ảnh hưởng của loại mẫu cấy và nồng độ benzyl adenin (ba) lên sự tái sinh chồi từ tử diệp dưa hấu nhị bội (citrullus vulgaris schard.)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ  ĐÀO THỊ NGỌC NƯƠNG ẢNH HƯỞNG CỦA LOẠI MẪU CẤY VÀ NỒNG ĐỘ BENZYL ADENIN (BA) LÊN SỰ TÁI SINH CHỒI TỪ TỬ DIỆP DƯA HẤU NHỊ BỘI (Citrullus vulgaris Schard.) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP KỸ SƯ KHOA HỌC CÂY TRỒNG CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ GIỐNG CÂY TRỒNG Cần Thơ, 2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ  ẢNH HƯỞNG CỦA LOẠI MẪU CẤY VÀ NỒNG ĐỘ BENZYL ADENIN (BA) LÊN SỰ TÁI SINH CHỒI TỪ TỬ DIỆP DƯA HẤU NHỊ BỘI (Citrullus vulgaris Schard.) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP KỸ SƯ KHOA HỌC CÂY TRỒNG CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ GIỐNG CÂY TRỒNG Cán hướng dẫn: PGs.Ts Lâm Ngọc Phương Sinh viên thực hiện: Đào Thị Ngọc Nương MSSV: 3087642 Cần Thơ, 2012 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG Hội đồng chấm luận văn tốt nghiệp chấp thuận luận văn tốt nghiệp Kỹ Sư Khoa Học Cây Trồng, chuyên ngành Công Nghệ Giống Cây Trồng với đề tài: ẢNH HƯỞNG CỦA LOẠI MẪU CẤY VÀ NỒNG ĐỘ BENZYL ADENIN (BA) LÊN SỰ TÁI SINH CHỒI TỪ TỬ DIỆP DƯA HẤU NHỊ BỘI (Citrullus vulgaris Schard.) Do sinh viên Đào Thị Ngọc Nương thực Kính trình lên Hội Đồng chấm luận văn tốt nghiệp Cần Thơ, ngày … tháng … năm 2012 Cán hướng dẫn PGs Ts Lâm Ngọc Phương ii TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG Hội đồng chấm luận văn tốt nghiệp chấp thuận luận văn tốt nghiệp Kỹ Sư Khoa Học Cây Trồng, chuyên ngành Công Nghệ Giống Cây Trồng với đề tài: ẢNH HƯỞNG CỦA LOẠI MẪU CẤY VÀ NỒNG ĐỘ BENZYL ADENIN (BA) LÊN SỰ TÁI SINH CHỒI TỪ TỬ DIỆP DƯA HẤU NHỊ BỘI (Citrullus vulgaris Schard.) Do sinh viên Đào Thị Ngọc Nương thực bảo vệ trước hội đồng Ý kiến Hội Đồng chấm luận văn tốt nghiệp: Luận văn tốt nghiệp Hội Đồng đánh giá mức: Cần Thơ, ngày … tháng … năm 2012 Hội đồng DUYỆT KHOA Trưởng Khoa Nông Nghiệp iii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu nhóm nghiên cứu, cô hướng dẫn thân Các số liệu, kết trình bày luận văn tốt nghiệp trung thực chưa công bố công trình luận văn trước Tác giả luận văn Đào Thị Ngọc Nương iv QUÁ TRÌNH HỌC TẬP -I LÝ LỊCH SƠ LƯỢC Họ tên: Đào Thị Ngọc Nương Giới tính: Nữ Ngày, tháng, năm sinh: 25/05/1990 Dân tộc: Kinh Nơi sinh: Long Khánh, Hồng Ngự, Đồng Tháp Họ tên cha: Đào Văn Cường Năm sinh: 1968 Họ tên mẹ: Hồ Thị Thúy Diễm Năm sinh: 1972 Địa thường trú: Ấp Long Hòa I, Phường Long Sơn, Thị xã Tân Châu, Tỉnh An Giang Email: dtnnuong42@student.ctu.edu.vn II QUÁ TRÌNH HỌC TẬP Tiểu học: Thời gian đào tạo: từ tháng 9/1996 đến tháng 5/2001 Trường: Tiểu học “B” Long Sơn Địa chỉ: Xã Long Sơn, Huyện Phú Tân, Tỉnh An Giang Trung học sở: Thời gian đào tạo: từ tháng 9/2001 đến tháng 5/2005 Trường: Trung học sở Long Sơn Địa chỉ: Xã Long Sơn, Huyện Phú Tân, Tỉnh An Giang Trung học phổ thông: Thời gian đào tạo: từ tháng 9/2005 đến tháng 5/2008 Trường: Trung học phổ thông Tân Châu Địa chỉ: Thị xã Tân Châu, Tỉnh An Giang Ngày tháng năm 2012 Người khai Đào Thị Ngọc Nương v CẢM TẠ Trong thời gian học tập rèn luyện Trường Đại Học Cần Thơ, em qu í thầy cô truyền đạt nhiều kiến thức, kinh nghiệm quý báu Đây vốn sống vô quan trọng giúp đỡ em trình làm việc công tác sau Kính dâng  Cha, mẹ đấng sinh thành cho hình hài hết lòng yêu thương, dạy dỗ nuôi nấng khôn lớn, nên người Xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc  PGs.Ts Lâm Ngọc Phương người tận tình hướng dẫn việc nghiên