SUMMARY Artesunate have been synthesized w ith the yield o f 89,4% from dihydroartemisinin and anhydride succinic using sodium bicarbonat as catalyst and acetone as solvent This new catalyst has the advantage o f less toxic, less polution and simple purification process in comparision w ith pyridine catalyst Influence o f solvent volume, catalyst ratio, anhydride sucdniơdihydroartem isinin ratio and reaction temperature on the product yield were studied TÀI LIỆU THAM KHÀO World Health Organisation (2006), Guidelines for the Treatment o f Malaria, WHO, Geneva ĐỔ Hữu Nghị (1996) Nghiên cứu chiết xuất, bán tổng hợp đưa vào sản xuất m ột số hợp chất tự nhiên có tác dụng điểu trị sốt rét từ nguón dược liệu Việt Nam Luận án phó tiến sĩ khoa học Y Dược, Trường Đại học Dược Hà Nội China Cooperative Research Group on Qinghaosu and its derivatives as antimalarials (1982), 'The chemistry and synthesis of qinghaosu derivatives", J T rad Chin Med., 2,9-16 Li Ying, Pei-Lin Yu, Yi-Xin Chen, Ru-Yun Ji (1982), "Studies on analogs o f arteannuin", Acta Chimica Sinica, 40,557-561 ĐỖ Hữu Nghị, Nguyễn Văn Hân (2008), 'Tổng hợp artesunat với xúc tác natri bicarbonat", Tạp chí Dược học, 384, tr 29-31, Bộ Y tế (2002), Dược điển Việt Nam III, Nhà xuất Y học, Hà Nội Tô Cẩm Tú (1999), Thiết kễ phân tích thí nghiệm (quy hoạch hoá thực nghiệm), Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội United States Pharmacopeial convention Inc (2005), The United States Pharmacopeia, Twenty-Eighth Revision and the National Formulary, Twenty-Third Edition (USP 28-NF 23) Nghiên cứu tương quan in vitro-in vivo viên nang dìitiazem giải phóng kéo dài Nguyễn Thị Hường, Nguyễn Trần Linh, Nguyễn Hóng Vân* Tạ Mạnh Hùng, Phùng Thị Vinh** *Trường Đại học Dược Hà Nội: ** Viện Kiềm nghiệm thuốc trung ương Đặt vấn đề Diltiazem thuốc chẹn kênh calci dùng phổ biến điểu trị đau thắt ngực tăng huyết áp có thời gian bán thải ngắn phải dùng nhiểu lẩn ngày Để khắc phục hạn chế này, giới diltiazem thường dùng dạng tác dụng kéo dài nước, gần đây, Bộ môn Bào chế trường Đại học Dược Hà Nội nghiên cứu bào chế diltiazem dạng viên nang chứa pellet giải phóng kéo dài 12 [1] đánh giá tương đương sinh học so với viên Diacor đối chiếu Viện kiểm nghiệm thuốc Trung ương Tiếp theo nghiên cứu trên, tiến hành đánh giá tương quan in vitro-in vivo chế phẩm Nguyên liệu, thiết bị, pKương pháp nghiên cứu Nguyên liệu, thiết bị -Diltiazem đạt tiêu chuẩn Dược điển Trung Quốc Các nguyên liệu, hóa chất dùng nghiên cứu đạt tiêu chuẩn dược dụng tinh khiết phân tích -Viên nang diltiazem giải phóng kéo dài 12 Bộ môn Bào chế Trường Đại học Dược Hà Nội bào chế, đạt TCCS, lô 070709, lĩạn dùng 07/2011 -Các th iết bị nghiên cứu chính: máy thử hòa tan VANKEL-VARIAN, máy lắc xoáy Vorter genie 2, HPLCMS Thermo Phương pháp nghiên cứu Thử nghiệm hòa tan Tiến hành theo test 2, test chuyên luận nang giải phóng kéo dài USP 30 với pH thiết bị thay đổi (pH: 1,2 - 4,5 - 6,8 7,2 giỏ quay cánh khuấy) Mô hình hóa đồ thị hòa tan Sửdụng phần mềm MathCAD, khớp số liệu môi trường lựa chọn mô hình phù hợp dựa tiêu chuẩn thông tin Akaike Mô hình có giá trị AIC nhỏ xem mô hình phù hợp Đánh giá sinh