Nghiên cứu thành phần các tecpenoid từ cây ngải tiên

Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA HÓA HỌC -*** - NGUYỄN VĂN ANH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN CÁC TECPENOID TỪ CÂY NGẢI TIÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHÍNH QUY Chuyên ngành : Hóa hữu Ngƣời hƣớng dẫn khoa học PGS TS PHAN VĂN KIỆM Hà Nội - 2012 Nguyễn Văn Anh K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội LỜI CẢM ƠN Khóa luận tốt nghiệp đƣợc thực phòng thí nghiệm hóa học hữu Viện Hóa học Hợp chất Thiên nhiên, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam Trƣớc hết em xin chân thành cám ơn GS TS Châu Văn Minh anh chị phòng Hóa hữu cơ, Viện Hóa học Hợp chất Thiên nhiên – Viện khoa học Công nghệ Việt Nam tạo điều kiện thí nghiệm thuận lợi giúp em hoàn thành Khóa luận tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn PGS TS Phan Văn Kiệm giao đề tài, tạo điều kiện thí nghiệm thuận lợi tận tình hƣớng dẫn em suốt thời gian thực Khóa luận tốt nghiệp Em xin bày tỏ lòng biết ơn tới Lãnh đạo Viện Hóa học hợp chất thiên nhiên tạo điều kiện cho em đƣợc học tập sử dụng thiết bị tiên tiến Viện để hoàn thành tốt mục tiêu đề khóa luận tốt nghiệp Cuối em xin cảm ơn thầy giáo TS Nguyễn Văn Bằng toàn thể thầy cô giáo khoa hóa học, thầy cô giáo trƣờng Đại học Sƣ phạm Hà Nội truyền đạt kiến thức quý báu cho em suốt trình học tập trƣờng Em xin chân thành cảm ơn Hà Nội, tháng 5/2012 Nguyễn Văn Anh Nguyễn Văn Anh K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Đây công trình nghiên cứu riêng Các số liệu kết đƣợc nêu Khóa luận trung thực chƣa đƣợc công bố công trình khác Hà Nội, Ngày 09 tháng 05 năm 2012 Sinh viên Nguyễn Văn Anh Nguyễn Văn Anh K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội MỤC LỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Sắc ký lớp mỏng TLC : CC : Sắc ký cột thƣờng FC : Sắc ký cột nhanh Mini-C : Sắc kí cột tinh chế RP-SPE : Chiết pha rắn pha đảo EI-MS Phổ khối lƣợng va chạm điện tử : Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân proton H-NMR : 13 Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân cacbon 13 C-NMR : DEPT : Phổ DEPT HMQC : Phổ Heteronuclear Multiple Quantum Coherence HMBC : Phổ Heteronuclear Multiple Bond Connectivity IR : Phổ hồng ngoại (Infraed Spectroscopy) MS : Phổ khối lƣợng (Mass Spectroscopy) NOESY : Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy Nguyễn Văn Anh K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội DANH MỤC CÁC BẢNG, CÁC SƠ ĐỒ Bảng 1: Các loài Alpinia có Việt Nam……………………………… Bảng 2: Thành phần hóa học tinh dầu thân rễ khô ngải tiên Hedychium coronarium Koenig…………………………………… 11 Bảng 3: Các terpennoid đƣợc phân lập từ ngải tiên……………… 12 Bảng 4: Bảng kết gán giá trị phổ 1H-NMR 13C-NMR (1) so sánh với tƣ liệu [10]…………………………………………………… 45 Bảng 5: Bảng kết gán giá trị phổ 1H-NMR 13C-NMR (2) so sánh với tƣ liệu [11]……………………………………………………… 51 Sơ đồ 1: Chiết phân