cứu hoàn thành Luận văn tốt nghiệp  Ths Lê Minh Lý hết lòng bảo tạo điều kiện tốt để hoàn thành luận văn  Thầy Phạm Văn Phượng thầy Nguyễn Phước Đằng, cố vấn học tập hết lòng giúp đỡ suốt trình học tập trường Xin chân thành cảm ơn Cô Phan Thị Hồng Nhung, cô Lê Hồng Giang quí thầy cô công tác môn Sinh lý-Sinh hoá, anh chị học viên cao học, bạn sinh viên thực đề tài nhiệt tình dẫn trình thực luận văn Thân gửi Các bạn lớp Công Nghệ Giống Cây Trồng khóa 34 lời chúc sức khỏe, thành công, thành đạt tương lai vi ĐÀO THỊ NGỌC NƯƠNG, 2012 “Ảnh hưởng loại mẫu cấy nồng độ Benzyl Adenin (BA) lên tái sinh chồi từ tử diệp dưa hấu nhị bội (Citrullus vulgaris Schard.)” Luận văn tốt nghiệp Kỹ sư Khoa Học Cây Trồng-chuyên ngành Công Nghệ Giống Cây Trồng, Khoa Nông Nghiệp Sinh Học Ứng Dụng, Trường Đại học Cần Thơ Cán hướng dẫn khoa học: PGs Ts Lâm Ngọc Phương TÓM LƯỢC Tái sinh chồi dưa hấu (Citrullus vulgaris Schard.) từ tử diệp phương pháp nhân giống vô tính cho tỷ lệ tạo chồi cao loại mẫu cấy nồng độ Benzyl adenine (BA) hai yếu tố quan trọng định hiệu tạo chồi trình nuôi cấy đề tài “Ảnh hưởng loại mẫu cấy nồng độ Benzyl adenin (BA) lên tái sinh chồi từ tử diệp dưa hấu nhị bội (Citrullus vulgaris Schard.)” thực nhằm tìm loại mẫu cấy nồng độ BA thích hợp cho tái sinh chồi dưa hấu từ tử diệp điều kiện in vitro, làm tiền đề cho việc nghiên cứu, góp phần vào công tác chọn tạo sản xuất giống Đề tài gồm thí nghiệm bố trí theo thể thức hoàn ngẫu nhiên nhân tố, lần lặp lại, lần lặp lại đĩa petri, đĩa petri cấy mẫu (4 mẫu vùng gần, mẫu vùng xa) Kết thí nghiệm cho thấy: (1) Ở giống Thành Long-Chánh Nông sử dụng tử diệp VG-10 NSKTP nuôi cấy môi trường bổ sung BA mg/l cho tỷ lệ mẫu tạo chồi đạt cao đạt 100%; (2) Ở giống Thành Long-Trang Nông, kết thí nghiệm cho thấy sử dụng tử diệp VG-14 NSKTP nuôi cấy môi trường bổ sung BA 0,5 mg/l cho tỷ lệ mẫu tạo chồi tốt đạt 97,5% Từ khóa: Tử diệp, BA, mô sẹo, tái sinh chồi nhân chồi vii MỤC LỤC Trang Tóm lược Vii Mục lục viii Danh sách bảng X Danh sách hình Xii Danh sách chữ viết tắt xiii MỞ ĐẦU Chương LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 1.1 Sơ lược dưa hấu 1.1.1 Nguồn gốc 1.1.2 Đặc tính thực vật 1.1.3 Đặc tính giống Thành Long 1.2 Kỹ thuật nuôi cấy mô 1.2.1 Lịch sử nuôi cấy mô 1.2.2 Các giai đoạn nhân giống in vitro 1.2.3 Môi trường nuôi cấy 1.2.4 Ứng dụng kỹ thuật nuôi cấy mô 1.3 Cơ sở khoa học tái sinh chồi từ tử diệp 1.4 Phương pháp tái sinh 10 1.5 Một số nghiên cứu tái sinh chồi từ tử diệp 11 1.5.1 Nguồn gốc phát sinh chồi 11 1.5.2 Một số nghiên cứu tái sinh chồi trực tiếp từ tử diệp 11 1.5.3 Tái sinh chồi gián tiếp thông qua mô sẹo 12 Chương PHƯƠNG TIỆN - PHƯƠNG PHÁP 14 2.1 Thời gian thực 14 2.2 Địa điểm 14 2.3 Phương tiện 14 2.3.1 Vật liệu trang thiết bị 14 2.3.2 Điều kiện thí nghiệm 15 viii 2.4 Phương pháp Chương 16 2.4.1 Chuẩn bị môi trường nuôi cấy 16 2.4.2 Vô trùng mẫu cấy 16 2.4.3 Bố trí thí nghiệm 17 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Ảnh hưởng loại mẫu cấy nồng độ BA tái sinh chồi dưa hấu từ tử diệp giống Thành LongChánh Nông 22 22 3.1.1 Tỷ lệ mẫu tạo mô sẹo 22 3.1.2 Tỷ lệ mẫu tạo chồi 24 3.1.3 Số chồi/mẫu 28 3.1.4 Số lá/mẫu 33 3.1.5 Chiều cao chồi 37 3.2 Ảnh hưởng loại mẫu cấy nồng độ BA tái sinh chồi dưa hấu từ tử diệp giống Thành LongTrang Nông 41 3.2.1 Tỷ lệ mẫu tạo mô sẹo 41 3.2.2 Tỷ lệ mẫu tạo chồi 44 3.2.3 Số chồi/mẫu 47 3.2.4 Số lá/mẫu 52 3.2.5 Chiều cao chồi 56 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 61 4.1 Kết luận 61 4.2 ĐỀ nghỊ 61 TÀI LIỆU THAM KHẢO 62 PHỤ CHƯƠNG