khả dụng: Đánh giá 12 người tình nguyện theo quy định chung FDA, lấy 6ml máu thời điểm: 0;1;2;3;4;5;6;7;8;10;12;24 36h sau uống thuốc Ly tâm 4000 vòng/phút 10 phút, lấy lớp huyết tương, bảo quản -40°c±10°c phân tích Bỏng hPhổntíămđltiũỉem giải phóng cỊua thời điềm (n=6) (Ghiclìú: ĩlgqSŨ, 72ckỉ00 lò kí hiệu điêu kiện thủ hòa tũn: Giờ 12gq50 30,298 59,952 83,231 91,253 92,112 92,112 92,542 92,829 12gq100 44,354 80,135 88,709 90,055 90,763 90,905 91,047 91,543 12ck50 54,609 82,305 87,014 89,784 90,965 92,206 93,352 98,318 12ck100 51,372 82,816 88,396 89,714 89,701 91,842 93,669 96,410 45gq50 21,367 31,982 53,209 72,296 83,413 89,005 90,642 91,256 45gq100 21,586 32,867 53,478 71,080 85,914 86,988 88,129 90,143 45ck50 34,716 55,201 67,992 81,460 90,765 89,96 91,167 91,078 45ckl00 26,324 37,526 60,854 80,723 92,663 94,093 94,185 94,185 68gq50 20,024 34,564 49,560 68,856 77,685 79,983 80,370 82,213 68gq100 24,012 38,082 52,357 63,531 78,947 81,615 84,397 86,404 68ck50 24,587 39,367 54,381 70,428 81,642 83,707 84,880 86,381 68ck100 24,710 39,764 56,192 71,887 81,954 81,176 81,000 85,752 72gq50 20,053 31,201 50,763 64,373 75,373 80,631 81,052 81,262 72gq100 21,866 36,421 50,569 65,463 70,608 74,94 75,753 78,934 72ck50 18,130 32,042 47,069 62,533 73,387 77,698 80,374 86,618 72ck100 22,781 34,171 50,063 65,819 74,345 79,641 81,607 83,574 - Xử lí mẫu: ml huyết tương thêm 500 |jl chuẩn nội (felodipin) 1ml amoniac, lắc 15 giây Thêm ml hỗn hợp diethylether: cloroform (7:3), lắc ngang 10 phút, ly tâm 4000 v ò ng /ph ú t phút, hút ml dung môi, bốc khí nitơ, hòa tan cắn ml pha động (methanol: isoproparol: amoniac: acetonitril = 5:1:1:3), lắc phút - Định lượng HPLC-MS với cột: Hypersil Gold C18 (50.2,1 mm), 1,9|jm; tốc độ dòng: 0,4 m l/ phút; pha động: methanol: isoproparol: amoniac: acetonitril = 5:1:1:3; detector MS; tiêm 10 |jl - Tính toán thông số dược động học theo quy định chung Xác định tương quan in vitro-in vivo * Tim IVIVC theo phương trình: A = a D + p (D: tỉ lệ dược chất hòa tan in v itr o ; A: tỉ lệ dược chất hấp thu in vivo; a, 3: hệ số) *Tim IVIVC theo phương trình: (D: tỉ lệ dược chất hòa tan in vitro; A: tỉ lệ dược chất hấp thu in vivo; a: tỉ lệ số tốc độ thấm số tốc độ hòa tan; F in f: tỉ iệ dược chất hấp thu thời điểm oo (coi Finf=1) Sử dụng phần mềm MathCAD để xây dựng mối tương quan Tương quan phù hợp tương quan có AIC nhỏ Kết thực nghiệm Kết giải phóng in vitro viên nang diltiazem giái phóng kéo dài Kết thử nghiệm hòa tan viên nang diltiaiem giải phóng kéo dài Tiến hành thử nghiêm hòa tan theo phương pháp mô tả Kết thu trình bày bảng 1: + Nhận xét: - Tốc độ giải phóng dược chất giảm dẩn từ pH 1,2 đến pH 7,2 Tại diltiazem giải phóng >80% pH 1,2 khoảng 50% pH 7,2 Tốc độ giải phóng dược chất phụ thuộc vào pH: cao pH thấp (do diltiazem dạng muối acid) -Tốc độ giải phóng diltiazem bị ảnh hưởng thủy động lực Khi dùng giỏ quay tốc độ giải phóng chậm cánh khuấy, thời tốc độ quay cao làm tăng tốc độ giải phóng dược chất Mô hình giải phóng dược chất điểu kiện thử hòa tan khác Tiến hành tính toán theo phương pháp mô tả trên, kết AIC mô hình tương ứng với với liệu giải phóng dược chất điều kiện