Khảo sát ảnh hưởng của BA và NAA lên các giai đoạn nhân giống in vitro lan dendrobium soniaearsakul
KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA BA VÀ NAA LÊN CÁC GIAI ĐOẠN NHÂN GIỐNG IN VITRO LAN DENDROBIUM SONIA EARSAKUL SVTH: MSSV: 60702516 GVHD: Ks Nguyễn Phi Viễn Phương Ts Lê Thị Thuỷ Tiên MỞ ĐẦU NỘI DUNG THỰC HIỆN Tổng Quan 1.1 Đối tượng nghiên cứu 1.2 Giá trị kinh tế 1.3 Lý thực đề tài Vật liệu - phương pháp nghiên cứu 2.1 Vật liệu 2.2 Phương pháp nghiên cứu Kết nghiên cứu bàn luận Kết luận kiến nghị 4.1 Kết luận 4.2 Kiến nghị TỔNG QUAN 1.1 Đối tượng nghiên cứu Dendrobium Sonia Earsakul Lớp: Monocotyledones Bộ: Orchidales Họ: Orchidaceae Họ phụ: Epidendroideae Tông: Epidendreae Giống: Dendrobium sp Hình 1.1: lan Dendrobium Sonia Earsakul TỔNG QUAN 1.2 Giá trị kinh tế Hình 1.2: trồng lan D Sonia Earsakul theo quy mô công nghiệp Thái Lan TỔNG QUAN 1.2 Giá trị kinh tế Hình 1.3: giống lan D Sonia Earsakul TỔNG QUAN 1.3 Lý thực đề tài Giá trị kinh tế Chủ động nguồn giống Quy trình nhân giống chưa tối ưu Hoàn thiện quy trình sản xuất theo quy mô công nghiệp VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Vật liệu VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Phương pháp nghiên cứu: Thí nghiệm 1: khảo sát khoáng thích hợp cho lan D Sonia Earsakul Bảng 2.1: môi trường nuôi chồi Ký hiệu Môi trường khoáng A1 MS A2 MS1/2 A3 B5 A4 LV A5 Knud VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thí nghiệm 2: khảo sát nồng độ BA lên tạo chồi từ chồi đỉnh D Sonia Earsakul Bảng 2.2: môi trường tạo chồi Nghiệm thức Nồng độ BA (mg/ lít) B1 B2 0,5 B3 B4 1,5 B5 B6 2,5 VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thí nghiệm 3: khảo sát nồng độ BA lên tạo PLBs từ chồi đỉnh lan D Sonia Earsakul Bảng 2.3: môi trường tạo PLBs Nghiệm thức NAA Nồng độ BA mg/l (mg/l) C1 C2 2.0 C3 3.0 0,5 C4 4.0 C5 5.0 C6 6.0 C7 8.0 VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thí nghiệm 4: khảo sát nồng độ NAA tạo rễ lan D Sonia Earsakul Bảng 2.4: môi trường rễ Nghiệm thức NAA(mg/l) D1 D2 0,5 D3 1,0 D4 1,5 D5 2.0 D6 2.5 VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Kết thu nhận xử lý phần mềm thống kê MSTATC với α =0.05 KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Khảo sát khoáng thích hợp cho tăng sinh lan D Sonia Earsakul Bảng 3.1: chồi D Sonia Earsakul sau 45 ngày nuôi cấy môi trường khác Môi Chiều cao chồi Số chồi Chiều dài Hình thái chồi trường (cm) MS1/2 2.150b 1.580c 1.48b Chồi nhỏ, cao, có rễ MS 3.150a 2.030b 1.72a Chồi to, xanh, chồi cấy tăng trưởng đồng LV 2.375b 2.480a 1.43bc Chồi to, mập, xanh B5 1.825bc 1.960b 1.31d Chồi nhỏ, xuất rễ Knud 1.775c 1.640c 1.37c Chồi nhỏ, vàng, xuất rễ (cm) KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Hình 3.1: chồi D Sonia Earsakul sau 45 ngày nuôi cấy môi trường khác Môi trường MS