PHỤ CHƯƠNG ix TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT LÂM NGỌC PHƯƠNG 2010 Ứng dụng nuôi cấy mô tế bào lai tạo giống dưa hấu không hạt (Citrullus vulgaris Schard.) Đề tài nghiên cứu khoa học, Trường Đại học Cần Thơ LÊ VĂN HÒA NGUYỄN BẢO TOÀN 2005 Giáo trình Sinh Lý Thực Vật Đại Học Cần Thơ LÊ VĂN HOÀNG 2008 Công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật Nhà xuất Đại học Đà Nẵng NGUYỄN BẢO TOÀN 2010 Giáo trình nuôi cấy mô tế bào thực vật Trường Đại Học Cần Thơ NGUYỄN ĐỨC LƯỢNG LÊ THỊ THỦY TIÊN 2002 Công nghệ tế bào Nhà xuất Đại học quốc gia, TP Hồ Chí Minh NGUYỄN XUÂN LINH 1998 Hoa Kỹ thuật trồng hoa Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội NGUYỄN TÚ TÀI 2010 Hiệu Benzyl adenin (BA) loại tử diệp tái sinh chồi dưa hấu (Citrullus vulgaris schard.) Luận văn cao học Trường Đại học Cần Thơ PHẠM HỒNG CÚC 2002 Kỹ Thuật Trồng Dưa Hấu, Nhà xuất Nông Nghiệp, Thành Phố Hồ Chí Minh PHẠM VĂN DUỆ 2005 Giáo trình kỹ thuật trồng hoa cảnh Nhà xuất Nông Nghiệp, Hà Nội TẠ THU CÚC, NGUYỄN THỊ TRƯỜNG VƯƠNG THỊ TUYẾT 2005 Giáo trình kỹ thuật trồng rau Nhà xuất Nông Nghiệp, Hà Nội TRẦN THỊ BA 2009 Giáo trình Kỹ Thuật Sản Xuất Rau Sạch Trường Đại Học Cần Thơ VŨ VĂN VỤ, NGUYỄN MỘNG HÙNG LÊ HỒNG ĐIỆP 2006 Công nghệ Sinh Học-Tập II- Công nghệ tế bào Nhà xuất Giáo Dục, Hà Nội 62 TIẾNG ANH AKASHI K., K MORIKAWA and A YOKOTA 2005 Agrobacterium-mediated transformation system for the drought and excess light stress-tolerant wild watermelon (Citrullus lanatus) Plant Biotechnology, 22, 13–18 BORDAS M., V MORENO and L ROIG 1991.Organogenic and embryogenic potential of several commercial lines of Cucumis melo Cucurbit Genetics Cooperative 14: 71-74 BOXUS P and BELAIZI M 1995 In vitro shoot multiplication of cork oak (Quercus suber L.) Influence of different carbohydrates Bull Rech Agron Gembloux 30: 39-46 COMPTON M E and D J GRAY 1993 Somatic embryogenesis and plant regeneration from immature cotyledons of watermelon Plant Cell Report, 12, 61-65 COMPTON M E., D J GRAY and G W ELMSTROM 1996 Identification of tetraploid regenerants from cotyledons of diploid watermelon cultured in vitro Euphitica, Netherlands, 87, 165-172 COMPTON M E 2000 Interaction between explainsize and cultivar affects shoot organogenic competence of watermelon cotyledons Hotscience, v.35, p.7497503 DEBERGH P C 1983 Effect of agar brand concentration on the ticcue culture medium Physiol Plant, 59, pp.270-276 DEBERGH P C., J C AIKEN, D COHEN, B GROUT, V S ARNOLD, R ZIMMERMAN and M ZIV 1992 Reconsideration of the tern vitrification as used in micropropagation, Plant Cell Tiss Org Cult 30, pp.441-446 GABA V., E SCHLARMAN, C ELMAN, O SAGEE, A A WATAD and D J GRAY 1999 In vitro Studies on the Anatomy and Morphology of Bud Regeneration in Melon Cotyledons In Vitro Cellular & Developmental Biology Plant, Vol 35, p.1-7 GEORGE E F 1996 Plant propagation by tissue culture, Part and 2Ed Edington, Wilts, England, Exegetics Ltd 63 GÜREL O., E GÜREL and Z KAYA 2001 Callus development and indirect shoot regeneration from seedling explants of Sugar beet (Beta vulgaris L.) Cultured In Vitro Turkey Journal Botany, 25, 25-33 HAN J S., D G OH, I.G MOK, H.G PARK and C K KIM 2004 Efficient plant regeneration from cotyledon explants of bottle gourd (Lagenaria siceraria Standl.) Plant Cell Rep, vol 23, p.291–296 HASHEMLOIAN B D., A ATAEI-AZIMI, A MAJD and H EBRAHIMZADEH 2008 Abnormal plantlets regeneration through direct somatic embryogenesis on immature seeds of Vinca herbacea Waldst and Kit