đoạn dịch chiết metanol Ngải tiên 41 Sơ đồ 2: Phân lập hợp chất coronarin D coronarin D methyl ete Nguyễn Văn Anh 42 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ Hình 1: Thân, hoa ngải tiên……………………………………………… Hình 2: Bụi ngải tiên……………………………………………………… 10 Hình 3: Hạt ngải tiên…………………………………………… 10 Hình 4: Rễ ngải tiên………………………………………………… 10 Hình 5: Phổ proton 1H hợp chất HC12……………………………… 46 Hình 6: Phổ cacbon 13C hợp chất HC12……………………………… 47 Hình 7: Phổ cacbon 13C DEPT hợp chất HC12…………………… 47 Hình 8: Phổ chiều HSQC hợp chất HC12………………………… 48 Hình 9: Phổ chiều HMBC hợp chất HC12………………………… 49 Hình 10 : Các tƣơng tác HMBC (HC) hợp chất HC12…… 50 Hình 11: Phổ proton 1H hợp chất HC6C2A………………………… 52 Hình 12: Phổ cacbon 13C hợp chất HC6C2A………………………… 53 Hình 13: Phổ cacbon 13C DEPT hợp chất HC6C2A……………… 53 Nguyễn Văn Anh K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội LỜI MỞ ĐẦU Cuộc sống ngƣời ngày đƣợc nâng cao, chất lƣợng sống ngày cải thiện, tuổi thọ tăng lên Bên cạnh phát triển ngƣời phải đối mặt với nguy mắc bệnh hiểm nghèo Nguyên nhân ô nhiễm bầu không khí, ô nhiễm nguồn nƣớc… Chính việc nghiên cứu tìm loại thuốc có nguồn gốc thiên nhiên có hiệu cao, dễ tìm nguồn nguyên liệu, tác dụng phụ độc tính để ứng dụng y học nông nghiệp mục đích khác ngƣời đƣợc nhà khoa học quan tâm Nƣớc ta nằm vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa, độ ẩm cao Với điều kiện tự nhiên thuận lợi nhƣ nên hệ thực vật Việt Nam phát triển phong phú đa dạng với khoảng 12.000 loài thực vật, không kể đến loài tảo, rêu nấm Nhiều loại số từ xa xƣa đến đƣợc sử dụng y học cổ truyền mục đích khác để phục vụ đời sống nhân dân ta Với phát nhiều chất có hoạt tính sinh học có giá trị từ thiên nhiên, nhà khoa học có đóng góp đáng kể việc tạo loại thuốc điều trị bệnh nhiệt đới bệnh hiểm nghèo để kéo dài tuổi thọ nâng cao chất lƣợng sống ngƣời Thiên nhiên không nguồn nguyên liệu cung cấp hoạt chất quý để tạo biệt dƣợc mà cung cấp chất dẫn đƣờng để tổng hợp loại thuốc Từ tiền chất đƣợc phân lập từ thiên nhiên, nhà khoa học chuyển hóa chúng thành hoạt chất có khả trị bệnh cao Các loài Hedychium (chi ngải) nguồn cung cấp hợp chất tecpenoid đƣợc biết đến, Ngải tiên thuộc chi ngải đƣợc sử dụng từ lâu dân gian để làm thuốc chữa bệnh nhƣ thân rễ thƣờng đƣợc dùng chữa đau bụng lạnh, bụng đầy trƣớng, tiêu hoá kém, chữa Nguyễn Văn Anh K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội rắn cắn….Tuy nhiên chƣa có công trình nghiên cứu thức hóa thực vật Chính Ngải tiên đƣợc lựa chọn làm đối tƣợng nghiên cứu Khóa luận Nhiệm vụ nghiên cứu Khóa luận là: Xây dựng quy trình chiết hợp chất từ thân rễ củ Ngải tiên Phân tích sắc kí lớp mỏng phần chiết chứa hợp chất tecpenoid Ngải tiên Xây dựng phƣơng pháp phân tách để phân lập hợp chất tecpenoid từ phần chiết Xác định cấu trúc hợp chất đƣợc phân lập Nguyễn Văn Anh K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Khái quát chi Hedychium 1.1.1 Đặc điểm