sử dụng cho thí nghiệm sau KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Khảo sát BA lên tạo chồi Bảng 3.2: chồi D Sonia Earsakul sau 45 ngày nuôi cấy môi trường có nồng độ BA thay đổi Nghiệm thức Số chồi/ chồi Thời gian cảm ứng Hình thái chồi Ký hiệu BA mg/l ban đầu chồi (ngày) B0 2.35d 14 Chồi phát triển bình thường B1 0.5 3.30c 12 Sự hình thành chồi chậm, chồi to, xanh B2 5.05bc 10 Sự hình thành chồi chậm, chồi to, có màu xanh B3 1.5 6.80b 10 Chồi to, phát triển bình thường, có màu xanh B4 8.10a Chồi hình thành chồi sớm, chồi to, đồng đều, có màu xanh B5 2.5 8.30a Sự hình thành chồi sớm, chồi không đồng đều, có màu xanh B6 8.65a 11 Sự hình thành chồi sớm, chồi không đồng đều, có màu xanh KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Hình 3.2: chồi D Sonia Earsakul sau 45 ngày nuôi cấy môi trường có nồng độ BA khác Nồng độ BA thích hợp cho tạo chồi lan Dendrobium Sonia Earsakul mg/l KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Khảo sát BA lên tạo PLBs Bảng 3.3: PLBs thu nhận sau 60 nuôi cấy môi trường có nồng độ BA thay đổi Nghiệm thức Số PLBs / Hình thái PLBs BA mg/l mẫu 0e Không có hình thành PLBs 0e Không có hình thành PLBs, tạo chồi mạnh C2 0e Không có hình thành PLBs, tạo chồi mạnh C3 3.650 d Cảm ứng tạo PLBs chậm, có nhiều chồi nhỏ phát triển C4 5.300 c Cảm ứng tạo PLBs chậm, có nhiều chồi nhỏ phát triển C5 6.600 b Cảm ứng tạo PLBs chậm, có nhiều chồi nhỏ phát triển C6 14.50 a Cảm ứng tạo PLBs sớm, PLBs tròn, có màu xanh C NAA mg/l C0 C1 0,5 KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN C1 C5 C2 C3 C6 C4 C7 Hình 3.3: PLBs thu nhận sau 60 nuôi cấy môi trường có nồng độ BA thay đổi BA mg/l kết hợp NAA 0,5 mg/l thích hợp cho tạo PLBs lan Dendrobium Sonia Earsakul KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Khảo sát NAA lên tạo rễ Bảng 3.4: chồi D Sonia Earsakul sau 60 ngày nuôi cấy môi trường có nồng độ BA thay đổi Nghiệm thức NAA mg/l Tổng số rễ/ Chiều dài rễ 1mẫu (cm) Hình thái rễ Thời gian tạo rễ (ngày) D0 1.05d 1.50d 14 Cảm ứng tạo rễ chậm, số rễ tạo thành ít, rễ ngắn D1 0.5 1.55c 1.75c 14 Cảm ứng tạo rễ chậm, số rễ tạo thành ít, rễ ngắn D2 1.0 1.85bc 2.07bc 10 Cảm ứng tạo rễ sớm, rễ tăng trưởng bình thường D3 1.5 2.00bc 2.49b 10 Cảm ứng tạo rễ sớm, rễ tăng trưởn bình thường D4 2.0 3.450a 3.38a Cảm ứng tạo rễ sớm, rễ dài, mẫu tăng trưởng bình thường D5 2.5 3.550a 2.50b Cảm ứng tạo rễ chậm, rễ ngắn, chậm phát triển KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Hình 3.4: chồi D Sonia Earsakul sau 60 ngày nuôi cấy môi trường có nồng độ BA thay đổi Môi trường MS ½ kết hợp với NAA mg/l tạo rễ tốt KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận • Môi trường khoáng thích hợp cho tăng trưởng chồi Dendrobium Sonia Earsakul môi trường MS (Murashige Skoog, 1962) • Nồng độ BA thích hợp cho tạo chồi