African Journal of Biotechnology, 7, 1679-1683 KRUG M G Z., L C L STIPP, A P M RODRIGUEZ and B M J MENDES 2005 In vitro organogenesis in watermelon cotyledons Pesquisa Agropecuária Brasileira, 40, no.9 LEE Y K and W I CHUNG 2006 Plant regeneration via organogenesis in the korean and japanese winter squash (Cucurbita maxima) Journal of horticultural science & biotechnology, 588, 119-133 LEE Y K., W I CHUNG and H EZURA 2003 Efficient plant regeneration via organogenesis in winter squash (Cucurbita maxima Duch.) Plant Sci 164, 413-418 MENDI Y Y., M IPEK, N BUZKAN, Y A KACAR and S CURUK 2009 Regeneration and Histological Analysis of Regeneration in Bottle Gourd (Lagenaria siceraria (Molina) Stand.) Turkey Journal Agricuture For., 33, 165-172 MIYAZAKI J., Y SUGIMURA, E KOTANI and T FURUSAWA 2000 Shoot organogenesis from mulberry leaf tissue: origin and development of regenerated shoots The Journal of Sericultural Science of Japan, 69, 319-325 MORENO V., M GARCÍA-SOGO, I GRANELL, B GARCÍA-SOGO and L A ROIG 1985 Plant regeneration from calli of melon (Cucumis melo L cv Amarillo Oro) Plant Cell, Tissue and Organ Culture, : (2), 139-146 64 MURASHIGE T and F SKOOG 1962 A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures Physiol Plant, 15, 473-497 NAJLA M., J AHMED, E NEDHRA, G B RADHIA and K SPIROS 2007 Morpho-histological study on shoot bud regeneration in cotyledon cultures of pepper (Capsicum annuum) Biologia, 62, 704-710 ORIDATE T and K OOSAWA 1986 Somatic emryogenesis and plant regeneration from suspension callus culture in melon (Cucumis melo L.) Japan journal Breeding, 36, 424-428 ORTZ M C., B GARCIA-SOGO, M ROCHE, L A ROIG and V MORENO 1987 Morphogenetic response of calli derived from primary explants of diverse cultivars of melon HortScience, 22 : (4), 666 PAL S P , I ALAM, M ANISUZZAMAN, K K SARKER, S A SHARMIN and M F ALAM 2007 Indirect organogenesis in Summer Squash (Cucurbita pepo L.) Turkey Journal Agriculture For., 31, 63-70 PIERIK R L M 1991 Commercial aspects of micropropagation in Western Europe and Israel In micropropagation of horticultural crops, Edit P C Debergh and R H Zimmerman, Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, pp.157-165 SELVARAJ N., A VASUDEVAN, M MANICKAVASAGAM, S KASTHURIRENGAN and A GANAPATHI 2007 High frequency shoot regeneration from cotyledon explants of cucumber via organogenesis Scientia Horticulturae, 112, 2-8 SOUZA F V D., B G SOGO., A S SOUZA., A P S JUAN and V MORENO 2006 Morphogenetic response of cotyledon and leaf explants of melon (Cucumis melon L.) cv Amarillo oro SUN H W., A NAIR, T ADACHI and G CLAYTON 2000 CampbellPlant regeneration from cotyledon tissues of common buckwheat (Fagopyrum esculentum Moench) In Vitro Cellular & Developmental Biology - Plant, 36, 358361 65 TABEI Y., H YAMANAKA and T KANNO 1993 Adventitious shoot induction and plant regeneration from cotyledons of mature seed in watermelon (Citrullus lanatus S.) Plant Tissue Culture Letters, 10, 235-241 YAN B., M S SRINIVASA REDDY, G.B COLLINS and R.D DINKINS 2000 Agrobacterium tumerfaciens-mediated transformation of soybean using immature zygotic cotyledon explants Plant cell Reports, 19, 1090-1097 WEHNER T C 2007 Watermelon, Vegetables I Asteraceae, Brassicaceae, Chenopodicaceae, and Cucurbitaceae SpringerLink - Book Chapter, 1, 381418 WEHNER T C and R D LOCY 1981 In vitro adventitious shoot and root formation of cultivars and lines of Cucumis sativus L HortScience, 16, 759760 66 PHỤ CHƯƠNG Môi trường nuôi cấy Khoáng đa–vi lượng