thực vật học Hedychium (chi ngải) chi thuộc họ gừng (Zingiberaceae) gồm lâu năm phổ biến với chiều cao phát triển khoảng 120 – 180 cm Chi thƣờng đƣợc gọi với tên chi hoa loa kèn gừng chi loại thân thảo, thân rễ mập phân nhánh Chi có nguồn gốc từ vùng đất nhiệt đới Châu Á dãy Himalaya Các loài chi thƣờng có hoa đẹp, rực rỡ hấp dẫn mùi hƣơng Tại Nam Á, chi Hedychium có 80 loài Các nghiên cứu gần báo cáo có 41 loài Ấn Độ, có 17 loài đặc hữu Ấn Độ [12] Ba loài chi Hedychium từ Thái Lan đƣợc nhận dạng phân lập năm 1995 H samuiense, H tomentosum H Biflorum [13] Theo cỏ Việt Nam Phạm Hoàng Hộ Việt Nam chi Hedychium có 12 loài, phân bố hầu hết tỉnh từ Bắc chí Nam [4] Nguyễn Văn Anh K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội Bảng 1: loài thuộc chi Hedychium có Việt Nam STT Tên tiếng Anh Tên thƣờng Đặc điểm địa thực vật gọi Dạng giống gừng, thơm, phiến to, không lông, mép cao 2-3 cm; phát hoa chót thân, có nhiều hoa Hedychium coronarium Ngải tiên xanh, hoa trắng thơm Đài ống dài; vành có tai hẹp, dài; tiểu nhụy Koen lép dạng cánh hoa to Cây phân bố Lào Cai, Đà Lạt, Hà Giang Cành ngắn, có sợi; thân cao đến 2m, đáy đo đỏ Lá có phiến thon dài, Hedychium coronarium var flavescens Ngải tiên vàng vàng mặt láng, mặt dƣới có lông; mép cao 3-4 cm Phát hoa thông; đài có ống có lông; vành có ống dài đến 10 cm; phiến vàng lợt; môi có bớt vàng sẫm Hoa thơm ngọt, màu vàng Thân cỏ cao, cành ngắn Lá có phiến thon, chót có đuôi dài 4-6 cm; mép Hedychium coronarium var flavum K Ngải tiên vàng cao đến 5cm; Phát hoa hình bắp cao đến 15cm, hoa có lông chót, mang – hoa; hoa vàng; ống vành Schum dài cm, môi to, chẻ chót Hedychium Ngải tiên Thân cỏ, cao 1-1,2 m Lá có phiến bousigoniamun Bousigon thon hẹp, nhọn, dài 30 – 50 cm, rộng Nguyễn Văn Anh 10 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội Hình 7: Phổ cacbon 13C DEPT hợp chất HC12 Kết phân tích phổ 13C-NMR DEPT (125 MHz, DMSO-d6) thấy có 20 tín hiệu cacbon đặc trƣng hợp chất diterpene, thành phần đặc trƣng Ngải tiên Trong có nhóm metyl vị trí cộng hƣởng C 14,01 (C-20), 21,48 (C-19) 33,12 (C-18); nhóm oximetin (-O-CH-O-) xác định vị trí cộng hƣởng C 96,37 (C-15); nhóm cacbonyl nối đôi liên hợp với nhóm cacbonyl đƣợc xác định tín hiệu C 169,21 (C-16), 125,83 (C-13) 140,56 (C-12); nối đôi lần vòng với nhóm metilen xác định vị trí C 107,31 (C-17) cacbon bậc C 148,03 Các kết gợi ý hợp chất có dạng diterpene với cấu trúc khung kiểu labdane - lớp chất phổ biến chi Hedychium Để khẳng định vị trí liên kết hợp chất HC12, tiến hành đo phổ chiều HSQC HMBC Các tín hiệu proton đƣợc gán với cacbon tƣơng ứng dựa việc phân tích phổ chiều HSQC (bảng 4) Nguyễn Văn Anh 54 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội Hình 8: Phổ chiều HSQC hợp chất HC12 Kết phân tích phổ HMBC cho thấy proton H-20 nhóm methyl có tƣơng tác với tín hiệu cacbon C-1, C-5, C-9, C-10; proton nối đôi H12 tƣơng tác với tín hiệu cacbon vị trí C-14, C-16 Trong đó, proton