lan Dendrobium Sonia Earsakul mg/l • Sự kết hợp BA mg/l NAA 0,5 mg/l thích hợp cho tạo PLBs lan Dendrobium Sonia Earsakul • Kích thích tạo rễ môi trường MS ½ kết hợp với NAA mg/l KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Quy trình nhân giống đề nghị Cây mẹ Tách đỉnh chồi BA: 2mg/l Tạo chồi t: 22C As: 2000-2500 lux Ra rễ NAA: 2mg/l t: 22C Huấn luyện giống Cây As: 2000-2500 lux KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kiến nghị • Khảo sát thêm yếu tố khác ảnh hưởng tới kết thí nghiệm (nhiệt độ, thời gian chiếu sáng…) • Tiếp tục theo dõi tạo chồi phát triển chồi Dendrobium Sonia Earsakul •Khảo ảnh hưởng BA NAA lên trình nhân nhanh PLBs • Khảo sát thí nghiệm cảm ứng chồi từ PLBs tạo thành từ thí nghiệm ba Cám Ơ C y ầ n Th C ôV Đ n cB g n ắ ãL ! e h Ng [...]... LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kiến nghị • Khảo sát thêm các yếu tố khác ảnh hưởng tới kết quả thí nghiệm (nhiệt độ, thời gian chiếu sáng…) • Tiếp tục theo dõi sự tạo chồi và sự phát triển của chồi Dendrobium Sonia Earsakul Khảo ảnh hưởng của BA và NAA lên quá trình nhân nhanh PLBs • Khảo sát thí nghiệm cảm ứng chồi từ PLBs được tạo thành từ thí nghiệm ba Cám Ơ C y ầ n Th á C à ôV Đ n ạ cB g n ắ ãL ! e h Ng ... hợp giữa BA 8 mg/l và NAA 0,5 mg/l thích hợp cho sự tạo PLBs ở lan Dendrobium Sonia Earsakul • Kích thích tạo rễ là môi trường MS ½ kết hợp với NAA 2 mg/l 4 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Quy trình nhân giống đề nghị Cây mẹ Tách đỉnh chồi BA: 2mg/l Tạo chồi 0 t: 22C As: 2000-2500 lux Ra rễ NAA: 2mg/l t: 22C Huấn luyện giống Cây con 0 As: 2000-2500 lux 4 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kiến nghị • Khảo sát thêm các yếu... xanh C NAA mg/l C0 C1 0,5 3 KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN C1 C5 C2 C3 C6 C4 C7 Hình 3.3: PLBs thu nhận sau 60 nuôi cấy trên môi trường có nồng độ BA thay đổi BA 8 mg/l kết hợp NAA 0,5 mg/l thích hợp cho sự tạo PLBs ở lan Dendrobium Sonia Earsakul 3 KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Khảo sát NAA lên sự tạo rễ Bảng 3.4: chồi D Sonia Earsakul sau 60 ngày nuôi cấy trên các môi trường có nồng độ BA thay đổi Nghiệm thức NAA mg/l... có màu xanh 3 KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Hình 3.2: chồi D Sonia Earsakul sau 45 ngày nuôi cấy trên các môi trường có nồng độ BA khác nhau Nồng độ BA thích hợp cho sự tạo chồi lan Dendrobium Sonia Earsakul là 2 mg/l 3 KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Khảo sát BA lên sự tạo PLBs Bảng 3.3: PLBs thu nhận sau 60 nuôi cấy trên môi trường có nồng độ BA thay đổi Nghiệm thức Số PLBs / một Hình thái PLBs BA mg/l mẫu 0 0e Không... PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thí nghiệm 3: khảo sát nồng độ BA lên sự tạo PLBs từ chồi đỉnh lan D Sonia Earsakul Bảng 2.3: môi trường tạo