NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG NỒNG ĐỘ CỦA MỘT SỐ CHẤT ĐIỀU TIẾT ĐẾN HỆ SỐ NHÂN NHANH CÂY HOA ĐỒNG TIỀN BẰNG INVITRO

Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học LỜI CẢM ƠN Sau trình học tập rèn luyện khoa Công nghệ sinh học trường Đại Học Nông Lâm – Việt Yên – Bắc Giang, em nhận dạy bảo tận tình thầy, cô nói chung thầy cô khoa Công nghệ sinh hoạc nói riêng Từ giúp em tích lũy kiến thức nghề nghiệp tư cách đạo đức Đây chìa khóa tri thức, hành trang để em vững bước sống sau Đến em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp Nhân dịp em mong muốn bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Ban giám hiệu nhà trường Đại Học Nông Lâm Bắc Giang, toàn thể thầy cô bạn bè quan tâm giúp đỡ em suốt thời gian học tập trường, đặc biệt em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến giáo viên hướng dẫn TS Nguyễn Thị Chuyên toàn thể thầy cô khoa công nghệ sinh học giúp đỡ, bảo tận tình để em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp Tiếp đến em xin trân trọng cảm ơn ban Giám đốc Trung tâm Nghiên cứu khoa học sản xuất Lâm Nông Nghiệm Quảng Ninh Thạc sỹ Trần Thị Doanh phó giám đốc, trưởng khoa công nghệ sinh học hướng dẫn bảo tận tình tạo điều kiệm tốt giúp em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp Nhân dịp em xin cảm ơn gia đình bạn bè quan tâm giúp đỡ, động viên em học tập sống Em xin chân thành cảm ơn tất giúp đỡ quý báu đó! Quảng Ninh, Ngày 22 tháng 05 năm 2011 Sinh viên Đào Thị Nhung Báo cáo thực tập tốt nghiệp Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN……………………………………………………………… MỞ ĐẦU………………………………………………………… Đặt vấn đề…………………………………………………………… ….6 Mục tiêu, ý nghĩa yêu cầu đề tài………………………………… 2.1 Mục tiêu đề tài…………………………………………………… 2.2.Yêu cầu đề tài… ………………………………………………… Ý nghĩa khoa học thực tiễn…………………………………………… 3.1 Ý nghĩa khoa học……………………………………………………… Mục tiêu, ý nghĩa yêu cầu đề tài……………………………… 2.1 Mục tiêu đề tài………………………………………………… .8 2.2.Yêu cầu đề tài…………………………………………………… Ý nghĩa khoa học thực tiễn…………………………………………… 3.1 Ý nghĩa khoa học…………………………………………………… .8 Mục tiêu, ý nghĩa yêu cầu đề tài………………………………… 2.1 Mục tiêu đề tài …………………………………………………… 2.2.Yêu cầu đề tài………………………………………………… Ý nghĩa khoa học thực tiễn…………………………………………… 3.1 Ý nghĩa khoa học…………………………………………………… .9 1.1.3 Cơ sở khoa học của phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật…….11 1.1.4 Các kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật invitro .12 1.2 Vài nét hoa Đồng Tiền DTH5……………………………… .14 1.2.1 Nguồn gốc, phân loại đặc điểm thực vật học………………………14 1.2.1.1.Nguồn gốc hoa đồng tiền……………………………………… 14 1.2.1.2 Phân loại hoa Đồng Tiền…………………………………… …15 1.2.1.3 Đặc điểm thực vật Đồng Tiền 16 1.3 Giá trị sử dụng……………………………………………………… 17 1.3.1 Giá trị thương mại giống hoa đồng tiền 17 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học 1.3.2 Giá trị thẩm mỹ giống hoa đồng tiền 18 1.4 Tình hình sản xuất hoa đồng tiền……………………………………….19 1.4.1 Sản xuất hoa đồng tiền giới 19 1.4.2 Sản xuất hoa đồng tiền Việt Nam .20 1.5 Các nghiên cứu nhân giống hoa Đồng Tiền………… 22 1.5.1 Tình hình nghiên cứu giống hoa đồng tiền giới 22 1.5.1.1 Nghiên cứu chọn tạo nhân giống……………………………… 22 1.5.1.2 Các nghiên cứu khác ………………………………… ………….25 1.5.2 Tình hình nghiên cứu giống hoa Đồng Tiền Việt Nam……………25 1.5.2.1 Nghiên cứu nhân giống ………………………………… 25 CHƯƠNG 28 VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 Vật liệu nghiên cứu 28 2.2 Nội dung nghiên cứu 28 2.3 Phương pháp nghiên cứu 28 2.3.1.Cách bố trí thí nghiệm 29 2.3.2 Chuẩn bị môi trường nuôi cấy 29 2.3.