ề Bàng 2: Chisổ Aie cùa mô hình ữong cúc điêu kiện M h ò ũ ton Bậc1 (Wagner) BậcO Weibull Higuchi Hixson-crowell Korsmeyerpeppás Hofen-berg 12gq50 44,178 61,185 48,109 56,934 45,164 56,807 51,493 12gq100 47,218 58,660 58,773 61,851 52,191 54,704 54,958 12ck50 43,839 52,566 57,228 61,46 52,282 41,217 55,282 12ck100 44,638 54,876 57,176 61,631 52,194 50,238 54,702 45gq50 47,649 55,099 40,360 52,796 42,137 51,403 51,385 45gq100 46,912 55,697 42,503 52,537 43,039 53,038 53,236 45ck50 34,513 55,180 37,941 49,835 44,428 48,864 58,702 45ck100 49,297 58,118 44,121 53,084 44,128 54,329 50,770 68gq50 41,410 54,515 42,780 49,909 44,130 50,250 59,200 68gq100 34,269 50,004 35,594 44,495 38,034 44,053 58,946 68ck50 37,192 53,328 38,830 46,738 41,493 48,04 58,632 68ck100 38,989 58,284 41,307 47,304 45,068 49,158 60,069 72gq50 40,447 53,377 41,126 49,480 42,198 49,118 58,608 72gql00 37,135 51,099 37,384 35,234 45,448 45,101 62,578 72ck50 36,950 49,195 31,588 48,645 33,116 43,884 35,106 72ck100 35,106 50,705 36,62 45,852 39,556 45,335 59,300 thử hòa tan trình bày bảng + Nhận xét: theo số AIC, mô hình giải phóng dược chất môi trường khác tương đối phù hợp với mô hình động học bậc (Wagner) Tiếp mô hình Weibull điều kiện thử có liệu giải phóng phù hợp với mô hình Higuchi Thông số dược động học viên nang diltiazem người tình nguyện Tiến hành tính thông sổ dược động học theo nồng độ dược chất máu theo thời gian 12 người tình nguyện, kết trình bày bảng + Nhận xét: - Mức độ dao động hấp thu cá thể lớn: Cmax người thứ 12 (446,8 ng/m l) gấp lẩn người thứ (61,5 ng/m l).Tm ax dao động từ 2-5 AUC có giá trị lớn người thứ 12 gấp lẩn người thứ Ngoài nguyên nhân sai số trình định lượng, diltiazem thuốc chuyển hóa mạnh qua gan lẩn đầu, độ liên kết protein huyết tương cao, nên thông số dược động học diltiazem có giá trị chênh lệch lớn Kết thực nghiệm chứng tỏ diltiazem dược chất có đặc tính dược động học phức tạp, phụ thuộc nhiều vào cá thể Dựa vào phương pháp Wagner-Nelson có hiệu chỉnh, bảng nồng độ thuốc máu, tỉ lệ thuốc hấp thu theo thời gian tính toán phẩn mểm KINBES Kết trình bày bảng Tỉ lệ thuốc hấp thu vào máu chênh lệch đẩu tiên Nguyên nhân Bòng i ĩhông số dược động học cùa ătlaiem người tình nguyện sn Cmax ng/m l Tmax Giờ AUC(giờ)*(ng/m l) 94,5 1409,91 61,5 1022,67 243,1 1926,35 215,9 1279,17 200,2 1661,76 151,1 1727,23 158,8 2075,25 167,0 1323,30 163,3 1362,79 10 93,1 1234,98 11 128,0 1275,14 12 446,8 3367,56 TB 176,9 3,5 1638,84 SD 100,0 1409,91 SỐ 1/2011 Nghiên CỨU d ợ c T h ổ n g tỉn thuốc BÀI NGHIÊN cứu — Bỏng 4: ĩ ỉ lệ thuốc hấp thu theo thời gian 12 người tình nguyện Thời điểm (giờ) Tỉ lệ thuốc hấp thu Trung bình SD 0,5 0,1372 0,0701 1,0 0,2775 0,1006 1,5 0,4537 0,1192 2,0 0,6318 0,1552 2,5 0,7566 0,1662 3,0 0,8701 0,1777 3,5 0,9131 0,1544 4,0 0,9501 0,1333 5,0 0,9577 0,0993 6,0 0,9553 0,0856 7,0 0,9512 0,0715 8,0 0,9532 0,0559 + Nhận xét: - Tương quan không tuyến tính thể rõ dược chất giải phóng điểu kiện thử pH 4,5 th iết bị giỏ quay, tốc độ 50 vòng/phút - Kết thực nghiệm thu giá trị AIC nhỏ -38,865 ứng với mô hình tương quan tuyến tính dược chất giải phóng điểu kiện thử pH 7,2, thiết bị cánh khuấy, tốc