PLBs Nghiệm thức NAA Nồng độ BA mg/l (mg/l) C1 0 C2 2.0 C3 3.0 0,5 C4 4.0 C5 5.0 C6 6.0 C7 8.0 2 VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thí nghiệm 4: khảo sát nồng độ NAA trong sự tạo rễ lan D Sonia Earsakul Bảng 2.4: môi trường ra rễ Nghiệm thức NAA( mg/l) D1 0 D2 0,5 D3 1,0 D4... hơi vàng, xuất hiện rễ (cm) 3 KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Hình 3.1: chồi D Sonia Earsakul sau 45 ngày nuôi cấy trên các môi trường khác nhau Môi trường MS được sử dụng cho các thí nghiệm sau 3 KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Khảo sát BA lên sự tạo chồi Bảng 3.2: chồi D Sonia Earsakul sau 45 ngày nuôi cấy trên các môi trường có nồng độ BA thay đổi Nghiệm thức Số chồi/ một chồi Thời gian cảm ứng Hình thái chồi Ký hiệu BA. .. phát triển 3 KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Hình 3.4: chồi D Sonia Earsakul sau 60 ngày nuôi cấy trên các môi trường có nồng độ BA thay đổi Môi trường MS ½ kết hợp với NAA 2 mg/l tạo rễ tốt nhất 4 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận • Môi trường khoáng thích hợp cho sự tăng trưởng của chồi Dendrobium Sonia Earsakul là môi trường MS (Murashige và Skoog, 1962) • Nồng độ BA thích hợp cho sự tạo chồi lan Dendrobium Sonia... NAA( mg/l) D1 0 D2 0,5 D3 1,0 D4 1,5 D5 2.0 D6 2.5 2 VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Kết quả thu nhận và xử lý bằng phần mềm thống kê MSTATC với α =0.05 3 KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Khảo sát khoáng thích hợp cho sự tăng sinh của lan D Sonia Earsakul Bảng 3.1: chồi D Sonia Earsakul sau 45 ngày nuôi cấy trên các môi trường khác nhau Môi Chiều cao chồi Số chồi Chiều dài lá Hình thái chồi trường (cm) MS1/2 2.150b... Khảo sát BA lên sự tạo chồi Bảng 3.2: chồi D Sonia Earsakul sau 45 ngày nuôi cấy trên các môi trường có nồng độ BA thay đổi Nghiệm thức Số chồi/ một chồi Thời gian cảm ứng Hình thái chồi Ký hiệu BA mg/l ban đầu chồi (ngày) B0 0 2.35d 14 Chồi phát triển bình thường B1 0.5 3.30c 12 Sự hình thành chồi chậm, chồi to, xanh B2 1 5.05bc 10 Sự hình thành chồi chậm, chồi to, có màu xanh B3 1.5 6.80b 10 Chồi to, ... tạo chồi phát triển chồi Dendrobium Sonia Earsakul Khảo ảnh hưởng BA NAA lên trình nhân nhanh PLBs • Khảo sát thí nghiệm cảm ứng chồi từ PLBs tạo thành từ thí nghiệm ba Cám Ơ C y ầ n Th C ôV... QỦA VÀ BÀN LUẬN Hình 3.2: chồi D Sonia Earsakul sau 45 ngày nuôi cấy môi trường có nồng độ BA khác Nồng độ BA thích hợp cho tạo chồi lan Dendrobium Sonia Earsakul mg/l KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Khảo sát. .. nhỏ, vàng, xuất rễ (cm) KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Hình 3.1: chồi D Sonia Earsakul sau 45 ngày nuôi cấy môi trường khác Môi trường MS sử dụng cho thí nghiệm sau KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN Khảo sát BA lên tạo