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng Cytokinin đến hệ số nhân chồi hoa đồng tiền 29 2.3.3 Các tiêu phương pháp theo dõi nuôi cấy mô tế bào…… 29 2.3.2.2 Thí nghiệm : Nghiên cứu ảnh hưởng BAP Ki nồng độ khác kết hợp với IAA (0,2 mg/l) đến hệ số nhân chồi chất lượng chồi hoa Đồng Tiền 30 2.3.2.3 Thí nghiệm Nghiên cứu ảnh hưởng cao nấm men Casein đến hệ số nhân chất lượng chồi hoa Đồng Tiền 30 2.3.4 Phương pháp theo dõi ………………………………………… … 31 2.3.5 Phương pháp xử lý số liệu………………………………………… 32 2.3.6 Địa điểm thời gian bối trí thí nghiệm…………………………… 32 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN………… .33 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học 3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng Cytokinin đến hệ số nhân chồi……………33 3.1.1 Thí nhiệm 1: Nghiên cứu ảnh hưởng BAP nồng độ khác đến hệ số nhân chồi hoa Đồng Tiền……………………… ……… 33 3.1.2 Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng Ki nồng độ khác đến hệ số nhân chồi hoa Đồng Tiền 33 3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng phối hợp Cytokynin auxin đến chất lượng chồi hoa Đồng Tiền 36 3.2.1 Thí nhiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng BAP, Ki nồng độ khác kết hợp với IAA (0.2mg/l) đến hệ số nhân chồi chất lượng chồi hoa Đồng Tiền 38 3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng cao nấm men casein đến hệ số nhân chất lượng chồi hoa Đồng Tiền 41 3.3.1 Thí nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng cao nấm men casein đến hệ số nhân chất lượng chồi hoa Đồng Tiền 41 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 44 Kết luận .44 Đề nghị……………………………………………………………………44 TÀI LIỆU THAM KHẢO………………………………………………… 45 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học CHỮ VIẾT TẮT BAP Benzyl Amino Purin CT Công thức IAA Indol Acetid Axid Ki Kinetin MS Mura Shige Skoog, 1962 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học DANH MỤC BẢNG Bảng 1: Ảnh hưởng BAP nồng độ khác đến hệ số nhân chồi hoa đồng tiền Bảng 2: Ảnh hưởng Ki nồng độ khác đến hệ số nhân chồi hoa đồng tiền in vitro Bảng 3: Ảnh hưởng BAP, Ki nồng độ khác kết hợp với IAA (0.2mg/l) đến hệ số nhân chồi chất lượng chồi hoa đồng tiền in vitro Bảng : Ảnh hưởng cao nấm men casein đến hệ số nhân chất lượng chồi hoa đông tiền Báo cáo thực tập tốt nghiệp Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình ảnh 1:Một số giống hoa Đồng Tiền Hình ảnh 2: Ảnh hưởng BAP đên sinh trưởng hệ số nhân Hình ảnh 3: Ảnh hưởng Kinetin lên chồi Hình ảnh 4: Ảnh hưởng Ki so sánh với BAP tác động đến chất lượng cụm chồi Hình ảnh 5.Môi trường đối chứng không bổ sung casein cao nấm men Hình ảnh 6: Môi trường có bổ sung casein cao nấm men đên hệ sô nhân chất lượng chồi Báo cáo thực tập tốt nghiệp Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 1: Biểu ảnh hưởng BAP nồng độ khác đến hệ số nhân chồi hoa đồng tiền Biểu đồ 2: Biểu ảnh hưởng Ki nồng độ khác đến hệ số nhân chồi hoa đồng tiền Biểu đồ 3: Biểu ảnh hưởng BAP, Ki nồng độ khác kết hợp với IAA (0.2mg/l) đến hệ số nhân chồi chất lượng chồi hoa Đồng Tiền Biểu đồ 4: Biểu ảnh hưởng cao nấm men casein đến hệ số nhân chất lượng chồi hoa Đồng Tiền Báo cáo thực tập tốt nghiệp Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Nhân dân ta nhân dân nước Thế Giới yêu hoa, hoa dùng buổi hội hè, lễ tết, cưới xin, ngày vui, dịp kỉ niệm…Hoa đem lại cho người cảm xúc thẩm mĩ cao quý mà không thứ quà tặng có Trong có đóng góp hoa Đồng Tiền Với vẻ đẹp hoa Đồng Tiền (Gerrbera sp.) 10 loài hoa có nhu cầu sử dụng nhiều giới, có đặc