nối đôi vòng H-17 có tƣơng tác với tín hiệu cacbon C-7, C-9 proton H-18, H-19 lần lƣợt xuất tƣơng tác với với tín hiệu cacbon C-3, C-4, C-5, C-18 C-19 (Hình 9) Nguyễn Văn Anh 55 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội Hình 9: Phổ chiều HMBC hợp chất HC12 Nguyễn Văn Anh 56 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội O 13 O 11 20 H 15 OH 17 19 18 Hình 10 : Các tƣơng tác HMBC (HC) hợp chất HC12 Kết hợp so sánh với liệu phổ đƣợc công bố trƣớc hợp chất Coronarin D thấy có tƣơng đƣơng vị trí tƣơng ứng [10] Từ số liệu nêu khẳng định hợp chất coronarin D 3.5 (coronarin D methyl ete) HC6C2A – Coronarin D metyl eter CDCl3 - C21H32O4, M = 348 O 12 20 11 18 19 OCH3 CH2 O 14 16 Bảng 5: bảng kết gán giá trị phổ 1H-NMR 13C-NMR (2) so sánh với tƣ liệu [11] Nguyễn Văn Anh 57 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp * C (ppm) Trường đại học sư phạm Hà Nội a,b C (ppm) a,c H (ppm, J, Hz) CDCl3 CDCl3 39,22/39,26 39,42/39,28 1,05*/ 1,69* 19,27 19,31 1,55* 41,97/41,95 41,98 33,50 32,76 - 55,30/55,35 55,31 1,14 * 24,04/24,05 24,08 37,74 37,77 1,21 dd (13,0, 4) 1,42 br d (13,0) 1,77 * 1,34 dd (13,0, 4) 2,02 ddd (13,0, 13,0, 5,0) 2,39 m 147,82/148,06 147,85/148,09 - 56,12 56,14 1,87 m 10 39,40 39,42 - 11 25,41 25,44 2,20*/2,31* 12 143,03/143,12 143,12/143,21 6,75 m 13 123,80/123,86 123,82/123,88 - 14 32,73/32,76 32,76/32,79 2,71 dd (17,0, 2,0)/3,01* 15 102,1 102,17 5,47 m 16 169,60 169,70 - 17 107,26/107,58 107,32/107,64 4,39 d (20,0)/ 4,82 d (7,5) 18 33,50 33,56 0,88 s 19 21,67 21,71 0,82 s 20 14,29 14,35 0,72 s -OCH3 56,54 56,62 3,52 s/ 3,51 s Nguyễn Văn Anh 58 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội *C coronarin D metyl eter (chất 3) đo CDCl3 , * tín hiệu bị chập a đo CDCl3, b125 MHz, c500 MHz , Hình 11: Phổ proton 1H hợp chất HC6C2A Hợp chất HC6C2A thu đƣợc dƣới dạng chất dầu không màu, Phổ 1H-NMR (500 MHz, CDCl3) xuất tín hiệu singlet nhóm metyl lần lƣợt các vị trí cộng hƣởng 0,72 (3H, s), 0,82 (3H, s) 0,88 (3H, s) nhóm methoxy tín hiệu cộng hƣởng 3,52 (3H, s) Trên phổ proton cho thấy tín hiệu singlet nhóm oximetin vị trí 5,47 (1H, m) Ngoài xuất tín hiệu nối đôi vòng vị trí cộng hƣởng 4,82 (1H, d, J = 7,5 Hz), 4,39 (1H, d, J = 20 Hz) tín hiệu nối đôi lần vị trí cộng hƣởng 6,75 (1H, m) Sự chuyển dịch phía vùng trƣờng thấp tín hiệu gợi ý liên hợp nối đôi với nhóm cacbonyl Nguyễn Văn Anh 59 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội Hình 12 : Phổ cacbon 13C hợp chất HC6C2A Hình 13: phổ cacbon 13C DEPT hợp chất HC6C2A Nguyễn Văn Anh 60 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội Kết phân tích phổ 13C-NMR DEPT (125 MHz, CDCl3) thấy có 20 tín hiệu cacbon đặc trƣng hợp chất diterpene, thành phần đặc trƣng Ngải tiên Trong có nhóm metyl vị trí cộng hƣởng C 14,35 (C-20), 21,71 (C-19) 33,56 (C-18) nhóm methoxy tín hiệu cộng hƣởng 56,62; nhóm oximetin (-CH-OCH3-) xác định vị trí cộng hƣởng C 102,17(C-15); nhóm cacbonyl