theo Murashige Skoog (1962),   Khoáng đa lượng (mg/l) NH 4NO3 1650,00 KNO3 1900,00 KH2PO4 170,00 MgSO4 7H2O 370,00 CaCl2 2H2O 440,00 Khoáng vi lượng (mg/l) MnSO4 H2O 23,30 ZnSO4 4H2O 8,60 H3BO3 6,20 KI 0,83 Na2MoO4 2H2O 0,25 CuSO4 H2O 0,025 CoCl2 H2O 0,025 Na2EDTA 37,30 FeSO4 7H2O 27,80 Vitamins (mg/l) Thiamin (B1) Nicotinic acid (B3) Pyridoxin HCl (B6) Myo-inositol 100 PHỤ CHƯƠNG Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng loại mẫu cấy nồng độ BA tái sinh chồi từ tử diệp dưa hấu giống Thành Long-Chánh Nông Bảng 3.1 Tỷ lệ (%) mẫu tạo mô sẹo từ tử diệp dưa hấu tuần sau cấy Nguồn biến động Độ tự Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) 3 24 31 Tổng bình phương 972,853 6529,959 120,751 5176,899 12800,462 Trung bình bình phương 324,284 6529,959 40,250 215,704 Giá trị F Giá trị P 1,5034 30,2728 0,1866 0,2390 0,0000 20,89 Bảng 3.2 Tỷ lệ (%) mẫu tạo mô sẹo từ tử diệp dưa hấu tuần sau cấy Nguồn biến động Độ tự Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) 3 24 31 Tổng bình phương 931,273 884,837 51,451 3545,280 5412,841 Trung bình bình phương 310,424 884,837 17,150 147,720 Giá trị F Giá trị P 2,1014 5,9900 0,1161 0,1266 0,0221 14,48 Bảng 3.3 Tỷ lệ (%) mẫu tạo chồi từ tử diệp dưa hấu tuần sau cấy Nguồn biến động Độ tự Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) 3 24 31 Tổng bình phương 4726,577 15993,662 4889,871 3004,440 28614,549 Trung bình bình phương 1575,526 15993,662 1629,957 125,185 23,14 Giá trị F Giá trị P 12,5856 127,7602 13,0204 0,0000 0,0000 0,0000 Bảng 3.4 Tỷ lệ (%) mẫu tạo chồi từ tử diệp dưa hấu tuần sau cấy Nguồn biến động Độ tự Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) 3 24 31 Tổng bình phương 5948,904 20692,392 4639,347 3687,076 34967,719 Trung bình bình phương 1982,968 20692,392 1546,449 153,628 Giá trị F Giá trị P 12,9076 134,6914 10,0662 0,0000 0,0000 0,0002 21,05 Bảng 3.5 Số chồi (số chồi/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Độ tự Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) 3 24 31 Tổng bình phương 1,366 0,254 0,080 0,992 2,692 Trung bình bình phương 0,455 0,254 0,027 0,041 Giá trị F Giá trị P 11,0211 6,1424 0,6454 0,0001 0,0206 87,08 Bảng 3.6 Số chồi (số chồi/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Độ tự Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) 3 24 31 Tổng bình phương 4,410 2,605 0,399 3,016 10,431 Trung bình bình phương 1,470 2,605 0,133 0,126 Giá trị F Giá trị P 11,6974 20,7261 1,0579 0,0001 0,0001 0,3854 48,01 Bảng 3.7 Số chồi (số chồi/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Độ tự Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) 3 24 31 Tổng bình phương 3,584 4,606 2,304 4,979 15,472 Trung bình bình phương 1,195 4,606 0,768 0,207 41,62 Giá trị F Giá trị P 5,7584 22,2004 3,7019 0,0041 0,0001 0,0255 Bảng 3.8 Số chồi (số chồi/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Độ tự Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) 3 24 31 Tổng bình phương 4,013 6,222 5,669 7,360 23,263 Trung bình bình phương 1,338 6,222 1,890 0,307 Giá trị F Giá trị P 4,3622 20,2884 6,1618 0,0138 0,0001 0,0029 40,52 Bảng 3.9 Số (số lá/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Độ tự Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) 3 24 31 Tổng bình phương 7,895 0,918 2,222 7,717 18,751 Trung bình bình phương 2,632 0,918 0,741 0,322 Giá trị F Giá trị P 8,1845 2,8552 2,3037 0,0006 0,1040 0,1025 106,48 Bảng 3.10 Số (số lá/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Độ tự Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) 