điểm lưu niên hoa quanh năm, suất cao, hoa bền, đẹp, màu sắc phong phú, người tiêu dùng ưa chuộng Hoa Đồng Tiền có mặt nhiều nước giới, lượng hoa thương mại lớn tập trung chủ yếu số nước như: Hà Lan, Đan Mạch, Bungari, Đức, Pháp…Ở Châu Á, nước có sản lượng hoa đồng tiền cao Trung Quốc, Ấn Độ, Nhật Bản…Hiện hoa đồng tiền chiếm vị trí quan trọng phát triển nông nghiệp nhiều quốc gia giới Cây hoa Đồng Tiền di nhập vào Việt Nam từ đầu kỷ 20, có vùng trồng thương mại Hà Nội, Đà Lạt thành phố Hồ Chí Minh Tuy nhiên, hoa Đồng Tiền trồng ban đầu loại hoa cánh đơn, nhỏ, màu sắc đơn điệu, suất thấp, chất lượng hoa kém, phát triển nhỏ lẻ hộ gia đình, người tiêu dùng để ý tới, bên cạnh đó, nghiên cứu hoa Đồng Tiền hạn chế Trong thập kỷ trở lại đây, nhờ tiến khoa học kỹ thuật, nhà chọn tạo giống Hà Lan, Nhật Bản tạo nhiều giống hoa Đồng Tiền với màu sắc hoa, hình dạng hoa phong phú, đa dạng Đặc biệt, việc tạo giống hoa Đồng Tiền kép có cánh dày, độ bền lâu thay đổi hẳn thị hiếu người chơi hoa hoa đồng tiền trở nên gần gũi, thân thiết với người tiêu dùng Báo cáo thực tập tốt nghiệp Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học Cùng với phát triển kinh tế nước ta, nhu cầu chơi hoa nói chung hoa đồng tiền nói riêng trở nên phổ biến nhà, người Trước nhu cầu đó, năm qua nhiều nhà sản xuất nhập số giống Đồng Tiền từ Hà Lan, Trung Quốc trồng kết số giống phát huy ưu điểm trội có giống không phù hợp với điều kiện khí hậu Việt Nam Vậy để có số lượng lớn hoa Đồng Tiền với chất lượng hoa tốt, đa dạng chủng loại đáp ứng nhu cầu thưởng thức hoa người hướng xuất khẩu, thúc đẩy nhà khoa học, nhà làm vườn, nhà kinh doanh tập trung nghiên cứu chọn tạo giống hoa đẹp, bền Trong đó, nuôi cấy mô điều kiện nhân tạo quan tâm nhiều nhất, phương pháp cho phép ta từ lượng nhỏ mẫu ban đầu nhân nhanh với tốc độ cao thời gian ngắn cho số lượng lớn, bệnh Xuất phát từ thực tế đó, tiến hành đề tài “Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ số chất điều tiết sinh trưởng đến hệ số nhân nhanh hoa Đồng Tiền in vitro” Mục tiêu, ý nghĩa yêu cầu đề tài 2.1 Mục tiêu đề tài - Tìm quy trình nhân nhanh In vitro số giống hoa Đồng Tiền - Xác định nồng độ thích hợp chất điều tiết sinh trưởng đến hệ số nhân nhanh giống hoa Đồng Tiền: BAP, Ki, IAA, - Xác định hợp chất hữu đến hệ số nhân nhanh giống hoa Đồng Tiền: Cao nấm men, casein 2.2.Yêu cầu đề tài Xác định nồng độ thích hợp chất điều tiết sinh trưởng nông độ hợp chất hữu để nâng cao hệ số nhân nhanh hoa Đồng Tiền Ý nghĩa khoa học thực tiễn 3.1 Ý nghĩa khoa học xác định yếu tố môi trường dinh dưỡng, chất điều tiết sinh trưởng, hợp chất hữu trình phát sinh hình thái để nhân nhanh tạo nguồn giống có chất lượng ổn định Báo cáo thực tập tốt nghiệp 10 Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học D 0,05 Ghi chú: + Kém: Chồi mảnh yếu, chồi cao, xanh bóng ++ Trung bình: Chồi khoẻ, mập, xanh +++ Tốt: Chiều cao giảm, hệ số tăng, chồi to, xốp mập, xuất thể sùi, xoăn Biểu đồ 3: Biểu ảnh hưởng BAP, Ki nồng độ khác kết hợp với IAA (0.2mg/l) đến hệ số nhân chồi chất lượng chồi hoa Đồng Tiền Từ kết cho thấy Trong chất thuộc nhóm cytokynin BAP hay Ki ảnh hưởng đến nhân nhanh hoa đồng tiền in vitro Khi sử dụng chất hệ số nhân đạt 4,1 nồng độ Ki 0,1mg/l hệ số nhân đạt 3,9 nồng độ Ki 1,5mg/l hệ số nhân đạt 4,43 nồng độ BAP 1,5mg/l hệ số nhân lại giảm mạnh 3,13 chứng tỏ hoạt tính Ki mạnh BAP, sử dụng với nồng độ vừa phải cao lại gây tượng ức chế Khi bổ sung tổ hợp BA Kinetin vào môi trường nuôi cấy có tác dụng rõ rệt đến việc kích thích tạo chồi đồng tiền So với thí Báo cáo thực tập tốt nghiệp 