nối đôi liên hợp với nhóm cacbonyl đƣợc xác định tín hiệu cộng hƣởng C 169,70 (C-16), 123,80 (C-13) 143,21 (C-12); nối đôi lần vòng với nhóm metilen xác định vị trí C 107,64 (C-17) cacbon bậc C 148,09 Các tín hiệu cacbon cộng hƣởng hợp chất hoàn toàn tƣơng tự nhƣ hợp chất coronarin D, ngoại trừ xuất tín hiệu cộng hƣởng nhóm methoxy chuyển phía trƣờng thấp cacbon C-15 (102,17 so với 96,37) Do khẳng định xảy ete hóa vị trí C-15 Từ kết phân tích trên, kết hợp so sánh với số liệu phổ hợp chất coronarin D methyl ete thấy tƣơng đƣơng vị trí tƣơng ứng [11] Do kết luận hợp chất coronarin D methyl ete O 12 20 11 14 Nguyễn Văn Anh 18 19 O OCH3 CH2 16 61 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội KẾT LUẬN Đã thu thập mẫu lƣợng lớn rễ, củ Ngải tiên đƣợc thu hái Sa Pa, đƣợc thái lát mỏng, phơi khô, xay nhỏ Bằng phƣơng pháp sắc ký kết hợp, hợp chất Tecpenoid đƣợc phân lập từ dịch chiết metanol rễ củ Ngải Tiên (H, coronarium Koenig), Các hợp chất là: Coronarin D (1) Coronarin D methyl ete(2) Cấu trúc hóa học (1) (2) O O 12 20 11 14 18 19 O 12 OH 20 11 coron 18 19 O OCH3 CH2 16 14 CH2 16 coronarin D methyl ete(2) arin D methyl ete(2) Cấu trúc hợp chất đƣợc xác định nhờ vào phƣơng pháp phổ đại nhƣ phổ cộng hƣởng từ hạt nhân chiều ( 1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT 135 DEPT 90), hai chiều (HSQC, HMBC ) Nguyễn Văn Anh 62 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chƣơng, Nguyễn Thƣợng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn cộng sự, (2004), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, tập I, Nxb KH&KT Hà Nội, 141-143 Bộ Y tế, 2002, Dược điển Việt Nam, Nxb, Y học, Hà Nội, T2, 141, Võ Văn Chi (1997), Từ điển thuốc Việt Nam, Nxb Y học, TP HCM, 821 Phạm Hoàng Hộ (1993), Cây cỏ Việt Nam, 3, tr, 558 – 562 Nguyễn Thị Thuỷ, Nguyễn Thị Phƣơng Thảo, Trƣơng Anh Thƣ, Bùi Văn Thanh, Thành phần hoá học tinh dầu Ngải tiên (Hedychium coronarium Koenig) Viện Sinh thái & Tài nguyên Sinh vật, Viện KH& CNVN TIẾNG ANH Phan Van Kiem , Nguyen Thi Kim Thuy , Hoang Le Tuan Anh , Nguyen Xuan Nhiem , Chau Van Minh , Pham Hai Yen , Ninh Khac Ban , Dan Thuy Hang, Bui Huu Tai, Nguyen Van Tuyen , Vivek Bhakta Mathema , Young-Sang Koh , Young Ho Kim, Chemical constituents of the rhizomes of Hedychium coronarium and their inhibitory effect on the proinflammatory cytokines production LPS- stimulated in bone marrow- derived dendritic cells, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 21 (2011) 7460–7465 Nguyễn Văn Anh 63 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội Sirirugsa, P, & Larsen K, (1995), The genus Hedychium (Zingiberaceae) in Thailand, Nordic Journal of Botany, vol 15, Issue 3, page 301–304 Aziz M, A,, Habib M, R,, Karim M, R,, (2009) ―Antibacterial and Cytotoxic Activities of Hedychium coronarium J, Koenig ―, Research Journal of Agriculture and Biological Sciences, 5(6), pp 969-972 Nakamura S, Okazaki Y, Ninomiya K, Morikawa