3 24 31 Tổng bình phương 14,907 1,167 14,650 17,423 48,146 Trung bình bình phương 4,969 1,167 4,883 0,726 Giá trị F Giá trị P 6,8448 1,6070 6,7267 0,0017 0,2171 0,0019 55,61 Bảng 3.11 Số (số lá/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Độ tự Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) 3 24 31 Tổng bình phương 26,051 4,946 33,377 17,980 82,354 Trung bình bình phương 8,684 4,946 11,126 0,749 37,43 Giá trị F Giá trị P 11,5908 6,6012 14,8506 0,0001 0,0168 0,0000 Bảng 3.12 Số (số lá/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Độ tự Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) 3 24 31 Tổng bình phương 34,391 15,582 75,920 31,795 157,687 Trung bình bình phương 11,464 15,582 25,307 1,325 Giá trị F Giá trị P 8,6532 11,7621 19,1025 0,0005 0,0022 0,0000 33,26 Bảng 3.13 Chiều cao chồi (cm) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 0,139 0,004 0,007 0,059 0,209 Trung bình bình phương 0,046 0,004 0,002 0,002 Giá trị F Giá trị P 18,7966 1,4695 0,9915 0,0000 0,2372 69,59 Bảng 3.14 Chiều cao chồi (cm) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Độ tự Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) 3 24 31 Tổng bình phương 0,434 0,092 0,009 0,162 0,698 Trung bình bình phương 0,145 0,092 0,003 0,007 Giá trị F Giá trị P 21,4807 13,7175 0,4637 0,0000 0,0011 43,64 Bảng 3.15 Chiều cao chồi (cm) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 0,682 0,308 0,091 0,432 1,513 Trung bình bình phương 0,227 0,308 0,030 0,018 40,80 Giá trị F Giá trị P 12,6426 17,1293 1,6921 0,0000 0,0004 0,1953 Bảng 3.16 Chiều cao chồi (cm) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Độ tự Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) 3 24 31 Tổng bình phương 1,151 0,398 0,334 0,614 2,498 Trung bình bình phương 0,384 0,398 0,111 0,026 Giá trị F Giá trị P 14,9957 15,5609 4,3487 0,0000 0,0006 0,0139 34,76 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng loại mẫu cấy nồng độ BA tái sinh chồi từ tử diệp dưa hấu giống Thành Long-Trang Nông Bảng 3.17 Tỷ lệ (%) mẫu tạo mô sẹo từ tử diệp dưa hấu tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 7532,897 481,741 5495,607 2919,908 16430,153 Trung bình bình phương 2510,966 481,741 1831,869 121,663 Giá trị F Giá trị P 20,6387 3,9596 15,0569 0,0000 0,0581 0,0000 15,69 Bảng 3.18 Tỷ lệ (%) mẫu tạo mô sẹo từ tử diệp dưa hấu tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 2024,339 10,013 1215,451 826,248 4076,052 Trung bình bình phương 674,780 10,013 405,150 34,427 Giá trị F Giá trị P 19,6003 0,2908 11,7684 0,0000 0,0001 6,79 Bảng 3.19 Tỷ lệ (%) mẫu tạo chồi từ tử diệp dưa hấu tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 1424,575 151,336 12530,978 3369,476 17476,365 Trung bình bình phương 474,858 151,336 4176,993 140,395 20,75 Giá trị F Giá trị P 3,3823 1,0779 29,7518 0,0346 0,3095 0,0000 Bảng 3.20 Tỷ lệ (%) mẫu tạo chồi từ tử diệp dưa hấu tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 3540,407 1,386 5674,327 2194,778 11410,898 Trung bình bình phương 1180,136 1,386 1891,442 91,449 Giá trị F Giá trị P 12,9048 0,0152 20,6830 0,0000 0,0000 12,76 Bảng 3.21 Số chồi (số chồi/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 0,145 0,008 0,032 0,509 0,695 Trung bình bình phương 0,048 0,008 0,011 0,021 Giá trị F Giá trị P 2,2829 0,3982 0,5058 0,1047 124,64 Bảng 3.22 Số chồi (số chồi/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 0,889 0,608 0,915 1,615 4,026 Trung bình bình phương 0,296 0,608 0,305 0,067 Giá trị F Giá trị