42 Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học nghiệm sử dụng riêng rẽ chất kích thích sinh trưởng (BA Kỉnetin ) hệ số nhân chồi không cao lắm, thí nghiệm sử dụng kết hợp chất kích thích sinh trưởng (BA Kinetin) hệ số nhân chồi vượt trội hẳn Vượt trội CT5 với hệ số nhân đạt 5,06, sau 4,43 (CT6), thấp 1,10 (CT4) Như hệ số nhân chồi thấp thí nghiệm 1,10 lớn so với hệ số nhân Ki thí nghiệm ( không bổ sung BA) Ở nồng độ IAA cố định 0,2mg/l nồng độ BAP tăng từ -3 mg/l hệ số nhân chồi giảm dần từ 4,30 – 3,33 rõ rệt Số giảm dần theo mức độ tăng hệ số nhân, từ 300 (CT1) xuống 2,22 (CT4) Do hệ số nhân cao nên tăng trưởng chiều cao ,chiều cao giảm dần theo chiều cao cụ thể 3,21cm (CT1), 2,93cm(CT2), 2,41cm(CT3) 2,33cm (CT4) Như CT5 hệ số nhân chồi cao tương ứng với số chiều cao thấp Ở tất công thức có bổ sung BA Kinetin tượng tạo rễ công thức đối chứng So sánh tác động BAP Kinetin đến hệ số nhân chồi Môi trường có hiệu cao cho nhân nhanh chồi hoa đồng tiền invitro là: MS+ 1mg/l IAA+ 1.5mg/l Kinetin Kinetin BAP Hình ảnh4: Ảnh hưởng Ki so sánh với BAP tác động đến chất lượng cụm chồi sau tuần Báo cáo thực tập tốt nghiệp 43 Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học Kết luận chung: Khi sử dụng tổ hựp BA Kinetin bổ sung vào môi trường nhân đồng tiền hệ số nhân tăng vượt trội so với sử dụng riêng rẽ chất, đạt cao với nồng độ 0,2 mg/l IAA cho hệ số nhân đạt 5,06 nồng độ 1mg/lKi Môi trường có hiệu cao cho nhân nhanh chồi hoa đồng tiền in vitro là: MS + 0,2mg/lIAA + 1mg/lKi 3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng cao nấm men casein đến hệ số nhân chất lượng chồi hoa Đồng Tiền * Thí nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng cao nấm men casein đến hệ số nhân chất lượng chồi hoa Đồng Tiền Cao nấm men casein hợp chất hữu dùng để nuôi cấy vi sinh vật nuôi cấy mô tế bào thực vật dùng để kích thích sinh trưởng hình thành chồi Chúng bối trí thí nghiệm môi trường môi trường nhân nhanh MS + 0,2mg/lIAA + 1mg/l Ki có bổ sung cao nấm men casein theo bối trí thí nghiệm Sau 28 ngày kết trình nghiên cứu ghi nhận bảng sau Bảng : Ảnh hưởng cao nấm men casein đến hệ số nhân chất lượng chồi hoa Đồng Tiền Hợp chất Số Hệ số Chiều Số Hình hữu mẫu nhân cao tb/ thái CT tb/chồi chồi(lá) chồi Cao Dịch (mÉu) nhanh nấm chiết men casein (g/l) (g/l) Đ/C Đ/C 30 4,9 3,34 3,30 + 0,5 30 5,40 3,51 3,60 ++ 1,0 30 5,90 4,65 4,40 +++ Báo cáo thực tập tốt nghiệp 44 Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học 1,5 30 5,70 4,12 2,0 30 5,53 3,80 0,5 30 5,36 3,61 1,0 30 6,00 5,00 1,5 30 5,60 4,22 2,0 30 5,50 3,84 CV 1,7 LSD0,05 0,16 Ghi chú: + Kém: Chồi mảnh yếu, chồi cao, xanh bóng 4,00 3,60 3,60 4,60 3,60 3,40 +++ +++ ++ +++ +++ +++ ++ Trung bình: Chồi khoẻ, mập, xanh +++ Tốt: Chiều cao giảm, hệ số tăng, chồi to, xốp mập, xuất thể sùi, xoăn Hình Biểu đồ biểu ảnh hưởng cao nấm men casein đến hệ số nhân chất lượng chồi hoa đông tiền Báo cáo thực tập tốt nghiệp 45 Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học Hình ảnh 5: Môi trường đối chứng Hình ảnh 6: Môi trường có bổ sung không bổ sung casein cao nấm men casein cao nấm men đên hệ sô nhân Từ kết nghiên cứu bảng cho thấy biểu đồ 4: Khi bổ sung hợp chất hữu vào môi trường nuôi cấy làm tăng hiệu trình hình thành chồi nhân chồi Khi tăng nồng độ nuôi cấy từ 0,5 – 2,0g/l hợp chấ hữu chất lượng chồi tăng nhiều so với thí nghiệm Chất hữu ảnh hưởng rõ rệt đến hệ số nhân nhanh chồi chất lượng chồi thể tất công thức bổ sung chất hữu đến hệ số nhân cao đạt 5,36 đến 6,00 công thức đối chứng không bổ sung chất hữu hệ số nhân 4,9 Trên