T, Matsuda H, Yoshikawa M, (2008) ―Medicinal flowers, XXIV, Chemical structures and hepatoprotective effects of constituents from flowers of Hedychium coronarium‖, Chem, Pharm, Bull, Vol, 56(12), pp 1704—1709 10 Hideji Itokawa, Hiroshi Morita, Koichi Takeya, and Mario Motidome (1988), Diterpenes from Rhizomes of Hedychium Coronarium, Chem, Pharm, Bull, 36(7), 2682-2684, 11 Nitirat Chimnoi, Somchai Pisutjaroenpong, Lukala Nghiwsara, Decha Dechtrirut, Daranee Choichaichamnankit, Nisachon Khunnawutmanotham, Chulabhorn Mahidol, and Supana, Techasakul, (2008), ―Labdane ditecpens the rhizomes of Hedychium coronarium― Natural Product Research, Vol 22 (14), 1249-1256 12 Sabulal, B, George, V,, Dan, M,, Pradeep, N,S, (2007), ―Chemical composition and antimicrobial activities of the essential oils from the rhizomes of four Hedychium species from South India‖, Journal of essential oil research, vol, 19, page 1-5 13 Sirirugsa, P, & Larsen K, (1995), The genus Hedychium (Zingiberaceae) in Thailand, Nordic Journal of Botany, vol 15, Issue 3, page 301–304, 14 Joshi S, Chanotiya CS, Agarwal G, Prakash O, Pant AK, Mathela CS (2008) ―Terpenoid Compositions, and Antioxidant and Antimicrobial Properties of the Rhizome Essential Oils of Different Hedychium Species‖, Chemistry & Biodiversity, Vol, 5, pp 299 Nguyễn Văn Anh 64 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội 15 Joy B, Rajan A, Abraham E,, (2007) ―Antimicrobial activity and chemical composition of essential oil from Hedychium coronarium‖, Phytother Res, vol, 21(5):pp 439-43 16 Taveira F,N,, Oliveira1 A,B,, Souza Filho J,D,, Braga F,C, (2005) ―Epimers of labdane diterpenes from the rhizomes of Hedychium coronarium J, Koenig‖, Revista Brasileira de Farmacognosia, Brazilian Journal of Pharmacognosy Vol, 15(1), pp 55-59 Nguyễn Văn Anh 65 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Khái quát chi Hedychium 1.1.1 Đặc điểm thực vật học 1.1.2 Thành phần hóa học chi Hedychium 13 1.2 Tổng quan Ngải tiên 14 1.2.1 Xuất xứ: 15 1.2.2 Một số đặc điểm thực vật 15 1.2.3 Thành phần hóa học ngải tiên (Hedychium coronarium Koenig) 17 2.3.1 Tecpenoid tinh dầu ngải tiên: 17 1.2.3.2 Sesquiterpenoid diterpenoid: 18 1.2.3.3 Các hợp chất C6 – C3: 25 1.2.3.4 Các hợp chất C6 – C3 – C6: 26 1.2.3.5 Các hợp chất Steroid 26 1.2.4 Tình hình nghiên cứu Hedychium coronarium Việt Nam 26 1.2.5 Ứng dụng ngải tiên Hedychium coronarium Koenig 28 1.3 Giới thiệu lớp chất tecpenoit 29 1.3.1 Giới thiệu chung 29 1.4 Tổng quan phƣơng pháp chiết mẫu thực vật 33 1.4.1 Chọn dung môi chiết 33 1.4.2 Quá trình chiết 35 1.5 Tổng quan phƣơng pháp sắc kí 36 Nguyễn Văn Anh 66 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội 1.5.1 Đặc điểm chung phƣơng pháp sắc kí 37 1.5.2 Cơ sở phƣơng pháp sắc kí 37 1.5.3 Phân loại phƣơng pháp sắc kí 38 1.5.3.1 Sắc kí cột 38 1.5.3.2 Sắc kí lớp mỏng 40 1.6 Ứng dụng số phƣơng pháp hóa lí để xác định cấu trúc hợp chất hữu 40 1.6.1 Phổ hồng ngoại ( Infraed Spectroscopy - IR ) 40 1.6.2 Phổ khối lƣợng (Mass Spectroscopy - MS) 41 1.6.3 Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân (Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy - NMR) 42 1.6.4 Phổ HMQC (Heteronuclear Multiple Quantum Coherence) 43 1.6.5 Phổ 1H-1H COSY (Homocosy), (1H-1H Chemical Shift Correlation Spectroscopy) 43 1.6.6 Phổ HMBC (Heteronuclear Multiple Bond Connectivity) 43 1.6.7 Phổ NOESY (Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy) 43 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 45 2.1 Mẫu thực vật 45 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 45 2.2.1 Các phƣơng pháp phân tích, phân tách phân lập hợp chất 45 2.2.2 Các phƣơng pháp xác định cấu trúc 46 CHƢƠNG : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 47 3.1 Thu mẫu thực vật xử lí mẫu 47 Nguyễn Văn Anh 67 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội 3.2 Phân lập hợp chất 47 3.3 Hằng số vật lí kiện phổ hợp chất 49 3.3.1 Hợp chất HC12 (coronarin D) 49 3.3.2 Hợp chất HC6C2A (coronarin D methyl ete) 50 (coronarin D) 50 (coronarin D methyl ete) 57 KẾT LUẬN 62 TÀI LIỆU THAM KHẢO 63 Nguyễn Văn Anh 68 K34B - Hóa [...]... đỏ [4] Hình 2: Bụi cây ngải tiên Nguyễn Văn Anh Hình 3: Hạt của cây ngải tiên 16 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội 2 Hình 4: Rễ cây ngải tiên 1.2.3 Thành phần hóa học của cây ngải tiên (Hedychium coronarium Koenig) 1 2.3.1 Tecpenoid và tinh dầu ngải tiên: Các mono và sesquitecpen chủ yếu nằm trong phần tinh dầu cùng các dẫn xuất của hemi và monotecpen Còn các dẫn xuất của... Thủy và cộng sự nghiên cứu thân rễ cây Ngải tiên Cây Ngải tiên (Hedychium coronarium Koenig) mọc tự nhiên tại huyện Sa Pa, tỉnh Lào Cai, Nguyễn Văn Anh 26 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội 2 đƣợc đem về trồng tại trại thực nghiệm của viện Sinh thái và Tài nguyên Sinh Vật (Cổ Nhuế, Từ Liêm, Hà Nội) từ năm 2000 và thu hoạch cuối năm 2002 để nghiên cứu Thành phần hoá học của... hemi và monotecpen Còn các dẫn xuất của oxi của sesquitecpen, các đitecpen và tritecpen thƣờng nằm trong phần cặn chiết Tinh dầu của cây ngải tiên chủ yếu nằm trong hoa và thân rễ Tinh dầu hoa có mùi thơm đặc biệt, êm dịu, quý phái nên có giá trị cao và đƣợc quan tâm trƣớc tiên Bảng 2: Thành phần hóa học của tinh dầu thân rễ khô của cây ngải tiên Hedychium coronarium Koenig[15] HỢP CHẤT -Phellandrene... (2,4%), germacrene D (2,1%), và sabinene (2.0%) 1.2 Tổng quan về cây Ngải tiên Cây Ngải tiên còn gọi là cây Bạch Yến, Ngãi diệp tiên, gừng lily trắng, tên khoa học là Hedychium coronarium Koenig, thuộc họ Gừng (Zingiberaceae) Nguyễn Văn Anh 14 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội 2 Ở một số nƣớc khác nhau, Ngải tiên đƣợc gọi với những tên khác nhau Tên tiếng anh là common ginger... và thành phần chủ yếu là hemiterpen (C5), monoterpen (C10), sesquiterpen (C15), điterpen (C20)… và các dẫn xuất oxi của chúng Thành