreductase LDH tên chung loại enzym xúc tác phản ứng khử hydro (H) axit lactic CẤU TẠO PHÂN LOẠI • LDH có phân tử lượng từ 130.000 đến 140.000 •Do 4 đơn vị nhỏ cấu tạo nên •Các chuỗi polipeptid này gồm 2 loại có cấu tạo phân tử sinh tổng được sinh tổng hợp nên từ 2 loại gen khác nhau và được ký hiệu là H (H=Heart=tim) và M (M=Muscle=cơ xương). •Các chuỗi kết hợp với thành dạng phân tử tetrame: LDH1, LDH2, LDH3, LDH4 LDH5 CẤU TẠO PHÂN LOẠI • • Các tiểu đơn vị M mã hóa gen LDHA Các tiểu đơn vị H mã hóa gen LDHB Lactate dehydrogenase A ( tiểu đơn vị M ) Lactate dehydrogenase B ( tiểu đơn vị H ) CẤU TẠO PHÂN LOẠI VAI TRÒ VAI TRÒ Kiểm tra loạt bệnh liên quan đến tim, gan, cơ, thận, phổi, máu Ý nghĩa lâm sàn LDH Giám sát sự thay đổi trong khối u sau khi hóa trị ỨNG DỤNG CỦA LDH ISOZYMES TRONG CHỈ THỊ PHÂN TỬ ĐIỆN DI LDH ĐIỆN DI LDH Giá trị tham khảo cho mức độ bình thường isoenzymes LDH khác từ phòng thí nghiệm đến phòng thí nghiệm tìm thấy phạm vi sau đây: ĐIỆN DI LDH Để phát isozyme LDH gel agarose sau điện di, phản ứng enzym nói nối với sản xuất phản ứng màu: ĐỊNH LƯỢNG LDH Một đơn vị gây trình oxy hóa micromole NADH phút 25 ° C pH 7.3, theo điều kiện quy định Thuốc thử 30 mM sodium pyruvate 0.2 Tris⋅HCl đệm, pH 7.3 0,2 M Tris⋅HCl, pH 7.3 Enzyme 6.6 mM NADH đệm 0,2 M Tris⋅HCl, mg / ml 0,2 M Tris⋅HCl đệm pH 7.3 ĐIỆN DI LDH • Quy trình: Thiết lập quang phổ 340 nm 25 ° C Pipette vào cuvette sau: Video ĐIỆN DI LDH MỨC độ LDH mô cao huyết LD-1, LD-2 chiếm ưu tim, thận, hồng cầu LD-4, LD-5 chiếm ưu xương, gan Cơ quan Mức độ Gan 145U / g Tim 124U / g Thận 106U / g Xương bắp 147U / g Hồng cầu 36U / g MỘT SỐ THÔNG TIN QUAN TRỌNG CỦA LDH LDH hoạt động khác huyết khác Các hoạt động LDH vốn có diện huyết gây tín hiệu khảo nghiệm MỘT SỐ THÔNG TIN QUAN TRỌNG CỦA LDH Luyện tập thể thao cũng có thể làm tăng Vitamin C (acid ascorbic) có thể làm giảm nồng nồng độ LDH. độ LDH Các loại thuốc can thiệp với thử nghiệm LDH xác Rượu, thuốc mê, thuốc aspirin, florua, mithramycin, procainamide và có thể làm tăng nồng độ LDH Triệu chứng bệnh dựa vào LDH Triệu chứng bệnh dựa vào LDH - Xác định hoạt độ LDH bệnh nhân xuất từ 12 - 24h trước vào viện bệnh nhân có tiền sử điện tim gợi ý nhồi máu tim cấp - Nếu lấy máu xét nghiệm vào ngày thứ (24 - 48h) mà LDH tăng cao gần chắn bệnh nhân bị nhồi máu tim mà không cần làm xét nghiệm chẩn đoán khác Triệu chứng bệnh dựa vào LDH - Các bệnh nhân bị nhồi máu tim vào viện muộn xét nghiệm LDH toàn phần không cần làm xét nghiệm khác - Bình thường: LDH = 230 - 460 U/l - Nếu LDH toàn phần tăng cao 2000 U/l có giá trị chẩn đoán nhiều bệnh khác làm tăng LDH Triệu chứng bệnh dựa vào LDH Cho nên cần xác định isozyme LDH - Phân tách phương pháp điện di huyết tương cho thấy: LDH có isozyme, gồm từ LDH1 đến LDH5 - Trong nhồi máu tim: LDH1, LDH2 tăng cao, LDH tăng cao khoảng thời gian 10- 12h đầu sau nhồi máu đạt tối đa từ 48 đến 72h Triệu chứng bệnh dựa vào LDH Trong nhồi máu tim: + LDH1/LDH2 > thường xuất từ 12 - 24h, đạt cực đại khoảng 55 - 60h, thường xuất vòng 48h + LDH1/LDH2 > không xuất trước CK-MB, xuất nhiều lần vòng 2- ngày + LDH1/LDH2 > gặp số trường hợp nhồi máu thận cấp, thiếu máu huyết tán, thiếu máu ác tính, đặt van tim nhân tạo, nhiễm urê huyết, đột quỵ, nhũn não Thank you ... • Các tiểu đơn vị M mã hóa gen LDHA Các tiểu đơn vị H mã hóa gen LDHB Lactate dehydrogenase A ( tiểu đơn vị M ) Lactate dehydrogenase B ( tiểu đơn vị H ) CẤU TẠO PHÂN LOẠI VAI TRÒ VAI TRÒ Kiểm... DUNG CHÍNH II Ứng dụng isoenzyme LDH III Ví dụ I Giới thiệu tổng quan LDH GIỚI THIỆU TỔNG QUAN LACTATE DEHYDROGENASE LÀ GÌ • Enzym lactat đehdrogenase (LDH) tên quen dùng, hệ thống danh pháp hoá