công thức có bổ sung chất hữu chồi sinh trưởng phát triển tốt chiều cao phát triển tốt so với công thức đối chứng Bổ sung cao nấm men casein hàm lượng 1,0g/l môi trường cho kết tốt Báo cáo thực tập tốt nghiệp 46 Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận Qua kết thí nghiệm rút số kết luận sau: Môi trường nhân nhanh chồi tốt là: MS+ 0,2mg/l IAA+ 1.5mg/l Ki+ 1,0g/l Casein + 2% Saccarose + 5g/l agar Có bổ xung chế phẩm sinh học để tăng chất lượng giống Đề nghị Do thời gian thực tập có hạn khuôn khổ nghiên cứu khóa luận đề tài, tập trung giải yêu cầu cụ thể giai đoạn nhân nhanh Từ kết luận trên, xin đề nghị áp dụng quy trình sau cho quy trình nhân giống hoa đồng tiền theo quy mô công nghiệp Báo cáo thực tập tốt nghiệp 47 Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu nước Th.S Đặng Văn Đông PGS.TS Đinh Thế Lộc, 2003- Hoa đồng tiền NXB Lao Động – Xã Hội Đặng Thị Thanh Hương, 2002 Nghiên cứu nhân giống hoa đồng tiền phương pháp nuôi cấy in vitro, Báo cáo thực tập tốt nghiệp, Trường đại hoc Nông Nghiệp Hà Nội Nguyễn Xuân Linh (1998), Hoa kỹ thuật trồng hoa, Nxb Nông nghiệp Hà Nội Đoàn Thị Luyến, 2007- Nghiên cứu tuyển chọn giống hoa đồng tiền Thái Nguyên Báo cáo thực tập tốt nghiệp, Trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên Hoàng Thị Nga, Nguyễn Thị Phương Hoa, Nguyễn Thị Giang, Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Lý Anh - Xây dựng quy trình nhân giống hoa đồng tiền kỹ thuật cấy mô Tạp trí nông nghiệp phát triển nông thôn, Số 8/2003 Ngô Đăng Vịnh, Hà Thị Thúy, Dương Minh Nga - Nghiên cứu hoàn thiện quy trình nhânh nhanh giống hoa đồng tiền nhập nội công nghệ in vitroTạp trí nông nghiệp phát triển nông thôn, Số 8/2003, 1012-1014 Đỗ Năng Vịnh, 2005 Công nghệ tế bào thực vật ứng dụng NXB Nông Nghiệp Tài liệu nước AIPH (2004), International statistics flower and plants Institut fỹr Gartenbauửkonomie der Universitọt Hannover.Volume 52 Hà Tiểu Đệ, Triệu Thống Lợi, Lỗ Kim Vũ (2000), hoa Đồng Tiền, NXB KHKT Giang Tô, Trung Quốc, dịch Đặng Văn Đông Tài Liệu internet http://www.p-maps.org http:///www.rauhoaquavietnam.vn Báo cáo thực tập tốt nghiệp 48 Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học PHỤ LỤC Thành phần môi trường MS Thành phần khoáng đa lượng Nồng độ (mg/l) NH4NO3 KNO3 CaCl2.2H2O MgSO4 KH2PO4 Thành phần khoáng vi lượng MnSO4.H2O ZnSO4.7H2O H3BO3 KI Na2MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCl2.6H2O Na2EDTA FeSO4.7H2O Vitamin Thiamine HCl Nicotinic Axit Pyridoxine HCl Glyxine 1650 1900 440 370 170 Nồng độ (mg/l) 23,3 8,6 6,2 0,83 0,25 0,025 0,025 37,3 27,8 Nồng độ (mg/l) 0,1 0,5 0,5 2,0 Báo cáo thực tập tốt nghiệp 49 Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học 2.Bảng xử lý số liệu IRRISTAT 2.1.Ảnh hưởng nồng độ Ki đến hệ số nhân chồi hoa đồng tiền Anh huong cua nong Ki den he so nhan nhanh choi VARIATE V003 %BATCHOI LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 29.5704 7.39260 ****** 0.000 * RESIDUAL 15 631061E-05 420708E-06 * TOTAL (CORRECTED) 19 29.5704 1.55634 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSBAT FILE KINETIN 11/ 4/** 2: PAGE Anh huong cua nong Ki den he so nhan nhanh choi VARIATE V004 HSBAT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 4.80000 1.20000 ****** 0.000 * RESIDUAL 15 861786E-07 574524E-08 * TOTAL (CORRECTED) 19 4.80000 252632 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KINETIN 11/ 4/** 2: PAGE Anh huong cua nong Ki den he so nhan nhanh choi MEANS FOR EFFECT T T NOS %BATCHOI HSBAT 0.000000 0.000000 0.000000 0.000000 1.11000 1.00000 4 3.33000 1.00000 1.11000 