phần của tinh dầu không những phụ thuộc vào loài, vào bộ phận mà còn phụ thuộc vào phƣơng pháp điều chế nữa Quả vậy, khi nghiên cứu tinh dầu của một số loài thuộc chi Ngải H ellipticum, H aurantiacum, H.coronarium, và H spicatum, Sushil Joshi và các cộng sự đã chỉ ra các. .. hoá học của tinh dầu đƣợc biết gồm các thành phần chính là 1,8 - Cineol - 43,32%, beta - Pinen - 25,45%, alpha - Pinen 10,32%, 3- Cyclohexen- 1-methanol - 5,29% [5] Mới đây, vào tháng 11 năm 2011, trên tạp chí Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, tác giả Phan Văn Kiệm và các cộng sự đã công bố nghiên cứu mới nhất về các hợp chất đƣợc phân lập từ thân rễ ngải tiên ở Sapa – Việt Nam Trong báo cáo... có tính gây trung tiện, trừ giun Tinh dầu của hoa là một loại hƣơng liệu cao cấp [3] Giá trị làm thuốc của Ngải tiên đã có một số công trình ghi nhận [1,3] Thân rễ đƣợc sử dụng nhƣ một thuốc , thuốc bổ và đặc trị các bệnh về thấp khớp Các phần chiết từ thân cây đƣợc sử dụng trị các bệnh sƣng, đau Các thân rễ của H.coronarium ("Tuqianghuo" trong tiếng Trung Quốc) đã đƣợc sử dụng điều trị nhức đầu, tiểu... qua màng tế bào nên quá trình chiết với các dung môi này sẽ thu đƣợc lƣợng lớn các thành phần trong tế bào Trái lại clorofoc khả năng phân cực thấp hơn có thể rửa giải các chất nằm ngoài tế bào Các ancol phần lớn là các chất chuyển hóa phân cực cùng với các hợp chất phân cực trung bình và thấp vì vậy khi chiết bằng ancol thì các chất này cũng bị hòa tan đồng thời Thông thƣờng dung môi cồn trong nƣớc dƣờng... -sitosterol, daucosterol, và stigmasterol Các hợp chất này từ cây có tác dụng ức chế sản sinh các cytokine tiền viêm có nguồn gốc từ tế bào đuôi gai của tủy xƣơng đƣợc kích thích bởi LPS (lypopolysacchride) Trong số các hợp chất này, các hợp chất coronarins D,G,H đã chất ức chế đáng kể tới LPS kích thích TNF- , IL-6 và IL-12 p40 sản xuất với IC50 khác nhau ,từ 0,19 ± 0,11 10,38 ± 2,34 M [8] Ba hợp chất... nhỏ, không Hedychium yunnanensis Ngải tiên Vân Gagn Nam lông; hoa trắng hay vàng, thơm; ống đài không lông; ống vành 2 cm, cánh hoa và tiểu nhụy lép hẹp, dài 2 cm; chỉ tiểu nhụy dài 5,5 cm, bao phấn cam; môi hình tam giác hẹp, chẻ hai Cây phân bố ở Đà Lạt 1.1.2 Thành phần hóa học của chi Hedychium Đối với các loài thuộc chi Ngải (Hedychium) đều có đặc điểm chung là các bộ phận thân rễ và hoa có mùi ... trình nghiên cứu thức hóa thực vật Chính Ngải tiên đƣợc lựa chọn làm đối tƣợng nghiên cứu Khóa luận Nhiệm vụ nghiên cứu Khóa luận là: Xây dựng quy trình chiết hợp chất từ thân rễ củ Ngải tiên. .. gmasterol [7] 1.2.4 Tình hình nghiên cứu Hedychium coronarium Việt Nam Về thành phần tinh dầu có công trình tác giả Nguyễn Thị Thủy cộng nghiên cứu thân rễ Ngải tiên Cây Ngải tiên (Hedychium coronarium... [4] Hình 2: Bụi ngải tiên Nguyễn Văn Anh Hình 3: Hạt ngải tiên 16 K34B - Hóa Khóa luận tốt nghiệp Trường đại học sư phạm Hà Nội Hình 4: Rễ ngải tiên 1.2.3 Thành phần hóa học ngải tiên (Hedychium