P 4,4055 9,0334 4,5320 0,0132 0,0061 0,0118 48,34 Bảng 3.23 Số chồi (số chồi/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Tổng bình Trung bình Nguồn biến động Độ tự Giá trị F Giá trị P phương bình phương Tuổi tử diệp (A) 2,423 0,808 4,9061 0,0085 Nồng độ BA (B) 0,179 0,179 1,0841 0,3082 Tương tác A*B 2,332 0,777 4,7202 0,0100 Sai số 24 3,952 0,165 Tổng cộng 31 8,885 CV (%) 40,69 Bảng 3.24 Số chồi (số chồi/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 2,949 0,884 1,891 5,711 11,435 Trung bình bình phương 0,983 0,884 0,630 0,238 Giá trị F Giá trị P 4,1318 3,7170 2,6488 0,0170 0,0658 0,0719 32,74 Bảng 3.25 Số (số lá/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 0,424 0,125 0,293 0,860 1,701 Trung bình bình phương 0,141 0,125 0,098 0,036 Giá trị F Giá trị P 3,9431 3,4890 2,7244 0,0203 0,0740 0,0665 103,36 Bảng 3.26 Số (số lá/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 2,218 1,155 1,048 7,048 11,470 Trung bình bình phương 0,739 1,155 0,349 0,294 Giá trị F Giá trị P 2,5176 3,9335 1,1893 0,0822 0,0589 0,3348 63,80 Bảng 3.27 Số (số lá/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 6,409 2,520 1,566 16,589 27,084 Trung bình bình phương 2,136 2,520 0,522 0,691 51,02 Giá trị F Giá trị P 3,0908 3,6459 0,7553 0,0461 0,0682 Bảng 3.28 Số (số lá/mẫu) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 9,295 9,159 2,451 34,498 55,403 Trung bình bình phương 3,098 9,159 0,817 1,437 Giá trị F Giá trị P 2,1556 6,3721 0,5685 0,1196 0,0186 43,74 Bảng 3.29 Chiều cao chồi (cm) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 0,019 0,000 0,002 0,036 0,056 Trung bình bình phương 0,006 0,000 0,001 0,001 Giá trị F Giá trị P 4,1811 0,0000 0,4067 0,0163 92,36 Bảng 3.30 Chiều cao chồi (cm) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 0,079 0,007 0,023 0,165 0,274 Trung bình bình phương 0,026 0,007 0,008 0,007 Giá trị F Giá trị P 3,8262 1,0498 1,1215 0,0226 0,3158 0,3600 50,96 Bảng 3.31 Chiều cao chồi (cm) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 0,186 0,008 0,071 0,387 0,652 Trung bình bình phương 0,062 0,008 0,024 0,016 36,53 Giá trị F Giá trị P 3,8547 0,4849 1,4639 0,0220 0,2494 Bảng 3.32 Chiều cao chồi (cm) dưa hấu tái sinh từ tử diệp tuần sau cấy Nguồn biến động Tuổi tử diệp (A) Nồng độ BA (B) Tương tác A*B Sai số Tổng cộng CV (%) Độ tự 3 24 31 Tổng bình phương 0,614 0,063 0,097 0,577 1,352 Trung bình bình phương 0,205 0,063 0,032 0,024 28,59 Giá trị F Giá trị P 8,5137 2,6194 1,3442 0,0005 0,1186 0,2835 [...]... lệ (%) mẫu tạo mô sẹo từ tử diệp dưa hấu ở 2 tuần sau khi cấy 3.2 Tỷ lệ (%) mẫu tạo mô sẹo từ tử diệp dưa hấu ở 3 tuần sau khi cấy 22 3.3 Tỷ lệ (%) mẫu tạo chồi từ tử diệp dưa hấu ở 2 tuần sau khi cấy 3.4 Tỷ lệ (%) mẫu tạo chồi từ tử diệp dưa hấu ở 3 tuần sau khi cấy Số chồi (số chồi /mẫu) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 3 tuần sau 3.5 khi cấy Số chồi (số chồi /mẫu) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp. .. (số chồi /mẫu) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 4 tuần sau 3.22 khi cấy Số chồi (số chồi /mẫu) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 5 tuần sau 3.23 khi cấy Số chồi (số chồi /mẫu) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 6 tuần sau 3.24 khi cấy Số lá (số lá /mẫu) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 3 tuần sau khi 3.25 cấy Số lá (số lá /mẫu) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 4 tuần sau khi 3.26 cấy Số lá (số lá /mẫu) ... 