1.00000 SE(N= 4) 0.234310E-03 0.2578987E-04 5%LSD 15DF 0.2377584E-03 0.114240E-03 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KINETIN 11/ 4/** 2: PAGE Anh huong cua nong Ki den he so nhan nhanh choi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T | (N= 20) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | %BATCHOI 20 1.1100 1.2475 0.64862E-03 0.1 0.0000 HSBAT 20 0.60000 0.50262 0.75797E-04 0.0 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE %BATCHOI FILE BAP 11/ 4/** 1:29 - PAGE Báo cáo thực tập tốt nghiệp 50 Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học 2.2 Ảnhhưởng nồng độ BAP đến hệ số nhân chồi hoa đồng tiền Anh huong cua nong BAP den he so nhan nhanh choi VARIATE V005 %BATCHOI LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 114.607 28.6517 232.54 0.000 * RESIDUAL 15 1.84815 123210 * TOTAL (CORRECTED) 19 116.455 6.12921 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSBAT FILE BAP 11/ 4/** 1:29 PAGE Anh huong cua nong Ki den he so nhan nhanh choi VARIATE V004 HSBAT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 4.13822 1.03456 87.38 0.000 * RESIDUAL 15 177600 118400E-01 * TOTAL (CORRECTED) 19 4.31582 227148 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BAP 11/ 4/** 1:29 PAGE Anh huong cua nong Ki den he so nhan nhanh choi MEANS FOR EFFECT T T NOS %BATCHOI HSBAT 6.67000 1.87250 10.2775 2.89250 4.44000 1.81250 4 6.94750 2.20250 3.33000 1.58500 SE(N= 4) 0.175506 0.544059E-01 5%LSD 15DF 0.529038 0.163999 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BAP 11/ 4/** 1:29 PAGE Anh huong cua nong Ki den he so nhan nhanh choi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T | (N= 20) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | %BATCHOI 20 6.3330 2.4757 0.35101 5.5 0.0000 HSBAT 20 2.0730 0.47660 0.10881 5.2 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE %BATCHOI FILE BAP&KI PAGE 2.3 Ảnh hưởng nồng độ BAP Ki đến hệ số nhân chồi hoa đồng tiền Anh huong BAP va Ki den he so nhan VARIATE V003 %BATCHOI LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 345.564 43.1955 631.04 0.000 * RESIDUAL 27 1.84817 684509E-01 * TOTAL (CORRECTED) 35 347.412 9.92607 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSBAT FILE BAP&KI PAGE Anh huong BAP va Ki den he so nhan VARIATE V004 HSBAT Báo cáo thực tập tốt nghiệp 51 Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 21.1606 2.64507 195.61 0.000 * RESIDUAL 27 365099 135222E-01 * TOTAL (CORRECTED) 35 21.5257 615020 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BAP PAGE Anh huong BAP va Ki den he so nhan MEANS FOR EFFECT T T NOS %BATCHOI HSBAT 6.67000 1.87250 10.2775 2.89250 4.44000 1.81250 4 6.94750 2.20250 1.11000 1.00000 0.000000 0.000000 SE(N= 4) 0.130816 0.581425E-01 5%LSD 27DF 0.379578 0.168708 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BAP&KI PAGE Anh huong BAP va Ki den he so nhan F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T | (N= 36) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | %BATCHOI 36 4.1350 3.1506 0.26163 6.3 0.0000 HSBAT 36 1.5544 0.78423 0.11628 7.5 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE %BATCHOI FILE TD 2.4 Ảnh hưởng cao nấm men casein đên hệ sô nhân nhanh chồi Anh huong cao nam men casein den he so nhan VARIATE V003 SL RE TB RE TB RE TB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 28.4812 4.74687 272.83 0.000 * RESIDUAL 21 365373 173987E-01 * TOTAL (CORRECTED) 27 28.8466 1.06839 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUDAI FILE NAA 30/ 3/** 0:25 PAGE Anh huong cao nam men casein