độ 50 vòng/phút Điều kiện giống với điểu kiện thử hòa tan USP qui định (test chuyên luận đánh giá độ hòa tan viên nang diltiazem giải phóng kéo dài) [5], Kết luận Có thể có tương quan tuyến tính không tuyến tính tỉ lệ dược chất giải phóng in vitro tấ t điểu kiện thử hòa tan tỉ lệ dược chất hấp thu in vivo Tương quan tuyến tính Thể rõ điểu kiện thử hoà tan pH 7,2, th iế t bị cánh khuấy, tốc độ 50 vòng/phút Bàng 5: ũió ưịAIC theo tương quan mức độ giỏi phóng vò mức độ híp thu dược chát Điếu kiên thử hòa tan Tương quan tuyên tính Tưang quan không tuyen tính 12gq50 -11,632 -17,251 12gq100 -6,798 -10,408 12ck50 -9,854 -14,006 12ckl00 -8,363 -12,663 SUMMARY: The IVIVC o f th e Diltiazem sustanied release capsule KD was Invertigated In v itro tests was conducted in th e d iffe re n t conditions such as e q u ip m e n t (apparatus o r 2); rotary speeds (50; 100 r/m ); m edium pH (1,2; 4,5; 6,8) In vivo absorption was studied on th e 12 healthy volunteers using HPLC/MS to determ ine diltiazem in th e blood samples IVIVC was calculated basing on th e AlC values The results show th a t 45gq50 -31,997 -34,018 45gql00 -28,592 -30,773 using USP dissolution test (basket operating at 50 r/m in the 45ck50 -20,434 -25,867 m edium o f pH 7,2) 45ckl00 -24,454 -24,127 68gq50 -26,901 -23,125 68gql00 -35,164 -26,948 68ck50 -29,038 -27,354 - Nguyễn Thị Hường cs (2009) - Nghiên cứu bào chế pellet 68ckl00 -24,605 -23,500 diltiazem giải phóng kéo dài phương pháp bao màng - Tạp 72gq50 -30,658 -23,667 72gq100 -28,360 -17,838 "Nonlinear calibrations on the assay o f dilitiazem and tw o 72ck50 -38,865 -25,482 o f its metabolites from plasma samples by means o f liquid 72ckl00 -36,028 -24,113 th e IVIVC o f th e KD capsule was fo u n d o n ly in th e co n d itio n o f TÀI LIỆUTHAM KHẢO chí Dược học, 402,9-12 - Georgita c., Albu F., David V., Medvedovici A (2008), chromatography and ESI/MS(2) detection: Application to a bioequivalence study", Biomed Chromatogr., 22(3), pp 289-297 - Nisarur ur R., K H Y., Jia Woei w (2005), "In vivo performance diltiazem có đặc tính dược động học phụ thuộc nhiều vào cá thể Xây dựng mối tương quan mức độ giải phóng in vitro mức độ hấp thu in vivo Từ số liệu hòa tan bảng tỉ lệ hấp thu bảng tính tương quan bảng o f controlled release pellets o f diltiazem MCI", Pak J Pharm Sci., 18(2), pp 44-48 4-SistaS.,LaiJ.C.,EradiriO.,AlbertK.S.(2003), "Pharmacokinetics o f a novel diltiazem MCI extended-release tablet form ulation for evening administration", J Clin Pharmacol., 43(10), pp 11491157 -USP 30, p 715-719 ... tương quan Tương quan phù hợp tương quan có AIC nhỏ Kết thực nghiệm Kết giải phóng in vitro viên nang diltiazem giái phóng kéo dài Kết thử nghiệm hòa tan viên nang diltiaiem giải phóng kéo dài. .. diltiazem giải phóng kéo dài) [5], Kết luận Có thể có tương quan tuyến tính không tuyến tính tỉ lệ dược chất giải phóng in vitro tấ t điểu kiện thử hòa tan tỉ lệ dược chất hấp thu in vivo Tương quan tuyến... Jia Woei w (2005), "In vivo performance diltiazem có đặc tính dược động học phụ thuộc nhiều vào cá thể Xây dựng mối tương quan mức độ giải phóng in vitro mức độ hấp thu in vivo Từ số liệu hòa