3.6 khi cấy Số chồi (số chồi /mẫu) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 5 tuần sau 3.7 khi cấy Số chồi (số chồi /mẫu) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 6 tuần sau 3.8 khi cấy Số lá (số lá /mẫu) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 3 tuần sau khi 3.9 cấy Số lá (số lá /mẫu) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 4 tuần sau khi 3.10 cấy Số lá (số lá /mẫu) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 5 tuần sau khi 3.11 cấy Số... của tử diệp dưa hấu ở 3 tuần sau khi cấy 24 3.2 Sự hình thành chồi từ tử diệp dưa hấu ở 3 tuần sau khi cấy 26 3.3 Chồi dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 2 tuần sau khi cấy 28 3.4 Hình dạng chồi tái sinh từ tử diệp ở 6 tuần sau khi cấy 33 3.5 Chiều cao chồi dưa hấu tái sinh từ tử diệp ở 6 tuần sau khi cấy 40 3.6 Sự hình thành mô sẹo từ tử diệp dưa hấu ở 3 tuần sau khi cấy 43 3.7 Chồi dưa hấu được tái. .. dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 5 tuần sau khi 3.27 cấy Số lá (số lá /mẫu) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 6 tuần sau khi 3.28 cấy Chiều cao chồi (cm) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp 3 tuần sau khi 3.29 cấy Chiều cao chồi (cm) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp 4 tuần sau khi 3.30 cấy Chiều cao chồi (cm) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp 5 tuần sau khi 3.31 cấy Chiều cao chồi (cm) dưa hấu được tái. .. (số lá /mẫu) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 6 tuần sau khi 3.12 cấy Chiều cao chồi (cm) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp 3 tuần sau khi 3.13 cấy Chiều cao chồi (cm) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp 4 tuần sau khi 3.14 cấy Chiều cao chồi (cm) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp 5 tuần sau khi 3.15 cấy Chiều cao chồi (cm) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp 6 tuần sau khi 3.16 cấy 3.17 Tỷ lệ (%) mẫu tạo... ctv (1991) Đề tài Ảnh hưởng của loại mẫu cấy và nồng độ Benzyl Adenin (BA) lên sự tái sinh chồi từ tử diệp dưa hấu nhị bội (Citrullus vulgaris Schrad.)” được thực hiện nhằm xác định được loại mẫu cấy và nồng độ Benzyl adenin (BA) thích hợp cho sự tái sinh chồi dưa hấu làm tiền đề cho việc nghiên cứu quy trình tái sinh hoàn chỉnh cây dưa hấu phục vụ cho công tác nhân giống và sản xuất giống CHƯƠNG 1... sẹo từ tử diệp dưa hấu ở 2 tuần sau khi cấy 25 3.18 Tỷ lệ (%) mẫu tạo mô sẹo từ tử diệp dưa hấu ở 3 tuần sau khi cấy 3.19 Tỷ lệ (%) mẫu tạo chồi từ tử diệp dưa hấu ở 2 tuần sau khi cấy 44 3.20 Tỷ lệ (%) mẫu tạo chồi từ tử diệp dưa hấu ở 3 tuần sau khi cấy Số chồi (số chồi /mẫu) dưa hấu được tái sinh từ tử diệp ở 3 tuần sau 3.21 khi cấy 46 x 19 21 23 27 29 30 31 32 34 35 36 37 38 39 39 41 42 45 47 Số chồi. .. Ảnh hưởng của loại mẫu cấy và nồng độ BA trên sự tái sinh chồi từ tử diệp dưa hấu giống Thành Long-Trang Nông Mục tiêu: Tìm được loại mẫu cấy và nồng độ BA thích hợp cho sự tái sinh chồi Vật liệu thí nghiệm: sử dụng hạt dưa hấu nhị bội (2n) giống Thành LongTrang Nông ở hai độ tuổi 14 và 18 NSKTP (Hình 2.4) 19 A B Hình 2.3 Mẫu trái dưa hấu Thành Long - Trang Nông được dùng làm vật liệu nuôi cấy tử diệp. .. hấu được tái sinh từ tử diệp ở 2 tuần sau khi cấy 45 3.8 Chồi dưa hấu tái sinh từ tử diệp ở 4 tuần sau khi cấy 49 3.9 Chồi dưa hấu tái sinh từ tử diệp 6 tuần sau khi cấy 51 3.10 Hình dạng và kích thước lá được hình thành từ tử diệp 55 3.11 Chồi dưa hấu được tái sinh từ tử diệp sau 7 tuần nuôi cấy 60 xii DANH SÁCH CHỮ VIẾT TẮT HgCl2 Thủy ngân clorua MS Murashige và Skoog, 1962 BA Benzyl adenin VG Vùng