den he so nhan VARIATE V004 CHIEUDAI LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 5.36249 893748 991.73 0.000 * RESIDUAL 21 189252E-01 901200E-03 * TOTAL (CORRECTED) 27 5.38141 199312 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAA 30/ 3/** 0:25 PAGE Anh huong cao nam men casein den he so nhan MEANS FOR EFFECT T T NOS SL RE TB CHIEUDAI 2.40750 0.877500 2.86750 1.13250 4.26250 1.39250 4 3.10000 0.660000 Báo cáo thực tập tốt nghiệp 52 Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học 2.31250 0.375000 1.21250 0.240000 1.15000 0.DEVIATION C OF V |T | (N= 28) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | SL RE TB 28 2.4732 1.0336 0.13190 5.3 0.0000 CHIEUDAI 28 0.68679 0.44644 0.30020E-01 4.4 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SLA FILE BD CC 13/ 4/** 13:39 PAGE - PAGE 130000 SE(N= 4) 0.659521E-01 0.150100E-01 5%LSD 21DF 0.193964 0.441441E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NAA 30/ 3/** 0:25 PAGE Anh huong cao nam men casein den he so nhan F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD Báo cáo thực tập tốt nghiệp 53 Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc BẢN KIỂM ĐIỂM CÁ NHÂN Kính gửi : Ban giám hiệu trường Đại Học Nông Lâm Các thầy cô khoa Công nghệ sinh học Đồng kính gửi Đơn vị thực tập Tên em : Đào Thị Nhung Sinh viên : K9K3- Công nghệ sinh học- Trường ĐH Nông-Lâm Trong thời gian thực tập tốt nghiệp Trung tâm khoa học sản xuất lâm Nông Nghiệp Quảng Ninh nhờ giúp đỡ bảo tận tình anh chị phòng công nghệ sinh học, em học hỏi làm số việc sau Chấp hành tốt quy định Trung tâm, làm việc giờ, hoàn thành nhiệm vụ mà kỹ sư phân công Nhưng em có khuyết điểm sau: - Kinh nghiệm thực tế non kém, tay nghề không vững vàng Kỹ thuật hạn chế nên nhiều điều thiếu sót thời gian thực tập - Do môi trường làm việc sức khoẻ thân hạn chế nhiều lúc công việc nhiều bỡ ngỡ sai sót Trên bảnkiểm điểm em thời gian thực tập tốt nghiệp Trung tâm khoa học sản xuất Lâm Nông nghiệp Quảng Ninh Xác nhận giáo viên HD Bắc Giang, ngày tháng 05 năm 2011 Sinh viên Đào Thị nhung Báo cáo thực tập tốt nghiệp 54 Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Báo cáo thực tập tốt nghiệp 55 Khoa công nghệ sinh học Đào Thị Nhung - 9K3 Trường ĐH Nông Lâm Bắc Giang  Báo cáo thực tập tốt nghiệp 56 Khoa công nghệ sinh học Đào Thị Nhung - 9K3 [...]... đến hệ số nhân chồi cây hoa Đồng Tiền + Nghiên cứu ảnh hưởng phối hợp của Cytokynin và auxin đến chất lượng chồi của cây hoa Đồng Tiền - Nghiên cứu ảnh hưởng của BAP và Ki ở các nồng độ khác nhau kết hợp với IAA (0,2 mg/l) đến hệ số nhân chồi và chất lượng chồi cây hoa Đồng Tiền + Nghiên cứu ảnh hưởng của cao nấm men và casein đến hệ số nhân và chất lượng chồi của cây hoa Đồng Tiền Báo cáo thực tập... bào động vật, liều lượng thường dùng là 1 g/l - Dịch thủy phân Casein hydrolyase: sử dụng 0,1- 1% làm tăng sự phát triển của mô sẹo hay cơ quan nuôi cấy 2.2 Nội dung nghiên cứu + Nghiên cứu ảnh hưởng của Cytokinin đến hệ số nhân chồi - Nghiên cứu ảnh hưởng của BAP ở các nồng độ khác nhau đến hệ số nhân chồi cây hoa Đồng Tiền - Nghiên cứu ảnh hưởng của Ki ở các nồng độ khác nhau đến hệ số nhân chồi cây. .. hành nhũng thí nghiệm nghiên cứu ảnh hưởng cytokinin đến khả năng tái sinh cũng như nhân nhanh chồi cây đồng tiền * Thí nhiệm 1: Nghiên cứu ảnh hưởng của BAP ở các nồng độ khác nhau đến hệ số nhân chồi của cây hoa Đồng Tiền Chồi bất định tái sinh từ mẫu cấy được nuối cấy trên môi trường MS có bổ sung BAP nồng độ thí nghiệm từ 0 – 2,0mg/l làm tăng hệ số nhân BAP là loại chất điều tiết sinh trưởng thuộc... Giang  Khoa công nghệ sinh học 1.5.1.2 Các nghiên cứu khác - Khi nghiên cứu ảnh hưởng của lai gần đến năng suất hoa cắt của đồng tiền, Huang H cho rằng lai gần làm tăng năng suất hoa từ 10,3 lên 28,3 bông /cây - Điều kiện môi trường sống ảnh hưởng đến sinh trưởng và chất lượng hoa đồng tiền Điều này được thể hiện trong nghiên cứu của Hahn Eun Joo Ông đã tiến hành nghiên cứu 6 giống đồng tiền (Ensophy,... khử trùng ở áp suất 1,1atm, nhiệt độ 121 oC trong vòng 20 -25 phút * Điều kiện nuôi cấy: - Chế độ chiếu sáng 16 giờ sáng/ 8 giờ tối - Nhiệt độ phòng 25 - 260C - Cường độ ánh sáng 2500 – 3000 lux 2.3.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng của Cytokinin đến hệ số nhân chồi cây hoa đồng tiền * Thí nghiệm 1: Nghiên cứu ảnh hưởng của BAP ở các nồng độ khác nhau đến hệ số nhân chồi cây hoa đồng tiên in vitro CT1: MS + 0mg/l... đường + 6g/l agar CT7: MS + 0 mg/l BAP + 3 mg/l Ki + 0,2mg/l IAA + 30g/l đường + 6g/l agar 2.3.2.3 Nghiên cứu ảnh hưởng của cao nấm men và casein đến hệ số nhân và chất lượng chồi của cây hoa Đồng Tiền * Thí nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng cao nấm men và Casein đến hệ số nhân và chất lượng chồi cây hoa Đồng Tiền CT1: MS + 0g/l cao nấm men + 0g/l casein + 30g/l đường + 6g/l agar CT2: MS + 0,5g/l cao nấm... Bắc Giang  Khoa công nghệ sinh học Trắng Đen Cà rốt nhị xanh Cà rốt nhị đen Hình ảnh 1 Một số giống hoa Đồng Tiền kép Hoa đồng tiền có khoảng 40 loài thuộc loại hoa lưu niên ra hoa quanh năm, độ bền hoa cắt cao, được coi là 1 loài hoa đẹp trong thế giới hoa Dựa vào hình thái hoa, người ta chia thành 3 nhóm: Hoa kép, hoa đơn và hoa đơn nhị kép [3] Nhóm 1 - Đồng tiền đơn: Hoa chỉ có một hoặc 2 tầng... Giang  Khoa công nghệ sinh học 3.2 Ý nghĩa thực tiễn Góp phần vào việc nhân nhanh, phát triển giống Đồng tiền DTH 125 phục vụ sản xuất, nâng cao hiệu quả kinh tế trong sản xuất nông nghiêp 4 Đối tượng và phạm vi nghiên cứu 4.1 Đối tượng nghiên cứu: Nghiên cứu ảnh hưởng của một số chất điều tiết sinh trưởng (BAP, Ki, IAA )và các hợp chất hữu cơ (Casein và cao nấm men) 4.2 Phạm vi nghiên cứu + Địa... MS + 2,0mg/l Ki + 30g/l đường + 6g/l agar 2.3.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng phối hợp của Cytokynin và auxin đến chất lượng chồi của cây hoa Đồng Tiền * Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng của BAP và Ki ở các nồng độ khác nhau kết hợp với IAA (0,2 mg/l) đến hệ số nhân chồi và chất lượng chồi cây hoa Đồng Tiền CT1: MS + 0 mg/l BAP + 0mg/l Ki + 0,2mg/l IAA + 30g/l đường + 6g/l agar CT2: MS + 1 mg/l BAP + 0mg/l... Nam 1.5.2.1 Nghiên cứu nhân giống Cây hoa đồng tiền ở Việt Nam đã được trồng từ rất lâu đời, song chủ yếu là những giống hoa đồng tiền đơn cho nên các kết quả nghiên cứu về giống hoa này còn hạn chế Từ những năm 1950 trở lại đây, với sự xuất hiện của nhiều giống hoa đồng tiền nhập nội đã làm thay đổi cơ cấu trồng đồng tiền ở nhiều vùng trồng hoa và nhận được những sự quan tâm của các nhà khoa học trong ... số nhân cao nên tăng trưởng chiều cao ,chiều cao giảm dần theo chiều cao cụ thể 3,21cm (CT1), 2,93cm(CT2), 2,41cm(CT3) 2,33cm (CT4) Như CT5 hệ số nhân chồi cao tương ứng với số chiều cao thấp... trị cao Ở điều kiện thích hợp hoa quanh năm Tỷ lệ cành cắt tỷ lệ hoa thương phẩm cao Kỹ thuật trồng trọt chăm sóc đơn giản, tốn công, đầu tư lần Báo cáo thực tập tốt nghiệp 20 Đào Thị Nhung. .. hưởng cao nấm men casein đến hệ số nhân chất lượng chồi hoa Đồng Tiền * Thí nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng cao nấm men Casein đến hệ số nhân chất lượng chồi hoa Đồng Tiền CT1: MS + 0g/l cao nấm